CN1102858A - 一种新菌株及其除草组合物和除草方法 - Google Patents

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Abstract

本发明描述了新的Drechslera monoceras var.microsporus 菌株，这些菌株在15℃低温下亦对 各种稗草(即，Echinochloa spp.)显示除草效果而对 栽培作物如稻无影响。本发明也描述了防治稗草的 杂草防除组合物，该组合物含有至少一种作为有效成 分且具有高度安全性和选择性的微生物菌株，本发明 还描述了采用至少一种这样的的微生物菌株的稗草 防除方法。将至少一种该微生物菌株与化学除草剂 组合使用与它们单独施用相比使大大减少它们的剂 量成为可能。

Description

本发明涉及Drechslera monoceras的新变种，所述的变种对作物无致病性而对稗草显示致病性。本发明还涉及含有该变种作为有效成分的除草组合物及使用它的除草方法。
由于过度使用合成的有机农用化学品，近几年来出现了严重的问题，包括环境污染和具获得性化学品抗性的病害、害虫和杂草的出现而导致防治效果降低。现在大众媒介大量报道农用化学品对人体和自然环境的影响，再则，人们对生物防治害物的兴趣增加，因而生物杀虫剂和生物除草剂方面大量的研究和开发工作正在进行之中。无杀虫剂或无除草剂耕作方法和生物防治方法尚在调研之中。事实上，当单独施用时，它们不能提供稳定的防治效果，因而不能期待有充分的作物产量。不论使用哪种防治方法，从安全的角度来看降低合成的有机农用化学品剂量是十分有意义的。
在除草剂领域，以美国为中心，以对采用杂草的病原体的生物除草剂已进行了研究的开发工作。目前为止，投放市场的生物除草剂包括“Devine”（商标，Abbott Laboratories Ltd.产品）和“Collego”（商标，Ecogen Inc.产品）。前者使用疫霉菌（Phytophthora Palmivola，它是萝摩科杂草莫伦藤（Morrenia odorata）的病原体。后者利用毛盘孢菌（Colletotrichum gloeosprioides），它是豆科杂草弗吉尼亚田皂角（Aeschynomene Virginica）的病原体。就本发明者所知，还没有生物除虫剂被实际用来防治稗草（Echinochloa spp）。稗草是重要作物如小麦，稻和大豆栽培中难以防治的杂草。
众所周知，稗草的野生种是全世界稻区的杂草。稗草作为典型低地杂草一直是个难题，特别是在日本。据说稗草在稻田的出现曾导致需要移栽稻秧。据Yabuno[“Zasso Kenkyu（杂草研究），Japan”20（1975）]报道，全世界野生的稗草包括Echinochloa oryzicola、Echinochloa colona、Echinochloa pyramidalis、Echinochloa stagnina、Echinochloa haplocloda和Echinochloa crus-galli，且crus-galli种分三个变种，即，Echinochloa crus-galli var. formosensis、Echinochloa Crus-galli Var. Crus-galli、Echinochloa crus-galli var. praticola.在这些变种中观察到对除草剂和病原体有不同的反应。自然生长的作为杂草的稗草被认为包括这些种类稗草的杂交体。作为对稗草具有防治效果的除草剂，人们希望它对各种稗草具有除草效果，即使不能显示出对各种稗草具有除草效果，也希望它对至少实际上难以防除的某些稗草种类具有宽的除草谱。
当环境温度超过10℃时，稗属杂草便萌发并开始生长。为获得更有效的防治，优选在稗属杂草萌发的同时施用除草剂。例如，在日本低地这段时期是从五月至六月，此间水温上升至10-15℃左右，是杂草防除的时机。
因此，对上述各种稗草具有宽的除草谱以及甚至在低达约15℃的温度下仍带来好效果的稗草防除剂是优选的。
已报道的从各种稗草收集的Drechslera monoceras sp.菌株包括ATCC-24641[美国典型培养物保藏中心（ATCC）ATCC目录第144页]以及IFO-9619和IFO-9800[OSAKA发酵研究所（IFO）培养物目录第177页]。如下文中将要描述的，这些菌株对稗属不显示任何除草活性，且根据本发明，它们的酯酶酶谱不同于新变种的。
此外，作为对稗属能显示致病性的Drechslera monoceras sp.，欧洲专利申请EP 0464410 A2和0374499 A1公开了11种菌株，包括MH-9011（Frem BP-3416）为25℃最有效的菌株。这些菌株如下文中将要描述的，与根据本发明的新变种在酯酶酶谱上也是不同的，并且在稗属的萌发温度，即15℃左右，不表现出实际除草活性。
为采用除草剂获取对稗属更有效的防除。强烈要求提供一种在低达15℃左右温度具有有效防治稗属效果的微生物。
除了稗草外，许多杂草在低地和高地与作物竞争性地生长。实际中对这些杂草的防除也是必要的。为同时防除这些多种杂草，通常的作法是组合使用几种类型的化学除草剂。然而，大量使用各种化学除草剂并不好，如上文所述，它将导致具有获得性除草剂抗性的杂草和昆虫出现，并且还形成环境污染。
本发明完成了克服现有技术中上述问题的目的。本发明的目的是提供杂草防除剂和杂草防除组合物，它能避免环境污染和抗性杂草的出现，而且能有效地防除杂草。换句话说，本发明的目的是从自然中分离Drechslera monoceras sp.菌株，该菌株只对稗草显示致病性，甚至在15℃或更低温时亦如此，并感染各种稗草从而防除它们;然后提供含有活的真菌细胞作为有效成分的杂草防除组合物。
本发明的另一个目的是，采用化学除草剂与Drechslera monoceras sp.的新变种组合来减少化学除草剂的施用量，从而提供更安全和有效的实用杂草防治组合物。所述新变种能只对稗草显示致病性且甚至在15℃和更低时也能引起感染。
本发明的再一个目的是提供杂草防治方法，该方法是使用上述Drechslera monoceras sp.新变种，且可与可不与化学除草剂组合。
根据本发明的真菌分类学上分入Drechslera monoceras sp.但它是完全不同于迄今已知的Drechslera monoceras sp.的一种变种本申请中，将常规的monoceras sp.称为“Drechslera monoceras Var. monoceras”，而根据本发明的新变种称为“Drechslera monoceras Var. microsporus”，以便它们能相互区别。
现已发现，根据本发明的新变种对各种稗草（所说各种稗草是作为杂草的稗草）甚至在15℃和更低温度下都具有致病性，且对稗草在包括在日本移栽稻秧时期在内的期限内显示实用的除草效果。业已证实，该新变种对栽培植物包括稻株具有极高的安全性。根据本发明的变种是从天然微生物中采集的，完全没有环境污染的潜在可能，而环境污染是使用合成的有机农用化学品目前人们所关注的问题，因此说，该变种是安全的。
此外，根据本发明的包含Drechslera monoceras sp.和化学除草剂的混合物，以低剂量组合时，可显示充分的防除效果，该效果是新变种或化学除草剂以同样剂量水平施用时所不能获得的，这使得减少两种除草剂的剂量成为可能。而且，由于Drechslera monoceras sp.与化学除草剂混合所获得的增效作用使减少该Drechslera monoceras sp.变种的分生孢子量成为可能，从而减低生产成本。
由上文可以理解，所有与本发明有关的新微生物、杂草防除剂和杂草防除组合物不仅有助于作物生长，而且有助于避免近年来成为问题的环境污染和获得性化学品抗性杂草的出现。
图1显示了根据本发明的新变种形成的酯酶酶谱谱型;
图2显示了Drechslera monoceras sp.的常规菌株形成的酯酶酶谱谱型。
为防除稗草-一种低地和高地上难以防除的杂草，本发明者调查了各种病原体，结果，本发明者发现了Drechslera monoceras sp.的新菌株，它甚至在15℃和更低温度下也显示杀稗草的效果，但对经济作物包括稻作物没有致病性。调查结果发明，这些菌株明显区别于Drechslera monoceras sp.的常规菌株，为新变种，从而完成了本发明。为区别根据本发明的新变种的常规菌株，如上所述，下文中将它们分别称作“Drechslera monoceras var. microsporus”菌株和“Drechslera monoceras var. monoceras”菌株。
还发现使用Drechslera monoceras sp.的新变种（所述新变种对稗草有选择致病性），与常规化学除草剂组合，可带来显著增效作用，且化学除草剂仅以其通常文献记载或标签标示剂量的十分之一至百分之一的剂量施用仍可获得对稗草的充分防治效果。
本发明的靶标杂草-稗草属于稗属（Echinochloa.），稗属属于禾本目。具体地说，它包括下列种类：Echinochloa oryzicola、Echinochloa crus-galli var. formosensis、Echinochloa crus-galli var. crus-galli、Echinochloa crus-galli var. praticola、Echinochloa colona、Echinochloa pyramidalis、Echinochloa stagnina和Echinochloa haploclada。
根据本发明的新微生物是Drechslera monoceras的新变种，即Drechslera monoceras var. microsporus，它对栽培作物如稻、大麦、小麦、黑麦、野燕麦、玉米、高粱和谷子，以及牧草如鸭茅、多花黑麦草、黑麦草、Sweet barnal grass、地羊茅和草地羊茅无致病性，而对Echinochloa oryzicola、稗（Echinochloa crus-galli）、光头稗（Echinochloa colonum）等有致病性。
从自然感染的稗草样品中以纯品形式分离出新变种，测试它对稗草和稻的致病性。根据测试结果，筛选出对所有稗属种类（稗草杂草）具有强的致病性，而对稻不显示致病性的新变种。如此筛选出的微生物，根据M. B. Ellis建立的常规分类方法（分析其基因和分析其酯酶酶谱类型）以分生孢子的形态特征为基础，进行鉴定。这些分析将Drechslera monoceras sp.的新变种即Drechslera monoceras var. microsporus与通常已知的Drechslera monoceras sp.菌株即Drechslera monoceras var. monoceras菌株区别开来。
根据本发明的新变种的菌株可单独使用或作为有效成分在杂草防除剂中组合使用。本发明的新变种可作为杂草防除剂以各种方式使用。由培养一种新变种菌株获得的活真菌细胞可直接使用，即是，如它们本身的情形。也可以使用细胞培养后获得的滤液。另外，也可以使用活真菌细胞和滤液两者的混合物。此外，本发明的各个新变种也可以单独使用或与一种或多种其它农用化学品如除草剂、杀菌剂和杀虫剂组合在一起使用。上述化学品不显示出与微生物的竞争性。单独使用时，将在营养培养基上培养得到的分生孢子和菌丝悬浮在含有表面活性剂等的水溶液中。当根据本发明的变种作为杂草防除剂使用时，分生孢子比菌丝具有更高的耐久性而更为所需。虽然根据本发明的新变种的细胞繁殖采用液体培养基或固体培养基都可行，但分生孢子可通过将细胞接种在液体培养基（如马铃薯-葡萄糖培养基）中使细胞繁殖，破裂如此获得的细胞，然后干燥所破裂过的细胞而形成。在固体培养基的情况下，分生孢子的形成可由将细胞接种到马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基等等上，去除生长的气生菌丝，然后干燥如此获得的细胞所促进。
根据本发明的新变种可大量生产细胞诸如如上所述的分生孢子和/或菌丝，从而它能作为杂草防除剂大量使用。再则，这些杂草防除剂-当施用时，例如在移栽稻秧到稻田时，显示出只对杂草稗草有除草效果，而对栽培作物如稻、大麦、小麦、黑麦、野燕麦、玉米、高梁和谷子或牧草如鸭茅、多花黑麦草、黑麦草、Sweet barnal grass、地羊茅和草地羊毛没有致病性。因此该杂草防除剂提供选择性除草效果。
根据本发明的新变种的代表性菌株包括，例如，Drechslera sp.MH-111010、MH-121024、MH-121025 MH-122124、MH-122754 MH-122755和MH-122756菌株。按照布达佩斯条约下，这些菌株已于下列保藏日以下列保藏号在The National Institute of Bioscience and Human-Technology of the Agency of Industrial Science and Technology（前者从1993年元月1日起更名为发酵研究所（The Fermentation Research Institute）），1-3，Higashi 1-chome，Tsukuba-shi，Ibaraki-ken 305，Japan保藏。
Figure 941052532_IMG1
根据本发明的新变种最具区别的特征是它分别地显示出图1中的酯酶酶谱类型，和能观察到菌丝甚至在温度低于15℃（例如10℃左右）时生长。因此，分类在Drechslera monoceras中的菌株和具有这些特征的菌株都包括在本发明中。
根据本发明的新变种绝对不受某种化学除草剂的影响（如抑制菌丝生长和孢子萌发）。它们组合使用可带来对稗草防除效果的实质性改善。
对各种除草剂进一步研究的结果表明，包含至少一种根据本发明的Drechslera monoceras var. microsporus菌株和至少一种化学除草剂的杂草防除组合物使得在化学除草剂以其本身使用不能提供有效防除的剂量时使用该组合物防除稗草成为可能。常规化学除草剂的例子包括恶草酮、二甲丙乙净、西草净、甲氧除草醚、哌草丹、氟乐灵、萘丙胺、快杀稗、苄草唑、吡唑特、丁草胺、丙草胺、杀草丹、苯噻草胺、草达灭、草枯醚敌草腈、2甲4氯、扑草净、吡草酮、敌稗、NSK-850、稗草胺、clomeprop、esprocarb、甲羧除草醚、二氯喹啉酸、溴丁酰草胺、苄嘧黄隆、吡嘧黄隆、和2，4-D。
至于根据本发明的各杂草防除组合物的作用机理，化学除草剂的吸收和转移显得可以通过因感染Drechslera菌株而在植物组织上形成的侵入瘢痕促进，而Drechslera菌株也容易感染被化学除草剂损害的植物组织。由于该Drechslera菌株和化学除草剂的这种增效作用而减少的化学除草剂剂量可以改善现今的各种问题如环境污染的抗性杂草出现，并且可以不仅对农业生产者而且对普通消费者大为有益。
作为除草剂，根据本发明的各种杂草防除组合物中，Drechslera spp.新变种的细胞可以它们本身，与以非稀释形式的化学除草剂一起使用，而且一般希望将Drechslera spp.的新变种细胞和非稀释的化学除草剂与惰性固体或液体载体混合，然后将所得混合物制成本行业常用的制剂形式，如颗粒剂、悬浮剂、可湿性粉剂、乳液或液剂。
任何载体都可使用，不论它们是固体或液体，只要它们是农业上和园艺上的农药常用的和生物学上惰性的即可。不限于任何特定的载体。
固体载体的例子包括矿石粉诸如陶土、滑石、膨润土、沸石、碳酸钙、硅藻土和白炭（White carbon）;植物面粉如玉米面和淀粉;和高分子化合物如聚乙烯醇的聚亚烷基二醇。另一方面，典型的液体载体包括各种有机溶剂如癸烷和十二烷，植物油，矿物油和水。
根据本发明的各杂草防除组合物中的Drechslera spp.变种的含量，就孢子而言，为每克102-1015个孢子，优选为每克106-1012个孢子。
根据本发明的各杂草防除组合物中的化学除草剂的含量取决于制剂形式。通常颗粒剂中可以含0.05-50wt%，悬浮剂中可以含1-50wt%，可温性粉剂中可以含1-90wt%。优选的含量是：颗粒剂中，0.5-20wt%;悬浮剂中，10-30wt%;可湿性粉剂中10-50wt%，另一方面，Drechslera spp.变种的含量，就孢子而言，为组合物中每克有效成分102-1015个孢子，优选106-1012个孢子。
通常在农业和园艺用化学品中用作辅助剂的表面活性剂、粘合剂、稳定剂等等可以单独使用或需要时组合使用，作为稳定剂可以使用例如抗氧化剂和/或PH调节剂。在某些情况下中也可以使用光稳定剂。
这些辅助剂的总含量可以是0wt%至80wt%，载体的含量是从100wt%减去有效成分和辅助剂含量后的值。
当根据本发明的杂草防除剂和防除组合物施用于大田时，它们的剂量，以Drechslera spp变种的分生孢子量而言，为每10公亩（1000m2）102-1015个孢子，优选106-1012个孢子。
根据本发明的杂草防除组合物含有一种或多种与一种或多种下述化学除草剂组合的所述新变种，即.Drechslera spp.新变种的菌株，这些杂草防除组合物可以以与农用化学品如杀菌剂、杀虫剂和生长调节剂、化肥、土壤改良剂等等的混合物形式使用。所述农用化学品对Drechslera spp.无杀菌活性，它们的组合施用没有问题。
可以混合的化学除草剂的例子包括：2，4-二氯苯氧乙酸（2，4-D）、2-甲基-4-氯苯氧乙酸（2甲4氯）、2，4，5-三-氯苯氧乙酸（2，4，5-T）、2-（2，4-二氯苯氧）丙酸（2，4-滴丙酸）、2-（2-甲基-4-氯代苯氧）丙酸（2甲4氯丙酸）、2-（2，4，5-三氯苯氧）丙酸（2，4，5-涕丙酸）、4-（2，4-二氯苯氧）丁酸（2，4-DB）、4-（2-甲基-4-氯苯氧）丁酸（2甲4氯丁酸）、2-（2-萘氧）丙酰苯胺（naproanilide）、2-（1-萘氧）N，N-二乙基丙酰胺（草萘胺）、（+）-2-[4-（2，4-二氯苯氧）苯氧]丙酸甲酯（禾草灵）、2-[4-（5-三氟甲基-2-吡啶基氧代）苯氧基]丙酸丁酯（吡氟丁禾灵）、2-[4-（3-氯-5-三氟甲基-2-吡啶基氧代）苯氧]丙酸甲酯（吡氟氯禾灵）、2-[4-（3，5-二氯-2-吡啶基氧代）苯氧]丙酸-2-丙炔酯（炔禾灵）、2-[4-（6-氯-2-喹喔啉基氧代）苯氧]丙酸乙酯（喹禾灵）、2-[4-（6-氯-2-苯并噁唑）苯氧]丙酸乙酯（噁唑禾草灵）、2-[4-（6-氯代-2-苯并噻唑基氧代）苯氧]丙酸乙酯（噻唑禾草灵）、2，3，6-三氯苯甲酸（草芽平）、3，6-二氯-2-二甲氧苯甲酸（麦草畏）、2，5-二氯-3-氨基甲酸（草灭平）、3，5，6-三氯-2-甲氧苯甲酸（杀草畏）、4-氯-2，2-二甲基戊酰苯受（庚草利）、3，4-二氯丙酰苯胺（敌稗）、3，4-二氯-2-甲基丙烯酰苯胺（土快尔）、3，4-二氯环丙烷羧酰胺（环丙草胺）、3，4-二氯-2-甲基-戊酰苯胺（草克尔）、3-氯-2，4-二甲基戊酰葳胺（solan）、N-（1，1-二甲基丙炔基）-3，5-二氯苯甲酰胺（戊炔草胺）、N，N-二甲基-2，2-二苯基乙酰胺（双苯酰草胺）、N-萘基酞氨酸（萘草胺）、N-（1，1-二甲基苄基）-2-溴-叔丁基乙酰胺（溴丁酰草胺）、2-苯并噻唑-2-基氧代-N-甲乙酰替苯胺（苯噻草胺）、N-[3-（1-乙基-1-甲丙基）5-异噁唑基]-2，6-二甲氧苯甲酰胺（benzamizole）、1，1-二甲基-3-苯基脲（非草隆）、3-（4-氯苯基）-1，1-二甲异脲（灭草隆）、3-（4-氯苯基）-2，1，1-三甲基异脲（三甲异脲）、3-（4-氯苯基）-1-甲氧基-1-甲基脲（绿谷隆）、3-（4-氯苯基）-1-甲基-1-（1-甲基丙炔-2-基）脲（插土隆）、3-（4-溴苯基）-1-甲氧基-1-甲基脲（秀谷隆）、1-（2-甲基环己基）-3-苯基脲（环草隆）、1，1-二甲基-3-（3-三氟甲基苯基）脲（伏草隆）、3-（3，4-二氯苯基）-1，1-二甲基脲（敌草隆）、3-（3，4-二氯苯基）-1-甲氧基-1-甲基脲（利谷隆）、3-（3，4-二氯苯基）1-正丁基-1-甲基脲（草不隆）、3-（3-氯-4-甲氧苯基）-1，1-二甲基脲（甲氧隆）、3-（4-溴-3-氯苯基）-1-甲氧基-1-甲基脲（绿秀隆）、1-（4-二氟氯甲巯基-3-氯苯基）-3，3-二甲基脲（fluothiuron）、3-（3-氯-4-甲基苯基）-1，1-二甲基脲（绿麦隆）、3[4-（4-氯苯氧）苯基]-1，1-二甲基脲（枯草隆）、3-[4-（4-甲氧苯氧）苯基]-1，1-二甲基脲（枯莠隆）、3-[3-（N-叔丁基甲氨酰氧）苯基]-1，1-二甲基脲（隆草特）、3-苯甲酰-3-（3，4-二氯苯基）-1，1-二甲基脲（苯酰敌草隆）、1-（α，α-二甲基苄基）-3-（4-甲基苯基）脲（杀草隆）、3-（4-异丙基苯基）-1，1-二甲基脲（异丙隆）、3-（2-苯并噻唑基）-1，3-二甲基脲（甲基苯噻隆）、3-（2-苯并噻唑基）-1-甲基脲（苯噻隆）、3-（六氢-4，7-甲撑茚-5-基）-1，1-二甲基脲（草完隆）、3-环辛基-1，1-二甲基脲（环莠隆）、1，3-二甲基-3-（5-三氟甲基-1，3，4-噻二唑-2-基）脲（噻氟隆）、1-（5-乙基磺酰基-1，3，4-噻二唑-2-基）基-1，3-二甲基脲（赛黄隆）、3-[5-（1，1-二甲基乙基）1，3，4-噻二唑-2-基]-1，3-二甲基脲（特丁赛草隆）、3-（5-叔丁基异噁唑-3-基）-1，1-二甲基脲（异恶隆）、4-[2-氯-4-（3，3-二甲基脲基）苯基]-2-叔丁基-1，3，4-噁二唑啉-5-酮（dimefuron）、3-（5-叔丁基-1，3，4-噻二唑-2-基）-4-羟基-1-甲基-2-咪唑酮（buthidazole）、2-氯-4，6-双（乙胺基）-1，3，5-三嗪（西玛津）、2-氯-4-异丙胺基-6-乙基氨基-1，3，5-三嗪（阿特拉津）、2-氯-4，6-双（异丙基氨基）-1，3，5-三嗪（扑灭津）、2-氯-4-二乙基氨基-6-乙基氨基-1，3，5-三嗪（草达津）、2-氯-4-乙氨基-6-叔丁基氨基-1，3，5-三嗪（特丁津）、2-（2-氯-4-乙氨基-1，3，5-三嗪-6-基-氨基）-2-甲基丙腈（氰草津）、2-氯-4-环丙基氨基-6-异丙氨基-1，3，5-三嗪（prefox）、2-[2-氯-4-（环丙基氨基）-1，3，5-三嗪-6-基-氨基]-2-甲基丙腈（环丙氰津）、2-甲氧-4-仲丁基氨基-6-乙基氨基-1，3，5-三嗪（仲丁通）、2-甲氧-4，6-双（异丙基氨基）-1，3，5-三嗪（扑灭通）、2-甲硫基-4，6-双（乙氧基）-1，3，5-三嗪（西草净）、2-甲硫基-4，6-双（异丙基氨基）-1，3，5-三嗪（扑草通）、2-甲硫基-4-甲氨基-6-异丙氨基-1，3，5-三嗪（莠灭净）、2-甲硫基-4-乙氨基-6-叔丁基氨基-1，3，5-三嗪（特丁净）、2-甲硫基-4-异丙基氨基-6-（3-甲氧丙基氨基）-1，3，5-三嗪（甲氧丙净）、2-甲硫基-4-（1，2-二甲基丙基）-6-乙氨基-1，3，5-三嗪（二甲丙乙净）、2-甲硫基-4-异丙氨基-6-乙氨基-1，3，5-三嗪（敌草净）、4-氨基-6-叔丁基-3-甲硫基-1，2，4-三嗪-5（4H）-酮（嗪草酮）、2-甲硫基-4，6-双（异丙氨基）-1，3，5-三嗪（异丙净）、2-叔丁氨基-4-乙氨基-6-甲氧基氨基-1，3，5-三嗪（特丁通）、2-叠氨基-4-异丙氨基-6-甲硫基-1，3，5-三嗪（叠氮净）、4-氨基-3-甲基-6-苯基-1，2，4-三嗪-5（4H）-酮（苯嗪草酮）、6-叔丁基-4-异丁叉氨-1，2，4-三嗪-5（4H）-酮（异青赛津）、3-环己基-6-二甲基氨基-1-甲基-1，3，5-三嗪-2，4-（1H，3H）-二酮（环嗪酮）、N-（4-氯-6-乙氨基-1，3，5-三嗪-乙基）氨基乙酸乙酯（甘草津）、N-（4-氯-6-异丙基-1，3，5-三嗪-乙基）氨基乙酸乙酯（甘扑津）、2-氯-N-异丙基乙酰替苯胺（毒草安）、N-甲氧甲基-2′，6′-二乙基-2-氯乙酰替苯胺（甲草胺）、2-氯-2′，6′-二乙基-N-（丁氧甲基）乙酰替苯胺（丁草胺）、2-氯-2′乙基-6′-甲基-N-（2-甲氧-1-甲基乙基）乙酰替苯胺（异丙甲草胺）N，N-二丙烯基-2-氯乙酰胺（二丙烯草胺）、2-氯-2′，6′-二甲基-N-（2-甲氧基乙基）乙酰替苯胺（二甲去草胺）、2，6-二硝基-N，N-二丙基-4-三氟甲基苯胺（氟乐灵）、N-丁基-N-乙基-2，6-二硝基-4-三氟甲基苯胺（乙丁氟灵）、2，6-二硝基-N-丙基-N-环丙基-4-三氟甲基苯胺（环丙氟乐）、N，N-二乙基-2，4-二硝基-6-三氟甲基间苯二胺（氨基乙氟灵）、4-异丙基-2，6-二硝基-N，N-二丙基苯胺（异丙乐灵）、2，6-二硝基-N-仲丁基-4-叔丁基苯胺（双丁乐灵）、4-甲磺酰基-2，6-二硝基-N，N-二丙基苯胺（磺乐灵）、3，4-二甲基-2，6-二硝基-N-1-乙基丙基苯胺（二甲戊乐灵）、3，5-二硝基-N，N-二丙基氨基苯磺酰胺（安磺灵）、N-乙基-N-（2-甲基烯丙基-2，6-二硝基-4-（三氟甲基）-苯胺（乙丁烯氟灵）、N，N-二乙基-2，4-二硝基-6-三氟甲基间苯二胺（diethamine）、2-氯-N-（4-甲氧基-6-甲基-1，3，5-三嗪-2-基-氨基羰基）苯基磺酰胺（绿黄隆）、2-[3-（4-甲氧基-6-甲基-1，3，5-三嗪-2-基）脲基磺酰基]苯甲酸甲酯（甲黄隆）、2-[3-（4，6-二甲基嘧啶-2-基）脲基磺酰基]苯甲酸甲酯（嘧黄隆）、2-[3-（4，6-二甲氧嘧啶-2-基）脲基磺酰基]苯甲酸甲酯（苄嘧黄隆）、3-4，6-二甲氧-1，3，5-三嗪-2-基）-1-[2-（2-甲氧乙氧基）苯基磺酰]脲（cinosulfuron）、N-（2-氯咪唑[1，2-α]吡啶-3-基磺酰）-N′-（4，6-二甲氧-2-嘧啶基）脲（TH-9，3）、1H-吡唑-5-磺酰胺-N-[（4，6-二甲氧-2-嘧啶）氨基羰基）-1-甲基-4-（2-甲基-2H-四唑-5-基]脲（DPX-A8947）、1-[{0-环丙基羰基）苯基}磺酰基]-3-（4，6-二甲氧-2-嘧啶）脲（AC-140）、2-[3-（4-氯-6-甲氧嘧啶-2-基）脲基磺酰基]苯甲酸乙酯（氯嘧黄隆）、3-[（4-甲氧基-6-甲基-1，3，5-三嗪-2-基）脲基磺酰基]-2-噻吩羧酸（噻黄隆）、3，7-二氯-8-喹啉羧酸（二氯喹啉酸）、3，6-二氧-2-吡啶羧酸（Clopyralid）、α-（2-氯-苯基）-α-（4-氯苯基）-5-嘧啶甲醇（氯苯嘧啶醇）、S，S-二甲基-2-（二氟甲基）-4-（2-甲基丙基）-6-三氟甲基-3，5-吡啶二硫代羧酸（酯）（MON-15100或MON-15126）、4-氯-5-（甲基氨基）-2-（3-三氟甲基）苯基）-3（2H）-哒嗪酮（哒草伏）、0，0-双（1-甲乙基）-S-[2-[（苯基磺酰）氨基]乙基]Sulfodithioate（bensulide），（+）-2-[4，5-二氢-4-甲基-4-（1-甲乙基）-5-氧代-1H-咪唑啉-2-基-5-甲基-3吡啶羧酸（咪草烟）、3-[5-（1，1-二甲基乙基）-3异噁唑基）-4-羟基-1-甲基-2-咪唑啉二酮（羟草酮），和2-[1-（乙氧亚氨基）丁基]-3-羟基-5-（2H-四氢噻烷吡喃-3基）-2-环己烯-1-酮（噻草酮）。
具体地说，当根据本发明的杂草防除组合物与一种或多种除稗草的除草剂，例如一种或多种化学除草剂诸如二苯醚除草剂、N-酰苯胺除草剂和硫代氨基甲酸酯除草剂一起组合使用时，可以获得的协同效果之大是它们单独施用时所不能达到的，因此使得以意想不到的低剂量防治稗草成为可能。
此外，当根据本发明的杂草防除组合物与一种或多种除宽叶杂草的除草剂，例如一种或多种化学除草剂诸如磺酰脲除草剂和三嗪除草剂一起组合使用时，可以获得的协同效果之大是它们单独施用时所不能达到的。因此使得降低病原体（两种有效成分之一）的剂量，和减少化学除草剂的剂量成为可能。此外，由于组合物的广谱除草效果，各种低地杂草也能防除。
根据本发明的一些杂草防除组合物每种都包含一种根据本发明的新菌株，即，新变种Drechslera monoceras var. microsporus的一种菌株和一种化学除草剂。这些组合物将在下文中由下列试验和实施例作具体描述。然而本发明并不限于此。
试验例1
微生物的分离和筛选方法及其鉴定
1）病原体的分离方法
采集自然感染的稗草，以单个病斑为中心，切下10-20mm长的叶片。将这些稗草叶片在70%乙醇溶液中浸1-2秒中，然后在含有2%有效氯气浓度的次氯酸钠溶液中泡10分钟。由此对稗草叶片进行表面消毒。用蒸馏水将表面消毒过的病斑组织清洗三次，然后置于琼脂培养基。在恒温箱中10℃下进行72小时静态培养。培养后，在显镜镜下将由此生长的霉菌菌丝顶端进行单菌丝分离，接着在营养培养基上纯化，在制备的1，000个培养物中获得总数在7，000个以上的菌株。已报道的根据本发明的新变种的这些菌株中新微生物的代表性例子有MH-111010、MH-121024、MH-121025、MH-122124、MH122754、MH-122755和MH-122756菌株，均为日本真菌协会的新变种，并如上所述在National Institute of Bioscience and Human-Technology保藏。用这样分离的霉菌测试了对稗草的致病性和其对稻的安全性。
2）测试分离的微生物对稗草的致病性和对稻的安全性。
让稗草和稻（品种：Nipponbare）在试管中无菌生长以提供测试样品。也就是，稗草种和稻种在70%乙醇溶液中浸1-2秒中，然后在具有2%有效氯气浓度的次氯酸钠溶液中泡10分钟，由此对种子进行表面消毒。这样表面消毒过的种子用蒸馏水清洗三次，然后将该消毒种子植于含有预消毒过的培养基的试管中。在植物生长室中让其生长至1.5叶期。
将根据本发明的分离微生物在马铃薯-葡萄糖琼脂培养基上于25℃下分别地进行平板培养4天。用直径为5mm的消过毒的软木穿孔器沿着菌落的周线将菌落穿过，获得菌丝片，作种细胞源。
将菌丝片分别置入生长有稗草苗和稻秧的试管中的培养基上。在植物生长室中在15℃培养10天后，根据下列-至+++四级系统评价各微生物对稗草和稻的致病力。结果概括于表1中
+++  死亡
++  严重抑制生长
+  部分抑制生长
-  无作用
MH-0003、MH-0007、MH-0011、MH-0015和MH-9011分别是Drechslera sp.，Phoma sp.，Fusarium sp.，Drechslera monoceras var. monoceras、Drechslera monoceras var. monoceras菌株，它们都与作为常规菌株代表的下列其它的已知菌株作了比较测试，ATCC-24641[美国典型培养物保藏中心（ATCC）ATCC目录，第144页]、IFO-9619和IFO-9800[OSAKA发酵研究所（IFO）培养物目录，第177页]。
Figure 941052532_IMG2
3）微生物的鉴定
就对稗草显示出突出的致病力而对稻无作用的菌株进行了鉴定。结果，当在麦芽琼脂培养基上28℃下进行7天平板培养后MH-111010、MH-121024、MH-121025、MH-122124、MH-122754、MH-122755和MH-122756菌株每一种都给出直径达65-75mm的菌落并显示出无规律生长，这些菌落为灰黑色。分生孢子有瘢痕且大小为宽17-27（大多数19-23）μm，长35-110（大多数70-100）μm，其大轴/小轴（长/宽）比率平均为6.1或更小（大多数4.5-5.0），它们具有非常直的形状，大多数分生孢子具4-6个隔，分生孢子梗为直形。另一方面，就通常已知的Drechslera monoceras var. monoceras菌株来看，分生孢子的大小为宽16-25（大多数17-20）μm，长60-150μm（大多数100-120），大轴/小轴比率（长/宽）平均为5.9或更大（大多数6.2-6.5），具有微弯的形状，大多数分生孢子具4-10个（大多数5-7）个隔，分生孢子梗为直形。从上述特征来看，MH-111010、MH-121024、MH-121025、MH-122124、MH-122754、MH-122755和MH-122756菌株全都为Drechslera monoceras菌株。与常规菌株相比，它们的分生孢子大小、形状、隔数不同，致病力也不同。
为证实根据本发明的新变种与常规Drechslera monoceras var. monoceras菌株的不同，下文中将用Hunter等的方法比较其酶的同工酶类型，所采用的酶为受环境影响较小的α-酯酶。
将根据本发明的新变种和各种对照菌株在马铃薯-蔗糖培养基上25℃黑暗条件下分别进行静态培养7-10天，得细胞群（cell mat）。将由此得的细胞群用蒸馏水冲洗且称重，然后将此细胞群在控制在-80℃的冰箱中冻干。向所得冻干物中加入1-1.5体积的0.05M tris-盐酸缓冲液（PH 7.4），然后破裂冻干物。破裂过的液体混合物过滤，并将此滤液在10，000rpm下离心，如此得到作为样品的上清液。用Lowry法测量样品中蛋白质的量。
采用大平板凝胶电泳槽（bath），制得10%丙烯酰胺凝胶和浓凝胶（分别为下层和上层）。将以上述方式得的样品铺上，给出每孔50μg的蛋白量。然后在流动（running）缓冲液中于30mA下电泳2小时。
电泳采用下列试验条件
丙烯酰胺凝胶
10%凝胶  浓凝胶
A  12ml  1.8ml
B  9ml  -
C  -  3ml
D  140μl  36μl
TEMD  20μl  12μl
H2O 15ml 7.2ml
A：丙烯酰胺  29.8%
BIS丙烯酰胺  0.2%
B 1.5 M Tris-HCl  （pH8.8）
C 0.5 M Tris-HCl  （pH6.8）
D 10%过硫酸胺
样品缓冲液
0.5M Tris-HCl（PH6.8）  5ml
0.05% BPB  2ml
甘油  2ml
H2O 18ml
流动缓冲液
250mM  Tris
1.92M  甘氨酸
按下述方法将进行电泳的凝胶上的酯酶染色。将凝胶浸在染色溶液中。所述溶液通过加2ml的1%α-萘乙酸/50%丙酮水溶液和10mg坚牢紫B盐（Fast violet B Salt）于100ml的0.05M Tris-盐酸中制备。震荡下进行染色30分钟，染色后，用蒸馏水冲洗凝胶并测定各带的移动性。
图1和2中分别显示对应于不同菌种的酯酶酶谱类型。图1显示的是由根据本发明的新变种形成的酯酶酶谱类型，图2说明的是由常规Drechslera monoceras sp.菌株形成的酯酶酶谱类型。结果表明根据本发明的新变种明显不同于常规Drechslera monoceras sp.菌株。
如本试验中采用的，使用酯酶的电泳类型进行微生物分类，是担子菌纲领域的常规作法。
此外，Drechslera monoceras var. monoceras菌株和根据本发明的新变种即Drechslera monoceras var. microsporus菌株的分类学上的区别在基因水平也得到证实。事实上，就它们DNA编码的RNA而言这些变种间也可能观察到不同。
由上述特点，证实根据本发明的菌株如MH-111010、MH-121024、MH-121025、MH-122124、MH-122754、MH-122755和MH-122756为不同于Drechslera monoceras var. monoceras菌株的新变种。
已经确认，依据由National Institutes of Health（日本）编纂的Pathogens Safety Control Guideline，根据本发明的新变种为非人体病原体。
另一方面，对稗草不显示致病性菌株即MH-0003菌株和MH-0007菌株被分别鉴定为Drechslera sp.菌株和Phoma sp.菌株。对稗草和稻都有致病性的菌株，即，MH-0011菌株被鉴定为Fusarium sp.菌株。对稗草有致病性而对稻无致病性的菌株，即，MH-0015菌株和MH-9011菌株都是已知的Drechslera monoceras var. monoceras菌株（EP 0464416 A2）。
参考M. B. Ellis，“Demariaceus Hyphomycetes”608，Commonwealth Mycological Institute，kew，England（1971）和M. B. Ellis，“More Demariaceus Hyphomycetes”507，Commonwealth Mycological Institute，kew，England（1976）中的方法进行上述鉴定。
试验例2
Drechslera菌株对稗草的防除效果
将各种从自然界中分离的Drechslera菌株接种在燕麦粉-琼脂培养基上，接着在25℃下静态培养7天。用蒸馏水除去气生菌丝以促进分生孢子的形成。将如此获得的分生孢子悬浮在0.02%“TritonX-100”（商标名，Rohm & Haas Co.产品）溶液中以给出108孢子/ml和105孢子/ml的浓度，由此制备含有Drechslera菌株作为有效成分的杂草防除剂。
另一方面，将稗草和稻（品种：Nipponbare）种在1/10000公亩的盆中的低地土壤中，并分别培育至1.5叶期。灌溉盆，将苗保持在约5cm深水浸泡条件下之后分别以每盆5ml的量滴施上述含有Drechslera菌株分生孢子的杂草防除剂。在白天和黑夜期间保持15℃的气候控制室将小苗培育10天之后，根据试验例1中的同样标准评价Drechslera菌株对稗草和稻的效果。结果示于表2中
+++  死亡
++  严重抑制生长
+  部分抑制生长
-  无作用
表2
Drechslera spp.的选择性除草活性-盆载试验
Figure 941052532_IMG3
结果，Drechslera spp.的MH-111010、MH-121024、MH-121025、MH-122124、MH-122754、MH-122755和MH-122756菌株（所述的菌株都与本发明有关）在15℃低温下对稗草显示除草作用，它们的效果比MH-0015、MH-9011菌株好1，000倍。再则，还观察到它们对稻安全。
试验例3
以试验例1-2相似的方法，评价根据本发明的各微生物对稗属的各种稗草和稻的致病性。测试的稗草为光头稗、Echinochloa oryzicola、Echinochloa crus-galli var，fornosensis、Echinochloa Crus-galli var. crus-galli和Echinochloa crus-galli var. praticola，测试的稻为“Nipponbare”、“Sasanishiki”和“Koshihikari”，它们都是栽培稻种。接种后10天，评价根据本发明的各微生物对稗草和稻的致病性。结果示于表3中。
Figure 941052532_IMG4
测试结果，与本发明相关的Drechslera monoceras新变种：MH-111010、MH-121024、MH-121025、MH-122124、MH-122754、MH-122755和MH-122756，对各种稗草的和其变种具有高致病力且显示出对它们有优异的除草效果。此外，还观察到对稻安全。
试验例4
化学除草剂对Drechslera spp.的各种生物属性的作用
Drechslera spp.各菌株的菌丝片（所述菌丝片由试验例1-2中所述方法制备）分别置于马铃薯-葡萄糖琼脂培养基层上，培养基中含化学除草剂如草枯醚（表中除草剂A），苯噻草胺（表中除草剂E），丙草胺（表中除草剂I），杀草丹（表中除草剂L）和苄嘧黄隆（表中除草剂P），浓度分别为500ppm。然后在25℃静态培养5天。测量如此形成的各菌落的直径并记录菌丝长度。此外，将Drechslera spp.各菌株的孢子悬浮液的“Triton X-100”溶液中的孢子转移到马铃薯-葡萄糖液体培养基中。上述溶液由试验例2中所述方法制备。上述培养基中分别含有500ppm浓度的不同的化学除草剂。在25℃下进行24小时静态培养，培养后，在显微镜下观察孢子萌发，计算孢子萌发率。以相对于不含化学除草剂的相应对照组的百分率表达各化学除草剂对Drechslera spp.各菌株的菌丝生长和孢子萌发率的影响。结果示于表4中。
从表4-1和4-2可见，实际上未观察到化学除草剂抑制根据本发明的Drechslera菌株的菌丝生长和孢子萌发。
表4-1
化学除草剂对Drechslera spp.菌丝生长的影响
Figure 941052532_IMG5
表4-2
化学除草剂对Drechslera spp.孢子萌发的影响
试验例5
含Drechslera菌株和化学除草剂枯草醚的组合物对稗草的防除效果
将从自然界中分离出的本发明的各Drechslera monoceras var. microsporus菌株接种到燕麦粉琼脂培养基上，接着在25℃下静态培养7天。用蒸馏水去除气生菌丝以促进分生孢子的形成。将如此得的分生孢子悬浮在0.02%“Triton X-100”（商标名，Rohm & Haas Co.产品）的溶液中，给出如表5中所示的浓度，由此制得含有Drechslera菌株作为有效成分的杂草防除剂。
至于枯草醚，称取30-1mg量的9%颗粒剂用作化学除草剂。
另一方面，将稗草和稻（品种：“Nipponbare”）种在1/10000公亩的盆中的低地土壤中，并分别培育至1.5叶期，灌溉盆，将苗保持在约5cm深水浸泡的条件下，分别以每盆5ml的量滴施含有Drechslera菌株分生孢子的杂草防除剂。同时，用化学除草剂枯草醚处理各盆。在白天和黑夜期间保持气候控制室15℃，将小苗培养10天。根据试验例1中的同样标准评价Drechslera菌株和化学除草剂对稗草和稻的影响。结果示于表5中
+++  死亡
++  严重抑制生长
+  部分抑制生长
-  无作用
虽然表5的结果只是一个例子，但Drechslera菌株和化学除草剂的各种组合甚至在低温下都显示明显增效作用。
表5
Drechslera spp.和化学除草剂的增效作用
稗草防除值：0-100%
括号中的符号表示对稻的伤害，（一）表示未见到伤害。
下文描述的是根据本发明的制剂实施例和杂草防除剂的除草活性试验。
制剂实施例1（颗粒剂）
将2wt%的“Neopelex”（商标名，Kao corporation产品），2wt%的“Sun Ekis p252”（商标名，Sanyo-kokusaku pulp Co.，Ltd产品）和96wt%的沸石充分混合后，按每克所要配制的颗粒剂含109个Drechslera MH-111010菌株分生孢子的量将孢子悬浮液加至所得混合物中以润湿之。然后用小型挤压成型机挤压由此润湿的物质成颗粒。将颗粒晾干，压碎，然后用移动机加工（processed by a shifting machine）由此得0.3-2mm颗粒。
制剂实施例2（颗粒剂）
将2wt%的“Neopelex”（商标名，Kao corporation产品），2wt%的“Sun Ekis p252”（商标名，Sanyo-kokusaku pulp Co.，Ltd产品）和96wt%的沸石充分混合后，按每克所要配制的颗粒剂含108个Drechslera MH-121024菌株分生孢子的量将孢子悬浮液加至所得混合物中以润湿之。然后用小型挤压机将由此润湿的物质挤压成颗粒。将颗粒晾干，压碎，然后用移动机加工，由此得0.3-2mm颗粒。
制剂实施例3（颗粒剂）
将2wt%的“Neopelex”（商标名，Kao corporation产品），2wt%的“Sun Ekis p252”（商标名，Sanyo-kokusaku pulp Co.，Ltd产品）和96wt%的沸石充分混合后，按每克所要配制的颗粒剂含109个Drechslera MH-121025菌株分生孢子的量将孢子悬浮液加至所得混合物中以润湿之。然后用小型挤压成型机挤压由此润湿的物质挤压成颗粒。将颗粒晾干，压碎，然后用移动机加工，由此得0.3-2mm颗粒。
制剂实施例4（颗粒剂）
将2wt%的“Neopelex”（商标名，Kao corporation产品），2wt%的“Sun Ekis p252”（商标名，Sanyo-kokusaku pulp Co.，Ltd产品）和96wt%的沸石充分混合后，按每克所要配制的颗粒剂含108个Drechslera MH-122124菌株分生孢子的量将孢子悬浮液加至所得混合物中以润湿之。然后用小型挤压成型机将由此润湿的物质挤压成颗粒。将颗粒晾干，压碎，然后用移带机传送，由此得0.3-2mm颗粒。
制剂实施例5（颗粒剂）
将2wt%的“Neopelex”（商标名，Kao corporation产品），2wt%的“Sun Ekis p252”（商标名，Sanyo-kokusaku pulp Co.，Ltd产品）和96wt%的沸石充分混合后，按每克所要配制的颗粒剂含109个Drechslera MH-122754菌株分生孢子的量将孢子悬浮液加至所得混合物中以润湿之。然后用小型挤压成型机挤压由此润湿的物质挤压成颗粒。将颗粒晾干，压碎，然后用移带机传送，由此得0.3-2mm颗粒。
制剂实施例6（颗粒剂）
将2wt%的“Neopelex”（商标名，Kao corporation产品），2wt%的“Sun Ekis p252”（商标名，Sanyo-kokusaku pulp Co.，Ltd产品）和96wt%的沸石充分混合后，按每克所要配制的颗粒剂含108个Drechslera MH-122755菌株分生孢子的量将孢子悬浮液加至所得混合物中以润湿之。然后用小型挤压成型机挤压由此润湿的物质挤压成颗粒。将颗粒晾干，压碎，然后用移动机加工，由此得0.3-2mm颗粒。
制剂实施例7（可湿性粉剂）
将2wt%的“Neopelex”（商标名，Kao corporation产品），2wt%的Triton X-100和5wt%的白碳（white carbon）的混合物，用用量为使每克所要配制的可湿性粉剂含1010个Drechslera MH-122756菌株分生孢子的孢子悬浮液浸渍，接着晾干。然后加入硅藻土（91wt%），接着充分混合并研磨得可湿性粉剂。
制剂实施例8（可湿性粉剂）
将2wt%的“Neopelex”（商标名，Kao corporation产品），十二烷基苯磺酸钠）、1wt%的Neugen EA 80”（商标名，Sanyo chemical Industries，Ltd.产品，聚氧乙烯壬基苯基醚），5wt%的白碳和92wt%的硅藻土的的混合物，用用量使每克所要配制的可湿性粉剂含109个Drechslera MH-111010菌株的分生孢子的孢子悬浮液浸渍，接着晾干。将所得混合物彻底研磨得可湿性粉剂。
制剂实施例9（可湿性粉剂）
将2wt%的“Neopelex”（商标名，Kao corporation产品），2wt%的Triton X-100和5wt%的白碳黑的混合物，用用量使每克所要配制的可湿性粉剂含1010个Drechslera MH-122756菌株的分生孢子的孢子悬浮液浸渍，接着晾干。然后加入硅藻土（91wt%），接着充分混合并研磨，得可湿性粉剂。
制剂实施例10（可湿性粉剂）
将2wt%的“Neopelex”（商标名，Kao corporation产品），十二烷基苯磺酸钠）、1wt%的“Neugen EA 80”（商标名，Sanyo chemical Industries，Ltd.产品，聚氧乙烯壬基苯基醚），5wt%的白碳和92wt%的硅藻土的的混合物，用用量使每克所要配制的可湿性粉剂含109个Drechslera MH-121024菌株的分生孢子的孢子悬浮液浸渍，接着晾干。将所得混合物充分混合并研磨，得可湿性粉剂。
制剂实施例11（可湿性粉剂）
将2wt%的“Neopelex”（商标名，Kao corporation产品），十二烷基苯磺酸钠）、1wt%的“Neugen EA 80”（商标名，Sanyo chemical Industries，Ltd.产品，聚氧乙烯壬基苯基醚），5wt%的白碳和92wt%的硅藻土的的混合物，用用量使每克所要配制的可湿性粉剂含109个Drechslera MH-121025菌株的分生孢子的孢子悬浮液浸渍，接着晾干。将所得混合物彻底混合并研磨，得可湿性粉剂。
制剂实施例12（悬浮剂）
将“Sun Ekis P252”（10wt%）溶于80wt%的水中湿磨，接着加入溶解在9.6wt%的用量使每毫升所要制备的悬浮剂含1010个Drechslera MH-122754菌株的分生孢子的孢子悬浮液中的0.4wt%的“Kelzan S”（商标名，Kelco Corp.产品）将所得混合物混合均匀，得悬浮剂。
制剂实施例13（悬浮剂）
将溶解在70wt%水中的10wt%的“Sun Ekis P252”（商标名，如上所述）与10wt%的用量使每毫升所要制备的悬浮剂含1010个Drechslera MH-111010菌株的分生孢子的孢子悬浮液混合后，将所得混合物湿磨。然后，将溶解在9.8wt%水中的0.2wt%的“Kelzan S”（商标名，Kelco Corp.产品，黄原胶）加入，得悬浮剂。
制剂实施例14（悬浮剂）
将“Sun Ekis P252”（10wt%）溶于80wt%的水中，湿磨，接着加入溶解在9.6wt%的用量使每毫升所要制备的悬浮剂含1010个Drechslera MH-122756菌株的分生孢子的孢子悬浮液中的0.4wt%的“Kelzan S”（商标名，Kelco Corp.产品）将所得混合物混合均匀，得悬浮剂。
制剂实施例15（悬浮剂）
将溶解在70wt%水中的10wt%的“Sun Ekis P252”（商标名;上述）与10wt%的用量使每毫升所要制备的悬浮剂含1010个Drechslera MH-121024菌株的分生孢子的孢子悬浮液混合，将所得混合物湿磨。然后加入溶于9.8wt%水中的0.2wt%的“Kelzan S”（商标名，Kelco Corp.产品，黄原胶），得悬浮剂。
制剂实施例16（悬浮剂）
将“Sun Ekis P252”（10wt%）溶于80wt%的水中，湿磨，接着加入溶解在9.6wt%的用量使每毫升所要制备的悬浮剂含1010个Drechslera MH-122124菌株的分生孢子的孢子悬浮液中的0.4wt%的“Kelzan S”（商标名，Kelco Corp.产品）将所得混合物混合均匀，得悬浮剂。
制剂实施例17（悬浮剂）
将溶解在70wt%水中的10wt%的“Sun Ekis P252”（商标名;上述）与10wt%的用量使每毫升所要制备的悬浮剂含1010个Drechslera MH-121025菌株的分生孢子的孢子悬浮液混合后，将所得混合物湿磨。然后加入溶于9.8wt%水中的0.2wt%的“Kelzan S”（商标名，Kelco Corp.产品;黄原胶），得悬浮剂。
制剂实施例18（干悬浮剂）
将烷基苯磺酸钠（15wt%）、聚丙二醇聚乙二醇醚（85wt%）和用量使每克将得的干悬浮剂含1010个Drechslera MH-111010菌株分生孢子的该孢子混合得干悬浮剂。
制剂实施例19（干悬浮剂）
将烷基苯磺酸钠（15wt%）、聚丙二醇聚乙二醇醚（85wt%）和用量使每克将得的干悬浮剂含1010个Drechslera MH-121024菌株分生孢子的该孢子混合得干悬浮剂。
制剂实施例20（干悬浮剂）
将烷基苯磺酸钠（15wt%）、聚丙二醇聚乙二醇醚（85wt%）和用量使每克将得的干悬浮剂含1010个Drechslera MH-122754菌株分生孢子的该孢子混合，得干悬浮剂。
制剂实施例21（干悬浮剂）
将烷基苯磺酸钠（15wt%）、聚丙二醇聚乙二醇醚（85wt%）和用量使每克将得的干悬浮剂含1010个Drechslera MH-122756菌株分生孢子的该孢子混合，得干悬浮剂。
制剂实施例22（粉剂）
将“Emulgen 910”（商标名：Kao Corporation产品，聚聚氧亚乙基壬基苯基醚;0.5wt%）和高岭土（99.5wt%）充分研磨并混合，接着加入用量使每克将得的粉剂含108个Drechslera MH-111010的分生孢子的孢子悬液，得粉剂。
制剂实施例23（乳剂）
按每克将配制的乳液含1010个Drechslera MH-121024菌株的分生孢子的量将该分生孢子悬浮在5wt%的卵磷脂和94wt%的重白油（heavy white oil）的混合物中，将等量的1wt%Triton X-100加入该悬浮液中。将所得混合物混合并乳化得乳液。
制剂实施例24（颗粒剂）
将9wt%的细研的化学除草剂枯草醚（表中除草剂A）、2wt%的“Neopelex”（商标名，Kao Corporation产品）、2wt%的“Sun Ekis p252”（商标名，Sanyo-Kokusaku Pulp Co.，Ltd产品）和87wt%的沸石充分混合后，按每克所要配制的颗粒剂含108个Drechslera MH-122754菌株分生孢子的量将孢子悬浮液加至所得混合物中以润湿之。用小型挤压成型机将由此润湿的物质挤压成颗粒坯（green granule）。将颗粒坯晾干，压碎，然后用移动机加工，得0.3-2mm颗粒。
制剂实施例25（颗粒剂）
将3.5wt%的化学除草剂丁草胺（表中除草剂H）、2wt%的“Neopelex”（商标名，Kao Corporation产品）、2wt%的“Sun Ekis p252”（商标名，Sanyo-Kokusaku Pulp Co.，Ltd产品）和92.5wt%的沸石充分混合后，按每克所要配制的颗粒剂含108个Drechslera MH-121025菌株分生孢子的量将孢子悬浮液加至所得混合物中以润湿之。然后将由此润湿的物质用小型挤压成型机挤成颗粒坯，将颗粒坯晾干，压碎，然后用移动机加工，得0.3-2mm颗粒。
制剂实施例26（颗粒剂）
将4wt%的磨细的化学除草剂苯噻草胺（表中除草剂E）、2wt%的“Neopelex”（商标名，Kao Corporation产品）、2wt%的“Sun Ekis p252”（商标名，Sanyo-Kokusaku Pulp Co.，Ltd产品）和92wt%的沸石充分混合后，按每克所要配制的颗粒剂含108个Drechslera MH-121024菌株分生孢子的量将孢子悬浮液加至所得混合物中以润湿之。然后将由此润湿的物质挤用小型挤压成型机挤成颗粒坯，将颗粒坯晾干，压碎，用移动机加工，得0.3-2mm颗粒。
制剂实施例27（颗粒剂）
将0.2wt%的磨细的化学除草剂苄嘧黄隆（表中除草剂P）、2wt%的“Neopelex”（商标名，Kao corporation产品），2wt%的“Sun Ekis p252”（商标名，Sanyo-Kokusaku Pulp Co.，Ltd产品）和95.8wt%的沸石充分混合后，按每克所要配制的颗粒剂含108个Drechslera MH-111010菌株分生孢子的量将孢子悬浮液加至所得混合物中以润湿之。然后用小型挤压成型机将由此润湿的物质挤成颗粒坯。将颗粒坯晾干，压碎，然后用移动机加工，得0.3-2mm颗粒。
制剂实施例28（颗粒剂）
将0.3wt%的磨细的化学除草剂吡嘧黄隆（表中除草剂Q）、2wt%的“Gosenol GL-05s”（The Nippon Synthenic Chemical Industry Co.，Ltd.产品;PVA）、2wt%的“Sun Ekis p252”（商标名，Sanyo-Kokusaku Pulp Co.，Ltd产品;木质素磺酸钠）和95.7wt%的陶土充分混合后，按每克所要配制的颗粒剂含108个Drechslera MH-111010菌株分生孢子的量将孢子悬浮液加至所得混合物中以润湿之。然后用小型挤压成型机将由此润湿的物质挤压成颗粒坯。将颗粒坯晾干，压碎，用移动机加工，得0.3-1mm颗粒。
制剂实施例29（颗粒剂）
将1.5wt%的磨细的化学除草剂恶草酮（表中除草剂D）、2wt%的“Gosenol GL-05s”（The Nippon Synthetic Chemical Industry Co.，Ltd.产品;PVA）、2wt%的“Sun Ekis P252”（Sanyo-Kokudsaku Pulp Co.Ltd.产品;木素磺酸钠）和94.5wt%的陶土充分混合后，按每克所配制的颗粒剂含108个Drechslera MH-122755菌株分生孢子的量将孢子悬浮液加入所得混合物中以润湿之。然后用小型挤压成型机将由此润湿的物质挤成颗粒坯。将颗粒坯晾干，压碎，用移动机加工，由此得0.3-1mm的颗粒。
制剂实施例30（颗粒剂）
将1.5wt%的磨细的化学除草剂西草净（表中除草剂S）、2wt%的“Gosenol GL-05s”（The Nippon Synthetic Chemical Industry Co.，Ltd.产品;PVA）、2wt%的“Sun Ekis P252”（Sanyo-Kokudsaku Pulp Co.Ltd.产品;木素磺酸钠）和94.5wt%的陶土充分混合后，按每克所配制的颗粒剂含108个Drechslera MH-122756菌株的分生孢子的量将孢子悬浮液加入所得混合物中以润湿之。然后用小型挤压成型机将由此润湿的物质挤成颗粒坯。将颗粒坯晾干，压碎，用移动机加工，由此得0.3-1mm的颗粒。
制剂实施例31（颗粒剂）
将6wt%的化学除草剂禾草特（表中除草剂N）、2wt%的“Neopelex”（商标名;Kao Corporation产品）、2wt%的“Sun Ekis P252”（商标名;Sanyo-Kokudsaku Pulp Co.Ltd.产品;木素磺酸钠）和90wt%的沸石充分混合后，按每克所要配制的颗粒剂含108个Drechslera MH-111010菌株分生孢子的量将孢子悬浮液加入所得混合物中以润湿之。然后用小型挤压成型机将由此润湿的物质挤成颗粒坯。将颗粒坯晾干，压碎，然后用移动机加工，由此得0.3-2mm的颗粒。
制剂实施例32（可湿性粉剂）
将30wt%的化学除草剂甲氧除草醚（表中除草剂B）、2wt%的“Neopelex”（商标名;Kao Corporation产品）、2wt%的Triton X-100和5wt%的白碳的混合物用用量使每克所配制可湿性粉含109个Drechslera MH-122124菌株分生孢子的孢子悬浮液浸渍。然后将空气干燥过的硅藻土（61wt%）加入到如此浸渍的混合物中，充分混合之得可湿性粉剂。
制剂实施例33（可湿性粉剂）
将40wt%的化学除草剂敌稗（表中除草剂J）、2wt%的“Neopelex”（商标名;Kao Corporation产品）、2wt%的Triton X-100和5wt%的白碳的混合物用用量使每克所配制可湿性粉含109个Drechslera MH-121024菌株分生孢子的孢子悬浮液浸渍。然后将空气干燥过的硅藻土（51wt%）加入如此浸渍的混合物中，充分研磨之得可湿性粉剂。
制剂实施例34（可湿性粉剂）
将20wt%的化学除草剂杀草丹（表中除草剂L）、2wt%的“Neopelex”（商标名;Kao Corporation产品）、2wt%的Triton X-100和5wt%的白碳的混合物用用量使每克所要配制可湿性粉含109个Drechslera MH-111010菌株分生孢子的孢子悬浮液浸渍。然后将空气干燥过的硅藻土（71wt%）加入如此浸渍的混合物中，充分研磨之。得可湿性粉剂。
制剂实施例35（可湿性粉剂）
将40wt%的化学除草剂萘丙胺（表中除草剂F）、2wt%的“Neopelex”（商标名;Kao Corporation产品十二烷基苯磺酸钠）、1wt%的“Neugen EA 80”（商标名;Sanyo Chemical Industries ltd.聚氧乙烯壬基苯基醚）、5wt%的白碳和52wt%的硅藻土的混合物用用量使每克所要配制可湿性粉含109个Drechslera MH-122124菌株分生孢子的孢子悬浮液浸渍，接着充分混合并研磨，得可湿性粉剂。
制剂实施例36（可湿性粉剂）
将20wt%的化学除草剂哌草丹（表中除草剂M）、2wt%的烷基苯磺酸钠、1wt%的聚氧乙烯烷基苯基醚和77wt%的zeaklite的混合物用用量使每克所要配制可湿性粉含109个Drechslera MH-122754菌株分生孢子的孢子悬浮液浸渍，接着充分混合并研磨，得可湿性粉剂。
制剂实施例37（可湿性粉剂）
将40wt%的化学除草剂clomeprop（表中除草剂K）、5wt%的白碳、6wt%的聚氧乙烯烷基苯基醚硫酸铵盐和2wt%的木素磺酸钠和47wt%的硅藻土的混合物用Jet-O-Miser机充分混合和研磨后，接着用用量使每克所要配制可湿性粉含109个Drechslera MH-121024菌株分生孢子的孢子悬浮液浸渍。将所得混合物充分混合和研磨，得可湿性粉剂。
制剂实施例38（悬浮剂）
将45wt%的磨细的化学除草剂枯草醚（表中除草剂A）和溶于35wt%的水的10wt%的“Sun Ekis P252”混合并湿磨后，将溶解在9.6wt%的用量使每毫升所要制备悬浮剂含109个Drechslera MH-111010菌株分生孢子的孢子悬浮液中的0.4wt%的“Kelzan S”（商标名，Kelco Corp.产品）加入所得混合物中，然后由此得的混合物中，混合得悬浮剂。
制剂实施例39（悬浮剂）
将10wt%的化学除草剂丙草胺（表中除草剂I）和溶于70wt%水的10wt%的“Sun Ekis P252”混合和湿磨后，将溶于9.6wt%的用量使每毫升所要配制的悬浮剂含109个Drechslera MH-122754菌株分生孢子的孢子悬浮液中的0.4wt%“Kelzan S”（商标名，Kelco Corp.产品）加入所得混合物中，然后将由此得的混合物混合，得悬浮剂。
制剂实施例40（悬浮剂）
将56.7wt%的水加入30wt%的化学除草剂杀草丹（表中除草剂L）、2wt%的木素磺酸钠后，向所得混合物中加入0.3wt%的黄原胶和1wt%的聚氧乙烯烷基芳基醚、10wt%的用量使每毫升所要配制的悬浮剂含109个Drechslera MH-121024菌株分生孢子的孢子悬浮液。然后将由此得的混合物用砂磨细磨，得悬浮剂。
制剂实施例41（悬浮剂）
将30wt%的化学除草剂esprocarb（表中除草剂O），溶于40wt%的水中的10wt%的“Sun Ekis P252”（商标名，上述）和10wt%的用量使每毫升所要制备悬浮剂含109个Drechslera MH-122756菌株分生孢子的孢子悬浮液混合后，将溶于9.6wt%水中的0.4wt%的“Kelzan S”（商标名，Kelco Corp.产品;黄原胶）加入所得混合物中，得悬浮剂。
制剂实施例42（干悬浮剂）
将细磨的化学除草剂pyrazolate（表中除草剂R，60wt%）、烷基苯磺酸钠（5wt%）、聚丙二醇聚乙二醇醚（35wt%）和用量为每克化学除草剂109个Drechslera MH-111010分生孢子的该孢子混合，得干悬浮剂。
制剂实施例43（粉剂）
将细磨的化学除草剂苄嘧黄隆（表中除草剂P;0.2wt%）、“Emulgen 910”（商标名;Kao corporation产品，聚氧乙烯壬基苯基醚;0.5wt%）和高岭土（99.3wt%）充分混合并研磨，接着按每克将得的粉剂含108个Drechslera MH-111010菌株分生孢子的量加入该孢子，由此得粉剂。
制剂实施例44（粉剂）
将细磨的化学除草剂苯噻草胺（表中除草剂E;4wt%）、“Emulgen 910”（商标名;Kao corporation产品，聚氧乙烯壬基苯基醚;1wt%）和木素磺酸钠（3wt%）、聚氧乙烯烷基芳基醚（2wt%）和陶土（90wt%）混合和研磨，接着按每克将得的粉剂含109个Drechslera MH-121024菌株分生孢子的量加入该孢子，由此得粉剂。
制剂实施例45（乳剂）
按用量使每毫升所要配制的乳液中含109个Drechslera MH-111010菌株分生孢子的量将该孢子悬浮在1wt%化学除草剂苄嘧黄隆（表中除草剂P）、5wt%的卵磷脂和94wt%的重白油的混合物中，往悬浮液中加入等量的1wt%Triton X-100。将所得混合物混合均匀得乳液。
制剂实施例46（乳剂）
按用量使每毫升所要配制的乳液中含109个Drechslera MH-122756菌株的分生孢子的量将该孢子悬浮在2wt%化学除草剂甲羧除草醚（表中除草剂C）、5wt%的卵磷脂和92wt%的重白油的混合物中，往该悬浮液中加入等量的1wt%Triton X-100，混合均匀所得混合物，得乳液。
除了上述制剂实施例外，可用各菌株分生孢子和各种化学除草剂的组合制备制剂，因此，制剂不限于上述例举的那些。
实施例1
根据本发明的新微生物菌株和化学除草剂的杂草防除组合物对稗草的除草效果-颗粒剂
在1/1000公亩盆内的低地土中播种稗草籽，将从这些草籽长出的植株培育至1.5叶期，灌溉之，保持约5cm水深，并用30mg（相当于标准剂量的十分之一）按制剂实施例24-31中所述的方法制备的颗粒剂（除了采用的是不同的菌株和化学除草剂外）处理。让稗草在白天和黑夜期间保持15℃的温室中生长。处理20天后，计算各盆中存留的数量。对稗草的防除效果根据下列公式计算，结果示于表6-1至6-3中。
防除效果＝ (未处理组存留数量-处理组存留数量)/(未处理组存留数量) ×100
表中，字母A-O表示下列除草剂，它们的剂量示于括号内。
剂量（g/10公亩）
A：草枯醚  （27）
B：甲氧除草醚  （21）
C：甲羧除草醚  （21）
D：恶草酮  （6）
E：苯噻草胺  （12）
F：萘丙胺  （30）
G：NSK-850  （2）
H：丁草胺  （15）
I：丙草胺  （6）
J：敌稗  （50）
K：Clomeprop  （4.5）
l：杀草丹  （21）
M：哌草丹  （21）
N：草达灭  （24）
O：Esprocarb  （21）
以同样的分生孢子数用MH-0015和MH-9011进行如上的同样试验。
表6-1
根据本发明的新微生物菌株和二苯醚类化学除草剂的组合物的除草效果
Figure 941052532_IMG8
＊）此情况下不含微生物
＊＊）此情况下不含化学除草剂
表6-2
根据本发明的新微生物菌株和N-酰苯胺类化学除草剂的组合物的除草效果
＊）此情况下不含微生物
＊＊）此情况下不含化学除草剂
表6-3
根据本发明的新微生物菌株和硫代氨基甲酸酯类化学除草剂的组合物的除草效果
Figure 941052532_IMG10
＊）此情况下不含微生物
＊＊）此情况下不含化学除草剂
从表6-1可见，含根据本发明的新微生物以及分别与二苯醚除草剂，即草枯醚、甲氧除草醚、甲羧除草醚或二嗪除草剂、即恶草酮，的组合物的情况下，与其各组分单独施用相比，除草活性均协同地提高。
从表6-2可见，含根据本发明的新微生物以及分别与N-酰苯胺除草剂，即苯噻甲胺、萘丙胺、NSK-850、丁草胺、丙草胺、敌稗和Clomeprop的组合物的情况下，与其各组分单独施用相比，除草活性均协同地提高。
从表6-3可见，含根据本发明的新微生物以及分别与硫代氨基甲酸酯类除草剂，即杀草丹、哌草丹、草达灭和esprocarb的组合物与其各组分单独施用相比，除草活性均协同地提高。
从上述结果，可以观察到组合物的显著增效作用。所述组合物含有与二苯醚除草剂、N-酰苯胺除草剂、硫代氨基甲酸酯二嗪除草剂等所有用作杀稗草的除草剂组合的对稗草有致病力的新微生物。因此，它使在低到以这些除草剂常规剂量的十分之一至百分之一的剂量下有效地防除稗草成为可能。
实施例2
根据本发明的新微生物菌株和化学除草剂的杂草防除组合物对稗草的除草效果-悬浮剂
在1/1000公亩盆内的低地土中播种稗草籽，将从这些草籽长出的植株培育至1.5叶期，灌溉之，保持约5cm水深，用1μl（相当于标准剂量的十分之一）按制剂实施例38-41中所述的方法制备的悬浮剂（除了采用的是不同的菌株和除草剂外）处理。然后让稗草在白天和黑夜期间保持15℃的温室中生长。处理20天后，计算各盆中存留的数量。根据下列公式计算对稗草的防除效果，结果示于表7-1至7-3中。
防除效果＝ (未处理组存留的数量-处理组存留的数量)/(未处理组存留的数量) ×100
从表7-1可见，含根据本发明的新微生物菌株以及分别与二苯醚除草剂，即草枯醚的组合物，与其各组分单独施用相比，除草活性均协同地提高。
从表7-2可见，含根据本发明的新微生物菌株以及分别与N-酰苯胺除草剂，即苯噻草胺和丙草胺的组合物与其各组分单独施用相比，除草活性均协同地提高。
从表7-3可见，含根据本发明的新微生物菌株以及分别与硫代氨基甲酸酯除草剂，即杀草丹和草达灭的组合物与其各组分单独施用相比，除草活性均协同地提高。
表7-1
根据本发明的新微生物菌株和草枯醚的组合物的除草效果
Figure 941052532_IMG11
＊）在此情况下不含微生物
＊＊）在此情况下不含化学除草剂
表7-2
根据本发明的新微生物菌株和苯噻草胺、丙草胺的组合物的除草效果
Figure 941052532_IMG12
＊）在此情况下不含微生物
＊＊）在此情况下不含除草剂
表7-3
根据本发明的新微生物菌株和杀草丹、草达灭的组合物的除草效果
＊）在此情况下不含微生物
＊＊）在此情况下不含化学除草剂
实施例3
根据本发明的新微生物菌株和化学除草剂的杂草防除组合物对稗草的除草效果-乳液
在1/1000公亩盆内的低地土中播种稗草籽，并培育从这些草籽长出的植株至1.5叶期，灌溉之，保持约5cm水深，用1.5μl（相当于正常剂量的十分之一）按制剂实施例45-46所述的方法制备的乳液（除了采用的是不同的菌株和除草剂外）处理。然后让植株在白天和黑夜期间保持15℃的温室中生长。处理20天后，计算各盆中存留的数量。根据下列公式计算对稗草的防除效果，结果示于表8中。
防除效果＝ (未处理组存留的数量-处理组存留的数量)/(未处理组存留的数量) ×100
表中，A、E、I和L表示剂量为括号中数值的下列除草剂。
剂量（g/10公亩）
A：草枯醚  （27）
E：苯噻草胺  （12）
I：丁草胺  （6）
L：杀草丹  （21）
从表8中可见，含根据本发明的新微生物菌株以及分别与二苯醚除草剂，即草枯醚的组合物与其各组分单独施用相比，除草活性均协同地提高。从表8中可见，含根据本发明的新微生物菌株以及分别与N-酰苯胺除草剂，即苯噻草胺和丙草胺的组合物的情况下，与它们单个施用相比，除草活性均协同地提高。
从表8中可见，含根据本发明的新微生物菌株以及分别与硫代氨基甲酸酯，即杀草丹和草达灭的组合物与其各组分单独施用相比，除草活性均协同地提高。
表8
根据本发明的新微生物菌株和化学除草剂的组合物的除草效果
＊）在此情况下不含微生物
＊＊）在此情况下不含化学除草剂
实施例4
根据本发明的新微生物菌株和化学除草剂对稗草和阔叶杂草的防治效果
在1/1000公亩盆内的低地土中分别播种稗草、莫伦藤和窄叶泽泻并培育至1.5叶期，将盆灌溉约3cm水深，用1.5mg（相当于标准剂量的十分之一）的如制剂实施例24-31所述制备的不同组合物（除了采用各种菌株和除草剂外）处理。然后让小苗白天和黑夜保持在15℃的温室中生长。处理20天后，计算各盆中存留的数量。根据下列公式计算对稗草、莫伦滕和窄叶泽泻的防除效果，结果示于表9-1至9-3中。
防除效果＝ (未处理组存留的数量-处理组存留的数量)/(未处理组存留的数量) ×100
表中，P-S表示剂量为括号中数值的下列除草剂。
剂量（g/10公亩）
P：苄嘧黄隆  （0.7）
Q：吡噻黄隆  （0.2）
R：吡唑特  （30）
S：西草净  （7.5）
表9-1
根据本发明的新微生物菌株和化学除草剂的组合物的对稗草的防除效果
Figure 941052532_IMG15
＊）在此情况下不含微生物
＊＊）在此情况下不含化学除草剂
表9-2
根据本发明的新微生物菌株和化学除草剂对莫伦滕的除草效果
Figure 941052532_IMG16
＊）在此情况下不含微生物
＊＊）在此情况下不含化学除草剂
表9-3
根据本发明的新微生物菌株和化学除草剂对窄叶泽泻的除草效果
＊）在此情况下不含微生物
＊＊）在此情况下不含化学除草剂
从表9-1可见，含根据本发明的新微生物菌株以及分别与磺酰脲除草剂，即苄嘧黄隆和吡嘧黄隆、二嗪除草剂，即吡唑特或三嗪除草剂，即西草净的组合物与其各组分单独施用相比，对稗草的除草活性均协同地提高。
从表9-2和9-3可见，含根据本发明的新微生物菌株以及分别与磺酰脲除草剂，即苄嘧黄隆和吡噻黄隆、二嗪除草剂，即吡唑特或三嗪除草剂，即西草净的组合物与其各组分单独施用相比，对阔叶杂草，即莫伦滕或窄叶泽泻的除草活性均有所提高。
从中还可见，含根据本发明的新微生物菌株以及分别与磺酰脲除草剂，即苄嘧黄隆和吡嘧黄隆、二嗪除草剂，即吡唑特或三嗪除草剂，即西草净的组合物与其各组分单独施用相比，对阔叶杂草即莫伦滕或窄叶泽泻均显示出充分的杂草防除效果并且观察到增加的实施效益。
从上述结果可以理解到，含有根据本发明的对稗草有致病力的新微生物菌株与磺酰脲除草剂如苄嘧黄隆和吡嘧黄隆、二嗪除草剂如吡唑特或三嗪除草剂如西草净（所述除草剂一直用来防治阔叶杂草）组合的组合物，虽然对阔叶杂草除草效果的提高不大，但可以显示对稗草提高的杂草防除效果，且也显示出对阔叶杂草具有增宽的杀草谱和提高的杂草防除效果。因此认为这些组合物具有实用效益。
与阔叶杂草除草剂组合使用使得降低本发明新微生物的分生孢子剂量成为可能。从而使降低生产成本成为可能。
实施例5
通过根据本发明的新微生物菌株和化学除草剂的增效作用降低分生孢子剂量
在1/1000公亩盆内的低地土中播种稗草籽，培育从草籽生长出的植株至1.5叶期，灌溉之，保持约5cm水深，用预定量的分生孢子和前述量的（相当于正常剂量的十分之一）阔叶杂草除草剂苄嘧黄隆处理。然后让植株在白天和黑夜期间保持15℃的温室中生长。处理20天后，计算各个分别盆中存留的数量。根据下列公式计算对稗草的防除效果，结果示于表10中。
防除效果＝ (未处理组存留的数量-处理组存留的数量)/(未处理组存留的数量) ×100
表10
因本发明的新微生物菌株和化学除草剂的增效作用导致的分生孢子剂量的降低
Figure 941052532_IMG18

Claims (24)

1、一种生物学上纯的Drechslera  monoceras  var.microsporus菌株，它对作物无致病力但对稗草具有致病力，且具有图1所示的酯酶酶谱类型。
2、权利要求1的生物学上纯的菌株，其中Drechslera monoceras var. microsporus菌株为FERM BP-3864、FERM BP-4498、FERM BP-4499、FERM BP-4500、FERM BP-4501、FERM BP-4502或FERM BP-4503。
3、一种杂草防除组合物，含有杂草防除有效量的至少一种Drechslera monoceras var.microsporus菌株和农业上可接受的载体或稀释剂，所述的菌株对作物无致病力，但对稗草具有致病力且具有图1所示的酯酶酶谱类型。
4、权利要求3的杂草防除组合物，其中Drechslera monoceras var. microsporus菌株为FERM BP-3864、FERM BP-4498、FERM BP-4499、FERM BP-4500、FERM BP-4501、FERM BP-4502或FERM BP-4503。
5、一种杂草防除组合物，包含有杂草防除有效量的至少一种Drechslera monoceras var. microsporus菌株，有效量的至少一种化学除草剂和农业上可接受的载体或稀释剂，所述菌株对作物无致病力而对稗草具有致病力且具有图1所示的酯酶酶谱类型。
6、权利要求5的杂草防除组合物，其中Drechslera monoceras var. microsporus菌株为FERM BP-3864、FERM BP-4498、FERM BP-4499、FERM BP-4500、FERM BP-4501、FERM BP-4502或FERM BP-4503。
7、权利要求5的杂草防除组合物，其中化学除草剂是至少一种选自下列的化学除草剂：二苯醚除草剂、N-酰-苯胺除草剂、硫代氨基甲酸酯除草剂、二嗪除草剂、磺酰脲除草剂和三嗪除草剂。
8、权利要求5的杂草防除组合物，其中化学除草剂是至少一种选自下列的二苯醚除草剂：草枯醚（化学名：2，4，6-三氯苯基-4-硝基苯基醚）、甲氧除草醚（化学名：2，4-二氯苯基-4-硝基-3-甲氧苯基醚）和甲羧除草醚（化学名：2，4-二氯苯基-3-甲氧羰基-4-苯基醚）。
9、权利要求5的杂草防除组合物，其中化学除草剂是至少一种选自下列的N-酰苯胺除草剂：苯噻草胺（化学名：2-苯并噻唑-3-基氧代-N-甲基乙酰替苯胺）、丙草胺（化学名：2-氯-2′，6′-二乙基-N-（丙氧乙基）乙酰替苯胺）、萘丙胺（化学名：2-（2-萘氧基）丙酰替苯胺）、NSK-850（化学名：N-（2，7-（3′-甲氧）-噻吩基甲基-N-氯乙酰-2，6-二甲基苯胺）、丁草胺（化学名：2-氯-2′，6′-二乙基-N-（丁氧甲基）乙酰替苯胺）、敌稗（化学名：3′，4′-二氯丙酰苯胺）和Clomeprop（化学名：2-（2，4-二氯-3-甲苯氧基）丙酰苯胺）。
10、权利要求5的杂草防除组合物，其中化学除草剂是至少一种选自下列的硫代氨基甲酸酯化学除草剂：杀草丹（化学名：S-（4-氯苯甲基）-N，N-二乙基硫代氨基甲酸酯）、哌草丹（化学名：S-（1-甲基-1-苯乙基）-哌啶-1-硫代甲酸酯）、草达灭（化学名：S-乙基-N，N-六亚甲基硫代氨基甲酸酯）和esprocarb（化学名：S-苄基-N-乙基-N-（1，2-二甲基丙基）硫代氨基甲酸酯）。
11、权利要求5的杂草防除组合物，其中化学除草剂是：恶草酮（化学名：5-叔丁基-3-（2，4-二氯-5-异丙氧苯基）-1，3，4-噁唑-2（3H）-酮）、或吡唑特（化学名：4-（2，4-二氯苯甲酰）-1，3-二甲基-1H-吡唑-5-基-对甲苯磺酸酯），或其混合物。
12、权利要求5的杂草防除组合物，其中化学除草剂是苄嘧黄隆（化学名：2-[3-（4，6-二甲基-嘧啶-2-基）脲基磺酰甲基]苯甲酸甲酯或吡嘧黄隆（化学名：5-[3-（4，6-二甲氧基-嘧啶-2-基）脲基磺酰基]-1-甲基吡唑-4-羧酸乙酯），或其混合物。
13、权利要求5的杂草防除方法，其中化学除草剂是西草净（化学名：2，4-双（乙氨基）-6-甲硫基-1，3，5-三嗪）。
14、一种杂草防除方法，它包含为防治稗草，施用有效量的至少一种Drechslera monoceras var. microsporus菌株于所需防除的地点，其中所述的菌株对作物无致病力而对稗草有致病力且具有图1所示的酯酶酶谱类型。
15、权利要求14的杂草防除方法，其中所述的至少一种Drechslera monoceras var. microsporus菌株是FERM BP-3864、FERM BP-4498、FERM BP-4499、FERM BP-4500、FERM BP-4501、FERM BP-4502或FERM BP-4503。
16、权利要求14的杂草防除方法，它包括，为防治稗草，施用有效量的至少一种Drechslera monoceras var. microsporus菌株和至少一种化学除草剂于所需防除的地点，其中所述的菌株对作物无致病力而对稗草有致病力且具有图1所示的酯酶酶谱类型。
17、权利要求16的杂草防除方法，其中Drechslera monoceras var. microsporus菌株是FERM BP-3864、FERM BP-4498、FERM BP-4499、FERM BP-4500、FERM BP-4501、FERM BP-4502或FERM BP-4503。
18、权利要求16的杂草防除方法，其中化学除草剂是至少一种选自下列的化学除草剂：二苯醚除草剂、N-酰苯胺除草剂、硫代氨基甲酸酯除草剂、二嗪除草剂、磺酰脲除草剂和三嗪除草剂。
19、权利要求16的杂草防除方法，其中化学除草剂是至少一种选自下列的二苯醚除草剂：草枯醚（化学名：2，4，6-三氯苯基-4-硝基苯基醚）、甲氧除草醚（化学名：2，4-二氯苯基-4-硝基-3-甲氧苯基醚）和甲羧除草醚（化学名：2，4-二氯苯基-3-甲氧羰基-4-苯基醚）。
20、权利要求16的杂草防除方法，其中化学除草剂是至少一种选自下列的N-酰苯胺除草剂：苯噻草胺（化学名：2-苯并噻唑-2-基氧代-N-甲基乙酰替苯胺）、丙草胺（化学名：2-氯-2′，6′-二乙基-N-（正丙氧乙基）乙酰替苯胺）、萘丙胺（化学名：2-（2-萘氧基）丙酰苯胺）、NSK-850（化学名：N-（2，7-（3′-甲氧基）-噻吩甲基-N-氯乙酰-2，6-二甲基苯胺）、丁草胺（化学名：2-氯-2′，6′-二乙基-N-（丁氧甲基）乙酰替苯胺）、敌稗（化学名：3′，4′-二氯丙酰苯胺）和Clomeprop（化学名：2-（2，4-二氯-3-甲基苯氧基）丙酰苯胺）。
21、权利要求16的杂草防除方法，其中化学除草剂是至少一种选自下列的硫代氨基甲酸酯除草剂：杀草丹（化学名：S-（4-氯苄基）-N，N-二乙基硫代氨基甲酸酯）、哌草丹（化学名：S-（1-甲基-1-苯乙基）-哌啶-1-硫代甲酸酯）、草达灭（化学名：S-乙基-N，N-六亚甲基硫代氨基甲酸酯）和esprocarb（化学名：S-苄基-N-乙基-N-（1，2-二甲基丙基）硫代氨基甲酸酯）。
22、权利要求16的杂草防除方法，其中化学除草剂为恶草酮（化学名：5-叔丁基-3-（2，4-二氯-5-异丙氧苯基）-1，3，4-噁唑-2（3H）-酮）或吡唑特（化学名：4-（2，4-二氯苯甲酰基）-1，3-二甲基-1H-吡唑-5-基-对甲苯磺酸酯），或其混合物。
23、权利要求16的杂草防除方法，其中化学除草剂为苄嘧黄隆（化学名：2-[3-（4，6-二甲基-嘧啶-2-基）脲基磺酰甲基]苯甲酸甲酯）或吡嘧黄隆（化学名：5-[3-（4，6-二甲氧基-嘧啶-2-基）脲基磺酰基]-1-甲基吡唑-4-羧酸乙酯），或其混合物。
24、权利要求16的杂草防除方法，其中化学除草剂为丙草净（化学名：2，4-双（乙氨基）-6-甲硫基-1，3，5-三嗪）。
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