CN110236976B - 一种包含稳定溶菌酶的口腔护理组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及了一种包含稳定溶菌酶的口腔护理组合物;具体地说,本发明涉及包含溶菌酶,EGCg,以及口腔可接受载体的口腔护理组合物,其中EGCg能稳定组合物中的溶菌酶。
Description
技术领域
本发明涉及口腔护理技术领域,尤其是涉及一种包含稳定溶菌酶的口腔护理组合物。
背景技术
溶菌酶(lysozyme)又称胞壁质酶(muramidase)或N-乙酰胞壁质聚糖水解酶(N-acetylmuramide glycanohydrlase),是一种能水解致病菌中黏多糖的碱性酶。溶菌酶主要通过破坏细胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之间的β-1,4糖苷键,使细胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽,导致细胞壁破裂内容物逸出而使细菌溶解。溶菌酶还可与带负电荷的病毒蛋白直接结合,与DNA、RNA、脱辅基蛋白形成复盐,使病毒失活。因此,该酶具有抗菌、消炎、抗病毒等作用。因其能有效抑制口腔有害菌生长而被添加于口腔护理产品中。如广州康添普生物科技有限公司推出的fe生物酶牙膏,能明显减少细菌,改善口腔多种问题。
例如,中国专利公开号CN 104983600 A公开了一种溶菌酶口腔护理保健液,其组份及重量百分比如下:溶菌酶0.01-10%,茶多酚0.01-10%,清凉剂0.1-10%,甜味剂1-20%,清香剂0.01-0.6%,增溶剂0.1-6%,纯净水98.77%43.4%,维生素B120.001-0.1ppm,即在上述溶剂中加入维生素B12,使其浓度维持在0.001-0.1ppm。该溶菌酶口腔护理保健液具有杀菌、抗炎症、治疗口腔溃疡、清除口气口臭等多重功效。
再例如,中国专利公开号CN 103705912 A公开了一种复合溶菌酶口腔喷雾剂,它由下列成分按重量百分比的成分组成:溶葡萄球菌酶3-7%、溶菌酶20-25%、茶多酚0.02-0.4%、橄榄油1.5-5%、维生素C1-10%、山梨醇1-3%、卵磷脂0.8-2%、黄原胶0.01-0.07%、其余为纯水,各组分之和为百分之百。该口腔喷雾剂对口腔溃疡、龋齿、口疮、口臭、舌炎、咽喉炎等口腔疾病都有非常好的预防和治疗效果。
又例如,中国专利公开号CN 103736084 A公开了一种复合溶菌酶口腔喷雾剂,由下列成分按重量百分比的成分组成:溶葡萄糖球菌酶3-7%,溶菌酶20-25%,茶多酚0.02-0.4%,橄榄油1.5-5%,维生素C 1-10%,山梨醇1-3%,卵磷脂0.8-2%,黄原胶0.01-0.07%,其余为蒸馏水。该口腔喷雾剂能治愈各种口腔、咽喉疾病,同时也可用于口腔疾病预防和日常口腔保健,用后口气清新、无毒副作用的高效、广谱杀菌。
上述都是溶菌酶使用的有效例子。但是,溶菌酶作为蛋白质的一种,存在存放过程中因发生蛋白质老化导致酶活力降低,进而影响其抗菌能力的问题。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种包含稳定溶菌酶的口腔护理组合物。该口腔护理组合物,其中EGCg能稳定组合物中的溶菌酶。
为解决上述技术问题,本发明采用如下的技术方案:
一种包含稳定溶菌酶的口腔护理组合物,包括
溶菌酶,
EGCg,以及
口腔可接受的载体;且
所述溶菌酶和EGCg的质量比为100:0.5-1:1。
优选地,所述溶菌酶和EGCg的质量比为20:1-1:1;更优选地,所述溶菌酶和EGCg的质量比为10:1-1:1;最优选地,所述溶菌酶和EGCg的质量比为1:1。
作为技术方案的进一步改进,所述溶菌酶在口腔护理组合物中的添加量为0.001%至0.5%;优选地,所述溶菌酶在口腔护理组合物中的添加量为0.01%至0.5%;更优选地,所述溶菌酶在口腔护理组合物中的添加量为0.1%-0.5%。
作为技术方案的进一步改进,所述EGCg在口腔护理组合物中的添加量为0.001%-0.5%;优选地,所述EGCg在口腔护理组合物中的添加量为0.01%-0.5%;更优选地,所述EGCg在口腔护理组合物中的添加量为0.1%-0.5%。
作为技术方案的进一步改进,所述EGCg来源于茶多酚。
作为技术方案的进一步改进,所述EGCg来源于茶提取液。
优选地,所述茶提取液来源于茶的酵母发酵产物。
优选地,所述茶为黄山毛峰、龙井或碧螺春。
作为技术方案的进一步改进,所述口腔护理组合物还进一步包含儿茶素(catechin,C)、表儿茶素(epicatechin,EC)、没食子儿茶素(gallocatechin,GC)、表没食子儿茶素(epigallocatechin,EGC)、儿茶素没食子酸酯(catechin gallate,CG)、表儿茶素没食子酸酯(epicatechin gallate,ECG)、没食子儿茶素没食子酸酯(gallocatechingallate,GCG)、绿原酸的一种或几种的组合。
作为技术方案的进一步改进,所述口腔护理组合物包括牙膏、凝胶、漱口水或牙粉。
本发明所记载的任何范围包括端值以及端值之间的任何数值以及端值或者端值之间的任意数值所构成的任意子范围。
如无特殊说明,本发明中的各原料均可通过市售购买获得,本发明中所用的设备可采用所属领域中的常规设备或参照所属领域的现有技术进行。
与现有技术相比较,本发明具有如下有益效果:
口腔护理组合物含有特定比例的溶菌酶和EGCg,其中EGCg能稳定组合物中的溶菌酶。
具体实施方式
为了更清楚地说明本发明,下面结合优选实施例对本发明做进一步的说明。本领域技术人员应当理解,下面所具体描述的内容是说明性的而非限制性的,不应以此限制本发明的保护范围。
作为本发明的一个方面,本发明一种包含稳定溶菌酶的口腔护理组合物,包括
溶菌酶,
EGCg,以及
口腔可接受的载体;且
所述溶菌酶和EGCg的质量比不大于100:0.5
本申请意外的发现,口腔护理组合物含有特定比例的溶菌酶和EGCg,其中EGCg能稳定组合物中的溶菌酶。也即,在特定比例的EGCg能够显著地防止溶菌酶在口腔护理组合物中的酶活力降低,进而防止溶菌酶的抗菌能力降低。
EGCg(Epigallocatechin gallate)即表没食子儿茶素没食子酸酯,是绿茶茶多酚的主要组成成分,是从茶叶中分离得到的儿茶素类单体,具有抗菌、抗病毒、抗氧化、抗动脉硬化、抗血栓形成、抗血管增生、抗炎以及抗肿瘤作用。
溶菌酶(lysozyme)又称胞壁质酶(muramidase)或N-乙酰胞壁质聚糖水解酶(N-acetylmuramide glycanohydrlase),是一种能水解致病菌中黏多糖的碱性酶。溶菌酶主要通过破坏细胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之间的β-1,4糖苷键,使细胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽,导致细胞壁破裂内容物逸出而使细菌溶解。溶菌酶存在于人和动物的多种组织、分泌液以及某些植物、微生物中。自然界中,以鸟类和家禽的蛋清中溶菌酶含量最多,其中鸡蛋清中约含0.3%的溶菌酶。
在本发明的某些优选实施例中,所述溶菌酶来源于鸡蛋清溶菌酶,动物溶菌酶,植物溶菌酶,微生物溶菌酶或细菌噬菌体溶菌酶。
在本发明的某些优选实施例中,所述溶菌酶和EGCg的质量比不大于100:0.5,例如,但不限于,不大于100:1,75:1,50:1,40:1,30:1,20:1,10:1,5:1:3:1,2:1,或者200:1-1:1,100:1-1:1,75:1-1:1,50:1-1:1,20:1-1:1,10:1-1:1,90:1-5:1,80:1-10:1,70:1-15:1,60:1-20:1,或40:1-30:1。
在本发明的某些实施例中,所述溶菌酶在口腔护理组合物中的添加量为0.0001%至0.5%,例如,但不限于,0.0005-0.5%,0.001%-0.5%,0.0005%-0.45%,0.005%-0.45%,0.01-0.4%,0.01%-0.35%,0.01%-0.3%,0.01%-0.25%,0.01%-0.2%,0.01%-0.15%,0.01%-0.1%,0.01%-0.05%,0.05-0.4%,0.05%-0.35%,0.05%-0.3%,0.05%-0.25%,0.05%-0.2%,0.05%-0.15%,0.05%-0.1%,0.1-0.4%,0.1%-0.35%,0.1%-0.3%,0.1%-0.25%,0.1%-0.2%,或0.1%-0.15%。
在本发明的某些优选实施例中,所述溶菌酶在口腔护理组合物中的添加量为0.01%至0.5%,例如,但不限于,0.0005-0.5%,0.001%-0.5%,0.0005%-0.45%,0.005%-0.45%,0.01-0.4%,0.01%-0.35%,0.01%-0.3%,0.01%-0.25%,0.01%-0.2%,0.01%-0.15%,0.01%-0.1%,0.01%-0.05%,0.05-0.4%,0.05%-0.35%,0.05%-0.3%,0.05%-0.25%,0.05%-0.2%,0.05%-0.15%,0.05%-0.1%,0.1-0.4%,0.1%-0.35%,0.1%-0.3%,0.1%-0.25%,0.1%-0.2%,或0.1%-0.15%。
在本发明的某些优选实施例中,所述EGCg来源于茶多酚。茶多酚,又名抗氧灵、维多酚、防哈灵,是茶叶中所含的一类多羟基类化合物,简称TP,主要化学成分为儿茶素类(黄烷醇类)、黄酮及黄酮醇类、花青素类、酚酸及缩酚酸类、聚合酚类等化合物的复合体;其中儿茶素类化合物为茶多酚的主体成分,占茶多酚总量的65%~80%。儿茶素类化合物主要包括EGCg(Epigallocatechin gallate),儿茶素(catechin,C)、表儿茶素(epicatechin,EC)、没食子儿茶素(gallocatechin,GC)、表没食子儿茶素(epigallocatechin,EGC)、儿茶素没食子酸酯(catechin gallate,CG)、表儿茶素没食子酸酯(epicatechin gallate,ECG)、没食子儿茶素没食子酸酯(gallocatechin gallate,GCG)。因此,一般茶多酚中可能含有一定量本发明原料EGCg,可以作为本发明原料EGCg的来源。茶多酚可通过使用有机溶剂萃取茶叶并浓缩后获得。
在本发明的某些优选实施例中,所述EGCg来源于茶提取液。茶提取液是从茶叶片通过水、酒精等溶剂提取后所得的溶液,主要包括茶多酚、咖啡因、芳香油、水分、矿物质、色素、碳水化合物、蛋白质、氨基酸、维生素等。
在本发明的某些优选实施例中,所述茶提取液是通过茶的酵母发酵制得的产物。
茶的酵母发酵产物是指由天然酿酒酵母菌与绿茶提取物发酵得来,可以提供茶多酚、茶多糖、茶氨酸等多种绿茶抗氧化、抗衰老成分。通过酵母菌发酵,提供多种氨基酸、有机酸等多种成分,协同作用,具有显著的清除自由基、抑制酪氨酸酶作用,美白等功效。可市售购买,比如安琪酵母销售的茶酵母提取物。
在本发明的某些优选实施例中,所述茶优选为黄山毛峰、龙井或碧螺春。
在本发明的某些优选实施例中,所述口腔护理组合物还进一步包括儿茶素(catechin,C)、表儿茶素(epicatechin,EC)、没食子儿茶素(gallocatechin,GC)、表没食子儿茶素(epigallocatechin,EGC)、儿茶素没食子酸酯(catechin gallate,CG)、表儿茶素没食子酸酯(epicatechin gallate,ECG)、没食子儿茶素没食子酸酯(gallocatechingallate,GCG)、绿原酸的一种或几种的组合。
在本发明的某些优选实施例中,所述口腔护理组合物包括牙膏、凝胶、漱口水或牙粉。
本发明所述“口腔可接受的载体”是指适用于配制本发明所公开的口腔护理组合物的任何媒介物;当口腔可接受的载体以本发明公开的量在口中保留而不吞咽持续如本发明所需的足以允许与牙齿表面有效接触的时间段时对哺乳动物无害;总体上,口腔可接受的载体即使无意被吞咽也不会有害;合适的口腔可接受的载体包括,例如,一种或多种下列物质:水、增稠剂、缓冲剂、湿润剂、表面活性剂、研磨剂、甜味剂、调味剂、视觉辅助剂(例如,色素、染料或其混合物)、抗龋齿剂、抗菌剂、增白剂、脱敏剂、维生素、防腐剂、酶以及其混合物等。
在本发明的某些优选实施例中,所述口腔护理组合物包括牙膏、凝胶、漱口水或牙粉。
在本发明的某些优选实施例中,所述口腔护理组合物中包括保湿剂、增稠剂、和/或表面活性剂等辅料。
“保湿剂”是防止口腔护理组合物脱水变硬的成分。示例的保湿剂包括但不限于如甘油、丙二醇、山梨醇等。按质量百分比计,保湿剂在口腔护理组合物中的含量通常为10-80%。
“增稠剂”是一种增加溶液或液体/固体混合物的粘度,但基本上不会改变其性质的物质。加入增稠剂的目的是为了给产品提供骨架、流动性和稳定性。示例的增稠剂包括,但不限于,以下一种或多种:羟乙基纤维素、羧甲基纤维素及其盐(例如羧甲基纤维素钠)、角叉菜聚糖(carrageenan)、羧基乙烯基聚合物、黄原胶(xanthangμm)、卡拉胶、明胶、支链淀粉、海藻酸钠等。在某些实施方式中,所述增稠剂包括黄原胶、卡拉胶或羧甲基纤维素钠中的一种或多种。增稠剂在口腔护理组合物中的重量比例通常为0.2-2%。
“表面活性剂”在口腔护理组合物中起到乳化香精和起泡的目的,在某种程度上可以辅助羟基磷灰石-多羧基化合物复合物的充分和完全分散。示例的表面活性剂包括,但不限于,阴离子表面活性剂,例如十二烷基磺酸钠;两性表面活性剂,例如甜菜碱;氨基酸表面活性剂如月桂醇肌氨酸钠和非离子表面活性剂。表面活性剂在口腔护理组合物中的重量比例通常为0.5-2.5%。
根据本申请的某些优选实施方式,所述口腔护理组合物中可进一步包括抗菌剂、抗龋剂、抗敏剂和/或美白剂等活性成分。
“抗菌剂”是指能够在一定时间内,使口腔护理组合物中某些微生物的生长或繁殖保持在必要水平以下的化学物质。示例的抗菌剂包括但不限于:四氢姜黄素、氯化十六烷基吡啶、三氯生等。
“抗龋剂”是指对龋病有抑制作用的物质,例如可以通过降低牙釉质羟基磷灰石的溶解度增强牙齿的抗龋能力的物质,或控制菌斑、抑制细菌生长的物质。示例的抗龋剂包括但不限于含磷试剂(磷酸钙、甘油磷酸镁、乳磷酸钙、酪蛋白酸钠等)、或精氨酸及其衍生物。优选地,在某些具体实施方式中,所述抗龋剂包括氟化物离子源。
“抗敏剂”是指通过抑制神经冲动或能够封闭牙本质小管或降低其通透性,从而预防或治疗牙本质过敏症的物质。示例的抗敏剂包括但不限于:甘草酸二钾、氟化钾、硝酸钾、氯化钾等钾离子源。
“美白剂”是指对牙齿能起到美白作用的物质。示例的美白剂包括但不限于:过氧化物漂白剂。
实施例1-6、对比例1-2:
一种包含稳定溶菌酶的口腔护理组合物,包括如下表1重量配比的原料,总量按100份计。
表1:
表1中,所述培养基是胰蛋白胨大豆肉汤培养基;该培养基为市售商品(例如可从美国Becton Dickinson公司购得)。
将实施例1-6和对比例1-2组合物在常温下放置30天后,检测组合物中各细菌的含量,数据如下表2-1和表2-2所示。
表2-1:各实施例和对比例中起始溶菌酶MIC值
表2-2:将上述对比例和实施例在常温下放置1个月后,再次检测MIC值
从上表1、表2可以得出,所述溶菌酶和EGCg的质量比大于100:0.5时,溶菌酶不能够防止溶菌酶在口腔护理组合物中的酶活力降低,进而导致溶菌酶的抗菌能力降低;在溶菌酶浓度相同的条件下,当溶菌酶和EGCg的质量比≤100:0.5时,可以保持口腔组合物的最低抑菌浓度≤650ppm;当溶菌酶和EGCg的质量比≤100:1时,可以保持口腔组合物的最低抑菌浓度≤350ppm;当溶菌酶和EGCg的质量比≤100:5时,可以保持口腔组合物的最低抑菌浓度≤160ppm;当溶菌酶和EGCg的质量比≤100:10时,可以保持口腔组合物的最低抑菌浓度≤10ppm。
因此,所述溶菌酶和EGCg的质量比为100:0.5-1:1范围内,能够显著地防止溶菌酶在口腔护理组合物中的酶活力降低,进而防止溶菌酶的抗菌能力降低。
本发明实施例或对比例中,MIC值的检测方法如下:
按表1配制溶液,使对比例1、对比例2及实施例1-6的样品中溶菌酶的溶度都为20000ppm,按比例添加EGCg配制比例1、对比例2及实施例1-6的样品溶液,使溶菌酶与EGCg的比例分别为1000:0,1000:1,1000:5,1000:10,1000:20,1000:50,1000:100,1000:1000。配制4000ppm CPC溶液作为试验的阳性对照品,所述CPC是指Cetylpyridinium Chloride,即十六烷基氯化吡啶;实验步骤如下:
1)先在96孔板中2-12列添加100μL的培养基,再在第1排每个孔注入200μL样品和对照溶液;
2)用一支8通道移液器缓慢地吸打溶液,以混匀第1列中每一个孔中的溶液,混匀后(反复吸打10-15次),用8通道移液器从第1列的孔中转移100μL溶液到第2列的孔中,然后继续用8通道移液器混匀第2列孔中的溶液,混匀后,再转移100μL到第3列孔中,不断重复直至全部12列孔中的溶液都混匀,最后从第12列的孔中转移出100μL溶液并弃掉,得到了一系列经2倍稀释含梯度浓度的样品和对照溶液;
3)每孔均添加100μL调节好浓度的菌悬液,这样最后96孔板中的每个孔中应均有200μL溶液,然后将96孔板置于微生物培养箱中培养18-24h;
4)配制0.05%的刃天青溶液,用移液器每个孔注入一滴刃天青溶液,观察刃天青颜色变化,确定孔板中细菌的活度,结合酶标仪所测数据确定MIC值。结果见表2-1和2-2所示。
实施例7-11:
一种包含稳定EGCg的口腔护理组合物,包括如下表3配比的原料,总量按100份计制备成牙膏。
表3:
将实施例7-11各组合物产品老化30天后,其中溶菌酶活度检测如下表4所示:
表4:
实施例7 | 实施例8 | 实施例9 | 实施例10 | 实施例11 | |
溶菌酶活度 | 12% | 60% | 18% | 65% | 80% |
在牙膏配方中,当所述溶菌酶和EGCg的质量比为100:0.5-1:1范围内时,可以在老化30天后,溶菌酶的活度依然≥60%。
综上所述,口腔护理组合物含有重量比100:0.5-1:1的溶菌酶和EGCg,其中EGCg能稳定组合物中的溶菌酶。也即,在特定比例范围内的EGCg能够显著地防止溶菌酶在口腔护理组合物中的酶活力降低,进而防止溶菌酶的抗菌能力降低。
显然,本发明的上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例,而并非是对本发明的实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说,在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无法对所有的实施方式予以穷举。凡是属于本发明的技术方案所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之列。
Claims (16)
1.一种包含稳定溶菌酶的口腔护理组合物,其特征在于:包括
溶菌酶,
EGCg,以及
口腔可接受的载体;且
所述溶菌酶和EGCg的质量比为100:0.5-1:1。
2.根据权利要求1所述包含稳定溶菌酶的口腔护理组合物,其特征在于:所述溶菌酶和EGCg的质量比为20:1-1:1。
3.根据权利要求1所述包含稳定溶菌酶的口腔护理组合物,其特征在于:所述溶菌酶和EGCg的质量比为10:1-1:1。
4.根据权利要求3所述包含稳定溶菌酶的口腔护理组合物,其特征在于:所述溶菌酶和EGCg的质量比为1:1。
5.根据权利要求1所述包含稳定溶菌酶的口腔护理组合物,其特征在于:所述溶菌酶在口腔护理组合物中的添加量为0.0001%至0.5%。
6.根据权利要求5所述包含稳定溶菌酶的口腔护理组合物,其特征在于:所述溶菌酶在口腔护理组合物中的添加量为0.001%至0.5%。
7.根据权利要求6所述包含稳定溶菌酶的口腔护理组合物,其特征在于:所述溶菌酶在口腔护理组合物中的添加量为0.01%至0.5%。
8.根据权利要求1所述包含稳定溶菌酶的口腔护理组合物,其特征在于:所述EGCg在口腔护理组合物中的添加量为0.0001%-0.5%。
9.根据权利要求8所述包含稳定溶菌酶的口腔护理组合物,其特征在于:所述EGCg在口腔护理组合物中的添加量为0.001%-0.5%。
10.根据权利要求9所述包含稳定溶菌酶的口腔护理组合物,其特征在于:所述EGCg在口腔护理组合物中的添加量为0.01%-0.5%。
11.根据权利要求1所述包含稳定溶菌酶的口腔护理组合物,其特征在于:所述EGCg来源于茶多酚。
12.根据权利要求1所述包含稳定溶菌酶的口腔护理组合物,其特征在于:所述EGCg来源于茶提取液。
13.根据权利要求12所述包含稳定溶菌酶的口腔护理组合物,其特征在于:所述茶提取液来源于茶的酵母发酵产物。
14.根据权利要求13所述包含稳定溶菌酶的口腔护理组合物,其特征在于:所述茶为黄山毛峰、龙井或碧螺春。
15.根据权利要求1所述包含稳定溶菌酶的口腔护理组合物,其特征在于:所述口腔护理组合物还进一步包含儿茶素、表儿茶素、没食子儿茶素、表没食子儿茶素、儿茶素没食子酸酯、表儿茶素没食子酸酯、没食子儿茶素没食子酸酯、绿原酸的一种或几种的组合。
16.根据权利要求1所述包含稳定溶菌酶的口腔护理组合物,其特征在于:所述口腔护理组合物包括牙膏、凝胶、漱口水或牙粉。
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CN103736084A (zh) * | 2013-12-24 | 2014-04-23 | 童渝 | 一种复合溶菌酶口腔喷雾剂及其制备方法 |
CN104800095A (zh) * | 2015-04-22 | 2015-07-29 | 江苏雪豹日化有限公司 | 一种生物溶菌酶复合制剂及其制备方法 |
CN104983600A (zh) * | 2015-06-01 | 2015-10-21 | 湖北神地生物科技有限公司 | 溶菌酶口腔护理保健液及其制备方法 |
CN107468587A (zh) * | 2017-09-14 | 2017-12-15 | 好维股份有限公司 | 一种包含稳定多酚的口腔护理组合物 |
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- 2019-06-06 CN CN201910491972.8A patent/CN110236976B/zh active Active
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