CN104542307B - 一种木鳖的培养方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种木鳖的培养方法，包括：步骤一、分化培养：将木鳖外植体接种到MS分化培养基中培养25～35天直至外植体的侧芽分化，培养温度23‑26℃，光照强度1400‑2000lux，光照周期10‑12小时/天；步骤二、壮苗培养：将木鳖外植体在MS壮苗培养基中培养35～45天得到木鳖健壮植株，培养温度23‑26℃，光照强度1400‑2000lux，光照周期10‑12小时/天；步骤三、生根培养：将木鳖健壮植株置于MS生根培养基中培养35～45天得到带根的木鳖植株，培养温度23‑26℃，光照强度1400‑2000lux，光照周期10‑12小时/天。本发明的方法能够快速繁殖出大量适合移栽的木鳖种苗。
Description
技术领域
本发明涉及一种植物繁殖方法，特别是一种木鳖的培养方法。
背景技术
木鳖(Momordica cochinchinensis(Lour)Spreng)为葫芦科苦瓜属多年生草质藤本雌雄异株植物，具有重要的观赏和药用价值。以皂角甙、木鳖子素、甾醇、生物硷等为主要活性成分，在外科用药、杀虫农药等方面具有广泛开发应用前景。木鳖子在我国主要分布广西、四川、广东、江西、湖南、湖北、云南、贵州等省，在南方大部分省区有栽培(陈小军，木鳖子栽培技术，南方园艺，2010，03：54-55.)。
木鳖常用种子和块根繁殖；但种子数量受限、发芽和成苗率较低，又因雌雄异株，种子苗后代遗传背景杂合、群体差参不齐，且难以保证当年开花结实；块根繁殖通常根据块根上芽眼的数目切成若干小块，每块至少具有一个芽眼，埋入播种穴内，每穴一块，一般当年即可开花结果，比种子繁殖快，但繁殖数量也有限(赵世伟主编，园林工程景观设计：植物配置栽培应用大全(上、中、下卷)，中国农业科技出版社，2000年09月第1版，第1457页)。所以，木鳖的快速繁殖是其种植业中亟待解决的“瓶颈问题”。
发明内容
本发明的一个目的是解决至少上述问题和/或缺陷，并提供至少后面将说明的优点。
本发明还有一个目的是提供一种木鳖组织培养快速繁殖方法，它能够快速繁殖出大量适合移栽的优良木鳖种苗。
本发明还有一个目的是提供一种在固体培养基中培养木鳖时，使其有效吸收固体培养基中的营养成分的问题。
本发明提供的技术方案为：
一种木鳖的培养方法，包括：
步骤一、分化培养：将木鳖外植体接种到MS分化培养基中培养25～35天直至木鳖外植体的侧芽分化长出丛生芽，其中，分化培养中的培养温度为23-26℃，光照强度为1400-2000lux，光照周期为10-12小时/天；之后进入步骤二，
步骤二、壮苗培养：将步骤一中经过分化培养的木鳖外植体在MS壮苗培养基中培养35～45天得到木鳖健壮植株，其中，壮苗培养中的培养温度为23-26℃，光照强度为1400-2000lux，光照周期为10-12小时/天；之后进入步骤三，
步骤三、生根培养：将经步骤二中得到的木鳖健壮植株置于MS生根培养基中培养35～45天得到带根的木鳖植株，其中，生根培养中的培养温度为23-26℃，光照强度为1400-2000lux，光照周期为10-12小时/天。
优选的是，所述的木鳖的培养方法中，在所述步骤三之后还进行步骤四，所述步骤四包括：炼苗和移栽：先将步骤三中得到的带根的木鳖植株在温度25℃下炼苗2-4天，之后再移栽到沙土壤中生长45天，最后再移栽至大田生长，其中，大田的生长条件为：温度为20-28℃，相对湿度为75-80％，遮阳率为70％。
优选的是，所述的木鳖的培养方法中，所述步骤四中，木鳖植株移栽至大田后，第1-7天，每天早晚间隔10个小时各喷雾3～5次，每次喷雾10min，第8天至以后，每天早晚间隔10个小时各喷雾1次，每次10min。
优选的是，所述的木鳖的培养方法中，所述步骤一中，MS分化培养基包含：MS，0.1-0.4mg/L KT，1.0-2.0mg/L 6-BA，0.2-1.0mg/L NAA，25-30g/L蔗糖和4.8-5.8g/L琼脂，并调节初始pH值为5.8。
优选的是，所述的木鳖的培养方法中，所述步骤二中，MS壮苗培养基包含：MS，0.5-2.0mg/L 6-BA、0.1-0.4mg/L KT、0.2-1.0mg/L IAA，25-30g/L蔗糖和3.8-4.8g/L琼脂，并调节初始pH值为5.8。
优选的是，所述的木鳖的培养方法中，所述步骤三中，MS生根培养基包含：1/2MS，0.5-1.0mg/L IBA、1.0-2.0mg/LNAA、25-30g/L蔗糖和3.8-4.8g/L琼脂，并调节初始pH值为5.8。
优选的是，所述的木鳖的培养方法中，在所述步骤一之前还包括木鳖外植体获取，木鳖外植体获取的具体过程包括：取木鳖嫩芽作为外植体，首先使用体积百分比2％的洗洁精水溶液浸泡5-15min、之后使用自来水冲洗10-20min，然后用质量体积分数0.1％的升汞消毒8-10min，最后用无菌水冲洗3-5次，除去表面水分得到木鳖外植体。
优选的是，所述的木鳖的培养方法中，所述质量体积分数0.1％的升汞中还包含吐温-20。
优选的是，所述的木鳖的培养方法中，所述MS分化培养基、MS壮苗培养基和MS生根培养基均为固体培养基，在固体培养基中放置一支架，该支架包括一水平设置的支撑滤网和多根吸水柱，所述多根吸水柱的一端均固定在所述支撑滤网上且靠近所述支撑滤网边框的部位设置的吸水柱的数量多，，所述支架由吸水树脂制成，所述支撑滤网位于所述固体培养基的表面，而所述多根吸水柱插入到所述固体培养基中，在所述支撑滤网上进行所述分化培养、壮苗培养和生根培养。
本发明至少包含如下优点：
(1)通过生物技术对木鳖进行组织培养快速繁殖，在短时间内培育出大量可供大田栽培的木鳖幼苗，提高了木鳖种苗的繁殖系数和种苗质量，实现规模化生产，满足生产上的需要。
(2)在MS繁殖培养基中添加1.0-2.0mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA和0.1-0.4mg/L的激动素KT可促进丛生芽的分化；添加浓度为0.2-1.0mg/L的生长激素萘乙酸NAA可促进丛生芽的生长；
在MS壮苗培养基中添加浓度为0.5-1.5mg/L的6-BA和0.2-0.6mg/L的吲哚乙酸IAA可促进丛生芽叶片的展开；
在MS生根培养基上组合使用浓度为0.5-1.0mg/L的吲哚丁酸IBA和1.0-2.0mg/L的生长素NAA，可获得带根的完整植株，这些植株经炼苗后可直接移栽沙床。
(3)采用本发明的方法，得到的单芽增殖系数达到5-8倍，获得的组培苗生根率在95％以上，每株平均带3-4个根，根长为3-5厘米，移栽沙床成活率在98％以上；快速、便捷、高效地进行木鳖组织培养，实现木鳖组培种苗的规模化生产。
(4)本发明还设置有一个支架，由吸水树脂制成，可将该支架在固体培养基未凝固前或灭菌之前插入到其中，这样，由于吸水树脂的强吸水性，其能够吸收大量的培养基中的营养物质，在凝固后，将木鳖在该支架上培养，其除了能够从培养基中吸收营养成分，培养基也不易很快干化，也能够从该支架中吸收营养，且靠近所述支撑滤网边框的部位设置的吸水柱的数量多，这样，靠近培养基周边生长的木鳖也能够吸收到足够的营养成分，且固体培养基的表面也能保持湿润，解决了固体培养基容易干化、营养成分难以扩散分布失衡等问题。
具体实施方式
下面对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
本发明提供一种木鳖的培养方法，包括：
步骤一、分化培养：将木鳖外植体接种到MS分化培养基中培养25～35天直至外植体的侧芽分化长出丛生芽，其中，分化培养中的培养温度为23-26℃，光照强度为1400-2000lux，光照周期为10-12小时/天；之后进入步骤二，
步骤二、壮苗培养：将步骤一中经过分化培养的木鳖外植体在MS壮苗培养基中培养35～45天得到木鳖健壮植株，其中，壮苗培养中的培养温度为23-26℃，光照强度为1400-2000lux，光照周期为10-12小时/天；之后进入步骤三，
步骤三、生根培养：将经步骤二中得到的木鳖健壮植株置于MS生根培养基中培养35～45天得到带根的木鳖植株，其中，生根培养中的培养温度为23-26℃，光照强度为1400-2000lux，光照周期为10-12小时/天。
作为优选，在所述步骤三之后还进行步骤四，所述步骤四包括：炼苗和移栽：先将步骤三中得到的带根的木鳖植株在温度25℃下炼苗2-4天，之后再移栽到沙土壤中生长45天，最后再移栽至大田生长，其中，大田的生长条件为：温度为20-28℃，相对湿度为75-80％，遮阳率为70％。
作为优选，所述步骤四中，木鳖植株移栽至大田后，第1-7天，每天早晚间隔10个小时各喷雾3～5次，每次喷雾10min，第8天至以后，每天早晚间隔10个小时各喷雾1次，每次10min。
作为优选，所述步骤一中，MS分化培养基包含：MS，0.1-0.4mg/L KT，1.0-2.0mg/L6-BA，0.2-1.0mg/L NAA，25-30g/L蔗糖和4.8-5.8g/L琼脂，并调节初始pH值为5.8。
作为优选，所述步骤二中，MS壮苗培养基包含：MS，0.5-2.0mg/L 6-BA、0.1-0.4mg/L KT、0.2-1.0mg/L IAA，25-30g/L蔗糖和3.8-4.8g/L琼脂，并调节初始pH值为5.8。
作为优选，所述步骤三中，MS生根培养基包含：1/2MS，0.5-1.0mg/LIBA、1.0-2.0mg/L NAA、25-30g/L蔗糖和3.8-4.8g/L琼脂，并调节初始pH值为5.8。
作为优选，在所述步骤一之前还包括木鳖外植体获取，木鳖外植体获取的具体过程包括：取木鳖嫩芽作为外植体，首先使用体积百分比2％的洗洁精水溶液浸泡5-15min、之后使用自来水冲洗10-20min，然后用质量体积分数0.1％的升汞消毒8-10min，最后用无菌水冲洗3-5次，除去表面水分得到木鳖外植体。
作为优选，所述质量体积分数0.1％的升汞中还包含吐温-20。
作为优选，所述MS分化培养基、MS壮苗培养基和MS生根培养基均为固体培养基，在固体培养基中放置一支架，该支架包括一水平设置的支撑滤网和多根吸水柱，所述多根吸水柱的一端均固定在所述支撑滤网上且靠近所述支撑滤网边框的部位设置的吸水柱的数量多，所述支架由吸水树脂制成，所述支撑滤网位于所述固体培养基的表面，而所述多根吸水柱延伸插入到所述固体培养基中，在所述支撑滤网上进行所述分化培养、壮苗培养和生根培养。这样该支架吸收很多还为凝固的培养基，而且，可以根据培养容器的形状制定该支架，使其与培养容器的形状贴合，当培养基凝固为固体后，该支架也同时被固定在固体培养基中，由于其具有强吸水性，这样能够保持固体培养基的表面和内部的湿润度，同时，由于沿支撑滤网边框的位置设置有更多跟的吸水柱，这样，也能保证固体培养基的边缘也保持湿润。因为一般情况下是固体培养基的边缘更加容易干化，造成周缘的植株生长不好。本发明设置的支架可以避免这种情况。本发明的支撑滤网的孔径为50～30目左右，该支架可以有诸如淀粉接枝丙烯酸盐类、接枝丙烯酰胺、交联羧甲基纤维素接枝丙烯酰胺等材料制成。
本发明中的MS培养基的配方组成如下：
MS培养基
实施例1
(1)外植体的选择与消毒：取木鳖嫩芽作为外植体，依次用2％洗洁精水溶液浸泡10min、线状自来水冲洗15min、添加了2滴吐温-20的100毫升0.1％升汞消毒9min、无菌水冲洗4次，最后用消毒滤纸吸去表面水分，得到外植体，其中无菌水为经高压灭菌的蒸馏水。
(2)侧芽分化获得丛生芽快速繁殖：将步骤(1)得到的外植体接种到MS培养基中，在培养温度为24.5℃，光照强度1700lux，光照时间为11h/d的条件下培养30天，侧芽分化后获得大量丛生芽，其中MS培养基中添加0.2mg/L KT、2.0mg/L 6-BA和1.0mg/L NAA，30g/L蔗糖和5.0g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8。
(3)丛生芽壮苗培养：将步骤(2)中得到的丛生芽置于MS壮苗培养基中培养30天得到健壮植株，培养温度24.5℃，光照强度1700lux，光照时间为13小时/天；其中MS壮苗培养基中含1.5mg/L 6-BA，0.5mg/L IAA，0.2mg/L KT，30g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8。
(4)试管苗生根培养：将步骤(3)中得到的丛生芽置于MS生根培养基中培养20天得到带根的完整植株，培养温度24.5℃，光照强度1700lux，光照时间为13小时/天；其中1/2MS生根培养基中含0.2mg/L，0.5mg/L NAA，30g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8。
(5)炼苗与移栽：获得带根的完整植株后，在室温为25℃左右的室内打开瓶盖，在瓶中加入少量自来水，炼苗2-4天，表面角质形成后将苗取出，洗净根部培养基，立即移栽到通风良好且弱光的沙土壤中，在沙土壤中生长一个半月后移栽大田。移栽后一个星期内，每天早8点到晚6点喷雾3-5次，每次8-10min，此后每天早8点、晚6点各喷雾1次，每次10min；移栽时温度条件为18-28℃，相对湿度75-80％，遮阳率70％。
实施例2
本发明提供一种木鳖的培养方法，包括：
(1)木鳖外植体获取：取木鳖嫩芽作为外植体，首先使用体积百分比2％的洗洁精水溶液浸泡15min、之后使用自来水冲洗20min，然后用质量体积分数0.1％的包含吐温-20的升汞消毒8min，最后用无菌水冲洗5次，除去表面水分得到木鳖外植体。
(2)分化培养：将木鳖外植体接种到MS分化培养基中培养25天直至外植体的侧芽分化长出丛生芽，其中，分化培养中的培养温度为26℃，光照强度为2000lux，光照周期为12小时/天；MS分化培养基包含：MS，0.4mg/LKT，2.0mg/L 6-BA，1.0mg/L NAA，30g/L蔗糖和5.8g/L琼脂，并调节初始pH值为5.8。
(3)壮苗培养：将经过分化培养的木鳖外植体在MS壮苗培养基中培养35天得到木鳖健壮植株，其中，壮苗培养中的培养温度为26℃，光照强度为2000lux，光照周期为12小时/天；MS壮苗培养基包含：MS，2.0mg/L 6-BA、0.4mg/L KT、1.0mg/L IAA，30g/L蔗糖和4.8g/L琼脂，并调节初始pH值为5.8。
(4)生根培养：将木鳖健壮植株置于MS生根培养基中培养35天得到带根的木鳖植株，其中，生根培养中的培养温度为26℃，光照强度为2000lux，光照周期为12小时/天。MS生根培养基包含：1/2MS，1.0mg/L IBA、2.0mg/LNAA、30g/L蔗糖和4.8g/L琼脂，并调节初始pH值为5.8。
(5)炼苗和移栽：向带根的木鳖植株喷水，在温度25℃下炼苗2天，之后再移栽到沙土壤中生长45天，最后再移栽至大田生长，其中，大田的生长条件为：温度为20℃，相对湿度为75％，遮阳率为70％。木鳖植株移栽至大田后，第1-7天，每天早晚间隔10个小时各喷雾3次，每次喷雾10min，第8天至以后，每天早晚间隔10个小时各喷雾1次，每次10min。
实施例3
本发明提供一种木鳖的培养方法，包括：
(1)木鳖外植体获取：取木鳖嫩芽作为外植体，首先使用体积百分比2％的洗洁精水溶液浸泡5min、之后使用自来水冲洗10min，然后用质量体积分数0.1％的包含吐温-20的升汞消毒10min，最后用无菌水冲洗3次，除去表面水分得到木鳖外植体。
(2)分化培养：将木鳖外植体接种到MS分化培养基中培养35天直至外植体的侧芽分化长出丛生芽，其中，分化培养中的培养温度为23℃，光照强度为1400lux，光照周期为10小时/天；MS分化培养基包含：MS，0.1mg/LKT，1.0mg/L 6-BA，0.2mg/L NAA，25g/L蔗糖和4.8g/L琼脂，并调节初始pH值为5.8。
(3)壮苗培养：将经过分化培养的木鳖外植体在MS壮苗培养基中培养45天得到木鳖健壮植株，其中，壮苗培养中的培养温度为23℃，光照强度为1400lux，光照周期为10小时/天；MS壮苗培养基包含：MS，0.5mg/L 6-BA、0.1mg/L KT、0.2mg/L IAA，25g/L蔗糖和3.8g/L琼脂，并调节初始pH值为5.8。
(4)生根培养：将木鳖健壮植株置于MS生根培养基中培养45天得到带根的木鳖植株，其中，生根培养中的培养温度为23℃，光照强度为1400lux，光照周期为10小时/天。MS生根培养基包含：1/2MS，0.5mg/L IBA、1.0mg/LNAA、25g/L蔗糖和3.8g/L琼脂，并调节初始pH值为5.8。
(5)炼苗和移栽：向带根的木鳖植株喷水，在温度25℃下炼苗4天，之后再移栽到沙土壤中生长45天，最后再移栽至大田生长，其中，大田的生长条件为：温度为28℃，相对湿度为80％，遮阳率为70％。木鳖植株移栽至大田后，第1-7天，每天早晚间隔10个小时各喷雾3次，每次喷雾10min，第8天至以后，每天早晚间隔10个小时各喷雾1次，每次10min。
其中，在培养过程中，在MS分化培养基、MS壮苗培养基和MS生根培养基等固体培养基中放置一支架，该支架包括一水平设置的支撑滤网和多根吸水柱，所述多根吸水柱的一端均固定在所述支撑滤网上且靠近所述支撑滤网边框的部位设置的吸水柱的数量多，所述支架由吸水树脂制成，所述支撑滤网位于所述固体培养基的表面，而所述多根吸水柱延伸插入到所述固体培养基中，在所述支撑滤网上进行所述分化培养、壮苗培养和生根培养。这样该支架吸收很多还为凝固的培养基，而且，可以根据培养容器的形状制定该支架，使其与培养容器的形状贴合，当培养基凝固为固体后，该支架也同时被固定在固体培养基中，由于其具有强吸水性，这样能够保持固体培养基的表面和内部的湿润度，同时，由于沿支撑滤网边框的位置设置有更多跟的吸水柱，这样，也能保证固体培养基的边缘也保持湿润。因为一般情况下是固体培养基的边缘更加容易干化，造成周缘的植株生长不好。本发明设置的支架可以避免这种情况。本发明的支撑滤网的孔径为50～30目左右，该支架可以有诸如淀粉接枝丙烯酸盐类、接枝丙烯酰胺、交联羧甲基纤维素接枝丙烯酰胺等材料制成。
实施例4
本发明提供一种木鳖的培养方法，包括：
(1)木鳖外植体获取：取木鳖嫩芽作为外植体，首先使用体积百分比2％的洗洁精水溶液浸泡10min、之后使用自来水冲洗15min，然后用质量体积分数0.1％的包含吐温-20的升汞消毒10min，最后用无菌水冲洗5次，除去表面水分得到木鳖外植体。
(2)分化培养：将木鳖外植体接种到MS分化培养基中培养30天直至外植体的侧芽分化长出丛生芽，其中，分化培养中的培养温度为25℃，光照强度为1800lux，光照周期为12小时/天；MS分化培养基包含：MS，0.25mg/LKT，1.5mg/L 6-BA，0.6mg/L NAA，27.5g/L蔗糖和5.3g/L琼脂，并调节初始pH值为5.8。
(3)壮苗培养：将经过分化培养的木鳖外植体在MS壮苗培养基中培养40天得到木鳖健壮植株，其中，壮苗培养中的培养温度为25℃，光照强度为1800lux，光照周期为12小时/天；MS壮苗培养基包含：MS，1.25mg/L 6-BA、0.25mg/L KT、0.6mg/L IAA，27.5g/L蔗糖和4.3g/L琼脂，并调节初始pH值为5.8。
(4)生根培养：将木鳖健壮植株置于MS生根培养基中培养40天得到带根的木鳖植株，其中，生根培养中的培养温度为25℃，光照强度为1800lux，光照周期为12小时/天。MS生根培养基包含：1/2MS，0.8mg/L IBA、1.5mg/LNAA、27.5g/L蔗糖和4.3g/L琼脂，并调节初始pH值为5.8。
(5)炼苗和移栽：先将步骤三中得到的带根的木鳖植株在温度25℃下炼苗3天，之后再移栽到沙土壤中生长45天，最后再移栽至大田生长，其中，大田的生长条件为：温度为25℃，相对湿度为80％，遮阳率为70％。木鳖植株移栽至大田后，第1-7天，每天早晚间隔10个小时各喷雾5次，每次喷雾10min，第8天至以后，每天早晚间隔10个小时各喷雾1次，每次10min。
本发明通过生物技术对木鳖进行组织培养快速繁殖，在短时间内培育出大量可供大田栽培的木鳖幼苗，提高了木鳖种苗的繁殖系数和种苗质量，实现规模化生产，满足生产上的需要。采用本发明的方法，得到的单芽增殖系数达到5-8倍，获得的组培苗生根率在95％以上，每株平均带3-4个根，根长为3-5厘米，移栽沙床成活率在98％以上；快速、便捷、高效地进行木鳖组织培养，实现木鳖组培种苗的规模化生产。本发明还设置有一个支架，由吸水树脂制成，可将该支架在固体培养基未凝固前或灭菌之前插入到其中，这样，由于吸水树脂的强吸水性，其能够吸收大量的培养基中的营养物质，在凝固后，将木鳖在该支架上培养，其除了能够从培养基中吸收营养成分，培养基也不易很快干化，也能够从该支架中吸收营养，且靠近所述支撑滤网边框的部位设置的吸水柱的数量多，这样，靠近培养基周边生长的木鳖也能够吸收到足够的营养成分，且固体培养基的表面也能保持湿润，解决了固体培养基容易干化、营养成分难以扩散分布失衡等问题。
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出的实施例。
Claims (6)
1.一种木鳖的培养方法，其特征在于，包括：
步骤一、分化培养：将木鳖外植体接种到MS分化培养基中培养25～35天直至木鳖外植体的侧芽分化长出丛生芽，其中，分化培养中的培养温度为23-26℃，光照强度为1400-2000lux，光照周期为10-12小时/天，MS分化培养基的组成为：MS，0.1-0.4mg/L KT，1.0-2.0mg/L 6-BA，0.2-1.0mg/L NAA，25-30g/L蔗糖和4.8-5.8g/L琼脂，并调节初始pH值为5.8；之后进入步骤二，
步骤二、壮苗培养：将步骤一中经过分化培养的木鳖外植体在MS壮苗培养基中培养35～45天得到木鳖健壮植株，其中，壮苗培养中的培养温度为23-26℃，光照强度为1400-2000lux，光照周期为10-12小时/天，MS壮苗培养基的组成为：MS，0.5-2.0mg/L 6-BA、0.1-0.4mg/L KT、0.2-1.0mg/L IAA，25-30g/L蔗糖和3.8-4.8g/L琼脂，并调节初始pH值为5.8；之后进入步骤三，
步骤三、生根培养：将经步骤二中得到的木鳖健壮植株置于MS生根培养基中培养35～45天得到带根的木鳖植株，其中，生根培养中的培养温度为23-26℃，光照强度为1400-2000lux，光照周期为10-12小时/天，MS生根培养基的组成为：1/2MS，0.5-1.0mg/L IBA、1.0-2.0mg/L NAA、25-30g/L蔗糖和3.8-4.8g/L琼脂，并调节初始pH值为5.8。
2.如权利要求1所述的木鳖的培养方法，其特征在于，在所述步骤三之后还进行步骤四，所述步骤四包括：炼苗和移栽：先将步骤三中得到的带根的木鳖植株在温度25℃下炼苗2-4天，之后再移栽到沙土壤中生长45天，最后再移栽至大田生长，其中，大田的生长条件为：温度为20-28℃，相对湿度为75-80％，遮阳率为70％。
3.如权利要求2所述的木鳖的培养方法，其特征在于，所述步骤四中，木鳖植株移栽至大田后，第1-7天，每天早晚间隔10个小时各喷雾3～5次，每次喷雾10min，第8天至以后，每天早晚间隔10个小时各喷雾1次，每次10min。
4.如权利要求1所述的木鳖的培养方法，其特征在于，在所述步骤一之前还包括木鳖外植体获取，木鳖外植体获取的具体过程包括：取木鳖嫩芽作为外植体，首先使用体积百分比2％的洗洁精水溶液浸泡5-15min、之后使用自来水冲洗10-20min，然后用质量体积分数0.1％的升汞消毒8-10min，最后用无菌水冲洗3-5次，除去表面水分得到木鳖外植体。
5.如权利要求4所述的木鳖的培养方法，其特征在于，所述质量体积分数0.1％的升汞中还包含吐温-20。
6.如权利要求1所述的木鳖的培养方法，其特征在于，所述MS分化培养基、MS壮苗培养基和MS生根培养基均为固体培养基，在固体培养基中放置一支架，该支架包括一水平设置的支撑滤网和多根吸水柱，所述多根吸水柱的一端均固定在所述支撑滤网上且靠近所述支撑滤网边框的部位设置的吸水柱的数量多，所述支架由吸水树脂制成，所述支撑滤网位于所述固体培养基的表面，而所述多根吸水柱插入到所述固体培养基中，在所述支撑滤网上进行所述分化培养、壮苗培养和生根培养。
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