CN107495057A - 一种复合乳酸菌固体饮料及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种复合乳酸菌固体饮料，包含复合乳酸菌和冻干保护剂；所述冻干保护剂包括以重量份计的：葡萄糖5～10份，脱脂奶粉20～42份，所述乳酸菌包括植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌，所述植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌以及干酪乳杆菌的菌活性分别为：1.0×108～1.6×108CFU/g、1.0×108～1.3×108CFU/g、1.0×108～1.6×108CFU/g。本发明公开了一种复合乳酸菌固体饮料的制备方法。本发明是一种粉末状的复合乳酸菌，有效控制益生菌的菌数，便于储存，使乳酸菌能长时间保持活性。

Description

一种复合乳酸菌固体饮料及其制备方法
技术领域
本发明属于食品加工技术领域，具体设计一种复合乳酸菌固体饮料及其制备方法。
背景技术
乳酸菌是一类能利用可发酵糖产生大量乳酸的革兰氏阳性细菌通称。一般具有以下基本特性：革兰氏阳性、不形成芽孢、不形成色素、过氧化氢酶阴性、厌氧或兼性厌氧；可分解蛋白质，脂肪分解能力较弱；乳酸发酵类型分为同型发酵和异型发酵；营养要求较复杂，一般需要氨基酸类、B类维生素等生长因子，不能利用复杂的碳水化合物；能利用乳糖等。乳酸菌作为人体肠道极为重要的生理菌群，与人体健康息息相关，乳酸菌不仅具有赋予食品独特风味、改进食品品质的作用，还具有强大的生理功能，使其成为益生菌首选菌株。随着人们健康意识逐渐提高，越来越倾向于预防疾病，乳酸菌的应用会更加广泛。
乳酸菌中的双歧杆菌、乳杆菌菌株是常用的对人体有益的益生菌，目前市面上益生菌的产品很多，由于乳酸菌在干燥过程中破坏较为严重，所以目前大部分乳酸菌的产品以液体或者是乳状居多。然而，液体的乳酸菌长期存放容易失活，通常保存时间短。
发明内容
为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种复合乳酸菌固体饮料，是一种粉末状的复合乳酸菌，有效控制益生菌的菌数，便于储存，使乳酸菌能长时间保持活性。
本发明的另一目的在于提供一种复合乳酸菌固体饮料的制备方法，通过控制制备工艺提高乳酸菌的制剂的质量以及活菌的存活率和稳定性，便于保存和运输。
为解决上述问题，本发明所采用的技术方案如下：
一种复合乳酸菌固体饮料，其包含复合乳酸菌和冻干保护剂；所述冻干保护剂包括以重量份计的：
葡萄糖5～10份，
脱脂奶粉20～42份，
所述乳酸菌包括植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌，所述植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌以及干酪乳杆菌的菌活性分别为：1.0×108～1.6×108CFU/g、1.0×108～1.3×108CFU/g、1.0×108～1.6×108CFU/g。
作为进一步的方案，本发明所述的冻干保护剂还包括3～8重量份的乳糖。
作为进一步的方案，本发明所述的冻干保护剂还包括海藻糖，其中葡萄糖、乳糖与海藻糖以质量比为1:1:2的比例混合。
作为进一步的方案，本发明所述的植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌以及干酪乳杆菌的菌活性分别为：1.0×108CFU/100g、1.2×108CFU/g、1.0×108CFU/g。
作为进一步的方案，本发明所述的冻干保护剂还包括0.1～0.5重量份的麦芽糊精。
一种复合乳酸菌固体饮料的制备方法，包括
菌种活化步骤：将植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌的菌种分别加入灭菌的MRS液体培养基中，在37～42℃温度下单独活化培养20～24小时；
增值培养菌液步骤：将上述活化后的植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌混合后接种于灭菌的增值培养基中，于pH6.2～6.5、37℃条件下在发酵罐中恒温培养；期间每隔2～3h对培养液取样进行酸度、pH值及菌数的测定，培养24h后取出，在无菌条件下，先将培养物用无菌滤纸过滤，以除去培养基中的大部分固体颗粒；
离心收集菌体步骤：将上述过滤后的菌液转入到离心机中离心处理，收集离心后的菌泥；
制备菌悬液步骤：将上述菌泥称重后加入冻干保护剂，均匀混合后制成菌悬液，调节菌悬液的pH值至中性；
真空冷冻干燥步骤：将上述菌悬液放入低温冷冻冰箱进行预冻，以保证冻结完全和形成小的冰晶；预先开启冷冻干燥机，待冷阱温度降至-25℃以下，迅速将预冻好的菌体放进物料盘内，关闭舱门开启真空泵，进入真空冷冻干燥；得到复合乳酸菌冻干粉；
包装步骤：将上述复合乳酸菌冻干粉按照每次的服用的剂量进行包装。
作为进一步的方案，本发明所述的制备方法中，所述的增值培养基包含葡萄糖2.5-2.8wt％、CaCO30.5-0.75wt％、番茄汁22-28wt％，蛋白胨0.5-1wt％，牛肉膏0.5-1wt％，酵母粉0.4-0.6wt％、K2HPO4 0.1-0.2wt％、MgSO4 0.02-0.05wt％。
作为进一步的方案，本发明所述的制备方法中，所述的离心收集菌体步骤中，离心的条件为4000～8000r/min，离心时间为10～25分钟。
作为进一步的方案，本发明所述的制备方法中，所述的真空冷冻干燥步骤中，预冻的温度为-20～-30℃，预冻的时间为3-5小时。
相比现有技术，本发明的有益效果在于：
1.本发明所述的复合乳酸菌固体饮料是一种粉末状的复合乳酸菌，有效控制益生菌的菌数，便于储存，使乳酸菌能长时间保持活性；
2.本发明所述的复合乳酸菌固体饮料能有效改善人体菌群，可以通过刺激肠道内的免疫机能，将过低或过高的免疫活性调节至正常状态；可以抑制有害菌在肠内的繁殖，减少毒素，促进肠道蠕动，从而提高肠道机能，改善排便状况。
下面结合具体实施方式对本发明作进一步详细说明。
具体实施方式
本发明所述的复合乳酸菌固体饮料，其包含复合乳酸菌和冻干保护剂；所述冻干保护剂包括以重量份计的：
葡萄糖5～10份，
脱脂奶粉20～42份，
所述乳酸菌包括植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌，所述植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌以及干酪乳杆菌的菌活性分别为：1.0×108～1.6×108CFU/g、1.0×108～1.3×108CFU/g、1.0×108～1.6×108CFU/g。
在本发明中，冻干保护剂能在菌体表面形成保护层，减少细胞暴露于氧气和介质中的面积以及由于细胞壁损坏而引起的胞内物质泄漏同时还可使溶液呈过冷状态，降低细胞外溶质浓度，避免在冻干的过程中由于细胞脱水而导致细胞壁和细胞膜的塌陷、渗透压性休克、蛋白质变性等不良后果，可减轻和防止冷冻和干燥两个过程对菌体的损害，尽可能保持原有的各种生理生化特征和生物活性，提高冻干存活率。并且本发明中所采用的冻干保护剂同时作为复合乳酸菌固体饮料的辅料。优选的方案，本发明所述的冻干保护剂还包括3～8重量份的乳糖。
作为进一步的方案，本发明所述的冻干保护剂还包括海藻糖，其中葡萄糖、乳糖与海藻糖以质量比为1:1:2的比例混合。
作为进一步的方案，本发明所述的植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌以及干酪乳杆菌的菌活性分别为：1.0×108CFU/100g、1.2×108CFU/g、1.0×108CFU/g。
作为进一步的方案，本发明所述的冻干保护剂还包括0.1～0.5重量份的麦芽糊精。
一种复合乳酸菌固体饮料的制备方法，包括
菌种活化步骤：将植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌的菌种分别加入灭菌的MRS液体培养基中，在37～42℃温度下单独活化培养20～24小时；
增值培养菌液步骤：将上述活化后的植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌混合后接种于灭菌的增值培养基中，于pH6.2～6.5、37℃条件下在发酵罐中恒温培养；期间每隔2～3h对培养液取样进行酸度、pH值及菌数的测定，培养24h后取出，在无菌条件下，先将培养物用无菌滤纸过滤，以除去培养基中的大部分固体颗粒；
离心收集菌体步骤：将上述过滤后的菌液转入到离心机中离心处理，收集离心后的菌泥；
制备菌悬液步骤：将上述菌泥称重后加入冻干保护剂，均匀混合后制成菌悬液，调节菌悬液的pH值至中性；
真空冷冻干燥步骤：将上述菌悬液放入低温冷冻冰箱进行预冻，以保证冻结完全和形成小的冰晶；预先开启冷冻干燥机，待冷阱温度降至-25℃以下，迅速将预冻好的菌体放进物料盘内，关闭舱门开启真空泵，进入真空冷冻干燥；得到复合乳酸菌冻干粉；
包装步骤：将上述复合乳酸菌冻干粉按照每次的服用的剂量进行包装。
作为进一步的方案，本发明所述的制备方法中，所述的增值培养基包含葡萄糖2.5-2.8wt％、CaCO30.5-0.75wt％、番茄汁22-28wt％，蛋白胨0.5-1wt％，牛肉膏0.5-1wt％，酵母粉0.4-0.6wt％、K2HPO4 0.1-0.2wt％、MgSO4 0.02-0.05wt％。发酵罐中菌体生长的对数期缩短，菌数增长率增高，主要原因可能是罐内搅拌使培养基成分混合均匀，细胞内外物质交换更频繁，从而促进了乳酸菌的增殖。
作为进一步的方案，本发明所述的制备方法中，所述的离心收集菌体步骤中，离心的条件为4000～8000r/min，离心时间为10～25分钟。
作为进一步的方案，本发明所述的制备方法中，所述的真空冷冻干燥步骤中，预冻的温度为-20～-30℃，预冻的时间为3-5小时。
以下是本发明具体的实施例，在下述实施例中所采用的原料、设备等除在本发明中特别限定外，均可以通过购买方式获得。
实施例1
复合乳酸菌固体饮料，其包含复合乳酸菌和冻干保护剂；所述冻干保护剂包括以重量份计的：
葡萄糖5份，
脱脂奶粉20份，
所述乳酸菌包括植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌；
该复合乳酸菌固体饮料通过以下方法制备而成：
菌种活化步骤：将植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌的菌种分别加入灭菌的MRS液体培养基中，在37℃温度下单独活化培养24小时；
增值培养菌液步骤：将上述活化后的植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌混合后接种于灭菌的增值培养基中，于pH6.2、37℃条件下在发酵罐中恒温培养，所述的增值培养基包含葡萄糖2.5wt％、CaCO30.5wt％、番茄汁22wt％，蛋白胨1.0wt％，牛肉膏1.0wt％，酵母粉0.4wt％、K2HPO4 0.1wt％、MgSO40.02wt％，余量为基础培养基；培养期间每隔2h对培养液取样进行酸度、pH值及菌数的测定，培养24h后取出，在无菌条件下，先将培养物用无菌滤纸过滤，以除去培养基中的大部分固体颗粒；
离心收集菌体步骤：将上述过滤后的菌液转入到离心机中离心处理，离心的条件为4000r/min，离心时间为25分钟，收集离心后的菌泥；
制备菌悬液步骤：将上述菌泥称重后加入冻干保护剂，均匀混合后制成菌悬液，调节菌悬液的pH值至中性；
真空冷冻干燥步骤：将上述菌悬液放入低温冷冻冰箱进行预冻，预冻的温度为-20℃，预冻的时间为5小时，以保证冻结完全和形成小的冰晶；预先开启冷冻干燥机，待冷阱温度降至-25℃以下，迅速将预冻好的菌体放进物料盘内，关闭舱门开启真空泵，进入真空冷冻干燥；得到复合乳酸菌冻干粉；
包装步骤：将上述复合乳酸菌冻干粉按照每次的服用的剂量进行包装。
实施例2
复合乳酸菌固体饮料，其包含复合乳酸菌和冻干保护剂；所述冻干保护剂包括以重量份计的：
葡萄糖10份，
脱脂奶粉42份，
所述乳酸菌包括植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌；
该复合乳酸菌固体饮料通过以下方法制备而成：
菌种活化步骤：将植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌的菌种分别加入灭菌的MRS液体培养基中，在42℃温度下单独活化培养20小时；
增值培养菌液步骤：将上述活化后的植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌混合后接种于灭菌的增值培养基中，于pH6.2～6.5、37℃条件下在发酵罐中恒温培养，所述的增值培养基包含葡萄糖2.8wt％、CaCO30.75wt％、番茄汁28wt％，蛋白胨0.5wt％，牛肉膏0.5wt％，酵母粉0.6wt％、K2HPO4 0.2wt％、MgSO40.02wt％；培养期间每隔3h对培养液取样进行酸度、pH值及菌数的测定，培养24h后取出，在无菌条件下，先将培养物用无菌滤纸过滤，以除去培养基中的大部分固体颗粒；
离心收集菌体步骤：将上述过滤后的菌液转入到离心机中离心处理，离心的条件为8000r/min，离心时间为10分钟，收集离心后的菌泥；
制备菌悬液步骤：将上述菌泥称重后加入冻干保护剂，均匀混合后制成菌悬液，调节菌悬液的pH值至中性；
真空冷冻干燥步骤：将上述菌悬液放入低温冷冻冰箱进行预冻，预冻的温度为-30℃，预冻的时间为3小时，以保证冻结完全和形成小的冰晶；预先开启冷冻干燥机，待冷阱温度降至-25℃以下，迅速将预冻好的菌体放进物料盘内，关闭舱门开启真空泵，进入真空冷冻干燥；得到复合乳酸菌冻干粉；
包装步骤：将上述复合乳酸菌冻干粉按照每次的服用的剂量进行包装。
实施例3
复合乳酸菌固体饮料，其包含复合乳酸菌和冻干保护剂；所述冻干保护剂包括以重量份计的：
葡萄糖5份，
乳糖8份，
脱脂奶粉42份，
所述乳酸菌包括植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌；
该复合乳酸菌固体饮料通过以下方法制备而成：
菌种活化步骤：将植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌的菌种分别加入灭菌的MRS液体培养基中，在42℃温度下单独活化培养24小时；
增值培养菌液步骤：将上述活化后的植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌混合后接种于灭菌的增值培养基中，于pH6.5、37℃条件下在发酵罐中恒温培养，所述的增值培养基包含葡萄糖2.8wt％、CaCO30.5wt％、番茄汁25wt％，蛋白胨0.8wt％，牛肉膏0.72wt％，酵母粉0.5wt％、K2HPO4 0.15wt％、MgSO40.02wt％；培养期间每隔3h对培养液取样进行酸度、pH值及菌数的测定，培养24h后取出，在无菌条件下，先将培养物用无菌滤纸过滤，以除去培养基中的大部分固体颗粒；
离心收集菌体步骤：将上述过滤后的菌液转入到离心机中离心处理，离心的条件为5000r/min，离心时间为20分钟，收集离心后的菌泥；
制备菌悬液步骤：将上述菌泥称重后加入冻干保护剂，均匀混合后制成菌悬液，调节菌悬液的pH值至中性；
真空冷冻干燥步骤：将上述菌悬液放入低温冷冻冰箱进行预冻，预冻的温度为25℃，预冻的时间为4小时，以保证冻结完全和形成小的冰晶；预先开启冷冻干燥机，待冷阱温度降至-25℃以下，迅速将预冻好的菌体放进物料盘内，关闭舱门开启真空泵，进入真空冷冻干燥；得到复合乳酸菌冻干粉；
包装步骤：将上述复合乳酸菌冻干粉按照每次的服用的剂量进行包装。
实施例4
复合乳酸菌固体饮料，其包含复合乳酸菌和冻干保护剂；所述冻干保护剂包括以重量份计的：
葡萄糖10份，
乳糖3份，
海藻糖5份
脱脂奶粉42份，
所述乳酸菌包括植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌；
该复合乳酸菌固体饮料通过以下方法制备而成：
菌种活化步骤：将植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌的菌种分别加入灭菌的MRS液体培养基中，在40℃温度下单独活化培养24小时；
增值培养菌液步骤：将上述活化后的植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌混合后接种于灭菌的增值培养基中，于pH6.5、37℃条件下在发酵罐中恒温培养，所述的增值培养基包含葡萄糖2.5wt％、CaCO30.5wt％、番茄汁25wt％，蛋白胨0.8wt％，牛肉膏0.6wt％，酵母粉0.5wt％、K2HPO4 0.2wt％、MgSO4 0.02wt％；培养期间每隔3h对培养液取样进行酸度、pH值及菌数的测定，培养24h后取出，在无菌条件下，先将培养物用无菌滤纸过滤，以除去培养基中的大部分固体颗粒；
离心收集菌体步骤：将上述过滤后的菌液转入到离心机中离心处理，离心的条件为8000r/min，离心时间为10分钟，收集离心后的菌泥；
制备菌悬液步骤：将上述菌泥称重后加入冻干保护剂，均匀混合后制成菌悬液，调节菌悬液的pH值至中性；
真空冷冻干燥步骤：将上述菌悬液放入低温冷冻冰箱进行预冻，预冻的温度为-30℃，预冻的时间为3小时，以保证冻结完全和形成小的冰晶；预先开启冷冻干燥机，待冷阱温度降至-25℃以下，迅速将预冻好的菌体放进物料盘内，关闭舱门开启真空泵，进入真空冷冻干燥；得到复合乳酸菌冻干粉；
包装步骤：将上述复合乳酸菌冻干粉按照每次的服用的剂量进行包装。
实施例5
复合乳酸菌固体饮料，其包含复合乳酸菌和冻干保护剂；所述冻干保护剂包括以重量份计的：
葡萄糖8份，
乳糖5份，
海藻糖5份，
麦芽糊精0.5份
脱脂奶粉35份，
所述乳酸菌包括植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌；
该复合乳酸菌固体饮料通过以下方法制备而成：
菌种活化步骤：将植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌的菌种分别加入灭菌的MRS液体培养基中，在42℃温度下单独活化培养24小时；
增值培养菌液步骤：将上述活化后的植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌混合后接种于灭菌的增值培养基中，于pH6.5、37℃条件下在发酵罐中恒温培养，所述的增值培养基包含葡萄糖2.8wt％、CaCO30.5wt％、番茄汁22wt％，蛋白胨0.5wt％，牛肉膏1wt％，酵母粉0.6wt％、K2HPO4 0.2wt％、MgSO4 0.02wt％，余量为基础培养基；培养期间每隔2～3h对培养液取样进行酸度、pH值及菌数的测定，培养24h后取出，在无菌条件下，先将培养物用无菌滤纸过滤，以除去培养基中的大部分固体颗粒；
离心收集菌体步骤：将上述过滤后的菌液转入到离心机中离心处理，离心的条件为6000/min，离心时间为15分钟，收集离心后的菌泥；
制备菌悬液步骤：将上述菌泥称重后加入冻干保护剂，均匀混合后制成菌悬液，调节菌悬液的pH值至中性；
真空冷冻干燥步骤：将上述菌悬液放入低温冷冻冰箱进行预冻，预冻的温度为-25℃，预冻的时间为4小时，以保证冻结完全和形成小的冰晶；预先开启冷冻干燥机，待冷阱温度降至-25℃以下，迅速将预冻好的菌体放进物料盘内，关闭舱门开启真空泵，进入真空冷冻干燥；得到复合乳酸菌冻干粉；
包装步骤：将上述复合乳酸菌冻干粉按照每次的服用的剂量进行包装。
性能及效果评价
1.对上述实施例1-5所得到的复合乳酸菌固体饮料的主要指标进行检测，结果参见表1。
表1
2.实施例1-5以及为加冻干保护剂(作为对比例)取的情况下乳酸菌冻干后活菌数变化实验，结果参见表2。
表2
上述实施方式仅为本发明的优选实施方式，不能以此来限定本发明保护的范围，本领域的技术人员在本发明的基础上所做的任何非实质性的变化及替换均属于本发明所要求保护的范围。

Claims (9)

1.一种复合乳酸菌固体饮料，其特征在于，其包含复合乳酸菌和冻干保护剂；所述冻干保护剂包括以重量份计的：
葡萄糖5～10份，
脱脂奶粉20～42份，
所述乳酸菌包括植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌，所述植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌以及干酪乳杆菌的菌活性分别为：1.0×108～1.6×108CFU/g、1.0×108～1.3×108CFU/g、1.0×108～1.6×108CFU/g。
2.根据权利要求1所述的复合乳酸菌固体饮料，其特征在于，所述冻干保护剂还包括3～8重量份的乳糖。
3.根据权利要求2所述的复合乳酸菌固体饮料，其特征在于，所述冻干保护剂还包括海藻糖，其中葡萄糖、乳糖与海藻糖以质量比为1:1:2的比例混合。
4.根据权利要求1～3任一项所述的复合乳酸菌固体饮料，其特征在于，所述植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌以及干酪乳杆菌的菌活性分别为：1.0×108CFU/100g、1.2×108CFU/g、1.0×108CFU/g。
5.根据权利要求4所述的复合乳酸菌固体饮料，其特征在于，所述冻干保护剂还包括0.1～0.5重量份的麦芽糊精。
6.一种复合乳酸菌固体饮料的制备方法，其特征在于，包括
菌种活化步骤：将植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌的菌种分别加入灭菌的MRS液体培养基中，在37～42℃温度下单独活化培养20～24小时；
增值培养菌液步骤：将上述活化后的植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌混合后接种于灭菌的增值培养基中，于pH6.2～6.5、37℃条件下在发酵罐中恒温培养；期间每隔2～3h对培养液取样进行酸度、pH值及菌数的测定，培养24h后取出，在无菌条件下，先将培养物用无菌滤纸过滤，以除去培养基中的大部分固体颗粒；
离心收集菌体步骤：将上述过滤后的菌液转入到离心机中离心处理，收集离心后的菌泥；
制备菌悬液步骤：将上述菌泥称重后加入冻干保护剂，均匀混合后制成菌悬液，调节菌悬液的pH值至中性；
真空冷冻干燥步骤：将上述菌悬液放入低温冷冻冰箱进行预冻，以保证冻结完全和形成小的冰晶；预先开启冷冻干燥机，待冷阱温度降至-25℃以下，迅速将预冻好的菌体放进物料盘内，关闭舱门开启真空泵，进入真空冷冻干燥；得到复合乳酸菌冻干粉；
包装步骤：将上述复合乳酸菌冻干粉按照每次的服用的剂量进行包装。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述增值培养基包含葡萄糖2.5-2.8wt％、CaCO30.5-0.75wt％、番茄汁22-28wt％，蛋白胨0.5-1wt％，牛肉膏0.5-1wt％，酵母粉0.4-0.6wt％、K2HPO4 0.1-0.2wt％、MgSO4 0.02-0.05wt％。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述离心收集菌体步骤中，离心的条件为4000～8000r/min，离心时间为10～25分钟。
9.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述真空冷冻干燥步骤中，预冻的温度为-20～-30℃，预冻的时间为3-5小时。
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