CN110214886B - 甜汁组合物的制备方法 - Google Patents

Abstract

本公开涉及由僧果和含罗汉果苷V和其他萜苷的其他葫芦科果实中制备甜汁组合物的方法。该方法采用阳离子交换树脂和阴离子交换树脂，以获得具有纯正味道的甜汁组合物。该甜汁组合物可用于食品、饮料、药品或膳食补充剂产品。

Description

甜汁组合物的制备方法

本申请是申请号为201380049350.0的中国发明专利(发明名称为“甜汁组合物的制备方法”，申请日为2013年8月7日，国际申请号为PCT/US2013/054007)的分案申请。相关申请的交叉引用：本申请要求于2012年8月7日提交的序列号为61/680,572的美国临时专利申请的权益，该申请所公开的内容整体地并入本文以作参考。

技术领域

本公开总体上涉及从含萜苷(terpene glycoside)的果实中制备甜汁组合物的方法，更具体地，涉及使用阳离子交换树脂和阴离子交换树脂从僧果(monk fruit)和其他含萜苷的葫芦科(Cucurbitaceae)果实中制备甜汁组合物的方法。

背景技术

随着西方世界肥胖的增加，消费者一直在寻找能降低其膳食卡路里含量但不牺牲味道的方法。已经开发了很多卡路里更低的食物和饮料产品。大量的低卡路里产品含有人工非营养性甜化剂，例如糖精、阿斯巴甜、环己氨磺酸盐、二肽、三氯蔗糖和乙酰舒泛钾。但是，天然非营养性甜味剂受到越来越多的偏爱，并且许多消费者更喜欢这些而不是人工甜味剂。

某些天然存在的萜苷既有强烈甜味又无卡路里。因此，在食物、饮料和膳食工业中用萜苷作为甜化剂是非常有吸引力的。葫芦科植物的果实是天然萜苷的来源之一。这类果实的一个例子是僧果，也被称为其中国名字“罗汉果”(luo han guo)”(Siraitiagrosvenorii，曾被称为Momordica grosvenorii)”。僧果生长在中国的东南省份，主要在广西地区。这种果实作为传统中药已经被培育和使用了数百年，用于治疗咳嗽和肺充血，并且还在汤和茶里用作为增甜剂和调味剂。

僧果和葫芦科的其它一些果实含有萜苷，如罗汉果苷(mogroside)和赛门苷(siamenoside)，其在果实的肉质部分存在的水平通常为1％左右。这些萜苷已在Matsumoto等,Chem.Pharm.Bull.,38(7),2030-2032(1990)中描述和表征。在僧果中含量最丰富的罗汉果苷是罗汉果苷V，据估计以重量计其甜度大约为蔗糖的250倍。

僧果和其他含萜苷的葫芦科果实虽然甜，但如果不通过额外的处理，它们通常不适合广泛用作非营养性甜味剂。葫芦科植物的天然果实有容易形成异味的倾向，并且果实中的果胶会引起凝胶化。果实可通过干燥来保存，但是这也导致其它不想要的苦味、涩味和烹煮味的形成。现有的来源于僧果和其他含萜苷的葫芦科果实的甜汁组合物受到带有棕色/黄色、稳定性差以及明显不良口味的不利影响。

在本领域中目前已知有多种方法和技术从僧果和其他含萜苷的葫芦科果实的果汁中去除异味成分；然而，这些方法也从果汁中去除了显著量的罗汉果苷。参见例如，美国专利号5,411,755；美国专利申请号2009/0196966和2009/0311404。因此，本领域存在对商业上可行的、从僧果和其他含萜苷的葫芦科植物的含萜苷果实中制备具有纯正口味(cleanflavor)的甜汁的方法的需求。

发明内容

本文提供了制备具有良好口味并且适合用作食品成分(包括例如甜食成分)的甜汁组合物的方法。

在一方面，提供的是一种制备甜汁组合物的方法，其通过使从葫芦科果实中得到的果汁接触阳离子交换树脂和阴离子交换树脂(或者作为阳离子交换树脂和阴离子交换树脂的单独树脂或其混合床)，来制备甜汁组合物。果实中含有萜苷，其中萜苷中的至少一种是罗汉果苷V。例如，葫芦科的果实可以是僧果或其他含萜苷的果实。从葫芦科果实中获得的果汁也含有萜苷，其中萜苷中的至少一种是罗汉果苷V。果汁可以是果实汁液、果汁浓缩物、或稀释果汁。在一个实施方式中，经HPLC测定，通过该方法制备的甜汁组合物以干重计保留果汁中至少60％的罗汉果苷V。

在一个变型中，提供了一种制备甜汁组合物的方法，其是通过：

a)提供葫芦科的果实，其中该果实含有萜苷，且其中萜苷的至少一种是罗汉果苷V；

b)从果实中获得果汁，其中该果汁含有萜苷，且其中萜苷的至少一种是罗汉果苷V；

c)提供阳离子交换树脂和阴离子交换树脂，其中阳离子交换树脂以酸形式再生，且其中阴离子交换树脂以碱形式再生；和

d)使果汁与阳离子交换树脂和阴离子交换树脂接触以产生甜汁组合物，其中经HPLC测定该甜汁组合物保留果汁中至少60％的罗汉果苷V。

在其他实施方式中，果汁和甜汁组合物各自含有天然存在于果实中的糖。

在一些实施方式中，步骤(b)包括：

ⅰ)使果实与水接触以形成含水浆料；

ⅱ)在至少约60℃的温度下处理该含水浆料；和

ⅲ)从步骤(ii)的含水浆料中获得果汁。

在某些实施方式中，该方法还包括在与阳离子交换树脂和阴离子交换树脂接触之前使果汁澄清的步骤。

在一个变型中，步骤(d)包括：使果汁与阳离子交换树脂接触以制备部分处理的果汁；和将部分处理的果汁与阴离子交换树脂接触以制备甜汁组合物。

在另一个变型中，步骤(d)包括：使果汁与阳离子交换树脂和阴离子交换树脂的混合床接触。

在其他实施方式中，该方法还包括：提供第二阳离子交换树脂和第二阴离子交换树脂，其中第二阳离子交换树脂以酸形式再生，并且其中第二阴离子交换树脂以碱形式再生；和使甜汁组合物与第二阳离子交换树脂和第二阴离子交换树脂接触以制备第二甜汁组合物。

在另一个变型中，提供了一种制备甜汁组合物的方法，其是通过：

a)提供来自葫芦科果实的果汁，其中果汁是新鲜果汁或稀释果汁，其中果汁含有来自果实的萜苷，且其中萜苷中的至少一种是罗汉果苷V；

b)提供阳离子交换树脂和阴离子交换树脂，其中阳离子交换树脂以酸形式再生，且其中阴离子交换树脂以碱形式再生；和

c)使果汁与阳离子交换树脂和阴离子交换树脂接触以制备甜汁组合物，其中经HPLC测定该甜汁组合物保留步骤(a)所提供的果汁中至少60％的罗汉果苷V。

在一些实施方式中，其中步骤(a)所提供的果汁是新鲜果汁，且阳离子交换树脂与阴离子交换树脂之比为大约1:1。在其他实施方式中，步骤(a)所提供的果汁是稀释的果汁，且阳离子交换树脂与阴离子交换树脂之比为大约1.4～2:1。

在任何上述方法的一些实施方式中，阳离子交换树脂是强酸阳离子交换树脂、弱酸阳离子交换树脂、混合酸阳离子交换树脂、或其任意组合。在某些实施方式中，酸形式选自氢形式、铵形式或其组合。在一个实施方式中，阳离子交换树脂是以氢形式再生的强酸阳离子交换树脂。

在任何上述方法的一些实施方式中，阴离子交换树脂是弱碱阴离子交换树脂、强碱阴离子交换树脂、混合碱阴离子交换树脂、或其任意组合。在某些实施方式中，碱形式选自羟基形式、碳酸盐形式或其组合。在一个实施方式中，阴离子交换树脂是以羟基形式再生的弱碱阴离子交换树脂。

在任何上述方法的某些实施方式中，阳离子交换树脂和阴离子交换树脂可独立地包括具有苯乙烯骨架的聚合物，其中苯乙烯骨架由酸部(阳离子交换树脂)或碱部(阴离子交换树脂)功能化。在一个实施方式中，酸部或碱部覆盖或者至少部分地覆盖该苯乙烯基质，以尽量减少苯乙烯基质对罗汉果苷V的吸收，并且最大程度地通过离子交换去除造成草味或土味或气味以及苦味的化合物。在某些实施方式中，酸部或碱部覆盖至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或至少100％的苯乙烯基质。

可以预期和理解的是，阳离子交换树脂的每一种变型都可以与上述方法中的阴离子交换树脂进行组合，就如同每一种组合是单独加以描述的。例如，在一种变型中，阳离子交换树脂是以氢形式再生的强酸阳离子交换树脂，而阴离子交换树脂是以羟基形式再生的弱碱阴离子交换树脂。在另一个变型中，阳离子交换树脂是以氢形式再生的强酸阳离子交换树脂，而阴离子交换树脂是以碳酸盐形式再生的弱碱阴离子交换树脂。

在任何上述方法的其他实施方式中，果实来自于罗汉果(Siraitia)属。在一个实施方式中，果实来自于罗汉果(Siraitia grosvenorii)或翅子罗汉果(Siraitiasiamensis)。

还提供了通过任何上述方法制备的甜汁组合物。在一方面，提供了一种甜汁组合物，其通过使葫芦科果实的果汁与阳离子交换树脂和阴离子交换树脂接触以制备甜汁组合物。

在某些实施方式中，提供通过以下步骤制备的甜汁组合物：

a)提供葫芦科的果实，其中果实含有萜苷，且其中萜苷中的至少一种是罗汉果苷V；

b)从该果实中获得果汁，其中果汁含有萜苷，且其中萜苷中的至少一种是罗汉果苷V；

c)提供阳离子交换树脂和阴离子交换树脂，其中阳离子交换树脂以酸形式再生，且其中阴离子交换树脂以碱形式再生；和

d)使果汁与阳离子交换树脂和阴离子交换树脂接触以产生甜汁组合物，其中经HPLC测定该甜汁组合物保留果汁中至少60％的罗汉果苷V。

在其他实施方式中，提供通过以下步骤制备的甜汁组合物：

a)提供来自葫芦科果实的果汁，其中果汁是新鲜果汁或稀释果汁，其中果汁含有来自果实的萜苷，且其中萜苷中的至少一种是罗汉果苷V；

b)提供阳离子交换树脂和阴离子交换树脂，其中阳离子交换树脂以酸形式再生，并且其中阴离子交换树脂以碱形式再生；和

c)使该果汁与阳离子交换树脂和阴离子交换树脂接触以制备甜汁组合物，其中经HPLC测定该甜汁组合物保留步骤(a)所提供的果汁中至少60％的罗汉果苷V。

还提供了包含通过任何上述方法制备的甜汁组合物的食品、饮料、膳食补充剂或药物产品。还提供了通过任何上述方法制备的甜汁组合物在食品、饮料、膳食补充剂或药物产品中的应用。

附图说明

可以通过参考以下的描述并结合附图来理解本申请，其中类似的部分可用类似的数字指示。

图1描述了采用一系列的强酸性阳离子(SAC)树脂和弱碱性阴离子(WBA)树脂按SAC→WBA→SAC→WBA顺序纯化僧果果汁的示例性过程；以及

图2描述了采用SAC和WBA树脂混合床纯化僧果果汁的另一示例性过程。

具体实施方式

下面的描述阐述示例性组合物、方法和参数等。然而，应该认识到，这样的描述并不是为了限制本公开的范围，而是作为示例性实施方式的说明而提供。

本文提供了从僧果和其他含萜苷的葫芦科果实中制备甜汁组合物的方法。特别地，果实中含有至少一种特定的萜苷，即罗汉果苷V。该方法采用阳离子交换树脂和阴离子交换树脂的组合，或是作为单独的树脂，或是作为阳离子交换树脂和阴离子交换树脂的混合床。该方法通过去除至少部分的不良味道和气味，同时使保留在纯化后甜汁组合物中的某些萜苷(特别是罗汉果苷V)的量最大化，来制备口味纯正的甜汁。

参见图1，方法100是使用一系列的阳离子交换树脂和阴离子交换树脂从僧果中制备甜汁的示例性实施方式。在步骤102中，提供了僧果果汁。果汁可以是新鲜的僧果果汁或从果汁浓缩物中得到的稀释果汁。在步骤104中，将果汁澄清。澄清后的果汁之后以阳离子交换树脂(步骤106)、阴离子交换树脂(步骤107)、阳离子交换树脂(步骤110)和阴离子交换树脂(步骤112)的顺序与一系列离子交换树脂接触，以获得味道纯正的纯化甜汁(步骤114)。在本示例性的实施方式中，强酸性阳离子(SAC)树脂用作阳离子交换树脂，弱碱性阴离子(WBA)用作阴离子交换树脂。

应当理解的是，一个或多个步骤可增加到方法100中或从方法100中省略。例如，在一些实施方式中，在将果汁与离子交换树脂接触之前，可以通过与吸附树脂接触对果汁进行处理。在其他实施方式中，可将从第二WBA树脂收集的果汁收集，并通过将果汁与第三阳离子交换树脂和/或第三阴离子交换树脂接触而进行进一步处理。然而，在其他实施方式中，该方法可以仅包括使来自步骤104的澄清果汁与一组阳离子交换树脂和阴离子交换树脂接触，因此可省略步骤110和112。

参见图2，方法200是另一使用阳离子交换树脂和阴离子交换树脂混合床从僧果中制备甜汁的示例性实施方式。在步骤202中，提供了僧果果汁。果汁可以是新鲜的僧果果汁或从僧果果汁浓缩物中得到的稀释果汁。在步骤204中，将果汁澄清。在步骤206中，将澄清的果汁与阳离子交换树脂和阴离子交换树脂混合床接触以获得味道纯正的纯化甜汁(步骤208)。与上述的方法100类似，方法200采用SAC树脂作为阳离子交换树脂，WBA作为阴离子交换树脂。

示例性方法100和200使保留在纯化甜汁中的甜味化合物(包括：特别是罗汉果苷V，以及其他罗汉果苷，如罗汉果苷IV、11-氧-罗汉果苷V、罗汉果苷VI和赛门苷，如赛门苷I)的量最大化，同时最大程度地去除了造成草味或土味或气味以及苦味的化合物。这样得到具有纯正甜味的果汁。应该理解的是，在其他示例性实施方式中，可以采用其他树脂与阳离子交换树脂和阴离子交换树脂组合。

本文描述的方法采用了多种成分(例如，僧果或其他含萜苷的葫芦科果实的果汁、阳离子交换树脂、阴离子交换树脂)和工艺参数来制备具有纯正口味的甜汁，其每一者都在下面进一步地详述。

来自僧果或其他含萜苷果实的果汁

用于本文所述方法的果汁可以得自市售来源，或使用任何本领域已知的方法从僧果或其他含萜苷果实中获得。根据本文所述方法所要纯化的果汁含有一种或多种萜苷。在某些实施方式中，萜苷中的至少一种是罗汉果苷。

罗汉果苷通常具有不同数目(2至6)的葡萄糖单元连接于三萜烯主链的碳3和碳24上。罗汉果苷可以包括，例如，罗汉果苷II、罗汉果苷III、罗汉果苷IV、罗汉果苷V、罗汉果苷VI及其任何衍生物。罗汉果苷II是最简单的罗汉果苷，其在碳3和碳24上各连接有一个葡萄糖残基。罗汉果苷III的不同点在于其在碳24上还连有额外的葡萄糖残基，而罗汉果苷IV在碳3和碳24上都有2个单元的葡萄糖侧链。该进程在罗汉果苷VI继续，其在三萜主链的位置3和24的两个碳上各连接有3个葡萄糖残基。

在其他实施方式中，前述一种或多种萜苷选自罗汉果苷V、罗汉果苷IV、11-氧-罗汉果苷V和罗汉果苷VI。在一个优选的实施方式中，萜苷中的至少一种是罗汉果苷V，它也已知为罗汉果醇-3-O-[β-D-吡喃葡糖基(1-6)-β-D-吡喃葡糖苷]-24-O-{[β-D-吡喃葡糖基(1-2)]-[β-D-吡喃葡糖基(1-6)]-β-D-吡喃葡糖苷}(mogro-3-O-[β-D-glucopyranosyl(1-6)-β-D-glucopyranoside]-24-O-{[β-D-glucopyranosyl(1-2)]-[β-D-glucopyranosyl(1-6)]-β-D-glucopyranoside})。

在其他实施方式中，要纯化的果汁可含有其他萜苷，如赛门苷。例如，在某些实施方式中，除了罗汉果苷V外，萜苷之一是赛门苷I。

应当理解的是，存在于鲜果汁中的萜苷的量可以根据所使用的果实类型、以及从果实中获得果汁的方法和条件而有所变化。还应该理解的是，存在于待纯化的果汁中的糖是天然存在于果实中的糖。在某些实施方式中，天然存在于果实中的糖是简单糖类(simplesugar)，包括，例如单糖和二糖。这样的天然发现于果实中的糖可以包括，例如，葡萄糖、果糖和蔗糖。

方法100和200描述了对从僧果获得的果汁进行纯化的示例性实施方式；然而，应该理解的是，在其他示例性实施方式中，来自其他果实的果汁可以根据本文描述的方法进行纯化。上述其他果实中含有萜苷，特别是罗汉果苷V。例如，果实可以是富含萜苷的果实，或富含罗汉果苷V的果实。合适的果实可以来自葫芦科植物，更具体地，来自Jollifieae族，赤瓟亚族(Thladianthinae)，再更具体地说，来自罗汉果属(Siraitia)。例如，果实可以来自选自罗汉果(Siraitia grosvenorii)、翅子罗汉果(Siraitia siamensis)、silomaradjae罗汉果(Siraitia silomaradjae)、锡金罗汉果(Siraitia sikkimensis)、Siraitia africana、无鳞罗汉果(Siraitia borneensis)和中国台湾罗汉果的植株。

此外，虽然在方法100和200提供的果汁是鲜果汁，但是应当理解的是，果汁也可以是果汁浓缩物或稀释果汁。

a)鲜果汁

“鲜果汁”指的是已经从果实中获得(例如使用本领域中已知的任何方法和技术，包括以下描述的方法和技术获得)但尚未蒸发浓缩的果汁。本领域技术人员能够辨识本领域中已知的各种方法和技术从僧果和其他含萜苷的葫芦科植物的果实中获得果汁。

例如，在某些实施方式中，果汁可以通过将果实经首先机械切碎或压碎而从新鲜果实获得。然后可以将切碎或压碎的果实与热水接触以从果实中获得果汁。热水可以具有足以对果实巴氏灭菌并灭活果实中存在的内源性酶(如蛋白酶)的温度。在某些实施方式中，热水的温度可以为至少约60℃，至少约70℃，或至少约80℃。在该阶段使内源酶失活具有下述有益效果：降低酶促的褐色化和限制酶促作用导致的异味形成。果实和热水可以混合以确保果实和热水之间的均匀接触，从而使酶均匀地暴露于热水因而尽快变性。

在一些实施方式中，连续逆流萃取工艺可用于从切碎的果实中获得果汁，其中切碎的果实被送入逆流萃取器与热水接触。在一个实施方式中，热水具有约80℃、约90℃、或约100℃的温度。在另一个实施方式中，热水与切碎果实接触约30分钟到约60分钟，或约30分钟或约45分钟。逆流萃取工艺和装置是本领域公知的。参见例如美国专利号5,419,251。采用逆流萃取工艺的一个优点是，所需要的提取时间通常比使用常规的罐型提取工艺的时间短。一般地，在逆流萃取工艺中果实与水的接触时间是在约30到60分钟。另一个优点是，通常需要较少的水。通常，在逆流提取工艺中，大约1.5：大约1的水:果实比将是足够的，而在罐型提取方法中，通常需要大约3：大约1的水:果实比。

然后可以从果实中排出果汁，在一些实施方式中，可以过滤或过筛以除去大果肉颗粒。热水萃取工艺可以重复一次或多次来处理剩余的果实，合并每次萃取所得到的果汁。之后所获得的果汁可以冷却并澄清，以便澄清和防止果汁胶凝。

澄清可以使用本领域中已知的任何合适的方法如超滤来进行。例如，可以使用超滤膜，其中，超滤膜的分子量截留允许罗汉果苷穿透到渗透液中，同时在滞留物中保留蛋白质和果胶。在一个实施方式中，可以使用50,000～100,000道尔顿之间的超滤膜。或者，澄清可以通过磷酸或果胶酶处理来进行。可以采用含有果胶酶的市售酶混合物形式的果胶酶，以从果汁中裂解果胶以及沉淀经果胶稳定的肽和蛋白质。合适的市售酶制剂可以包括，例如，Novozyme 3356和Rohapect B1。果胶酶可作为稀释溶液加入，其加入量以干重计为约0.001％至约1％。含有果胶酶的果汁可以在约30℃～约55℃，或约40℃～约50℃的温度下轻轻搅拌，直到果汁基本上不含果胶，通常进行约15分钟～约60分钟，或约30分钟。

在另外的实施方式中，可以进一步处理果汁以失活果胶酶并使得蛋白质变性，促进凝结和它们与降解的果胶的共沉淀，这是通过加热至约80℃至约90℃，或约85℃，其中加热时间足以失活果胶酶，在某些实施方式中为约30秒至约5分钟。继果胶酶失活以及蛋白质凝结和共沉淀之后，可以将果汁冷却并过滤以去除絮状物和变性蛋白。在一个实施方式中，可以将果汁冷却至低于约65℃，或在另一个实施方式中，低于约50℃。该过滤可以使用本领域中已知的任何方便的方法进行，如通过硅藻土，或通过错流超滤或错流微滤进行。在一个实施方式中，将果汁过滤到光学澄清，例如，低于约5NTU。

b)果汁浓缩物或稀释果汁

由上述方法和技术获得的鲜果汁还可以进一步加工以制备果汁浓缩物。“果汁浓缩物”中可溶性固形物含量大于从中获得该果汁浓缩物的鲜果汁。果汁浓缩物可以存储以备后用。在一个实施方式中，果汁浓缩物可以根据本文所述的方法进行纯化以制备具有纯正口味的甜汁。

“稀释果汁”是指加水的果汁浓缩物。本文所述方法中加入到果汁浓缩物中以制备稀释果汁的水的量可以变化。加入到果汁浓缩物中的水的量，可以等于、大于或小于从鲜果汁中去除以制备果汁浓缩物的水的量。在另一个实施方式中，稀释果汁也可以根据本文所述的方法进行纯化以制备具有纯正口味的甜汁。在某些实施方式中，稀释果汁可以具有约1°白利糖度(Brix)到约30°白利糖度(Brix)的浓度。

应当理解的是，从葫芦科果实中获得的果汁在与离子交换树脂接触之前可以进一步处理。例如，在一些实施方式中，果汁可以与能去除该果汁中至少部分萜苷的吸附树脂接触。可以使用的示例性的吸附树脂包括苯乙烯二乙烯苯共聚物或二乙烯基苯共聚物树脂。该通过吸附树脂纯化的果汁可能仍然含有至少一部分的罗汉果苷V和其他萜苷，之后可以根据本文所述的方法，通过与阳离子和阴离子树脂的组合接触进行进一步处理。在其他实施方式中，该果汁在与离子交换树脂接触之前可以进行澄清。

离子交换树脂

本文所述的方法利用离子交换树脂从由葫芦科果实中获得的果汁中去除造成草味或土味或气味以及苦味的化合物，同时在甜汁组合物中最大限度地保留某些萜苷的量，特别是罗汉果苷V。令人惊讶地发现，在处理僧果果汁时，采用本文所述的阴离子和阳离子交换树脂的组合及条件，可以保留该果汁90％以上的罗汉果苷V(以干重计，经HPLC测定)，因此保留了僧果果汁中浓烈的甜味。

离子交换树脂是能够使得聚合物内特定离子与通过该树脂的溶液中的离子进行交换的聚合物。离子交换树脂可以是不溶性的酸或碱，其盐也是不溶性的，从而使树脂与带正电的离子(阳离子交换树脂)或带负电的离子(阴离子交换树脂)进行交换。

本文所述方法中使用的离子交换树脂包括阳离子交换树脂和阴离子交换树脂，其可以作为单独的树脂使用，也可以作为阳离子和阴离子交换树脂混合床使用。在某些实施方式中，离子交换树脂可以是合成的离子交换树脂。此外，应该理解的是，用于本文所述方法的离子交换树脂可以从任何来源获得，包括任何市售来源。

a)阳离子交换树脂

本文所述方法中使用的阳离子交换树脂可以是强酸阳离子交换树脂、弱酸阳离子交换树脂或混合酸阳离子交换树脂或其任意组合。

本文所述方法中使用的阳离子交换树脂以酸形式再生。在某些实施方式中，酸形式为氢形式、铵形式、或其组合。在一个实施方式中，阳离子交换树脂是以氢形式再生的强酸阳离子交换树脂。例如，合适的阳离子交换树脂是Dowex Marathon MSC强酸性阳离子树脂。

阳离子交换树脂可以使用本领域中公知的适合的方法和技术再生。例如，可以采用顺流再生、逆流再生或其组合。当再生剂流动的方向与果汁处理的方向相同时发生顺流再生。例如，再生剂可以通过点滴器(dropper)进口泵入柱子中直接到达树脂床的顶部，沿着柱子向下通过阀门排出。当再生剂流动的方向与果汁流动的方向相反时发生逆流再生。例如，再生剂可以泵入柱子的底部，向上通过树脂床，并通过点滴器排出。

阳离子交换树脂可以通过使用强无机酸(如盐酸或硫酸)恢复到它的可重复使用的形式，用氢离子取代从此前由去阳离子化的果汁中交换得来的阳离子。此类阳离子的例子包括钾、钠、钙、镁、铁、氨基酸和肽。

b)阴离子交换树脂

本文所述的方法中使用的阴离子交换树脂可以是弱碱阴离子交换树脂、强碱阴离子交换树脂、混合碱阴离子交换树脂或其任意组合。

本文所述的方法中使用的阴离子交换树脂以碱形式再生。在某些实施方式中，碱形式是羟基形式、碳酸盐形式或其组合。在一个实施方式中，阴离子交换树脂是以羟基形式再生的弱碱阴离子交换树脂。例如，合适的阴离子交换树脂是Dowex Marathon WBA弱碱性阴离子树脂。

阴离子交换树脂可以使用本领域已知的合适的方法再生。例如，阴离子交换树脂可以使用碱(例如苛性钠)恢复到它的可重复使用的形式，中和并取代此前从去离子果汁中交换得来的酸性阴离子。这样的阴离子的例子包括氯化物、硫酸盐、磷酸盐、抗坏血酸盐、柠檬酸盐、苹果酸盐和酚酸。

可以预期和理解的是，阴离子交换树脂的每一种变型可以与本文所述方法中的阳离子交换树脂进行组合，如同每一个组合是单独加以描述的。例如，在某些实施方式中，在本文所述的方法中，以氢形式再生的强酸阳离子交换树脂可以与以羟基形式再生的弱碱阴离子交换树脂组合使用。在其他实施方式中，在本文所述的方法中，以铵形式再生的强酸阳离子交换树脂可以与以羟基形式再生的弱碱阴离子交换树脂组合使用。在另外的实施方式中，在本文所述的方法中，以氢形式再生的强酸阳离子交换树脂可以与以碳酸盐形式再生的弱碱阴离子交换树脂组合使用。

c)离子交换树脂的选择

在本文所述的方法中使用阳离子和阴离子交换树脂(作为单独的树脂或者作为阳离子和阴离子交换树脂的混合床)产生具有纯正的甜味的甜汁组合物。在果汁中存在罗汉果苷V是产生甜味的部分原因。其他甜味化合物包括其他罗汉果苷，如罗汉果苷IV，11-氧-罗汉果苷V，罗汉果苷VI和赛门苷(诸如赛门苷I)。从中去除苦味化合物或至少部分苦味化合物化合物部分地有助于口味纯正。纯正口味指较低水平的令人讨厌的感官特性，包括草味或土味或气味以及苦味。各种因素，包括树脂的选择和工艺条件，可影响根据本文所述方法所制备的甜汁组合物的口味。

为了从僧果和其他含萜苷的葫芦科果实中获得具有纯正口味的甜汁，在本文所述的方法中采用阳离子和阴离子交换树脂的组合(作为单独的树脂，或者作为阳离子和阴离子交换的混合床树脂)，使萜苷(包括罗汉果苷V)的损失最小化，并最大限度地去除可能造成草味或土味或气味以及苦味的某些化合物。

在一些实施方式中，在本文所描述的方法中使用的阳离子交换树脂对罗汉果苷具有较低的亲和力，在一个实施方式中，其对罗汉果苷V具有较低的亲和力。在某些实施方式中，以干重计，经HPLC测定，本文所述的方法中使用的阳离子交换树脂保留少于50％，少于40％，少于35％，少于30％，少于25％，少于20％，少于15％，少于10％，少于9％，少于8％，少于7％，少于6％，少于5％，少于4％，少于3％，少于2％，少于1％，少于0.5％，或少于0.1％，或60％和100％之间，60％和99％之间，60％和95％之间，70％和100％之间，70％和99％之间，70％和95％之间，75％和100％之间，75％和99％之间，75％和95％之间，80％和100％之间，80％和99％之间，80％和95％之间，85％和100％之间，85％和99％之间，85％和95％之间，85％和90％之间，90％和100％之间，或90％和99％之间的来自果汁(在与树脂接触之前)的罗汉果苷(在一个实施方式中为罗汉果苷V)。

在一些实施方式中，在本文所描述的方法中使用的阴离子交换树脂对罗汉果苷具有较低的亲和力，在一个实施方式中，其对罗汉果苷V具有较低的亲和力。在某些实施方式中，以干重计，经HPLC测定，本文所述的方法中使用的阴离子交换树脂保留少于50％，少于40％，少于35％，少于30％，少于25％，少于20％，少于15％，少于10％，少于9％，少于8％，少于7％，少于6％，少于5％，少于4％，少于3％，少于2％，少于1％，少于0.5％，或少于0.1％，或60％和100％之间，60％和99％之间，60％和95％之间，70％和100％之间，70％和99％之间，70％和95％之间，75％和100％之间，75％和99％之间，75％和95％之间，80％和100％之间，80％和99％之间，80％和95％之间，85％和100％之间，85％和99％之间，85％和95％之间，85％和90％之间，90％和100％之间，或90％和99％之间的来自果汁(在与树脂接触之前)的罗汉果苷(在一个实施方式中为罗汉果苷V)。

应当理解的是，在某些实施方式中，当在本文所述的方法中阳离子交换树脂和阴离子交换树脂作为单独的树脂使用时，它们独立地对罗汉果苷(在一个实施方式中为罗汉果苷V)具有较低的亲和力。例如，在某些实施方式中，以干重计，经HPLC测定，在本文所述的方法中使用的阳离子交换树脂和阴离子交换树脂各自保留少于50％，少于40％，少于35％，少于30％，少于25％，少于20％，少于15％，少于10％，少于9％，少于8％，少于7％，少于6％，少于5％，少于4％，少于3％，少于2％，少于1％，少于0.5％，或少于0.1％，或60％和100％之间，60％和99％之间，60％和95％之间，70％和100％之间，70％和99％之间，70％和95％之间，75％和100％之间，75％和99％之间，75％和95％之间，80％和100％之间，80％和99％之间，80％和95％之间，85％和100％之间，85％和99％之间，85％和95％之间，85％和90％之间，90％和100％之间，或90％和99％之间的来自果汁(在与树脂接触之前)的罗汉果苷(在一个实施方式中为罗汉果苷V)。

在另外的其他实施方式中，在本文所述的方法中使用的阳离子和阴离子交换树脂的混合床对罗汉果苷V具有较低的亲和力。在某些实施方式中，以干重计，经HPLC测定，在本文所述的方法中使用的阳离子和阴离子交换树脂的混合床保留少于50％，少于40％，少于35％，少于30％，少于25％，少于20％，少于15％，少于10％，少于9％，少于8％，少于7％，少于6％，少于5％，少于4％，少于3％，少于2％，少于1％，少于0.5％，或少于0.1％，或60％和100％之间，60％和99％之间，60％和95％之间，70％和100％之间，70％和99％之间，70％和95％之间，75％和100％之间，75％和99％之间，75％和95％之间，80％和100％之间，80％和99％之间，80％和95％之间，85％和100％之间，85％和99％之间，85％和95％之间，85％和90％之间，90％和100％之间，或90％和99％之间的来自果汁(在与树脂接触之前)的罗汉果苷(在一个实施方式中为罗汉果苷V)。

罗汉果苷V和其他萜苷含量

在一些实施方式中，阳离子和阴离子交换树脂与果汁接触使得根据本文所述的方法进行纯化的果汁中的罗汉果苷V损失降至最低。在某些实施方式中，以干重计，经HPLC测定，使用阳离子交换树脂和阴离子交换树脂(作为单独的树脂或者作为阳离子和阴离子交换树脂的混合床)在形成甜汁组合物的处理过的果汁中保留果汁中(在与树脂接触前)至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，至少96％，至少97％，至少98％，至少99％，至少99.5％，或至少99.9％的罗汉果苷V。在某些实施方式中，以干重计，经HPLC测定，使用单独的阳离子交换树脂和阴离子交换树脂或者阳离子和阴离子交换树脂的混合床在形成甜汁组合物的处理过的果汁中保留果汁中(在与树脂接触前)60％和100％之间，60％和99％之间，60％和95％之间，70％和100％之间，70％和99％之间，70％和95％之间，75％和100％之间，75％和99％之间，75％和95％之间，80％和100％之间，80％和99％之间，80％和95％之间，85％和100％之间，85％和99％之间，85％和95％之间，85％和90％之间，90％和100％或90％和99％之间的罗汉果苷V。

在某些实施方式中，本文所述的方法以干重计经HPLC测定从果汁(与树脂接触之前)中去除少于50％，少于40％，少于35％，少于30％，少于25％，少于20％，少于15％，少于10％，少于9％，少于8％，少于7％，少于6％，少于5％，少于4％，少于3％，少于2％，少于1％，少于0.5％，或少于0.1％的罗汉果苷V，以制备甜汁组合物。在某些实施方式中，本文所述的方法以干重计经HPLC测定从果汁(与树脂接触之前)中去除1％和40％之间，5％和40％之间，10％和40％之间，20％和40％之间，30％和40％之间，1％和35％之间，5％和35％之间，10％和35％之间，20％和35％之间，1％和30％之间，5％和30％之间，10％和30％之间，10％和20％之间，20％和30％之间，1％和20％之间，1％和15％之间，1％和10％之间，1％和5％之间，或0.1％到5％的罗汉果苷V。

在其他实施方式中，阳离子交换树脂自身，采用单独的阳离子交换树脂和阴离子交换树脂或者阳离子和阴离子交换树脂混合床，以干重计经HPLC测定在形成甜汁组合物的处理过的果汁中保留果汁中(在与树脂接触前)至少60％，至少70％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，至少96％，至少97％，至少98％，至少99％，至少99.5％或至少99.9％的萜苷。在某些实施方式中，采用单独的阳离子交换树脂和阴离子交换树脂或者阳离子和阴离子交换树脂混合床以干重计经HPLC测定在形成甜汁组合物的处理过的果汁中保留果汁中(在与树脂接触前)60％和100％之间，60％和99％之间，60％和95％之间，70％和100％之间，70％和99％之间，70％和95％之间，75％和100％之间，75％和99％之间，75％和95％之间，80％和100％之间，80％和99％之间，80％和95％之间，或85％和90％之间的萜苷。

在某些实施方式中，本文所述的方法以干重计经HPLC测定从果汁(与树脂接触之前)中去除少于20％，少于15％，少于10％，少于9％，少于8％，少于7％，少于6％，少于5％，少于4％，少于3％，少于2％，少于1％，少于0.5％，或少于0.1％的萜苷，以制备甜汁组合物。在某些实施方式中，本文所述的方法以干重计经HPLC测定从果汁(与树脂接触之前)中去除1％和40％之间，5％和40％之间，10％和40％之间，20％和40％之间，30％和40％之间，1％和35％之间，5％和35％之间，10％和35％之间，20％和35％之间，1％和30％之间，5％和30％之间，10％和30％之间，10％和20％之间，或20％和30％之间的萜苷，以制备甜汁组合物。

根据本文所述方法制备的甜汁组合物中保留的萜苷可包括，例如罗汉果苷和赛门苷。在一个变型中，在甜汁组合物中保留的萜苷包括罗汉果苷V、罗汉果苷IV、11-氧-罗汉果苷V、罗汉果苷VI和赛门苷I。在另一变型中，所保留的萜苷包括罗汉果苷V，以及罗汉果苷IV、11-氧-罗汉果苷V、罗汉果苷VI和赛门苷I中的一种或多种。应当理解，纯化后的萜苷含量包括罗汉果苷V含量可根据多种因素包括果汁组成、所选的离子交换树脂类型、使用离子交换树脂的条件而有变化。

本领域技术人员能够辨识可用于鉴定和量化存在于果汁和甜汁组合物中的罗汉果苷V和其他萜苷含量的合适的分析技术。例如，在一个实施方式中，高效液相色谱(也称为高压液相色谱或HPLC)是一种可用于鉴定、定量和任选地纯化混合物中的单独萜苷的色谱技术。

罗汉果苷V的含量和萜苷的含量可以以重量计的百分比(％w/w)表示。在一个实施方式中，罗汉果苷V含量和萜苷的含量以干重计的百分比表示。“干重计”是指罗汉果苷V或萜苷的重量除以给定样品中的可溶性干固形物的重量的含量。在其他实施方式中，罗汉果苷V含量或萜苷的含量可以用不同的单位表示，例如以湿重计的百分比或g/L。例如，由于稀释样品中果汁的体积中更容易测量，本领域技术人员可以用g/L计量稀释果汁样品中罗汉果苷V含量和萜苷含量。相比之下，本领域技术人员可以以重量计量浓缩果汁样品中的罗汉果苷V含量和萜苷含量。此外，本领域技术人员中能将一种单位转换为另一种。

造成草味或土味或气味以及苦味的化合物

在其他实施方式中，本文所述方法中使用的树脂去除或至少部分地去除一种或多种造成草味或土味或气味以及苦味的化合物。这类化合物可以选自，例如，蛋白黑素、肽、类萜、酚(包括，例如多酚类、酚类低聚物、稠多酚(condensed polyphenol))和萜苷(不同于上述甜味萜苷包括例如罗汉果苷V、罗汉果苷IV、11-氧-罗汉果苷V、罗汉果苷VI和赛门苷I)。

在一个实施方式中，化合物是一种苦味蛋白黑素。在另一个实施方式中，化合物是一种苦味肽。在又一个实施方式中，化合物是一种苦味类萜。在又一个实施方式中，化合物是一种苦味酚。在又一个实施方式中，化合物是一种苦味多酚。在一个实施方式中，化合物是一种苦味酚类低聚物。在另一个实施方式中，化合物是一种苦味稠多酚。在又一个实施方式中，化合物是一种苦味萜苷(不同于上述甜味萜苷包括例如罗汉果苷V、罗汉果苷IV、11-氧-罗汉果苷V、罗汉果苷VI和赛门苷I)。

在某些实施方式中，本文所述的方法以干重计经HPLC测定从果汁(接触树脂前)中去除至少5％、至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少99％、或约100％的一种或多种上述苦味化合物，以制备甜汁组合物。

在本文所述的方法中使用的阳离子和阴离子交换树脂可以基于基质覆盖(matrixcoverage)和/或功能性部分的空间分布进行选择。例如，在一个示例性实施方式中，离子交换树脂由苯乙烯骨架的聚合物组成，其中苯乙烯骨架由酸部(阳离子交换树脂)或碱部(阴离子交换树脂)功能化。在一个实施方式中，酸部或碱部覆盖或者至少部分地覆盖该苯乙烯基质，以尽量减少苯乙烯基质对罗汉果苷V的吸收，并且最大程度地通过离子交换去除造成草味或土味或气味以及苦味的化合物。在某些实施方式中，酸部或碱部覆盖至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或至少100％的苯乙烯基质。

离子交换纯化条件

还应当理解的是，除了阳离子和阴离子交换树脂的组合使用，离子交换纯化条件对于制备具有纯正甜味的甜汁组合物、同时最小化地减少期望化合物如罗汉果苷的损失也有影响。这样的处理条件包括，例如，流速。

本文中所用的“流速”是指果汁流过柱子的速率，表示为柱床体积/小时(bv/hr)。在这种情形下“柱床体积”是指基于单独的阴离子树脂体积柱子中安置的树脂床所占的体积。通过树脂床的流速可影响果汁在含有离子交换树脂的柱子中的滞留时间。果汁的滞留时间可影响在纯化过程中罗汉果苷V和其他萜苷的损失量，因此，流速可以影响罗汉果苷V和其他萜苷的损失量。

在一些实施方式中，本文所述的方法的实施使得果汁以约5bv/hr的平均流速与阳离子交换树脂接触。其他实施方式中，本文所述的方法的实施使得果汁以约5bv/hr的平均流速与阴离子交换树脂接触。在其他实施方式中，本文所述的方法的实施使得果汁以约5bv/hr的平均流速与阳离子和阴离子交换树脂混合床接触。还应该理解的是，在一个变型中，在整个纯化过程中的流速可以为从约2bv/hr至约30bv/hr。

甜汁组合物(离子交换纯化后)

与阳离子和阴离子交换树脂接触后的甜汁组合物比目前本领域已知的从僧果中得到的甜味剂具有更纯正的味道。

罗汉果苷V和其他萜苷含量

如以上所讨论的，在本文所述的方法中使用的离子交换树脂可以使纯化过程中某些萜苷特别是罗汉果苷V的损失最小化。甜汁组合物中某些萜苷尤其是罗汉果苷V的量与甜汁组合物的甜度相关联。

在一些实施方式中，以干重计，经HPLC测定，根据本文所述方法制备的甜汁组合物含有至少0.1％、至少0.5％、至少1％、至少2％、至少3％、至少4％、至少5％、至少10％、至少15％、至少20％、0.1％和75％之间、1％和65％之间、1％和50％之间、1％和40％之间、1％和20％之间、1％和10％之间、5％和70％之间、5％和50％之间、或5％和20％之间的罗汉果苷V。

在一些实施方式中，以干重计，经HPLC测定，根据本文所述方法制备的甜汁组合物含有至少0.1％、至少0.5％、至少1％、至少2％、至少3％、至少4％、至少5％、至少10％、至少15％、至少20％、0.1％和75％之间、1％和65％之间、1％和50％之间、1％和40％之间、1％和20％之间、1％和10％之间、5％和70％之间、5％和50％之间、或5％和20％之间的萜苷。如以上所讨论的，在根据本文所述方法采用离子交换树脂进行纯化后的甜汁组合物中保留的萜苷可以包括，例如，罗汉果苷和赛门苷。在一个变型中，保留在甜汁组合物中的萜苷包括罗汉果苷V、罗汉果苷IV、11-氧-罗汉果苷V、罗汉果苷VI和赛门苷I。在另一变型中，保留的萜苷包括罗汉果苷V，以及罗汉果苷IV、11-氧-罗汉果苷V、罗汉果苷VI和赛门苷I中的一种或多种。

造成草味或土味或气味以及苦味的化合物

本文所述方法中使用的阳离子和阴离子交换树脂去除或至少部分地去除一种或多种造成草味或土味或气味以及苦味的化合物。这类化合物可以选自，例如，蛋白黑素、肽、类萜、酚(包括，例如多酚类、酚类低聚物、稠多酚)和萜苷(不同于上述甜味萜苷包括例如罗汉果苷V、罗汉果苷IV、11-氧-罗汉果苷V、罗汉果苷VI和赛门苷I)。存在于甜汁组合物中的这些化合物的量与甜汁组合物的纯正味道相关联。

在一个实施方式中，根据本文所述的方法制备的甜汁组合物具有少量的苦味蛋白黑素。在另一个实施方式中，甜汁组合物具有少量的苦味肽。在又一个实施方式中，甜汁组合物具有少量的苦味类萜。在又一个实施方式中，甜汁组合物具有少量的苦味酚。在又一个实施方式中，甜汁组合物具有少量的苦味多酚。在一个实施方式中，甜汁组合物具有少量的苦味酚类低聚物。在另一个实施方式中，甜汁组合物具有少量的苦味稠多酚。在又一个实施方式中，甜汁组合物具有少量的苦味萜苷。

本文所述的方法可以制备如下的甜汁组合物，其中组合物中存在的苦味化合物的量少于味觉感知的阈值。在某些实施方式中，基于70°白利糖度的甜汁组合物浓缩物，甜汁组合物具有少于1000ppm、少于900ppm、少于800ppm、少于700ppm、少于600ppm、少于500ppm、少于400ppm、少于300ppm、少于200ppm、少于100ppm、少于90ppm、少于80ppm、少于70ppm、少于60ppm、少于50ppm、少于40ppm、少于30ppm、少于20ppm、少于10ppm、少于9ppm、少于8ppm、少于7ppm、少于6ppm、少于5ppm、少于5ppm、少于4ppm、少于3ppm、少于2ppm、或少于1ppm的一种或多种的上述苦味化合物。

其他试剂

虽然使用根据本文所述方法制备的甜汁组合物一般可以无需添加其他试剂以覆盖或掩盖异味和气味，但本文所述的甜汁组合物也可以与其他材料组合，如调味剂、着色剂和甜味剂。调味剂的例子包括天然和人造食品调味剂。着色剂的例子包括天然和人造的食用色素。甜味剂的例子可以包括天然和人造的营养性甜味剂以及天然和人造的非营养性甜味剂。

本文所述的甜汁组合物可以用于食品、饮料、药物或膳食补充剂产品。

应当理解的是，本文提及“约”某数值或参数包括(并描述)涉及该数值或参数本身的实施方式。例如，提及“约X”的表述包括对“X”本身的表述。在其他情况下，术语“约”在与其他量度联用时，或用于修饰一个值、单位、常数或值的范围时，是指+/-10％的变化。

还应当理解的是，本文提及两个值或参数“之间”包括(并描述)包含这两个值或参数本身的实施方式。例如，提及“x和y之间”的表述包括对“x”和“y”自身的表述。

实施例

以下实施例仅仅是说明性的，并不意在以任何方式限制本公开的任意方面。

实施例1

实验室规模制备和纯化稀释的僧果果汁

本实施例描述了对稀释并澄清的僧果果汁的纯化。在本实施例中，稀释的果汁由澄清并浓缩至约70°白利糖度的僧果果汁浓缩物获得。

离子交换树脂和装置的装配

在本实施例中使用的离子交换树脂是Dowex Marathon MSC强酸阳离子(SAC)树脂和Dowex Marathon WBA弱碱阴离子(WBA)树脂，二者都是以单分散珠级别商购获得的。

安装四个硬质PVC柱，将1200毫升所选的湿树脂装入每个柱中，以提供SAC→WBA→SAC→WBA的处理顺序。SAC柱以氢形式再生，而WBA柱以羟基形式再生。SAC柱以逆流模式再生。当大部分树脂再生剂被冲洗出来时(如通过电导率测定)，连接树脂柱，并且周期性地向下冲洗，直到得到在果汁加工制备中可接受的水质。在此实施例中，从第二WBA柱出水记录的可接受水质pH<10，电导率<20μS/cm。

从果汁浓缩物获得的稀释果汁

已经澄清并浓缩至70°白利糖度的僧果果汁用反渗(RO)水稀释。所得稀释果汁是光学透明的。因此，没有对稀释果汁进行进一步澄清。然而，本领域技术人员将会认识到，如果果汁浓缩物浑浊，可采用附加的过滤步骤。本实施例中使用的稀释果汁的特性汇总于下表1中。

采用离子交换树脂纯化稀释果汁

将再生和冲洗过的离子交换柱排空降到树脂床的水平，从而尽量减少上部空间的水对果汁的额外稀释。柱子在随后的处理过程维持在树脂床水平或高于树脂床的水平。将10L经稀释且澄清的僧果果汁(相当于8.3柱床体积的果汁，基于第一阴离子树脂体积)泵送到第一阳离子柱树脂床水平以尽量减少树脂的干扰，通过树脂向下引导，然后顺序流出并按照SAC→WBA→SAC→WBA顺序进入下一个柱子中树脂床的水平。

使用白利糖度校准的折射计监测从第二WBA柱流出的果汁。弃掉“变甜体积”(“sweeten on volume”)直到检测到所需的甜度水平，之后收集甜汁。在10L(8.3柱床体积)的果汁泵入第一阳离子柱之后，用水置换出柱中残留的果汁。收集“浸出体积”(“sweetenoff volume”)直到所监测的白利糖度水平下降到所需水平，然后停止收集。“变甜”是指在甜度检测中在果汁进入树脂柱和离开树脂柱之间随着树脂中的水逐渐地被果汁取代的延迟。相反，“浸出”是指在取代水进入树脂柱和离开树脂柱的甜度衰减之间随着甜汁被水取代的延迟。

在第二阴离子交换柱后收集的甜汁(即第二去离子步骤后)的特性汇总于下表1中。

表1.果汁组合物特性的汇总

可溶性固形物含量为溶解的固形物的重量占果汁样品重量的百分比的量度。可溶性固形物含量可通过折射计来测量，并且可表示为°白利糖度单位。

电导率与无机和有机的溶解的阳离子(包括，例如钠、钾、镁和钙)和阴离子(包括，例如氯化物、硫酸盐、磷酸盐、柠檬酸盐和苹果酸盐)的浓度成比例。电导率可通过本领域中已知的任何合适的方法或技术测量，包括例如使用电导率仪。电导率可表示为μS/cm单位。

可滴定酸度是果汁样品的游离的和非解离的总酸性氢的量度。可滴定酸可以使用本领域已知的任何合适的分析技术和方法来测定。例如，在本实施例中，将体积被记录的标准氢氧化钠(NaOH)溶液滴定到称重的果汁样品中直到通过pH计测定pH上升至8.1。苛性钠的消耗量，用该用量的苛性钠所能中和的无水柠檬酸当量表示。在表1中，可滴定酸度表示为％w/w(重量百分比)无水柠檬酸当量，其在制表的可溶固形物浓度下对应于：克柠檬酸/100g甜汁组合物。

如上所讨论的，罗汉果苷V的含量与果汁的甜度相关。在本实施例中，使用装备有UV-Vis检测器的HPLC测定罗汉果苷V。得到100mg果汁样品，超声振动2分钟溶于10mL甲醇。然后将溶液转移到100mL容量瓶中，用甲醇稀释至100mL。将稀释的溶液通过0.45μm的微过滤器进行过滤。获得20mg罗汉果苷V标准样品，超声振动2分钟溶解于10mL甲醇。然后将溶液转移到25mL的容量瓶中，并用甲醇稀释至25mL。将稀释的标准溶液通过0.45μm的微过滤器进行过滤。为了制作标准曲线，将2μL、4μL、6μL、8μL和10μL标准样品溶液注入HPLC中。然后，将10μL的过滤样品溶液注入HPLC，并根据标准曲线计算罗汉果苷V的含量。

下表2总结了本实施例描述的过程中的几个工作参数。

表2.颜色/味道突破(breakthrough)的工作参数汇总

离子交换处理去除了造成可溶性固形物含量(由折射计测定)的阳离子和阴离子。参见上表2，通过树脂去除的可溶性固形物的百分比如下计算：从稀释果汁中总的可溶性固形物中减去到颜色/味道突破时所收集果汁中总的可溶性固形物，将余数除以稀释果汁中的总固形物，然后乘以100。如本文所用，“颜色/味道突破”是指，在无色果汁离开第二阴离子树脂柱的过程中首次肉眼观察到黄色或褐色变色、或在无色果汁离开第二阴离子树脂柱的过程中可感受到果汁中有苦味时的时间点，以发生最早者为准。

参见上表2，甜汁中罗汉果苷V的保留百分比如下计算：至颜色/口味突破时所收集的甜汁组合物中总罗汉果苷V的含量除以稀释果汁中总罗汉果苷V的含量，再乘以100。罗汉果苷V的保留百分比测定为94％(以干重计，HPLC测定)。

在获取上表2所示数据时的进一步观察显示，第一阳离子交换树脂和第一阴离子交换树脂的比例为约1.7:1时适于处理由僧果果汁浓缩物得到的稀释果汁。

重建(re-establish)果汁的pH和浓度

对所收集的甜汁重建pH以抑制致病微生物繁殖并抑制果汁浓缩前的褐变反应。具体而言，收集的甜汁通过添加一些柠檬酸晶体而重建pH值到小于5，从而消除致病微生物的繁殖，并同时抑制果汁在蒸发过程中的褐变反应。然后将经过pH调节的甜汁蒸发至大于70°白利糖度，以制备微生物学稳定的重建的僧果果汁浓缩物，其呈现极小的颜色变化和极小的烹调味。

重建的僧果果汁浓缩物的特性归纳在上表1中。此外，可观察到重建的僧果果汁浓缩物具有浅稻草色，其在随后的储存中具有稳定的颜色和味道。

实施例2

来自实施例1的纯化僧果果汁的感官评价

将实施例1中制备的重建僧果果汁浓缩物的一部分稀释于瓶装矿泉水，得到250mg/L的罗汉果苷V含量。同时，将罗汉果苷V纯度为50％的粉末状僧果提取物甜味剂样品重新溶解于瓶装矿泉水。加入2.7g/L葡萄糖以匹配去离子化果汁制剂的碳水化合物甜味，得到250mg/L的罗汉果苷V含量。在两种制剂中，所得的pH为6.8，反映了瓶装水的pH值，酸度是微不足道的。

在盲测中，所有受试者都评价实施例1的甜汁的味道相当于或优于粉末状僧果果实提取物甜味剂。

实施例3

实验室规模制备和纯化新鲜的僧果果汁

该实施例描述对已经澄清的新鲜僧果果汁的制备和纯化。

离子交换树脂和装置的组装

在本实施例中使用同前面实施例1所描述的同样的树脂、设备和配置来处理僧果果汁。树脂在上述实施例1中使用之后，阳离子树脂的性能由于黑素蛋白和其他有机阳离子的累积已经明显恶化。为恢复树脂的性能，将该两个SAC柱用苛性钠溶液进行逆循环，冲洗和双再生。SAC柱以逆流模式再生，以尽量减少化学品的使用。当大部分树脂再生剂被冲洗出来时(如通过电导率测定)，以SAC→WBA→SAC→WBA的顺序连接柱子，并且周期性地向下冲洗，直到得到在果汁加工制备中可接受的水质。在此实施例中，从第二WBA柱出水记录的可接受水质被视为pH<10，电导率<20μS/cm。

新鲜僧果果汁

将新鲜的僧果压碎，然后使用逆流提取器在热水中处理40分钟。在本实施例中在与离子交换树脂接触之前将所得的果汁澄清。鲜果汁的特性汇总于下表3中。

使用离子交换树脂纯化鲜果汁

将再生和冲洗过的离子交换柱排空降到树脂床的水平，进一步尽量减少与上部空间的水混合而引起的对果汁的额外稀释。在随后的处理过程中树脂床水平保持在或高于床水平。将30L的鲜果汁(相当于25柱床体积的果汁，基于第一阴离子树脂体积)泵送到第一SAC柱的树脂床水平以尽量减少树脂的干扰，通过树脂向下引导，然后顺序流出并按照SAC→WBA→SAC→WBA顺序进入下一个柱子中树脂床的水平。

如在以上实施例1中所记载的，基于通过白利糖度水平监测的“变甜”和“浸出”效果来收集从第二WBA树脂流出的果汁。

在第二阴离子交换柱之后收集的甜汁(即第二去离子步骤后)的特性汇总于下表3中。

表3.处理过程中各阶段的果汁组合物特性汇总

下表4总结了在本实施例中描述的过程中的几个工作参数。

表4.颜色/味道突破的工作参数汇总

参见上述表4，可溶性固形物的去除百分比和罗汉果苷V的保留百分比按照上述实施例1描述的方法进行测定。观察到罗汉果苷V的保留率为98％(以干重计，HPLC测定)。

在获取上表4所示数据时的进一步观察显示，第一阳离子交换树脂与第一阴离子交换树脂的比例为大约1:1更适合加工鲜果汁。

重建果汁的pH值和浓度

所收集的甜汁通过添加一些柠檬酸晶体而重建pH值到小于5，从而消除致病微生物的繁殖，并同时抑制果汁在蒸发中的褐变反应。然后将经过pH调节的甜汁蒸发至大于70°白利糖度，以制备微生物学稳定的重建的僧果果汁浓缩物，其呈现极小的颜色变化和极小的烹调味。

重建的僧果果汁浓缩物的特性总结于上表4。此外，观察到重建的浓缩物具有浅稻草色，其在随后的存储过程具有稳定的颜色和味道。

实施例4

来自实施例3的纯化僧果果汁的感官评价

将实施例3制备的重建僧果果汁浓缩物的一部分稀释于瓶装矿泉水，其罗汉果苷V含量为250mg/L。将实施例1制备的重建僧果果汁浓缩物的一部分也稀释于瓶装矿泉水，其罗汉果苷V含量为250mg/L。同时，将罗汉果苷V纯度为50％的粉末状僧果提取物甜味剂样品重溶于瓶装矿泉水。在所有三种制剂中，所得的pH为6.8，反映了瓶装水的pH值，酸度是微不足道的。

在盲测中，所有受试者都评价实施例3(新鲜僧果果汁)的味道更纯正且更优于粉末状僧果提取物甜味剂产品和以上实施例1制备的甜汁(通过稀释僧果果汁浓缩物得到的纯化的僧果果汁)。

Claims (20)

1.一种制备甜汁组合物的方法，包括：

a)提供葫芦科的果实，其中所述果实包含萜苷，且其中所述萜苷中的至少一种是罗汉果苷V；

b)从所述果实获得果汁，其中所述果汁包含萜苷，且所述萜苷中的至少一种是罗汉果苷V；

c)提供阳离子交换树脂和阴离子交换树脂，其中所述阳离子交换树脂以酸形式再生并且所述阳离子交换树脂为强酸阳离子交换树脂，且其中所述阴离子交换树脂以碱形式再生，所述阴离子交换树脂为弱碱阴离子交换树脂；和

d)使所述果汁与所述阳离子交换树脂接触以制备部分处理的果汁；和使所述部分处理的果汁与所述阴离子交换树脂接触以制备甜汁组合物，其中经高压液相色谱(HPLC)测定所述甜汁组合物保留果汁中至少60％的罗汉果苷V。

2.如权利要求1所述的方法，其中经HPLC测定所述甜汁组合物保留果汁中至少60％的萜苷。

3.如权利要求1或2所述的方法，其中所述果汁和所述甜汁组合物各自包含天然存在于果实中的糖。

4.如权利要求1或2所述的方法，其中步骤(b)包括：

ⅰ)使所述果实与水接触以形成含水浆料；

ⅱ)在至少60℃的温度下处理所述含水浆料；和

ⅲ)从步骤(ii)中的所述含水浆料中获得果汁。

5.如权利要求4所述的方法，还包括在将所述果汁与阳离子交换树脂和阴离子交换树脂接触之前使其澄清。

6.如权利要求1或2所述的方法，还包括：

提供第二阳离子交换树脂和第二阴离子交换树脂，其中所述第二阳离子交换树脂以酸形式再生并且所述第二阳离子交换树脂为强酸阳离子交换树脂，且其中所述第二阴离子交换树脂以碱形式再生并且所述第二阴离子交换树脂为弱碱阴离子交换树脂；和

使所述甜汁组合物与所述第二阳离子交换树脂接触以制备部分处理的果汁；和使所述部分处理的果汁与所述第二阴离子交换树脂接触以制备第二甜汁组合物。

7.如权利要求1或2所述的方法，其中所述酸形式选自氢形式、铵形式及其组合。

8.如权利要求1或2所述的方法，其中所述阳离子交换树脂是以氢形式再生的强酸阳离子交换树脂。

9.如权利要求1或2所述的方法，其中所述碱形式选自羟基形式、碳酸盐形式及其组合。

10.如权利要求1或2所述的方法，其中所述阴离子交换树脂是以羟基形式再生的弱碱阴离子交换树脂。

11.如权利要求1或2所述的方法，其中所述果实来自罗汉果(Siraitia grosvenorii)或翅子罗汉果(Siraitia siamensis)。

12.一种制备甜汁组合物的方法，包括：

a)提供来自葫芦科果实的果汁，其中所述果汁是新鲜果汁或稀释果汁，其中所述果汁包含来自所述果实的萜苷，且其中所述萜苷中的至少一种是罗汉果苷V；

b)提供阳离子交换树脂和阴离子交换树脂，其中所述阳离子交换树脂以酸形式再生并且所述阳离子交换树脂为强酸阳离子交换树脂，且其中所述阴离子交换树脂以碱形式再生并且所述阴离子交换树脂为弱碱阴离子交换树脂；

c)使所述果汁与所述阳离子交换树脂接触以制备部分处理的果汁；和使所述部分处理的果汁与所述阴离子交换树脂接触以制备甜汁组合物，其中经高压液相色谱(HPLC)测定所述甜汁组合物保留果汁中至少60％的罗汉果苷V。

13.如权利要求12所述的方法，其中步骤(a)中提供的所述果汁是：

新鲜果汁，且其中阳离子交换树脂与阴离子交换树脂之比为1:1；或

稀释果汁，且其中阳离子交换树脂与阴离子交换树脂之比为1.4～2:1。

14.如权利要求12或13所述的方法，其中所述阳离子交换树脂是以氢形式再生，且所述阴离子交换树脂是以羟基形式再生。

15.如权利要求12或13所述的方法，其中所述果实来自罗汉果(Siraitiagrosvenorii)或翅子罗汉果(Siraitia siamensis)。

16.一种甜汁组合物，其根据权利要求1～15中任一项所述的方法制备。

17.一种食品、药物或膳食补充剂产品，其包含根据权利要求1～15中任一项所述的方法制备的甜汁组合物。

18.一种饮料，其包含根据权利要求1～15中任一项所述的方法制备的甜汁组合物。

19.由根据权利要求1～15中任一项所述的方法制备的甜汁组合物在食品、药物或膳食补充剂产品中的用途。

20.由根据权利要求1～15中任一项所述的方法制备的甜汁组合物在饮料中的用途。

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