CN110218651A - 一种高蛋白酵母抽提物的制备方法 - Google Patents

一种高蛋白酵母抽提物的制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种高蛋白酵母抽提物的制备方法，具体按照如下操作步骤：S1：酵母培养；S2：菌液裂解；S3：冷冻；S4：蛋白质析出；S5：纯化；S6：制粒。本发明通过蜗牛酶对酵母细胞进行处理，能够破坏酵母细胞的细胞壁，配合低温冷冻处理，使得酵母细胞充分破裂，有利于溶出酵母细胞内的蛋白质成分，有利于提高蛋白的产量，通过采用易挥发的盐酸对蛋白溶液进行处理，使得蛋白质变性后析出，清洗干燥后，获得纯净的蛋白成分，收集析出蛋白后可以利用盐酸的易挥发性重新收集盐酸，循环使用，降低成本。

Description

一种高蛋白酵母抽提物的制备方法
技术领域
本发明属于酵母提取物技术领域，具体涉及一种高蛋白酵母抽提物的制备方法。
背景技术
酵母蛋白是存在于天然酵母中的一种优质完全蛋白。酵母中的产朊假丝酵母和啤酒酵母最早被人们利用作为食品，它们的蛋白质含量超过了干重的一半。在获取酵母蛋白质时，传统的抽提方法获得的蛋白含量相对较低，均难以达到18%，在酵母细胞培养到蛋白抽提的各个步骤均存在物料浪费的现象，增加了企业成本，且用传统的盐析方式获取酵母蛋白时，酵母蛋白中会混入难以清除的盐离子，影响蛋白质的品质。
发明内容
本发明的目的在于提供一种高蛋白酵母抽提物的制备方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种高蛋白酵母抽提物的制备方法，具体按照如下操作步骤：
S1：酵母培养，在液体培养基中对酵母菌母株进行培养增殖，液体培养基的PH控制在5.5～6.5，温度保持34～38℃，氧气浓度18～22%，培养24～32小时，得酵母菌液；
S2：菌液裂解，将酵母菌液的温度自然冷却至30～32℃，向酵母菌液中加入酵母菌液体积的0.5～1%的蜗牛酶，混合搅拌均匀，恒温保存，静置处理30～50分钟，得酵母菌裂解液；
S3：冷冻，将酵母菌裂解液置于冷库中，于-18～-22℃条件下冷冻2～4小时后取出自然解冻；
S4：蛋白质析出，向解冻液中加入盐酸，直至解冻液的PH值调整至4.2～4.5，混合搅拌均匀后静置15～30分钟，有絮状蛋白质析出，之后使用离心机以4000～4100r/min离心处理15～20分钟，收集沉淀物，得蛋白膏，上清液收集备用；
S5：纯化，将蛋白膏使用4～6倍自身重量的蒸馏水进行清洗，得洁净蛋白膏，收集清洗液备用；
S6：制粒，将洁净蛋白膏配制成浑浊液经巴氏灭菌，之后用喷雾干燥机进行干燥，收集干燥颗粒得高蛋白酵母抽提物，密封保存。
优选的，步骤S1中培养液中酵母菌母株的初始浓度为30～50个/ml。
优选的，步骤S4的上清液和S5中清洗液混合后通过减压浓缩的方式收集混合液中的盐酸，得到浓度大于75%的盐酸溶液，循环使用。
优选的，步骤S6中经巴氏灭菌后，于无菌室中开口保温静置20～30分钟，期间不断搅拌，用于挥发残余盐酸成分。
本发明的技术效果和优点：
本发明通过蜗牛酶对酵母细胞进行处理，能够破坏酵母细胞的细胞壁，配合低温冷冻处理，使得酵母细胞充分破裂，有利于溶出酵母细胞内的蛋白质成分，有利于提高蛋白的产量，通过采用易挥发的盐酸对蛋白溶液进行处理，使得蛋白质变性后析出，清洗干燥后，获得纯净的蛋白成分，收集析出蛋白后可以利用盐酸的易挥发性重新收集盐酸，循环使用，降低成本。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
一种高蛋白酵母抽提物的制备方法，具体按照如下操作步骤：
S1：酵母培养，在液体培养基中对酵母菌母株进行培养增殖，培养液中酵母菌母株的初始浓度为30个/ml，液体培养基的PH控制在5.5，温度保持34℃，氧气浓度18%，培养24小时，得酵母菌液；
S2：菌液裂解，将酵母菌液的温度自然冷却至30℃，向酵母菌液中加入酵母菌液体积的0.5%的蜗牛酶，混合搅拌均匀，恒温保存，静置处理30分钟，得酵母菌裂解液；
S3：冷冻，将酵母菌裂解液置于冷库中，于-18℃条件下冷冻2小时后取出自然解冻；
S4：蛋白质析出，向解冻液中加入盐酸，直至解冻液的PH值调整至4.2，混合搅拌均匀后静置15分钟，有絮状蛋白质析出，之后使用离心机以4000r/min离心处理15分钟，收集沉淀物，得蛋白膏，上清液收集备用；
S5：纯化，将蛋白膏使用4倍自身重量的蒸馏水进行清洗，得洁净蛋白膏，收集清洗液备用，步骤S4的上清液和S5中清洗液混合后通过减压浓缩的方式收集混合液中的盐酸，得到浓度大于75%的盐酸溶液，循环使用；
S6：制粒，将洁净蛋白膏配制成浑浊液经巴氏灭菌，于无菌室中开口保温静置20分钟，期间不断搅拌，用于挥发残余盐酸成分，之后用喷雾干燥机进行干燥，收集干燥颗粒得高蛋白酵母抽提物，密封保存。
本实施例中蛋白的提取率为22.28%。
实施例2
一种高蛋白酵母抽提物的制备方法，具体按照如下操作步骤：
S1：酵母培养，在液体培养基中对酵母菌母株进行培养增殖，培养液中酵母菌母株的初始浓度为40个/ml，液体培养基的PH控制在6.0，温度保持36℃，氧气浓度20%，培养28小时，得酵母菌液；
S2：菌液裂解，将酵母菌液的温度自然冷却至31℃，向酵母菌液中加入酵母菌液体积的0.8%的蜗牛酶，混合搅拌均匀，恒温保存，静置处理40分钟，得酵母菌裂解液；
S3：冷冻，将酵母菌裂解液置于冷库中，于-20℃条件下冷冻3小时后取出自然解冻；
S4：蛋白质析出，向解冻液中加入盐酸，直至解冻液的PH值调整至4.4，混合搅拌均匀后静置24分钟，有絮状蛋白质析出，之后使用离心机以4050r/min离心处理17分钟，收集沉淀物，得蛋白膏，上清液收集备用；
S5：纯化，将蛋白膏使用5倍自身重量的蒸馏水进行清洗，得洁净蛋白膏，收集清洗液备用，步骤S4的上清液和S5中清洗液混合后通过减压浓缩的方式收集混合液中的盐酸，得到浓度大于75%的盐酸溶液，循环使用；
S6：制粒，将洁净蛋白膏配制成浑浊液经巴氏灭菌，于无菌室中开口保温静置25分钟，期间不断搅拌，用于挥发残余盐酸成分，之后用喷雾干燥机进行干燥，收集干燥颗粒得高蛋白酵母抽提物，密封保存。
本实施例中蛋白的提取率为22.88%。
实施例3
一种高蛋白酵母抽提物的制备方法，具体按照如下操作步骤：
S1：酵母培养，在液体培养基中对酵母菌母株进行培养增殖，培养液中酵母菌母株的初始浓度为50个/ml，液体培养基的PH控制在6.5，温度保持38℃，氧气浓度22%，培养32小时，得酵母菌液；
S2：菌液裂解，将酵母菌液的温度自然冷却至32℃，向酵母菌液中加入酵母菌液体积的1%的蜗牛酶，混合搅拌均匀，恒温保存，静置处理50分钟，得酵母菌裂解液；
S3：冷冻，将酵母菌裂解液置于冷库中，于-22℃条件下冷冻4小时后取出自然解冻；
S4：蛋白质析出，向解冻液中加入盐酸，直至解冻液的PH值调整至4.5，混合搅拌均匀后静置30分钟，有絮状蛋白质析出，之后使用离心机以4100r/min离心处理20分钟，收集沉淀物，得蛋白膏，上清液收集备用；
S5：纯化，将蛋白膏使用6倍自身重量的蒸馏水进行清洗，得洁净蛋白膏，收集清洗液备用，步骤S4的上清液和S5中清洗液混合后通过减压浓缩的方式收集混合液中的盐酸，得到浓度大于75%的盐酸溶液，循环使用；
S6：制粒，将洁净蛋白膏配制成浑浊液经巴氏灭菌，于无菌室中开口保温静置30分钟，期间不断搅拌，用于挥发残余盐酸成分，之后用喷雾干燥机进行干燥，收集干燥颗粒得高蛋白酵母抽提物，密封保存。
本实施例中蛋白的提取率为23.18%。
本发明通过蜗牛酶对酵母细胞进行处理，能够破坏酵母细胞的细胞壁，配合低温冷冻处理，使得酵母细胞充分破裂，有利于溶出酵母细胞内的蛋白质成分，有利于提高蛋白的产量，通过采用易挥发的盐酸对蛋白溶液进行处理，使得蛋白质变性后析出，清洗干燥后，获得纯净的蛋白成分，收集析出蛋白后可以利用盐酸的易挥发性重新收集盐酸，循环使用，降低成本。
最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换,凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (4)

1.一种高蛋白酵母抽提物的制备方法，其特征在于：具体按照如下操作步骤：
S1：酵母培养，在液体培养基中对酵母菌母株进行培养增殖，液体培养基的PH控制在5.5～6.5，温度保持34～38℃，氧气浓度18～22%，培养24～32小时，得酵母菌液；
S2：菌液裂解，将酵母菌液的温度自然冷却至30～32℃，向酵母菌液中加入酵母菌液体积的0.5～1%的蜗牛酶，混合搅拌均匀，恒温保存，静置处理30～50分钟，得酵母菌裂解液；
S3：冷冻，将酵母菌裂解液置于冷库中，于-18～-22℃条件下冷冻2～4小时后取出自然解冻；
S4：蛋白质析出，向解冻液中加入盐酸，直至解冻液的PH值调整至4.2～4.5，混合搅拌均匀后静置15～30分钟，有絮状蛋白质析出，之后使用离心机以4000～4100r/min离心处理15～20分钟，收集沉淀物，得蛋白膏，上清液收集备用；
S5：纯化，将蛋白膏使用4～6倍自身重量的蒸馏水进行清洗，得洁净蛋白膏，收集清洗液备用；
S6：制粒，将洁净蛋白膏配制成浑浊液经巴氏灭菌，之后用喷雾干燥机进行干燥，收集干燥颗粒得高蛋白酵母抽提物，密封保存。
2.根据权利要求1所述的一种高蛋白酵母抽提物的制备方法，其特征在于：步骤S1中培养液中酵母菌母株的初始浓度为30～50个/ml。
3.根据权利要求1所述的一种高蛋白酵母抽提物的制备方法，其特征在于：步骤S4的上清液和S5中清洗液混合后通过减压浓缩的方式收集混合液中的盐酸，得到浓度大于75%的盐酸溶液，循环使用。
4.根据权利要求1所述的一种高蛋白酵母抽提物的制备方法，其特征在于：步骤S6中经巴氏灭菌后，于无菌室中开口保温静置20～30分钟，期间不断搅拌，用于挥发残余盐酸成分。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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