CN102742507B - 毛葡萄离体再生培养方法 - Google Patents
毛葡萄离体再生培养方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102742507B CN102742507B CN 201210273554 CN201210273554A CN102742507B CN 102742507 B CN102742507 B CN 102742507B CN 201210273554 CN201210273554 CN 201210273554 CN 201210273554 A CN201210273554 A CN 201210273554A CN 102742507 B CN102742507 B CN 102742507B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- medium
- bud
- root
- grape
- culture
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 title claims abstract description 18
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 title claims abstract description 18
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 title abstract description 12
- 240000006365 Vitis vinifera Species 0.000 title description 16
- 235000014787 Vitis vinifera Nutrition 0.000 title description 12
- 235000009754 Vitis X bourquina Nutrition 0.000 title description 8
- 235000012333 Vitis X labruscana Nutrition 0.000 title description 8
- 238000012364 cultivation method Methods 0.000 title description 3
- 244000272739 Vitis cinerea Species 0.000 claims abstract 8
- 235000011862 Vitis cinerea Nutrition 0.000 claims abstract 8
- 238000012136 culture method Methods 0.000 claims abstract 4
- 239000006870 ms-medium Substances 0.000 claims description 30
- SEOVTRFCIGRIMH-UHFFFAOYSA-N indole-3-acetic acid Chemical compound C1=CC=C2C(CC(=O)O)=CNC2=C1 SEOVTRFCIGRIMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 21
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 12
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 12
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 12
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 12
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 12
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 12
- PVRBGBGMDLPYKG-UHFFFAOYSA-N 6-benzyl-7h-purine Chemical compound N=1C=NC=2N=CNC=2C=1CC1=CC=CC=C1 PVRBGBGMDLPYKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 9
- JTEDVYBZBROSJT-UHFFFAOYSA-N indole-3-butyric acid Chemical compound C1=CC=C2C(CCCC(=O)O)=CNC2=C1 JTEDVYBZBROSJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 7
- TWFZGCMQGLPBSX-UHFFFAOYSA-N Carbendazim Natural products C1=CC=C2NC(NC(=O)OC)=NC2=C1 TWFZGCMQGLPBSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- JNPZQRQPIHJYNM-UHFFFAOYSA-N carbendazim Chemical compound C1=C[CH]C2=NC(NC(=O)OC)=NC2=C1 JNPZQRQPIHJYNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000006013 carbendazim Substances 0.000 claims description 4
- 239000002689 soil Substances 0.000 claims description 4
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 claims description 4
- 229960002523 mercuric chloride Drugs 0.000 claims description 3
- LWJROJCJINYWOX-UHFFFAOYSA-L mercury dichloride Chemical compound Cl[Hg]Cl LWJROJCJINYWOX-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 2
- 238000005286 illumination Methods 0.000 claims 4
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims 3
- 230000000050 nutritive effect Effects 0.000 claims 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims 2
- 244000037666 field crops Species 0.000 claims 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 claims 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 claims 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 claims 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 claims 1
- 229910001562 pearlite Inorganic materials 0.000 claims 1
- 238000007670 refining Methods 0.000 claims 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 claims 1
- 238000002791 soaking Methods 0.000 claims 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims 1
- 241000219094 Vitaceae Species 0.000 abstract description 15
- 235000021021 grapes Nutrition 0.000 abstract description 15
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 abstract description 4
- 230000006698 induction Effects 0.000 abstract description 4
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 abstract description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 abstract description 3
- 230000009466 transformation Effects 0.000 abstract description 3
- 238000004161 plant tissue culture Methods 0.000 abstract description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 239000003617 indole-3-acetic acid Substances 0.000 description 9
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 6
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 description 5
- 235000019362 perlite Nutrition 0.000 description 3
- 239000010451 perlite Substances 0.000 description 3
- 239000012882 rooting medium Substances 0.000 description 3
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 3
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 3
- 235000017190 Vitis vinifera subsp sylvestris Nutrition 0.000 description 2
- 235000017242 Vitis vulpina Nutrition 0.000 description 2
- 244000237969 Vitis vulpina Species 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 235000002532 grape seed extract Nutrition 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N mercury Chemical compound [Hg] QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052753 mercury Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 2
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 235000005504 Vitis heyneana Nutrition 0.000 description 1
- 241000728008 Vitis heyneana Species 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 238000012271 agricultural production Methods 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 238000009402 cross-breeding Methods 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 238000009369 viticulture Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
本发明公开了一种毛葡萄离体再生培养方法，包括以下步骤：无菌系的建立、不定芽诱导、生根培养及炼苗移栽。本发明采用植物组织培养技术成功实现毛葡萄叶片离体再生，毛葡萄再生率可达37%以上，最高可达93.3%，生根率可达90%以上，成活率可达100%，为毛葡萄遗传转化奠定坚实基础，为葡萄其他优良性状向毛葡萄的转移提供了一条有效的途径。本发明方法简单，成本低廉，使用效果好。
Description
技术领域
本发明涉及农业科学领域，尤其是一种毛葡萄离体再生培养方法。
背景技术
毛葡萄（Vitis heyneana Roem. & Schult.）又名绒毛葡萄、五角叶葡萄，在我国华中、华东、西南、华南北部、西北的陕、甘及华北的山西均有分布，是分布最为广泛的野生葡萄种类之一。毛葡萄抗性强、适应性好，结果系数高，易与葡萄栽培品种杂交，既是葡萄栽培的优良抗性砧木，也是葡萄抗性育种的优良亲本。由于葡萄遗传背景复杂、生命周期长，使常规杂交育种在品种改良上受到极大限制，通过转基因技术可实现毛葡萄抗性性状与葡萄栽培品种的品质性状有效结合，培育出优质高抗葡萄新品种。转基因技术的关键是高效再生体系的建立，而毛葡萄离体再生研究未见报道。
发明内容
本发明的目的是：提供一种毛葡萄离体再生培养方法，它能为毛葡萄遗传转化奠定坚实基础，为葡萄其他优良性状向毛葡萄的转移提供了一条有效的途径，以满足农业生产需要。
本发明是这样实现的：毛葡萄离体再生培养方法，包括以下步骤，
步骤一、无菌系的建立：在生长季节选取生长健壮的毛葡萄新梢作为外植体，用自来水冲洗干净，在超净工作台上，先用体积百分比为70%的酒精漂洗30s，再用无菌水冲洗3次后，用质量百分比为0.1%的升汞溶液（即相当于1g氯化汞溶解在1升水中）浸泡消毒8-10min后，用无菌水冲洗5-6次，然后剪除新梢两端褐化部分后，剪成单芽茎段，接种到MS培养基中，在温度为25±1℃，光照强度为40umol·s-1·m-2，光照时间为12h/d的培养条件下，培养诱导至腋芽萌发，获得诱导的腋芽叶片；
步骤二、不定芽诱导：取步骤一中获得的诱导的腋芽叶片剪成0.5×0.5cm2见方的小块，在叶片背面沿叶脉垂直方向划三刀，正面向上接种到MS培养基上，在温度为25±1℃，光照强度为40umol·s-1·m-2，光照时间为12h/d的条件下培养20d，叶片开始向上卷起，25-30d划伤处再生出不定芽，30-45d大量产生再生不定芽；
步骤三、生根培养：取步骤二中产生的不定芽，将其接种到1/2MS生根培养基中，先光下培养7d，再暗培养7d后，然后转入光下继续培养至正常生根，获得试管苗；培养温度为25±1℃，光照强度为40umol·s-1·m-2，光照时间为12h/d；
步骤四、炼苗移栽：选取步骤三中生有3-4条根，长为4-5cm的试管苗，在102.8umol·s-1·m-2的光照条件下炼苗7d，然后从培养瓶中取出试管苗，洗净试管苗根部培养基，用质量百分比为0.1% KMnO4溶液浸根10s，再移栽到灭菌的珍珠岩基质中，用1/8MS营养液浇透，之后每隔7d浇灌1次营养液，并从移栽后第2-3d始每隔7d浇灌1次1000倍质量百分比为40%的多菌灵溶液，加盖与营养钵相同大小的塑料杯保持湿度，置于温度为25±1℃的培养室内培养至植株长出3-5条新根后移栽到盛有营养土的营养钵中，置于温室内炼苗30d，最后定植到大田即可。
步骤一中采用的MS培养基为国际通用的培养基，并在该MS培养基中每升添加2.0mg 的6-苄基嘌呤，0.2mg的吲哚乙酸，20 g蔗糖和5g琼脂粉，其pH值为5.8-6.0。
步骤二中采用的MS培养基为国际通用的培养基，并在该MS培养基中每升添加8.0-8.5 mg 的6-苄基嘌呤，0.3-0.35 mg的吲哚丁酸，0.20-0.26 mg的吲哚乙酸，18-32 g蔗糖和5g琼脂粉，pH5.8-6.0。
步骤三中采用的1/2MS培养基是指MS培养基中的大量元素减半，其它元素不变，并在该MS培养基中每升添加0.08-0.5g吲哚丁酸，0-0.14 g吲哚乙酸，20g蔗糖和5g琼脂粉，pH5.8-6.0。
步骤四中采用的1/8MS营养液是指MS培养基中的大量元素为1/8，其它元素不变，并在该MS培养基中每升添加0.05mg·L-1吲哚乙酸。
由于采用上述的技术方案，与现有技术相比，本发明采用植物组织培养技术成功实现毛葡萄叶片离体再生，毛葡萄再生率可达37%以上，最高可达93.3%，生根率可达90%以上，成活率可达100%，为毛葡萄遗传转化奠定坚实基础，为葡萄其他优良性状向毛葡萄的转移提供了一条有效的途径；本发明方法简单，成本低廉，使用效果好。
本发明的实施例1：毛葡萄离体再生培养方法，包括以下步骤，
步骤一、无菌系的建立：在生长季节选取生长健壮的毛葡萄“花溪-4”新梢为外植体，在自来水下冲洗干净后，先在体积百分比70%的酒精中浸泡30s，无菌水冲洗3次，再用质量百分比为0.1%升汞溶液浸泡消毒8min，无菌水冲洗5次，剪成单芽茎段，接种到MS培养基上（每升MS培养基附加2.0mg 的6-苄基嘌呤，0.2mg的吲哚乙酸，20g蔗糖和5g琼脂粉，pH5.8-6.0），MS培养基的温度为25±1℃，光照强度为40umol·s-1·m-2，光照时间为12h/d；培养诱导至腋芽萌发，获得诱导的腋芽叶片；
步骤二、不定芽诱导：取步骤一中获得的诱导的腋芽叶片剪成0.5×0.5cm2见方的小块，在叶片背面沿叶脉垂直方向划三刀，正面向上接种到MS培养基上(每升MS培养基添加8.0-8.5 mg 的6-苄基嘌呤，0.3-0.35 mg的吲哚丁酸，0.20-0.26 mg的吲哚乙酸，18-32 g蔗糖和5g琼脂粉，pH5.8-6.0)，在温度为25±1℃，光照强度为40umol·s-1·m-2，光照时间为12h/d的条件下培养20d，叶片开始向上卷起，25-30d划伤处再生出不定芽，30-45d大量产生再生不定芽； 45d再生率可达93.3%；
步骤三、生根培养：取步骤二中产生的不定芽，将其接种到1/2MS生根培养基中（1/2MS培养基是指MS培养基中的大量元素减半，其它元素不变，并在该MS培养基中每升添加8.0-8.5 mg 的6-苄基嘌呤，0.3-0.35 mg的吲哚丁酸，0.20-0.26 mg的吲哚乙酸，18-32 g蔗糖和5g琼脂粉，pH5.8-6.0），先光下培养7d，再暗培养7d后，然后转入光下继续培养至正常生根，获得试管苗；培养温度为25±1℃，光照强度为40umol·s-1·m-2，光照时间为12h/d；30d后生根率可达92.5%；
步骤四、炼苗移栽：选取步骤三中生有3-4条根，长为4-5cm的试管苗，在102.8umol·s-1·m-2的光照条件下炼苗7d，然后从培养瓶中取出试管苗，洗净试管苗根部培养基，用质量百分比为0.1% KMnO4溶液浸根10s，再移栽到灭菌的珍珠岩基质中，用1/8MS营养液（1/8MS营养液是指MS培养基中的大量元素为1/8，其它元素不变，并在该MS培养基中每升添加0.05mg·L-1吲哚乙酸）浇透，之后每隔7d浇灌1次营养液，并从移栽后第2-3d始每隔7d浇灌1次1000倍质量百分比为40%的多菌灵溶液，加盖与营养钵相同大小的塑料杯保持湿度，置于温度为25±1℃的培养室内培养至植株长出3-5条新根后移栽到盛有营养土的营养钵中，置于温室内炼苗30d，最后定植到大田，成活率100%。
本发明的实施例2：毛葡萄离体再生培养方法，包括以下步骤，
步骤一、无菌系的建立：在生长季节选取生长健壮的毛葡萄“农院-11”新梢为外植体，在自来水下冲洗干净后，先在体积百分比为70%的酒精中浸泡30s，无菌水冲洗3次，再用质量百分比为0.1%升汞溶液浸泡消毒8min，无菌水冲洗5次，剪成单芽茎段，接种到MS培养基上（每升MS培养基附加2.0mg 的6-苄基嘌呤，0.2mg的吲哚乙酸，20g蔗糖和5g琼脂粉，pH5.8-6.0），MS培养基的温度为25±1℃，光照强度为40umol·s-1·m-2，光照时间为12h/d；培养诱导至腋芽萌发，获得诱导的腋芽叶片；
步骤二、不定芽诱导：取步骤一中获得的诱导的腋芽叶片剪成0.5×0.5cm2见方的小块，在叶片背面沿叶脉垂直方向划三刀，正面向上接种到MS培养基上(每升MS培养基添加8.0-8.5 mg 的6-苄基嘌呤，0.3-0.35 mg的吲哚丁酸，0.20-0.26 mg的吲哚乙酸，18-32 g蔗糖和5g琼脂粉，pH5.8-6.0)，在温度为25±1℃，光照强度为40umol·s-1·m-2，光照时间为12h/d的条件下培养20d，叶片开始向上卷起，25-30d划伤处再生出不定芽，30-45d大量产生再生不定芽；35d时再生率可达37.5%；
步骤三、生根培养：取步骤二中产生的不定芽，将其接种到1/2MS生根培养基中（1/2MS培养基是指MS培养基中的大量元素减半，其它元素不变，并在该MS培养基中每升添加8.0-8.5 mg 的6-苄基嘌呤，0.3-0.35 mg的吲哚丁酸，0.20-0.26 mg的吲哚乙酸，18-32 g蔗糖和5g琼脂粉，pH5.8-6.0），先光下培养7d，再暗培养7d后，然后转入光下继续培养至正常生根，获得试管苗；培养温度为25±1℃，光照强度为40umol·s-1·m-2，光照时间为12h/d；30d后生根率可达96.9%；
步骤四、炼苗移栽：选取步骤三中生有3-4条根，长为4-5cm的试管苗，在102.8umol·s-1·m-2的光照条件下炼苗7d，然后从培养瓶中取出试管苗，洗净试管苗根部培养基，用质量百分比为0.1%KMnO4溶液浸根10s，再移栽到灭菌的珍珠岩基质中，用1/8MS营养液（1/8MS营养液是指MS培养基中的大量元素为1/8，其它元素不变，并在该MS培养基中每升添加0.05mg·L-1吲哚乙酸）浇透，之后每隔7d浇灌1次营养液，并从移栽后第2-3d始每隔7d浇灌1次1000倍质量百分比为40%的多菌灵溶液，加盖与营养钵相同大小的塑料杯保持湿度，置于温度为25±1℃的培养室内培养至植株长出3-5条新根后移栽到盛有营养土的营养钵中，置于温室内炼苗30d，最后定植到大田，成活率100%。
花溪-4及农院-11均是从野外收集的贵州野生毛葡萄优良单株，与栽培葡萄品种相比，果粒小，含糖量较低、含酸量较高，但抗病、抗虫性及抗旱性好，既可作为酿酒葡萄栽培，也可用于砧木利用，更是提高栽培品种抗性的优良亲本。
Claims (1)
1.一种毛葡萄离体再生培养方法，其特征在于：包括以下步骤，
步骤一、无菌系的建立：在生长季节选取生长健壮的毛葡萄新梢作为外植体，用自来水冲洗干净，在超净工作台上，先用体积百分比为70%的酒精漂洗30s，再用无菌水冲洗3次后，用质量百分比为0.1%的升汞溶液浸泡消毒8-10min后，用无菌水冲洗5-6次，然后剪除新梢两端褐化部分后，剪成单芽茎段，接种到培养基中，在温度为25±1℃，光照强度为40umol·s-1·m-2，光照时间为12h/d的培养条件下，培养诱导至腋芽萌发，获得诱导的腋芽叶片；步骤一中采用的培养基为MS培养基中添加了2.0mg/L 的6-苄基嘌呤，0.2mg/L的吲哚乙酸，20g/L蔗糖和5g/L琼脂粉，其pH值为5.8-6.0；
步骤二、不定芽诱导：取步骤一中获得的诱导的腋芽叶片剪成0.5×0.5cm2见方的小块，在叶片背面沿叶脉垂直方向划三刀，正面向上接种到培养基上，在温度为25±1℃，光照强度为40umol·s-1·m-2，光照时间为12h/d的条件下培养20d，叶片开始向上卷起，25-30d划伤处再生出不定芽，30-45d大量产生再生不定芽；步骤二中采用的培养基为MS培养基中添加8.0-8.5 mg/L 的6-苄基嘌呤，0.3-0.35 mg/L的吲哚丁酸，0.20-0.26 mg/L的吲哚乙酸，18-32 g/L蔗糖和5g/L琼脂粉，pH5.8-6.0；
步骤三、生根培养：取步骤二中产生的不定芽，将其接种到1/2MS生根培养基中，先光下培养7d，再暗培养7d后，然后转入光下继续培养至正常生根，获得试管苗；培养温度为25±1℃，光照强度为40umol·s-1·m-2，光照时间为12h/d；步骤三中采用的1/2MS生根培养基是指MS培养基中的大量元素减半，其它元素不变，并添加8.0-8.5 mg/L的6-苄基嘌呤，0.3-0.35 mg/L吲哚丁酸，0.20-0.26 mg/L吲哚乙酸，18-32g/L蔗糖和5g/L琼脂粉，pH5.8-6.0；
步骤四、炼苗移栽：选取步骤三中生有3-4条根，长为4-5cm的试管苗，在102.8umol·s-1·m-2的光照条件下炼苗7d，然后从培养瓶中取出试管苗，洗净试管苗根部培养基，用质量百分比为0.1%KMnO4溶液浸根10s，再移栽到灭菌的珍珠岩基质中，用1/8MS营养液浇透，之后每隔7d浇灌1次营养液，并从移栽后第2-3d始每隔7d浇灌1次1000倍质量百分比为40%的多菌灵溶液，加盖与营养钵相同大小的塑料杯保持湿度，置于温度为25±1℃的培养室内培养至植株长出3-5条新根后移栽到盛有营养土的营养钵中，置于温室内炼苗30d，最后定植到大田即可；步骤四中采用的1/8MS营养液是指MS培养基中的大量元素为1/8，其它元素不变，并添加0.05mg/L吲哚乙酸。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201210273554 CN102742507B (zh) | 2012-08-03 | 2012-08-03 | 毛葡萄离体再生培养方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201210273554 CN102742507B (zh) | 2012-08-03 | 2012-08-03 | 毛葡萄离体再生培养方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102742507A CN102742507A (zh) | 2012-10-24 |
| CN102742507B true CN102742507B (zh) | 2013-10-23 |
Family
ID=47023285
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN 201210273554 Expired - Fee Related CN102742507B (zh) | 2012-08-03 | 2012-08-03 | 毛葡萄离体再生培养方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102742507B (zh) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105454045A (zh) * | 2015-12-04 | 2016-04-06 | 石河子农业科学研究院 | 葡萄组织培养外植体的消毒方法 |
| CN106417019B (zh) * | 2016-09-30 | 2018-04-06 | 湖北蕊露源生物科技有限公司 | 一种刺葡萄种苗的繁殖方法及培养基 |
-
2012
- 2012-08-03 CN CN 201210273554 patent/CN102742507B/zh not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (12)
| Title |
|---|
| 中国野生葡萄组织培养研究;张剑侠等;《西北植物学报》;20031231;第23卷(第3期);460-463 * |
| 余智莹等.美人指葡萄再生体系的建立.《江西农业学报》.2011,第23卷(第5期),44-49. |
| 广西罗城毛葡萄组织培养脱毒技术研究;陈耕云;《中国优秀硕士学位论文全文数据库 农业科技辑》;20070615(第6期);D048-22 * |
| 张剑侠等.中国野生葡萄组织培养研究.《西北植物学报》.2003,第23卷(第3期),460-463. |
| 李霞等.野生毛葡萄单芽茎段的离体快繁培养.《贵州农业科学》.2010,第38卷(第7期),12-14. |
| 毛葡萄组织培养的脱毒技术;石贵玉等;《广西师范大学学报: 自然科学版》;20080930;第26卷(第3期);71-74 * |
| 王以红等.野生毛葡萄芽器官离体培养的研究.《广西林业科学》.1998,第27卷(第1期),9-10、15. |
| 石贵玉等.毛葡萄组织培养的脱毒技术.《广西师范大学学报: 自然科学版》.2008,第26卷(第3期),71-74. |
| 美人指葡萄再生体系的建立;余智莹等;《江西农业学报》;20111231;第23卷(第5期);44-49 * |
| 野生毛葡萄单芽茎段的离体快繁培养;李霞等;《贵州农业科学》;20101231;第38卷(第7期);12-14 * |
| 野生毛葡萄芽器官离体培养的研究;王以红等;《广西林业科学》;19980331;第27卷(第1期);9-10、15 * |
| 陈耕云.广西罗城毛葡萄组织培养脱毒技术研究.《中国优秀硕士学位论文全文数据库 农业科技辑》.2007,(第6期),D048-22. |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN102742507A (zh) | 2012-10-24 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101578963B (zh) | 日本红枫的组织培养快繁方法 | |
| CN101822220B (zh) | 一种春兰名品茎尖组织培养快速繁殖方法 | |
| CN101536674B (zh) | 粗肋草的组织培养繁殖方法 | |
| CN104782486A (zh) | 一种多肉植物玉露的组织培养快速繁殖方法 | |
| CN103380730A (zh) | 一种杜梨组培快繁方法 | |
| CN102845313A (zh) | 狗枣猕猴桃的离体快速繁殖方法 | |
| CN101647392A (zh) | 喜临门杜鹃品种的组织培养快繁方法及其专用培养基 | |
| CN103563746A (zh) | 黄山贡菊茎尖组织培养的方法 | |
| CN103380729B (zh) | 一种双片苣苔组织培养及快速繁殖的方法 | |
| CN103931497A (zh) | 一种提高火龙果组培苗成苗率的方法 | |
| CN102823502A (zh) | 毛葡萄离体快速繁殖培养方法 | |
| CN107455261B (zh) | 一种加拿大糖槭组织培养快繁的方法 | |
| CN113331059B (zh) | 一种以鸟王茶树胚轴为外植体建立高效再生体系的方法 | |
| CN103430845A (zh) | 一种草莓组织培养方法 | |
| CN101637123A (zh) | 南岭莪术的组织培养快速繁殖方法 | |
| CN107821168B (zh) | 一种沙冬青组培苗的繁殖方法 | |
| CN102845238A (zh) | 一种英红九号胚芽砧嫁接繁殖方法 | |
| CN111758573B (zh) | 一种美味猕猴桃砧木组培快繁方法 | |
| CN104488722A (zh) | 一种南美叉柱花的组织培养快速繁殖方法 | |
| CN102742507B (zh) | 毛葡萄离体再生培养方法 | |
| CN104604735A (zh) | 一种美国红叶紫薇的组培快繁方法 | |
| CN103931499B (zh) | 一种红千层的组织培养快速繁殖方法 | |
| CN106818476A (zh) | 天然三倍体漆树高效快速扩繁方法 | |
| CN1305371C (zh) | 丛生竹组培快繁的生根方法 | |
| CN110278874A (zh) | 一种窄冠黑杨11号的组培快繁方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20131023 Termination date: 20190803 |