CN110522835A - 具有调控肺纤维化微环境中肺间充质干细胞定向分化作用的药物组合物及其制备方法与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种具有调控肺纤维化微环境中肺间充质干细胞定向分化作用的药物组合物及其制备方法与应用,本发明原材料均为天然活性提取物,容易获取。所述具有调控肺纤维化微环境中肺间充质干细胞定向分化作用的药物组合物是采用如下的原料制备的:以永瓣藤、火棘果实、毛喉鞘蕊花、长柱金花茶、延龄草和虎耳草的总质量计,永瓣藤、火棘果实、毛喉鞘蕊花、长柱金花茶、延龄草和虎耳草,任一组分的质量百分比含量均不超过总质量的40%。本发明的药物组合物配方新颖合理,制备方法简单。细胞实验和动物实验均证实本发明的药物组合物能够调控肺纤维化微环境中肺间充质干细胞定向分化,具有良好的开发前景。
Description
技术领域
本发明涉及一种药物组合物及其制备方法,特别是一种具有调控肺纤维化微环境中肺间充质干细胞定向分化作用的药物组合物及其制备方法。
背景技术
肺纤维化是一种以进行性肺功能下降为特征的慢性、不可逆性致命疾病。其患者的肺泡上皮细胞(即组成肺泡的薄薄的单层细胞)被肺成纤维细胞所取代,拥有良好循环的薄层上皮细胞层渐渐被坚硬的瘢痕组织所取代,最终形成粗糙的蜂巢状结构。这些病理变化使肺部变得僵化,无法承担摄取氧并释放二氧化碳的重要功能。随着诊断技术的快速进步,肺纤维化的确诊率快速提高,保守估计,我国IPF患者超过1000万人之多。有一半肺纤维化患者在确诊后的两三年内死亡,5年生存率低于30%,比多数癌症的生存率都低,因此又被称为“不是癌症的癌症”。长期以来用于治疗肺纤维化的药物选择极少,患者面临着疾病进展快、死亡风险高的威胁。
发明内容
本发明的目的是为了克服现有技术中的不足之处,提供一种具有调控肺纤维化微环境中肺间充质干细胞定向分化作用的药物组合物及其用途。
本发明所述的具有调控肺纤维化微环境中肺间充质干细胞定向分化作用的药物组合物,是以永瓣藤、火棘果实、毛喉鞘蕊花、长柱金花茶、延龄草和虎耳草为原料制备的,且任一组分的重量百分含量均不超过总量的40%;
具有调控肺纤维化微环境中肺间充质干细胞定向分化作用的药物组合物,是以如下质量份数的原料制备的:永瓣藤1~60份,火棘果实1~60份,毛喉鞘蕊花1~60份,长柱金花茶1~60份,延龄草1~60份,虎耳草1~60份。
具有调控肺纤维化微环境中肺间充质干细胞定向分化作用的药物组合物,是以如下质量份数的原料制备的:永瓣藤1~50份,火棘果实1~50份,毛喉鞘蕊花1~50份,长柱金花茶1~50份,延龄草1~50份,虎耳草1~50份。
优选的,所述具有调控肺纤维化微环境中肺间充质干细胞定向分化作用的药物组合物,是以如下重量份数的原料制备的:
永瓣藤1~40份
火棘果实1~40份
毛喉鞘蕊花1~40份
长柱金花茶1~40份
延龄草1~40份
虎耳草1~40份
优选的,所述具有调控肺纤维化微环境中肺间充质干细胞定向分化作用的药物组合物,是以如下重量份数的原料制备的:
永瓣藤2~35份
火棘果实2~35份
毛喉鞘蕊花2~35份
长柱金花茶2~35份
延龄草2~35份
虎耳草2~35份
优选的,所述具有调控肺纤维化微环境中肺间充质干细胞定向分化作用的药物组合物,是以如下重量份数的原料制备的:
永瓣藤8~30份
火棘果实8~30份
毛喉鞘蕊花8~30份
长柱金花茶8~30份
延龄草10~30份
虎耳草10~30份
最优选的,是以如下重量份数的原料制备的:
永瓣藤10份
火棘果实10份
毛喉鞘蕊花10份
长柱金花茶10份
延龄草10份
虎耳草10份
最优选的,是以如下重量份数的原料制备的:
永瓣藤8份
火棘果实8份
毛喉鞘蕊花8份
长柱金花茶12份
延龄草12份
虎耳草12份
最优选的,是以如下重量份数的原料制备的:
永瓣藤8份
火棘果实8份
毛喉鞘蕊花8份
长柱金花茶15份
延龄草15份
虎耳草15份
最优选的,是以如下重量份数的原料制备的:
永瓣藤8份
火棘果实10份
毛喉鞘蕊花10份
长柱金花茶12份
延龄草12份
虎耳草12份
最优选的,是以如下重量份数的原料制备的:
永瓣藤8份
火棘果实8份
毛喉鞘蕊花8份
长柱金花茶10份
延龄草10份
虎耳草15份
本发明所述的具有调控肺纤维化微环境中肺间充质干细胞定向分化作用的药物组合物的制备方法,包括以下步骤:
(1)将上述的各个原料置于体积浓度为20%~80%的乙醇中浸泡2~48小时,浸泡用的乙醇用量为各个原料总重量的10~200倍,过滤,得浸泡液;
优选的,过滤残渣再用体积浓度为20%~80%的乙醇浸泡2~48小时,合并浸泡后的溶液,得浸泡液。
(2)浸泡液浓缩至原重量的2~5%,浓缩液用大孔树脂吸附,再用体积浓度5~95%的乙醇多次洗脱,收集洗脱液,即为所述的具有调控肺纤维化微环境中肺间充质干细胞定向分化作用的药物组合物;
优选的,乙醇的体积浓度为40%~95%;
所述大孔树脂采用美国罗姆—哈斯公司的XAD-2型大孔树脂,XAD-2型大孔树脂是以苯乙烯和丙酸酯为单体,加入乙烯苯为交联剂,甲苯、二甲苯为致孔剂,它们相互交联聚合形成了多孔骨架结构。浸泡液浓缩的方法为常规的减压浓缩。
试验证明,本发明的具有调控肺纤维化微环境中肺间充质干细胞定向分化作用的药物组合物用于制备抗肺纤维化的治疗性药物;
本发明还有一个目的是提供该药物组合物在制备抗肺纤维化产品的应用。
进一步的,取羟丙甲纤维素、羧甲淀粉钠、微晶纤维素、乳糖、药用淀粉和硬脂酸与药物组合物混合搅拌制成片剂,该片剂为抗肺纤维化产品
进一步的,取微晶纤维素和药用淀粉与药物组合物混合搅拌制成片剂,该片剂为抗肺纤维化产品。
进一步的,取微晶纤维素、药用淀粉与药物组合物混合搅拌,填入硬胶囊中,制成胶囊剂,该胶囊为抗肺纤维化产品。
本发明根据中药理论,从大量的天然药物中,选用了永瓣藤、火棘果实、毛喉鞘蕊花、长柱金花茶、延龄草和虎耳草为原料,制备获得了所述的具有调控肺纤维化微环境中肺间充质干细胞定向分化作用的组合物,其中,所述的永瓣藤选用卫矛科永瓣藤属植物永瓣藤 Monimopetalum chinense Rehd.的干燥花;火棘果实选用蔷薇科苹果亚科火棘属的常绿野生小灌木植物Pyracantha fortuneana (Maxim.) Li的果实;毛喉鞘蕊花选用唇形科植物鞘蕊花属植物(Coleus forskohlii (Wild) Briq的干燥花;长柱金花茶选用选用山茶科山茶属长柱金花茶(Camellia. nitidissma var. Longistyla)的干燥叶片;延龄草选用百合科延龄草属植物Trillium tschonoskii Maxim的干燥根;虎耳草选用虎耳草科植物虎耳草Saxifragga stolonifera Curt.的全草。所有原料药经广东省中医院袁小红主任中药师鉴定基源,同时质量符合使用标准,样品凭证保存于江西中医药大学附属医院肺病科样品室。
根据《中国药典》和文献记载:
永瓣藤是卫矛科(Celastraceae)永瓣藤属MonimopetalumRehd. 单种属植物永瓣藤Monimopetalum chinense Rehd.的干燥花,永瓣藤属卫矛科,永瓣藤种,与一般卫矛科叶片对生不同,它是单叶互生的,非常稀有,具有较高的研究价值。永瓣藤为中国特有的国家二级稀有濒危保护植物。泰仁昌于1926年在皖南祁门县首次发现该植物,当时拟名为“祁藤”,因其花瓣宿存于果实而不凋落,故中名一直称其为永瓣藤。永瓣藤数量稀少,只生长在皖赣接壤地带,并呈间断分布。其叶为纸质,春夏为绿色,秋天转为棕红色,冬季变为深红色。翌春,叶片又逐渐由红转绿,进行光合作用,待新叶长成才落去。花瓣呈匙形,浅绿色,伴随子房发育至果实成熟,仍不凋落。
火棘果实为蔷薇科苹果亚科火棘属的常绿野生小灌木植物Pyracantha fortuneana (Maxim.) Li的果实,火棘果实又名赤阳子、火把果等,主要分布在我国东南、西南及西北等区域的山地及丘陵地带。火棘果实可食用,性味甘酸,具有健脾消积、生津止渴等功效。火棘果实提取物富含芦丁和金丝桃苷等黄酮类化合物,此外也含有氨基酸、多种无机盐及微量元素等。国外曾报道火棘果实具有显著的美白作用,并以此为原料成功开发出美白化妆品。
毛喉鞘蕊花为唇形科植物鞘蕊花属植物(Coleus forskohlii (Wild) Briq的花,毛喉鞘蕊花被国内植物学家界定为珍稀植物,我国野生毛喉鞘蕊花国内资源极为稀少,它在我国仅分布于云南省的东北部地区海拔2300米的旷野山坡上有野生植株。毛喉鞘蕊花在古印度被称为万灵药,长期以来在印度民间以全草煎服,用于心脏病、腹痛、呼吸紊乱、失眠、痉挛等病的治疗,疗效显著。近年来毛喉鞘蕊花被发现可以治疗青光眼和皮肤病,从而引起科学家的广泛关注。毛喉鞘蕊花化学成分多样,已经分离的化学成分主要有萜类、黄酮、甾醇、挥发油等。
长柱金花茶是山茶科山茶属长柱金花茶(Camellia. nitidissma var.Longistyla)的干燥叶片。长柱金花茶为广西壮族自治区特有的植物资源,其中含有丰富的多糖,黄酮类,茶多酚,皂苷等活性化学成分,以及多种对人体有重要保健作用的锗、硒、钼、钒、锰、锌以及大量元素钾、钙、镁等;还含有赖氨酸、苏氨酸、谷氨酸、丝氨酸、天冬氨酸等氨基酸。长柱金花茶不仅具有极高的观赏价值,而且还具有一定的营养和药用价值,被誉为“国宝神茶”。临床试验研究证明,长柱金花茶叶具有增强机体免疫力、增强心肌收缩力、增强血管弹性、增进肝脏代谢、抗衰老、抑制肿瘤、降低血清胆固醇,降低血压、激活人体各种生物酶、平衡机体各种机能等作用。
延龄草是百合科延龄草属植物Trillium tschonoskii Maxim的干燥根,又名头顶一颗珠,主要生长在海拔2000m左右的山坡林下草丛中,功能镇静安神、活血止血、解毒,主治头晕目眩、高血压、神经衰弱。延龄草富含多种甾体皂苷和氨基酸,是提取甾体皂苷的重要原料。
虎耳草为虎耳草科植物虎耳草Saxifragga stolonifera Curt.的全草。微苦、辛、寒、有小毒,祛风,清热,凉血解毒。治风疹,湿疹,中耳炎,丹毒,咳嗽,吐血,肺痈,崩漏,痔疾。近年来,人们发现虎耳草花中富含熊果苷,能有效抑制黑色素母细胞的活跃程度,就像给黑色素催眠一样,有美白,淡斑的功效。
目前,国内外尚未见将永瓣藤、火棘果实、毛喉鞘蕊花、长柱金花茶、延龄草和虎耳草提取物的组合物用于具有调控肺纤维化微环境中肺间充质干细胞定向分化作用的相关报道。
综上所述,本发明人阅读了大量文献,依据肺纤维化的病理生理规律,利用细胞模型进行高通量筛选,终于发现具有调控肺纤维化微环境中肺间充质干细胞定向分化作用的药物组合物,可进一步开发成为新型抗肺纤维化药物。
具体实施方式
实施例1
在室温下,取永瓣藤、火棘果实、毛喉鞘蕊花、长柱金花茶、延龄草和虎耳草各10公斤,用体积浓度70%的乙醇600公斤浸泡提取,浸泡时间为24小时,残渣再用体积浓度70%的乙醇600公斤浸泡24小时提取,然后将浸泡后的溶液合并,经过200目的滤网过滤后,减压浓缩20倍,再将浓缩液上大孔树脂,用体积浓度50%的乙醇洗脱,收集的洗脱液中含有本发明组方中所需要的有效成分,即药物组合物。
实施例2
在室温下,取永瓣藤8公斤、火棘果实8公斤、毛喉鞘蕊花8公斤、长柱金花茶12公斤、延龄草12公斤和虎耳草12公斤,用体积浓度50%的乙醇1200公斤浸泡提取,浸泡时间为24小时,残渣再用体积浓度50%的乙醇1200公斤浸泡24小时提取,然后将浸泡后的溶液合并,经过200目的滤网过滤后,减压浓缩40倍,再将浓缩液上大孔树脂,用体积浓度40%的乙醇洗脱,收集的洗脱液中含有本发明组方中所需要的有效成分,即药物组合物。
实施例3
在室温下,取永瓣藤8公斤、火棘果实8公斤、毛喉鞘蕊花8公斤、长柱金花茶15公斤、延龄草15公斤和虎耳草15公斤,用体积浓度80%的乙醇1000公斤浸泡提取,浸泡时间为24小时,残渣再用体积浓度80%的乙醇1000公斤浸泡24小时提取,然后将浸泡后的溶液合并,经过200目的滤网过滤后浓缩25倍,再将浓缩液上大孔树脂,用体积浓度60%的乙醇洗脱,收集的洗脱液中含有本发明组方中所需要的有效成分,即药物组合物。
实施例4
在室温下,取永瓣藤8公斤、火棘果实10公斤、毛喉鞘蕊花10公斤、长柱金花茶12公斤、延龄草12公斤和虎耳草12公斤,用体积浓度30%的乙醇2000公斤浸泡提取,浸泡时间为24小时,残渣再用体积浓度30%的乙醇2000公斤浸泡24小时提取,然后将浸泡后的溶液合并,经过200目的滤网过滤后浓缩50倍,再将浓缩液上大孔树脂,用体积浓度50%的乙醇洗脱,收集的洗脱液中含有本发明组方中所需要的有效成分,即药物组合物。
实施例5
在室温下,取永瓣藤8公斤、火棘果实8公斤、毛喉鞘蕊花8公斤、长柱金花茶10公斤、延龄草10公斤和虎耳草15公斤,用体积浓度60%的乙醇1200公斤浸泡提取,浸泡时间为24小时,残渣再用体积浓度60%的乙醇1200公斤浸泡24小时提取,然后将浸泡后的溶液合并,经过200目的滤网过滤后浓缩30倍,再将浓缩液上大孔树脂,用体积浓度80%的乙醇洗脱,收集的洗脱液中含有本发明组方中所需要的有效成分,即药物组合物。
实施例6
药物组合物具有调控肺纤维化微环境中肺间充质干细胞定向分化作用的细胞实验研究报告:下述实验中,所用的药物提取物的组合物为实施例1的药物组合物。
采用肺纤维化大鼠的大鼠支气管灌洗液诱导生长状态良好的第三代肺间充质干细胞,倒置显微镜下连续观察细胞形态变化及增值情况,并采用共聚焦荧光显微镜检测Ⅱ型肺泡细胞特异性标记表面蛋白C的荧光表达(见附图1)。
附图说明:BMSCs分化的Ⅱ型肺泡细胞共聚焦荧光显微镜图片(细胞质采用绿色表面蛋白C染色,细胞核采用碘化丙啶染色),×40
结果显示在常规培养液中加入支气管灌洗液,有(42.48±5.12)%的肺间充质干细胞48小时后分化为Ⅱ型肺泡细胞,这说明肺纤维化大鼠的支气管灌洗液可以成功诱导肺间充质干细胞定向分化为Ⅱ型肺泡细胞,而药物组合物含药血清组可以显著提高转化率,有统计学意义(P<0.01)。
与支气管灌洗液组比较,﹡P<0.05,﹡﹡P<0.01。
实施例7
药物组合物片剂的制备
取实施例1中获得的药物组合物2g、羟丙甲纤维素4g、羧甲淀粉钠10g,微晶纤维素10g、乳糖115g、药用淀粉50g、硬脂酸铁1g,将主药与辅料充分混匀后投入速搅拌机中,喷雾加水适量,整粒,水分控制在3~4%,然后月压片,制成1000片,包薄膜衣。每片含主药成分0.2mg。该片剂为抗氧化产品或者神经保护产品。
药物组合物又一片剂的制备
取实施例1中获得的药物组合物3g、羧甲淀粉钠15g、微晶纤维素15g、药用淀50g、硬脂酸镁2g,将主药与辅料充分混匀后投入高速搅拌机中,喷雾加水适量,整粒,水控制在3~4%,然后压片,制成1000片。每片含主药成分0.3mg。该片剂为抗化产品或者神经保护产品。
药物组合物胶囊剂的制备
取实施例1中获得的药物组合物2g、微晶纤维素25g、药用淀粉70g,将药用淀先干燥,过120目筛,再与药物组合物、微晶纤维素混合,过两次120日筛,填入硬胶囊制成1000粒本发明胶囊。每粒硬胶囊含主药成分0.2mg,该胶囊为抗氧化产品或者神经保护产品。
最后有必要在此说明的是:以上实施例只用于对本发明的技术方案作进一步地说明,不能理解为对本发明保护范围的限制,本领域的技术人员根据本发明的上述作出的一些非本质的改进和调整均属于本发明的保护范围。
Claims (10)
1.具有调控肺纤维化微环境中肺间充质干细胞定向分化作用的药物组合物,其特征在于:是以永瓣藤、火棘果实、毛喉鞘蕊花、长柱金花茶、延龄草和虎耳草为原料制备的,且任一组分的重量百分含量均不超过总量的40%。
2.根据权利要求1所述的具有调控肺纤维化微环境中肺间充质干细胞定向分化作用的药物组合物,其特征在于,是以如下质量份数的原料制备的:永瓣藤1~60份,火棘果实1~60份,毛喉鞘蕊花1~60份,长柱金花茶1~60份,延龄草1~60份,虎耳草1~60份。
3.根据权利要求2所述的具有调控肺纤维化微环境中肺间充质干细胞定向分化作用的药物组合物,其特征在于,是以如下质量份数的原料制备的:永瓣藤1~50份,火棘果实1~50份,毛喉鞘蕊花1~50份,长柱金花茶1~50份,延龄草1~50份,虎耳草1~50份。
4.根据权利要求1~3任一项所述的具有调控肺纤维化微环境中肺间充质干细胞定向分化作用的药物组合物的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
第一步:将上述的各个原料置于体积浓度为20%~80%的乙醇中浸泡,浸泡用的乙醇用量为各个原料总重量的10~200倍,过滤,得浸泡液;
第二步:浸泡液浓缩至原重量的2~5%,浓缩液用大孔树脂吸附,再用体积浓度为5~95%的乙醇洗脱,收集洗脱液,即为所述的具有调控肺纤维化微环境中肺间充质干细胞定向分化作用的药物组合物。
5.根据权利要求4所述的的具有调控肺纤维化微环境中肺间充质干细胞定向分化作用的药物组合物的制备方法,其特征在于:第一步中,所述的乙醇浸泡时间为2~48小时;或各个原料先用乙醇浸泡2~48小时,残渣再用乙醇浸泡2~48小时,合并浸泡后的溶液,得浸泡液。
6.根据权利要求4所述的具有调控肺纤维化微环境中肺间充质干细胞定向分化作用的药物组合物的制备方法,其特征在于:第二步中,所述洗脱用乙醇的体积浓度为40%~95%。
7.根据权利要求1~3任一项所述的具有调控肺纤维化微环境中肺间充质干细胞定向分化作用的药物组合物的用途,其特征在于:制备抗肺纤维化产品的应用。
8.根据权利要求4所述的药物组合物在制备抗肺纤维化产品的应用,其特征在于:取羟丙甲纤维素、羧甲淀粉钠、微晶纤维素、乳糖、药用淀粉和硬脂镁与药物组合物混合搅拌制成片剂。
9.根据权利要求4所述的药物组合物在制备抗肺纤维化产品的应用,其特征在于:取微晶纤维素和药用淀粉与药物组合物混合搅排制成片剂。
10.根据权利要求4所述的药物组合物在制备抗肺纤维化产品的应用,其特征在于:取微晶纤维素、药用淀粉与药物组合物混合搅拌,填入硬胶囊中,制成胶囊剂。
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CN201910653113.4A Pending CN110522835A (zh) | 2019-07-19 | 2019-07-19 | 具有调控肺纤维化微环境中肺间充质干细胞定向分化作用的药物组合物及其制备方法与应用 |
Country Status (1)
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CN (1) | CN110522835A (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN113337453A (zh) * | 2021-05-31 | 2021-09-03 | 中国科学院生态环境研究中心 | 检测化合物的肺毒性的方法 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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CN104069322A (zh) * | 2014-05-29 | 2014-10-01 | 王恩瀚 | 具有面部美白淡斑作用的药物组合物及其制备方法与应用 |
CN105497098A (zh) * | 2015-12-21 | 2016-04-20 | 江苏省中国科学院植物研究所 | 具有抗炎活性的永瓣藤提取物、制备方法及其应用 |
CN109718233A (zh) * | 2019-02-28 | 2019-05-07 | 天津国际生物医药联合研究院 | 岩白菜素在制备用于治疗肺纤维化疾病药物中的应用 |
CN109875992A (zh) * | 2019-03-20 | 2019-06-14 | 昆明医科大学 | 佛司可林及其衍生物在制备抗肺纤维化药物中的应用 |
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2019
- 2019-07-19 CN CN201910653113.4A patent/CN110522835A/zh active Pending
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