CN110184203A - 一种高核酸面包酵母及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种高核酸面包酵母及其制备方法，该高核酸面包酵母相对于面包酵母菌体的100%重量，含有21%重量以上的核酸，其中RNA的重量大于13%。本发明通过对酵母进行活化后培养，利用带有高浓度葡萄糖的液体培养基促进酵母的发酵生长增殖活动，从而促进酵母菌细胞内RNA物质的表达，有利于提高初代酵母菌细胞整体的核酸含量，再通过低速离心分离，将含有更多核酸成分且单细胞重量较大的酵母菌进行分离，进一步提高高核酸酵母的纯度，使得后续扩大培养后获得的子代酵母细胞内均含有较高的核酸含量，从而从整体上提高所生产的酵母菌的核酸含量。
Description
技术领域
本发明属于面包酵母技术领域，具体涉及一种高核酸面包酵母及其制备方法。
背景技术
酵母核酸是从天然酵母中提取的核糖核酸，目前主要应用于医药、保健食品以及婴幼儿食品中，随着现代生物提取技术的发展，酵母核酸应用趋于广泛，尤其在抗癌新药、保健品及婴幼儿食品等方。在利用酵母生产核酸时，现有的做法通常直接利用初代酵母进行扩大培养，再对酵母细胞进行处理，从而获得酵母核酸。由于初代酵母体内核酸含量存在高低差异，从而造成由初代酵母增殖获得的子代酵母核酸含量存在较大差异，一定程度上影响高核酸酵母的含量，最终造成酵母核酸产量达不到预期效果。
发明内容
本发明的目的在于提供一种高核酸面包酵母及其制备方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种高核酸面包酵母，相对于面包酵母菌体的100%重量，含有21%重量以上的核酸，其中RNA的重量大于13%。
一种高核酸面包酵母的制备方法，具体按照如下操作步骤：
S1：活化酵母菌体，将冷冻酵母菌种置于无菌室内，在室温下自然溶解，之后，将酵母菌液转移至液体培养基中，于34～38℃恒温培养箱进行活化培养18～28小时；
S2：筛选优势菌体，使用低速离心机，将酵母菌液分装置50ml试管中，以200～300r/min转速低速离心5分钟，收集试管底部聚集的菌体，并将菌体置于液体培养基中轻轻摇匀，继续培养18～28小时后重复一次低速离心，获得优势酵母菌体，将优势酵母菌体置于液体培养基中增殖培养26～32小时；
S3：扩大培养，将S2中的优势菌体培养液分别接种至培养罐中进行恒温培养，培养时间为20～24小时，培养罐内培养液的PH为5.5～6.5，培养罐内液体温度保持在30～34℃，氧气含量20～25%。
优选的，步骤S1中液体培养基中葡萄糖浓度为15～20%。
优选的，步骤S3中优势菌体培养液的接入量为培养罐内液体总体积的5～10%。
优选的，步骤S3中培养罐内培养液还包括中量元素与微量元素、维生素，且中量元素与微量元素合计为培养液质量的2～4%，维生素为培养液质量的1～3%。
本发明的技术效果和优点：
本发明通过对酵母进行活化后培养，利用带有高浓度葡萄糖的液体培养基促进酵母的发酵生长增殖活动，从而促进酵母菌细胞内RNA物质的表达，有利于提高初代酵母菌细胞整体的核酸含量，再通过低速离心分离，将含有更多核酸成分且单细胞重量较大的酵母菌进行分离，进一步提高高核酸酵母的纯度，使得后续扩大培养后获得的子代酵母细胞内均含有较高的核酸含量，从而从整体上提高所生产的酵母菌的核酸含量。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
一种高核酸面包酵母，相对于面包酵母菌体的100%重量，含有21%重量以上的核酸，其中RNA的重量大于13%。
一种高核酸面包酵母的制备方法，具体按照如下操作步骤：
S1：活化酵母菌体，将冷冻酵母菌种置于无菌室内，在室温下自然溶解，之后，将酵母菌液转移至液体培养基中，于34～38℃恒温培养箱进行活化培养18小时；
S2：筛选优势菌体，使用低速离心机，将酵母菌液分装置50ml试管中，以200r/min转速低速离心5分钟，收集试管底部聚集的菌体，并将菌体置于液体培养基中轻轻摇匀，继续培养18小时后重复一次低速离心，获得优势酵母菌体，将优势酵母菌体置于液体培养基中增殖培养26小时；
S3：扩大培养，将S2中的优势菌体培养液分别接种至培养罐中进行恒温培养，培养时间为20小时，培养罐内培养液的PH为5.5，培养罐内液体温度保持在30℃，氧气含量20%。
步骤S1中液体培养基中葡萄糖浓度为15%。
步骤S3中优势菌体培养液的接入量为培养罐内液体总体积的5%。
步骤S3中培养罐内培养液还包括中量元素与微量元素、维生素，且中量元素与微量元素合计为培养液质量的2%，维生素为培养液质量的1%。
实施例2
一种高核酸面包酵母，相对于面包酵母菌体的100%重量，含有21%重量以上的核酸，其中RNA的重量大于13%。
一种高核酸面包酵母的制备方法，具体按照如下操作步骤：
S1：活化酵母菌体，将冷冻酵母菌种置于无菌室内，在室温下自然溶解，之后，将酵母菌液转移至液体培养基中，于36℃恒温培养箱进行活化培养24小时；
S2：筛选优势菌体，使用低速离心机，将酵母菌液分装置50ml试管中，以250r/min转速低速离心5分钟，收集试管底部聚集的菌体，并将菌体置于液体培养基中轻轻摇匀，继续培养24小时后重复一次低速离心，获得优势酵母菌体，将优势酵母菌体置于液体培养基中增殖培养30小时；
S3：扩大培养，将S2中的优势菌体培养液分别接种至培养罐中进行恒温培养，培养时间为22小时，培养罐内培养液的PH为6.0，培养罐内液体温度保持在32℃，氧气含量23%。
步骤S1中液体培养基中葡萄糖浓度为18%。
步骤S3中优势菌体培养液的接入量为培养罐内液体总体积的8%。
步骤S3中培养罐内培养液还包括中量元素与微量元素、维生素，且中量元素与微量元素合计为培养液质量的3%，维生素为培养液质量的2%。
实施例3
一种高核酸面包酵母，相对于面包酵母菌体的100%重量，含有21%重量以上的核酸，其中RNA的重量大于13%。
一种高核酸面包酵母的制备方法，具体按照如下操作步骤：
S1：活化酵母菌体，将冷冻酵母菌种置于无菌室内，在室温下自然溶解，之后，将酵母菌液转移至液体培养基中，于38℃恒温培养箱进行活化培养28小时；
S2：筛选优势菌体，使用低速离心机，将酵母菌液分装置50ml试管中，以300r/min转速低速离心5分钟，收集试管底部聚集的菌体，并将菌体置于液体培养基中轻轻摇匀，继续培养28小时后重复一次低速离心，获得优势酵母菌体，将优势酵母菌体置于液体培养基中增殖培养32小时；
S3：扩大培养，将S2中的优势菌体培养液分别接种至培养罐中进行恒温培养，培养时间为24小时，培养罐内培养液的PH为6.5，培养罐内液体温度保持在34℃，氧气含量25%。
步骤S1中液体培养基中葡萄糖浓度为20%。
步骤S3中优势菌体培养液的接入量为培养罐内液体总体积的10%。
步骤S3中培养罐内培养液还包括中量元素与微量元素、维生素，且中量元素与微量元素合计为培养液质量的4%，维生素为培养液质量的3%。
实施例1、2、3中所获得酵母细胞内核酸检测表
| 核酸含量（%） | RNA含量（%） | |
| 实施例1 | 21.8 | 13.4 |
| 实施例2 | 21.9 | 13.8 |
| 实施例3 | 21.5 | 13.6 |
本发明通过对酵母进行活化后培养，利用带有高浓度葡萄糖的液体培养基促进酵母的发酵生长增殖活动，从而促进酵母菌细胞内RNA物质的表达，有利于提高初代酵母菌细胞整体的核酸含量，再通过低速离心分离，将含有更多核酸成分且单细胞重量较大的酵母菌进行分离，进一步提高高核酸酵母的纯度，使得后续扩大培养后获得的子代酵母细胞内均含有较高的核酸含量，从而从整体上提高所生产的酵母菌的核酸含量。
最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换,凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (5)
1.一种高核酸面包酵母，其特征在于：相对于面包酵母菌体的100%重量，含有21%重量以上的核酸，其中RNA的重量大于13%。
2.一种高核酸面包酵母的制备方法，其特征在于：具体按照如下操作步骤：
S1：活化酵母菌体，将冷冻酵母菌种置于无菌室内，在室温下自然溶解，之后，将酵母菌液转移至液体培养基中，于34～38℃恒温培养箱进行活化培养18～28小时；
S2：筛选优势菌体，使用低速离心机，将酵母菌液分装置50ml试管中，以200～300r/min转速低速离心5分钟，收集试管底部聚集的菌体，并将菌体置于液体培养基中轻轻摇匀，继续培养18～28小时后重复一次低速离心，获得优势酵母菌体，将优势酵母菌体置于液体培养基中增殖培养26～32小时；
S3：扩大培养，将S2中的优势菌体培养液分别接种至培养罐中进行恒温培养，培养时间为20～24小时，培养罐内培养液的PH为5.5～6.5，培养罐内液体温度保持在30～34℃，氧气含量20～25%。
3.根据权利要求2所述的一种高核酸面包酵母的制备方法，其特征在于：步骤S1中液体培养基中葡萄糖浓度为15～20%。
4.根据权利要求2所述的一种高核酸面包酵母的制备方法，其特征在于：步骤S3中优势菌体培养液的接入量为培养罐内液体总体积的5～10%。
5.根据权利要求2所述的一种高核酸面包酵母的制备方法，其特征在于：步骤S3中培养罐内培养液还包括中量元素与微量元素、维生素，且中量元素与微量元素合计为培养液质量的2～4%，维生素为培养液质量的1～3%。
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| CN101928674A (zh) * | 2008-12-24 | 2010-12-29 | 大连珍奥生物技术股份有限公司 | 选育高核酸酵母、用高核酸酵母制备核糖核酸的方法 |
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