CN110218651A - 一种高蛋白酵母抽提物的制备方法 - Google Patents

一种高蛋白酵母抽提物的制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN110218651A
CN110218651A CN201910529105.9A CN201910529105A CN110218651A CN 110218651 A CN110218651 A CN 110218651A CN 201910529105 A CN201910529105 A CN 201910529105A CN 110218651 A CN110218651 A CN 110218651A
Authority
CN
China
Prior art keywords
protein
yeast
hydrochloric acid
solution
obtains
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201910529105.9A
Other languages
English (en)
Inventor
朱永兵
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Lesaffre Mingguang Co Ltd
Original Assignee
Lesaffre Mingguang Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Lesaffre Mingguang Co Ltd filed Critical Lesaffre Mingguang Co Ltd
Priority to CN201910529105.9A priority Critical patent/CN110218651A/zh
Publication of CN110218651A publication Critical patent/CN110218651A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
    • C07K1/30—Extraction; Separation; Purification by precipitation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/06—Lysis of microorganisms
    • C12N1/063—Lysis of microorganisms of yeast

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)

Abstract

本发明公开了一种高蛋白酵母抽提物的制备方法，具体按照如下操作步骤：S1：酵母培养；S2：菌液裂解；S3：冷冻；S4：蛋白质析出；S5：纯化；S6：制粒。本发明通过蜗牛酶对酵母细胞进行处理，能够破坏酵母细胞的细胞壁，配合低温冷冻处理，使得酵母细胞充分破裂，有利于溶出酵母细胞内的蛋白质成分，有利于提高蛋白的产量，通过采用易挥发的盐酸对蛋白溶液进行处理，使得蛋白质变性后析出，清洗干燥后，获得纯净的蛋白成分，收集析出蛋白后可以利用盐酸的易挥发性重新收集盐酸，循环使用，降低成本。

Description

一种高蛋白酵母抽提物的制备方法
技术领域
本发明属于酵母提取物技术领域，具体涉及一种高蛋白酵母抽提物的制备方法。
背景技术
酵母蛋白是存在于天然酵母中的一种优质完全蛋白。酵母中的产朊假丝酵母和啤酒酵母最早被人们利用作为食品，它们的蛋白质含量超过了干重的一半。在获取酵母蛋白质时，传统的抽提方法获得的蛋白含量相对较低，均难以达到18%，在酵母细胞培养到蛋白抽提的各个步骤均存在物料浪费的现象，增加了企业成本，且用传统的盐析方式获取酵母蛋白时，酵母蛋白中会混入难以清除的盐离子，影响蛋白质的品质。
发明内容
本发明的目的在于提供一种高蛋白酵母抽提物的制备方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种高蛋白酵母抽提物的制备方法，具体按照如下操作步骤：
S1：酵母培养，在液体培养基中对酵母菌母株进行培养增殖，液体培养基的PH控制在5.5～6.5，温度保持34～38℃，氧气浓度18～22%，培养24～32小时，得酵母菌液；
S2：菌液裂解，将酵母菌液的温度自然冷却至30～32℃，向酵母菌液中加入酵母菌液体积的0.5～1%的蜗牛酶，混合搅拌均匀，恒温保存，静置处理30～50分钟，得酵母菌裂解液；
S3：冷冻，将酵母菌裂解液置于冷库中，于-18～-22℃条件下冷冻2～4小时后取出自然解冻；
S4：蛋白质析出，向解冻液中加入盐酸，直至解冻液的PH值调整至4.2～4.5，混合搅拌均匀后静置15～30分钟，有絮状蛋白质析出，之后使用离心机以4000～4100r/min离心处理15～20分钟，收集沉淀物，得蛋白膏，上清液收集备用；
S5：纯化，将蛋白膏使用4～6倍自身重量的蒸馏水进行清洗，得洁净蛋白膏，收集清洗液备用；
S6：制粒，将洁净蛋白膏配制成浑浊液经巴氏灭菌，之后用喷雾干燥机进行干燥，收集干燥颗粒得高蛋白酵母抽提物，密封保存。
优选的，步骤S1中培养液中酵母菌母株的初始浓度为30～50个/ml。
优选的，步骤S4的上清液和S5中清洗液混合后通过减压浓缩的方式收集混合液中的盐酸，得到浓度大于75%的盐酸溶液，循环使用。
优选的，步骤S6中经巴氏灭菌后，于无菌室中开口保温静置20～30分钟，期间不断搅拌，用于挥发残余盐酸成分。
本发明的技术效果和优点：
本发明通过蜗牛酶对酵母细胞进行处理，能够破坏酵母细胞的细胞壁，配合低温冷冻处理，使得酵母细胞充分破裂，有利于溶出酵母细胞内的蛋白质成分，有利于提高蛋白的产量，通过采用易挥发的盐酸对蛋白溶液进行处理，使得蛋白质变性后析出，清洗干燥后，获得纯净的蛋白成分，收集析出蛋白后可以利用盐酸的易挥发性重新收集盐酸，循环使用，降低成本。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
一种高蛋白酵母抽提物的制备方法，具体按照如下操作步骤：
S1：酵母培养，在液体培养基中对酵母菌母株进行培养增殖，培养液中酵母菌母株的初始浓度为30个/ml，液体培养基的PH控制在5.5，温度保持34℃，氧气浓度18%，培养24小时，得酵母菌液；
S2：菌液裂解，将酵母菌液的温度自然冷却至30℃，向酵母菌液中加入酵母菌液体积的0.5%的蜗牛酶，混合搅拌均匀，恒温保存，静置处理30分钟，得酵母菌裂解液；
S3：冷冻，将酵母菌裂解液置于冷库中，于-18℃条件下冷冻2小时后取出自然解冻；
S4：蛋白质析出，向解冻液中加入盐酸，直至解冻液的PH值调整至4.2，混合搅拌均匀后静置15分钟，有絮状蛋白质析出，之后使用离心机以4000r/min离心处理15分钟，收集沉淀物，得蛋白膏，上清液收集备用；
S5：纯化，将蛋白膏使用4倍自身重量的蒸馏水进行清洗，得洁净蛋白膏，收集清洗液备用，步骤S4的上清液和S5中清洗液混合后通过减压浓缩的方式收集混合液中的盐酸，得到浓度大于75%的盐酸溶液，循环使用；
S6：制粒，将洁净蛋白膏配制成浑浊液经巴氏灭菌，于无菌室中开口保温静置20分钟，期间不断搅拌，用于挥发残余盐酸成分，之后用喷雾干燥机进行干燥，收集干燥颗粒得高蛋白酵母抽提物，密封保存。
本实施例中蛋白的提取率为22.28%。
实施例2
一种高蛋白酵母抽提物的制备方法，具体按照如下操作步骤：
S1：酵母培养，在液体培养基中对酵母菌母株进行培养增殖，培养液中酵母菌母株的初始浓度为40个/ml，液体培养基的PH控制在6.0，温度保持36℃，氧气浓度20%，培养28小时，得酵母菌液；
S2：菌液裂解，将酵母菌液的温度自然冷却至31℃，向酵母菌液中加入酵母菌液体积的0.8%的蜗牛酶，混合搅拌均匀，恒温保存，静置处理40分钟，得酵母菌裂解液；
S3：冷冻，将酵母菌裂解液置于冷库中，于-20℃条件下冷冻3小时后取出自然解冻；
S4：蛋白质析出，向解冻液中加入盐酸，直至解冻液的PH值调整至4.4，混合搅拌均匀后静置24分钟，有絮状蛋白质析出，之后使用离心机以4050r/min离心处理17分钟，收集沉淀物，得蛋白膏，上清液收集备用；
S5：纯化，将蛋白膏使用5倍自身重量的蒸馏水进行清洗，得洁净蛋白膏，收集清洗液备用，步骤S4的上清液和S5中清洗液混合后通过减压浓缩的方式收集混合液中的盐酸，得到浓度大于75%的盐酸溶液，循环使用；
S6：制粒，将洁净蛋白膏配制成浑浊液经巴氏灭菌，于无菌室中开口保温静置25分钟，期间不断搅拌，用于挥发残余盐酸成分，之后用喷雾干燥机进行干燥，收集干燥颗粒得高蛋白酵母抽提物，密封保存。
本实施例中蛋白的提取率为22.88%。
实施例3
一种高蛋白酵母抽提物的制备方法，具体按照如下操作步骤：
S1：酵母培养，在液体培养基中对酵母菌母株进行培养增殖，培养液中酵母菌母株的初始浓度为50个/ml，液体培养基的PH控制在6.5，温度保持38℃，氧气浓度22%，培养32小时，得酵母菌液；
S2：菌液裂解，将酵母菌液的温度自然冷却至32℃，向酵母菌液中加入酵母菌液体积的1%的蜗牛酶，混合搅拌均匀，恒温保存，静置处理50分钟，得酵母菌裂解液；
S3：冷冻，将酵母菌裂解液置于冷库中，于-22℃条件下冷冻4小时后取出自然解冻；
S4：蛋白质析出，向解冻液中加入盐酸，直至解冻液的PH值调整至4.5，混合搅拌均匀后静置30分钟，有絮状蛋白质析出，之后使用离心机以4100r/min离心处理20分钟，收集沉淀物，得蛋白膏，上清液收集备用；
S5：纯化，将蛋白膏使用6倍自身重量的蒸馏水进行清洗，得洁净蛋白膏，收集清洗液备用，步骤S4的上清液和S5中清洗液混合后通过减压浓缩的方式收集混合液中的盐酸，得到浓度大于75%的盐酸溶液，循环使用；
S6：制粒，将洁净蛋白膏配制成浑浊液经巴氏灭菌，于无菌室中开口保温静置30分钟，期间不断搅拌，用于挥发残余盐酸成分，之后用喷雾干燥机进行干燥，收集干燥颗粒得高蛋白酵母抽提物，密封保存。
本实施例中蛋白的提取率为23.18%。
本发明通过蜗牛酶对酵母细胞进行处理，能够破坏酵母细胞的细胞壁，配合低温冷冻处理，使得酵母细胞充分破裂，有利于溶出酵母细胞内的蛋白质成分，有利于提高蛋白的产量，通过采用易挥发的盐酸对蛋白溶液进行处理，使得蛋白质变性后析出，清洗干燥后，获得纯净的蛋白成分，收集析出蛋白后可以利用盐酸的易挥发性重新收集盐酸，循环使用，降低成本。
最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换,凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (4)

1.一种高蛋白酵母抽提物的制备方法，其特征在于：具体按照如下操作步骤：
S1：酵母培养，在液体培养基中对酵母菌母株进行培养增殖，液体培养基的PH控制在5.5～6.5，温度保持34～38℃，氧气浓度18～22%，培养24～32小时，得酵母菌液；
S2：菌液裂解，将酵母菌液的温度自然冷却至30～32℃，向酵母菌液中加入酵母菌液体积的0.5～1%的蜗牛酶，混合搅拌均匀，恒温保存，静置处理30～50分钟，得酵母菌裂解液；
S3：冷冻，将酵母菌裂解液置于冷库中，于-18～-22℃条件下冷冻2～4小时后取出自然解冻；
S4：蛋白质析出，向解冻液中加入盐酸，直至解冻液的PH值调整至4.2～4.5，混合搅拌均匀后静置15～30分钟，有絮状蛋白质析出，之后使用离心机以4000～4100r/min离心处理15～20分钟，收集沉淀物，得蛋白膏，上清液收集备用；
S5：纯化，将蛋白膏使用4～6倍自身重量的蒸馏水进行清洗，得洁净蛋白膏，收集清洗液备用；
S6：制粒，将洁净蛋白膏配制成浑浊液经巴氏灭菌，之后用喷雾干燥机进行干燥，收集干燥颗粒得高蛋白酵母抽提物，密封保存。
2.根据权利要求1所述的一种高蛋白酵母抽提物的制备方法，其特征在于：步骤S1中培养液中酵母菌母株的初始浓度为30～50个/ml。
3.根据权利要求1所述的一种高蛋白酵母抽提物的制备方法，其特征在于：步骤S4的上清液和S5中清洗液混合后通过减压浓缩的方式收集混合液中的盐酸，得到浓度大于75%的盐酸溶液，循环使用。
4.根据权利要求1所述的一种高蛋白酵母抽提物的制备方法，其特征在于：步骤S6中经巴氏灭菌后，于无菌室中开口保温静置20～30分钟，期间不断搅拌，用于挥发残余盐酸成分。
CN201910529105.9A 2019-06-19 2019-06-19 一种高蛋白酵母抽提物的制备方法 Pending CN110218651A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910529105.9A CN110218651A (zh) 2019-06-19 2019-06-19 一种高蛋白酵母抽提物的制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910529105.9A CN110218651A (zh) 2019-06-19 2019-06-19 一种高蛋白酵母抽提物的制备方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN110218651A true CN110218651A (zh) 2019-09-10

Family

ID=67817687

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910529105.9A Pending CN110218651A (zh) 2019-06-19 2019-06-19 一种高蛋白酵母抽提物的制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110218651A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111018729A (zh) * 2019-12-03 2020-04-17 杭州三得农业科技有限公司 一种利用声障原理拆解蛋白质转化为氨基酸工艺

Non-Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
刘蓉 等: "啤酒废酵母中蛋白质提取工艺的研究", 《食品科学》 *
卢鑫 等: "马克斯克鲁维酵母DNA提取方法的比较", 《食品科技》 *
屈慧鸽 等: "白葡萄酒废酵母蛋白及多糖的提取工艺研究", 《食品科学》 *
徐那 等: "几种不同破壁方法对提取酵母内容物的影响", 《农产品加工》 *
房贤坤 等: "布拉酵母高密度培养条件的研究", 《安徽农业科学》 *
杨翠竹 等: "酵母细胞破壁技术研究与应用进展", 《食品科技》 *
郭龙 等: "啤酒废酵母蛋白的提取工艺研究", 《安徽农业科学》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111018729A (zh) * 2019-12-03 2020-04-17 杭州三得农业科技有限公司 一种利用声障原理拆解蛋白质转化为氨基酸工艺

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102028091B (zh) 一种纳豆菌发酵法制备低分子鱼肽的方法
JPS605278B2 (ja) 食品蛋白質含有物質製造に於ける核酸含有率低下方法
CN104531435A (zh) 酒精处理-复合抑制剂法益生菌活菌格瓦斯制造方法
CN105167064B (zh) 一种枸杞渣综合利用加工澄清枸杞汁的方法
CN108165423A (zh) 一种蓝莓发酵酒的酿造方法
WO2021012870A1 (zh) 一种低嘌呤豆浆粉及其制作方法
CN105754897A (zh) 一株食品发酵用的乳酸菌菌株、发酵剂及其应用
CN107495057A (zh) 一种复合乳酸菌固体饮料及其制备方法
CN110218651A (zh) 一种高蛋白酵母抽提物的制备方法
CN104498372B (zh) 尖孢镰刀菌bm201、其产生的复合果胶酶及复合果胶酶的制备方法和应用
CN111154666B (zh) 一株具有淀粉凝集活性的柠檬明串珠菌
CN104513752A (zh) 一种封窖皮泥的养护方法
CN109593627B (zh) 一种沙棘枸杞保健果酒的电场强化酿造工艺
CN105918738A (zh) 一种冰核蛋白-超声波协同提高柑橘汁冷冻浓缩晶体成核温度的方法
CN111165750A (zh) 一种利用发酵技术制备海参花粉剂的方法
CN114317657B (zh) 一种鱼骨肽及其制备方法和应用
CN102119759B (zh) 一种利用嗜酸乳杆菌从虾头和虾壳中提取蛋白质和甲壳素的方法
CN109576328A (zh) 一种龙须菜琼胶寡糖的制备方法
CN109619529A (zh) 一种白刺生物盐加工提取方法
CN112522121B (zh) 一种克鲁维酵母及其在生产木糖醇中的应用
Unger et al. Continuous aerobic process for distiller's yeast
CN114350731A (zh) 一种谷胱甘肽的制备方法
CN113444578A (zh) 一种微拟球藻精油的提取工艺
CN108070022B (zh) 一种海藻抗冻多肽浓缩液及其制备方法
US9382507B2 (en) Malolactic fermentation of wine

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20190910

RJ01 Rejection of invention patent application after publication