CN110327451A - 治疗风寒感冒的中药组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及药物领域,特别涉及治疗风寒感冒的中药组合物及其制备方法。本发明提供的中药组合物对大鼠解热、抗炎,小鼠镇痛、止咳、祛痰方面均有明显疗效,并且与同类对比专利比较具有明显优势作用,表明本发明中药组合物对憎寒壮热,项强头痛,四肢酸痛,噤口痢疾,无汗鼻塞,咳嗽有痰等风寒感冒症状疗效显著。本发明提供的中药组合物及其制备方法弥补了市场上感冒的治疗药物针对性不强等不足,为治疗风寒感冒提供了更安全有效的方法,为药品的生产和临床应用提供了有效保障。
Description
本申请是申请日为2018.12.19、发明名称为“中药组合物的HPLC指纹图谱的构建方法及中药组合物的质量检测方法”、申请号为201811556488.0的发明的分案申请。
技术领域
本发明涉及药物领域,特别涉及治疗风寒感冒的中药组合物及其制备方法。
背景技术
感冒是一种常见的急性上呼吸道病毒性感染性疾病,以鼻塞、流涕、喷嚏、头痛、发热等为特征,四时皆有,以冬春季节为多见。病情轻者,称为伤风;重者称为重伤风或时行感冒。中医辨证可分为风寒、风热、暑湿三种类型。风寒感冒是风寒之邪外袭、肺气失宣所致。症状可见:恶寒重、发热轻、无汗、头痛身痛、鼻塞流清涕、咳嗽吐稀白痰、口不渴或渴喜热饮、苔薄白。
目前市场上治疗感冒的药物多是化学药物和抗生素,其特点为作用强疗效快,但副作用也多,且长期服用易产生耐药性或导致其他脏器损伤。现有的中药制剂对于感冒的治疗也往往只留于清热解表,治疗作用缓慢单一。
发明内容
有鉴于此,本发明提供一种治疗风寒感冒的中药组合物及其制备方法。该中药组合物对大鼠解热、抗炎,小鼠镇痛、止咳、祛痰方面均有明显疗效。
为了实现上述发明目的,本发明提供以下技术方案:
本发明提供了一种中药组合物,有效成分由如下组分制成:
在本发明的一些具体实施方案中,所述中药组合物的有效成分由如下组分制成:
或
或
或
本发明还提供了所述的中药组合物的制备方法,包括如下步骤:
步骤1:取配方量的薄荷、生姜,加6~12倍(w/w)量水,浸泡,蒸馏提取,收集挥发油,用等量(v/v)乙醇溶解,制得挥发油醇溶液;收集蒸馏后的水溶液和药渣,备用;
步骤2:取4~10倍(w/w)挥发油量的β-环糊精制成饱和水溶液,与步骤1制得的所述挥发油醇溶液混合,搅拌,-4℃~-2℃过夜,滤过,收集滤渣晾干,制得包合物;
步骤3:取步骤1制得的药渣与配方量的剩余组分混合,加水煎煮,滤过,收集滤液;
步骤4:合并步骤1制得的所述蒸馏后的水溶液与步骤3制得的所述滤液,减压浓缩制得清膏;
步骤5:取步骤2制得的所述包合物与步骤4制得的所述清膏混合。
在本发明的一些具体实施方案中,所述中药组合物的制备方法步骤1中所述浸泡的时间为0.5~2小时;所述蒸馏提取的时间为4~8小时。
在本发明的一些具体实施方案中,所述中药组合物的制备方法步骤2中所述饱和水溶液的温度为45~55℃;所述搅拌的温度为45~55℃,时间为1~4小时。
在本发明的一些具体实施方案中,所述中药组合物的制备方法步骤3中所述煎煮的次数为2次,第一次水的用量为8~12倍量,第二次水的用量为6~10倍量,每次煎煮1~3小时,所述煎煮的温度为80~100℃。
在本发明的一些具体实施方案中,所述中药组合物的制备方法步骤4中所述减压浓缩为于70℃减压浓缩至相对密度为1.10~1.15的清膏。
本发明还提供了所述的制备方法制得的中药组合物。
本发明还提供了所述的中药组合物在制备治疗风寒感冒的药物中的应用。
本发明还提供了治疗风寒感冒的药物,其特征在于,包括所述的中药组合物。
本发明提供了一种治疗风寒感冒的中药组合物及其制备方法,本发明提供的中药组合物对大鼠解热、抗炎,小鼠镇痛、止咳、祛痰方面均有明显疗效,并且与同类对比专利比较具有明显优势作用,表明本发明中药组合物对憎寒壮热,项强头痛,四肢酸痛,噤口痢疾,无汗鼻塞,咳嗽有痰等风寒感冒症状疗效显著。本发明提供的中药组合物及其制备方法弥补了市场上感冒的治疗药物针对性不强等不足,为治疗风寒感冒提供了更安全有效的方法,为药品的生产和临床应用提供了有效保障。
具体实施方式
本发明公开了一种治疗风寒感冒的中药组合物及其制备方法,本领域技术人员可以借鉴本文内容,适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是,所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的,它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述,相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合,来实现和应用本发明技术。
本发明提供了一种治疗风寒感冒的中药组合物及其制备方法,该组合物包括党参10-50重量份、茯苓20-50重量份、甘草10-25重量份、枳壳20-50重量份、桔梗20-50重量份、羌活20-50重量份、独活20-50重量份、川芎20-50重量份、柴胡20-50重量份、前胡20-50重量份、生姜20-50重量份、薄荷20-50重量份。
制备方法:
⑴取薄荷、生姜,加6~12倍量水,浸泡0.5~2小时,用水蒸汽蒸馏提取挥发油4~8小时,收集挥发油,用等量乙醇溶解,备用;
⑵称取4~10倍挥发油量的β-环糊精制成45~55℃的饱和水溶液,边搅拌边加入挥发油,并在45~55℃保温下连续搅拌1~4小时,-4℃冷藏过夜,滤过,晾干,得包合物,备用;
⑶蒸馏后的水溶液另器收集,备用;药渣与党参等十味,加水煎煮二次,第一次8~12倍量,第二次6~10倍量,每次1~3小时,滤过;
⑷合并滤液与上述水溶液,减压浓缩至相对密度为1.10~1.15(70℃)的清膏;
⑸并β-环糊精包合物与上述清膏加辅料制粒,即得。
在本发明的一些具体实施方案中,治疗风寒感冒的中药组合物的最佳制备方法如下:
⑴取薄荷、生姜,加10倍量水,浸泡1小时,用水蒸汽蒸馏提取挥发油6小时,收集挥发油,用等量乙醇溶解,备用;
⑵称取8倍挥发油量的β-环糊精制成50℃的饱和水溶液,边搅拌边加入挥发油,并在50℃保温下连续搅拌3小时,-4℃冷藏过夜,滤过,晾干,得包合物,备用;
⑶蒸馏后的水溶液另器收集,备用;药渣与党参等十味,加水煎煮二次,第一次10倍量,第二次8倍量,每次1.5小时,滤过;
⑷合并滤液与上述水溶液,减压浓缩至相对密度为1.10~1.15(70℃)的清膏;
⑸合并β-环糊精包合物与上述清膏加辅料制粒,即得。
与现有技术相比,本发明的有益效果如下:
⑴弥补了化学类感冒药和抗生素副作用大,易产生耐药性的不足,
⑵弥补了市场上感冒的治疗药物只留于清热解表,治疗作用缓慢单一针对性不强等不足。
⑶为治疗风寒感冒提供了更安全有效的方法,为药品的生产和临床应用提供了有效保障。
本发明提供的治疗风寒感冒的中药组合物及其制备方法中所用原料及试剂均可由市场购得
下面结合实施例,进一步阐述本发明:
实施例1
取党参10重量份、茯苓20重量份、甘草10重量份、枳壳20重量份、桔梗20重量份、羌活20重量份、独活20重量份、川芎20重量份、柴胡20重量份、前胡20重量份、生姜20重量份、薄荷20重量份。
制备方法:
⑴取薄荷、生姜,加6倍量水,浸泡0.5小时,用水蒸汽蒸馏提取挥发油5小时,收集挥发油,用等量乙醇溶解,备用;
⑵称取6倍挥发油量的β-环糊精制成45℃的饱和水溶液,边搅拌边加入挥发油,并在45℃保温下连续搅拌2小时,-2℃冷藏过夜,滤过,晾干,得包合物,备用;
⑶蒸馏后的水溶液另器收集,备用;药渣与党参等十味,加水煎煮二次,第一次8倍量,第二次6倍量,每次1小时,煎煮的温度为80℃,滤过;
⑷合并滤液与上述水溶液,减压浓缩至相对密度为1.10~1.15(70℃)的清膏;
⑸合并β-环糊精包合物与上述清膏加辅料制粒,即得。
实施例2
取党参35重量份、茯苓35重量份、甘草15重量份、枳壳35重量份、桔梗35重量份、羌活35重量份、独活35重量份、川芎35重量份、柴胡35重量份、前胡35重量份、生姜35重量份、薄荷35重量份。
制备方法:
⑴取薄荷、生姜,加8倍量水,浸泡1小时,用水蒸汽蒸馏提取挥发油6小时,收集挥发油,用等量乙醇溶解,备用;
⑵称取8倍挥发油量的β-环糊精制成45℃的饱和水溶液,边搅拌边加入挥发油,并在45℃保温下连续搅拌2小时,-4℃冷藏过夜,滤过,晾干,得包合物,备用;
⑶蒸馏后的水溶液另器收集,备用;药渣与党参等十味,加水煎煮二次,第一次10倍量,第二次8倍量,每次2小时,煎煮的温度为90℃,滤过;
⑷合并滤液与上述水溶液,减压浓缩至相对密度为1.10~1.15(70℃)的清膏;
⑸合并β-环糊精包合物与上述清膏加辅料制粒,即得。
实施例3
取党参50重量份、茯苓50重量份、甘草25重量份、枳壳50重量份、桔梗50重量份、羌活50重量份、独活50重量份、川芎50重量份、柴胡50重量份、前胡50重量份、生姜50重量份、薄荷50重量份。
制备方法:
⑴取薄荷、生姜,加10倍量水,浸泡1小时,用水蒸汽蒸馏提取挥发油6小时,收集挥发油,用等量乙醇溶解,备用;
⑵称取8倍挥发油量的β-环糊精制成50℃的饱和水溶液,边搅拌边加入挥发油,并在45℃保温下连续搅拌3小时,-4℃冷藏过夜,滤过,晾干,得包合物,备用;
⑶蒸馏后的水溶液另器收集,备用;药渣与党参等十味,加水煎煮二次,第一次10倍量,第二次8倍量,每次1.5小时,煎煮的温度为100℃,滤过;
⑷合并滤液与上述水溶液,减压浓缩至相对密度为1.10~1.15(70℃)的清膏;
⑸合并β-环糊精包合物与上述清膏加辅料制粒,即得。
实施例4
取党参45重量份、茯苓45重量份、甘草20重量份、枳壳45重量份、桔梗45重量份、羌活45重量份、独活45重量份、川芎45重量份、柴胡45重量份、前胡45重量份、生姜45重量份、薄荷45重量份。
⑴取薄荷、生姜,加12倍量水,浸泡2小时,用水蒸汽蒸馏提取挥发油8小时,收集挥发油,用等量乙醇溶解,备用;
⑵称取10倍挥发油量的β-环糊精制成55℃的饱和水溶液,边搅拌边加入挥发油,并在55℃保温下连续搅拌4小时,-4℃冷藏过夜,滤过,晾干,得包合物,备用;
⑶蒸馏后的水溶液另器收集,备用;药渣与党参等十味,加水煎煮二次,第一次12倍量,第二次10倍量,每次3小时,煎煮的温度为100℃,滤过;
⑷合并滤液与上述水溶液,减压浓缩至相对密度为1.10~1.15(70℃)的清膏;
⑸合并β-环糊精包合物与上述清膏加辅料制粒,即得。
实施例5挥发油提取工艺
(1)挥发油提取加水量
以得油量为指标,加水量没过药材为基准,考察不同倍数的水量,测试挥发油提取的加水量,以与药材量相等的水量为对照组1,以20倍加水量为对照组2。
表1
实验结果表明:加水量为10倍量时,出油量最大且与对照组比较有显著性差异(*P<0.05),因此选择加水10倍量为生姜、薄荷两味药材的最佳浸泡加水量。
(2)挥发油提取时间
以得油量为指标,考察不同提取时间,分别设提取时间5小时为对照组1,提取时间15小时为对照组2。
表2
实验结果表明,提取时间为6小时时,出油量最大,与对照组比较有显著性差异(*P<0.05),并且当提取时间超过6小时,油量不在增加。因此选择提取6小时为生姜、薄荷两味药材的最佳提取时间。
2.挥发油β-CD包合工艺
为了尽可能地保留挥发性成分,以保证临床疗效,采用β-CD包合挥发性成分,采用水饱和法,以挥发油包合率,包得率综合评价对方法参数进行考察。
(1)包合转数考察试验
称取β-CD至于锥形瓶中,每份6g,加10倍水,加热溶解,冷却后置于磁力搅拌器上,精密量取挥发油1ml(挥发油预先用等量乙醇溶解),50℃搅拌3小时转数分别为10、20、30、40、50、60、70、100r/min,冷却,2~10℃冷藏过夜,抽滤,晾干。
以挥发油包合率,包得率综合评价为指标,对包合转数进行考察,分别设10r/min为对照组1,100r/min为对照组2。
表3
实验结果表明,当转数为50r/min的时候综合评分最高,且与对照组比较有显著性差异(*P<0.05),因此确定β-CD包合转数为50r/min。
(2)β-CD包合物料比
分别称取β-CD1、2、4、6、8、10、15、20g置于锥形瓶中,加10倍水,加热溶解,冷却后置于磁力搅拌器上,精密量取挥发油1ml(挥发油预先用等量乙醇溶解),50℃搅拌3小时转数为50r/min,冷却,2~10℃冷藏过夜,抽滤,晾干。
选取挥发油与β-CD之比并以包合物收得率和包合率的综合评分作为评价指标进行考察。以挥发油-β-CD(1:1)为对照组1,以挥发油-β-CD(1:20)为对照组2。
表4
实验结果表明,当挥发油与β-CD之比为1:8时候综合评分最高,且与对照组比较有显著性差异(*P<0.05),因此确定β-CD包合物料比为挥发油:β-CD(1:8)。
(2)β-CD包合温度
称取β-CD至于锥形瓶中,每份6g,置于锥形瓶中,加10倍水,加热溶解,冷却后置于磁力搅拌器上,精密量取挥发油1ml(挥发油预先用等量乙醇溶解),分别于20、30、40、50、60、70℃搅拌3小时转数为50r/min,冷却,2~10℃冷藏过夜,抽滤,晾干。
选取挥发油与β-CD之比并以包合物收得率和包合率的综合评分作为评价指标进行考察。以20℃为对照组1,以70℃为对照组2。
表5
实验结果表明,β-CD包合温度为50℃时候综合评分最高,且与对照组比较有显著性差异(*P<0.05),因此确定β-CD包合温度为50℃。
(2)β-CD包合时间
称取β-CD至于锥形瓶中,每份6g,置于锥形瓶中,加10倍水,加热溶解,冷却后置于磁力搅拌器上,精密量取挥发油1ml(挥发油预先用等量乙醇溶解),于50℃搅拌0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5小时转数为50r/min,冷却,2~10℃冷藏过夜,抽滤,晾干。
选取挥发油与β-CD之比并以包合物收得率和包合率的综合评分作为评价指标进行考察。以搅拌1小时为对照组1,以搅拌5小时为对照组2。
表6
实验结果表明,β-CD包合时间为3小时时候综合评分最高,且与对照组比较有显著性差异(*P<0.05),因此确定β-CD包合时间为3小时。
实施例6
水提工艺考察
⑴提取次数考察
以浸膏得率和柚皮苷量为考察指标,提取5次为对照组。
表7
实验结果表明,水提取次数为2次时出膏率及柚皮苷的含量最高,且与对照组比较有显著性差异(*P<0.05),因此确定水提取的次数为2次。
⑵第一次加水量考察
以浸膏得率和柚皮苷量为考察指标,加水量1倍量为对照组1,以加水量20倍为对照组2。
表8
实验结果表明,水提取第一次加水量为10倍量时出膏率及柚皮苷的含量最高,且与对照组比较有显著性差异(*P<0.05),因此确定水提取第一次加水量为10倍量。
⑵第二次加水量考察
以浸膏得率和柚皮苷量为考察指标,加水量4倍量为对照组1,以加水量14倍为对照组2。
表9
实验结果表明,水提取第二次加水量为8倍量时出膏率及柚皮苷的含量最高,且与对照组比较有显著性差异(*P<0.05),因此确定水提取第二次加水量为8倍量。
⑶水提取时间
以浸膏得率和柚皮苷量为考察指标,提取0.5小时为对照组1,以提取5小时为对照组2。
表10
实验结果表明,水提取时间为1.5小时时出膏率及柚皮苷的含量最高,且与对照组比较有显著性差异(*P<0.05),因此确定水提取时间为1.5小时。
对比例1
药材重量组分为:羌活(去苗)30g、独活(去苗)30g、柴胡(去苗)30g、川芎30g、桔梗30g、枳壳(去瓤,麸炒)30g、前胡(去苗,洗净)30g、茯苓(去皮)30g、人参(去芦)30g、薄荷30g、生姜30g、甘草15g;将药材清洗干净后放入锅中并加入与药材重量比例为3~6:1的水浸泡2~6小时,然后开火进行煎制,直到药剂中液体与药渣的比例为0.5~1:1,将药渣过滤后倒出中药制剂,待药剂温度适宜服用时将药剂服下。以三天为期,一日两服服用。
对比例2
取党参25克、羌活8克独活8克、柴胡12克、紫菀9克、前胡11克、川芎10克、枳壳10克、桔梗6克、茯苓12克、桑白皮5克、甘草8克、薄荷4克、生姜5克,先将方中药材(羌活、薄荷另外粉碎)合拢粉碎成粗末,再将洁净井水100克烧沸放入冰糖10克。待冰糖全部融化液沸。再将方中党参、甘草、柴胡、前胡、紫菀、独活、川芎、茯苓、枳壳、桑白皮、桔便、生姜粗末放入锅内片刻,然后待液沸后再放羌活、薄荷二药片刻即可息火待凉。冷后过滤装瓶密封即得糖浆。
对比例3
取羌活200g、独活200g、川芎200g、柴胡200g、柴胡200g、薄荷100g、生姜200g,加6倍量水,浸泡1小时,用水蒸汽蒸馏提取挥发油6小时,收集挥发油,备用;称取8倍挥发油量的β-环糊精制成50℃的水饱和溶液,边搅拌边加入挥发油,并在50℃保温下连续搅拌3小时,冷藏过夜,滤过,晾干,粉碎成细粉,得包合物,备用。蒸馏后的水溶液另器收集,备用;取前胡药材200g加入60%乙醇提取两次,第一次10倍量水,第二次8倍量水,每次1.5小时,每次1小时,滤过,备用;取枳壳200g,桔梗200g,党参200g,甘草100g,加水煎煮二次,第一次10倍量水,第二次8倍量,每次1.5小时,滤过,合并滤液与上述水溶液,70℃以下减压干燥,粉碎,与β-环糊精包合物混合,制粒,低温干燥,备用。
对比例4
取羌活200g、独活200g、川芎200g、柴胡200g、柴胡200g、薄荷100g、生姜200g,加6倍量水,浸泡1小时,用水蒸汽蒸馏提取挥发油6小时,收集挥发油,备用;称取8倍挥发油量的β-环糊精制成50℃的水饱和溶液,加入挥发油,并在50℃保温下连续搅拌3小时,冷藏过夜,滤过,晾干,粉碎成细粉,得包合物,备用。蒸馏后的水溶液另器收集,备用;取前胡200g、枳壳200g、桔梗200g、党参200g、甘草100g,加水煎煮二次,第一次10倍量水,第二次8倍量,每次1.5小时,滤过,合并滤液与上述水溶液,70℃以下减压干燥,粉碎,与β-环糊精包合物混合,制粒,晾干,备用。
对比例5
取薄荷100g、生姜200g、柴胡200g、前胡200g、川芎200g、枳壳200g、羌活200g、独活200g、茯苓200g、桔梗200g、党参200g、甘草100g;取薄荷、生姜,加等药材量的水,浸泡1小时,用水蒸汽蒸馏提取挥发油15小时,收集挥发油,用等量乙醇溶解,备用;称取20倍挥发油量的β-环糊精制成20℃的饱和水溶液,边搅拌边加入挥发油,并在20℃保温下连续搅拌5小时,冷藏过夜,滤过,晾干,得包合物,备用;蒸馏后的水溶液另器收集,备用;药渣与党参等十味,加水煎煮二次,第一次20倍量,第二次4倍量,每次5小时,滤过;合并滤液与上述水溶液,减压浓缩至相对密度为1.10~1.15(70℃)的清膏;合并β-环糊精包合物与上述清膏加辅料制粒,即得。
对比例6
败毒散:取党参100g、甘草50g、独活100g、桔梗100g、茯苓100g、川芎100g、柴胡100g、枳壳100g、羌活100g、前胡100g,加入生姜、薄荷少许,煎煮1小时,过滤、浓缩,即得。
效果例
为了进一步评价该中药组合物的疗效及其安全性,申请人对其进行药效学试验,现将结果报告如下:
1实验材料
1.1实验药物
本发明中药组合物实施例样1、2、3、4组(简写实施例1-4组):按本发明实施例1-4制备方法制备样品。人拟日服用量为18g/日,大鼠剂量日服用量为6.48g生药/kg;小鼠剂量为11.7g生药/kg。
败毒散剂组:按散剂制备方法煎煮成汤剂备用,根据用法大鼠日服用量为3.5g生药/kg;小鼠日服用量为7.6g生药/kg。
对比例1组:日服用量折算大鼠剂量为31g生药/kg;小鼠剂量为45g生药/kg。
对比例2组:日服用量折算大鼠剂量为12g生药/kg;小鼠剂量为18g生药/kg。
对比例3、4、5组给药剂量同败毒散剂组。
阳性对照药物:拜阿司匹林:拜耳医药保健有限公司,规格:100mg/片,批号:BJ32151;氢溴酸右美沙芬:石家庄以岭药业股份有限公司,规格:15mg/片,批号:A1611003;盐酸氨溴索分散片:烟台东诚大洋制药有限公司,规格:30mg/片,批号:1624309;布洛芬颗粒:哈药集团世一堂药厂,规格:200mg/袋,批号:1605625。
1.2实验动物
ICR小鼠,雌雄各半,6-8周龄,体重18-22g;Wistar大鼠,雌雄各半,体重130-150g,180-220g,均购自长春市亿斯实验动物技术有限责任公司。
1.3仪器
SMP500-18272-LSIO酶标仪:Manufactured in China Designed in CaliforniaUSA;LD5-2A型低速离心机:北京医用离心机厂;YLS-7A足趾容积测量仪、YLS-6B智能热板仪:山东省医学科学院设备站;JA1103N型电子天平:上海民桥精密科学仪器有限公司;T-1000电子天平:美国双杰兄弟有限公司
氯化钠注射液:吉林省都邦药业股份有限公司,批号:1511061206;医用酒精:德州德新康消毒制品有限公司,批号:150809;分装卡拉胶(角叉菜胶):Number:Q1555,SIGMA;干酵母:安琪酵母股份有限公司。
2.1解热实验
2.1.1方法
对干酵母致大鼠发热模型的解热作用:
正式实验前3d,将150只大鼠,雌雄各半,置于实验环境中模拟实验操作(包括捉拿、固定、灌胃、安放温度计)以适应实验室条件,每日测量体温(肛温)1次,连续2日,单次体温超过38.5℃或2次体温差值超过0.5℃的剔除不用。筛选出合格大鼠130只,随机分为13组,分别为空白对照组、模型对照组、阳性组(布洛芬颗粒40mg·kg-1)、败毒散剂组(3.5g生药·kg-1)、对比例1组(31g生药·kg-1)、对比例2组(12g生药·kg-1)、实施例1-4组(6.48g生药·kg-1),对比例3、4、5剂量组(6.48g生药·kg-1)。每组各10只,每日灌胃给药1次,灌胃体积10ml·kg-1,给药3d。实验前动物禁食不禁水过夜,使排空大便,造模前测量体温1次作为基础体温,每只大鼠于背部皮下注射20%干酵母悬液(10ml·kg-1)复制大鼠发热模型,空白对照组注射等量的生理盐水,然后,各组大鼠灌胃给药(10ml·kg-1),测量给药后1,2,3,4h大鼠肛温,记录体温变化△T℃。
2.1.2实验结果
模型组大鼠在造模后体温明显升高,与空白对照组比较具有统计学差异(p<0.001),各给药组在给药后4h内均能不同程度抑制大鼠体温升高变化,与模型对照组比较有统计学差异(p<0.05,p<0.01),且实施例3组与败毒散剂组及对比例3、4、5组、对比例1、2组比较具有明显优势,具有统计学差异(p<0.05),并与布洛芬颗粒组作用相当,结果见表11。
表11对各时间点大鼠体温变化的影响(n=10)
与空白对照组比较###p<0.001;与模型对照组比较*p<0.05,**p<0.01;与败毒散剂组及对比例3、4、5比较Δp<0.05;与对比例1、2组比较□p<0.05
2.2镇痛实验
2.2.1热板实验
在55±0.5℃环境下测定ICR小鼠的痛阈值,每只小鼠测量二次每次测量间隔30min,二次测量值求平均值即为小鼠的基础痛阈值,选取痛阈值在5s~30s的小鼠120只。将小鼠随机分为10组,空白对照组(灌胃等体积溶媒)、阳性对照小儿布洛芬颗粒(80mg·kg-1)、败毒散剂组(7.6g生药·kg-1)、对比例1组(45g生药·kg-1)、对比例2组(18g生药·kg-1)、实施例1-4组(11.7g生药·kg-1),对比例3、4、5剂量组(11.7g生药·kg-1),每组各10只,灌胃给药,10ml·kg-1,连续7日。末次给药后60min测舔足潜伏期,记录痛阈值,超过60s者按60s计算。
2.2.2实验结果
实施例1-4组、败毒散剂组、对比例3、4、5组,对比例2组、布洛芬颗粒组均能明显延长小鼠痛阈值,与空白对照组比较具有统计学差异(p<0.05,p<0.001),实施例3组、布洛芬颗粒组与败毒散剂及对比例3、4、5组、对比例1、2组比较,镇痛作用明显,与之比较具有统计学差异(,p<0.01),结果见表12。
表12对各组小鼠痛阈值的影响(n=10)
与空白对照组比较*p<0.05,***p<0.001;与败毒散剂组期对比例3、4、5组比较ΔΔp<0.01;与对比例1、2组比较□□p<0.01
2.3抗炎实验
2.3.1对角叉菜胶所致大鼠足趾肿胀的抗炎作用
取雄性大鼠130只,体130~150g,按体重随机分空白对照组、模型对照组(灌胃等体积溶媒)、阳性对照阿司匹林组(540mg·kg-1)、败毒散剂组(3.5g生药·kg-1)、对比例1组(31g生药·kg-1)、对比例2组(12g生药·kg-1)、实施例1-4组(6.48g生药·kg-1),对比例3、4、5剂量组(6.48g生药·kg-1),每日灌胃给药1次,灌胃体积10ml·kg-1,连续7日。给药第7日,用电子数显卡尺测量大鼠右后足趾基础厚度,末次给药30分钟后,于大鼠右后肢足趾皮下注射5%角叉菜胶溶液0.1ml/只,随后分别于给药后1、2、3、4和6h各测一次足趾厚度。用肿胀度表示结果。
肿胀度=肿胀后的足趾厚度-足趾基础厚度
2.3.2实验结果
造模后,模型组大鼠各时间点组织肿胀度明显增大,与空白对照组比较有统计学差异(p<0.001),与模型对照组比较,实施例1、2、4、败毒散剂、对比例2组、对比例3组在炎症初期发挥作用,抑制大鼠组织肿胀度增加(p<0.05,p<0.01),实施例3组及阿司匹林组在1-6h持续的抑制大鼠足趾肿胀度增大(p<0.05,p<0.01,p<0.001),且实施例3组组及阿司匹林组与败毒散剂组及对比例3、4、5组,与对比例1、2组比较,在各时间点抑制足趾肿胀度作用比较具有明显优势,具有统计学差异(p<0.05),结果见表13。
表13对各时间点大鼠肿胀度的影响(n=10)
与空白对照组比较###p<0.001;与模型对照组比较*p<0.05,**p<0.01;与败毒散剂组比较Δp<0.05;与对比例1、2组比较□p<0.05
2.4止咳实验
2.4.1方法
小鼠氨水诱咳实验ICR小鼠,雌雄各半,取小鼠逐个放入多功能诱咳引喘仪,以25%氨水喷雾引咳15s,观察小鼠从喷雾开始到出现腹肌收缩张嘴的时间,1.5min内不出现咳嗽者弃去。将合格小鼠120只随机分组,分别是模型组、氢溴酸右美沙芬组(47mg·kg-1)、败毒散剂组(7.6g生药·kg-1)、对比例1组(45g生药·kg-1)、对比例2组(18g生药·kg-1)、实施例1-4组(11.7g生药·kg-1),对比例3、4、5剂量组(11.7g生药·kg-1),每日灌胃给药1次,连续7日。末次给药后40min,将小鼠放入多功能诱咳引喘仪实验装置中,用浓度为25%氨水喷雾15s,观察。以小鼠出现咳嗽的时间为咳嗽潜伏期(从喷雾开始到小鼠出现咳嗽的时间)、咳嗽次数(记录5分钟内的咳嗽次数)为观察指标,观察止咳作用。注:(小鼠咳嗽的判断以剧烈收缩腹肌并张嘴为准,时可闻到轻微咳嗽声)。
2.4.2实验结果
各给药组可明显延长氨水刺激后的咳嗽潜伏期,并且抑制氨水刺激后5min内的咳嗽次数,与空白对照组比较有统计学差异(p<0.05,p<0.01,p<0.001),实施例3组及右美沙芬组与败毒散剂组及对比例3、4、5组、与对比例1、2组比较作用明显,具有统计学差异(p<0.05),结果见表14。
表14对小鼠咳嗽潜伏期和咳嗽次数的影响(n=10)
与空白对照组比较*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001;与败毒散剂组及对比例3、4、5组比较Δp<0.05;与对比例1、2组比较□p<0.05
2.5祛痰实验
2.5.1方法
小鼠酚红祛痰实验ICR小鼠130只,雌雄各半,体重18~22g,按照体重随机分组,分别是空白对照组、模型对照组(灌胃等体积溶媒)、阳性对照氨溴索组(70mg·kg-1)、败毒散剂组(7.6g生药·kg-1)、对比例1组(45g生药·kg-1)、对比例2组(18g生药·kg-1)、实施例1-4组(11.7g生药·kg-1),对比例3、4、5剂量组(11.7g生药·kg-1),每日灌胃给药1次,连续7日。小鼠末次给药后30min,立即腹腔注射0.5%酚红生理盐水溶液10ml·kg-1,30min后处死动物,解剖分离出气管,剥去气管周围组织,剪下自甲状软骨下至气管分支处的一段气管,放入盛有生理盐水2ml的试管中,再加入1mol·L-1氢氧化钠0.1ml,避光放置30min后取上清液,用酶标仪于波长546nm处测吸光度OD值。OD值越大表示酚红排泌量越多,提示药物的祛痰作用越强。据回归方程求出浓度(μg·ml-1)。
酚红标准曲线曲线,计算回归方程。在100ml量瓶内用5%氢氧化钠溶液精确配制浓度为1mg·ml-1的酚红母液,再稀释成0.0,0.1,0.5,1.0,
1.5,,10.0μg·ml-1溶液,于546nm处测得吸光度(A),以酚红剂量(C)为纵坐标、吸光度(A)为横坐标,制作标准回归方程。
2.5.2实验结果
模型组小鼠气管有酚红排泌,与空白对照组比较有显著差异(p<0.001),各给药均组可明显促进小鼠酚红排泌量增加,与模型对照组比较具有统计学差异(p<0.01,p<0.001),实施例3组及氨溴索组与败毒散剂组及对比例3、4、5组比较、与对比例1、2组比较促进酚红排泌量作用显著,具有统计学差异(p<0.05,p<0.01),结果见表15。
表15对小鼠酚红排泌量的影响(n=10)
与空白对照组比较*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001;与败毒散剂组及对比例3、4、5组比较Δp<0.05;与对比例1、2组比较□□p<0.01
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (10)
1.中药组合物,其特征在于,有效成分由如下组分制成:
2.如权利要求1所述的中药组合物,其特征在于,有效成分由如下组分制成:
或
或
或
3.如权利要求1或2所述的中药组合物的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤1:取配方量的薄荷、生姜,加6~12倍(w/w)量水,浸泡,蒸馏提取,收集挥发油,用等量(v/v)乙醇溶解,制得挥发油醇溶液;收集蒸馏后的水溶液和药渣,备用;
步骤2:取4~10倍(w/w)挥发油量的β-环糊精制成饱和水溶液,与步骤1制得的所述挥发油醇溶液混合,搅拌,-4℃~-2℃过夜,滤过,收集滤渣晾干,制得包合物;
步骤3:取步骤1制得的药渣与配方量的剩余组分混合,加水煎煮,滤过,收集滤液;
步骤4:合并步骤1制得的所述蒸馏后的水溶液与步骤3制得的所述滤液,减压浓缩制得清膏;
步骤5:取步骤2制得的所述包合物与步骤4制得的所述清膏混合。
4.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于,步骤1中所述浸泡的时间为0.5~2小时;所述蒸馏提取的时间为4~8小时。
5.如权利要求3或4所述的制备方法,其特征在于,步骤2中所述饱和水溶液的温度为45~55℃;所述搅拌的温度为45~55℃,时间为1~4小时。
6.如权利要求3至5任一项所述的制备方法,其特征在于,步骤3中所述煎煮的次数为2次,第一次水的用量为8~12倍量,第二次水的用量为6~10倍量,每次煎煮1~3小时,所述煎煮的温度为80~100℃。
7.如权利要求3至6任一项所述的制备方法,其特征在于,步骤4中所述减压浓缩为于70℃减压浓缩至相对密度为1.10~1.15的清膏。
8.如权利要求3至7任一项所述的制备方法制得的中药组合物。
9.如权利要求1、2或8所述的中药组合物在制备治疗风寒感冒的药物中的应用。
10.治疗风寒感冒的药物,其特征在于,包括如权利要求1、2或8所述的中药组合物。
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