CN110339320A - 一种治疗脂肪肝的中药组合物 - Google Patents

Abstract

本发明属于中医药技术领域，涉及一种治疗脂肪肝的中药组合物。所述中药组合物包括以下重量份原料：浙贝母12‑20份、温郁金10‑15份、杭白菊10‑15份、白术10‑15份、白芍10‑15份、延胡索10‑15份、玄参7‑11份、杭麦冬7‑11份。

Description

一种治疗脂肪肝的中药组合物

技术领域

本发明属于中医药技术领域，涉及一种治疗脂肪肝的中药组合物。

背景技术

脂肪肝一般分为酒精性脂肪性肝病和非酒精性脂肪性肝病两大类，非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)是由糖脂代谢紊乱诱发的以肝细胞脂质沉积为特征的肝脏疾病，疾病谱包括非酒精性单纯性脂肪肝(nonalcoholic fattyliver,NAFL)、非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)、NASH相关肝硬化及肝细胞癌。NAFLD在中医学中可归属于“肝癖”、“胁痛”、“积聚”等范畴；目前诸多医家认为其病因多为饮食不节、劳逸失度、情志失调、久病体虚、禀赋不足；其病理基础与痰、湿、浊、瘀、热等有关，病位在肝，涉及脾、胃、肾等脏腑，证属本虚标实，脾肾亏虚为本，痰浊血瘀为标，临床证候类型主要有痰瘀互结证、肝郁脾虚证、湿浊内停证、湿热蕴结证。周强等(周强,张声生.从临床研究文献分析非酒精性脂肪性肝病常用治法要素和中药用药规律[J].北京中医药,2016,35(5):484-486.)纳入中医药治疗NAFLD的临床研究，整理分析中医药治疗本病的有效治法及方剂，以探讨中医药治疗NAFLD的治法要素及方药规律，结果发现化痰、疏肝、健脾、活血法频率分别为98.6％、89.9％、84.1％、72.5％，提示这四种治法可能是NAFLD的基本治法。而对于NASH，陈成等(陈成,慕永平,冯琴.非酒精性脂肪性肝炎的中医病机特点探讨[J].世界科学技术-中医药现代化,2016,18(9):1483-1487.)经过大量文献检索分析和临床研究认为，其病机以“邪实”为主，基本病机为“瘀热蕴结于肝”。

NAFLD已经成为全球最主要的慢性肝病，在我国，NAFLD患病率快速上升，目前患病率已超过20％，此外，NAFLD发病有低年龄化的趋势。非酒精性单纯性脂肪肝一般病情较为稳定，随访10-20年肝硬化发生率仅0.6％-3％，而NASH患者10-15年内肝硬化发生率高达15％-25％。据估算，在西方发达国家，NASH在NAFLD患者中的比例为20％-30％，在亚洲这一比例为10％-20％。NASH可发展为肝硬化、肝癌，最终可能需要肝移植或死亡，带来了沉重的经济和社会负担。

目前，对于NASH的防治手段比较有限，除了生活方式的改变，目前还没有其他批准的治疗药物。针对不同靶点及多层次靶向联合治疗可能是防治NASH的未来发展方向。中医药的整体观和辨证论治，以及中药复方多层次、多环节、多靶点的作用特点，使得中医药在NASH的治疗中具有较大优势。如中国专利(公告号：CN 102106992B)公开了一种由泽泻27-33g、海藻13-17g、决明子9-11g、郁金13-17g、丹参13-17g、山楂13-17g、水飞蓟13-17g、柴胡5-7g制成的治疗非酒精性脂肪性肝炎的中药颗粒。中国专利申请(公开号：CN 101804102A)公开了一种包括丹参5-15份、虎杖10-30份、灵芝4-12份、垂盆草17-51份的药物组合物用于治疗于非酒精性脂肪性肝炎。

发明内容

本发明的目的在于选用浙江著名的道地药材“浙八味”组成中药组合物，水煎形成“浙八味煎剂”，用于脂肪肝的治疗中，取得较好的临床疗效。

本发明的上述目的通过以下技术方案得以实施：

一种治疗脂肪肝的中药组合物，所述中药组合物包括以下重量份原料：

浙贝母12-20份、温郁金10-15份、杭白菊10-15份、白术10-15份、白芍10-15份、延胡索10-15份、玄参7-11份、杭麦冬7-11份。

以上原料均生长于浙江区域。

作为优选，所述中药组合物包括以下重量份原料：

浙贝母14-16份、温郁金11-13份、杭白菊11-13份、白术11-13份、白芍11-13份、延胡索11-13份、玄参8-10份、杭麦冬8-10份。

作为优选，所述中药组合物包括以下重量份原料：

浙贝母15份、温郁金12份、杭白菊12份、白术12份、白芍12份、延胡索12份、玄参9份、杭麦冬9份。

上述中药组合物在制备治疗或预防脂肪性肝病药物中的应用。

作为优选，所述脂肪性肝病为非酒精性脂肪性肝病。

作为优选，所述脂肪性肝病为非酒精性脂肪性肝炎。

所述中药组合物以“煎剂”形式应用于治疗或预防脂肪性肝病：按照所述重量份称取中药组合物原料，加水煮煎20-30min后，过滤取汁获得“浙八味煎剂”。

本发明与现有技术相比具有以下优点：

本发明采用浙江道地药材“浙八味”治疗或防治脂肪性肝病，浙八味的复合使用，比其它产地同种药材的复合具有更好的临床效果，对解决NAFLD所带来的严重社会和健康问题，提供了重要的临床价值；另一方面，充分利用了浙江省丰富的中药资源优势开发临床新药，对进一步挖掘浙江省道地药材的临床适应症，提升浙江省道地药材的社会效益和经济效益具有重要意义。

附图说明

图1为本发明动物试验例中各组小鼠肝组织病理变化示意图(HE染色，×200倍)，A代表正常组，B代表模型组，C代表“浙八味煎剂”组，D代表阳性对照组；

图2为本发明动物试验例中各组小鼠肝组织病理变化示意图(油红O染色，×200倍)，A代表正常组，B代表模型组，C代表“浙八味煎剂”组，D代表阳性对照组；

具体实施方式

“浙八味”是浙江道地药材的代表，包括温郁金、浙贝母、杭白菊、白术、白芍、延胡索、玄参、杭麦冬八味中药，由于“浙八味”药材质量好、应用范围广及疗效佳而为历代中医药家所推崇。“浙八味”多以苦、辛、寒或温为性味，归经涉及内容较广，大多包含肝胆脾胃经，而功效可归结为两类：一类是“清、散”，另一类是“调、补”，其中“清”包括泄热、逐瘀、祛痰，“散”包括开郁、散结、活血，而“调、补”则以调理气血阴阳。“浙八味”的性味归经和功效特点，契合脂肪肝的中医病机特点和主要治法，故本发明将“浙八味”合用组成复方“浙八味煎剂”用于临床NASH的治疗。方中浙贝母清热化痰散结，温郁金活血行气解郁，共为君药；杭白菊清热解毒平肝，白芍养血敛阴柔肝，延胡索活血行气疏肝，共为臣药；白术为佐药，一是药性偏温，以佐制大队寒凉药性，二是补脾以佐助浙贝母化痰，三是健胃以防寒凉药伤胃；玄参、麦门冬亦为佐药，养阴生津，以防痰瘀日久化热伤阴。八味和合，以清化痰瘀为主，兼健脾养肝益肾。

从药理而言，温郁金及其活性成分具有抗炎、保肝、抗氧化、抗肝纤维化作用；浙贝母多糖具有一定的体外抗氧化活性；杭白菊对四氯化碳所致肝损伤具有良好的保护作用；白芍总苷可能通过改善NAFLD鼠异常的糖脂代谢及拮抗胰岛素抵抗，有效抑制NAFLD鼠的脂质浸润及肝纤维化；延胡索乙素对四氯化碳致小鼠肝损伤具有良好的保护作用，延胡索醇提物能改善小鼠的胰岛素抵抗；白术多糖具有良好的防治NASH的药效学效应；玄参提取物能够通过抑制脂质过氧化发挥保肝作用，显著降低急性肝损伤小鼠的谷丙转氨酶及谷草转氨酶活性，玄参苯丙素苷对大鼠肝损伤肝细胞凋亡具有显著的保护作用；杭麦冬具有保肝、改善胰岛素抵抗作用。由此可见，“浙八味”中药通过不同机制发挥保肝作用。

以下通过试验例对本发明的有益效果作进一步的阐述：

一、“浙八味”中药组合物治疗脂肪肝的动物实验研究

1.材料

1.1实验动物

8-10周龄C57/BL6雄性小鼠40只，体重20g±2g。饲养于宁波大学实验动物中心。

1.2药物和主要试剂

本实验中，浙八味煎剂组的中药组合物，由浙贝母15份、温郁金12份、杭白菊12份、白术12份、白芍12份、延胡索12份、玄参9份、杭麦冬9份组成，按照上述重量份称取中药组合物原料，加水煮煎30min后，过滤取汁获得“浙八味煎剂”。

阳性对照组的中药组合物，由川贝母15份、广郁金12份、亳菊12份、白术12份、白芍12份、延胡索12份、玄参9份、川麦冬9份组成，川贝母、麦冬生长于四川，广郁金长于广西，亳菊、白术、白芍长于安徽，延胡索生长于陕西，玄参生长于湖北，按照上述重量份称取中药组合物原料，加水煮煎30min后，过滤取汁获得“阳性对照组煎剂”。

分析纯CCl₄和化学纯橄榄油，蛋氨酸-胆碱缺乏饲料(MCD)，蛋氨酸-胆碱充足饲料(MCS)。

2.方法

2.1模型制备和给药

小鼠适应性喂养1周后，按体重分层随机法分正常组(10只)、模型组(10只)、浙八味煎剂组(10只)、阳性对照组(10只)。模型组、浙八味煎剂组和阳性对照组给予蛋氨酸-胆碱缺乏饲料(MCD)喂养(每只小鼠每天3g饲料)并联合低剂量CCl₄-橄榄油溶液注射(腹腔注射10％CCl₄-橄榄油溶液，计量为每次2ml/kg体重，每周1次)，共6周，并自造模首日开始分别给予“浙八味煎剂”和“阳性对照组煎剂”进行灌胃给药处理，按70kg成人与小鼠体表面积换算法，小鼠灌胃剂量为14g生药/kg.d，每日灌胃一次，共6周。正常组小鼠予相同时间给予蛋氨酸-胆碱充足饲料(MCS)喂养。

关于“小鼠灌胃剂量为14g生药/kg.d”的说明：浙八味煎剂一剂饮片为93，加水400ml，煎煮两次分别取汁，合并，旋转仪蒸发得66.4ml药液(终浓度为1.4g生药量/ml)，小鼠灌胃量按体重计算为每kg灌药液10ml。

2.2观察指标

2.2.1样本采集

实验结束后小鼠禁食12h后，用2％戊巴比妥钠3mL/kg腹腔注射麻醉，打开腹腔。经下腔静脉采血，离心后吸取血清，－70℃低温保存。摘下肝脏，在同一肝叶和位置切取一小块组织，置入10％中性福尔马林缓冲液中固定，余下肝组织-70℃低温保存。

2.3.2肝组织染色

2.3.2.1肝组织HE染色

4％中性甲醛溶液固定的肝脏组织修整后于脱水机中脱水，后于自动石蜡包埋机中包埋，4℃保存。切片行常规HE染色。光学显微镜观察肝组织学改变。

2.3.2.2肝组织油红O染色

肝组织OCT包埋剂包埋，液氮固定，冰冻切片7μm，采用修正异丙醇油红O染色法染色。

2.3.3血清肝脏生化功能和肝脏甘油三脂测定

分别检测血清ALT、AST、GGT，以及血清和肝脏甘油三酯含量。

3.实验结果

3.1“浙八味煎剂”对NASH模型小鼠肝脏脂肪变和炎症的影响

如图1所示，显微镜下观察，HE染色可见正常组肝组织形态结构正常，无脂肪变性，汇管区无炎症细胞浸润(见图1A)；模型组肝组织可见大量脂肪变性，胞质内充满大小较一致的脂滴空泡，汇管区炎症细胞浸润严重(见图1B)；相比模型组，浙八味煎剂组(见图1C)、阳性对照组(见图1D)脂肪变性程度有所减轻，炎症细胞浸润程度明显减轻，尤其是以浙八味煎剂组效果更明显，阳性对照组的效果不如浙八味煎剂组；

再如图2所示，油红O染色显示，正常组肝细胞胞浆几乎未见红色脂滴(见图2A)；模型组肝细胞胞浆内均可见大量红色大小不一的脂滴(见图2B)；相比模型组，浙八味煎剂组(见图2C)、阳性对照组(见图2D)脂滴明显减少变小，尤其是以浙八味煎剂组效果更为明显，阳性对照组的效果不如浙八味煎剂组。

3.2“浙八味煎剂”对NASH模型小鼠肝功能的影响

血清肝脏生化功能检测结果显示：相比正常组，模型组血清ALT、AST、TBil指标均显著升高(P<0.01)；相比模型组，浙八味煎剂组各指标均有显著下降(P<0.05)；相比模型组，阳性对照组ALT、AST有显著下降(P<0.05)，但TBil无显著变化(P＞0.05)；相比阳性对照组，浙八味煎剂组的TBil有明显降低的趋势。

表1各组肝功能比较

注：ALT，谷丙转氨酶；AST，谷草转氨酶；TBil，总但红素；与正常组比较，*P<0.05，**P<0.01；与模型组比较，^#P<0.05，^##P<0.01

3.3“浙八味煎剂”对NASH模型血清和肝脏甘油三酯(TG)含量的影响。

TG检测结果显示，相比正常组，模型组血清TG含量显著下降(P<0.01)，而肝脏TG含量显著升高(P<0.01)；相比模型组，浙八味煎剂组、阳性对照组血清TG无显著性差异(P＞0.05)，而肝脏TG含量显著降低(P<0.01)；相比阳性对照组，浙八味煎剂组肝脏GT含量显著降低(P<0.01)。

表2各组血清和肝脏TG含量比较

注：TG，甘油三酯；与正常组比较，*P<0.05，**P<0.01；与模型组比较，#P<0.05，##P<0.01。与阳性对照组比较，^△△P<0.01。

二、“浙八味”中药组合物治疗脂肪肝的临床研究

1、资料和方法

1.1实验设计：采用前瞻性队列研究设计，根据患者治疗意愿分为两组，西医常规治疗组作为对照组，西药联合使用浙八味煎剂治疗患者纳入为试验组。样本量估算：假设对照组有效率为70％，试验组有效率为90％，确定显著性水平α＝0.05，把握度＝1-β＝80％，计算其每组样本含量为59，考虑到约10％失访或脱落等因素，确定每组为70例，总共需样本含量约为140例。本次临床试验获得了本单位医学伦理委员会的批准，获得了受试者的知情同意。

1.2研究对象：

(1)病例来源：2016年10月至2018年9月，我院肝病内科、消化内科门诊患者。

(2)纳入标准：①符合NAFLD西医诊断标准。②符合肝郁脾虚、痰浊内阻、痰瘀互结证候的中医辨证标准；③血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)超过正常值上限；④治疗前B超提示脂肪性肝病；⑤血甘油三醋(TG)或总胆固醇(TC)超过正常值上限；⑥年龄18～65周岁之间；⑦接受本试验并同意按试验方案接受相应检查和随访。

(3)排除标准：①B超或CT提示有肝硬化；②合并病毒性肝炎、药物性肝炎、自身免疫性肝病等其他可导致肝功能异常的特定疾病；③中医辨证属于“湿热蕴结”证；④2周内服用过保肝药物及降脂、减肥药；⑤合并糖尿病、冠心病或心、脑、肾、造血系统等严重疾病患者；⑥妊娠或准备妊娠的妇女，哺乳期妇女；⑦拒绝签署知情同意书。

(4)脱落或剔除标准：①病人自行退出；②失访；③研究者令其退出(出现严重的合并症和并发症，严重不良事件)；④依从性差，或虽然完成试验，但服药量不在应服量的80％-120％范围内；⑤治疗过程中合并使用其他护肝药及降血脂药。

1.3治疗方法：参照指南推荐意见，对照组予常规治疗：生活方式干预(饮食和运动宣教和指导)，药物予多烯磷脂酰胆碱胶囊(国药准字H20059010，赛诺菲安万特制药有限公司)治疗，每次456mg，每天3次，饭前口服，疗程12周。试验组：在对照组基础上，予中药“浙八味”煎剂治疗：浙贝母15g、温郁金12g、杭白菊12g、白术12g、白芍12、延胡索12g、玄参9g、杭麦冬9g，以上药材均来自浙江区域，每日一剂，水煎两次早晚温服，疗程12周。

1.4观察指标：治疗前后记录以下指标：(1)中医症状：主症：右胁胀或痛；次症：倦怠、纳差、腹胀、胸闷、喜太息、口黏腻、痰多、便溏不爽。所有症状都分为无、轻度、中度、重度四级，在主症记0、2、4、6分，在次证则记为0、1、2、3分。(2)血常规、肝肾功能、血糖、血脂。(3)B超检查，并根据诊疗指南将脂肪肝分为轻度、中度、重度。(4)记录治疗过程中的药物不良反应。疗程12周结束时终止观察。

1.5疗效判断标准：(1)中医证候疗效评价：疗效指数＝(治疗前积分-治疗后积分)/治疗前积分×100％。临床痊愈：疗效指数≥95％；显效：70％≤疗效指数＜95％；有效：30％≤疗效指数＜70％；无效：疗效指数疗效指数＜30％。(2)肝功能和血脂复常率：分别计算谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)等指标恢复到正常患者例数百分比。(3)B超疗效评价：显效指B超恢复正常；有效指程度较治疗前下降1个等级或以上；无效指未达有效标准者。

1.6统计学处理：采用SPSS19.0统计软件进行分析，计量指标以均数±标准差(x±s)表示，组内治疗前后比较采用配对样本t检验，组间比较采用两独立样本t检验。计数资料用采用卡方检验，P＜0.05表示具有统计学差异。

2、结果

2.1一般情况

本试验共有141例患者入选，剔除及脱落12例(8.5％)，实际完成129例。试验组完成63例，男39例，女24例，年龄38-63岁；对照组完成66例，男40例，女26例，年龄27-61岁,两组间年龄、性别分布有差异(P＜0.05)，而肝功能、血脂及B超检查两组间差异均无统计学意义(P＞0.05)。

2.2两组患者中医证候疗效比较

结果显示，两组间临床治愈率、总有效率比较差异具有统计学意义(P＜0.05)，试验组显著优于对照组，见表3。

表3两组中医证候疗效比较[例(％)]

注：和对照组比较，1)P＜0.05，2)P＜0.01

2.3两组治疗前后肝功能、血脂指标比较

与本组治疗前比较，两组治疗后ALT、AST均显著下降(P＜0.01)试验组治疗后TG显著下降(P＜0.01)见表4；两组ALT、AST复常率均达90％左右，试验组略高于对照组，但两组间无显著性差异(P＞0.05)；试验组TC、TG复常率显著高于对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)，见表5。

表4两组治疗前后肝功能、血脂指标变化

注：和本组治疗前比较，¹⁾P＜0.01

表5两组肝功能、血脂复常率比较[复常例数/异常总例数(％)]

注：和对照组比较，¹⁾P＜0.05，²⁾P＜0.01

2.4两组治疗后肝脏B超疗效比较

治疗结束后，试验组B超显效率显著优于对照组(P＜0.01)，试验组B超总有效率显著优于对照组(P＜0.05)，见表6。

表6两组肝脏B超疗效比较[例(％)]

注：和对照组比较，¹⁾P＜0.05，²⁾P＜0.01

2.5两组不良反应分析

试验组有2例服用中药后出现轻度胃部不适，未予特殊处理，继续服药后症状逐渐消失。对照组未出现不良反应。

三、结论

根据NASH的病机特点：其病机以“邪实”为主，基本病机为“瘀热蕴结于肝”，本发明确立了化痰祛瘀，清肝健脾的治法，选用浙江著名的道地药材“浙八味”组成复方，通过动物模型干预实验和前瞻性队列临床研究试验，评价其干预疗效。动物实验研究显示“浙八味煎剂”能显著抑制脂肪肝模型动物的肝脏脂肪变性、炎症反应，具有显著防治脂肪肝的功效。临床研究结果显示，在西医常规治疗基础上，联合采用“浙八味煎剂”能显著改善NASH患者的临床症状，中医症候疗效总有效率达92.06％；能显著降低肝脏B超脂肪肝程度，显著降低血清ALT、AST、TG等指标，临床疗效明显优于常规的西医治疗。研究结果提示，“浙八味煎剂”治疗NASH疗效显著，且安全无副作用。

不同产地的药材疗效会有所差异，本发明动物模型干预试验中设计的对照组即采用了其它产地的贝母、郁金、菊、麦冬、白术、白芍、延胡索、玄参共同组成的八味中药煎剂，通过试验可知，对照组虽然也能显著改善NASH模型动物组织病理、血清肝功能、肝脏脂肪含量的作用，但是改善效果不如采用浙江道地药材来源的“浙八味煎剂”的试验组。

本文中所描述的具体实施例仅仅是对本发明精神作举例说明，并不用于限定本发明的保护范围。本发明所属技术领域的技术人员可以对所描述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代，但并不会偏离本发明的精神或者超越所附权利要求书所定义的范围。

Claims (6)

1.一种治疗脂肪肝的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物包括以下重量份原料：

浙贝母12-20份、温郁金10-15份、杭白菊10-15份、白术10-15份、白芍10-15份、延胡索10-15份、玄参7-11份、杭麦冬7-11份。

2.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物包括以下重量份原料：

浙贝母14-16份、温郁金11-13份、杭白菊11-13份、白术11-13份、白芍11-13份、延胡索11-13份、玄参8-10份、杭麦冬8-10份。

3.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物包括以下重量份原料：

浙贝母15份、温郁金12份、杭白菊12份、白术12份、白芍12份、延胡索12份、玄参9份、杭麦冬9份。

4.如权利要求1-3任一所述的中药组合物在制备治疗或预防脂肪性肝病药物中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述脂肪性肝病为非酒精性脂肪性肝病。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述脂肪性肝病为非酒精性脂肪性肝炎。