CN110476813A - 一种樱花离体快繁方法 - Google Patents

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    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01HNEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
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    • AHUMAN NECESSITIES
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    • A01H4/00Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/008Methods for regeneration to complete plants

Abstract

本发明公开了一种樱花离体快繁方法,属于植物组织培养技术领域。本发明公开的一种樱花离体快繁方法,通过对外植体进行采集、消毒和红光条件下培养;解决了品种退化樱花苗质量参差不齐、繁殖规模小等问题,生根率高达73.3%,达到了优质快繁的目的。

Description

一种樱花离体快繁方法
技术领域
本发明涉及植物组织培养技术领域,更具体的说是涉及一种樱花离体快繁方法。
背景技术
樱花枝叶茂盛,颜色美丽,是著名观花树种,常用于园林观赏。樱花中樱花树皮可以入药,主要用于治疗发热、咳嗽。樱花经济价值和观赏价值很高,所以近年来樱花在国内得以飞速发展,樱花传统的繁殖方式一般为嫁接、播种、分株等方式,但是大多数种类樱花扦插不易生根,樱花枝条扦插存活率低,繁殖问题困扰着樱花产业的发展,成活率较高的嫁接法也因为多代无性繁殖,引起品种退化,同时植株生活力和抗逆性下降,开花质量下降,甚至不能正常开花,且繁殖规模小限制了它在园林中的应用。
樱花离体快繁技术虽明显优于传统樱花的繁殖方式,但是离体快繁技术中仍存在一些问题:如丛生芽的诱导、消毒与生根等。因此,提供一种樱花离体快繁方法,解决品种退化樱花苗质量参差不齐、繁殖规模小等问题,达到优质快繁的目的是本领域技术人员亟需解决的问题。
发明内容
有鉴于此,本发明提供了一种樱花离体快繁方法,解决了品种退化樱花苗质量参差不齐、繁殖规模小等问题,达到了优质快繁的目的。
为了实现上述目的,本发明采用如下技术方案:
一种樱花离体快繁方法,具体步骤如下:
(1)选择4月份的晴朗天气,上午十点左右,采集日本晚樱主干上幼嫩、无病虫害、腋芽饱满、生长情况良好的枝条,将枝条修剪长度保持在3-5cm,保留至少一个腋芽,获得外植体;
(2)将准备好的外植体放入烧杯中,用流水冲洗2.5h,用洗衣粉饱和溶液将外植体浸泡15分钟,将外植体用0.2%苯来特+0.2%克菌丹浸泡10min,用无菌水冲洗干净,放入超净工作台,用75%酒精浸泡30s,0.1%的HgCl2浸泡5min,再用无菌水漂洗3-4次;
(3)将消毒后的外植体接种在pH为5.8的wpm+0.6mg·L-1GA3+1mg·L-16-BA+0.2mg·L-1NAA培养基上,每瓶接种3个外植体,在波长为630nm的红光下培养75d,光照强度为20μmol/(m2·s),光照时间为12h/d,培养温度为21-25℃,获得无菌苗。
经由上述的技术方案可知,与现有技术相比,本发明公开提供了一种樱花离体快繁方法,解决了品种退化樱花苗质量参差不齐、繁殖规模小等问题,生根率高达73.3%,达到了优质快繁的目的。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案,下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本发明的实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据提供的附图获得其他的附图。
图1附图为本发明红光处理前无菌苗;
图2附图为本发明红光处理后生长5d的无菌苗;
图3附图为本发明红光处理后生长15d的无菌苗;
图4附图为本发明红光处理后生长30d的无菌苗。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
材料为“日本晚樱”,采自江苏农林职业技术学院科研苗圃,生长健壮且无病虫害的10年生大树。
实施例1
一种樱花离体快繁方法,具体步骤如下:
(1)选择4月份的晴朗天气,上午十点左右,采集日本晚樱主干上幼嫩、无病虫害、腋芽饱满、生长情况良好的枝条,将枝条修剪长度保持在3-5cm,保留至少一个腋芽,获得外植体;
(2)将准备好的外植体放入烧杯中,用流水冲洗2.5h,用洗衣粉饱和溶液将外植体浸泡15分钟,将外植体用0.2%苯来特+0.2%克菌丹浸泡10min,用无菌水冲洗干净,放入超净工作台,用75%酒精浸泡30s,0.1%的HgCl2浸泡5min,再用无菌水漂洗3-4次;
(3)将消毒后的外植体接种在pH为5.8的wpm+0.6mg·L-1GA3+1mg·L-16-BA+0.2mg·L-1NAA培养基上,每瓶接种3个外植体,在波长为630nm的红光下培养75d,光照强度为20μmol/(m2·s),光照时间为12h/d,培养温度为21-25℃,获得无菌苗;
其中分别对红光处理前,红光处理后生长5d、15d、30d的无菌苗进行拍照,见图1-图4。
(4)将无菌苗移至正常环境中培养30d后,对接种芽数、生根的芽数量进行记录,计算出生根率的均值为73.3%,计算公式为:生根率=生根的芽数量/接种芽数。
对所公开的实施例的上述说明,使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的,本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下,在其它实施例中实现。因此,本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例,而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。

Claims (3)

1.一种樱花离体快繁方法,其特征在于,具体步骤如下:
(1)4-5月份采集外植体;
(2)将外植体用0.2%苯来特+0.2%克菌丹消毒10min,酒精消毒30s,0.1%的HgCl2消毒5-7min;
(3)将消毒后的外植体接种在wpm+0.6mg·L-1GA3+1mg·L-16-BA+0.2mg·L-1NAA培养基上,在红光下培养75d,光照强度为20μmol/(m2·s),光照时间为12h/d,培养温度为21-25℃,获得无菌苗。
2.根据权利要求1所述的一种樱花离体快繁方法,其特征在于,步骤(1)所述外植体选自健壮、无病虫害、腋芽饱满、生长情况良好的枝条。
3.根据权利要求1所述的一种樱花离体快繁方法,其特征在于,步骤(3)所述培养基的pH为5.8。
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