CN104971085A - 一种中药瓜蒌皮提取物及其提取方法与应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种中药瓜蒌皮提取物的提取方法及其应用，将粉碎中药瓜蒌皮饮片加入其两倍量的水，煎煮过滤去渣，所得溶液用大孔树脂吸附，再用质量百分浓度为70％的乙醇洗脱，抽滤掉大孔树脂，将溶液中多余溶剂去除掉，得到一级提取物；一级提取物用有机溶剂萃取，蒸发掉有机溶剂，得到二级提取物；二级提取物用有机溶剂过玻璃层析柱，得到三级提取物；最后，将三级提取物过薄层色谱板，获取Rf＝0.4层析物、Rf＝0.6层析物以及Rf＝0.8层析物，得到四级提取物。上述各级提取物对血管具有很好的保护作用，并且效果逐渐优化。

Description

一种中药瓜蒌皮提取物及其提取方法与应用

技术领域

本发明属于中药提取物制备技术领域，尤其涉及一种中药瓜蒌皮提取物及其提取方法与应用。

背景技术

瓜蒌为常用中药，为《中国药典》2010年版一部收载，瓜蒌的来源为栝楼及双边栝楼的干燥成熟果实，为中医治疗胸痹之要药，具清热涤痰，宽胸散结及润燥滑肠、扩张冠脉、保护心肌缺血等功效。其化学成分主要包括油脂、有机酸类，甾醇、三萜及其苷类，蛋白质、氨基酸类及微量元素等。

目前瓜蒌皮提取物在心血管方面的应用有：瓜蒌皮注射液可用于治疗或改善心绞痛。口服瓜蒌片剂可用于治疗冠心病，瓜蒌配伍其他中药可用于治疗心绞痛、慢性心功能不全、心律失常等。

发明内容

本发明的目的在于提供一种中药瓜蒌皮提取物的提取方法及其应用，旨在筛选出瓜蒌皮提取物对血管作用的有效部位，以提高瓜蒌皮治疗疾病的疗效。

本发明是这样实现的，一种中药瓜蒌皮提取物的提取方法，包括以下步骤：

(1)将中药瓜蒌皮饮片20kg粉碎加入其两倍量的水，煎煮水减半后过滤去渣，所得溶液用D101大孔树脂10kg吸附，用质量百分浓度为70％的乙醇3000ml洗脱，抽滤掉大孔树脂，将溶液加热去除掉多余溶剂，加热浓缩至300ml得到一级中药瓜蒌皮提取物。

优选地，所述提取方法中，在步骤(1)之后还包括步骤：

(2)将步骤(1)得到的一级瓜蒌皮提取物用有机溶剂300ml萃取，在旋转蒸发仪中蒸发掉有机溶剂，得到二级中药瓜蒌皮提取物。

优选地，在步骤(2)中，所述有机溶剂为氯仿、乙酸乙酯和正丁醇中的至少一种。

优选地，在步骤(2)中，所述有机溶剂为氯仿。

优选地，所述提取方法中，在步骤(2)之后还包括步骤：

(3)将步骤(2)中得到的二级中药瓜蒌皮提取物用有机溶剂300ml过玻璃层析柱，得到三级中药瓜蒌皮提取物。

优选地，在步骤(3)中，所述有机溶剂为纯氯仿，按质量比1∶1配比的氯仿与甲醇的混合液，或者按质量比1∶10配比的氯仿与甲醇的混合液。

优选地，在步骤(3)中，所述有机溶剂为按质量比1∶1配比的氯仿与甲醇的混合液。

优选地，所述提取方法中，在步骤(3)之后还包括步骤：

(4)将步骤(3)中得到的三级中药瓜蒌皮提取物过薄层色谱板，获取Rf＝0.4层析物、Rf＝0.6层析物以及Rf＝0.8层析物，得到四级中药瓜蒌皮提取物。

优选地，在步骤(4)中，所述三级中药瓜蒌皮提取物过薄层色谱板后，获取Rf＝0.6层析物，得到中药瓜蒌皮提取物的终产物。

本发明进一步提供了上述中药瓜蒌皮提取物在血管保护方面的应用。

本发明克服现有技术的不足，提供一种中药瓜蒌皮提取物的提取方法及其应用，将粉碎中药瓜蒌皮饮片加入其两倍量的水，煎煮过滤去渣，所得溶液用大孔树脂吸附，再用质量百分浓度为70％的乙醇洗脱，抽滤掉大孔树脂，将溶液中多余溶剂去除掉，得到一级提取物；一级提取物用有机溶剂萃取，蒸发掉有机溶剂，得到二级提取物；二级提取物用有机溶剂过玻璃层析柱，得到三级提取物；最后，将三级提取物过薄层色谱板，获取Rf＝0.4层析物、Rf＝0.6层析物以及Rf＝0.8层析物，得到四级提取物。上述各级提取物对血管具有很好的保护作用，并且效果逐渐优化。

附图说明

图1是本发明实施例1中瓜蒌皮提取物(EPT)对大鼠血浆NO浓度的影响；其中，Control：空白对照组；LDL：低密度脂蛋白损伤组；ETP(L)：LDL+40％乙醇组；ETP(M)：LDL+70％乙醇组；ETP(H)：LDL+95％乙醇组；ETP(W)：LDL+水提组；数据表示平均值±标准误，n＝8-10；**p＜0.01vs对照组；++p＜0.01vs LDL组；

图2是本发明实施例2中瓜蒌皮提取物(EPT)对大鼠血清中NO的含量影响；其中，Control：空白对照组；LDL：低密度脂蛋白损伤组；EPT(L)：LDL+氯仿萃取组；EPT(Y)：LDL+乙酸乙酯萃取组；EPT(Z)：LDL+正丁醇萃取组；EPT(S)：LDL+水提取组；数据表示：平均值±标准误，n＝8-10；**p＜0.01vs Control组，++p＜0.01vs LDL组；

图3是本发明实施例3中瓜蒌皮提取物(EPT)对大鼠血液中NO含量的影响；其中，Control：空白对照组；LDL：低密度脂蛋白损伤组；EPT(X)：纯氯仿组；EPT(Y)：氯仿、甲醇，1∶1组；EPT(Z)：氯仿、甲醇，1∶10组；数据表示：平均值±标准差，n＝8-10；++p＜0.01vs Control组，*p＜0.05，**p＜0.01vs LDL组；

图4是本发明实施例4中瓜蒌皮提取(EPT)物对大鼠血清中NO含量的影响；其中，Control：空白对照组；LDL：低密度脂蛋白损伤组；EPT(X)：Rf值为0.4组；EPT(Y)：Rf值为0.6组；EPT(Z)：Rf值为0.8组；数据表示：平均值±标准差，n＝8-10；++p＜0.01vs Control组，**p＜0.01vs LDL组；

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

实施例1

1、一级中药瓜蒌皮提取物的制备

将20kg瓜蒌皮饮片粉碎加入其两倍量的水煎煮，待水减少一半时，停止加热倒出溶液，将溶液过滤去渣，得到瓜蒌皮煎煮药液。

将溶液移至大烧杯，倒入溶液容量二分之一的大孔吸附树脂，静置12个小时，过滤，留下大孔吸附树脂，其水溶液弃去。

同时配置95％的乙醇溶液，70％的乙醇溶液，40％乙醇溶液，及双蒸水各3000ml。将吸附有药物的大孔树脂分成四等分，分别用95％的乙醇溶液，70％的乙醇溶液，40％乙醇溶液，及双蒸水洗脱，抽滤掉大孔树脂。将溶液中多余溶剂，即乙醇用旋转蒸发仪去除掉，得到含有不同成分的药物溶液(即本实施例中的一级中药瓜蒌皮提取物，分别是用95％的乙醇，用70％的乙醇，用40％乙醇，及用双蒸水洗脱的药物)，将以上四种药物分别浓缩至300ml。

2、大鼠的分组及药物处理

将48只SD大鼠分成六组每组8只，随机分组：

①Control：空白对照组，实验前48h尾部静脉注射生理盐水(0.9％氯化钠注射液)(4mg/kg)以作为对照组；

②LDL：LDL损伤组，实验前48h尾部静脉注射LDL(4mg/kg)；

③EPT(L)：40％乙醇洗脱部分+LDL组，40％乙醇洗脱部分(4ml/kg)每天灌胃1次，连续5天，提取物灌胃第四天尾部静脉注射LDL(4mg/kg)；

④EPT(M)：70％乙醇洗脱部分+LDL组，70％乙醇洗脱部分(4ml/kg)每天灌胃1次，连续5天，其他处理过程同③；

⑤EPT(H)：95％乙醇洗脱部分+LDL组，95％乙醇洗脱部分(4ml/kg)每天灌胃1次，连续5天，其他处理过程同③。

⑥EPT(W)：水洗脱部分+LDL组，水洗脱部分(4ml/kg)每天灌胃1次，连续5天，其他处理过程同③；

3、取血法

将大鼠用25％乌来糖腹腔麻醉后，固定在鼠板上，切开大鼠颈部皮肤，用玻璃分针分离一侧颈总动脉，用动脉夹夹住近心端，远心端用线结扎，用眼科剪剪一V型切口，插入动脉导管，用试管取血约6ml，离心5分钟(3000r/min)，取上清液冷冻待检测。

4、血清中NO的含量的检测 

机体中NO释放后很快转变成代谢产物NO^3-和NO^2-，以镉粉将NO^3-还原成NO^2-，NO^2-通过Griess重氮反应生成有色化合物，再用722分光光度计540nm处测定，然后根据公式计算出NO^2-含量以此来反应血清中NO含量。

5、实验数据处理

实验数据以均数±标准差表示，组间比较采用t检验，双侧P＜0.05认为有统计学意义。

6、实验结果 

实验结果如下表1、2以及图1所示：

表1 各实验组大鼠血清中NO(μmol/L)的含量原始数据

表2 各实验组大鼠血清中NO(μmol/L)的含量

由表1、2以及图1可以看出，70％的乙醇提取物对NO的影响最好，在给 药组中使血管内皮细胞释放NO的含量最高，说明对血管有保护作用的有效成份主要在70％的乙醇提取物中，其次是水洗脱部分，也能有较好的效果，但相对70％乙醇的提取物，作用稍差一点。

7、讨论与结论 

本实施例主要通过了解瓜蒌皮对心脑血管方面的作用，研究瓜蒌皮不同部位提取物对心脑血管疾病是否有预防或治疗作用。本实验主要侧重瓜蒌皮有效成分的提取和对血浆NO值的检测，从而判断哪个部位提取物能提高血浆NO，起到保护心脑血管的作用。通常情况下，高脂血症(LDL升高)使NO的生成和释放受到抑制，而使血管内皮细胞受损。瓜蒌皮提取物能提高高脂血症大鼠血清NO水平，具有保护血管内皮的作用，从而发挥抗动脉粥样硬化(AS)作用。高血脂症大鼠血清NO含量较正常明显降低，脂质过氧化作用增强，MDA产生增多，SOD活力降低，可引起动脉内皮细胞的损伤，促进AS的发生.而瓜蒌皮提取物(ETP)能够显著促进内皮细胞NO的生成和释放，提升SOD活力，增强机体抗氧化能力，从而保护血管内皮，对防治AS、减少心脑血管疾病的发生具有重要意义。

结论：

①、70％的乙醇提取的药物对NO的影响最好，说明对血管有保护作用有效部位在70％的乙醇提取物中。

②、水提取部分，也能有较好的效果，但对血管有保护作用有效部位稍少。

③、40％和95％乙醇提取物对血管几乎无保护作用。

实施例2

1、二级中药瓜蒌皮提取物的制备

将实施例1中70％的乙醇提取的药物溶液(一级中药瓜蒌皮提取物)分别用氯仿、乙酸乙酯以及正丁醇萃取，蒸发掉有机溶剂，得到极性不同的多个二级中药瓜蒌皮提取物，存放于冰箱待用。

2、动物实验 

将48只SD大鼠随机分为六组，每组8只大鼠：

①Control：空白对照组，实验前48h尾部静脉注射生理盐水(4mg/kg)以作为对照组；

②LDL：LDL损伤组，实验前48h尾部静脉注射LDL(4mg/kg)；

③EPT(L)：氯仿萃取部分+LDL，水洗脱部分(4ml/kg)每天灌胃1次，连续5天，提取物灌胃第四天尾部静脉注射LDL(4mg/kg)；

④EPT(Y)：乙酸乙酯部分+LDL组，处理过程同③；

⑤EPT(Z)：正丁醇部分+LDL组，处理过程同③；

⑥EPT(S)：水提部分+LDL组，处理过程同③。

3、取血法

大鼠腹腔麻醉后，固定在鼠板上，切开大鼠颈部皮肤，用玻璃分针分离一侧颈总动脉，用动脉夹夹住近心端，远心端用线结扎，用眼科剪剪一V型切口，插入动脉导管，用试管取血6ml，离心5分钟(3000r/min)，取上清液冷冻待检测。

4、血清NO含量测定

机体中NO释放后很快转变成代谢产物NO^3-和NO^2-，以镉粉将NO^3-还原成NO^2-，NO^2-通过Griess重氮反应生成有色化合物，再用722分光光度计540nm处测定，然后根据公式计算出NO^2-含量以此来反应血清中NO含量。

5、实验数据处理

实验数据以均数±标准差表示，组间比较采用t检验，双侧P＜0.05认为有统计学意义。

6、实验结果 

实验结果如下表3、4以及图2所示：

表3 瓜蒌皮提取物(EPT)对大鼠血浆中NO(μmol/L)的含量影响原始数据

表4 瓜蒌皮提取物(EPT)对大鼠血清中NO(μmol/L)的含量影响

7、讨论

由表3、4以及图2可以看出氯仿组提取物中的药物对NO的影响最好，其NO的含量最高。空白组是正常大鼠的NO值，损伤组和其他四组是注射了LDL，引起大鼠血管损伤，损伤组(LDL组)没有用瓜蒌皮提取物药物保护而其他四组均用瓜蒌皮提取物药物保护，其他四组较损伤组NO有回升，其中氯仿组提取物上升最明显，表明氯仿组提取物对血管有明显的保护作用。

其次是乙酸乙酯组，也能有一定的效果，但相对氯仿组的提取物，效果没有那么明显；正丁醇组提取物和水提组提取物对NO的影响与低密度脂蛋白损伤组没有太大的差异。

综上所述，氯仿萃取的瓜蒌皮提取物有保护血管内皮作用。

实施例3

1、三级中药瓜蒌皮提取物的制备

将实施例2中用氯仿萃取得到的二级中药瓜蒌皮提取物再用纯氯仿，氯仿与甲醇按1∶1、1∶10比例过玻璃层析柱得到EPT(X)、EPT(Y)、EPT(Z)3个部分(三级中药瓜蒌皮提取物)，存放于冰箱待用。

2、动物实验部分

将40只SD大鼠随机分为五组，每组8只大鼠：

①Control：空白对照组，用生理盐水(4ml/kg)每天灌胃1次，连续5天，于第4天尾部静脉注射生理盐水(4ml/kg)以作为对照组。

②LDL：LDL损伤组，生理盐水(4ml/kg)每天灌胃1次，连续5天，于第4天尾部静脉注射LDL(4mg/kg)以复制LDL损伤大鼠模型。

③EPT(X)：纯氯仿+LDL组，纯氯仿洗脱部分(4ml/kg)每天灌胃1次，连续5天，提取物灌胃第四天尾部静脉注射LDL(4mg/kg)；

④EPT(Y)：氯仿与甲醇1∶1+LDL组，处理过程同③；

⑤EPT(Z)：氯仿与甲醇1∶10+LDL组，处理过程同③。

3、取血法

将大鼠用25％乌来糖腹腔麻醉后，固定在鼠板上，切开大鼠颈部皮肤，用玻璃分针分离一侧颈总动脉，用动脉夹夹住近心端，远心端用线结扎，用眼科剪剪一V型切口，插入动脉导管，用试管取血6ml，离心5分钟(3000r/min)，取上清液冷冻待检测。

4、血清中NO的含量的检测 

机体中NO释放后很快转变成代谢产物NO^3-和NO^2-，以镉粉将NO^3-还原成NO^2-，NO^2-通过Griess重氮反应生成有色化合物，再用722分光光度计540nm处测定，然后根据公式计算出NO^2-含量以此来反应血清中NO含量。

5、实验数据处理

实验数据以均数±标准差表示，组间比较采用t检验，双侧P＜0.05认为有统计学意义。

6、实验结果 

实验结果如下表5和图3所示：

表5 瓜蒌皮提取物(EPT)对LDL诱导血管损伤大鼠血液中NO含量(umol/L)的影响

7、讨论与结论 

血管内皮细胞释放NO主要受血流对血管内皮产生的切应力影响，当血压升高时，血流形成的切应力增大，NO释放增多，反之则释放减少。NO弥散进入细胞与鸟苷酸环化酶(GC)中F结合并激活此酶，增加细胞内cGMP含量，cGMP作为第二信使，激活细胞蛋白激酶PKG，调控离子通道，降低细胞内Ca浓度，使肌凝蛋白轻链磷酸化，引起血管平滑肌舒张效应。血压升高时血流对血管内皮形成切应力增大，NO释放增加，最终导致血管舒张、血压下降，这种负反馈调节机制具有保护作用。生理条件下，血管内皮细胞持续不断地释放NO以保持血管恒定的舒张状态并具有抑制白细胞浸润和血小板的凝聚作用，防止血栓形成；NO能抑制血管平滑肌增殖，减少胶原纤维和弹力纤维生成，维持血管正常结构和功能；NO是维持冠状血管舒张的重要物质，能预防心肌肥厚和心肌间质纤维化的发生。瓜蒌皮提取物能保护血管内皮细胞，促进NO释放，因而保护血管防治心血管疾病发生。

由表5和图3，可看出空白组血清中NO的含量最高；LDL组受损后血清中NO的含量最低；EPT(X)组、EPT(Y)组和EPT(Z)组被LDL损伤，但都给予了相应的药物处理，因此血清中NO含量均介于空白组与LDL损伤组间，其中EPT(Y)组保护效果最好。

综上所述，瓜蒌皮氯仿萃取物中用氯仿与甲醇1∶1过柱后的部分对血管保护作用最好，说明瓜蒌皮对血管保护作用的有效部位在用氯仿与甲醇1∶1过柱后的组份中。

实施例4

1、四级中药瓜蒌皮提取物的制备

将实施例3中氯仿与甲醇按1∶1配比获取的三级中药瓜蒌皮提取物过薄层 色谱板得到不同组份，测定不同组份的Rf值，得到Rf值为0.4、0.6、0.8的三个部分(四级中药瓜蒌皮提取物)，存放于冰箱待用

2、动物实验部分

将40只SD大鼠随机分为五组，每组8只大鼠：

①Control组：空白对照组，用生理盐水(4ml/kg)每天灌胃1次，连续5天，于第4天，尾部静脉注射生理盐水(4ml/kg)以作为对照组；

②LDL组：LDL损伤组，生理盐水(4ml/kg)每天灌胃1次，连续5天，于第4天，尾部静脉注射LDL(4mg/kg)以复制LDL损伤大鼠模型；

③EPT(X)组：Rf值为0.4的层析物+LDL组，以浓度为0.01g/ml的层析洗脱部分(4ml/kg)每天灌胃1次，连续5天，提取物灌胃第四天尾部静脉注射LDL(4mg/kg)；

④EPT(Y)组：Rf值为0.6的层析物+LDL组，处理过程同③；

⑤EPT(Z)组：Rf值为0.8的层析物+LDL组，处理过程同③。

3、取血法

将大鼠用25％乌来糖腹腔麻醉后，固定在鼠板上，切开大鼠颈部皮肤，用玻璃分针分离一侧颈总动脉，用动脉夹夹住近心端，远心端用线结扎，用眼科剪剪一V型切口，插入动脉导管，用试管取血6ml，离心5分钟(3000r/min)，取上清液冷冻待检测。

4、血清中NO的含量的检测 

机体中NO释放后很快转变成代谢产物NO^3-和NO^2-，以镉粉将NO^3-还原成NO^2-，NO^2-通过Griess重氮反应生成有色化合物，再用722分光光度计540nm处测定，然后根据公式计算出NO^2-含量以此来反应血清中NO含量。

5、实验数据处理

实验数据以均数±标准差表示，组间比较采用t检验，双侧P＜0.05认为有统计学意义。

6、实验结果如表6以及图4所示：

表6 瓜蒌皮提取物(EPT)对SD大鼠血清中NO含量(ng/ml)的影响

7、讨论与结论 

瓜蒌皮提取物能促进NO释放，因而保护血管防治心血管疾病发生。血管内皮细胞持续不断地释放NO以保持血管恒定的舒张状态并具有抑制白细胞浸润和血小板的凝聚作用，防止血栓形成；NO能抑制血管平滑肌增殖，减少胶原纤维和弹力纤维生成，维持血管正常结构和功能；NO是维持冠状血管舒张的重要物质，能预防心肌肥厚和心肌间质纤维化的发生。

由表6以及图4，可看出空白组血清中NO的含量最高；LDL组受损后血清中NO的含量最低；EPT(X)组、EPT(Y)组和EPT(Z)组被LDL损伤，但都给予了相应的药物处理，因此血清中NO含量均介于空白组与LDL损伤组间，其中EPT(Y)组效果最好。

结论，三级中药瓜蒌皮提取物过薄层色谱板后得到Rf值为0.6的提取物部分对血管保护作用最好，说明瓜蒌皮对血管保护作用的有效部位在此组份中。

相比于现有技术的缺点和不足，本发明具有以下有益效果：本发明通过将中药瓜蒌皮经过70％的乙醇提取，提取物再用氯仿萃取，萃取物再用氯仿与甲醇按(1∶1)过玻璃层析柱，过柱物再过薄层色谱板得到Rf值为0.6的提取物部分对血管有明显的保护作用，说明对血管有保护作用的有效成分可通过此方法提取优化。目前瓜蒌皮的提取有很多方法，也证明其化学成分主要包括油脂、有机酸类，甾醇、三萜及其苷类，蛋白质、氨基酸类及微量元素等，但很多成分不知有何作用和功效。通过此方法“提取-实验验证-提取-实验验证”逐级筛选出药物有效成分一定具有保护血管，预防和治疗心脑血管相关疾病的作用。有此方法可通过工厂程序化的提取瓜蒌皮的有效部位研发并生产出作用好疗效高的新药，减轻心脑血管疾病对人类的危害，造福社会。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种中药瓜蒌皮提取物的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将中药瓜蒌皮饮片20kg粉碎加入其两倍量的水，煎煮水减半后过滤去渣，所得溶液用D101大孔树脂10kg吸附，用质量百分浓度为70％的乙醇3000ml洗脱，抽滤掉大孔树脂，将溶液加热去除掉多余溶剂，加热浓缩至300ml得到一级中药瓜蒌皮提取物。

2.如权利要求1所述的中药瓜蒌皮提取物的提取方法，其特征在于，所述提取方法中，在步骤(1)之后还包括步骤：

(2)将步骤(1)得到的一级瓜蒌皮提取物用有机溶剂300ml萃取，在旋转蒸发仪中蒸发掉有机溶剂，得到二级中药瓜蒌皮提取物。

3.如权利要求2所述的中药瓜蒌皮提取物的提取方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述有机溶剂为氯仿、乙酸乙酯和正丁醇中的至少一种。

4.如权利要求3所述的中药瓜蒌皮提取物的提取方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述有机溶剂为氯仿。

5.如权利要求4所述的中药瓜蒌皮提取物的提取方法，其特征在于，所述提取方法中，在步骤(2)之后还包括步骤：

(3)将步骤(2)中得到的二级中药瓜蒌皮提取物用有机溶剂300ml过玻璃层析柱，得到三级中药瓜蒌皮提取物。

6.如权利要求5所述的中药瓜蒌皮提取物的提取方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述有机溶剂为纯氯仿，按质量比1∶1配比的氯仿与甲醇的混合液，或者按质量比1∶10配比的氯仿与甲醇的混合液。

7.如权利要求6所述的中药瓜蒌皮提取物的提取方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述有机溶剂为按质量比1∶1配比的氯仿与甲醇的混合液。

8.如权利要求7所述的中药瓜蒌皮提取物的提取方法，其特征在于，所述提取方法中，在步骤(3)之后还包括步骤：

(4)将步骤(3)中得到的三级中药瓜蒌皮提取物过薄层色谱板，获取Rf＝0.4层析物、Rf＝0.6层析物以及Rf＝0.8层析物，得到四级中药瓜蒌皮提取物。

9.如权利要求8所述的中药瓜蒌皮提取物的提取方法，其特征在于，在步骤(4)中，所述三级中药瓜蒌皮提取物过薄层色谱板后，获取Rf＝0.6层析物，得到中药瓜蒌皮提取物的终产物。

10.权利要求1～9任一项所述的中药瓜蒌皮提取物在血管保护方面的应用。