CN103266156A - 利用分步酶解技术制备鹿血蛋白肽的方法 - Google Patents
利用分步酶解技术制备鹿血蛋白肽的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103266156A CN103266156A CN2013101640689A CN201310164068A CN103266156A CN 103266156 A CN103266156 A CN 103266156A CN 2013101640689 A CN2013101640689 A CN 2013101640689A CN 201310164068 A CN201310164068 A CN 201310164068A CN 103266156 A CN103266156 A CN 103266156A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- deer
- haemproteins
- substep
- utilizing
- prepare
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
利用分步酶解技术制备鹿血蛋白肽的方法,属于食品生物化学领域。本发明按照以下步骤利用分步酶解技术制备鹿血蛋白肽:(1)先在称量好的鹿血粉中,按照一定的比例加入蒸馏水,放100℃的水浴锅中10min,蛋白变性;(2)将(1)中的溶液用中性蛋白酶处理,酶灭活;(3)将(2)中的溶液用木瓜蛋白酶水解处理;(4)水解液离心,收集上清液,喷雾干燥。实验证明,经分布法酶解的鹿血蛋白肽对·OH的清除能力提高,DPPH自由基清除能力增强。
Description
技术领域
本发明属于食品生物化学领域,具体涉及一种应用两种酶分步酶解制备鹿血蛋白肽的方法。
背景技术
多肽和蛋白质的基本组成单元都是氨基酸,从氨基酸营养的角度来分析,两者没有区别。但是多肽的相对分子质量比蛋白质小很多,并具有一些蛋白质所没有的生理调节功能。由于营养、消化、疾病等原因,或处于一些特殊环境下时,为保持良好状态,提高机体应变能力,就有必要对人体补充外源性的生物活性肽。相对于结构复杂的蛋白质大分子,生物活性肽相对分子质量小,结构简单,能够以完整的形式被机体吸收,在微量或低浓度的情况下即可发挥生物调节作用。因此利用降解技术将蛋白质中的肽释放出来,可提高蛋白利用率,使人体能快速补充营养,补充能量,快速合成人体千万种蛋白质,发挥多种生理活性作用对不同来源的蛋白降解获得。
多年来我国对于鹿血资源的利用仅限于对原血液的利用和加工,其中大部分都是以鹿血酒的形式存在的。因此,我国鹿血开发的产品比较单一,深度开发和利用不足。我国从上世纪七、八十年代开始对畜禽血液的利用进行研究,积累了血液开发的技术和经验。在欧洲、日本等发达国家,猪血的利用率大约在50%左右,他们主要利用酶解和分离技术开发肽类试剂、肽类药物以及功能食品和食品添加剂。因此,利用酶技术和生物技术以及现代分离技术对鹿血蛋白进一步开发和利用,提高产品的附加值,开发具有功能性的活性肽,对促进我国鹿血资源的进一步开发和利用具有重要的理论和实践指导意义。
发明内容
本发明的目的是提供利用分步酶解技术制备鹿血蛋白肽的方法,利用中性蛋白酶和木瓜蛋白酶水解鹿血蛋白,既提高抗氧化肽免疫活性,又增强DPPH自由基清除能力。
利用分步酶解技术制备鹿血蛋白肽的方法,其特征在于所述方法步骤如下:
(1)先在称量好的鹿血粉中,按照一定的比例加入蒸馏水,配成底物浓度为4~6%(w/w)的溶液,放100℃的水浴锅中10min,蛋白变性;
(2)然后加入到酶反应器,调整温度为40~60℃,用0.1mol/lNaOH溶液调整pH=7~8;然后加入中性蛋白酶,酶添加量为(E/S)4~6,反应过程中不断搅拌并用NaOH维持pH恒定,水解2~4h完毕,90℃水浴灭酶10min,迅速冷却;
(3)调整温度为30~50℃,用0.1mol/lHCl溶液调整pH=5~7,木瓜蛋白酶酶添加量(E/S)6~10%,水解1~2h完毕,反应结束后,灭酶冷却;
(4)水解液3000~5000r/min离心5~15min,收集上清液,喷雾干燥,得到产品。
本发明的对于使用单一一种酶进行酶解所得到的鹿血蛋白肽的相比,所得鹿血蛋白肽抗对·OH的清除能力更强,DPPH自由基清除能力更高。
具体实施方式
具体实施方式一:本实施方式按照下述方法制备鹿血蛋白肽
(1)、将鹿血粉与蒸馏水调成一定浓度的溶液。
(2)将步骤(1)鹿血溶液用中性蛋白酶酶解处理,酶灭活;
(3)、将步骤(2)中的鹿血蛋白溶液用木瓜蛋白酶酶解处理,酶灭活;
(4)、将步骤(3)中的鹿血蛋白水解液离心,收集上清液。
在本实施方式中,步骤(1)中所述的鹿血溶液的浓度为4~6%(w/w),优选为5%(w/w);步骤(2)中所述的酶处理条件为:pH值7~8,水浴温度40~60℃,加入鹿血溶液6~10%的中性蛋白酶,反应时间2~4h;更优选的,pH值7.5,水浴温度55℃,中性蛋白酶添加量5%,反应时间4h。在本实施方式中,步骤(3)所述的酶处理条件为:pH值5~7,水浴温度30~50℃,加入鹿血溶液6~10%木瓜蛋白酶,反应时间1~2h;更优选的,pH值6.8,水浴温度45℃,木瓜蛋白酶添加量6.5%,反应时间1h。
在本实施方式中,步骤(4)中所述的水解液3000~5000r/min离心5~15min,收集上清液。更优选的,离心速度4000r/min,时间10min。
具体实施方式二:本实施方式与具体实施方式一不同的是,本实施方式按照下述方法制备鹿血蛋白肽:
(1)配制质量浓度5%的鹿血蛋白溶液,调节pH值为7.5,恒温水浴55℃,加入5%的中性蛋白酶,反应3h,90℃水浴使酶灭活,迅速冷却;
(2)、调节步骤(1)中的鹿血蛋白溶pH值为6.8,恒温水浴45℃,加入6.5%的木瓜蛋白酶,反应1h,90℃水浴使酶灭活,迅速冷却。
(3)将步骤(2)中的鹿血蛋白肽溶液,离心速度4000r/min,时间10min的条件下提取上清液,喷雾干燥,既得产品。
实验所得鹿血蛋白肽抗氧化肽对·OH的清除能力为52.2%,DPPH自由基清除能力为45.9%。
Claims (10)
1.利用分步酶解技术制备鹿血蛋白肽的方法,其特征在于所述方法步骤如下:
(1)先在称量好的鹿血粉中,按照一定的比例加入蒸馏水,配成底物浓度为4~6%(w/w)的溶液,放100℃的水浴锅中10min,蛋白变性;
(2)然后加入到酶反应器,调整温度为40~60℃,用0.1mol/lNaOH溶液调整pH=7~8;然后加入中性蛋白酶,酶添加量为(E/S)4~6,反应过程中不断搅拌并用NaOH维持pH恒定,水解2~4h完毕,90℃水浴灭酶10min,迅速冷却;
(3)调整温度为30~50℃,用0.1mol/l HCl溶液调整pH=5~7,木瓜蛋白酶酶添加量(E/S)6~10%,水解1~2h完毕,反应结束后,灭酶冷却;
(4)水解液3000~5000r/min离心5~15min,收集上清液,喷雾干燥,得到产品。
2.根据权利要求1所述的利用分步酶解技术制备鹿血蛋白肽的方法,其特征在于步骤(1)中所述的底物浓度为5%(w/w)。
3.根据权利要求1所述的利用分步酶解技术制备鹿血蛋白肽的方法,其特征在于步骤(2)中所述中性蛋白酶所需pH值为7.5。
4.根据权利要求1所述的利用分步酶解技术制备鹿血蛋白肽的方法,其特征在于步骤(2)中所述中性蛋白酶所需温度值55℃。
5.根据权利要求1所述的利用分步酶解技术制备鹿血蛋白肽的方法,其特征在于步骤(2)中所述中性蛋白酶水解时间为3h。
6.根据权利要求1所述的利用分步酶解技术制备鹿血蛋白肽的方法,其特征在于步骤(2)中所述中性蛋白酶的酶添加量(E/S)5%。
7.根据权利要求1所述的利用分步酶解技术制备鹿血蛋白肽的方法,其特征在于步骤(3)中所述木瓜蛋白酶所需pH值为6.8。
8.根据权利要求1所述的利用分步酶解技术制备鹿血蛋白肽的方法,其特征在于步骤(3)中所述木瓜蛋白酶所需温度值45℃。
9.根据权利要求1所述的利用分步酶解技术制备鹿血蛋白肽的方法,其特征在于步骤(3)中所述木瓜蛋白酶蛋白酶水解时间为1h;木瓜蛋白酶的酶添加量(E/S)6.5%。
10.根据权利要求1所述的利用分步酶解技术制备鹿血蛋白肽的方法,其特征在于所述步骤(4)水解液4000r/min离心10min。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN2013101640689A CN103266156A (zh) | 2013-05-07 | 2013-05-07 | 利用分步酶解技术制备鹿血蛋白肽的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN2013101640689A CN103266156A (zh) | 2013-05-07 | 2013-05-07 | 利用分步酶解技术制备鹿血蛋白肽的方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN103266156A true CN103266156A (zh) | 2013-08-28 |
Family
ID=49009818
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN2013101640689A Pending CN103266156A (zh) | 2013-05-07 | 2013-05-07 | 利用分步酶解技术制备鹿血蛋白肽的方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN103266156A (zh) |
Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104611397A (zh) * | 2015-01-27 | 2015-05-13 | 张恒 | 一种鹿血肽提取方法 |
CN112516166A (zh) * | 2020-12-03 | 2021-03-19 | 青岛大学附属医院 | 一种鹿血浆蛋白肽粉冷冻干燥粉化方法 |
CN112522355A (zh) * | 2020-12-04 | 2021-03-19 | 吉林省东北亚生物科技有限公司 | 一种响应面法优化鹿血酶解肽工艺的方法及其应用 |
CN113475611A (zh) * | 2021-05-26 | 2021-10-08 | 南京同仁堂黄山精制药业有限公司 | 一种鹿血压片糖果的制备方法 |
CN113957112A (zh) * | 2021-10-20 | 2022-01-21 | 中国农业科学院特产研究所 | 一种鹿血肽的制备方法及鹿血肽 |
CN115466771A (zh) * | 2022-10-12 | 2022-12-13 | 长春工业大学 | 一种鹿血多肽螯合钙的制备方法及设备 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102199648A (zh) * | 2011-03-25 | 2011-09-28 | 伊通满族自治县吉云鹿业发展有限公司 | 两种酶依次水解鹿血蛋白获取活性肽的方法 |
-
2013
- 2013-05-07 CN CN2013101640689A patent/CN103266156A/zh active Pending
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102199648A (zh) * | 2011-03-25 | 2011-09-28 | 伊通满族自治县吉云鹿业发展有限公司 | 两种酶依次水解鹿血蛋白获取活性肽的方法 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
王帅: "鹿恤抗氧化肽水解条件工艺的优化", 《肉类研究》, no. 10, 31 October 2009 (2009-10-31), pages 29 - 5 * |
Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104611397A (zh) * | 2015-01-27 | 2015-05-13 | 张恒 | 一种鹿血肽提取方法 |
CN112516166A (zh) * | 2020-12-03 | 2021-03-19 | 青岛大学附属医院 | 一种鹿血浆蛋白肽粉冷冻干燥粉化方法 |
CN112522355A (zh) * | 2020-12-04 | 2021-03-19 | 吉林省东北亚生物科技有限公司 | 一种响应面法优化鹿血酶解肽工艺的方法及其应用 |
CN113475611A (zh) * | 2021-05-26 | 2021-10-08 | 南京同仁堂黄山精制药业有限公司 | 一种鹿血压片糖果的制备方法 |
CN113957112A (zh) * | 2021-10-20 | 2022-01-21 | 中国农业科学院特产研究所 | 一种鹿血肽的制备方法及鹿血肽 |
CN115466771A (zh) * | 2022-10-12 | 2022-12-13 | 长春工业大学 | 一种鹿血多肽螯合钙的制备方法及设备 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN103266156A (zh) | 利用分步酶解技术制备鹿血蛋白肽的方法 | |
CN101709319B (zh) | 一种鱼皮鱼鳞胶原蛋白肽的制备方法 | |
CN104710525B (zh) | 一种金枪鱼鱼骨胶原蛋白源锌螯合胶原肽及其制备方法和用途 | |
CN101856367B (zh) | 一种具有抗氧化活性的鸡骨泥酶解物的制备方法 | |
CN106282287B (zh) | 一种提取白果生物活性多肽的方法 | |
CN104757252B (zh) | 一种具有抗氧化活性的灰树花蛋白酶解物的制备方法 | |
CN102630804A (zh) | 一种核桃肽粉的生产工艺 | |
CN103343153A (zh) | 一种酶水解制备林蛙油肽的方法和林蛙油肽 | |
CN102174073A (zh) | 一种牡蛎蛋白肽-锌螯合物及其制备方法 | |
CN101509030A (zh) | 复合酶法水解猪血生产血肽素 | |
CN104544454A (zh) | 一种海参肽营养粉及其制备方法 | |
CN110195090A (zh) | 海参肠卵多肽粉的制备方法及所得海参肠卵多肽粉 | |
CN103315126A (zh) | 一种低分子量鱼水解蛋白粉的制备方法 | |
CN102108374B (zh) | 以禽类胸软骨为原料加工ii型胶原蛋白混合物的方法 | |
CN105031606A (zh) | 一种鹿茸多肽混合物及其制备方法与应用 | |
CN105211655A (zh) | 一种液态鱼味猫粮风味剂的制备方法 | |
CN105111277A (zh) | 一种人参肽的制备方法 | |
CN101353687A (zh) | 具有血管紧张素转移酶抑制活性的蜂花粉肽及其制备方法 | |
CN103667409A (zh) | 一种缓解铅毒性的富硒米肽酶解制备方法 | |
CN106480145A (zh) | 一种小分子牡蛎多肽的提取方法 | |
CN103130869A (zh) | 超声波辅助黄粉虫幼虫蛋白酶解制备的降血压肽及制备方法 | |
CN103981245A (zh) | 利用螺旋藻泥制备高活性小肽的方法 | |
CN104945501B (zh) | 一种带鱼鱼骨铁螯合胶原肽 | |
CN103262939A (zh) | 一种源自鸡胚的抗氧化活性混合肽的制备方法 | |
CN103695513A (zh) | 一种提高低分子量大豆肽产量的方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20130828 |