CN110478373A - 南极磷虾油在制备抗高尿酸血症或抗痛风的药物或保健食品中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了南极磷虾油在制备抗高尿酸血症或抗痛风药物或保健食品中的应用。本发明人发现南极磷虾油具有降低高尿酸动物模型血清尿酸含量的功效，如5‑20mg/kg的南极磷虾油灌胃可以显著降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平至接近正常水平，但对肾功能无明显影响。南极磷虾油能够明显降低模型小鼠血清的黄嘌呤氧化酶活性。因此，南极磷虾油可应用于抗高尿酸血症和抗痛风药物/保健食品，具有良好的开发应用前景。
Description
技术领域
本发明具体涉及南极磷虾油在制备抗高尿酸血症和抗痛风药物或保健食品中的应用。
背景技术
痛风(Gout)是一种因嘌呤代谢紊乱导致尿酸(Uric acid,UA)生成增多和/或尿酸排泄减少所引起的代谢性疾病。痛风已成为继糖尿病之后的第二大代谢性疾病。高尿酸血症(Hyperuricemia)是指细胞外液的尿酸盐呈超饱和状态，一般认为血尿酸值≥417μmol/L时被认为是高尿酸血症。长期的高尿酸血症易诱发痛风，约6-12％的高尿酸血症患者会发展成为痛风。高尿酸血症是痛风的前提与生化基础，因此，高尿酸血症成为痛风的生化标志，因为痛风必然伴有高尿酸血症；但痛风的患者的临床症状多表现为尿酸盐沉积所导致反复发作的急、慢性关节炎和软组织损伤。此外，痛风还同时与代谢紊乱综合征如心血管疾病、高血压、慢性肾脏等独立的危险因素密切相关。研究证实，痛风主要是由先天遗传因素与后天饮食环境等因素共同导致，其形成与发展都与相关代谢酶有关，尤其是嘌呤碱基分解代谢的关键酶——黄嘌呤氧化酶(Xanthine oxidase,XOD)。在嘌呤代谢过程中，黄嘌呤氧化酶催化黄嘌呤和/或次黄嘌呤氧化形成尿酸。因此，黄嘌呤氧化酶是决定体内尿酸生成速度的限速酶，通过抑制黄嘌呤氧化酶的活性可以降低尿酸的生成速度，进而起到治疗高尿酸血症和痛风的作用。欧洲、北美、日本等发达国家和地区痛风的发病率较高；随着我国经济社会的发展和饮食结构的改变，人们摄入富含嘌呤和蛋白质类食品也逐年增多，导致痛风的发病率呈逐年上升。
目前，对于高尿酸血症和痛风的常规治疗主要以促进尿酸排泄和抑制黄嘌呤氧化酶为主。临床实践也表明现有药物存在着各种不足：促尿酸排泄药物常伴随有皮疹、发热、肾脏损害等副作用，黄嘌呤氧化酶抑制剂类药物具有肝脏、骨髓毒性和过敏等不良反应。因此，寻找高效低毒的抗高尿酸血症和抗痛风的药物或保健食品已经成为食品科学或药物科学研究的热点。
发明内容
本发明针对缺乏高效低毒的抗高尿酸血症和抗痛风的药物或保健食品的问题，提供一种南极磷虾油在防治高尿酸血症和痛风的新用途。
本发明的技术方案如下：南极磷虾油在制备抗高尿酸血症或抗痛风的药物或保健食品中的应用。
所述的南极磷虾油是指以冷冻南极磷虾，干燥南极磷虾及任一以南极磷虾为原料提取获得的南极磷虾油及其组分。
所述的南极磷虾油为完整南极磷虾油及南极磷虾油组分。南极磷虾油及其组分占药物/保健食品质量的0.01-100％。
本发明所述的应用包括药用剂型，如胶囊、颗粒剂、丸剂、片剂、膏剂、酊剂、口服液等；或保健食品剂型，如胶囊、颗粒剂、片剂、饮料等。可以是以南极磷虾油或南极磷虾油及辅助性成分按照常规制剂工艺制成的制剂。
南极磷虾油通过降低尿酸含量，抑制黄嘌呤氧化酶活性等，达到缓解/治疗高尿酸血症或痛风的作用。
本发明人在研究南极磷虾油功效过程中发现，南极磷虾油具有降低高尿酸动物模型血清尿酸含量的功效，如5-20mg/kg的南极磷虾油灌胃可以显著降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平至接近正常水平，但对肾功能无明显影响。临床研究结果也证明，南极磷虾油可以有效降低高尿酸患者血清尿酸含量，改善痛风患者临床症状。这可能是由于南极磷虾油来自于低温、严酷的南极海域所产生的特殊生物活性及其良好的抗氧化和吸收作用，能够促进高尿酸血症和痛风患者机体组织细胞生长和代谢，减少尿酸的生成等有关。因此，南极磷虾油可应用于抗高尿酸血症和抗痛风药物/保健食品，具有良好的开发应用前景。
具体实施方式
下面举较佳实施例来更清楚完整地说明本发明。
实施例1南极磷虾油对氧嗪酸钾盐诱导小鼠高尿酸血症的影响
1.1材料与试剂：受试样品南极磷虾油；实验所用水为纯净水；尿酸检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所。
1.2实验动物：健康雄性昆明种小鼠(20±2)g，由上海实验动物中心提供。
1.3动物分组：实验动物随机分为正常对照组、模型对照组、阳性对照组(别嘌呤醇5.0mg/kg)和南极磷虾油5.0、10.0、20.0mg/kg，每组10只。灌胃给药，每天2次。采用尿酸酶抑制剂氧嗪酸钾为化学性诱导剂，腹腔注射氧嗪酸400.0mg/kg，造成高尿酸血症小鼠，正常对照组则注射等体积0.5％CMC-Na溶液，注射后1h灌胃给予末次剂量的样品，2h后经内眦采血，3000rpm离心10min，取血清，采用磷钨酸比色法(南京建成生物工程研究所试剂盒)测定血清尿酸含量。处死动物取肝脏，制备10％肝匀浆，3000rpm、4℃离心、30min，取上清按磷钨酸还原法试剂盒说明书测定小鼠血清和肝脏中尿酸(UA)含量。
1.4结果表明，腹腔注射氧嗪酸钾后小鼠血清尿酸水平显著升高，与正常对照组相比，有显著性差异(P＜0.01)，表明高尿酸血症动物模型造模成功。给予南极磷虾油后，20.0mg/kg剂量组动物血清尿酸水平降低约25％，明显低于高尿酸血症模型对照组，与模型对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.01)；但弱于阳性对照组，差异有统计学显著性(P＜0.01)；此外，南极磷虾油对肝尿酸含量影响不明显；表明南极磷虾油具有较强的降低高尿酸血症动物血尿酸的作用(表1)。
表1南极磷虾油灌胃给药对氧嗪酸钾诱导的高尿酸血症小鼠尿酸的影响
备注：m±sd，n＝10；aP＜0.01，与正常对照组相比；bP＜0.01，与模型组相比；cP＜0.01，与别嘌醇组相比(t-test)。
实施例2南极磷虾油对氧嗪酸钾盐诱导的高尿酸血症小鼠XOD的影响
2.1材料与试剂：受试样品南极磷虾油；实验所用水为纯净水；黄嘌呤氧化酶检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所。
2.2.实验动物：健康雄性昆明种小鼠(20±2)g，由上海实验动物中心提供。
2.3动物分组：实验动物随机分为正常对照组、模型对照组、阳性对照组(别嘌呤醇5.0mg/kg)和南极磷虾油5.0、10.0、20.0mg/kg，每组10只。灌胃给药，每天2次。采用尿酸酶抑制剂氧嗪酸钾为化学性诱导剂，腹腔注射氧嗪酸400.0mg/kg，造成高尿酸血症小鼠，正常对照组则注射等体积0.5％CMC-Na溶液，注射后1h灌胃给予末次剂量的样品，2h后经眼采血，3000rpm离心10min，取血清，采用磷钨酸比色法(南京建成生物工程研究所试剂盒)测定血清尿酸水平；处死动物取肝脏，制备10％肝匀浆，3000rpm、4℃离心、30min，取上清按磷钨酸还原法试剂盒说明书测定小鼠血清和肝脏中尿酸(UA)和黄嘌呤氧化酶(XOD)水平。
2.4结果：低、中和高剂量南极磷虾油组与阳性对照组对高尿酸血症小鼠血清和肝脏黄嘌呤氧化酶活性的影响结果见表2。与正常对照组相比，模型对照组的血清和肝脏黄嘌呤氧化酶活性都升高(P<0.05)；与模型对照组相比，阳性对照组(别嘌呤醇)明显降低了血清黄嘌呤氧化酶活性，增强了肝脏黄嘌呤氧化酶活性(P<0.05)；低、中、高剂量南极磷虾油组对血清和肝脏的黄嘌呤氧化酶活性均无显著性影响(P>0.05)。这说明，南极磷虾油组对小鼠血清和肝脏黄嘌呤氧化酶活性无抑制作用，对肝功能无明显影响。
表2南极磷虾油灌胃给药对氧嗪酸钾盐诱导的高尿酸血症小鼠XOD的影响
与正常对照组相比，P<0.01；与模型对照组相比，*/**P<0.05/0.01。
实施例3南极磷虾油对体外黄嘌呤氧化酶抑制实验
称取1.0mg南极磷虾油，采用20.0μL DMSO溶解并用缓冲液稀释至1.0mL，获得1.0mg/mL母液。样品终浓度为200.0μg/mL。在正常对照组中加入100.0μL焦磷酸钠缓冲液(pH＝7.4)；模型对照组先加入60.0μL缓冲液；阳性对照组中加入20.0μL别嘌醇溶液(50.0μM)和40.0μL酶溶液(2.5U/L)；样品对照组加入20.0μL样品和40.0μL酶溶液(2.5U/L)。加样完成后，将其放入恒温箱中在25℃下孵育15min。孵育完成后，除了正常对照组，其余均加入40.0μL黄嘌呤溶液(400.0μM)，每组的终体积为0.1mL，并立即在295nm波长进行动态法测定，读取时间为30min，5min/次，平行测定三次。
黄嘌呤氧化酶抑制率(％)＝(△酶—△样/△酶—△阴)×100，结果见表3。通过计算检测受试样品的黄嘌呤氧化酶抑制率活性强弱，南极磷虾油对黄嘌呤氧化酶抑制率为47.58±3.26％(m±sd)，具有显著的抑制活性。
表3南极磷虾油体外抑制XOD的影响
与正常对照组相比，P<0.01；与模型对照组相比，*/**P<0.05/0.01。
以上所述实施例仅说明了本发明的几种实施方式，不能因此而理解为是对本发明专利范围的限制；尽管参前述实施例对被发明进行了详细的说明，但对于本领域的普通技术人员来说，依然可以依据前述实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而对这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明所要求保护的技术方案的精神和范围。
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1.南极磷虾油在制备抗高尿酸血症或抗痛风的药物或保健食品中的应用。
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