CN114271497A - 一种能够降低血清中高尿酸水平的组合物及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种能够降低血清中高尿酸水平的组合物，该组合物包括富含多不饱和脂肪酸的海洋油脂、大蒜油和虾青素。本发明提供的南极磷虾油、大蒜油和虾青素复配的组合物，通过具体实验验证了该组合物能够显著性降低血清中的高尿酸水平，且在动物水平上验证了该组合物对抗高尿酸血症的积极作用；组合物中三者的复配起到了良好的降尿酸水平效果，具体表现在降低高尿酸水平、对高尿酸血症和痛风症有一定缓解作用。另外经过实际验证，本发明提供的组合物能够抑制肝脏黄嘌呤氧化酶和腺苷脱氨酶活性，进而减少尿酸的生成；并且该组合物还可降低血清肌酐和尿素氮含量，防治肾脏组织病变，对肾脏起到一定的保护作用。
Description
技术领域
本发明属于海洋生物资源利用技术领域，具体涉及一种能够降低血清中高尿酸水平的组 合物，及其在预防和/或治疗高尿酸血症/痛风产品中的应用。
背景技术
高尿酸血症是由于嘌呤代谢紊乱从而使尿酸生成过多或尿酸排泄减少所致的代谢性疾病， 主要特点是血尿酸浓度增高。高尿酸血症不仅是痛风病的初始阶段，而且与脂代谢异常、糖 尿病、冠心病、高血压、肥胖、代谢综合征以及肾脏损伤等疾病密切相关。
当前临床常用的降尿酸药物可分成尿酸合成抑制剂和促尿酸排泄剂两类，分别从抑制尿 酸合成与促进尿酸代谢两个方面降低血尿酸浓度。但这些药物都具有一定的副作用，如抑制 骨髓造血功能、胃肠毒副反应、会引起表皮脱落性皮炎、血管炎、肝功能紊乱以及尿酸结晶 在肾小管或输尿管中沉积所引起的肾结石和肾衰竭等疾病。
尽管药物性治疗高尿酸水平是主流做法，但是单纯药物服用或多或少会带来副作用，当 前现有技术中缺少一种能够有效降低血清中高尿酸水平的可食用的功能性食品。
发明内容
本发明的目的之一是提供一种能够有效降低血清中高尿酸水平的可食用的功能性组合物， 目的之二是研究该组合物的具体应用，以弥补现有技术的不足。
为了实现上述目的，本发明采用的具体技术方案如下：
一种能够降低血清中高尿酸水平的组合物，该组合物包括富含多不饱和脂肪酸的海洋油 脂、大蒜油和虾青素。
其中，所述富含多不饱和脂肪酸的海洋油脂、大蒜油、虾青素的质量比为(400～890)： (100～599)：(1～10)。
进一步的，所述富含多不饱和脂肪酸的海洋油脂、大蒜油、虾青素的质量比为(450～890)： (100～547)：(3～10)。
更进一步的，所述富含多不饱和脂肪酸的海洋油脂、大蒜油、虾青素的质量比为670：326：4。
所述富含多不饱和脂肪酸的海洋油脂为南极磷虾油或海产鱼油中的一种或两种组合；所 述富含多不饱和脂肪酸的海洋油脂优选为南极磷虾油。
所述的虾青素，是指以雨生红球藻(Haematococcus pluvialis)、南极磷虾壳等任一含虾青 素的水产动植物中的一种或多种为原料提取获得的虾青素组分；所述虾青素优选为雨生红球 藻虾青素。
进一步的，所述南极磷虾油的制备方法包括：利用酶解法制备南极磷虾油，具体为南极 磷虾粉中加入复合蛋白酶和木瓜蛋白酶进行酶解，物料比为100:0.1～0.5，酶浓度在0.1～0.2wt％， 酶解时间为1～8h，加热温度30～40℃；或是以冷冻南极磷虾为原料，利用其自身内源酶，再 加入复合蛋白酶进行酶解，物料比为100:0.02～0.08，酶浓度在0.1～0.2wt％，酶解时间为1～8h； 或是利用提取法制备南极磷虾油，具体为采用乙醇、正己烷中的一种或二种在4～30℃下浸 泡南极磷虾粉，固液比为1:2～1:10，时间为0.5～6h，浸泡后的悬浊液用剪切乳化机进行剪 切提取，然后进行静置或搅拌提取，分离提取液，提取并分离提取液2～3次，将提取液在 30～60℃、真空度在-0.05～-0.1MPa下蒸发，除去提取液中溶剂后得到南极磷虾油。
所述大蒜油的制备方法包括：将大蒜鳞茎原料投料于蒸馏提取罐中，按照固液比1:0.2～ 1:0.8加入水，在压力0.08～0.12MPa、蒸馏温度110～130℃条件下，蒸馏1～3h，收集馏出物 得到大蒜油。采用蒸馏方法提取大蒜油，更符合最终可食用产品的要求。
或是采用以下方法提取大蒜油：大蒜去皮后用组织捣碎机捣碎，取蒜泥加入15mmol/L 氯化锰溶液、2mmol/L磷酸吡哆醛溶液、10mmol/L甘油、10mmol/L氯化镁溶液，在30～40℃， pH 6.0～6.5条件下微波酶解60min；放入超声波合成萃取仪中，添加95％乙醇，液料比为4～7:1 mL/g，超声功率600W，在35℃下超声萃取30～60min。该方法提取的大蒜油纯度和提取率更 高。
所述虾青素的制备方法包括：利用南极磷虾壳制备虾青素：南极磷虾壳粉粹后过筛，采 用卵磷脂与离子液体构建双连续型微乳液体系，在超声辅助条件下提取虾青素，料液比为 1:60～100；或利用雨生红球藻制备虾青素的方法：雨生红球藻经破壁处理，而后采用溶剂提 取法或者超临界法提取分离获得虾青素组分。
另外，所述组合物还包括辅助成分；所述辅助成分包括抗氧化剂和乳化剂中的一种或多 种，或其他添加剂。
所述组合物在开发预防和/或治疗高尿酸血症/痛风产品中的应用；所述产品包括普通食品 和保健食品。
当然，上述组合物的有效应用是也可用于制备治疗高尿酸血症/痛风的药物中，其中所述 组合物在药剂学上可接受载体、溶剂、崩解剂、矫味剂、防腐剂、着色剂、粘合剂等制成口 服制剂或注射剂型。
南极磷虾油富含磷脂型二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)，以及少量的虾 青素等多种活性因子，其中磷脂含量高达40％。南极磷虾油可以起到调节机体代谢、改善氧 化损伤、增强免疫力等作用。机体对于摄食南极磷虾油中的EPA和DHA耐受性良好，没有 迹象表明南极磷虾油对机体安全性参数有不良影响。
大蒜油的主要活性因子为含硫有机化合物，包括二烯丙基一硫醚、甲基烯丙基二硫醚、 二烯丙基二硫醚、二烯丙基三硫醚等，具有增强免疫力、抗氧化、消除炎症反应等功效。
虾青素具有不饱和酮基和羟基的共扼双键链分子结构，能提供吸引自由基的未配对电子， 从而清除自由基，起到显著的抗氧化功效，具有治疗代谢综合征等功效。雨生红球藻是天然 虾青素的主要来源，其中的虾青素主要以虾青素酯的形式存在。
与现有技术相比，本发明的优点和有益效果是：
本发明提供了一种富含多不饱和脂肪酸的海洋油脂、大蒜油和虾青素复配的组合物，且 通过具体动物实验验证了该组合物能够显著性降低血清中的高尿酸水平，在动物水平上验证 了该组合物对抗高尿酸血症的积极作用；组合物中三者的复配起到了良好的降低血清中尿酸 水平效果，具体表现在降低血清中高尿酸水平、对高尿酸血症和痛风症有一定缓解作用。
另外经过实际验证，本发明提供的组合物能够抑制肝脏黄嘌呤氧化酶和腺苷脱氨酶活性， 进而减少尿酸的生成；并且该组合物还可降低血清肌酐和尿素氮含量，防治肾脏组织病变， 对肾脏起到一定的保护作用。
具体实施方式
为更好地说明本发明的目的、技术方案和有益效果，下面将结合具体实施例对本发明作 进一步说明。需说明的是，下述实施方法是对本发明做的进一步解释说明，不应当作为对本 发明的限制。本发明的实施例中所用的材料、试剂若无特殊说明皆可用于商业途径。
若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。
实施例1：配制组合物
将南极磷虾油、大蒜油和虾青素按照质量比670：326：4置于不锈钢罐中混合并搅拌均 匀，混合油经过胶体磨研磨2-3次，即得组合物。
实施例2：
所述的一种能够降低血清中高尿酸水平的组合物，可以制成胶囊和乳剂的形式。具体方 法如下，
胶囊：将上述优选配方组合(实施例1)作为内容物；将明胶、水、甘油、山梨糖醇液混合，加热至70～80℃，搅拌熔融，保温1～2小时后，过滤并脱气后制得胶浆；取内容物和胶浆以滴制法或压制法制成胶囊。
乳剂：将上述优选配方组合(实施例1)加入含有乳化剂或稳定剂的水中，漩涡混匀后 进行超声，再经8000～10000r/min的高速均质处理5～20分钟，使之形成均一乳化状态，制成 乳剂。
实施例3：组合物对高尿酸血症模型小鼠治疗实验
3.1实验仪器与试剂
实验灌胃针(上海玻利鸽工贸有限公司)，Neofuge 15R型高速冷冻离心机(上海力申科 学仪器有限公司)，CMax Plus型酶标仪(美谷分子仪器(上海)有限公司)，UV1102Ⅱ型紫 外/可见分光光度计(上海天美科学仪器有限公司)，CX31RTSF型光学显微镜(日本Olympus 公司)，BAS224S-CW型电子天平(赛多利斯(北京)科学仪器有限公司)，HH-4型数显恒 温水浴锅(常州智博瑞仪器制造有限公司)，酵母浸膏、氧嗪酸钾、猪胆盐(国药集团化学试 剂有限公司)，尿酸试剂盒、尿素氮试剂盒、肌酐试剂盒、黄嘌呤氧化酶试剂盒、腺苷脱氨酶 试剂盒(南京建成生物工程研究所)。
3.2实验动物
SPF级昆明小鼠60只，8周龄，雄性，体重(25±2)g，购自山东鲁抗医药股份有限公司提供，动物合格证编号SCXK(鲁)20190003。动物饲养环境条件：湿度50％～70％，温度(23±2)℃，12h/12h昼夜交替。
3.3分组、造模及干预治疗
雄性昆明小鼠购回后适应环境一周，然后按体质量随机分为六组，每组10只，分别为正 常组、模型组、南极磷虾油组、大蒜油组、虾青素组、组合物组。
造模方法：除正常组外，其他各组小鼠每日灌胃给予酵母浸膏，同时腹腔注射氧嗪酸钾 建立高尿酸血症模型。酵母浸膏灌胃剂量为20g/kg·bw，每只小鼠灌胃容量为每10g体重量灌 胃0.1mL，灌胃完立即腹腔注射氧嗪酸钾，剂量为200mg/kg·bw，根据小鼠体重变化实时调 整注射用氧嗪酸钾溶液浓度，注射最大容量为0.1mL/只。
干预治疗：南极磷虾油组小鼠灌胃给予301.5mg/kg剂量的南极磷虾油；大蒜油组小鼠灌 胃给予146.7mg/kg剂量的大蒜油；虾青素组灌胃给予1.8mg/kg剂量的虾青素；组合物组小鼠 灌胃给予450mg/kg剂量的组合物(其中组合物中南极磷虾油、大蒜油和虾青素的质量比为 670：326：4)；正常组和模型组小鼠灌胃给予等量0.85％生理盐水；每只小鼠灌胃容量为每 10g体重量灌胃0.1mL。实验期间，各组小鼠均喂食标准饲料，自由摄食和饮水。实验周期为 四周，造模每天进行；第三周开始，造模和受试物干预同时进行，至实验结束；受试物干预 每天一次。
具体灌胃试剂配制方法为：一定量受试物加入含有0.5％猪胆盐的水中，漩涡混匀后进行 超声，再经8000～10000r/min的高速均质处理5～20分钟，使之形成均一乳化状态，用于小鼠 灌胃。
3.4本发明的组合物对小鼠血清尿酸(UA)水平的影响
治疗实验结束后取小鼠血清，采用尿酸酶比色法测定血清中UA含量，具体方法按照尿 酸试剂盒说明书规定进行。
各组小鼠血清中UA水平(
n＝10)检测结果见表1。与正常组相比，模型组小鼠血 清UA水平明显升高，且差异具有显著统计学意义(##P＜0.01)，显示造模成功；与模型组相 比，各受试物均能降低高尿酸小鼠血清UA水平，且差异具有显著统计学意义(**P＜0.01)， 其中，组合物(含实施例1)的效果最优。
表1组合物对高尿酸血症小鼠血清中尿酸水平的影响
| 组别 | UA水平(μmol/L) |
| 正常组 | 85.40±16.41 |
| 模型组 | 176.02±19.11<sup>##</sup> |
| 南极磷虾油组 | 107.09±20.25<sup>**</sup> |
| 大蒜油组 | 120.47±15.03<sup>**</sup> |
| 虾青素组 | 131.66±19.20<sup>**</sup> |
| 组合物组(含实施例1) | 100.31±23.28<sup>**</sup> |
3.5本发明的组合物对小鼠肝脏黄嘌呤氧化酶(XOD)和腺苷脱氨酶(ADA)酶活力的影响
治疗实验结束后取小鼠肝脏，制备10％肝匀浆，采用比色法分别测定肝脏中XOD和ADA 的酶活力，具体方法按照黄嘌呤氧化酶试剂盒和腺苷脱氨酶试剂盒说明书规定进行。
各组小鼠肝脏中XOD和ADA酶活力(
n＝10)检测结果见表2。与正常组相比，模型组小鼠肝脏XOD和ADA酶活力均明显升高，且差异具有显著统计学意义(#P＜0.05)，显 示造模成功；与模型组相比，各受试物均能降低高尿酸小鼠肝脏XOD和ADA酶活力水平， 其中，组合物(含实施例1)的效果最优，且差异具有显著统计学意义(*P＜0.05)。
表2组合物对高尿酸血症小鼠肝脏黄嘌呤氧化酶和腺苷脱氨酶的影响
| 组别 | XOD(U/g prot) | ADA(U/g prot) |
| 正常组 | 35.56±0.99 | 10.42±0.50 |
| 模型组 | 45.87±1.28<sup>##</sup> | 13.18±0.89<sup>#</sup> |
| 南极磷虾油组 | 37.94±4.13<sup>*</sup> | 11.42±0.82 |
| 大蒜油组 | 38.41±3.05<sup>*</sup> | 10.93±0.93 |
| 虾青素组 | 39.29±2.71<sup>*</sup> | 11.76±0.75 |
| 组合物组(含实施例1) | 34.44±1.15<sup>**</sup> | 10.01±0.67<sup>*</sup> |
3.6本发明的组合物对小鼠血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)含量的影响
治疗实验结束后取小鼠血清，采用肌氨酸氧化酶法测定血清中Cr含量，采用二乙酰肟比 色法测定血清中BUN含量，具体方法按照肌酐试剂盒和尿素氮试剂盒说明书规定进行。
各组小鼠血清中Cr和BUN含量(
n＝10)检测结果见表3。与正常组相比，模型组小鼠血清Cr和BUN含量均明显升高，且差异具有显著统计学意义(##P＜0.01)，显示造模成功；与模型组相比，各受试物均能降低高尿酸小鼠血清Cr和BUN含量，其中，组合物(含 实施例1)的效果最优，且差异具有显著统计学意义(*P＜0.05)。
表3组合物对高尿酸血症小鼠血清肌酐和尿素氮含量的影响
| 组别 | Cr(μmol/L) | BUN(mmol/L) |
| 正常组 | 21.51±2.03 | 7.55±0.97 |
| 模型组 | 32.08±2.98<sup>##</sup> | 11.38±0.55<sup>##</sup> |
| 南极磷虾油组 | 23.97±1.78<sup>**</sup> | 10.51±0.57 |
| 大蒜油组 | 20.27±5.28<sup>**</sup> | 9.86±1.06 |
| 虾青素组 | 24.25±2.61<sup>**</sup> | 10.21±0.78 |
| 组合物组(含实施例1) | 20.24±3.15<sup>**</sup> | 8.96±1.06<sup>*</sup> |
3.7本发明的组合物对小鼠肾脏组织结构的影响
治疗实验结束后取小鼠肾脏扇形切块，置入10％中性甲醛中固定24小时，乙醇梯度脱水 后进行石蜡包埋和HE染色，在光学显微镜下观察肾脏组织形态。
各组小鼠肾脏组织切片图见图1。与正常组相比，模型组主要表现为具有明显水肿的肾 小管上皮细胞，管腔扩张，肾小球体积缩小，肾间质和肾小管上皮细胞顶端可见炎性细胞浸 润及纤维化。相比模型组，各受试物均能改善肾小管扩张、肾小球萎缩、肾间质损伤及肾脏 的局部纤维化，改善高尿酸血症造成的肾脏损伤。其中，组合物的效果最优，肾小球结构几 乎恢复正常，肾小球萎缩情况得到明显改善，肾间质及肾小管结构接近正常组。
综合上述案例可以得出结论，本发明的组合物能够显著降低高尿酸血症血清尿酸水平， 而且本发明的组合物能够显著降低肝脏黄嘌呤氧化酶和腺苷脱氨酶的酶活力，以及显著降低 血清尿素氮和肌酐含量，从而减轻高尿酸血症以及由高尿酸血症引发的肾脏损伤情况，具有 保护肾脏的功能。该组合物可用于制备预防或治疗高尿酸血症和/或痛风的普通食品、保健食 品或药物。
最后，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技 术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个 整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施 方式。
Claims (10)
1.一种能够降低血清中高尿酸水平的组合物，其特征在于，该组合物包括富含多不饱和脂肪酸的海洋油脂、大蒜油和虾青素。
2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述富含多不饱和脂肪酸的海洋油脂、大蒜油、虾青素的质量比为（400~890）：（100~599）：（1~10）。
3.如权利要求2所述的组合物，其特征在于，所述富含多不饱和脂肪酸的海洋油脂、大蒜油、虾青素的质量比为（450~890）：（100~547）：（3~10）。
4.如权利要求3所述的组合物，其特征在于，所述富含多不饱和脂肪酸的海洋油脂、大蒜油、虾青素的质量比为670：326：4。
5.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述富含多不饱和脂肪酸的海洋油脂为南极磷虾油或海产鱼油中的一种或两种组合；所述的虾青素，是指以雨生红球藻、南极磷虾壳等任一含虾青素的水产动植物中的一种或多种为原料提取获得的虾青素组分。
6.如权利要求5所述的组合物，其特征在于，所述富含多不饱和脂肪酸的海洋油脂为南极磷虾油；所述虾青素为雨生红球藻虾青素。
7.如权利要求6所述的组合物，其特征在于，所述南极磷虾油的制备方法包括：利用酶解法制备南极磷虾油，具体为南极磷虾粉中加入复合蛋白酶和木瓜蛋白酶进行酶解，物料比为100:0.1~0.5，酶浓度在0.1~0.2wt%，酶解时间为1~8h，加热温度30~40℃；或是以冷冻南极磷虾为原料，利用其自身内源酶，再加入复合蛋白酶进行酶解，物料比为100:0.02~0.08，酶浓度在0.1~0.2wt%，酶解时间为1~8h；或是利用提取法制备南极磷虾油，具体为采用乙醇、正己烷中的一种或二种在4～30℃下浸泡南极磷虾粉，固液比为1:2～1:10，时间为0.5～6h，浸泡后的悬浊液用剪切乳化机进行剪切提取，然后进行静置或搅拌提取，分离提取液，提取并分离提取液2～3次，将提取液在30～60℃、真空度在-0.05～-0.1MPa下蒸发，除去提取液中溶剂后得到南极磷虾油。
8.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述大蒜油的制备方法包括：将大蒜鳞茎原料投料于蒸馏提取罐中，按照固液比1:0.2～1:0.8加入水，在压力0.08~0.12 MPa、蒸馏温度110～130℃条件下，蒸馏1~3h，收集馏出物得到大蒜油。
9.如权利要求6所述的组合物，其特征在于，所述虾青素的制备方法包括：利用南极磷虾壳制备虾青素：南极磷虾壳粉粹后过筛，采用卵磷脂与离子液体构建双连续型微乳液体系，在超声辅助条件下提取虾青素，料液比为1:60~100；或利用雨生红球藻制备虾青素的方法：雨生红球藻经破壁处理，而后采用溶剂提取法或者超临界法提取分离获得虾青素组分。
10.权利要求1所述的组合物在开发预防和/或治疗高尿酸血症/痛风产品中的应用；所述产品包括普通食品和保健食品。
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| CN202111635678.3A CN114271497A (zh) | 2021-12-29 | 2021-12-29 | 一种能够降低血清中高尿酸水平的组合物及其应用 |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110478372A (zh) * | 2019-09-23 | 2019-11-22 | 中国水产科学研究院东海水产研究所 | 一种用于预防和/或治疗高尿酸血症/痛风的组合物 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103504301A (zh) * | 2013-09-30 | 2014-01-15 | 李树森 | 一种降压降糖降尿酸抗肿瘤的虾青素油的配方及制备方法 |
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| CN109735392A (zh) * | 2019-01-28 | 2019-05-10 | 江南大学 | 一种高虾青素、高磷脂虾油的制备方法 |
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-
2021
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| CN110478372A (zh) * | 2019-09-23 | 2019-11-22 | 中国水产科学研究院东海水产研究所 | 一种用于预防和/或治疗高尿酸血症/痛风的组合物 |
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