CN108834894A - 一种钩藤的组织培养方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种钩藤的组织培养方法，包括外植体的选择、外植体的清洁与消毒、丛生芽诱导、丛生芽增殖及生根等步骤。本发明对钩藤组织培养技术展开了探索，确立了无菌材料的获得、丛生芽的诱导、丛生芽的增殖、丛生芽的生根等理想培养条件，最终成功建立了钩藤的组织培养体系，为实现对钩藤野生资源的保护、优质种质保存以及优质种质规模化种植奠定了技术基础，解决野生钩藤野生资源过度开发、规范化规模化种植种苗瓶颈等问题。
Description
技术领域
本发明涉及一种中药材的组织培养方法，属于植物组织培养及中药材种植领域，特别涉及一种钩藤的组织培养方法。
背景技术
钩藤(Uncaria rhynchophylla(Miq.)Miq.ex Havil.)为茜草科钩藤属属多年生木质藤本植物，以带钩茎枝入药，有熄风定惊，清热平肝的功效，主要用于肝风内动，惊痫抽搐，高热惊厥，小儿惊啼，妊娠子痫，头疼眩晕等症。现代医药研究其内含钩藤碱，有降血压、抗血小板凝聚和抗血栓的功效，用于治疗部分心脑血管疾病。目前以钩藤为原料药的中药制剂约170余种，药材年需求量大。野生主要分布于云南、广东、广西、贵州、福建、湖南、湖北、江西等地，云南产地生于海拔1300-1900m的山谷溪边的疏林或灌木丛中。目前贵州、广西已形成一定规模种植。
近年来，随着其开发用途的增加以及疗效的临床认可度提高，需求量逐年上升，钩藤药材价格亦随之上升，目前的种植规模产能已不能满足市场需求。传统的繁殖方式主要有种子繁殖和扦插繁殖，种子繁殖存在繁殖周期长、种质性状不稳定等缺点，而扦插繁殖具有繁殖率低，种苗及种植过程中病虫害严重等缺点。同时，钩藤在各企业药材标准中大部分有钩藤碱含量检测指标，由于钩藤品种较多，即使同种不同品种间差异亦较大，使得药材质量参差不齐。
发明内容
本发明针对以上所述现有技术中繁殖周期长、繁殖率低、种质性状不稳定等缺点，利用现代生物技术，发明了一种组分简单、操作简便、生产周期短、繁殖系数高、种质性状稳定性强，可为规模化种植短期内快速提供钩藤优质种苗的组织培养方法。
本发明是通过以下技术方案实现的：
1.外植体的选择：选择健壮植株，剪取健壮无病虫害茎端10-20cm作为外植体；
2.外植体的清洁：将选取的外植体剪成约2-3cm大小的带芽(腋芽或顶芽)茎段，用饱和肥皂水溶液涮洗10-15min，后用自来水冲洗3-4次至无肥皂液残留，加适量水，再加2-3滴吐温-80，振摇10-15min，用自来水冲淋50-60min；
3.外植体的消毒：将清洗好的外植体倒出全部流动水，转移至超净工作台内，加入75％酒精振摇20-30s，无菌水涮洗3-4次，再加入饱和漂白粉溶液振摇20-30min，无菌水涮洗3-4次，最后加入0.1％升汞溶液+1滴吐温-80振摇6-8min，无菌水涮洗6-8次，用无菌纸吸去外植体表面水分；
4.丛生芽诱导培养：将消毒好的外植体剪去两端伤口至1-2cm大小带芽茎段，斜插于1/2MS+NAA 0-0.1mg/L+KT 2.0-4.0mg/L+GA30.5-1.0mg/L+活性炭0.5-1.0g/L，或WPM+NAA 0-0.1mg/L+KT2.0-5.0mg/L+GA3 0.5-1.0mg/L+活性炭0.5-1.0g/L的诱导培养基，培养环境为温度25±2℃，光照强度1000-2000lux，光照时间为培养前7天为8h/天，7天后为12h/天的条件下培养；
5.增殖培养：钩藤经诱导产生丛生芽后，将其丛生芽按节间剪成带芽小段，斜插于MS+ZT 0.01-0.05mg/L+KT 2.0-4.0mg/L+GA30.05-0.3mg/L，培养40-45天后剪成带芽小段斜插于WPM+ZT0.01-0.05mg/L+KT 2.0-4.0mg/L+GA3 0.05-0.3mg/L，在增殖培养过程中，两种培养基每隔一个培养周期交替使用一次，培养环境为温度25±2℃，光照强度3000-4000lux，光照时间为12h/天的条件下培养；
6.生根培养：将增殖后的丛生芽去除基部愈伤，非愈伤部切成具2-3芽茎段，直立插于1/2WPM+NAA 0.5-2.0mg/L+IBA 0-2.0mg/L+多效唑0.01-0.1mg/L+活性炭0.5-1.0g/L的生根培养基中，培养环境为温度25±2℃，光照强度3000-4000lux，光照时间为12h/天的条件下培养。
本发明的有益效果在于：
(1)本发明所述的一种钩藤组织培养方法，外植体的采集时间为5月至9月，可采集周期长，经采集后可继续生长，到收获季节亦可同其他未采集的植株同时收获且几乎不影响产量及品质；
(2)本发明所述的一种钩藤组织培养方法，组分简单，操作简便，成本低廉，繁育过程不受地域及季节限制；
(3)本发明所述的一种钩藤组织培养方法，繁殖速度快、繁殖率高。按一株钩藤植株计算，一株植株可采集30-50个外植体，经诱导培养50天，每代45天的增殖培养5代，以及30天的生根培养，可获得约20万组培生根苗，历时不到一年，是种子繁殖率的500倍，扦插繁殖繁殖率的8000倍，若继续增殖培3-5月，将可获得上千万甚至上亿株组培生根苗，可为规模化种植短期内提供大量种苗；
(4)本发明所述的一种钩藤组织培养方法，属于用体细胞繁殖的无性繁殖范畴，能最大程度的保持亲本性状，相比传统的种子繁殖存在杂交变异的情况，更有利于高质母本优良性状的保存。
附图说明
图1为本发明组织培养方法培养得到的钩藤生根苗。
具体实施方式
实施例1
1.外植体选择：选择钩藤当年生健壮无病虫害的枝条，剪取茎端10-20cm作为外植体，剪成约2-3cm大小的带芽(腋芽或顶芽)茎段，用饱和肥皂水溶液涮洗10min，后用自来水冲洗3-4次至无肥皂液残留，加适量水，再加3滴吐温-80，振摇10min，用自来水冲淋60min；
2.消毒：将清洗好的外植体倒出全部流动水，转移至超净工作台内，加入75％酒精振摇30s，无菌水涮洗3次，再加入饱和漂白粉溶液振摇20min，无菌水涮洗3次，最后加入0.1％升汞溶液+1滴吐温-80振摇6min，无菌水涮洗6次；
3.丛生芽诱导：消毒好的外植体用无菌纸吸去表面水分，剪去两端伤口褐化部分，斜插于WPM+NAA 0.1mg/L+KT 2.0mg/L+GA3 0.5mg/L+活性炭1.0g/L的诱导培养基，培养环境为温度25±2℃，光照强度1000-2000lux，光照时间为培养前7天为8h/天，7天后为12h/天，30天后统计丛生芽诱导率；
4.增殖培养：钩藤经诱导产生丛生芽后，将其丛生芽按节间剪成带芽小段，斜插于MS+ZT 0.02mg/L+KT 2.0mg/L+GA3 0.1mg/L，培养40-45天后剪成带芽小段斜插于WPM+ZT0.02mg/L+KT 4.0mg/L+GA3 0.1mg/L，在增殖培养过程中，两种培养基每隔一个培养周期交替使用一次，培养环境为温度25±2℃，光照强度3000-4000lux，光照时间为12h/天，培养40天后统计增殖倍数；
5.生根培养：将增殖后的丛生芽去除基部愈伤，非愈伤部切成具2-3芽茎段，直立插于1/2WPM+NAA 0.5mg/L+IBA 2.0mg/L+多效唑0.05mg/L+活性炭1.0g/L的生根培养基中，培养环境为温度25±2℃，光照强度3000-4000lux，光照时间为12h/天的条件下培养，培养30天后统计生根率。
实施例2
1.外植体选择：选择钩藤当年生健壮无病虫害的枝条，剪取茎端10-20cm作为外植体，剪成约2-3cm大小的带芽(腋芽或顶芽)茎段，用饱和肥皂水溶液涮洗10min，后用自来水冲洗3-4次至无肥皂液残留，加适量水，再加2-3滴吐温-80，振摇10min，用自来水冲淋60min；
2.消毒：将清洗好的外植体倒出全部流动水，转移至超净工作台内，加入75％酒精振摇26s，无菌水涮洗3次，再加入饱和漂白粉溶液振摇25min，无菌水涮洗3次，最后加入0.1％升汞溶液+1滴吐温-80振摇8min，无菌水涮洗6次；
3.丛生芽诱导：消毒好的外植体用无菌纸吸去外植体表面水分，剪去两端伤口褐化部分，斜插于1/2MS+KT 4.0mg/L+GA3 0.5mg/L+活性炭1.0g/L的诱导培养基，培养环境为温度25±2℃，光照强度1000-2000lux，光照时间为培养前7天为8h/天，7天后为12h/天，培养30天后统计丛生芽诱导率；
4.增殖培养：钩藤经诱导产生丛生芽后，将其丛生芽按节间剪成带芽小段，斜插于MS+ZT 0.05mg/L+KT 2.0mg/L+GA3 0.3mg/L，培养40-45天后剪成带芽小段斜插于WPM+ZT0.01mg/L+KT 2.5mg/L+GA3 0.2mg/L，在增殖培养过程中，两种培养基每隔一个培养周期交替使用一次，培养环境为温度25±2℃，光照强度3000-4000lux，光照时间为12h/天，培养40天后统计增殖率；
5.生根培养：将增殖后的丛生芽去除基部愈伤，非愈伤部切成具2-3芽茎段，直立插于1/2WPM+NAA 2.0mg/L+多效唑0.01mg/L+活性炭1.0g/L的生根培养基中，培养环境为温度25±2℃，光照强度3000-4000lux，光照时间为12h/天的条件下培养，培养30天后统计生根率。
对比例1
本实施例的一种钩藤的组织培养方法，为专利CN104957043B(白钩藤的快速繁殖方法)实施例1，其步骤为：
步骤一：选取钩藤靠近顶芽的带节嫩茎段，摘除多余叶片，用细毛刷在流水下轻轻刷洗外植体表面，然后剪成2cm长的带腋芽的嫩茎段作为钩藤的无菌外植体。对钩藤的外植体进行消毒，具体消毒的过程为：用质量比为1∶100的大蒜素和乙醇的混合溶液浸泡所述外植体5min，再用无菌水润洗所述带节嫩茎段三遍，之后将所述外植体下方的1/3处及以下部分浸泡于质量分数为1％的竹醋液中25min，之后用消毒后的茶叶水持续冲洗所述外植体20s。
步骤二：将所述无菌外植体转入第一培养基中进行光照培养，控制温度为24℃，调节pH为5.7，控制光照强度为15001x，每天的光照时间为9小时，诱导腋芽形成；所述第一培养基包括white培养基、1mg/L的竹醋液、35g/L的蜜二糖和4g/L的琼脂。
步骤三：将步骤二培养的带有腋芽的无菌外植体转入第二培养基中进行光照培养，控制温度为24℃℃，控制光照强度为22001x，每天的光照时间为12小时，培养直至生根。其中，所述第二培养基包括固态培养基和液态培养基，所述第二培养基放置于无菌培养盒中，使固态培养基在所述液态培养基的上方。从无菌外植体的下端开始，将带有腋芽的无菌外植体的1/5浸没于所述液态培养基，将所述带有腋芽的无菌外植体的1/3置于所述固态培养基中。
所述固态培养基包括white培养基、0.1mg/L的珍珠粉、0.1mg/L的激动素KT、0.7mg/L的吲哚丁酸、4g/L的琼脂和0.1g/L的活性炭。调节所述固态培养基的pH为5.7。
所述液态培养基包括B5培养基、0.6mg/L竹醋液和0.2mg/L槐花粉提取液，调节所述液态培养基的pH为5.3。所述槐花粉提取液的制作方法为将槐花粉破壁后，用槐花粉质量10倍的50％的乙醇水溶液浸泡7小时，之后在65℃下萃取8小时，过滤，取滤液，将所述滤液真空减压浓缩至8mg/L，设置真空度为0.05MPa，减压浓缩时控制温度为65℃，即得所述槐花粉提取液。
步骤四：将生根的钩藤苗移栽至基质中培养，移栽后在所述基质表面铺设一层聚乙烯醇缓释膜，所述聚乙烯醇缓释膜中注入有质量配比为1∶1∶2∶1的复合氨基酸、尿素、生物菌肥和糖蜜发酵液。
按重量份数计，所述基质由5份腐殖酸、1份虾壳、15份珍珠岩、保水剂2份和30份田园土混合而成。
对比例2
本实施例的一种钩藤的组织培养方法，其步骤包括：
1.外植体选择与消毒：选取钩藤靠近顶芽的带节嫩茎段为外植体，摘除多余叶片，用细毛刷在流水下轻轻刷洗表面，然后剪成2cm长的带腋芽的嫩茎段，转至超净工作台上，用质量比为1∶100的大蒜素和乙醇的混合溶液浸泡5min，再用无菌水润洗3次，之后将外植体下方的1/3处及以下部分浸泡于质量分数为1％的竹醋液中25min，之后用消毒后的茶叶水持续冲洗20s。
2.腋芽诱导：将步骤1消毒好的外植体转入初代诱导培养基中进行光照培养，控制温度为24℃，调节pH为5.7，控制光照强度为15001x，每天的光照时间为9小时，诱导腋芽形成；所述诱导培养基为：white培养基+1mg/L竹醋液+35g/L蜜二糖+4g/L的琼脂。
3.生根培养：将步骤2培养的带有腋芽的无菌外植体转入生根培养基中进行光照培养，控制温度为24℃，控制光照强度为22001x，每天的光照时间为12小时，培养直至生根。所述生根培养基为：white培养基+0.1mg/L珍珠粉+0.1mg/L KT+0.7mg/L IBA+4g/L琼脂+0.1g/L活性炭，pH为5.7。
表1实施例与对比例培养结果
通过比较可知，本发明的方法外植体灭菌效果较好，操作方便、简单易行，丛生芽诱导具有较高的诱导率，增殖培养阶段具有较高的增殖倍数，可实现量的扩繁，具有明显优势。
Claims (6)
1.一种钩藤的组织培养方法，其特征在于按以下步骤进行：
(1)外植体的选择：选择健壮植株，剪取取无病虫害幼嫩带芽茎段；
(2)外植体的清洁消毒：将选取的外植体剪成带芽小段后用饱和肥皂水溶液涮洗后冲淋，在超净工作台上依次用酒精、漂白粉溶液及升汞溶液消毒；
(3)丛生芽诱导培养：将消毒好的外植体，去掉两端切至1-2cm带芽茎段，接种在以1/2MS或WPM为基本培养基，添加NAA、KT、GA3、活性炭等活性物质的诱导培养基上，在一定温度、光照强度和光周期环境下培养；
(4)丛生芽增殖培养：将诱导出的丛生芽剪成单芽，接种在以MS、WPM交替使用的基本培养基，添加ZT、KT、GA3、活性炭等活性物质的增殖培养基上，在一定温度、光照强度和光周期的环境下培养；
(5)丛生芽生根培养：将增殖的无根苗，接种在以1/2WPM为基本培养基，添加NAA、IBA、多效唑、活性炭等活性物质的生根培养基上，在一定温度、光照强度和光周期的环境下培养。
2.根据权利要求1所述的钩藤的组织培养方法，其特征在于步骤(1)所述的幼嫩带芽茎段为顶端健壮无病虫害植株顶端20-30cm，剪成2-3cm带芽茎段。
3.根据权利要求1所述的钩藤的组织培养方法，其特征在于步骤(2)所述的外植体的最佳消毒方法为75％酒精消毒20-30s，饱和漂白粉溶液消毒20-30min，0.1％升汞溶液消毒6-8min。
4.根据权利要求1所述的一种钩藤组织培养方法，其特征在于步骤(3)所述的丛生芽诱导培养基为1/2MS+NAA 0-0.1mg/L+KT 2.0-4.0mg/L+GA3 0.5-1.0mg/L+活性炭0.5-1.0g/L，或WPM+NAA 0-0.1mg/L+KT 2.0-5.0mg/L+GA3 0.5-1.0mg/L+活性炭0.5-1.0g/L，培养环境为温度25±2℃，光照强度1000-2000lux，光照时间为培养前7天为8h/天，7天后为12h/天的条件下培养。
5.根据权利要求1所述的一种钩藤组织培养方法，其特征在于步骤(4)所述的丛生芽增殖培养包含以下步骤：钩藤经诱导产生丛生芽后，将其丛生芽按节间剪成带芽小段，斜插于MS+ZT 0.01-0.05mg/L+KT 2.0-4.0mg/L+GA3 0.05-0.3mg/L，培养40-45天后剪成带芽小段斜插于WPM+ZT 0.01-0.05mg/L+KT 2.0-4.0mg/L +GA3 0.05-0.3mg/L，在增殖培养过程中，两种培养基每隔一个培养周期交替使用一次，培养环境为温度25±2℃，光照强度3000-4000lux，光照时间为12h/天的条件下培养。
6.根据权利要求1所述的一种钩藤组织培养方法，其特征在于步骤(5)所述的丛生芽生根培养基为1/2WPM+NAA 0.5-2.0mg/L+IBA 0-2.0mg/L+多效唑0.01-0.1mg/L+活性炭0.5-1.0g/L，培养环境为温度25±2℃，光照强度3000-4000lux，光照时间为12h/天的条件下培养。
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Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111165358A (zh) * | 2020-03-13 | 2020-05-19 | 临沧惠康中药材资源开发有限公司 | 一种利用钩藤不定芽诱导四倍体植株的方法 |
| CN114680045A (zh) * | 2022-04-15 | 2022-07-01 | 云南省农业科学院药用植物研究所 | 一种滇鸡血藤的组培育苗方法 |
| CN116941528A (zh) * | 2023-07-12 | 2023-10-27 | 广西壮族自治区药用植物园 | 钩藤离体保存方法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104957044A (zh) * | 2015-07-30 | 2015-10-07 | 广西壮族自治区药用植物园 | 毛钩藤的快速繁殖方法 |
| CN105028202A (zh) * | 2015-07-30 | 2015-11-11 | 广西壮族自治区药用植物园 | 大叶钩藤的快速繁殖方法 |
-
2018
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Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104957044A (zh) * | 2015-07-30 | 2015-10-07 | 广西壮族自治区药用植物园 | 毛钩藤的快速繁殖方法 |
| CN105028202A (zh) * | 2015-07-30 | 2015-11-11 | 广西壮族自治区药用植物园 | 大叶钩藤的快速繁殖方法 |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111165358A (zh) * | 2020-03-13 | 2020-05-19 | 临沧惠康中药材资源开发有限公司 | 一种利用钩藤不定芽诱导四倍体植株的方法 |
| CN114680045A (zh) * | 2022-04-15 | 2022-07-01 | 云南省农业科学院药用植物研究所 | 一种滇鸡血藤的组培育苗方法 |
| CN114680045B (zh) * | 2022-04-15 | 2022-10-04 | 云南省农业科学院药用植物研究所 | 一种内南五味子Kadsura interior A.C.Smith的组培育苗方法 |
| CN116941528A (zh) * | 2023-07-12 | 2023-10-27 | 广西壮族自治区药用植物园 | 钩藤离体保存方法 |
| CN116941528B (zh) * | 2023-07-12 | 2024-04-09 | 广西壮族自治区药用植物园 | 钩藤离体保存方法 |
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| Publication number | Publication date |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| TA01 | Transfer of patent application right |
Effective date of registration: 20190924 Address after: Beijing Road, Panlong District 650205 Yunnan city of Kunming province No. 2238 Applicant after: Medicinal Plant Institute, Yunnan Academy of Agricultural Sciences Applicant after: Yunnan Haochen Agricultural Technology Co., Ltd. Address before: Lotus Wuhua District Office of Yunnan province in 650000 schools of Kunming Yun Road No. 9 Applicant before: Medicinal Plant Institute, Yunnan Academy of Agricultural Sciences Applicant before: YUNNAN CHECHUAN BIOTECHNOLOGY CO., LTD. |
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| TA01 | Transfer of patent application right | ||
| CB02 | Change of applicant information |
Address after: No.2238, Beijing Road, Panlong District, Kunming City, Yunnan Province Applicant after: INSTITUTE OF MEDICINAL PLANTS, YUNNAN ACADEMY OF AGRICULTURAL SCIENCES Applicant after: Yunnan HaoChen Agriculture Co.,Ltd. Address before: No.2238, Beijing Road, Panlong District, Kunming City, Yunnan Province Applicant before: INSTITUTE OF MEDICINAL PLANTS, YUNNAN ACADEMY OF AGRICULTURAL SCIENCES Applicant before: Yunnan Haochen Agricultural Technology Co.,Ltd. |
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| CB02 | Change of applicant information | ||
| GR01 | Patent grant | ||
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