CN110585251A - 一种使用正丁醇提取银杏黄酮的方法 - Google Patents

一种使用正丁醇提取银杏黄酮的方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开一种使用正丁醇萃取银杏黄酮的方法，涉及植物功能成分提取技术领域，具体为一种从银杏叶中提取银杏黄酮的方法。本方法以乙醇为溶剂，用超声辅助浸提法从银杏叶粉末中得到银杏叶粗提液；以正丁醇为溶剂对所得的银杏叶粗提液进行纯化分离，干燥得到银杏黄酮。本发明具有操作简便、对设备要求低、以正丁醇为溶剂成本低、萃取率高等特点，可为正丁醇为溶剂萃取银杏黄酮的工业化生产提供借鉴。

Description

一种使用正丁醇提取银杏黄酮的方法
技术领域
本发明属于植物功能成分提取技术领域，涉及一种使用正丁醇提取银杏黄酮的方法。
背景技术
银杏黄酮作为一类常用的天然药物，存在不同的提取纯化方法，目前根据文献记录过的方法有：溶剂法、超声波提取法、微波提取法、毛细管电泳法、大孔吸附树脂法等。突破现有的分离提取技术，实现高提取率、低耗费是很有必要的，为了这对于进一步提纯银杏中的功能性物质，更大限度地发挥银杏资源优势，促进植物有效物质的结构、药理、药效等方面的深入研究，采用新型分离技术，对目前的分离技术进行突破创新势在必行。对银杏叶加工技术的优化、提取工艺的创新和对其中微量有效物质的高效快速分离与提纯鉴定技术的创立，将会提高银杏叶及其药用化合物的利用率。实现快速分离提纯的技术对产生巨大的经济效益、药用价值、保护环境等必不可少。由于超声波提取法采用的设备较昂贵，且对被被处理物质要求具有较高的耐热性；大孔吸附树脂具有成本高、操作规模大等缺点，又因为有机溶剂萃取法是现阶段最常用的方法，但国内外萃取剂常使用丙酮，后续处理较复杂，所以本发明采用有机溶剂——正丁醇萃取纯化银杏黄酮。
发明内容
本发明的目的是提供一种使用正丁醇提取银杏黄酮的方法，解决了现有技术中常用的萃取剂丙酮萃取操作后续处理较复杂的问题。
本发明所采用的技术方案是，一种使用正丁醇提取银杏黄酮的方法，具体按照以下步骤实施：
步骤1、用银杏叶制备银杏叶粉末，用乙醇在超声波辅助下提取银杏叶粉末，得到银杏叶粗提液，旋蒸所得的银杏叶粗提液，得到银杏叶提取液。
步骤2、蒸馏水稀释银杏叶提取液得到稀释提取液，使用正丁醇萃取稀释提取液，分液得到粗萃取液，旋转蒸发粗萃取液得到萃取液，干燥浓缩萃取液得到银杏黄酮。
本发明的特点还在于：
步骤1具体按照以下步骤实施：
步骤1.1、将干净新鲜银杏叶烘干，粉碎成粉末，过200目筛，获得银杏叶粉末；
步骤1.2、将步骤1.1所得的银杏叶粉末与乙醇混合，混合后进行超声提取，得到银杏叶粗提液；
步骤1.3、将步骤1.2所得的银杏叶粗提液置于旋转蒸发仪中，进行旋蒸，得到银杏叶提取液。
步骤1.1中银杏叶烘干温度为70～90℃。
步骤1.2中银杏叶粉末与乙醇的混合比例为1g﹕6-9mL，乙醇体积分数为70-90％。
超声波提取的参数包括超声功率180～200W，超声作用每5～7s间隔0.5s，进行时间为30～50min的超声提取。
步骤1.3种旋转蒸发参数包括压力为0.08～0.09MPa，转速为70～90r/min，温度为50～70℃时
步骤2具体按照以下步骤实施：
步骤2.1、吸取10-20mL银杏叶提取液，加入10mL蒸馏水稀释，得到稀释提取液，混合稀释提取液与正丁醇后进行萃取，倒入分液漏斗静置，溶液分层后分液得到粗萃取液，将粗萃取液置于旋转蒸发仪中，旋蒸得到萃取液；
步骤2.2、干燥浓缩萃取液得到银杏黄酮。
步骤2.1中稀释提取液与正丁醇混合比例为1g：2-5mL，正丁醇体积分数为80～90％。
步骤2.1中混合稀释提取液与正丁醇后，在60-65℃下，萃取8-10min。
本发明的有益效果是：本发明采用有机溶剂正丁醇萃取纯化银杏黄酮，具有操作简便、对设备要求低、以正丁醇为溶剂成本低、萃取率高等特点。本发明可以为正丁醇为溶剂萃取银杏黄酮的工业化生产提供借鉴。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行详细说明。
实施例1
本发明一种使用正丁醇提取银杏黄酮的方法，具体按照以下步骤实施：
步骤1、用银杏叶制备银杏叶粉末，用乙醇在超声波辅助下提取银杏叶粉末，得到银杏叶粗提液，旋蒸所得的银杏叶粗提液，得到银杏叶提取液，具体步骤如下：
步骤1.1、将干净新鲜银杏叶在70℃下烘干，粉碎成粉末，过200目筛，获得银杏叶粉末；
步骤1.2、将步骤1.1所得的银杏叶粉末与体积分数为70％乙醇混合，银杏叶粉末与乙醇的混合比例为1g﹕6mL，混合后进行超声提取，超声功率180W，超声作用每5s间隔0.5s，进行时间为30min的超声提取，得到银杏叶粗提液；
步骤1.3、将步骤1.2所得的银杏叶粗提液置于旋转蒸发仪中，压力为0.080MPa，转速为70r/min，温度为50℃时，进行旋蒸，得到银杏叶提取液。
步骤2、蒸馏水稀释银杏叶提取液得到稀释提取液，使用正丁醇萃取稀释提取液，分液得到粗萃取液，旋转蒸发粗萃取液得到萃取液，干燥浓缩萃取液得到银杏黄酮，具体步骤如下：
步骤2.1、吸取10-20mL银杏叶提取液，加入10mL蒸馏水稀释，得到稀释提取液，混合稀释提取液与体积分数为80～90％正丁醇，稀释提取液与正丁醇混合比例为1g：2mL，混合后，在60℃下，萃取8min，进行萃取倒入分液漏斗静置，溶液分层后分液得到粗萃取液，将粗萃取液置于旋转蒸发仪中，旋蒸得到萃取液；
步骤2.2、干燥浓缩萃取液得到银杏黄酮。
实施例2
本发明一种使用正丁醇提取银杏黄酮的方法，具体按照以下步骤实施：
步骤1、用银杏叶制备银杏叶粉末，用乙醇在超声波辅助下提取银杏叶粉末，得到银杏叶粗提液，旋蒸所得的银杏叶粗提液，得到银杏叶提取液，具体步骤如下：
步骤1.1、将干净新鲜银杏叶在75℃下烘干，粉碎成粉末，过200目筛，获得银杏叶粉末；
步骤1.2、将步骤1.1所得的银杏叶粉末与体积分数为75％乙醇混合，银杏叶粉末与乙醇的混合比例为1g﹕6mL，混合后进行超声提取，超声功率185W，超声作用每5s间隔0.5s，进行时间为35min的超声提取，得到银杏叶粗提液；
步骤1.3、将步骤1.2所得的银杏叶粗提液置于旋转蒸发仪中，压力为0.083MPa，转速为75r/min，温度为55℃时，进行旋蒸，得到银杏叶提取液。
步骤2、蒸馏水稀释银杏叶提取液得到稀释提取液，使用正丁醇萃取稀释提取液，分液得到粗萃取液，旋转蒸发粗萃取液得到萃取液，干燥浓缩萃取液得到银杏黄酮，具体步骤如下：
步骤2.1、吸取10-20mL银杏叶提取液，加入10mL蒸馏水稀释，得到稀释提取液，混合稀释提取液与体积分数为80～90％正丁醇，稀释提取液与正丁醇混合比例为1g：2.5mL，混合后，在60℃下，萃取8min，进行萃取倒入分液漏斗静置，溶液分层后分液得到粗萃取液，将粗萃取液置于旋转蒸发仪中，旋蒸得到萃取液；
步骤2.2、干燥浓缩萃取液得到银杏黄酮。
实施例3
本发明一种使用正丁醇提取银杏黄酮的方法，具体按照以下步骤实施：
步骤1、用银杏叶制备银杏叶粉末，用乙醇在超声波辅助下提取银杏叶粉末，得到银杏叶粗提液，旋蒸所得的银杏叶粗提液，得到银杏叶提取液，具体步骤如下：
步骤1.1、将干净新鲜银杏叶在80℃下烘干，粉碎成粉末，过200目筛，获得银杏叶粉末；
步骤1.2、将步骤1.1所得的银杏叶粉末与体积分数为77％乙醇混合，银杏叶粉末与乙醇的混合比例为1g﹕7mL，混合后进行超声提取，超声功率190W，超声作用每6s间隔0.5s，进行时间为40min的超声提取，得到银杏叶粗提液；
步骤1.3、将步骤1.2所得的银杏叶粗提液置于旋转蒸发仪中，压力为0.085MPa，转速为80r/min，温度为60℃时，进行旋蒸，得到银杏叶提取液。
步骤2、蒸馏水稀释银杏叶提取液得到稀释提取液，使用正丁醇萃取稀释提取液，分液得到粗萃取液，旋转蒸发粗萃取液得到萃取液，干燥浓缩萃取液得到银杏黄酮，具体步骤如下：
步骤2.1、吸取10-20mL银杏叶提取液，加入10mL蒸馏水稀释，得到稀释提取液，混合稀释提取液与体积分数为80～90％正丁醇，稀释提取液与正丁醇混合比例为1g：3mL，混合后，在62℃下，萃取9min，进行萃取倒入分液漏斗静置，溶液分层后分液得到粗萃取液，将粗萃取液置于旋转蒸发仪中，旋蒸得到萃取液；
步骤2.2、干燥浓缩萃取液得到银杏黄酮。
实施例4
本发明一种使用正丁醇提取银杏黄酮的方法，具体按照以下步骤实施：
步骤1、用银杏叶制备银杏叶粉末，用乙醇在超声波辅助下提取银杏叶粉末，得到银杏叶粗提液，旋蒸所得的银杏叶粗提液，得到银杏叶提取液，具体步骤如下：
步骤1.1、将干净新鲜银杏叶在84℃下烘干，粉碎成粉末，过200目筛，获得银杏叶粉末；
步骤1.2、将步骤1.1所得的银杏叶粉末与体积分数为80％乙醇混合，银杏叶粉末与乙醇的混合比例为1g﹕8mL，混合后进行超声提取，超声功率195W，超声作用每6s间隔0.5s，进行时间为45min的超声提取，得到银杏叶粗提液；
步骤1.3、将步骤1.2所得的银杏叶粗提液置于旋转蒸发仪中，压力为0.087MPa，转速为85r/min，温度为65℃时，进行旋蒸，得到银杏叶提取液。
步骤2、蒸馏水稀释银杏叶提取液得到稀释提取液，使用正丁醇萃取稀释提取液，分液得到粗萃取液，旋转蒸发粗萃取液得到萃取液，干燥浓缩萃取液得到银杏黄酮，具体步骤如下：
步骤2.1、吸取10-20mL银杏叶提取液，加入10mL蒸馏水稀释，得到稀释提取液，混合稀释提取液与体积分数为80～90％正丁醇，稀释提取液与正丁醇混合比例为1g：4mL，混合后，在63℃下，萃取9min，进行萃取倒入分液漏斗静置，溶液分层后分液得到粗萃取液，将粗萃取液置于旋转蒸发仪中，旋蒸得到萃取液；
步骤2.2、干燥浓缩萃取液得到银杏黄酮。
实施例5
本发明一种使用正丁醇提取银杏黄酮的方法，具体按照以下步骤实施：
步骤1、用银杏叶制备银杏叶粉末，用乙醇在超声波辅助下提取银杏叶粉末，得到银杏叶粗提液，旋蒸所得的银杏叶粗提液，得到银杏叶提取液，具体步骤如下：
步骤1.1、将干净新鲜银杏叶在86℃下烘干，粉碎成粉末，过200目筛，获得银杏叶粉末；
步骤1.2、将步骤1.1所得的银杏叶粉末与体积分数为85％乙醇混合，银杏叶粉末与乙醇的混合比例为1g﹕8mL，混合后进行超声提取，超声功率200W，超声作用每7s间隔0.5s，进行时间为45min的超声提取，得到银杏叶粗提液；
步骤1.3、将步骤1.2所得的银杏叶粗提液置于旋转蒸发仪中，压力为0.089MPa，转速为87r/min，温度为68℃时，进行旋蒸，得到银杏叶提取液。
步骤2、蒸馏水稀释银杏叶提取液得到稀释提取液，使用正丁醇萃取稀释提取液，分液得到粗萃取液，旋转蒸发粗萃取液得到萃取液，干燥浓缩萃取液得到银杏黄酮，具体步骤如下：
步骤2.1、吸取10-20mL银杏叶提取液，加入10mL蒸馏水稀释，得到稀释提取液，混合稀释提取液与体积分数为80～90％正丁醇，稀释提取液与正丁醇混合比例为1g：4.5mL，混合后，在64℃下，萃取10min，进行萃取倒入分液漏斗静置，溶液分层后分液得到粗萃取液，将粗萃取液置于旋转蒸发仪中，旋蒸得到萃取液；
步骤2.2、干燥浓缩萃取液得到银杏黄酮。
实施例6
本发明一种使用正丁醇提取银杏黄酮的方法，具体按照以下步骤实施：
步骤1、用银杏叶制备银杏叶粉末，用乙醇在超声波辅助下提取银杏叶粉末，得到银杏叶粗提液，旋蒸所得的银杏叶粗提液，得到银杏叶提取液，具体步骤如下：
步骤1.1、将干净新鲜银杏叶在90℃下烘干，粉碎成粉末，过200目筛，获得银杏叶粉末；
步骤1.2、将步骤1.1所得的银杏叶粉末与体积分数为90％乙醇混合，银杏叶粉末与乙醇的混合比例为1g﹕9mL，混合后进行超声提取，超声功率200W，超声作用每7s间隔0.5s，进行时间为50min的超声提取，得到银杏叶粗提液；
步骤1.3、将步骤1.2所得的银杏叶粗提液置于旋转蒸发仪中，压力为0.09MPa，转速为90r/min，温度为70℃时，进行旋蒸，得到银杏叶提取液。
步骤2、蒸馏水稀释银杏叶提取液得到稀释提取液，使用正丁醇萃取稀释提取液，分液得到粗萃取液，旋转蒸发粗萃取液得到萃取液，干燥浓缩萃取液得到银杏黄酮，具体步骤如下：
步骤2.1、吸取10-20mL银杏叶提取液，加入10mL蒸馏水稀释，得到稀释提取液，混合稀释提取液与体积分数为80～90％正丁醇，稀释提取液与正丁醇混合比例为1g：5mL，混合后，在65℃下，萃取10min，进行萃取倒入分液漏斗静置，溶液分层后分液得到粗萃取液，将粗萃取液置于旋转蒸发仪中，旋蒸得到萃取液；
步骤2.2、干燥浓缩萃取液得到银杏黄酮。
表1
银杏黄酮萃取率(％)
实施例1 92.75
实施例2 94.60
实施例3 96.07
实施例4 93.57
实施例5 94.79
实施例6 96.63
将本发明实施例1～6的银杏黄酮提取结果进行对比，结果如表1所示。
根据以上实施例，本发明中提取剂为70-90％乙醇，提取温度50-80℃，是因为发明人通过研究发现，较高的醇浓度有利于黄酮类等物质的溶出，增加细胞膜的通透性，此温度下有利于乙醇适时地蒸出，温度太低，耗时较长，且不利于黄酮类物质的溶解，温度太高，乙醇蒸出过快，同样不利于目标物质的溶解，且对一些热敏性物质容易造成破坏。同时进行超声辅助处理，处理时间15-20min，超声处理时间过短，不利于黄酮类物质的富集，处理时间过长，会增加能耗，也可能会破坏目标物质结构。本发明采用有机溶剂正丁醇萃取纯化银杏黄酮，按照料液比为1：2-5加入80-100％正丁醇，在60-65℃下，萃取8-10min。
本发明具有操作简便、对设备要求低、以正丁醇为溶剂成本低、萃取率高等特点。本发明可以为正丁醇为溶剂萃取银杏黄酮的工业化生产提供借鉴。

Claims (9)

1.一种使用正丁醇提取银杏黄酮的方法，其特征在于，具体按照以下步骤实施：
步骤1、用银杏叶制备银杏叶粉末，用乙醇在超声波辅助下提取银杏叶粉末，得到银杏叶粗提液，旋蒸所得的银杏叶粗提液，得到银杏叶提取液。
步骤2、蒸馏水稀释银杏叶提取液得到稀释提取液，使用正丁醇萃取稀释提取液，分液得到粗萃取液，旋转蒸发粗萃取液得到萃取液，干燥浓缩萃取液得到银杏黄酮。
2.根据权利要求1所述的一种使用正丁醇提取银杏黄酮的方法，其特征在于，所述步骤1具体按照以下步骤实施：
步骤1.1、将干净新鲜银杏叶烘干，粉碎成粉末，过200目筛，获得银杏叶粉末；
步骤1.2、将步骤1.1所得的银杏叶粉末与乙醇混合，混合后进行超声提取，得到银杏叶粗提液；
步骤1.3、将步骤1.2所得的银杏叶粗提液置于旋转蒸发仪中，进行旋蒸，得到银杏叶提取液。
3.根据权利要求2所述的一种使用正丁醇提取银杏黄酮的方法，其特征在于，所述步骤1.1中银杏叶烘干温度为70～90℃。
4.根据权利要求2所述的一种使用正丁醇提取银杏黄酮的方法，其特征在于，所述步骤1.2中银杏叶粉末与乙醇的混合比例为1g﹕6-9mL，所述乙醇体积分数为70-90％。
5.根据权利要求2所述的一种使用正丁醇提取银杏黄酮的方法，其特征在于，超声波提取的参数包括超声功率180～200W，超声作用每5～7s间隔0.5s，进行时间为30～50min的超声提取。
6.根据权利要求2所述的一种使用正丁醇提取银杏黄酮的方法，其特征在于，所述步骤1.3种旋转蒸发参数包括压力为0.08～0.09MPa，转速为70～90r/min，温度为50～70℃时。
7.根据权利要求2所述的一种使用正丁醇提取银杏黄酮的方法，其特征在于，所述步骤2具体按照以下步骤实施：
步骤2.1、吸取10-20mL银杏叶提取液，加入10mL蒸馏水稀释，得到稀释提取液，混合稀释提取液与正丁醇后进行萃取，倒入分液漏斗静置，溶液分层后分液得到粗萃取液，将粗萃取液置于旋转蒸发仪中，旋蒸得到萃取液；
步骤2.2、干燥浓缩萃取液得到银杏黄酮。
8.根据权利要求7所述的一种使用正丁醇提取银杏黄酮的方法，其特征在于，所述步骤2.1中稀释提取液与正丁醇混合比例为1g：2-5mL，所述正丁醇体积分数为80～90％。
9.根据权利要求8所述的一种使用正丁醇提取银杏黄酮的方法，其特征在于，所述步骤2.1中混合稀释提取液与正丁醇后，在60-65℃下，萃取8-10min。
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于文萃: "超声波法提取银杏叶中黄酮类化合物的研究 ", 《吉林化工学院学报》 *
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