CN104094846A - 一种罗汉果组培苗壮苗生根的方法 - Google Patents

一种罗汉果组培苗壮苗生根的方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种罗汉果组培苗壮苗生根的方法，涉及农业繁殖方法领域。该方法包括以下步骤：组培苗诱导培养、组培苗增殖继代培养、罗汉果组培苗壮苗生根培养、壮苗生根组培苗炼苗并移栽成活。本发明采用的壮苗生根培养基配方具有较好的协同作用，很好达到壮苗生根的目的，达到移栽要求，外部环境适应性强，以提高移栽的成活率。本发明方法得到的组培苗粗壮、抗病性强、木质化程度高，定植移栽成活率达到98%以上。

Description

一种罗汉果组培苗壮苗生根的方法
技术领域
本发明涉及农业繁殖方法领域，具体为罗汉果的繁殖方法领域，尤其涉及一种罗汉果组培苗壮苗生根的方法。
背景技术
罗汉果(Siraitia grosvenorii)是葫芦科多年生藤本植物。罗汉果具有清热润肺、消暑生津、滑肠通便，清咽止咳之功效，也是饮料和调味佳果。罗汉果含有丰富的纯蛋白、粗蛋白、多种维生素、果糖以及20多种微量元素，还具有抗衰老，防肺结核作用。
罗汉果雌雄异株，幼苗期难分雌雄，因此生产上一直以压蔓法进行繁殖。压蔓繁殖的罗汉果种薯苗，繁殖率低，易感染病虫。自1980年林荣等进行罗汉果组织培养获成功后，用罗汉果的叶组织、带芽茎段、顶芽成功诱导丛生芽，培养成完整植株的研究陆续有报道。罗汉果组培苗繁殖系数高，去病毒效果好，短期内可大量培育优良种苗。近几年推广种植罗汉果组培苗，在生产上已显示巨大优势。在已开展的罗汉果组培苗研究中，主要报道了罗汉果丛生芽诱导与培养条件，而对其壮苗生根培养还没有详细报道。
罗汉果组培苗相对于传统压蔓繁殖的薯苗表现了繁殖系数高、不携带病生长势、适应性较广等优势，但由于很多出现了组培苗纤细易脆易断，易失水萎蔫等现象，导致定植成活率低、开花结果率低，因此造成经济损失，也增加了种植风险。组培苗生根质量直接决定了后期移栽的成活率，因此亟需对罗汉果组培苗壮苗生根进行深入研究，进而提高组培苗移栽成活率。
发明内容
本发明的目的在于：针对上述存在的问题，提供一种罗汉果组培苗壮苗生根的方法，解决罗汉果组培苗纤细易脆易断，易失水萎蔫等现象，提高罗汉果组培苗生根诱导率,达到根多且粗壮，以提高开花结果率，并提高移栽定植成活率。
本发明采用的技术方案为：
一种罗汉果组培苗壮苗生根的方法，包括以下步骤：
(1)组培苗诱导培养：取灭菌好的三年生以上罗汉果雌株的带芽茎段，接种在诱导培养基上诱导产生丛生芽；
(2)组培苗增殖继代培养：将丛生芽接种于增殖继代培养基中培养4次以上；
(3)罗汉果组培苗壮苗生根培养：将无菌增殖继代培养组培苗的单芽茎段，接种在壮苗生根培养基中进行培养，培养温度为22～26℃，光照强度1500～2000Lx,光照6～10h/d，培养周期为40～50d，所述壮苗生根培养基为MS+NAA 0.01～0.05mg/L+活性炭0.2～0.3g/L+蔗糖2.5～3％，pH值为5.6；
(4)壮苗生根组培苗移栽炼苗：将长至5cm的无菌壮苗生根组培苗从培养室移入温室大棚炼苗15～20d，然后取出炼苗后的组培苗并洗净，移栽至由泥炭土、煤渣和山泥组成并按2:1:1的比例混合而成的栽培基质中，温度控制在25～28℃，移栽30d后统计移栽成活率。
步骤(1)中诱导培养基的配方为MS+BA 0.7～0.9mg/L+NAA 0.08～0.10mg/L+蔗糖2％，pH值为5.8。
步骤(2)中增值继代培养基为MS+BA 0.2～0.3mg/L+NAA 0.05～0.08mg/L+蔗糖2％，pH值为5.7。
综上所述，由于采用了上述技术方案，本发明的有益效果是：
1、本发明采用的壮苗生根培养基配方具有协同作用，很好达到壮苗生根的目的，达到移栽要求，外部环境适应性强，因此以提高移栽成活率。
2、利用大棚代替培养室对组培苗进行壮苗生根培养，节约培养室的空间，组培苗炼苗时接受自然光以及大棚温度的锻炼，有助于组培苗的木质化程度增高，已达到适应外部温度和湿度，以提高移栽的成活率。
3、本发明栽培基质富含有机质，结构疏松，具有良好的透气性，组培苗根部吸水强，提高组培苗的移栽成活率。
4、本发明方法得到的组培苗粗壮、抗病性强、木质化程度高，定植移栽成活率达到98％以上。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明的上述发明内容作进一步的详细描述，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于下述实施例。
实施例1
一种罗汉果组培苗壮苗生根的方法，包括以下步骤：
(1)组培苗诱导培养：取灭菌好的三年生以上罗汉果雌株的带芽茎段，接种在诱导培养基上诱导产生丛生芽，其中诱导培养基的配方为MS+BA 0.8mg/L+NAA 0.08mg/L+蔗糖2％，pH值为5.8。
(2)组培苗增殖继代培养：将丛生芽接种于增殖继代培养基中培养4次以上，其中增值继代培养基为MS+BA 0.2mg/L+NAA 0.06mg/L+蔗糖2％，pH值为5.7；
(3)罗汉果组培苗壮苗生根培养：将无菌增殖继代培养组培苗的单芽茎段，接种在壮苗生根培养基中进行培养，培养温度为25℃，光照强度2000Lx,光照10h/d，培养周期为40d，所述壮苗生根培养基为MS+NAA 0.03mg/L+活性炭0.2g/L+蔗糖2.5％，pH值为5.6；
(4)壮苗生根组培苗炼苗并移栽成活：将长至5cm的无菌壮苗生根组培苗从培养室移入温室大棚炼苗15d，然后取出炼苗后的组培苗并洗净，移栽至由泥炭土、煤渣和山泥组成并按2:1:1的比例混合而成的栽培基质中，温度控制在25℃，移栽30d后统计移栽成活率。
实施例2
一种罗汉果组培苗壮苗生根的方法，包括以下步骤：
(1)组培苗诱导培养：取灭菌好的三年生以上罗汉果雌株的带芽茎段，接种在诱导培养基上诱导产生丛生芽，其中诱导培养基的配方为MS+BA 0.8mg/L+NAA 0.08mg/L+蔗糖2％，pH值为5.8。
(2)组培苗增殖继代培养：将丛生芽接种于增殖继代培养基中培养4次以上，其中增值继代培养基为MS+BA 0.2mg/L+NAA 0.06mg/L+蔗糖2％，pH值为5.7；
(3)罗汉果组培苗壮苗生根培养：将无菌增殖继代培养组培苗的单芽茎段，接种在壮苗生根培养基中进行培养，培养温度为25℃，光照强度2000Lx,光照10h/d，培养周期为40d，所述壮苗生根培养基为MS+NAA 0.01mg/L+活性炭0.2g/L+蔗糖2.5％，pH值为5.6；
(4)壮苗生根组培苗炼苗并移栽成活：将长至5cm的无菌壮苗生根组培苗从培养室移入温室大棚炼苗15d，然后取出炼苗后的组培苗并洗净，移栽至由泥炭土、煤渣和山泥组成并按2:1:1的比例混合而成的栽培基质中，温度控制在25℃，移栽30d后统计移栽成活率。实施例3
一种罗汉果组培苗壮苗生根的方法，包括以下步骤：
(1)组培苗诱导培养：取灭菌好的三年生以上罗汉果雌株的带芽茎段，接种在诱导培养基上诱导产生丛生芽，其中诱导培养基的配方为MS+BA 0.8mg/L+NAA 0.08mg/L+蔗糖2％，pH值为5.8。
(2)组培苗增殖继代培养：将丛生芽接种于增殖继代培养基中培养4次以上，其中增值继代培养基为MS+BA 0.2mg/L+NAA 0.06mg/L+蔗糖2％，pH值为5.7；
(3)罗汉果组培苗壮苗生根培养：将无菌增殖继代培养组培苗的单芽茎段，接种在壮苗生根培养基中进行培养，培养温度为25℃，光照强度2000Lx,光照10h/d，培养周期为40～50d，所述壮苗生根培养基为MS+NAA 0.05mg/L+活性炭0.2g/L+蔗糖2.5％，pH值为5.6；
(4)壮苗生根组培苗炼苗并移栽成活：将长至5cm的无菌壮苗生根组培苗从培养室移入温室大棚炼苗15d，然后取出炼苗后的组培苗并洗净，移栽至由泥炭土、煤渣和山泥组成并按2:1:1的比例混合而成的栽培基质中，温度控制在25℃，移栽30d后统计移栽成活率。
实施例4
本实施例4与上述实施例不同之处在于：步骤(3)中壮苗生根培养基的活性炭浓度为0.2g/L，其他条件不变。
实施例5
本实施例5与上述实施例不同之处在于：步骤(1)中诱导培养基的细胞分裂素BA的浓度为0.7或0.9mg/L，其他条件不变。
实施例5
本实施例5与上述实施例不同之处在于：步骤(1)中诱导培养基的生长素NAA的浓度为0.09或0.10mg/L，其他条件不变。
实施例6
本实施例6与上述实施例不同之处在于：步骤(2)增值继代培养基的细胞分裂素BA的浓度为0.3mg/L，其他条件不变。
实施例7
本实施例7与上述实施例不同之处在于：步骤(2)增值继代培养基的生长素NAA的浓度为0.05或0.08mg/L，其他条件不变。
现做以下处理，试验设7组壮苗生根培养基，每组30棵，并以实施例1～3的壮苗生根培养基分别作为组1、组2、组3，组4：MS+NAA 0.08mg/L+活性炭0.2g/L+蔗糖2.5％；组5:MS+NAA 0.03mg/L+活性炭0.3g/L+蔗糖2.5％；组6：MS+活性炭0.2g/L+蔗糖2.5％；组7：MS+NAA 0.03mg/L+蔗糖2.5％，其他条件不变，以对罗汉果组培苗生根诱导，以上6组组培苗同一天进行移栽，30d后统计移栽成活率，统计数据如表1：
表1 不同壮苗生根培养基对罗汉果组培苗的影响以及成活率
通过上述数据表明，本发明罗汉果壮苗生根方法得到的组培苗粗壮、根系发达健壮，抗病强、移栽成活率高达98以上。

Claims (3)

1.一种罗汉果组培苗壮苗生根的方法，其特征在于包括以下步骤：
(1)组培苗诱导培养：取灭菌好的三年生以上罗汉果雌株的带芽茎段，接种在诱导培养基上诱导产生丛生芽；
(2)组培苗增殖继代培养：将丛生芽接种于增殖继代培养基中培养4次以上；
(3)罗汉果组培苗壮苗生根培养：将无菌增殖继代培养组培苗的单芽茎段，接种在壮苗生根培养基中进行培养，培养温度为22～26℃，光照强度1500～2000Lx,光照6～10h/d，培养周期为40～50d，所述壮苗生根培养基为MS+NAA 0.01～0.05mg/L+活性炭0.2～0.3g/L+蔗糖2.5～3％，pH值为5.6；
(4)壮苗生根组培苗炼苗并移栽成活：将长至5cm的无菌壮苗生根组培苗从培养室移入温室大棚炼苗15～20d，然后取出炼苗后的组培苗并洗净，移栽至由泥炭土、煤渣和山泥组成并按2:1:1的比例混合而成的栽培基质中，温度控制在25～28℃，移栽30d后统计移栽成活率。
2.如权利要求1所述的一种罗汉果组培苗壮苗生根的方法，其特征在于：步骤(1)中诱导培养基的配方为MS+BA 0.7～0.9mg/L+NAA0.08～0.10mg/L+蔗糖2％，pH值为5.8。
3.如权利要求1所述的一种罗汉果组培苗壮苗生根的方法，其特征在于：步骤(2)中增值继代培养基为MS+BA 0.2～0.3mg/L+NAA 0.05～0.08mg/L+蔗糖2％，pH值为5.7。
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