CN104255508A - 一种木鳖子组织培养的快速繁殖方法 - Google Patents

一种木鳖子组织培养的快速繁殖方法 Download PDF

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刘东锋
杨成东
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Abstract

本发明研究了一种木鳖子组织培养的快速繁殖方法,包括木鳖子幼苗的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根诱导等步骤,本发明通过植物组织培养技术,研究了采用组织培养方法为木鳖子建立无性繁殖体系的方法,为木鳖子优良品种的选育和快速繁殖提供技术基础。

Description

一种木鳖子组织培养的快速繁殖方法
技术领域
本发明涉及木鳖子组织培养的快繁方法,属于植物栽培技术领域。
背景技术
木鳖子,Momordica cochinchinensis (Lour.) Spreng.,葫芦科,别称:番木鳖,糯饭果,老鼠拉冬瓜等。多年生草质藤木,喜温暖潮湿的气候和向阳的环境。对土壤条件要求不严,宜选择排水良好、肥沃深厚的砂质壤土栽培常生长于生于海拔450-1100米的山沟、林缘及路旁等土层较深厚的地方。分布于江苏、安徽、江西、福建、台湾、广东、广西、湖南、四川、贵州、云南和西藏。中南半岛和印度半岛也有。含木鳖子酸、丝石竹皂甙元、齐墩果酸、α-桐酸、氨基酸、甾醇。散结消肿,攻毒疗疮。用于疮疡肿毒,乳痈,瘰疠,痔漏,干癣,秃疮。主要采用种子和根头繁殖法,繁殖率低,生长周期长,且成本较高。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种木鳖子组织培养的快速繁殖方法,本发明通过植物组织培养技术,研究了采用组织培养方法为木鳖子建立无性繁殖体系的方法,为木鳖子优良品种的选育和快速繁殖提供技术基础。
本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的:
挑选光滑饱满的种子,用浓硫酸浸泡1h,用自来水反复冲洗播种到基质为细沙的花盆中,将花盆放在光照充足的地方,培养出的土鳖子幼苗叶片,用干净纱布在加有洗涤剂的水中清洗,在10%的双氧水中浸泡6min,无菌水冲洗5次,切成0.5cm×0.5cm的小块接入MS+IBA0.02mg/L+ZT3mg/L培养基中,附加0.7%琼脂,35g/L蔗糖进行愈伤组织的诱导,pH5.85,暗室培养,温度27℃,诱导出来的愈伤组织放入ER+IAA0.1-0.15mg/L+5-6mg/L2ip+PVP0.2-0.25g/L+0.7%琼脂+35g/L蔗糖培养基中进行愈伤组织的分化,pH5.85,光照3000lx,温度27℃,将芽苗从培养瓶中取出放入0.3%的硫酸钠溶液中浸泡3min,无菌水冲洗干净,放入灭菌处理过的珍珠岩基质中,每三天浇灌MS营养液,保持湿度85%,适当遮阴,通风透光,1个月后统计生根率。
采用本发明制备的木鳖子生根率高,周期短,产量大,能耗少,利于大规模种植。
下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述,但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施方式
实施例1
挑选光滑饱满的种子,用浓硫酸浸泡1h,用自来水反复冲洗播种到基质为细沙的花盆中,将花盆放在光照充足的地方,培养出的木鳖子幼苗叶片,用干净纱布在加有洗涤剂的水中清洗,在10%的双氧水中浸泡6min,无菌水冲洗5次,切成0.5cm×0.5cm的小块接入MS+IBA0.02mg/L+ZT3mg/L培养基中,附加0.7%琼脂,35g/L蔗糖进行愈伤组织的诱导,pH5.85,暗室培养,温度27℃,诱导出来的愈伤组织放入ER+IAA0.1mg/L+5mg/L2ip+PVP0.2g/L+0.7%琼脂+35g/L蔗糖培养基中进行愈伤组织的分化,pH5.85,光照3000lx,温度27℃,将芽苗从培养瓶中取出放入0.3%的硫酸钠溶液中浸泡3min,无菌水冲洗干净,放入灭菌处理过的珍珠岩基质中,每三天浇灌MS营养液,保持湿度85%,适当遮阴,通风透光,1个月后统计生根率,生根率90%。
实施例2
挑选光滑饱满的种子,用浓硫酸浸泡1h,用自来水反复冲洗播种到基质为细沙的花盆中,将花盆放在光照充足的地方,培养出的木鳖子幼苗叶片,用干净纱布在加有洗涤剂的水中清洗,在10%的双氧水中浸泡6min,无菌水冲洗5次,切成0.5cm×0.5cm的小块接入MS+IBA0.02mg/L+ZT3mg/L培养基中,附加0.7%琼脂,35g/L蔗糖进行愈伤组织的诱导,pH5.85,暗室培养,温度27℃,诱导出来的愈伤组织放入ER+IAA0.15mg/L+6mg/L2ip+PVP0.25g/L+0.7%琼脂+35g/L蔗糖培养基中进行愈伤组织的分化,pH5.85,光照3000lx,温度27℃,将芽苗从培养瓶中取出放入0.3%的硫酸钠溶液中浸泡3min,无菌水冲洗干净,放入灭菌处理过的珍珠岩基质中,每三天浇灌MS营养液,保持湿度85%,适当遮阴,通风透光,1个月后统计生根率,生根率91%。
实施例3
挑选光滑饱满的种子,用浓硫酸浸泡1h,用自来水反复冲洗播种到基质为细沙的花盆中,将花盆放在光照充足的地方,培养出的木鳖子幼苗叶片,用干净纱布在加有洗涤剂的水中清洗,在10%的双氧水中浸泡6min,无菌水冲洗5次,切成0.5cm×0.5cm的小块接入MS+IBA0.02mg/L+ZT3mg/L培养基中,附加0.7%琼脂,35g/L蔗糖进行愈伤组织的诱导,pH5.85,暗室培养,温度27℃,诱导出来的愈伤组织放入ER+IAA0.1mg/L+6mg/L2ip+PVP0.2g/L+0.7%琼脂+35g/L蔗糖培养基中进行愈伤组织的分化,pH5.85,光照3000lx,温度27℃,将芽苗从培养瓶中取出放入0.3%的硫酸钠溶液中浸泡3min,无菌水冲洗干净,放入灭菌处理过的珍珠岩基质中,每三天浇灌MS营养液,保持湿度85%,适当遮阴,通风透光,1个月后统计生根率,生根率93%。

Claims (3)

1. 一种木鳖子组织培养的快速繁殖方法,包括木鳖子幼苗的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根诱导,其主要步骤如下:
(1)取木鳖子的种子,对其进行处理,培养出木鳖子幼苗;
(2)取步骤(1)培养出的土鳖子幼苗叶片,用干净纱布在加有洗涤剂的水中清洗,在10%的双氧水中浸泡6min,无菌水冲洗5次,切成0.5cm×0.5cm的小块接入MS+IBA0.02mg/L+ZT3mg/L培养基中,附加0.7%琼脂,35g/L蔗糖进行愈伤组织的诱导,pH5.85,暗室培养,温度27℃;
(3)取步骤(2)诱导出来的愈伤组织放入ER+IAA0.1-0.15mg/L+5-6mg/L2ip+PVP0.2-0.25g/L+0.7%琼脂+35g/L蔗糖培养基中进行愈伤组织的分化,pH5.85,光照3000lx,温度27℃;
(4)取步骤(3)分化出来的芽苗进行生根诱导。
2. 按照权利要求1所述的一种木鳖子组织培养的快速繁殖方法,其特征在于:步骤(1)中所述木鳖子幼苗的获得为,挑选光滑饱满的种子,用浓硫酸浸泡1h,用自来水反复冲洗播种到基质为细沙的花盆中,将花盆放在光照充足的地方。
3. 按照权利要求1所述的一种木鳖子组织培养的快速繁殖方法,其特征在于:步骤(4)中木鳖子芽苗生根诱导的方法为将芽苗从培养瓶中取出放入0.3%的硫酸钠溶液中浸泡3min,无菌水冲洗干净,放入灭菌处理过的珍珠岩基质中,每三天浇灌MS营养液,保持湿度85%,适当遮阴,通风透光,1个月后统计生根率。
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