KR20180075987A - 발효녹차 추출물을 유효성분으로 함유하는 구강세균 억제 및 항염 효과가 우수한 구강용 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 발효녹차 추출물을 함유하는 구강용 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 차나무 잎에 아스퍼질러스속(Aspergillus sp .) 균주를 접종하고 특정 발효조건 하에서 발효시켜 얻은 발효녹차를 용매를 사용하여 추출하여 얻은 발효녹차 추출물을 유효성분으로 함유함으로써 충치 원인균인 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans)의 번식을 억제하고, 구강 내 염증유발 사이토카인, 특히 IL-8의 발현을 억제하여, 우수한 구강세균 억제와 항염 효과를 동시에 제공하는 구강용 조성물에 관한 것이다.

Description

발효녹차 추출물을 유효성분으로 함유하는 구강세균 억제 및 항염 효과가 우수한 구강용 조성물{Oral composition comprising fermented green tea extract having excellent antibacterial effect on oral bacteria and anti-inflammatory effect}
본 발명은 아스퍼질러스속 균주 발효 녹차추출물을 유효성분으로 함유하는 구강세균 억제 및 항염효과가 우수한 구강용 조성물에 관한 것이다.
치아는 인산칼슘(Calcium phosphate)으로 이루어진 무기질로서 그 질환은 크게 충치와 치주질환이다. 이중 충치는 어린이부터 성인까지 치과질병의 가장 큰 부분을 차지하고 있으며 발생빈도가 높아지고 있다. 대한치과의사협회의 보고에 따르면, 아동의 90% 이상이 치아 우식(Dental caries)을 경험하며, 성인의 80% 이상이 잇몸질환을 갖고 있다고 한다. 이런 질환을 일으키는 주요한 원인은 구강내의 미생물에 의한 감염으로 세균, 음식물, 타액의 상호작용에 의해 유발된다. 즉, 구강 내 세균의 발육에 필요한 영양분과 수분이 음식물과 타액, 치온구액 등에 의하여 계속 공급되고 구강내의 환경이 미생물이 발육하기에 적합한 온도(37℃), pH(중성 부근)를 갖는다.
치주질환을 유발하는 대표적인 미생물로 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans)와 플레보텔라 인터메디아(Prevotella intermedia)가 있다. 이런 미생물들은 음식물 내에 존재하는 자당(Sucrose)을 포도당(Glucose)과 과당(Fructose)으로 생성하는 미생물 대사과정을 일으켜 포도당의 중합체인 불용성 글루칸(Glucan)을 치면에 형성한다. 이러한 과정에서 글루칸에 의해 구강 내 다른 미생물들과 치면에 부착하여 치면세균막, 즉 플라그(Dental plaque)가 형성된다. 형성된 플라그의 내부에 스트렙토코커스 뮤탄스를 포함한 젖산균에 의해 축적된 젖산이 치아표면의 에나멜을 용해시켜 충치가 발생된다. 또한 그러한 각종균의 증식에 따른 산물들에 의해 치욕이 용해되므로 치주질환이 발생되게 된다.
치주질환은 흔히 풍치라고도 하는데, 병의 정도에 따라 치은염(gingivitis)과 치주염(periodontitis)으로 나뉜다. 비교적 가볍고 회복이 빠른 형태의 치주질환으로 잇몸 즉, 연조직에만 국한된 형태를 치은염이라고 하고, 이러한 염증이 잇몸과 잇몸뼈 주변까지 진행된 경우를 치주염이라고 한다.
또한 치은(잇몸)과 치아 사이에 V자 모양의 틈이 있는데, 치주질환은 이 홈(sulcus)의 잇몸 선 아랫부분을 세균이 공격하여 치주인대와 인접조직을 손상시키는 것을 말한다. 염증이 진행되어 더 많은 조직이 손상되면서 홈이 치주낭(periodontal pocket)으로 발전하게 되며, 치주염이 심할수록 치주낭의 깊이가 깊어지게 된다. 치주낭이 깊어지면서 치주인대에 염증이 생기게 되고 골소실이 일어나기도 한다.
상기 충치 및 치주질환을 억제하기 위해서 항균물질인 소듐 바이카보네이트(NaHCO3), 트리클로산(Triclosan, C12H7Cl3O2), 폴리포스페이트(Polyphosphate) 및 플루오르화나트륨(NaF), 반코마이신(Vancomycin), 클로르헥시딘(Chlorhexidine) 및 스피라마이신(Spiramycin) 등의 항생 물질, 염화나트륨(NaCl), 알란토인클로로히드록시 알루미늄(Allantoine Chlorohydroxy Aluminum), 아미노카프론산(Aminocaproic Acid), 초산토코페롤(tocopherol acetate) 등의 합성원료, 또는 유기/무기 불소가 사용되어 왔다. 그러나 상기 방법들은 충치 예방에는 효과가 있으나, 구토, 설사, 및 항생물질에 대한 내성이 발생하는 단점이 있어 사용이 제한되고 있다. 특히 종래 충치, 치주염과 같은 세균 감염질환에 대해서는 항생제의 사용이 일반적이었으나 항생제는 인체의 유익한 세균까지 모두 해칠 뿐만 아니라, 과용할 경우 내성균의 출현, 환자의 면역능력 저하, 이에 따른 감염질환의 만성화, 균교대증 등과 같은 부작용을 유발시킨다.
따라서, 부작용이 없으며 유해 구강미생물에 대하여 선택적으로 항균활성이 높은 천연물질 개발이 필요하며, 최근 치·의학계에서는 천연식물 등을 이용한 민간전통의학의 효용성을 찾고 극대화하기 위한 수많은 연구가 이루어지고 있다. 최근 자연 추출물에 대한 관심이 높아지면서 각종 식물에 대한 연구가 활발히 진행되고 있으며, 구강에의 효과들이 알려지면서 많은 추출물들이 잇몸질환예방 및 구취 억제와 관련된 구강조성물에 응용되고 있다.
그러나 많은 식물추출물들이 구강위생의 증진목적으로 배합되어 사용되어 오고 있으나, 대개의 경우 빈약한 항균 효과를 가지거나 단순히 소염, 수렴, 지혈, 혈액순환 촉진과 같은 추상적인 효능을 통하여 치주질환의 발생을 예방한다는 정도만을 나타내고 있다.
녹차(Green tea/Thea sinensis Linnaeus)는 차나무과(Theaceae)에 속하는 상록 교목 또는 관목이다. 녹차는 물 다음으로 널리 소비되는 음료로 그 효능 효과에 대해서는 오래 전부터 연구되어 왔다. 그 잎으로부터 녹차, 홍차, 우롱차 등이 생산된다. 녹차는 차잎, 줄기 또는 꽃을 증기시킴으로써 산화 관련 효소들을 불활성 시키고, 폴리페놀 성분을 안정하게 유지하여 얻어진다. 녹차에서 발견되는 폴리페놀 성분은 플라보놀과 카테킨 성분으로 알려져 있으며, 특허출원 제2010-0048323호와 특허출원 제2010-0048323호에서 밝힌 것과 같이, 항산화, 항암, 항염증, 항균 등의 다양한 효능 효과를 가지고 있는 것으로 알려져 있다. 그러나 문헌 [여생규 외 5명, 녹차, 오룡차 및 홍차 추출물의 항균효과, 한국식품영양과학회지, 1995. 4. 30., 제24권 2호 pp. 293~298]에 따르면, 녹차, 오룡차, 및 홍차와 같은 발효차에 비해 비발효차인 증제차와 볶음차가 항균작용이 크게 나타나는 것으로 확인되었으며, 특히 충치 원인균인 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans)에 대해서는 발효 정도가 큰 차일수록 항균 작용이 떨어지는 것으로 나타났다.
이와 같은 종래 연구결과에 따라, 발효녹차 및 추출물을 활용하여 구강 내 세균 및 염증 억제 활성을 제공할 수 있는 제품을 개발하고자 하는 연구노력은 거의 이루어지고 있지 아니한 실정이다.
대한민국 특허출원 제2010-0048323호 대한민국 특허출원 제2014-0146449호 대한민국 특허출원 제2011-0107337호 대한민국 특허출원 제2015-0038323호
여생규 외 5명, 녹차, 오룡차 및 홍차 추출물의 항균효과, 한국식품영양과학회지, 1995. 4. 30., 제24권 2호 pp 293~298.
천연물 추출물 중 녹차 추출물은 항균 및 항염 효과가 알려져 있으나, 구강세균 억제력과 항염력이 낮은 문제점이 있다. 또한, 발효녹차 추출물의 경우, 미백 활성과 같은 효과들이 알려져 있지만, 구강에 적용하여 항균 및 항염 효과에 대한 연구는 사실상 전무하다. 따라서 본 발명자들은 이러한 문제점을 인지하고 발효녹차 추출물을 연구한 결과, 녹차잎에 아스퍼질러스속 균주, 바람직하게는 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae)를 발효균주로 사용하여 수득한 발효녹차, 구체적으로 발효녹차잎의 추출물(이하, ‘아스퍼질러스속 균주로 발효하여 얻은 발효녹차의 추출물’ 또는 '아스퍼질러스속 균주 발효 녹차추출물'로 지칭함)이 기존 녹차, 구체적으로 녹차잎 추출물 및 다른 발효균주를 사용하여 발효시켜 얻은 발효녹차, 더 구체적으로 발효녹차잎 추출물보다 우수한 구강세균 억제 및 항염 효과를 제공할 수 있음을 확인하여 본 발명을 완성하게 되었다.
따라서 본 발명은 아스퍼질러스속 균주-발효녹차 추출물을 유효성분으로 함유하는 구강세균 억제 및 구강염증 억제 효과가 뛰어난 구강용 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 아스퍼질러스속 균주-발효녹차 추출물을 유효성분으로 함유하는 구강세균 억제능 및 구강염증 억제능이 우수한 구강용 조성물을 제공한다.
본 발명은 아스퍼질러스속 균주-발효녹차 추출물을 유효성분으로 하는 구강세균 억제 및 항염 효과가 우수한 구강용 조성물에 관한 것으로 상기 발효녹차 추출물은 충치에 직접적인 영향을 끼치는 스트렙토코커스 뮤탄스(Stereptococcus mutans)균의 증식 억제 활성이 뛰어나며, 구강염증 유발 물질인 사이토카인, 특히 IL-8의 발현 억제 활성이 우수하므로, 구강 세정 또는 청결 용품 분야에서 다양하게 활용 가능하다.
본 발명은 아스퍼질러스속 균주-발효녹차 추출물을 유효성분으로 함유하는 구강세균 억제 및 구강염증 억제용 조성물에 관한 것이다.
이하, 본 발명을 보다 상세히 설명한다.
본 발명의 아스퍼질러스속 균주-발효녹차 추출물은 차나무의 잎을 일광건조 또는 열풍건조한 후, 세말화하고, 이 세말화한 잎에 아스퍼질러스속 균주를 접종한 후 일정시간 발효시킨 다음, 에탄올과 같은 유기 용매로 추출함으로써 제조할 수 있다.
본 발명에서 발효균주로 사용되는 아스퍼질러스속 균주의 예로는 아스퍼질러스 니거(Aspergillus niger), 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae), 아스퍼질러스 테레우스(Aspergillus terreus), 아스퍼질러스 소재(Aspergillus sojae), 및 아스퍼질러스 푸미가투스(Aspergillus fumigatus) 등을 들 수 있으며, 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae)를 사용하는 것이 바람직하다.
본 발명의 발효녹차는 녹차잎에 아스퍼질러스속 균주를 1.0 x 105 내지 1.0 x 109CFU/g의 농도로 접종한 다음, 20 내지 30℃, 3 내지 15일간 발효시킴으로써 제조할 수 있으며, 바람직하게는 25 내지 30℃에서, 5 내지 10일간 발효시키는 것이 좋다.
본 발명에 따른 아스퍼질러스속 균주로 발효하여 얻은 발효녹차의 추출물은 차잎에 상기 발효균주를 접종하여 상기 발효기간 동안 발효시킨 후, 얻은 녹차(녹차잎) 발효물에 추출용매로서 탄소수 1 내지 4의 저급알코올(예를 들어, 주정) 또는 물과 탄소수 1 내지 4의 저급알코올의 혼합물을 가하고 추출하여 얻은 추출물이다. 추출용매로 사용되는 저급알코올의 농도는 10 내지 100%, 바람직하게는 30% 내지 70%인 것이 바람직하다.
본 발명에 따른 아스퍼질러스속 균주로 발효하여 얻은 발효녹차의 추출물의 추출 방법은 냉침 추출법, 주정 추출법 등 통상의 추출법을 이용할 수 있으며, 발효녹차에서 최대한의 유효 성분을 추출할 수 있는 방법이라면 특별히 한정되지는 않는다.
본 발명에 따른 아스퍼질러스속 균주로 발효하여 얻은 발효녹차의 추출물은 조성물 총 중량에 대하여 1 내지 90 중량%로 혼합될 수 있으며, 바람직하게는 1 내지 30 중량%, 더욱 바람직하게는 1 내지 10 중량%로 혼합될 수 있다. 1 중량% 미만으로 함유되었을 경우, 충분한 구강세균 억제 및 항염 효과를 기대할 수 없으며, 90 중량% 초과로 함유되었을 경우, 구강에 적용시 자극이 있어 사용감이 좋지 않다.
본 발명에 따른 아스퍼질러스속 균주로 발효하여 얻은 발효녹차의 추출물을 함유하는 구강용 조성물은 구강세균 억제 및 항염이 목적이라면 그 제형에 있어서 특별히 한정되지 않는다. 구체적으로 예를 들면, 치약, 구강용 세정제, 치아 미백제 등의 제형을 가질 수 있다.
본 발명에 따른 아스퍼질러스속 균주로 발효하여 얻은 발효녹차의 추출물을 함유하는 구강용 조성물은 제형 및 사용 목적에 따라 통상적으로 사용하는 연마제, 습윤제, 보조 기포제, 결합제, 감미제, pH 조절제, 방부제, 약효성분, 향료, 증백제, 색소, 용제 등을 함유할 수 있다.
이하에서는 시험예 및 제조예를 들어 본 발명의 구성 및 효과를 보다 구체적으로 설명한다. 그러나 이들 시험예 및 제조예는 본 발명에 대한 이해를 돕기 위해 예시의 목적으로만 제공된 것일 뿐 본 발명의 범주 및 범위가 하기 예에 의해 제한되는 것은 아니다.
[제조예 1] 아스퍼질러스속 균주 발효녹차의 추출물 제조
배양용기에 차나무로부터 채집한 녹차 생엽(입수처: 제주 오설록 농장) 100kg을 넣고, 물 30∼60kg을 첨가한 다음, 발효균주로 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae(입수처: 한국미생물보존센터(KCCM)))를 녹차 중량 대비 0.1∼5 중량% 첨가한 후, 녹차 생엽과 발효균주가 잘 섞이도록 교반하여 원료 혼합물을 준비하였다. 인큐베이터에서, 상기 혼합물의 배양온도를 30℃, pH를 약 3.0으로 유지하면서 약 15일 동안 발효시켰다.
이렇게 얻어진 발효녹차 100g에 추출용매로서 70% 에탄올 수용액 5ℓ를 넣고, 3회 환류 추출한 다음, 상온에서 1일간 침적시켰다. 그 후, 여과포 여과와 원심분리를 통해 잔사와 여액을 분리하고, 분리된 여액을 감압 농축하여 발효녹차 추출물 35g을 얻었다.
[비교제조예 1] 일반녹차 추출물의 제조
녹차 생엽(입수처: 제주 오설록 농장) 100g에 70% 에탄올 수용액 5ℓ를 넣고, 3회 환류 추출한 다음, 상온에서 1일간 침적시켰다. 그 후, 여과포 여과와 원심분리를 통해 잔사와 여액을 분리하고, 분리된 여액을 감압 농축하여 일반녹차 추출물 약 30g을 얻었다.
[비교제조예 2] 정제수로 추출한 발효녹차의 추출물의 제조
정제수를 추출 용매로 사용한 것을 제외하고는 상기 제조예 1과 동일한 방법으로 추출하여 발효녹차 추출물 약 33g을 수득하였다.
[비교제조예 3] 건조효모로 발효한 발효녹차의 추출물 제조
건조 효모(Saccharomyces cerevisiae(입수처: KCCM))를 발효균주로 사용한 것을 제외하고는 상기 제조예 1과 동일한 방법으로 발효녹차 추출물 약 32g을 얻었다.
[비교제조예 4] 발효조건을 달리한 발효녹차의 추출물의 제조
25℃에서 24시간 동안 발효시킨 것을 제외하고는 상기 제조예 1과 동일한 방법으로 발효녹차 추출물 약 32g을 얻었다.
[비교제조예 5] 발효조건과 발효 균주를 달리한 발효녹차의 추출물의 제조
건조 효모(Saccharomyces cerevisiae(입수처: KCCM))를 발효균주로 사용하고, 25℃에서 24시간 동안 발효시킨 것을 제외하고는 상기 제조예 1과 동일한 방법으로 발효녹차 추출물 약 32g을 얻었다.
[시험예 1] 발효녹차의 추출물별 구강세균 억제 효능 측정
스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans)를 35℃의 항온 배양기에서 24시간 동안 배양하여 지수기(Exponential phase)에 도달하였을 때 시험에 사용하였다. 96 well 플레이트에 첫 행을 제외하고 100㎕의 액체 배지(배지 1L에 대하여, Calf brains 7.7 g, Beef heart 9.8 g, 프로테오스펩톤 10.0 g, 덱스트로스 2.0 g, 염화나트륨 5.0 g, 디소듐포스페이트 2.5g, 탈이온수 잔량으로 함유)를 넣었다. 첫 행에는 제조예 1 및 비교제조예 1 내지 5를 2 %(w/w)의 농도로 첨가한 액체 배지 200㎕를 투입한 후, 농도가 1/2씩 희석되도록 연속 희석법(Serial dilution)을 7회 실행하였다. 시료가 첨가된 여러 농도의 배지에 앞서 24시간 배양한 스트렙토코커스 뮤탄스 균액을 농도 1 x 106 CFU/㎖로 접종하여 35℃ 항온 배양기에서 배양하였다. 액체 배지의 현탁도를 측정하고, 이 현탁도로부터 스트렙토코커스 뮤탄스의 성장이 저해된 최소 농도를 결정하였다. 총 3회 실험을 실시하여 얻은 최소 농도 평균값을 [표 1] 및 [표 2]에 나타내었다.
농도(%) CPC 제조예 1 비교제조예 1 비교제조예 2 비교제조예 3 비교제조예 4 비교제조예 5
2 - - - + + - +
1 - - + + + - +
0.5 - - + + + - +
0.25 - - + + + + +
0.125 - - + + + + +
0.0625 - - + + + + +
0.031 - + + + + + +
0.015 - + + + + + +
주) CPC: Cephalosporin C; -: 균이 성장하지 않음, + 균이 성장함
항균 물질 S. mutans에 대한 MIC 농도(%)
CPC (합성항균제) <0.015625
제조예 1 0.0625
비교제조예 1 2
비교제조예 2 >2
비교제조예 3 >2
비교제조예 4 0.5
비교제조예 5 >2
[표 1] 및 [표 2]를 통해 본 발명에 따른 제조예 1의 발효녹차 추출물은, 녹차잎의 발효 유무, 추출 용매, 발효 균주, 발효 조건, 또는 발효 균주와 발효 조건을 달리하여 수득한 녹차 추출물(즉, 비교제조예 1 내지 5)보다 스트렙토코커스 뮤탄스에 대한 항균 효과가 월등하게 우수한 것을 알 수 있었다. 특히, 추출 용매, 및 발효 균주에 의한 항균력 차이가 매우 크게 나타나는 것을 확인할 수 있었다.
[시험예 2] 발효녹차의 추출물별 항염 활성 측정
발효녹차의 추출물이 염증을 유발시키는 염증성 사이토카인의 생성을 억제하는 활성이 있는지 확인하기 위하여, 다음과 같은 실험을 수행하였다. 구강세포주인 YD 38 세포(한국세포주 은행)를 RPMI-1640 배지(10% FBS, 1% Penicillin-streptomycin 함유)에 희석하여 2 x 104 cell/well의 밀도로 분주(seeding)하고 24시간 동안 5% CO2, 37℃ 조건하에서 배양하였다. 시험 2일째에 멸균 PBS로 1회 세척한 후, 혈청과 항생제가 없는 RPMI-1640 200㎕를 분주한 다음 24시간 동안 5% CO2, 37℃ 조건하에서 배양하였다. 시험 3일째에 새로운 혈청과 항생제가 없는 RPMI-1640를 분주한 후, 여기에 제조예 1의 발효녹차 추출물과 비교제조예 1 내지 5의 추출물을 시험 농도 별로 처리 한 다음, LPS 5 ㎍/㎖ 농도로 처리하고 5% CO2, 37℃ 조건하에서 6시간 배양하였다. 시험 물질 처리 6시간 후, 세포 배양액을 회수하여 IL-8의 발현양을 ELISA 키트(BD PharMingen, CA, USA, R&D system, MN, USA)를 이용하여 평가하였다. 무처리군, LPS 단독 처리군, LPS와 시험물질 처리군에서 측정된 IL-8 발현양에 대하여 아래 도식을 통해 억제 정도를 수치화하였다. 이 수치가 높을수록 항염 효과가 우수하다는 것을 의미한다. 결과는 [표 3]에 나타내었다.
% of inhibition = [(cytokine 분비량 LPS - cytokine 분비량 CTL) - (cytokine 분비량 Test - cytokine 분비량 CTL)/ (cytokine 분비량 LPS - cytokine 분비량 CTL)] X 100
항염 물질 % of inhibition
250ppm 125ppm 62ppm
아미노카프론산(합성항염물질) 56.13 38.96 37.6
제조예 1 72.09 62.23 12.07
비교제조예 1 -25.78 54.71 7.14
비교제조예 2 21.44 32.57 1.53
비교제조예 3 5.31 30.31 32.21
비교제조예 4 34.10 40.11 38.19
비교제조예 5 10.53 4.41 5.27
상기 [표 3]을 살펴보면 본 발명에 따른 제조예 1의 발효녹차의 추출물은 합성 항염 물질인 아미노카프론산보다 IL-8의 발현 억제능이 우수하다는 것을 알 수 있었다. 특히 비교제조예 1인 녹차추출물과 비교할 때, 제조예 1의 발효녹차의 추출물은 모든 시험 농도에서 현저히 높은 항염력을 나타내는 것을 확인할 수 있었다.
본 발명에 따른 아스퍼질러스속 균주 발효녹차의 추출물을 유효성분으로 하여, 하기 [표 4] 내지 [표 6]와 같은 제형 및 조성을 갖는 구강용 제품을 제조하였다.
[제형예 1] 치약의 제형예
성분명 중량비 (%)
1 정제수 잔량 (to 100)
2 일불소인산나트륨 0.76
3 발효녹차의 추출물 (제조예 1) 5.00
4 소르비톨액 (70%) 50.00
5 소듐 사카린 0.40
6 실리카 10.00
7 셀룰로오스검 1.00
8 조합향료 1.00
9 소듐라우릴설페이트 2.00
[제형예 2] 구강용 세정제의 제형예
성분명 중량비 (%)
1 정제수 잔량 (to 100)
2 플루오르화나트륨 0.03
3 발효녹차의 추출물 (제조예 1) 1.00
4 소르비톨액 (70%) 10.00
5 소듐 사카린 0.01
6 조합향료 0.10
[제형예 3] 치아 미백제의 제형예
성분명 중량비 (%)
1 폴리에틸렌글리콜 잔량 (to 100)
2 글리세린 35.00
3 함수규산 20.00
4 발효녹차의 추출물 (제조예 1) 10.00
5 일불소인산나트륨 0.76
6 소듐 사카린 0.30
7 폴리비닐피롤리돈 1.00
8 조합향료 1.00
9 라우릴황산나트륨 2.00

Claims (12)

  1. 아스퍼질러스속(Aspergillus sp .) 균주로 발효하여 얻은 발효녹차의 추출물을 유효성분으로 함유하는 구강 유해 세균 억제용 조성물.
  2. 제 1항에 있어서, 상기 아스퍼질러스속 균주는 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae)인 것을 특징으로 하는, 구강 유해 세균 억제용 조성물.
  3. 제 1항에 있어서, 상기 발효녹차의 추출물은 탄소수 1 내지 4의 알코올, 또는 물과 탄소수 1 내지 4의 알코올의 혼합용매를 추출용매로 사용하여 추출함으로써 수득된 것임을 특징으로 하는, 구강 유해 세균 억제용 조성물.
  4. 제 1항에 있어서, 상기 발효녹차의 추출물은 조성물 총 중량에 대하여 1 내지 90 중량%로 함유되는 것을 특징으로 하는, 구강 유해 세균 억제용 조성물.
  5. 제 1항에 있어서, 상기 구강 유해 세균은 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans)인 것을 특징으로 하는, 구강 유해 세균 억제용 조성물.
  6. 제 1항 내지 제 5항 중 어느 한 항에 있어서, 치약, 구강용 세정제 및 치아 미백제로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 제형을 갖는, 구강 유해 세균 억제용 조성물.
  7. 아스퍼질러스속(Aspergillus sp .) 균주로 발효하여 얻은 발효녹차의 추출물을 유효성분으로 함유하는 구강 염증 억제용 조성물.
  8. 제 7항에 있어서, 상기 아스퍼질러스속 균주는 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae)인 것을 특징으로 하는, 구강 염증 억제용 조성물.
  9. 제 7항에 있어서, 상기 발효녹차의 추출물은 탄소수 1 내지 4의 알코올, 또는 물과 탄소수 1 내지 4의 알코올의 혼합용매를 추출용매로 사용하여 추출함으로써 수득된 것임을 특징으로 하는, 구강 염증 억제용 조성물.
  10. 제 7항에 있어서, 상기 발효녹차의 추출물은 조성물 총 중량에 대하여 1 내지 90 중량%으로 함유되는 것을 특징으로 하는, 구강 염증 억제용 조성물.
  11. 제 7항에 있어서, 상기 구강염증은 IL-8에 의한 염증인 것을 특징으로 하는, 구강 염증 억제용 조성물.
  12. 제 7항 내지 제 11항 중 어느 한 항에 있어서, 치약, 구강용 세정제, 및 치아 미백제로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 제형을 갖는, 구강 염증 억제용 조성물.
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20230067052A (ko) * 2021-11-09 2023-05-16 주식회사 알씨케이 항균활성을 갖는 구강위생용 조성물
KR20230070144A (ko) 2021-11-13 2023-05-22 지성산업 주식회사 무화과추출물을 주성분으로 하는 무화과 세정수

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20100048323A (ko) 2008-10-30 2010-05-11 비티에스테크놀로지스(주) 스니핑 방지를 위한 키보드 보안 장치 및 방법
KR20110060238A (ko) * 2009-11-30 2011-06-08 (주)아모레퍼시픽 잇몸에 좋은 한방 발효 추출물을 함유하는 구강용 조성물
KR20110107337A (ko) 2008-12-18 2011-09-30 에디컨 엔도-서저리 인코포레이티드 조종 가능한 외과용 접근 장치 및 방법
WO2012043743A1 (ja) * 2010-09-30 2012-04-05 国立大学法人広島大学 抗菌組成物およびその利用
KR20140146449A (ko) 2013-06-17 2014-12-26 김철 조립식 축구장
KR20150038323A (ko) 2012-08-28 2015-04-08 알까뗄 루슨트 폴리시 기반 데이터센터 네트워크 자동화를 제공하는 시스템 및 방법

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20100048323A (ko) 2008-10-30 2010-05-11 비티에스테크놀로지스(주) 스니핑 방지를 위한 키보드 보안 장치 및 방법
KR20110107337A (ko) 2008-12-18 2011-09-30 에디컨 엔도-서저리 인코포레이티드 조종 가능한 외과용 접근 장치 및 방법
KR20110060238A (ko) * 2009-11-30 2011-06-08 (주)아모레퍼시픽 잇몸에 좋은 한방 발효 추출물을 함유하는 구강용 조성물
WO2012043743A1 (ja) * 2010-09-30 2012-04-05 国立大学法人広島大学 抗菌組成物およびその利用
KR20150038323A (ko) 2012-08-28 2015-04-08 알까뗄 루슨트 폴리시 기반 데이터센터 네트워크 자동화를 제공하는 시스템 및 방법
KR20140146449A (ko) 2013-06-17 2014-12-26 김철 조립식 축구장

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
여생규 외 5명, 녹차, 오룡차 및 홍차 추출물의 항균효과, 한국식품영양과학회지, 1995. 4. 30., 제24권 2호 pp 293~298.

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20230067052A (ko) * 2021-11-09 2023-05-16 주식회사 알씨케이 항균활성을 갖는 구강위생용 조성물
KR20230070144A (ko) 2021-11-13 2023-05-22 지성산업 주식회사 무화과추출물을 주성분으로 하는 무화과 세정수

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