CN112826876A - 藤茶水提物在制备改善肝损伤的制剂中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明属于医药保健食品技术领域，尤其涉及藤茶水提物在制备改善肝损伤的制剂中的应用。本发明所述的藤茶水提物可通过调节小鼠肠道菌群的多样性，有效地调节肠道菌群紊乱和改善肠道屏障功能受损，降低肝损伤的炎症反应，明显升高小鼠血清的SOD含量，提高肝细胞抗氧化能力。本发明对利用藤茶水提物通过调节肠道微生态紊乱治疗和预防急慢性肝损伤，改善患者肝功能障碍，延缓患者肝纤维化的发展有积极的应用价值。本发明的藤茶水提物及其组合物可用于改善多种原因导致的肠道微生态紊乱的疾病防治。

Description

藤茶水提物在制备改善肝损伤的制剂中的应用

技术领域

本发明属于医药保健食品技术领域，尤其涉及藤茶水提物在制备改善肝损伤的制剂中的应用。

背景技术

肠道微生态是指宿主肠道与其邻近微生物组成的庞大生态系统。肠道微生态系统中的有益菌和有害菌互相制约、互相依存，在质和量上形成肠道菌群稳态；一旦机体内外环境发生变化，有益菌被抑制，有害菌乘机繁殖，可导致肠道菌群失调，产生病理性表现、引起一系列的临床症状就称为肠道菌群紊乱。最新兴起的肠道微生物组学揭示了肠道微生物在生理病理条件下的变化趋势，已发现诸多疾病的发生均与肠道菌群失常有关，包括肥胖、肠易激综合征、炎性肠病、抑郁、阿尔茨海默病、肝损伤等等。目前将肠道菌群视为治疗靶标的益生元、益生菌、功能食品等，已逐渐成为缓解或治疗疾病的新途径。

近年来，急慢性肝损伤已经成为临床上威胁人类健康的常见疾病之一。急性肝损伤是指患者在无慢性肝病基础上，由各种病因导致肝脏细胞损伤而发生。慢性肝损伤是指由于肝损伤诱因持续存在，如肝病毒性疾病、酒精性肝炎、胆道疾病、血色素沉着症或肝病等，致使肝脏细胞持续发生坏死，继发肝脏类炎症或损伤后修复过程中持续的炎症反应，引起实质性肝损伤的病理变化。严重或持续的肝损伤可演化为为肝纤维化、肝硬化，导致肝功能衰竭，甚至肝癌。目前，针对肝损伤的治疗，通常采用药物如多烯磷脂酰胆碱、还原型谷胱甘肽、甘草酸二铵、复方甘草酸苷、异甘草酸镁、双环醇、六味五灵片等，但这些药物安全性小、不良反应较多。因此，寻找一种针对急、慢性肝损伤的有效防治且副作用小的制剂，成为国内外研究的热点。而肠肝轴的发现为防治肝损伤提供了新的方向。

藤茶(Ampelopsis megalophylla Diels et Gilg)，是近年来研究较多的药茶两用中药之一，具有清热利湿、平肝降压、活血通络之功效。藤茶中富含黄酮类化合物，以二氢杨梅素(DHM)的含量最高(约30％左右)，二氢杨梅素微溶于水(4％左右，25℃)，易溶于酒精(80％以上，25℃)，具有显著的抗氧化、抗炎、抗病原微生物、抗肿瘤、保肝、心脏保护、提高胰岛素敏感性等作用。

现有技术中公开了多种防治肝损伤的中药组合物，如中国专利CN112089748A公开了一种治疗肝损伤的中药组合物，该组合物由：桔梗和甘草组成，具有护肝的作用。中国专利CN110179946A公开了一种具有保护化学性肝损伤功效的中药组合物，主要由五味子、姜黄素和水飞蓟组成。中国专利CN11729072A公开了一种解酒护肝制剂，主要由枸杞糖肽和橄榄油组成，具有解酒护肝功效。中国专利CN111632082A公开了一种防治酒精性肝损伤的药物组合物，由西洋参和枳椇子组成，具有改善脂质代谢和提高抗氧化能力的功效。中国专利CN111821343A公开了由一枝蒿、茵陈、毛菊苣、玫瑰花、大黄和甘草制备而成的预防和治疗酒精性肝损伤的中药复方制剂，制剂的原料中还能加入乳糖、糊精、淀粉、蔗糖或微晶纤维等辅料。

人们利用中药制备保肝护肝药物、保健品的研究从未停歇。但是目前还没有以藤茶为主要组成应用于调节肝损伤所导致肠道微生态紊乱的研究报道。因此，本申请提出藤茶在调节肝损伤动物肠道微生态的用途，为防治急慢性肝损伤提供新的选择，为藤茶的深度开发提供新的思路。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了藤茶水提物在制备改善肝损伤的制剂中的应用，目的在于解决现有技术中的一部分问题或至少缓解现有技术中的一部分问题。为了克服现有技术存在的藤茶对肠道菌群紊乱的调节作用尚未见应用的问题，提供藤茶水提物及其组合物在制备用于调节肠道微生态的制剂中的应用，该应用能调节急慢性肝损伤导致的肠道微生态紊乱，为藤茶的研究开发提供新的思路。

本发明是这样实现的，藤茶水提物在制备改善肝损伤的制剂中的应用。

进一步地，所述肝损伤包括急性肝损伤和慢性肝损伤中的任一种。

进一步地，所述肝损伤包括酒精性肝损伤、药物性肝损伤、酒精性脂肪肝和非酒精性脂肪肝中的至少一种。所述药物性肝损伤包括CCl₄诱导的肝损伤。

藤茶水提物在制备调节肠道菌群紊乱制剂中的应用。特别是肝损伤条件下肠道微生态的制剂。所述调节肠道微生态包括调节肠道菌群紊乱和肠道肌层受损。所述肠道菌群紊乱为急慢性肝损伤条件下引起的肠道菌群多样性降低，且肠道有害菌含量显著高于健康肠道，或肠道有益菌的含量显著低于健康肠道；所述肠道屏障功能受损为肠道肌层变薄、肠粘膜受损、组织完整性破坏。

所述肠道菌群紊乱为肠道菌群多样性相比于正常情况为降低状态，具体表现为肠道菌群有益菌和有害菌的比例失衡。

所述有益菌包括乳酸杆菌和双歧杆菌。

所述有害菌包括脱硫弧菌和梭菌。

所述肠道肌层受损为肠道肌层变薄、结构破坏。

藤茶水提物在制备改善肠道屏障功能受损制剂中的应用。

进一步地，所述制剂剂型为胶囊剂、片剂、丸剂、颗粒剂、糖浆剂、散剂、注射剂、固体饮料、饮料或烘培食品中的任一种。优选情况下，所述药物组合物的剂型为胶囊剂、颗粒剂或糖浆剂。

进一步地，所述藤茶水提物的制备方法包括：

(1)藤茶干燥茎叶经研磨成粉，藤茶粉末与水按一定比例混合，在一定温度条件下煎煮一定时间；

(2)步骤(1)所得水煎液离心后获得上清液，将步骤(1)所得沉淀按照沉淀与水按一定比例混合，在一定温度条件下煎煮一定时间；

(3)多次重复步骤(2)的操作，合并各次的上清液，离心；

(4)将所得上清液在按一定条件喷雾干燥成粉，得到藤茶水提物。

进一步地，藤茶粉末与水的体积比为1：5-60。优选为1：5-30。

进一步地，煎煮温度为10-100℃，优选为50-100℃；煎煮时间为60-120min，优选为60-100min；步骤(2)的重复次数为至少3次。

进一步地，喷雾干燥条件为100-250℃，优选为100-200℃；1-3Bar，优选为1-2Bar条件下喷雾干燥成粉。

进一步地，所述藤茶水提物的给药量为1-500mg/kg体重。优选地，所述藤茶水提物的给药量为60-450mg/kg体重。

本发明还提供一种用于调节肠道微生态的藤茶组合物，该药物组合物含有藤茶水提物、益生元和药物学上可接受的辅料；所述益生元为木寡糖、果寡糖、壳寡糖、甘露寡糖和葡寡糖中的至少一种。

综上所述，本发明的优点及积极效果为：

本发明使用的藤茶水提物经实验证明具有明显的调节慢性肝损伤动物肠道微生态效果。动物实验证明，在急慢性肝损伤小鼠模型中，通过饮水喂食一定剂量的藤茶水提物，小鼠的肠道菌群的多样性得到调节，肠道菌群紊乱和肠道肌层受损改善，肝脏组织炎症因子的表达降低，从而逆转由急慢性肝损伤模型小鼠肝脏组织的炎性浸润、细胞坏死，小鼠血清的超氧化物歧化酶(SOD)含量明显升高，肝功能恢复。实验结果提示，所述藤茶水提物对于急慢性肝损伤所引起的肠道微生态紊乱有较好的缓解作用，可进一步用于药物制剂或保健食品的开发和应用。本发明所述的藤茶水提物制备成组合物后能调节肝损伤条件下的肠道菌群紊乱，有利于改善酒精性肝损伤、药物性肝损伤、酒精性脂肪肝和非酒精性脂肪肝病等肝损伤疾病，为藤茶的研究开发提供新的思路。

附图说明

图1是藤茶水提物对CCl₄诱导的急性肝损伤小鼠的肝脏组织炎性浸润、细胞坏死的抑制作用图；

图2是藤茶水提物对CCl₄诱导的慢性肝损伤小鼠的体重的调节作用图；

图3是藤茶水提物对CCl₄诱导的慢性肝损伤小鼠的肠道肌层损伤的抑制作用图。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明，各实施例及试验例中所用的设备和试剂如无特殊说明，均可从商业途径得到。此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

根据本申请包含的信息，对于本领域技术人员来说可以轻而易举地对本发明的精确描述进行各种改变，而不会偏离所附权利要求的精神和范围。应该理解，本发明的范围不局限于所限定的过程、性质或组分，因为这些实施方案以及其他的描述仅仅是为了示意性说明本发明的特定方面。实际上，本领域或相关领域的技术人员明显能够对本发明实施方式作出的各种改变都涵盖在所附权利要求的范围内。

为了更好地理解本发明而不是限制本发明的范围，在本申请中所用的表示用量、百分比的所有数字、以及其他数值，在所有情况下都应理解为以词语“大约”所修饰。因此，除非特别说明，否则在说明书和所附权利要求书中所列出的数字参数都是近似值，其可能会根据试图获得的理想性质的不同而加以改变。各个数字参数至少应被看作是根据所报告的有效数字和通过常规的四舍五入方法而获得的。本发明中，“约”指给定值或范围的10％以内，优选为5％以内。

本发明下述各实施例中所述常温是指四季中自然室温条件，不进行额外的冷却或加热处理，一般常温控制在10～30℃，最好是15～25℃。

本发明披露了藤茶水提物在制备改善肝损伤的制剂中的应用。本发明所述的藤茶水提物可通过调节小鼠肠道菌群的多样性，有效地调节肠道菌群紊乱和改善肠道屏障功能受损，降低肝损伤的炎症反应，明显升高小鼠血清的SOD含量，提高肝细胞抗氧化能力。本发明对利用藤茶水提物通过调节肠道微生态紊乱治疗和预防急慢性肝损伤，改善患者肝功能障碍，延缓患者肝纤维化的发展有积极的应用价值。本发明的藤茶水提物及其组合物可用于改善多种原因导致的肠道微生态紊乱的疾病防治。具体如下实施例所示，本发明中“^*”或“^**”代表模型组与对照组相比有统计差异，“^#”或“^##”代表处理组与模型组之间存在显著差异。

实施例1藤茶水提物的制备

本实施例用于说明藤茶水提物的制备过程，具体制备过程为：

S1、将干燥后的藤茶茎叶研磨成细粉，按照藤茶粉与水的体积比为1:10的比例加水，在90℃下煎煮1h。

S2、收集步骤S1所得水煎液离心，将步骤S1所得沉淀按照沉淀与水的体积比为1:10的比例再次加水，在90℃下煎煮1h，合并两次上清液，再次离心。

S3、收集步骤S2所得水煎液离心，将步骤S2所得沉淀按照沉淀与水的体积比为1:10的比例再次加水，在90℃下煎煮1h，合并三次上清液，再次离心。

S4、将步骤S3所得上清液在180℃、2.0Bar条件下喷雾干燥成粉，得到藤茶水提物。

实施例2藤茶水提物对CCl₄诱导的急性肝损伤小鼠的肝脏炎症的抑制作用和肠道微生态紊乱的改善作用

为了研究藤茶水提物对CCl₄诱导的急性肝损伤小鼠的肝脏炎症的抑制作用和肠道微生态紊乱的改善，建立CCl₄诱导的急性肝损伤小鼠模型及给药处理，并以治疗肝损伤临床药物肝泰乐作为阳性对照。具体包括以下步骤：

(1)将4-6周龄、体重为20±2g的雄性C57BL/6小鼠随机分为空白对照组(Ctrl)、急性肝损伤组(A-CCl₄)、急性肝损伤加肝泰乐组(A-CCl₄-GTL)、急性肝损伤加藤茶组(A-CCl₄-VT)。

(2)饲养条件保持适宜的温度和湿度，昼夜节律，喂食正常标准饲料和无菌饮水。经过一周的环境适应期后，Ctrl组每周三次腹腔注射6mL/kg体重橄榄油(olive oil)，CCl₄组、A-CCl₄-GTL组和CCl₄-VT组每周三次腹腔注射2mL/kg体重CCl₄(CCl₄:olive oil＝1:2，v/v)，A-CCl₄-GTL组每日灌胃500mg/kg体重护肝片，CCl₄-VT组每日灌胃200mg/kg体重藤茶，Ctrl组和CCl₄组灌胃0.01ml/10g体重灭菌水。

(3)小鼠喂养1周后，将小鼠麻醉处死，取小鼠肝脏组织固定于4％的多聚甲醛溶液中，制成石蜡切片，在光学显微镜下观察肝脏组织细胞的情况(如图1所示)。从图1可以看出，相比于Ctrl组，A-CCl₄组肝组织结构紊乱，出现明显的肝细胞水肿、弥散性肝细胞坏死、炎性细胞浸润，而A-CCl₄-GTL组及A-CCl₄-VT组，肝组织结构紊乱情况减轻，肝细胞水肿、弥散性肝细胞坏死、炎性细胞浸润明显减少，说明藤茶对于CCl₄诱导的急性肝损伤小鼠的肝脏组织的炎性细胞浸润、肝细胞水肿坏死具有抑制和保护作用。

(4)小鼠喂养1周后，收集小鼠的新鲜粪便，利用试剂盒提取其中的基因，基于16SrRNA的V3-V4区扩增片段进行二代高通量核酸测序，经过数据库信息比对，结合生物信息学分析和统计学分析，鉴定出各个实验组中的肠道细菌的种类，并计算出不同细菌的相对含量。表1显示了双歧杆菌、乳酸杆菌和脱硫弧菌占总体肠道细菌的百分含量。可以发现，CCl₄诱导的急性肝损伤小鼠A-CCl₄组中，有益菌双歧杆菌、乳酸杆菌含量明显下调，促炎细菌脱硫弧菌含量显著升高；西药治理组A-CCl₄-GTL组双歧杆菌、乳酸杆菌含量未见显著回升，脱硫弧菌的比重无明显降低；而A-CCl₄-VT组中双歧杆菌、乳酸杆菌含量显著回升，脱硫弧菌的比重显著降低，肠道菌群紊乱得到明显改善。

表1.各组小鼠肠道内关键细菌含量变化(^*P<0.05，^**P<0.01vs Ctrl，^#P<0.05，^##P<0.01vs CCl₄)

实验分组/含量(％)	双歧杆菌	乳酸杆菌	脱硫弧菌
				Ctrl	15.28±0.26	19.41±1.78	0.24±0.89
A-CCl<sub>4</sub>	0.11±0.12<sup>*</sup>	0.05±0.01<sup>**</sup>	12.63±1.43<sup>**</sup>
				A-CCl<sub>4</sub>-GTL	1.89±1.53	2.15±2.65	8.45±0.84
A-CCl<sub>4</sub>-VT	4.45±0.61<sup>##</sup>	6.36±1.57<sup>##</sup>	4.49±0.61<sup>##</sup>

实施例3藤茶水提物对CCl₄诱导的慢性肝损伤小鼠的体重调节作用和肠道微生态紊乱的改善作用

为了研究苦藤茶水提物对CCl₄诱导的慢性肝损伤小鼠的体重调节作用和对肝脏炎症的抑制作用，建立CCl₄诱导的慢性肝损伤小鼠模型及给药处理。具体包括以下步骤：

(1)将4-6周龄、体重为20±2g的雄性C57BL/6小鼠随机分为空白对照组(Ctrl)、慢性肝损伤组(CCl₄)、慢性肝损伤加肝泰乐组(CCl₄-GTL)、慢性肝损伤加藤茶组(CCl₄-VT)。

(2)饲养条件保持适宜的温度和湿度，昼夜节律，喂食正常标准饲料和无菌饮水。经过一周的环境适应期后，Ctrl组每周两次腹腔注射3mL/kg体重橄榄油(olive oil)，CCl₄组、CCl₄-GTL组和CCl₄-VT组每周两次腹腔注射1mL/kg体重CCl₄(CCl₄:olive oil＝1:2,v/v)，Ctrl组正常无菌饮水，CCl₄-GTL组予2mg/mL肝泰乐饮水，CCl₄-VT组予1mg/mL藤茶饮水。

(3)小鼠在饲养的6周中每7天进行体重监测，并记录其体重变化，制成小鼠生长曲线(如图2所示)。体重变化结果显示，与Ctrl组相比，CCl₄组小鼠体重明显低于Ctrl组，并有显著性差异(P＜0.05)，而CCl₄-GTL组及CCl₄-VT组与CCl₄组相比体重明显上升，且具有显著性差异(P＜0.05)。说明藤茶可以抑制CCl₄诱导的慢性肝损伤小鼠的体重下降。

(4)小鼠喂养6周后，收集小鼠的新鲜粪便，提取其中的基因，基于16S rRNA的V3-V4区扩增片段进行二代高通量核酸测序，经过数据库信息比对，结合生物信息学分析和统计学分析，鉴定出各个实验组中的肠道细菌的种类，并计算出不同细菌的相对含量。表2显示了双歧杆菌、乳酸杆菌和脱硫弧菌占总体肠道细菌的百分含量。可以发现，CCl₄诱导的慢性肝损伤小鼠CCl₄组中，有益菌双歧杆菌、乳酸杆菌含量明显下调，促炎细菌脱硫弧菌含量显著升高；西药治疗组CCl₄-GTL组有益菌双歧杆菌、乳酸杆菌含量未见明显回升，促炎细菌脱硫弧菌含量无明显降低；而CCl₄-VT组中双歧杆菌、乳酸杆菌含量显著回升，脱硫弧菌的比重显著降低，肠道菌群紊乱得到明显改善。

表2.各组小鼠肠道内关键细菌含量变化(^*P<0.05，^**P<0.01vs Ctrl，^#P<0.05，^##P<0.01vs CCl₄)

(5)小鼠喂养6周后，将小鼠麻醉处死，取小鼠大肠组织固定于4％的多聚甲醛溶液中，制成石蜡切片，进行HE染色，在光学显微镜下观察大肠组织肌层情况(如图3所示)。从图3可以看出，相比于Ctrl组，CCl₄组肠道肌层明显变薄，且肠道组织结构不完整；CCl₄-GTL组肠道肌层未见明显增厚，且肠道组织结构不完整；而CCl₄-VT组与CCl₄组相比，肠道肌层明显变厚，肠道屏障结构完整，说明藤茶对于CCl₄诱导的慢性肝损伤小鼠的肌层变薄、肠道组织结构破坏具有抑制和恢复作用。

实施例4藤茶水提物对酒精诱导的急性酒精性肝损伤小鼠的肝脏抗氧化功能改善和肠道微生态紊乱的抑制作用

为了研究苦藤茶水提物对酒精诱导的急性酒精性肝损伤小鼠的肝脏抗氧化功能改善和肠道微生态紊乱的抑制作用，建立酒精诱导的急性酒精性肝损伤小鼠模型及给药处理。具体包括以下步骤：

(1)将4-6周龄、体重为20±2g的雄性C57BL/6小鼠随机分为空白对照组(Ctrl)、急性酒精性肝损伤组(Alcohol)、空白对照加藤茶组(Ctrl-VT)、急性酒精性肝损伤加藤茶组(Alcohol-VT)。

(2)饲养条件保持适宜的温度和湿度，昼夜节律，喂食正常标准饲料和无菌饮水。经过一周的环境适应期后，Ctrl-VT组和A-Alcohol-VT组灌胃200mg/kg体重藤茶，Ctrl组和Ctrl-VT组灌胃0.01mL/10g体重灭菌水，90min后Ctrl组和Ctrl-VT组灌胃0.01mL/10g体重灭菌水，A-Alcohol组和A-Alcohol-VT组灌胃0.01mL/10g体重54％乙醇。

(3)收集小鼠的新鲜粪便，提取其中的基因，基于16S rRNA的V3-V4区扩增片段进行二代高通量核酸测序，经过数据库信息比对，结合生物信息学分析和统计学分析，鉴定出各个实验组中的肠道细菌的种类，并计算出不同细菌的相对含量。表3显示了双歧杆菌、乳酸杆菌和脱硫弧菌占总体肠道细菌的百分含量。可以发现，酒精诱导的急性酒精性肝损伤小鼠A-Alcohol组中，有益菌双歧杆菌、乳酸杆菌含量明显下调，促炎细菌脱硫弧菌含量显著升高，而A-Alcohol-VT组中双歧杆菌、乳酸杆菌含量显著回升，脱硫弧菌的比重显著降低，肠道菌群紊乱得到明显改善。

表3.各组小鼠肠道内关键细菌含量变化(^*P<0.05，^**P<0.01vs Ctrl，^#P<0.05，^##P<0.01vs CCl₄)

(4)用带有抗凝剂的容器收集实验小鼠的血液，低温离心机下4℃，5000g高速离心后取上清液，并用试剂盒检测血浆中AST、ALT、SOD的浓度，相应的结果见表4。可以发现，A-Alcohol组小鼠血浆中，AST、ALT含量明显升高，而SOD含量显著下调，而A-Alcohol-VT组中AST、ALT含量显著下调，而SOD含量显著回升，肝功能损伤及抗氧化能力下降得到明显改善。

表4各组小鼠AST、ALT及SOD含量差异(^*P<0.05，^**P<0.01vs Ctrl，^#P<0.05，^##P<0.01vs CCl₄)

实施例5藤茶水提物对酒精诱导的慢性酒精性肝损伤小鼠的肝功能恢复和肠道菌群紊乱的改善作用

(1)将4-6周龄、体重为20±2g的雄性C57BL/6小鼠随机分为空白对照组(Ctrl)、慢性酒精性肝损伤组(Alcohol)、空白对照加藤茶组(Ctrl-VT)、慢性酒精性肝损伤加藤茶组(Alcohol-VT)。

(2)饲养条件保持适宜的温度和湿度，昼夜节律，喂食正常标准饲料和无菌饮水。经过一周的环境适应期后，Ctrl组和Ctrl-VT组每天一次灌胃0.01mL/10g体重灭菌水，Alcohol组和Alcohol-VT组每天一次灌胃0.01mL/10g体重50％乙醇。Ctrl组和Alcohol组正常无菌饮水，Ctrl-VT组和Alcohol-VT组2mg/mL藤茶饮水。

(3)收集小鼠的新鲜粪便，提取其中的基因，基于16S rRNA的V3-V4区扩增片段进行二代高通量核酸测序，经过数据库信息比对，结合生物信息学分析和统计学分析，鉴定出各个实验组中的肠道细菌的种类，并计算出不同细菌的相对含量。表5显示了双歧杆菌、乳酸杆菌和脱硫弧菌占总体肠道细菌的百分含量。可以发现，酒精诱导的急性酒精性肝损伤小鼠Alcohol组中，有益菌双歧杆菌、乳酸杆菌含量明显下调，促炎细菌脱硫弧菌含量显著升高，而Alcohol-VT组中双歧杆菌、乳酸杆菌含量显著回升，脱硫弧菌的比重显著降低，肠道菌群紊乱得到明显改善。

表5.各组小鼠肠道内关键细菌含量变化(^*P<0.05，^**P<0.01vs Ctrl，^#P<0.05，^##P<0.01vs Alcohol)

(4)用带有抗凝剂的容器收集实验小鼠的血液，低温离心机下4℃，5000g高速离心后取上清液，并用试剂盒检测血浆中AST、ALT、SOD的浓度，相应的结果见表6。可以发现，Alcohol组小鼠血浆中，AST、ALT含量明显升高，而SOD含量显著下调，而Alcohol-VT组中AST、ALT含量显著下调，而SOD含量显著回升，肝功能损伤及抗氧化能力下降得到明显改善。

表6各组小鼠AST、ALT及SOD含量差异(^*P<0.05，^**P<0.01vs Ctrl，^#P<0.05，^##P<0.01vs Alcohol)

本发明通过动物实验，研究了藤茶水提物在调节肠道微生态中的应用。将一定浓度的藤茶粉末溶于动物灭菌饮用水中，监测小鼠的体重，检测肝脏炎症、肠道肌层的变化情况，发现藤茶水提物可以降低肝脏组织炎症因子的表达，恢复受损的肝功能，改善肠道肌层受损情况。收集小鼠的新鲜粪便，通过16S rRNA高通量测序发现，小鼠的肠道菌群紊乱，藤茶水提物能够有效地调节肠道菌群紊乱，起到护肝作用。由此可见，藤茶可进一步开发用于治疗肝炎及其他肠道菌群异常的疾病。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.藤茶水提物在制备改善肝损伤的制剂中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述肝损伤包括急性肝损伤和慢性肝损伤中的任一种。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述肝损伤包括酒精性肝损伤、药物性肝损伤、酒精性脂肪肝和非酒精性脂肪肝中的至少一种。

4.藤茶水提物在制备调节肠道菌群紊乱制剂中的应用。

5.藤茶水提物在制备改善肠道屏障功能受损制剂中的应用。

6.根据权利要求1-5任一所述的应用，其特征在于，所述制剂剂型为胶囊剂、片剂、丸剂、颗粒剂、糖浆剂、散剂、注射剂、固体饮料、饮料或烘培食品中的任一种。

7.根据权利要求1-5任一所述的应用，其特征在于：所述藤茶水提物的制备方法包括：

(1)藤茶干燥茎叶经研磨成粉，藤茶粉末与水按一定比例混合，在一定温度条件下煎煮一定时间；

(2)步骤(1)所得水煎液离心后获得上清液，将步骤(1)所得沉淀按照沉淀与水按一定比例混合，在一定温度条件下煎煮一定时间；

(3)多次重复步骤(2)的操作，合并各次的上清液，离心；

(4)将所得上清液在按一定条件喷雾干燥成粉，得到藤茶水提物。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：藤茶粉末与水的体积比为1：5-60；煎煮温度为10-100℃，煎煮时间为60-120min；步骤(2)的重复次数为至少3次。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：喷雾干燥条件为100-250℃，1-3Bar条件下喷雾干燥成粉。

10.一种用于调节肠道微生态的藤茶组合物，其特征在于：该药物组合物含有藤茶水提物、益生元和药物学上可接受的辅料；所述益生元为木寡糖、果寡糖、壳寡糖、甘露寡糖和葡寡糖中的至少一种。

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