CN110201067B - 一种藤茶提取物及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种藤茶提取物及其制备方法和应用。藤茶提取物由二氢杨梅素、杨梅素、杨梅苷和多酚组成。其制备过程为：(1)将藤茶与水混合，加热浸提；(2)离心过滤，保留上清液；(3)将上清液进行陶瓷膜过滤，保留上清液；(4)将上清液进行真空低温浓缩，降温结晶得到晶体；(5)将晶体保温，搅拌，冰水冲洗得到初级提取物；(6)将初级提取物离心分离，烘干得到藤茶提取物。本发明的制备方法得到的藤茶提取物有效成分含量高、对于代谢综合征的疗效作用好。

Description

一种藤茶提取物及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及中药提取领域，尤其涉及一种藤茶提取物及其制备方法和应用。
背景技术
代谢综合征是指人体的蛋白质、脂肪、碳水化合物等物质发生代谢紊乱的病理状态，是一组复杂的代谢紊乱症候群，是导致糖尿病心脑血管疾病的危险因素。其具有以下特点：1.多种代谢紊乱集于一身，包括肥胖、高血糖、高血压、血脂异常、高血黏、高尿酸、高脂肪肝发生率和高胰岛素血症，这些代谢紊乱是心、脑血管病变以及糖尿病的病理基础。2.有共同的病理基础，目前多认为它们的共同原因就是肥胖尤其是中心性肥胖所造成的胰岛素抵抗和高胰岛素血症。3.可造成多种疾病增加，如高血压、冠心病、脑卒中、甚至某些癌症，包括与性激素有关的乳腺癌、子宫内膜癌、前列腺癌，以及消化系统的胰腺癌、肝胆癌、结肠癌等。4.有共同的预防及治疗措施，防治住一种代谢紊乱，也就有利于其他代谢紊乱的防治。
随着现代人理念的不断进步，人们开始注重养生问题，趋向于通过调整饮食的方式来预防疾病的发生。中国茶文化源远流长，茶饮是颇受欢迎的一种方式，不少人通过日常饮茶来达到防三高的目的，已有科学报道证实，茶多酚能够预防高脂饮食引起的代谢紊乱和体重增加，也能够有效调节肝脏的糖脂代谢。
藤茶学名为显齿蛇葡萄，俗称白茶、山甜茶、端午茶、龙须茶等。为葡萄科蛇葡萄属的一种野生木质落叶藤本植物。近年来，国内外学者对藤茶经化学成分分析，发现其为富含黄酮类化合物的一种特殊天然植物，还富含多种营养成分。黄酮类化合物是藤茶的主要成分，含量比其它植物更为丰富，其有效成份为蛇葡萄素、双氢杨梅素等。藤茶嫩茎叶中总黄酮的含量高达43.4％-45.52％。藤茶中的黄酮类化合物种类多样，有二氢杨梅素、槲皮素、花旗松素、山奈酚、藤茶素、杨梅苷、橙皮素、洋芹素等，其中二氢杨梅素是藤茶中的主要活性成分。
中国发明专利申请CN 104522217 A公开了一种藤茶提取物，通过藤茶水提时在水溶液里加入黄酮保护剂，加热后过滤，滤液加入助沉淀剂进行絮凝沉淀，滤去沉淀后滤液冷藏使藤茶提取物结晶析出，其含总黄酮80-90％，二氢杨梅素为总黄酮的70-80％。本发明还提供了一种组合物，含有上述的藤茶提取物与银杏提取物，本发明还提供了上述的组合物在制备预防与治疗老年性认知障碍的食品、保健品、药品中的应用。本发明还提供了上述的藤茶提取物在制备抑制前列腺肥大、治疗良性前列腺增生药物、降低血糖、血脂、血压的食品、保健品、药品中的应用。本发明提取物较现有的方法纯度提高，色泽白。临床应用发现对改善起夜有一定的功效，与银杏提取物配伍能预防改善老年性认知障碍。由此发明的说明书可知，此申请公开的提取物所含有的二氢杨梅素含量较低，仅占提取成分的56％-72％。由此可推测，此发明申请得到的产品对治疗代谢综合征的效果不佳。
中国发明专利申请CN 103891966 A提供了一种藤茶的复方保健茶，所述藤茶的复方保健茶包括藤茶和红茶提取物，所述红茶提取物为红茶经粉碎、纯化水浸提、浓缩和干燥后获得，所述红茶提取物包裹在所述藤茶的表面，所述藤茶的质量占所述复方保健茶的总质量的70％-90％；所述复方保健茶中藤茶、红茶提取物的作用相辅相成，相得益彰，兼具品性温和、抗菌消炎、降脂降压、保肝护肝、养胃护胃的效果。本发明还提供了一种藤茶的复方保健茶的制备方法，所述制备方法工艺简单，适合大规模生产。此发明采用藤茶与红茶混合提取的方式，但是藤茶与红茶的浸泡水温以及耐泡性的差异，导致两种茶叶中的营养元素难以同时浸出，而且红茶与藤茶的饮用比例，也会直接影响到茶叶中营养元素的吸收以及饮用效果。另外，红茶中含有的鞣酸还会降低藤茶的功效。综上所述，此种方法不利于有效治疗代谢综合征。
目前，对于藤茶提取物，存在的问题还比较多，例如有效成分含量少、对于代谢综合征的疗效作用小。另外，对于提取藤茶中有效活性组分的方法还存在很多困难，例如提取的有效成分含量低、提取的有效成分种类少、工艺繁琐复杂等。
发明内容
为了解决现有技术中存在的藤茶提取物有效成分含量少、对于代谢综合征的疗效作用小，提取过程中提取的有效成分含量低、提取的有效成分种类少、工艺繁琐复杂等问题，本发明提供一种藤茶提取物，由二氢杨梅素、杨梅素和杨梅苷组成。
进一步地，按重量份计，藤茶提取物由二氢杨梅素81.4％-93.6％、杨梅素1.5％-2.3％和杨梅苷0.47％-1.2％。
本发明还提供一种藤茶提取物的制备方法包括以下步骤：
(1)将藤茶粉碎过筛与水混合，加热至90-95℃浸提；
(2)离心过滤，保留上清液；
(3)将上清液进行陶瓷膜过滤，保留上清液；
(4)将上清液进行真空浓缩，降温结晶得到晶体；
(5)将晶体冰水冲洗得到初级提取物；
(6)将初级提取物离心分离，烘干得到藤茶提取物。
进一步地，所述步骤(1)，按重量份计，藤茶：水＝1:25-30。
进一步地，所述步骤(1)粉碎过60-80目筛。
更进一步地，所述步骤(1)粉碎过60目筛。
进一步地，所述步骤(1)，浸提时间为40-60min。
进一步地，所述步骤(3)，陶瓷膜孔径为0.2-0.5μm。
进一步地，所述步骤(4)中，真空度为-0.08～-0.1MPa。
进一步地，所述步骤(4)中，浓缩的温度为60-70℃。
进一步地，所述步骤(4)中，以0.5℃/min的降温速度缓慢降温至4-10℃。
进一步地，所述步骤(5)，将得到的晶体保温，保温温度为4-10℃。
进一步地，所述步骤(6)，烘干温度为50-60℃。
本发明还提供一种藤茶提取物复合物，包括上述提取物或上述制备方法得到的提取物，以及α-环状糊精或γ-环状糊精中的一种。
进一步地，按重量份计，α-环状糊精75-80％、提取物余量。
进一步地，按重量份计，γ-环状糊精80-83％、提取物余量。
本发明还提供一种藤茶提取物复合物的制备方法，包括以下步骤：
(1)将藤茶提取物与水混合，溶解；
(2)将α-环状糊精或γ-环状糊精与藤茶提取物混合；
(3)喷雾干燥，得到复合物。
进一步地，所述步骤(1)，按重量份计，藤茶提取物：水＝1:20-25。
更进一步地，所述步骤(1)，按重量份计，藤茶提取物：水＝1:20。
进一步地，所述步骤(1)，水的温度为75-85℃。
进一步地，所述步骤(2)，按重量份计，藤茶提取物：α-环状糊精＝1:(3-4)。
进一步地，所述步骤(2)将α-环状糊精或γ-环状糊精缓慢与藤茶提取物混合，20min加完。
进一步地，所述步骤(3)喷雾干燥时，进风温度为180℃，出风温度为75-80℃。
本申请还提供所述提取物、所述提取物的制备方法得到的提取物、所述藤茶提取物复合物或所述复合物的制备方法在制备治疗代谢综合征药物中的应用。
理论基础：
二氢杨梅素，多提取自葡萄科蛇葡萄属的一种木质藤本植物，也有用拐枣提取，其中主要活性成分为黄酮类化合物，此类物质具有清除自由基、抗氧化、抗血栓、抗肿瘤、消炎等多种奇特功效；而二氢杨梅素是较为特殊的一种黄酮类化合物，除具有黄酮类化合物的一般特性外，还具有解除醇中毒、预防酒精肝、脂肪肝、抑制肝细胞恶化、降低肝癌的发病率等作用。是保肝护肝，解酒醒酒的良品。
真空浓缩具有很多优点。液体物质在沸腾状态下溶剂的蒸发很快，其沸点因压力而变化，压力增大，沸点升高，压力小，沸点降低。真空浓缩可以除去食品中的大量水分，减轻了重量，减小了体积，节省了包装、贮存和运输费用，同时，由于物料不受高温影响，避免了热不稳定成分的破坏和损失，更好地保存了原料的营养成分和香气。特别是某些氨基酸、黄酮类、酚、类维生素等物质，可防止受热而破坏。而一些糖类、蛋白质、果胶、粘液质等粘性较大的物料，低温蒸发可防止物料焦化。
与现有技术对比，本发明的有益效果是：
1.本发明提取物的有效成分组成，可以有效治疗代谢综合征。
2.通过本发明所述的提取方法，明确了合适的提取过程，得到的提取物含量较高，对于治疗代谢综合征有较好的作用。
3.本发明通过真空浓缩，更大程度的保留了有效活性组分是活性，获得了有效成分含量较高的提取物。
具体实施方式
下面结合具体实施例来进一步描述本发明，本发明的优点和特点将会随着描述而更为清楚，但这些实施例仅是范例性的，并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。
实施例1
藤茶提取物的制备：
(1)将1份藤茶粉碎过60目筛，与25份水混合，加热至95℃浸提40min；
(2)离心过滤，保留上清液；
(3)将上清液进行陶瓷膜过滤，膜孔径为0.2μm，保留上清液；
(4)将上清液进行浓缩，真空度为-0.08MPa，温度为60℃，然后以0.5℃/min的降温速度降温至4℃结晶得到晶体；
(5)将晶体4℃保温，搅拌，冰水冲洗2次得到初级提取物；
(6)将初级提取物离心分离，50℃烘干得到藤茶提取物。
藤茶提取物复合物的制备：
(1)将1份藤茶提取物与20份75℃水混合，溶解；
(2)将4份α-环状糊精与藤茶提取物缓慢混合，20min加完；
(3)喷雾干燥，得到复合物，其中进风温度180℃，出风温度75℃。
实施例2
藤茶提取物的制备：
(1)将1份藤茶粉碎过80目筛，与30份水混合，加热至90℃浸提60min；
(2)离心过滤，保留上清液；
(3)将上清液进行陶瓷膜过滤，膜孔径为0.5μm，保留上清液；
(4)将上清液进行浓缩，真空度为-0.1MPa，温度为70℃，然后以0.5℃/min的降温速度降温至10℃结晶得到晶体；
(5)将晶体10℃保温，搅拌，冰水冲洗1次得到初级提取物；
(6)将初级提取物离心分离，60℃烘干得到藤茶提取物。
藤茶提取物复合物的制备：
(1)将1份藤茶提取物与25份85℃水混合，溶解；
(2)将3份γ-环状糊精与藤茶提取物缓慢混合，20min加完；
(3)喷雾干燥，得到复合物，其中进风温度180℃，出风温度80℃。
实施例3
藤茶提取物的制备：
(1)将1份藤茶粉碎过70目筛，与28份水混合，加热至92℃浸提50min；
(2)离心过滤，保留上清液；
(3)将上清液进行陶瓷膜过滤，膜孔径为0.5μm，保留上清液；
(4)将上清液进行浓缩，真空度为-0.09MPa，温度为65℃，然后以0.5℃/min的降温速度降温至8℃结晶得到晶体；
(5)将晶体8℃保温，搅拌，冰水冲洗2次得到初级提取物；
(6)将初级提取物离心分离，55℃烘干得到藤茶提取物。
藤茶提取物复合物的制备：
(1)将1份藤茶提取物与22份80℃水混合，溶解；
(2)将3份γ-环状糊精与藤茶提取物缓慢混合，20min加完；
(3)喷雾干燥，得到复合物，其中进风温度180℃，出风温度78℃。
对比例1
与实施例1相比，藤茶提取物的制备过程步骤(4)不同，不采用真空浓缩的方式。
其中步骤(4)为：将上清液常压下进行浓缩，温度为60℃，然后以0.5℃/min的降温速度降温至4℃结晶得到晶体。
对比例2
与实施例1相比，藤茶提取物的制备过程步骤(4)不同，采用迅速降温的方式结晶。
其中步骤(4)为：将上清液进行浓缩，真空度为-0.08MPa，温度为60℃，然后迅速降温，5分钟降温至4℃结晶得到晶体。
对比例3
与实施例1相比，藤茶提取物的制备过程步骤(3)不同，采用聚醚砜过滤膜。
其中步骤(3)具体为：将上清液进行过滤，采用膜孔径为0.2μm的聚醚砜过滤膜，保留上清液。
对比例4
与实施例1相比，藤茶提取物复合物的制备过程步骤(3)不同。
其中步骤(3)具体为：喷雾干燥，得到复合物，其中进风温度200℃，出风温度60℃。
选取80只雌性db/db小鼠(8-10周龄)适应性喂养2周，空腹血糖值超过13.9mmol/L后准备进行试验。同周龄C57雌性小鼠为正常组，80只雌性db/db小鼠随机分为8组，每组10只，分别为对照组、实施例1-3组、对比例1-4组，实施例1-3组、对比例1-4组各组灌胃给药，将产品溶解于水中制成浓度为5.0g/L的溶液，每日1次，灌胃体积0.1ml/10g，连续给药处理8周；对照组灌胃给水，灌胃体积1ml/10g。每周监测血糖1次，连续给药8周，同时对所有小鼠进行一般状况和行为检查。各组小鼠均分笼饲养，每日记录小鼠一般行为状态、饮水量和饲料消耗量，计算每只动物每日饮水量，每周测定1次小鼠体重。
试验例1对db/db小鼠空腹血糖的影响
动物处理同上，每周监测一次空腹血糖，动物禁食不禁水5h后，用全自动血糖仪测定小鼠尾静脉血血糖值，一周后实验结果如下：
Figure BDA0002139722670000071
不同标号之间，P<0.05，具有显著性差异。
试验例2对db/db小鼠葡萄糖耐量的影响
试验例1小鼠最后一次给药后，动物禁食不禁水5h，按照2.5g/kg葡萄糖剂量灌胃后0min，30min，60min，90min，120min用全自动血糖仪测定尾静脉血血糖值，计算小鼠糖耐量。实验结果如下：
组别 灌胃后糖耐量AUC(min·m mol/L)
正常组 1530.4±151.1<sup>*</sup>
对照组 3958.9±38.7<sup>**</sup>
实施例1 3019.7±225.5##
实施例2 2994.3±416.2##
实施例3 3016.5±576.0#
对比例1 3492.9±304.9#
对比例2 3211.9±341.0#
对比例3 3292.1±314.9#
对比例4 3311.9±271.0#
不同字母之间，P<0.05。
试验例3对db/db小鼠胰岛素抵抗指数的影响
试验例1小鼠最后一次给药后，动物禁食不禁水5h，腹主动脉采血500μL，3500rpm离心15min，取上清，胰岛素ELISA试剂盒检测血清胰岛素。按照胰岛素抵抗指数计算，HOMA-IR＝空腹血糖(mmol/l)×胰岛素(μU/ml)/22.5
实验结果如下：
组别 胰岛素抵抗指数
正常组 2.9±0.07<sup>d</sup>
对照组 30.1±4.3<sup>a</sup>
实施例1 10.9±2.1<sup>b</sup>
实施例2 11.3±2.6<sup>b</sup>
实施例3 11.9±3.9<sup>b</sup>
对比例1 22.8±2.2<sup>c</sup>
对比例2 23.1±3.1<sup>c</sup>
对比例3 26.5±2.5<sup>c</sup>
对比例4 28.5±2.4<sup>c</sup>
不同标号之间，P<0.05，具有显著性差异。
试验例4对db/db小鼠血脂水平的影响
给药和处理同上。最后一次给药后，动物禁食不禁水5h后，腹主动脉采血500μL，3500rpm离心15min，取上清，全自动生化仪检测血脂。实验结果如下：
Figure BDA0002139722670000091
不同标号之间，P<0.05，具有显著性差异。
实施例5对db/db小鼠体重和体脂的影响
给药和处理同上。最后一次给药后，动物禁食不禁水，测定完所有指标后，称取体重后，小鼠解剖后称重小鼠腹部白色脂肪和棕色脂肪，并计算体脂比等指标。
组别 体重(g) 体脂比
正常组 23.8±1.7 0.09±0.007
对照组 60.9±3.6<sup>*</sup> 0.19±0.06<sup>*</sup>
实施例1 52.8±5.3<sup>*#</sup> 0.14±0.6<sup>*#</sup>
实施例2 53.6±3.9<sup>*#</sup> 0.14±0.9<sup>*#</sup>
实施例3 56.5±4.9<sup>*#</sup> 0.14±0.9<sup>*#</sup>
对比例1 56.6±5.5<sup>*#</sup> 0.16±0.05<sup>*#</sup>
对比例2 59.0±2.4<sup>*</sup> 0.16±0.04<sup>*</sup>
对比例3 54.4±6.6<sup>*#</sup> 0.15±0.03<sup>*#</sup>
对比例4 56.6±5.6<sup>*#</sup> 0.15±5.6<sup>*#</sup>
*，p＜0.05，与正常对照组比较；#，p＜0.05，与模型组比较。
综合测试结果可知，本申请具备以下优点：
1.本发明提取物的有效成分组成，可以有效治疗代谢综合征。不仅仅是动物实验，人体试食结果显示，对中心性肥胖伴随高脂血症和糖尿病为特征的代谢综合征患者具有较好的改善体重和血糖的作用，体现了综合改善的特征。
2.通过本发明所述的提取方法，明确了合适的提取过程，得到的提取物含量较高，对于治疗代谢综合征有较好的作用。
3.本发明通过真空浓缩，更大程度的保留了有效活性组分是活性，获得了有效成分含量较高的提取物。
本发明方案所公开的技术手段不仅限于上述所公开的技术手段，还包括由以上技术特征任意组合所组成的技术方案。以上所述是本发明的具体实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以作出若该改进和修饰，这些也将视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种藤茶提取物，其特征在于，包括二氢杨梅素、杨梅素和杨梅苷；所述的提取物的制备方法，包括以下步骤：
(1)将藤茶粉碎过筛与水混合，加热至90-95℃浸提；
(2)离心过滤，保留上清液；
(3)将上清液进行陶瓷膜过滤，保留上清液；
(4)将上清液进行真空浓缩，降温结晶得到晶体；
(5)将晶体冰水冲洗得到初级提取物；
(6)将初级提取物离心分离，烘干得到藤茶提取物；
步骤(4)中，所述降温为以0.5℃/min的降温速度缓慢降温至4-10℃。
2.根据权利要求1所述的提取物，其特征在于，按重量份计，二氢杨梅素81.4％-93.6％、杨梅素1.5％-2.3％和杨梅苷0.47％-1.2％。
3.权利要求1或2任一所述的提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将藤茶粉碎过筛与水混合，加热至90-95℃浸提；
(2)离心过滤，保留上清液；
(3)将上清液进行陶瓷膜过滤，保留上清液；
(4)将上清液进行真空浓缩，降温结晶得到晶体；
(5)将晶体冰水冲洗得到初级提取物；
(6)将初级提取物离心分离，烘干得到藤茶提取物。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)，按重量份计，藤茶：水＝1:25-30；浸提时间为40-60min。
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)，陶瓷膜孔径为0.2-0.5μm。
6.一种藤茶提取物复合物，其特征在于，包括权利要求1-2任一所述的提取物，或权利要求3-5任一所述的制备方法得到的提取物和α-环状糊精、γ-环状糊精中的一种。
7.根据权利要求6所述的复合物，其特征在于，按重量份计，α-环状糊精75-80％，提取物余量；或γ-环状糊精80-83％，提取物余量。
8.权利要求6-7任一所述的复合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将藤茶提取物与水混合，溶解；
(2)将α-环状糊精或γ-环状糊精与藤茶提取物混合；
(3)喷雾干燥，得到复合物。
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)，按重量份计，藤茶提取物：水＝1:20-25；水的温度为75-85℃。
10.权利要求1-2任一所述的提取物、权利要求3-5任一所述的制备方法得到的提取物、权利要求6-7任一所述的复合物或权利要求8-9任一所述的制备方法得到的复合物在制备治疗代谢综合征药物中的应用。
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