CN110151566A - 一种含猪皮胶原多肽的护肤冻干粉及其制备 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种含猪皮胶原多肽的护肤冻干粉及其制备。所述的制备方法包括：将猪皮干燥并粉碎后加入水中，煎煮1‑4h后，冷却至室温，得到猪皮水溶液；然后加入复合酶对所述猪皮水溶液中的蛋白质进行酶解，得到酶解液；将所述酶解液进行脱色处理，得到脱色酶解液，再将所述脱色酶解液依次经过膜过滤、浓缩得到猪皮胶原多肽；将所述的猪皮胶原多肽、表皮细胞生长因子和冻干保护剂溶于水中，将所得溶液进行冷冻干燥得到含猪皮胶原多肽的护肤冻干粉。本发明运用冷冻干燥技术实现护肤冻干粉在不添加防腐剂的情况下的长期有效保质，降低了护肤冻干粉的刺激性，扩大了使用范围。

Description

一种含猪皮胶原多肽的护肤冻干粉及其制备
技术领域
本发明涉及多肽护肤冻干粉技术领域，具体涉及一种含猪皮胶原多肽的护肤 冻干粉及其制备工艺。
背景技术
现代科技的飞速发展和广泛应用，给美容化妆品行业带来了全新的发展和机 遇，护肤品已经从化学美容、植物美容向生物美容与基因美容发展。活性生物多 肽具有安全稳定、易溶于水、易吸收等优点，同时具有抗氧化、抗衰老、清除自 由基等多种生理功能，不仅能够促进皮肤细胞的增殖，还可以为皮肤提供营养， 延缓皮肤老化，促进皮肤创伤修复，因此被广泛应用于护肤化妆品等领域。
猪皮中蛋白质含量高达33％，而其中胶原蛋白含量约为87.7％，具有很高的 利用价值。但长期以来，猪皮作为副产物除部分用于皮革、食品行业外，其营养 及经济价值未得到充分的利用和体现，这不仅浪费资源，还造成一定的环境污染。 因此，利用我国丰富的猪皮资源开发胶原蛋白抗氧化肽，并用于化妆品行业具有 重要的一样及广阔的市场前景。
发明内容
本发明目的是提供一种猪皮胶原多肽、含猪皮胶原多肽的护肤冻干粉及其制 备方法。
为了达到上述目的，本发明提供了一种含猪皮胶原多肽的护肤冻干粉的制备 方法，其特征在于，包括：
步骤1：将猪皮干燥并粉碎后加入水中，煎煮1-4h后，冷却至室温，得到猪 皮水溶液；
步骤2：调节所述猪皮水溶液的pH值至5-9范围内，然后加入复合酶对所 述猪皮水溶液中的蛋白质进行酶解，得到酶解液；
步骤3：将所述酶解液进行脱色处理，得到脱色酶解液，再将所述脱色酶解 液依次经过膜过滤、浓缩得到猪皮胶原多肽；
步骤4：将所述的猪皮胶原多肽、表皮细胞生长因子和冻干保护剂溶于水中， 将所得溶液进行冷冻干燥得到含猪皮胶原多肽的护肤冻干粉。
优选地，所述的冻干保护剂为甘露醇和甘氨酸。
优选地，所述的步骤1中水的质量为干燥猪皮粉质量的6-12倍。
优选地，所述的步骤2中的酶解的温度为40～60℃，时间为1-4h，酶解后进 行灭酶处理。
优选地，所述的脱色处理为：将所述酶解液过滤并除去残渣后，在所述酶解 液中加入活性炭并维持在40～80℃温度范围内10～60min。
优选地，所述的活性炭的添加量为干燥猪皮粉质量的1％～5％。
优选地，所述的复合酶包括重量比为5:1～1:5的木瓜蛋白酶和动物蛋白酶。
更优选地，所述的动物蛋白酶为碱性蛋白酶或中性蛋白酶。
优选地，所述的复合酶的添加量为干燥猪皮粉质量的0.2％～1.2％。
优选地，所述的步骤3中的膜为孔径为0.22μm的微孔滤膜。
优选地，所述的步骤4中的水为30℃～40℃。
优选地，所述的护肤冻干粉由以下质量比的原料组成：
优选地，所述的护肤冻干粉由以下质量比的原料组成：
优选地，所述的护肤冻干粉由以下质量比的原料组成：
优选地，所述的冷冻干燥包括：将所得的透明溶液进行常温无菌处理，加入 到冻干瓶中；将冻干瓶置于冻干箱内预冷，2-6h后物料温度达到-40℃，使冻干 瓶内的溶液完全处于冷冻的固态；再将冻干箱内的温度由-40℃升高至室温，同 时在升温的过程中进行干燥仓抽真空操作，进行冷冻干燥8～24h，使冻干瓶内的 蒸馏水由固态直接升华成气态。
优选地，每个冻干瓶中溶液的体积为0.5～5mL。
优选地，所述的干燥仓压力为5Pa。
本发明还提供了采用上述的方法所制备的含猪皮胶原多肽的护肤冻干粉。
本发明还提供了一种猪皮胶原多肽提取物的制备方法，其特征在于，包括：
步骤1：将猪皮干燥并粉碎后加入水中，煎煮1-4h后，冷却至室温，得到猪 皮水溶液；
步骤2：调节所述猪皮水溶液的pH值至5-9范围内，然后加入复合酶对所 述猪皮水溶液中的蛋白质进行酶解，得到酶解液；
步骤3：将所述酶解液进行脱色处理，得到脱色酶解液，再将所述脱色酶解 液依次经过膜过滤、浓缩得到猪皮胶原多肽。
根据上述冷冻干燥技术制备的护肤冻干粉，不需要添加任何防腐剂，常温下 长期有效保存了多肽的生物活性。
本发明通过水煎煮提取、酶解、活性炭脱色、微孔滤膜过滤、浓缩等步骤从 猪皮中获得猪皮活性多肽提取物。通过预冻、抽真空、升温等步骤将富含胶原多 肽的水溶液中的蒸馏水从固体直接升华为气态而制得富含胶原多肽的护肤冻干 粉。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
(1)本发明方法提取的猪皮胶原多肽纯度高，且方法简单、操作方便，无 环境污染利于产业化生产。
(2)本发明以猪皮为原料，成本低廉，对猪肉副产物进行了再利用，提高 了猪的生物利用价值。
(3)本发明冻干过程中添加了冻干保护剂，为多肽样品提供了良好的冻干 骨架，使样品在冻干时受到的损伤最小，最大限度的保存了样品的生物活性。
(4)本发明所制得的富含猪皮胶原多肽的冻干粉具有很好的美容、抗衰老 作用，可用于化妆品、医药、保健品等领域。
(5)本发明所制得的富含猪皮胶原多肽的冻干粉外观良好，复水性良好， 涂抹于皮肤后吸收快，无残留固体。
(6)本发明能够有效提取猪皮中的多肽物质，由猪皮多肽制得的护肤冻干 粉富含活性多肽，具有很好的抗衰老、美容、创伤修复的功效，运用冷冻干燥技 术实现护肤冻干粉在不添加防腐剂的情况下的长期有效保质，降低了护肤冻干粉 的刺激性，扩大了使用范围。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说 明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容 之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于 本申请所附权利要求书所限定的范围。
以下实施例中所用到的各原料均为市售产品。
以下实施例中所用的木瓜蛋白酶购自上海麦克林生化科技有限公司，货 号：P815680-5g，活性：≥3units/mg；碱性蛋白酶购自上海麦克林生化科技有 限公司，货号：P824138-500mg，活性：2units/mg；中性蛋白酶购自上海麦克林 生化科技有限公司，货号：D832687-250g，活性：50units/mg。
以下实施例中所用的表皮细胞生长因子购自武汉科隆生物医学有限公司， 货号：KLPR2101。
实施例1
一种含猪皮胶原多肽的护肤冻干粉的制备方法，具体步骤为：
(1)将猪皮干燥并粉碎至40目，称取猪皮粉末100g，并将称取的猪皮粉 末加入到蒸馏水中，边搅拌边煎煮1h后，冷却至室温，过滤得到猪皮水溶液； 蒸馏水的质量为干燥猪皮粉末质量的6倍。
(2)用冰醋酸和0.1mol/L的NaOH溶液调节所述猪皮水溶液的pH值至5， 然后加入复合酶对所述猪皮水溶液中的蛋白质进行40℃酶解1h，再进行灭酶处 理，得到酶解液；复合酶包括重量比为1:1的木瓜蛋白酶和动物蛋白酶，所述动 物蛋白酶购自广西南宁庞博生物技术有限公司，酶活力≥200units/mg。复合酶 添加量为干燥猪皮粉末质量的0.2％。
(3)将所述酶解液进行脱色处理：将所述酶解液过滤并除去残渣后，在所述 酶解液中加入活性炭并维持在40℃10min，得到脱色酶解液，活性炭的添加量 为干燥猪皮粉末质量的1％。再将所述脱色酶解液依次经过孔径为0.22μm的微 孔滤膜过滤、浓缩得到猪皮胶原多肽，胶原多肽分子量分布在3～20KDa之间， 得到的猪皮胶原多肽的重量为41g，提取率为41％。猪皮经酶解后得到的胶原多 肽富含甘氨酸和脯氨酸，此类结构具有优良的抗氧化性，可用于制备化妆品用护 肤冻干粉。
(4)按以下质量比称取各原料：
在无菌操作间内，按照质量比将猪皮胶原多肽、甘露醇、甘氨酸、表皮细胞 生长因子溶解于30℃蒸馏水中得到透明溶液，取1.2mL透明溶液分装至2mL冻 干瓶中；
将所述灌装好样品的冻干瓶置于冻干箱内预冷，4h后物料温度达到-40℃， 使冻干瓶内的溶液完全处于冷冻的固态；
再将冻干箱内的温度由-40℃升高至室温，同时在升温的过程中进行干燥仓 抽真空操作，干燥仓压力为5Pa，进行冷冻干燥20h，使冻干瓶内的蒸馏水由固 态直接升华成气态，冻干完成后，将所得含猪皮胶原多肽的护肤冻干粉从冻干箱 中取出密封的冻干瓶进行常温保存。根据上述冷冻干燥技术制备的护肤冻干粉， 不需要添加任何防腐剂，常温下长期有效保存了多肽的生物活性。采用倍比稀释 法测定多肽溶液的最小抑菌浓度(MIC)以及猪皮胶原多肽冻干粉的最小抑菌浓 度。按质量比配置多肽溶液，编号为1号，将多肽冻干粉按冻干前体积重新溶解 为溶液，编号为2号。菌种为金黄色葡萄球菌和大肠杆菌，菌液浓度为1× 105CFU/mL。猪皮胶原多肽冻干前后抑菌效果如下表所示，多肽溶液冻干前后的 最小抑菌浓度变化很小，抑菌效果良好。
编号 菌种 MIC(mg/mL)
1 金黄色葡萄球菌 12.5
2 金黄色葡萄球菌 12.5
1 大肠杆菌 25
2 大肠杆菌 25
注：编号1为冻干前含猪皮胶原多肽溶液，编号2为冻干后含猪皮胶原多肽冻干粉。
实施例2
一种含猪皮胶原多肽的护肤冻干粉的制备方法，具体步骤为：
(1)将猪皮干燥并粉碎至40目，称取猪皮粉末100g，并将称取的猪皮粉 末加入到蒸馏水中，边搅拌边煎煮1h后，冷却至室温，过滤得到猪皮水溶液； 蒸馏水的质量为干燥猪皮粉末质量的6倍。
(2)用冰醋酸和0.1mol/L的NaOH溶液调节所述猪皮水溶液的pH值至6， 然后加入复合酶对所述猪皮水溶液中的蛋白质进行40℃酶解1h，再进行灭酶处 理，得到酶解液；复合酶包括重量比为2:1的木瓜蛋白酶和动物蛋白酶，所述动 物蛋白酶购自广西南宁庞博生物技术有限公司，酶活力≥200units/mg。复合酶 添加量为干燥猪皮粉末质量的0.2％。
(3)将所述酶解液进行脱色处理：将所述酶解液过滤并除去残渣后，在所 述酶解液中加入活性炭并维持在40℃10min，得到脱色酶解液，活性炭的添加 量为干燥猪皮粉末质量的1％。再将所述脱色酶解液依次经过孔径为0.22μm的 微孔滤膜过滤、浓缩得到猪皮胶原多肽，胶原多肽分子量分布在3～20KDa之间； 得到的猪皮胶原多肽的重量为31g，提取率为31％。猪皮经酶解后得到的胶原多 肽富含甘氨酸和脯氨酸，此类结构具有优良的抗氧化性，可用于制备化妆品用护 肤冻干粉。
(4)按以下质量比称取各原料：
在无菌操作间内，按照质量比将猪皮胶原多肽、甘露醇、甘氨酸、表皮细胞 生长因子溶解于30℃蒸馏水中得到透明溶液，取1.2mL透明溶液分装至2mL冻 干瓶中；
将所述灌装好样品的冻干瓶置于冻干箱内预冷，4h后物料温度达到-40℃， 使冻干瓶内的溶液完全处于冷冻的固态；
再将冻干箱内的温度由-40℃升高至室温，同时在升温的过程中进行干燥仓 抽真空操作，干燥仓压力为5Pa，进行冷冻干燥20h，使冻干瓶内的蒸馏水由固 态直接升华成气态，冻干完成后，将所得含猪皮胶原多肽的护肤冻干粉从冻干箱 中取出密封的冻干瓶进行常温保存。
根据上述冷冻干燥技术制备的护肤冻干粉，不需要添加任何防腐剂，常温下 长期有效保存了多肽的生物活性。采用倍比稀释法测定多肽溶液的最小抑菌浓度 (MIC)以及猪皮胶原多肽冻干粉的最小抑菌浓度。按质量比配置多肽溶液，编 号为1号，将多肽冻干粉按冻干前体积重新溶解为溶液，编号为2号。菌种为金 黄色葡萄球菌和大肠杆菌，菌液浓度为1×105CFU/mL。猪皮胶原多肽冻干前后 抑菌效果如下图所示，多肽溶液冻干前后的最小抑菌浓度变化很小，抑菌效果良 好。
编号 菌种 MIC(mg/mL)
1 金黄色葡萄球菌 12
2 金黄色葡萄球菌 12
1 大肠杆菌 24
2 大肠杆菌 24
注：编号1为冻干前含猪皮胶原多肽溶液，编号2为冻干后含猪皮胶原多肽冻干粉。
实施例3
一种含猪皮胶原多肽的护肤冻干粉的制备方法，具体步骤为：
(1)将猪皮干燥并粉碎至40目，称取猪皮粉末100g，并将称取的猪皮粉 末加入到蒸馏水中，边搅拌边煎煮1h后，冷却至室温，过滤得到猪皮水溶液； 蒸馏水的质量为干燥猪皮粉末质量的6倍。
(2)用冰醋酸和0.1mol/L的NaOH溶液调节所述猪皮水溶液的pH值至7， 然后加入复合酶对所述猪皮水溶液中的蛋白质进行40℃酶解1h，再进行灭酶处 理，得到酶解液；复合酶包括重量比为3:1的木瓜蛋白酶和动物蛋白酶，所述动 物蛋白酶购自广西南宁庞博生物技术有限公司，酶活力≥200units/mg。复合酶 添加量为干燥猪皮粉末质量的0.2％。
(3)将所述酶解液进行脱色处理：将所述酶解液过滤并除去残渣后，在所 述酶解液中加入活性炭并维持在40℃10min，得到脱色酶解液，活性炭的添加 量为干燥猪皮粉末质量的1％。再将所述脱色酶解液依次经过孔径为0.22μm的 微孔滤膜过滤、浓缩得到猪皮胶原多肽，胶原多肽分子量分布在3～20KDa之间； 得到的猪皮胶原多肽的重量为44g，提取率为44％。猪皮经酶解后得到的胶原多 肽富含甘氨酸和脯氨酸，此类结构具有优良的抗氧化性，可用于制备化妆品用护 肤冻干粉。
(4)按以下质量比称取各原料：
在无菌操作间内，按照质量比将猪皮胶原多肽、甘露醇、甘氨酸、表皮细胞 生长因子溶解于30℃蒸馏水中得到透明溶液，取1.2mL透明溶液分装至2mL冻 干瓶中；
将所述灌装好样品的冻干瓶置于冻干箱内预冷，4h后物料温度达到-40℃， 使冻干瓶内的溶液完全处于冷冻的固态；
再将冻干箱内的温度由-40℃升高至室温，同时在升温的过程中进行干燥仓 抽真空操作，干燥仓压力为5Pa，进行冷冻干燥20h，使冻干瓶内的蒸馏水由固 态直接升华成气态，冻干完成后，将所得含猪皮胶原多肽的护肤冻干粉从冻干箱 中取出密封的冻干瓶进行常温保存。
根据上述冷冻干燥技术制备的护肤冻干粉，不需要添加任何防腐剂，常温下 长期有效保存了多肽的生物活性。采用倍比稀释法测定多肽溶液的最小抑菌浓度 (MIC)以及猪皮胶原多肽冻干粉的最小抑菌浓度。按质量比配置多肽溶液，编 号为1号，将多肽冻干粉按冻干前体积重新溶解为溶液，编号为2号。菌种为金 黄色葡萄球菌和大肠杆菌，菌液浓度为1×105CFU/mL。猪皮胶原多肽冻干前后 抑菌效果如下图所示，多肽溶液冻干前后的最小抑菌浓度变化很小，抑菌效果良 好。
编号 菌种 MIC(mg/mL)
1 金黄色葡萄球菌 11.5
2 金黄色葡萄球菌 11.5
1 大肠杆菌 24
2 大肠杆菌 24
注：编号1为冻干前含猪皮胶原多肽溶液，编号2为冻干后含猪皮胶原多肽冻干粉。
实施例4
一种含猪皮胶原多肽的护肤冻干粉的制备方法，具体步骤为：
(1)将猪皮干燥并粉碎至40目，称取猪皮粉末100g，并将称取的猪皮粉 末加入到蒸馏水中，边搅拌边煎煮1h后，冷却至室温，过滤得到猪皮水溶液； 蒸馏水的质量为干燥猪皮粉末质量的6倍。
(2)用冰醋酸和0.1mol/L的NaOH溶液调节所述猪皮水溶液的pH值至8， 然后加入复合酶对所述猪皮水溶液中的蛋白质进行40℃酶解1h，再进行灭酶处 理，得到酶解液；复合酶包括重量比为1:2的木瓜蛋白酶和动物蛋白酶，所述动 物蛋白酶购自广西南宁庞博生物技术有限公司，酶活力≥200units/mg。复合酶 添加量为干燥猪皮粉末质量的0.2％。
(3)将所述酶解液进行脱色处理：将所述酶解液过滤并除去残渣后，在所 述酶解液中加入活性炭并维持在40℃10min，得到脱色酶解液，活性炭的添加 量为干燥猪皮粉末质量的1％。再将所述脱色酶解液依次经过孔径为0.22μm的 微孔滤膜过滤、浓缩得到猪皮胶原多肽，胶原多肽分子量分布在3～20KDa之间； 得到的猪皮胶原多肽的重量为35g，提取率为35％。猪皮经酶解后得到的胶原多 肽富含甘氨酸和脯氨酸，此类结构具有优良的抗氧化性，可用于制备化妆品用护 肤冻干粉。
(4)按以下质量比称取各原料：
在无菌操作间内，按照质量比将猪皮胶原多肽、甘露醇、甘氨酸、表皮细胞 生长因子溶解于30℃蒸馏水中得到透明溶液，取1.2mL透明溶液分装至2mL冻 干瓶中；
将所述灌装好样品的冻干瓶置于冻干箱内预冷，4h后物料温度达到-40℃， 使冻干瓶内的溶液完全处于冷冻的固态；
再将冻干箱内的温度由-40℃升高至室温，同时在升温的过程中进行干燥仓 抽真空操作，干燥仓压力为5Pa，进行冷冻干燥20h，使冻干瓶内的蒸馏水由固 态直接升华成气态，冻干完成后，将所得含猪皮胶原多肽的护肤冻干粉从冻干箱 中取出密封的冻干瓶进行常温保存。
根据上述冷冻干燥技术制备的护肤冻干粉，不需要添加任何防腐剂，常温下 长期有效保存了多肽的生物活性。采用倍比稀释法测定多肽溶液的最小抑菌浓度 (MIC)以及猪皮胶原多肽冻干粉的最小抑菌浓度。按质量比配置多肽溶液，编 号为1号，将多肽冻干粉按冻干前体积重新溶解为溶液，编号为2号。菌种为金 黄色葡萄球菌和大肠杆菌，菌液浓度为1×105CFU/mL。猪皮胶原多肽冻干前后 抑菌效果如下图所示，多肽溶液冻干前后的最小抑菌浓度变化很小，抑菌效果良 好。
编号 菌种 MIC(mg/mL)
1 金黄色葡萄球菌 12.5
2 金黄色葡萄球菌 12.5
1 大肠杆菌 24
2 大肠杆菌 24
注：编号1为冻干前含猪皮胶原多肽溶液，编号2为冻干后含猪皮胶原多肽冻干粉。
实施例5
一种含猪皮胶原多肽的护肤冻干粉的制备方法，具体步骤为：
(1)将猪皮干燥并粉碎至40目，称取猪皮粉末100g，并将称取的猪皮粉 末加入到蒸馏水中，边搅拌边煎煮1h后，冷却至室温，过滤得到猪皮水溶液； 蒸馏水的质量为干燥猪皮粉末质量的6倍。
(2)用冰醋酸和0.1mol/L的NaOH溶液调节所述猪皮水溶液的pH值至9， 然后加入复合酶对所述猪皮水溶液中的蛋白质进行40℃酶解1h，再进行灭酶处 理，得到酶解液；复合酶包括重量比为1:3的木瓜蛋白酶和动物蛋白酶，所述动 物蛋白酶购自广西南宁庞博生物技术有限公司，酶活力≥200units/mg。复合酶 添加量为干燥猪皮粉末质量的0.2％。
(3)将所述酶解液进行脱色处理：将所述酶解液过滤并除去残渣后，在所 述酶解液中加入活性炭并维持在40℃10min，得到脱色酶解液，活性炭的添加 量为干燥猪皮粉末质量的1％。再将所述脱色酶解液依次经过孔径为0.22μm的 微孔滤膜过滤、浓缩得到猪皮胶原多肽，胶原多肽分子量分布在3～20KDa之间； 得到的猪皮胶原多肽的重量为29g，提取率为29％。猪皮经酶解后得到的胶原多 肽富含甘氨酸和脯氨酸，此类结构具有优良的抗氧化性，可用于制备化妆品用护 肤冻干粉。
(4)按以下质量比称取各原料：
在无菌操作间内，按照质量比将猪皮胶原多肽、甘露醇、甘氨酸、表皮细胞 生长因子溶解于30℃蒸馏水中得到透明溶液，取1.2mL透明溶液分装至2mL冻 干瓶中；
将所述灌装好样品的冻干瓶置于冻干箱内预冷，4h后物料温度达到-40℃， 使冻干瓶内的溶液完全处于冷冻的固态；
再将冻干箱内的温度由-40℃升高至室温，同时在升温的过程中进行干燥仓 抽真空操作，干燥仓压力为5Pa，进行冷冻干燥20h，使冻干瓶内的蒸馏水由固 态直接升华成气态，冻干完成后，将所得含猪皮胶原多肽的护肤冻干粉从冻干箱 中取出密封的冻干瓶进行常温保存。
根据上述冷冻干燥技术制备的护肤冻干粉，不需要添加任何防腐剂，常温下 长期有效保存了多肽的生物活性。采用倍比稀释法测定多肽溶液的最小抑菌浓度 (MIC)以及猪皮胶原多肽冻干粉的最小抑菌浓度。按质量比配置多肽溶液，编 号为1号，将多肽冻干粉按冻干前体积重新溶解为溶液，编号为2号。菌种为金 黄色葡萄球菌和大肠杆菌，菌液浓度为1×105CFU/mL。猪皮胶原多肽冻干前后 抑菌效果如下图所示，多肽溶液冻干前后的最小抑菌浓度变化很小，抑菌效果良 好。
编号 菌种 MIC(mg/mL)
1 金黄色葡萄球菌 12
2 金黄色葡萄球菌 12
1 大肠杆菌 25
2 大肠杆菌 25
注：编号1为冻干前含猪皮胶原多肽溶液，编号2为冻干后含猪皮胶原多肽冻干粉。

Claims (10)

1.一种含猪皮胶原多肽的护肤冻干粉的制备方法，其特征在于，包括：
步骤1：将猪皮干燥并粉碎后加入水中，煎煮1-4h后，冷却至室温，得到猪皮水溶液；
步骤2：调节所述猪皮水溶液的pH值至5-9范围内，然后加入复合酶对所述猪皮水溶液中的蛋白质进行酶解，得到酶解液；
步骤3：将所述酶解液进行脱色处理，得到脱色酶解液，再将所述脱色酶解液依次经过膜过滤、浓缩得到猪皮胶原多肽；
步骤4：将所述的猪皮胶原多肽、表皮细胞生长因子和冻干保护剂溶于水中，将所得溶液进行冷冻干燥得到含猪皮胶原多肽的护肤冻干粉。
2.如权利要求1所述的含猪皮胶原多肽的护肤冻干粉的制备方法，其特征在于，所述的步骤2中的酶解的温度为40～60℃，时间为1-4h，酶解后进行灭酶处理。
3.如权利要求1所述的含猪皮胶原多肽的护肤冻干粉的制备方法，其特征在于，所述的脱色处理为：将所述酶解液过滤并除去残渣后，在所述酶解液中加入活性炭并维持在40～80℃温度范围内10～60min。
4.如权利要求1所述的含猪皮胶原多肽的护肤冻干粉的制备方法，其特征在于，所述的活性炭的添加量为干燥猪皮粉质量的1％～5％。
5.如权利要求1所述的含猪皮胶原多肽的护肤冻干粉的制备方法，其特征在于，所述的复合酶包括重量比为5:1～1:5的木瓜蛋白酶和动物蛋白酶。
6.如权利要求1所述的含猪皮胶原多肽的护肤冻干粉的制备方法，其特征在于，所述的复合酶的添加量为干燥猪皮粉质量的0.2％～1.2％。
7.如权利要求1所述的含猪皮胶原多肽的护肤冻干粉的制备方法，其特征在于，所述的护肤冻干粉由以下质量比的原料组成：
8.如权利要求1所述的含猪皮胶原多肽的护肤冻干粉的制备方法，其特征在于，所述的冷冻干燥包括：将所得的透明溶液进行常温无菌处理，加入到冻干瓶中；将冻干瓶置于冻干箱内预冷，2-6h后物料温度达到-40℃，使冻干瓶内的溶液完全处于冷冻的固态；再将冻干箱内的温度由-40℃升高至室温，同时在升温的过程中进行干燥仓抽真空操作，进行冷冻干燥8～24h，使冻干瓶内的蒸馏水由固态直接升华成气态。
9.权利要求1-8中任一项所述的制备方法所制备的含猪皮胶原多肽的护肤冻干粉。
10.一种猪皮胶原多肽提取物的制备方法，其特征在于，包括：
步骤1：将猪皮干燥并粉碎后加入水中，煎煮1-4h后，冷却至室温，得到猪皮水溶液；
步骤2：调节所述猪皮水溶液的pH值至5-9范围内，然后加入复合酶对所述猪皮水溶液中的蛋白质进行酶解，得到酶解液；
步骤3：将所述酶解液进行脱色处理，得到脱色酶解液，再将所述脱色酶解液依次经过膜过滤、浓缩得到猪皮胶原多肽。
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