CN114424824A - 一种藤茶提取物及其制备方法和在制备降脂护肝的药品或食品中的应用 - Google Patents

一种藤茶提取物及其制备方法和在制备降脂护肝的药品或食品中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种藤茶提取物及其制备方法和在制备降脂护肝的药品或食品中的应用，属于天然成分提取技术领域。本发明用水对藤茶原料进行提取，超声辅助提取，得到的藤茶提取物得率达28.5以上，主要黄酮类活性成分含量：二氢杨梅素≥240mg/g，杨梅苷≥10mg/g，杨梅素≥35mg/g。用高血脂SD大鼠模型评价提取物的降脂和护肝活性，结果表明藤茶提取物能减少脂肪在肝脏细胞中积累，降低对肝细胞的损伤。本发明提供的方法能够实现高效提取藤茶中具有降脂护肝的活性成分，进而为其开发利用提供参考。

Description

一种藤茶提取物及其制备方法和在制备降脂护肝的药品或食 品中的应用
技术领域
本发明属于天然成分提取技术领域，具体涉及一种藤茶提取物及其制备方法和在制备降脂护肝的药品或食品中的应用。
背景技术
高脂血症及其并发症所导致的死亡人数达全世界总死亡人数1/2以上，但是占有主导地位的化学类降血脂药物存在肌肉、肝肾、消化系统等严重毒副作用。因此，迫切需要研发新型无副作用的降脂护肝药物。植物来源的天然药物，通过多途径、多系统、多靶点发挥降血脂功效，比西药化学药具有更小的毒副作用。
新食品资源藤茶(Ampelopsis grossedentata(Hand.-Mazz.)W.T.Wang)具有清热解毒、利咽消肿、平肝降压、活血通络的功效，已被民间广泛应用于降血脂等疾病的预防和治疗。但是藤茶中降脂护肝的化学活性成分尚未被系统提取，阻碍其在开发为更高功效的降血脂的药品和/或功能性食品方面的运用。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种藤茶提取物及其制备方法，利用水作为提取溶剂，超声辅助提取，能高效提取藤茶中降脂护肝活性成分，为制备降脂护肝的药品或食品提供了基础。
本发明提供了一种藤茶提取物的制备方法，包括以下步骤：
1)将藤茶粉和水混合，在超声作用下提取，得到藤茶粗提液；
2)将所述藤茶粗提液经滤袋过滤，得到纯化的藤茶提取液；
3)将所述纯化的藤茶提取液进行冷冻干燥，得到藤茶提取物。
优选的，步骤1)中所述藤茶粉和水质量比为1：(40～55)。
优选的，步骤1)中所述提取的温度为30～40℃。
优选的，步骤1)中所述超声处理的功率为190～210W；
所述超声处理的时间为60～70min。
优选的，步骤1)中所述藤茶粉的粒径≤75μm。
优选的，步骤2)中所述滤袋过滤时，滤袋的孔径为1000目；
所述述滤袋过滤时，转速为3000～4000rpm。
优选的，步骤3)中所述冷冻干燥的真空度为20～30MPa，所述冷冻干燥的温度为-35～-40℃，所述冷冻干燥的时间为10～12h。
本发明提供了所述制备方法得到的藤茶提取物，活性成分包括以下以下含量的组分：二氢杨梅素≥280mg/g，杨梅苷≥10mg/g和杨梅素≥30mg/g。
本发明提供了所述藤茶提取物在制备降脂护肝的药品中的应用。
本发明提供了所述藤茶提取物在制备降脂护肝的食品中的应用。
本发明提供了一种藤茶提取物的制备方法，本发明利用水作为溶剂，同时超声辅助提取，从藤茶粉中提取得到具有降脂护肝的活性成分，并经滤袋过滤纯化以及冷冻干燥，得到活性成分得率较高的藤茶提取物。所述方法制备藤茶提取物中活性成分含量高，为后续制备降脂护肝的药物或食品提供了基础。并且，本发明提供的制备方法操作简便，重复性好，没有采用有毒有害试剂，绿色环保。
本发明提供了上述方案制备的藤茶提取物在制备降脂护肝的药品或食品中的应用。将制备的藤茶提取物对SD大鼠高血脂模型进行灌胃给药，评估其降脂效果，给药藤茶提取物组大鼠中总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白等检测结果表明，降脂活性显著优于其他对照组，并且ORO染色结果表明，藤茶提取物能减少脂肪在肝脏细胞中积累，降低对肝细胞的损伤。可见，本发明提供的藤茶提取物具有优异的降脂护肝活性，可应用于工业生产。
附图说明
图1为实施例1藤茶提取物对SD大鼠肝脏脂质积蓄(ORO，X63)及血脂指标含量(mmol/L)的影响；其中1.藤茶提取物低剂量组，高脂饲料+藤茶提取物(0.5g/kg)；2.空白对照组，正常饲料+生理盐水；3.藤茶提取物高剂量，高脂饲料+藤茶提取物(2.5g/kg)；4.高脂模型组，高脂饲料+生理盐水；5.阳性对照组，高脂饲料+洛伐他汀(2.0mg/kg)。
具体实施方式
本发明提供了一种藤茶提取物的制备方法，包括以下步骤：
1)将藤茶粉和水混合，在超声作用下提取，得到藤茶粗提液；
2)将所述藤茶粗提液经滤袋过滤，得到纯化的藤茶提取液；
3)将所述纯化的藤茶提取液进行冷冻干燥，得到藤茶提取物。
本发明将藤茶粉和水混合，在超声作用下提取，得到藤茶粗提液。
在本发明中，所述藤茶粉的粒度是影响提取效果的重要因素，粒度太大与溶剂作用不充分，提取率低；粒度太小，耗费成本，且对加工人员身体不利。所述藤茶粉的粒径优选≤75μm，更优选为37.5～60μm。本发明对所述藤茶粉的来源没有特殊限制，采用本领域所熟知的特定粒径的藤茶粉即可。在本发明实施例中，所述藤茶粉经藤茶原料粉碎后，过200目筛，收集筛下粉末获得。
在本发明中，所述藤茶粉和水质量比优选为1：(40～55)，更优选为1：(45～50)。
在本发明中，所述提取的温度优选为30～40℃，更优选为35℃。所述超声处理的功率优选为190～210W，更优选为200W。所述超声处理的时间优选为60～70min，更优选为65℃。实验证明，在超声处理提取时，温度或超声功率过高或过低或超声提取的时间过长或过短也会影响提取物中降脂护肝功能的活性成分的提取。
得到藤茶粗提液后，本发明将所述藤茶粗提液经滤袋过滤，得到纯化的藤茶提取液。
在本发明中，所述滤袋过滤时，滤袋的孔径优选为1000目。所述述滤袋过滤时，转速优选为3000～4000rpm，更优选为3500rpm。转速过高，增加成本和危险系数，转速过低又影响生产效率。所述滤袋过滤的目的是去除固体杂质颗粒。
得到纯化的藤茶提取液，本发明将所述纯化的藤茶提取液进行冷冻干燥，得到藤茶提取物。
在本发明中，所述冷冻干燥的真空度优选为20～30MPa，更优选为25MPa。所述冷冻干燥的温度优选为-35～-40℃，更优选为-38℃。所述冷冻干燥的时间优选为10～12h，更优选为11h。
本发明提供了所述制备方法得到的藤茶提取物，活性成分优选包括以下以下含量的组分：二氢杨梅素≥280mg/g，杨梅苷≥10mg/g和杨梅素≥30mg/g。所述藤茶提取物的得率优选为28％～32％。
建议所述藤茶提取物具有降低SD大鼠高血脂模型中降血脂和降低肝细胞损伤的作用，因此本发明提供了所述藤茶提取物在制备降脂护肝的药品或食品中的应用。
在本发明中，所述药品的剂型优选为口服剂。本发明对所述口服剂的种类没有特殊限制，采用本领域所熟知的口服剂即可，例如，口服液、片剂、丸剂等。所述药品中所述藤茶提取物的质量百分含量优选为40～60％，更优选为50％。所述药品中还包括一定量的药学上可接受的辅料。所述辅料的种类根据剂型进行调整。本发明对所述药品的制备方法没有特殊限制，采用本领域所熟知的药品的制备方法即可。取本药品1～2g倒入杯中，用100～200mL开水冲溶即可饮用。
本发明对制备的食品的种类没有特殊限制，采用本领域所熟知的食品即可，例如，植物固体饮料、功能性食品。
下面结合实施例对本发明提供的一种藤茶提取物及其制备方法和在制备降脂护肝的药品或食品中的应用进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
原料、耗材和仪器来源说明：
藤茶原料：咸丰县筒车坝藤茶专业合作社；
纯净水：恩施市云雾山饮品有限公司；
粉碎机：广东中科华恒科技有限公司；
分离筛：安平县腾德金属丝网制品有限公司；
超声仪：昆山舒美超声仪器有限公司；
冷冻干燥机：宁波新芝生物科技股份有限公司；
离心机：张家港市乐余电机设备厂；
滤袋：佛山市精柯纺织印染设备有限公司。
实施例1
(1)2020年12月3日，从咸丰县筒车坝藤茶专业合作社购得藤茶原料20kg，粉碎机(ZGP-2320Q)粉碎，过200目筛，获得藤茶样品粉碎的粒度≤75μm；
(2)运用kq5200e型超声波仪，以纯净水为提取溶剂，按料液比1：55(藤茶与水溶液的质量比例)，超声时间60min，温度40℃，功率210w，获得提取液；
(3)提取液利用离心机(型号200)，设置3000r/min、1000目滤袋离心过滤；
(4)冷冻干燥机(SCIENTZ-30F)，冷冻干燥条件：真空度20MPa，温度-40℃，时间为12h，藤茶提取液冻干，获得具有降脂护肝活性的藤茶提取提取物。每组处理设置3个重复。
(5)按照专利《一种藤茶中黄酮类化合物种类及含量的检测方法》(专利号：ZL201910739376.7)提供的检测方法检测藤茶提取物中主要黄酮类活性成分二氢杨梅素、杨梅苷、杨梅素的含量。
实施例2
(1)2020年12月3日，从咸丰县筒车坝藤茶专业合作社购得藤茶原料20kg，粉碎机(ZGP-2320Q)粉碎，过200目筛，获得藤茶样品粉碎的粒度≤75μm；
(2)运用kq5200e型超声波仪，以纯净水为提取溶剂，按料液比1：60(藤茶与水溶液的比例)，超声时间60min，温度35℃，功率190w，获得提取液；
(3)提取液利用离心机(型号200)，设置3500r/min、1000目滤袋离心过滤；
(4)冷冻干燥机(SCIENTZ-30F)，冷冻干燥条件：真空度25MPa，温度-35℃，时间为12h，藤茶提取液冻干，获得具有降脂护肝活性的藤茶提取提取物。
(5)按照专利《一种藤茶中黄酮类化合物种类及含量的检测方法》(专利号：ZL201910739376.7)提供的检测方法检测藤茶提取物中主要黄酮类活性成分二氢杨梅素、杨梅苷、杨梅素的含量。
实施例3
(1)2020年12月3日，从咸丰县筒车坝藤茶专业合作社购得藤茶原料20kg，粉碎机(ZGP-2320Q)粉碎，过200目筛，获得藤茶样品粉碎的粒度≤75μm；
(2)运用kq5200e型超声波仪，以纯净水为提取溶剂，按料液比1：55(藤茶与水溶液的比例)，超声时间60min，温度40℃，功率210w，获得提取液；
(3)提取液利用离心机(型号200)，设置3000r/min、1000目滤袋离心过滤；
(4)冷冻干燥机(SCIENTZ-30F)，冷冻干燥条件：真空度25MPa，温度-35℃，时间为11h，藤茶提取液冻干，获得具有降脂护肝活性的藤茶提取提取物。每组处理设置3个重复。
(5)按照专利《一种藤茶中黄酮类化合物种类及含量的检测方法》(专利号：ZL201910739376.7)提供的检测方法检测藤茶提取物中主要黄酮类活性成分二氢杨梅素、杨梅苷、杨梅素的含量。
实施例4
(1)2020年12月3日，从咸丰县筒车坝藤茶专业合作社购得藤茶原料20kg，粉碎机(ZGP-2320Q)粉碎，过200目筛，获得藤茶样品粉碎的粒度≤75μm；
(2)运用kq5200e型超声波仪，以纯净水为提取溶剂，按料液比1：55(藤茶与水溶液的比例)，超声时间70min，温度40℃，功率200w，获得提取液；
(3)提取液利用离心机(型号200)，设置4000r/min、1000目滤袋离心过滤；
(4)冷冻干燥机(SCIENTZ-30F)，冷冻干燥条件：真空度20MPa，温度-40℃，时间为12h，藤茶提取液冻干，获得具有降脂护肝活性的藤茶提取提取物。每组处理设置3个重复。
(5)按照专利《一种藤茶中黄酮类化合物种类及含量的检测方法》(专利号：ZL201910739376.7)提供的检测方法检测藤茶提取物中主要黄酮类活性成分二氢杨梅素、杨梅苷、杨梅素的含量。
实施例5
(1)2020年12月24日，从咸丰县筒车坝藤茶专业合作社购得藤茶原料10kg，粉碎机(ZGP-2320Q)粉碎，过400目筛，获得藤茶样品粉碎的粒度≤37.5μm；
(2)运用kq5200e型超声波仪，以纯净水为提取溶剂，按料液比1：50(藤茶与水溶液的比例)，超声时间65min，温度35℃，功率210w，获得提取液；
(3)提取液利用离心机(型号200)，设置3000r/min、1000目滤袋离心过滤；
(4)冷冻干燥机(SCIENTZ-30F)，冷冻干燥条件：真空度20MPa，温度-40℃，时间为12h，藤茶提取液冻干，获得具有降脂护肝活性的藤茶提取提取物。每组处理设置3个重复。
(5)按照专利《一种藤茶中黄酮类化合物种类及含量的检测方法》(专利号：ZL201910739376.7)提供的检测方法检测藤茶提取物中主要黄酮类活性成分二氢杨梅素、杨梅苷、杨梅素的含量。
对比例1
和实施例1相比，只改变步骤(1)，过100目筛，获得藤茶样品粉碎的粒度≤150μm。
对比例2
和实施例1相比，只改变步骤(2)，超声时间50min。
对比例3
和实施例1相比，只改变步骤(2)，温度25℃。
对比例4
和实施例1相比，只改变步骤(2)，温度45℃。
对比例5
和实施例1相比，只改变步骤(2)，功率180w。
对比例6
和实施例1相比，只改变步骤(2)，功率220w。
对比例7
和实施例1相比，只改变步骤(3)，设置离心转速2500r/min。
对比例8
和实施例1相比，只改变步骤(3)，设置离心转速4500r/min。
对比例9
和实施例1相比，只改变步骤(4)，设置真空度10MPa。
对比例10
和实施例1相比，只改变步骤(4)，设置真空度40MPa。
对比例11
和实施例1相比，只改变步骤(4)，设置温度-30℃。
对比例12
和实施例1相比，只改变步骤(4)，设置时间为8h。
实施例6
对试验获得的活性成分提取物，采用如下公式I计算浸膏得率：
Figure BDA0003491663710000081
采用专利《一种藤茶中黄酮类化合物种类及含量的检测方法》(专利号：ZL201910739376.7)提供的检测方法检测主要黄酮活性成分的含量。按照如下公式II计算各种黄酮化合物的含量。
Figure BDA0003491663710000082
结果见表1。
表1藤茶提取物得率及主要黄酮活性成分含量
Figure BDA0003491663710000083
Figure BDA0003491663710000091
注：同一列不同小写字母表示数据具有显著性差异，以实施例数据为对比，带字母表示具有显著性差异，没有带，表示数据没有统计上的差异。
实施例1、2、3、4、5的藤茶提取物得率、主要黄酮类活性成分含量无显著性差异。与对比例1～12相比，本发明的方法可使实施例活性提取物的得率显著提升，主要黄酮类活性成分含量显著性升高。
实施例7
对实施例1～5以及对比例1～12制备获得的藤茶提取物进行动物实验，具体方法如下，运用SD大鼠高血脂模型，灌胃不同剂量(0.5g/kg大鼠体重、2.5g/kg大鼠体重)的藤茶提取物，灌胃等剂量洛伐他汀作为阳性对照组，设置高血脂空白对照和正常饲料空白对照。每4个疗程(30天)检测一次血脂指标，共检测3次。采用罗氏cobas8000测定实验组大鼠血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)等4项血脂指标含量；解剖摘取肝脏、石蜡包埋、ORO染色、冰冻切片、全景扫描观察组织状态，判断工艺提取的活性成分的降脂效果。结果见表2。
表2藤茶提取物得率及对SD高血脂模型大鼠的血脂指标影响
Figure BDA0003491663710000101
注：同一列不同小写字母表示数据具有显著性差异
实施例1、2、3、4、5的主要血脂指标总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白无显著性差异。本发明的方法可使实施例的降脂活性也显著优于其它实施例。同时ORO染色结果显示，实施例大鼠肝细胞核呈蓝色，肝细胞内未出现红色脂滴，SD大鼠肝脏中积累不明显，肝细胞损失不明显(见图1)，说明该提取物能减少脂肪在肝脏细胞中积累，降低对肝细胞的损伤。本发明提供的的方法操作简便，成本低，重复性好，可用于生产。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种藤茶提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)将藤茶粉和水混合，在超声作用下提取，得到藤茶粗提液；
2)将所述藤茶粗提液经滤袋过滤，得到纯化的藤茶提取液；
3)将所述纯化的藤茶提取液进行冷冻干燥，得到藤茶提取物。
2.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，步骤1)中所述藤茶粉和水质量比为1：(40～55)。
3.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，步骤1)中所述提取的温度为30～40℃。
4.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，步骤1)中所述超声处理的功率为190～210W；
所述超声处理的时间为60～70min。
5.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，步骤1)中所述藤茶粉的粒径≤75μm。
6.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，步骤2)中所述滤袋过滤时，滤袋的孔径为1000目；
所述述滤袋过滤时，转速为3000～4000rpm。
7.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，步骤3)中所述冷冻干燥的真空度为20～30MPa，所述冷冻干燥的温度为-35～-40℃，所述冷冻干燥的时间为10～12h。
8.权利要求1～7任意一项所述制备方法得到的藤茶提取物，其特征在于，活性成分包括以下以下含量的组分：二氢杨梅素≥280mg/g，杨梅苷≥10mg/g和杨梅素≥30mg/g。
9.权利要求8所述藤茶提取物在制备降脂护肝的药品中的应用。
10.权利要求8所述藤茶提取物在制备降脂护肝的食品中的应用。
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