CN110087689A - 液体人纤维蛋白原组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及包含10‑30g/I纤维蛋白原、10‑300mM精氨酸和10‑300mM谷氨酸的药物组合物。此外，该组合物的pH为6‑8。

Description

液体人纤维蛋白原组合物
本发明涉及人纤维蛋白原制剂，其在疗法中具有用途。
目前用包含纤维蛋白原的组合物治疗许多病理状况。例如，可以提及具有自发性或创伤后出血患者的低纤维素原血症、异常纤维蛋白原血症或先天性无纤维蛋白原血症，在获得性低纤维蛋白原血症的情况下治疗不受控制的严重出血的补充治疗等。
对于某些病理状况的治疗，使用储存稳定的和即用的含纤维蛋白原的组合物可证明是特别有利的。事实上，这种施用形式为从业者提供了更大的灵活性和更快的施用速度，从而改善了出血性患者的紧急治疗。为此目的，已经开发了适于快速构成的储存稳定的、冷冻干燥的含纤维蛋白原的组合物。然而，这种冻干组合物的重构需要几分钟。此外，必须谨慎地进行重构，以使冷冻干燥的材料完全溶解，保证产品的浓度，不形成泡沫，或不形成使组合物难以或不可能施用的浑浊或沉积物。因此，在医院内或院外紧急医学环境中使用这种冷冻干燥产品不是最佳的，其中每分钟计数用于出血治疗。
迄今为止，含纤维蛋白原的组合物特别是在液体稳定性方面并不完全令人满意。
在这种背景下，对易于使用的含纤维蛋白原组合物的需求持续存在。
发明概述：
在研究含纤维蛋白原组合物特有的稳定性问题时，申请人开发了一种特定的制剂，其以特定的比例组合纤维蛋白原、精氨酸和谷氨酸，从而有助于所述制剂的液体形式随时间的稳定性。令人惊讶且有利的是，申请人已经证明，使用等量的精氨酸和谷氨酸，可以获得液体形式随时间的推移特别稳定的含纤维蛋白原的组合物。因此，不必冷冻干燥含纤维蛋白原的组合物以确保其长期稳定性。此外，申请人通过最小化赋形剂的数量和用量，成功地开发了特别适用于注射，例如静脉内注射的含纤维蛋白原的组合物。本发明通常可以使生产这些各种组合物的方法合理化和简化，从而节省时间并降低可观的生产成本。有利地，所述组合物可以不含其它赋形剂，特别是不含已知具有冷冻干燥产品保存性能的赋形剂，以保证在即用型液体形式的储存期间的稳定性。因此，本发明的主题是液体药物组合物，其包含：
-10-30g/l的纤维蛋白原；
-10-300mM的精氨酸；和
-10-300mM的谷氨酸，
该组合物的pH为6-8。
在一个具体实施方案中，该组合物仅由纤维蛋白原、精氨酸和谷氨酸组成。
本发明的组合物包含10g/l-30g/l的纤维蛋白原，优选5g/l-25g/l的纤维蛋白原，更优选15g/l-20g/l的纤维蛋白原，且甚至更优选15g/l或20g/l或25g/l的纤维蛋白原。
根据一个优选的实施方案，纤维蛋白原是人纤维蛋白原，特别是从血浆中获得的。
精氨酸浓度和谷氨酸浓度为10-30mM，优选20-200mM，更优选30-100mM，甚至更优选50-80mM。
在一个具体实施方案中，精氨酸浓度和谷氨酸浓度为10-80mM。这种精氨酸和谷氨酸浓度特别适合于旨在通过静脉内注射的含纤维蛋白原的组合物。
在一个具体实施方案中，精氨酸浓度为10-300mM，优选20-250mM，更优选50-250mM。
在另一个具体实施方案中，精氨酸浓度有利地低于300mM，优选低于250mM，优选低于200mM，甚至更优选低于150mM。这种精氨酸浓度特别适合于避免过多地增加重量摩尔渗透压浓度。
在一个具体实施方案中，谷氨酸浓度有利地低于80mM，优选低于70mM，优选低于60mM，甚至更优选低于50mM。这种谷氨酸浓度特别适合于含有纤维蛋白原的组合物，该组合物旨在通过静脉内注射，以便将患者的副作用减少至最低限度。
在另一个有利的实施方案中，谷氨酸浓度为10-80mM，优选20-70mM，更优选30-60mM。这种谷氨酸浓度特别适合于含有纤维蛋白原的组合物，该组合物旨在通过静脉内注射，以便将患者的副作用减少至最低限度。
在一个有利的实施方案中，组合物还包含至少一种氨基酸，其选自单独或组合形式的丙氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸和缬氨酸，优选浓度约为1-300mM。
在一个具体的实施方案中，组合物还包含氨基酸，其有利地选自丝氨酸、脯氨酸和/或异亮氨酸，优选浓度约为1-300mM。
在一个具体的实施方案中，组合物还包含极性氨基酸，例如丝氨酸，优选浓度约为1-300mM。
在一个具体的实施方案中，组合物还包含疏水性氨基酸，例如脯氨酸或异亮氨酸，优选浓度约为1-300mM。
在一个具体的实施方案中，组合物还包含表面活性剂，优选F68、聚山梨醇酯80或聚山梨醇酯20或烷基糖，优选浓度约为1-500ppm。
在一个具体的实施方案中，组合物还包含柠檬酸三钠，优选浓度约为1-15mM。
在一个具体的实施方案中，组合物还包含白蛋白，浓度为5-1000ppm，优选浓度为5-500ppm。
本发明的组合物有利地为随时可用的液体组合物。
本发明的组合物有利地为适合于眼、鼻、耳内、口、舌下、肺、腹膜内、静脉内、局部、经皮、皮下、皮内、肌内、透皮、阴道或直肠施用的形式，优选静脉内施用。
发明详述：
定义
在本发明的上下文中，术语“纤维蛋白原”意指人纤维蛋白原。它可以是功能性人纤维蛋白原，具有与正常人纤维蛋白原的序列相似或相同的序列，以及在生产含纤维蛋白原的组合物的方法中获得的任何中间体部分。
纤维蛋白原是由称为α、β和γ的三条多肽链的二聚体组成的蛋白质。因此，纤维蛋白原是二聚体，并且每个单体由三条链(α、β、γ)组成。纤维蛋白原的主要形式具有340kDa的分子量(MW)。纤维蛋白原由通过二硫键连接的两个相同亚单位构成，从而赋予分子包含三个小球的纤维形状：一个中心(E结构域)和两个远端(D结构域)。整个分子含有2964个氨基酸：α(α)链为610个氨基酸，β(β)链为461个氨基酸，γ(γ)链为411个氨基酸。纤维蛋白原参与初级止血，并且也参与凝血。它是为治疗与先天性或严重的纤维蛋白原缺乏血症和出血性综合征相关的并发症或与低纤维素原血症相关的出血风险最常用开据的处方。
根据本发明，可以使用几种含有纤维蛋白原的原料来源。因此，本发明的含纤维蛋白原的组合物使用纤维蛋白原的组合物，特别是来自各种来源的纤维蛋白原。因此，纤维蛋白原组合物可以源自血浆，细胞培养上清液或转基因动物乳。
在一个具体实施方案中，本发明的组合物是血浆级分，优选从预纯化血浆获得的血浆级分。
表述“从预纯化血浆获得的血浆部分”旨在表示人血浆的任何部分或亚部分，其已经成为一个或多个纯化步骤的主题。因此，所述血浆级分包括冷冻上清液、血浆冷沉淀物(再悬浮液)、通过乙醇分级分离(根据Cohn或Kistler&Nitschmann的方法)获得的级分I，色谱洗脱液和来自色谱柱、包括多柱色谱的非吸附级分和滤液。
在本发明的一个优选实施方案中，本发明的组合物来源于色谱洗脱液或来自色谱柱的非吸附级分，包括多柱色谱。
因此，在本发明的一个优选实施方案中，本发明的组合物来源于从冷冻上清液或重悬浮的冷沉淀物获得的血浆级分。
根据本发明，“冷冻上清液”相当于冷冻血浆解冻后获得的液相(冷沉淀)。特别地，冷冻上清液可以通过下列步骤得到：在-10℃至-40℃之间的温度下冷冻血浆，然后在0℃至+6℃之间温度，优选在0℃至+1℃之间适度解冻，然后离心解冻的血浆，以分离冷沉淀物和冷冻上清液。冷沉淀物是纤维蛋白原、纤维连接蛋白、von Willebrand因子和因子VIII的浓缩物，而冷冻上清液含有补体因子、维生素K-依赖性因子如蛋白质C、蛋白质S或蛋白质Z，因子II、因子VII、因子IX和X因子、纤维蛋白原、免疫球蛋白和白蛋白。
在本发明的一个有利实施方案中，根据申请人在申请EP 1 739 093或申请WO2015/136217中描述的方法可以获得本发明的组合物。
在本发明的另一个具体实施方案中，本发明的组合物来自转基因动物乳，例如根据WO 00/17234或WO 00/17239中描述的方法获得。
在一个实施方案中，本发明的组合物可通过包含以下步骤的方法获得：
-亲和色谱纯化步骤；
-赋予生物安全性的至少一个步骤；和
-液体形式的配制步骤。
在本发明的一个具体实施方案中，亲和色谱纯化步骤通过亲和色谱法，使用选自抗体、抗体片段、抗体衍生物或化学配体(例如肽、模拟肽、类肽、纳米过滤物、否则就是寡核苷酸配体例如适体)的亲和配体进行。
在本发明的一个具体实施方案中，根据包含括以下步骤的方法获得含纤维蛋白原的稳定液体组合物：
-获得血浆冷冻上清液级分；
-用8％乙醇沉淀冷冻上清液以获得富含纤维蛋白原的级分，
-通过用亲和色谱凝胶，优选使用选自抗体、抗体级分、抗体衍生物或化学配体如肽、模拟肽、类肽、纳米过滤物，否则就是寡核苷酸配体例如适体的亲和配体进行分离，在再悬浮后纯化富含纤维蛋白原的血浆级分，
-回收包含纤维蛋白原的纯化的吸附级分，
-任选地加入药学上可接受的赋形剂。
在一个具体实施方案中，该方法还包含在5℃下储存至少3个月的步骤。
在本发明的一个具体实施方案中，所用的亲和色谱是使用美洲驼抗体衍生片段类型配体的亲和基质，例如纤维蛋白原CaptureSelect基质(Life Technologies)。
特别有利地，本发明的组合物不含蛋白酶和/或纤维蛋白溶解活化剂。
表述“不含蛋白酶和/或纤维蛋白溶解活化剂的纤维蛋白原组合物”意指纤维蛋白原组合物经历一个或多个步骤以除去蛋白酶如凝血酶、凝血酶原、纤溶酶或纤溶酶原，按照这种方式，使得蛋白酶和/或纤维蛋白溶解活化剂残留量为：
-与色谱步骤之前的预纯化纤维蛋白原溶液相比极为显著降低，和/或
-零，和/或
-低于本领域技术人员通常使用的方法的检测阈值。
有利地，残留的凝血酶原含量低于5μIU/mg的纤维蛋白原，纤溶酶原含量低于15ng/mg的纤维蛋白原。
在本发明的一个具体实施方案中，本发明的组合物因此不含蛋白酶，例如凝血酶和/或纤溶酶或其相应的酶原凝血酶原(凝血因子II)和/或纤溶酶原，它们是潜在可激活的酶原。
术语“含纤维蛋白原的组合物”旨在表示组合物包含：
-人纤维蛋白原，
-任选一种或多种共纯化或伴随的蛋白质，
-药学上可接受的赋形剂。
根据本发明，纤维蛋白原的共纯化或伴随蛋白质可以由一种或多种血浆蛋白组成。根据本发明，术语“血浆蛋白”旨在表示包含在血浆中的任何蛋白质，更特别是任何工业或治疗目的蛋白质。血浆蛋白包括白蛋白、α-巨球蛋白、抗胰凝乳蛋白酶、抗凝血酶、抗胰蛋白酶、Apo A、Apo B、Apo C、Apo D、Apo E、Apo F、Apo G、βXIIa、C1-抑制剂、C-反应蛋白、C7、C1r、C1s、C2、C3、C4、C4bP、C5、C6、C1q、C8、C9、羧肽酶N、血浆铜蓝蛋白、因子B、因子D、因子H、因子I、因子IX、因子V、因子VII、因子VIIa、因子VIII、因子X、因子XI、因子XII、因子XIII、纤维蛋白原、纤连蛋白、触珠蛋白、血液结合素、肝素辅助因子II、富含组氨酸的GP、IgA、IgD、IgE、IgG、ITI、IgM、激酶II、HMW激肽原、溶菌酶、PAI 2、PAI 1、PCI、纤溶酶、纤溶酶抑制剂、纤溶酶原、前白蛋白、前激肽释放酶、备解素、蛋白酶连结素INH、蛋白C、蛋白S、蛋白Ｚ、凝血酶原、血清淀粉样蛋白(SAP)、TFPI、巯基蛋白酶、血栓调节蛋白、组织因子(TF)、TPA、转轱胺素II、运皮质激素蛋白、转铁蛋白、玻连蛋白和维勒布兰德因子。特别地，血浆蛋白包括凝血蛋白，即参与级联反应链导致血凝块的形成的血浆蛋白。凝血蛋白包括因子I(纤维蛋白原)、因子II(凝血酶原)、因子V(促凝血球蛋白原)、因子VII(转变加速因子)、因子VIII(抗血友病因子A)、因子IX(抗血友病因子B)、因子X(St-P因子)、因子XI(Rosenthal因子或PTA)、因子XII(Hageman因子)、因子XIII(纤维蛋白稳定因子或FSF)、PK(前激肽释放酶)、HMWK(高分子量激肽原)、因子III(促凝血酶原激酶或组织因子)、肝素辅助因子II(HCII)、蛋白C(PC)、血栓调节蛋白(TM)、蛋白S(PS)、维勒布兰德因子(Wf)和组织因子途径抑制剂(TFPI)，否则为组织因子。
在某些实施方案中，血浆蛋白由具有酶活性的凝固蛋白组成。具有酶活性的凝固蛋白包括因子II的活化形式(凝血酶原)、因子VII(转变加速因子)、因子IX(抗血友病因子B)、因子X(St-P因子)、因子XI(Rosenthal因子或PTA)。因子XII(Hageman因子)、因子XIII(纤维蛋白稳定因子或FSF)和PK(前激肽释放酶)。
术语“药学上可接受的赋形剂”相当于可有利地用于配制人蛋白质的任何赋形剂，特别是选自盐、氨基酸、糖、表面活性剂或任何其他赋形剂的物质。
术语“等摩尔”是指在几种赋形剂之间，特别是在两种赋形剂之间，相同或等量的摩尔/升或毫摩尔/升(M或mM)，两种赋形剂之间的比例为0.8-1.2，优选在0.9-1.1，甚至更优选约等于1.0。特别地，本发明的组合物有利地包含等摩尔量的精氨酸和谷氨酸，其中精氨酸/谷氨酸之比为0.8-1.2，优选0.9-1.1，甚至更优选约等于1.0；或谷氨酸/精氨酸之比为0.8-1.2，优选0.9-1.1，甚至更优选地约等于1.0。
术语“稳定”相当于含纤维蛋白原的组合物的物理和/或化学稳定性。术语“物理稳定性”是指二聚体、寡聚体或聚合形式的纤维蛋白原的不溶性或可溶性聚集体的形成的减少或不存在，沉淀物形成的减少或不存在，并且也指分子的结构变性的任何减少或不存在。
术语“化学稳定性”是指在加速条件下以液态储存期间含纤维蛋白原组合物的任何化学修饰的减少或不存在。
含纤维蛋白原的组合物的稳定性可通过各种方法评估，特别是通过加速稳定性测试方法或通过长期稳定性测试方法评估。
加速稳定性测试方法尤其包含通过加热进行的机械应力测试。
在一个实施方案中，通过在37℃的恒温浴中加热，例如通过在T0、T+7天和T+14天测定量，在热应激后测定含纤维蛋白原组合物的稳定性。然后通过使用例如欧洲药典检查装置(乳光，颗粒形成)的目视检查，通过借助于分光光度计测量400nm处的吸光度或光密度测量浊度来测定溶液中具有大于人眼检测阈值(约50μm)的尺寸颗粒。
可以在各种温度、湿度和光照条件下进行长期稳定性测试。优选地，在本发明的上下文中，稳定性测试可持续最少1周、优选至少1个月、优选至少2个月、优选至少3个月、优选至少4个月、优选至少5个月、更优先至少6个月。
典型地，进行如下定义的稳定性参数的测量：
-在对含有纤维蛋白原的组合物进行稳定性测试之前；然后参比起始含量；和
-在所述稳定性测试期间或结束时，
应理解，所述稳定性测试可持续至少1周、优选至少1个月、优选至少2个月、优选至少3个月、优选至少4个月、优选至少5个月、更优选至少6个月。
经受长期稳定性后的分析方法尤其包含通过目视检查使用特别是欧洲药典检查装置(乳光，颗粒形成)，通过借助于分光光度计测量400nm处的吸光度或光密度来测量浊度进行分析，使得能够通过检测溶液中的浑浊度评估产品是否存在降解。
在一个实施方案中，含纤维蛋白原的组合物的稳定性通过高压尺寸排阻色谱法(HPSEC)测定稳定性测试期间保存的单体含量来定义。这些方法是本领域技术人员众所周知的。
如果在进行稳定性测试期间保留的纤维蛋白原单体的量大于纤维蛋白原单体的起始含量的50％、优选大于60％、优选大于70％、优选大于80％、优选大于90％、优选大于95％，则有利地认为纤维蛋白原组合物是稳定的。
更优选地，在进行稳定性测试期间保留的纤维蛋白原单体的含量大于纤维蛋白原单体的起始含量的70％。
表述“纤维蛋白原单体的起始含量”旨在表示在进行稳定性测试之前观察到的单体含量。典型地，在进行稳定性测试之前和在所述稳定性测试期间或结束时测量纤维蛋白原单体的量。
或者，如果纤维蛋白原单体的量在稳定性测试过程中的变化低于20％、优选低于10％、优选低于5％、优选低于1％，则将纤维蛋白原组合物视为稳定的。
在另一个实施方案中，含纤维蛋白原组合物的稳定性通过测量在通过HPSEC进行稳定性测试期间形成的纤维蛋白原聚合物的含量来定义。纤维蛋白原聚合物是包含纤维蛋白原的至少2个α多肽链、2个β多肽链和2个γ多肽链的聚合物。该术语还包括纤维蛋白原三聚体。
如果在进行稳定性测试期间形成的纤维蛋白原聚合物的量相对于纤维蛋白原聚合物的初始含量低于10％、优选低于20％、优选低于30％、优选低于40％、优选低于50％，则有利地认为纤维蛋白原组合物是稳定的。典型地，纤维蛋白原聚合物的初始含量相当于在进行稳定性测试之前的所有纤维蛋白原的聚合形式(三聚体和以上)。
更优选地，在进行稳定性测试期间形成的纤维蛋白原聚合物的量低于30％。典型地，在进行稳定性测试之前和在所述稳定性测试期间或结束时测量纤维蛋白原聚合物的量。
或者，如果稳定性试验期间纤维蛋白原聚合物的量的变化低于20％，优选低于10％、优选低于5％、优选低于1％，则认为纤维蛋白原组合物是稳定的。
在另一个实施方案中，通过测量纤维蛋白原相对于纤维蛋白原的抗原测量的凝固活性(也称为比活性)来评估含纤维蛋白原的组合物的稳定性。特别有利的是，稳定的纤维蛋白原组合物具有可凝结的纤维蛋白原/抗原性纤维蛋白原之比大于0.5；优先大于0.6；大于0.7；大于0.8；大于0.9；甚至更优先约等于1.0。
术语“可凝结的纤维蛋白原”旨在表示通过凝血技术测量功能性纤维蛋白原，根据von Clauss的方法测定。可凝固活性以g/l的纤维蛋白原溶液表示。该技术是本领域技术人员已知的，可参考出版物Von Clauss，A.(1957)Gerinnungsphysiologischeschnellmethodezurbestimmung des fibrogens.ActaHaematologica，17，237-246。
术语“抗原性纤维蛋白原”旨在表示通过比浊法测量的纤维蛋白原的量，无论是活性的还是非活性的。抗原性纤维蛋白原的量以g/l表示。
包含纤维蛋白原的组合物的稳定性还通过SDS PAGE测量α、β和γ纤维蛋白原链的保留来评估，优选在本发明上下文中定义的稳定性测试之前和之后进行。因此，如果出现以下情况，则有利地认为纤维蛋白原组合物是稳定的：
-所有α链至少50％、优选至少60％、优选至少70％、优选至少80％、优选至少90％保留；更优选约100％保留，和/或
-所有β链至少50％、优选至少60％、优选至少70％、优选至少80％、优选至少90％保留；更优选约100％保留，和/或
-所有γ链至少50％、优选至少60％、优选至少70％、优选至少80％、优选至少90％保留；更优选约100％保留。
含纤维蛋白原组合物的稳定性也通过在400nm下通过UV分光光度法测量浊度来定义。具体地，浊度反映了使溶液混浊的材料量。如果在本发明中定义的稳定性测试之后测量的浊度与稳定性测量之前的浊度相差无几，则有利地认为纤维蛋白原组合物是稳定的。
有利地，在进行稳定性测试之后测量的浊度相当于低于130％、低于120％、低于110％；有利地，相当于稳定前测量的浊度的100％。
在本发明的一个有利的实施方案中，含纤维蛋白原的组合物在2℃-8℃下稳定至少1个月、至少2个月、至少3个月、至少4个月、至少5个月、至少6个月。
在本发明的一个有利实施方案中，含纤维蛋白原的组合物在2℃-8℃之间稳定6个月。
表述“液体形式的纤维蛋白原组合物”旨在表示在溶液中包含纤维蛋白原的组合物，优选其未经过冷冻干燥、干燥、脱水、喷雾干燥或干燥步骤，因此不需要在使用前重构。
在本发明的上下文中，表述″x-y″.是指包括数值x和y。
制剂：
本发明的组合物包含10g/l-30g/l的纤维蛋白原(下文涉及的10-30g/l纤维蛋白原组合物)，优选15g/l-25g/l的纤维蛋白原，更优选15g/l-20g/l的纤维蛋白原，甚至更优选15g/l或20g/l或25g/l的纤维蛋白原。
在本发明的上下文中，浓度是指即用型最终组合物。相对于液体形式的组合物确定浓度。
特别有利地，申请人已经证明能够获得包含10-30g/l纤维蛋白原的液体组合物，其使用最少量的赋形剂随时间特别稳定。因此，根据本发明，10-30g/l液体纤维蛋白原组合物有利地包含10-300mM精氨酸，优选20-200mM，和10-300mM谷氨酸，优选20-200mM。
在一个具体实施方案中，精氨酸浓度为10-300mM，优选20-250mM，更优选50-250mM。
在另一个具体实施方案中，精氨酸浓度有利地低于300mM、优选低于250mM、优选低于200mM、甚至更优选低于150mM。这种精氨酸浓度特别适合于避免过多地增加重量摩尔渗透压浓度。
在一个具体实施方案中，谷氨酸浓度有利地低于80mM、优选低于70mM、优选低于60mM、甚至更优选低于50mM。这种谷氨酸浓度特别适合于旨在通过静脉内注射的含纤维蛋白原的组合物，以使患者的副作用减少到最低限度。
在另一个有利的实施方案中，谷氨酸浓度为10-80mM、优选20-70mM、更优选30-60mM。这种谷氨酸浓度特别适合于旨在通过静脉内注射的含纤维蛋白原的组合物，以使患者的副作用减少到最低限度。
在另一个具体实施方案中，10-30g/l液体纤维蛋白原组合物包含等摩尔量的精氨酸和谷氨酸。令人惊讶地，申请人已经证明，加入等摩尔量的谷氨酸和精氨酸有利地使得可以使制剂稳定成液体形式，同时维持度患者的良好耐受性。稳定作用与谷氨酸和精氨酸的量的增加成正比。尽管如此，但申请人仍然证实了10-80mM的最佳效果；实际上，高于80mM，该组合物虽然稳定，但具有能够在患者中引起副作用的谷氨酸含量。
同样，在一个具体实施方案中，10-30g/l纤维蛋白原组合物有利地包含1-500ppm的表面活性剂，优选20-400ppm的表面活性剂，更优选50-400ppm的表面活性剂，更优选150-250ppm的表面活性剂。在本发明的组合物中使用的表面活性剂有利地选自非离子表面活性剂，优选聚山梨醇酯，特别是聚山梨醇酯80(或80，其为聚氧乙烯去水山梨糖醇单油酸酯)和聚山梨醇酯20(或20，其为聚氧乙烯月桂山梨坦)。任选地，表面活性剂可选自泊洛沙姆、聚氧乙烯烷基醚、乙烯/聚丙烯共聚物嵌段、烷基葡糖苷或烷基糖和F68(聚乙烯聚丙二醇)。表面活性剂也可彼此组合。有利地，表面活性剂使得能够稳定液体形式的分子之间的相互作用。
根据本发明的一个具体实施方案，该组合物还包含至少一种氨基酸，其选自单独或组合形式的丙氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸和缬氨酸，优选浓度约为1-300mM。
根据本发明的一个具体实施方案，组合物还包含有利地选自丝氨酸、脯氨酸和/或异亮氨酸的氨基酸，优选浓度为约1-300mM。有利地，氨基酸稳定液体形式的本发明的组合物。
在一个具体实施方案中，组合物还包含极性氨基酸，例如丝氨酸，优选浓度约为1-300mM。
根据本发明的一个具体实施方案，该组合物还含有至少一种疏水性氨基酸，其选自选自亮氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、半胱氨酸和/或甘氨酸。优选地，疏水性氨基酸选自脯氨酸和/或异亮氨酸。有利地，疏水性氨基酸稳定液体形式的本发明的组合物。
根据本发明的一个具体实施方案，该组合物还含有缓冲剂，特别是组氨酸缓冲剂、磷酸盐缓冲剂、Tris-HCl或柠檬酸三钠，优选柠檬酸三钠，优选浓度为1-15mM，更优选浓度为7-10mM，甚至更优选浓度为8-9mM。
根据本发明的一个具体实施方案，该组合物还含有浓度为5-1000ppm、优选浓度为5-500ppm的白蛋白。有利地，存在于本发明组合物中的白蛋白是人血浆白蛋白或重组白蛋白。
有利地，申请人已经证明，这种组合物具有在数量和/或用量方面特别适合于通过注射施用、特别是静脉内注射的重量摩尔渗透压浓度，其中没有添加赋形剂。因此，本发明提供15-25g/l或15-20g/l的纤维蛋白原组合物，其具有测量的重量摩尔渗透压浓度为约250-550mOsm/kg。在本发明的上下文中，除非另有说明，否则组合物的重量摩尔渗透压浓度是指在所述组合物中测量的重量摩尔渗透压浓度。
重量摩尔渗透压浓度有利地使用用标准溶液校准的渗透压计测量，特别是根据欧洲药典规定的方法(2005-01/2005：2.2.35.的欧洲药典5.0)测量。当然，可以使用任何其他测量重量摩尔渗透压浓度的方法。
在一个具体实施方案中，本发明的纤维蛋白原组合物的唯一赋形剂是精氨酸和谷氨酸。由于存在有效的最小数量和用量的赋形剂，这种制剂允许液体纤维蛋白原组合物的良好稳定化和工业规模生产时间和成本的降低。有利地，这种组合物具有与注射施用、特别是静脉内注射相容的重量摩尔渗透压浓度。
在另一个具体的实施方案中，本发明的纤维蛋白原组合物的唯一赋形剂是精氨酸、谷氨酸和表面活性剂。
在另一个具体的实施方案中，本发明的纤维蛋白原组合物的唯一赋形剂是精氨酸、谷氨酸和至少一种另外的氨基酸。
在另一个具体实施方案中，本发明的纤维蛋白原组合物的唯一赋形剂是精氨酸、谷氨酸和至少一种疏水氨基酸。
在另一个具体的实施方案中，本发明的纤维蛋白原组合物的唯一赋形剂是精氨酸、谷氨酸、表面活性剂和至少一种另外的氨基酸。
在另一个具体的实施方案中，本发明的纤维蛋白原组合物的唯一赋形剂是精氨酸、谷氨酸、表面活性剂和至少一种疏水性氨基酸。
在另一个具体实施方案中，本发明的纤维蛋白原组合物的唯一赋形剂是精氨酸、谷氨酸和人白蛋白。
在一个具体的实施方案中，组合物基本上由纤维蛋白原、精氨酸和谷氨酸组成，在某种意义上，可能存在的任何其它赋形剂仅以痕量存在。
在本发明的另一个具体实施方案中，本发明的组合物不含二价离子，特别是二价金属离子，特别是钙和/或钠离子。
特别有利地，本发明的组合物不含已知具有冻干材料稳定作用的赋形剂，例如氯化钠和/或羧甲基葡聚糖(CMD)。
在本发明的另一个具体实施方案中，本发明的组合物不含白蛋白。
在本发明的另一个具体实施方案中，本发明的组合物不含糖。
在本发明的一个具体实施方案中，本发明的纤维蛋白原组合物不含蛋白酶抑制剂和/或抗纤维蛋白溶解药。
表述“蛋白酶抑制剂和/或抗纤维蛋白溶解药”旨在表示具有抗蛋白酶活性的任何分子，特别是具有丝氨酸蛋白酶抑制和/或抗纤维蛋白溶解活性的任何分子，特别是具有抑制凝血酶的任何分子和/或抗纤溶酶活性，特别是水蛭素、苯甲脒、抑肽酶、苯甲基磺酰氟(PMSF)、胃蛋白酶抑制剂、亮肽酶、抗凝血酶III(任选与肝素、α-2-巨球蛋白、α-1抗胰蛋白酶、己酸或ε-氨基己酸组合)、氨甲环酸、α2-抗纤溶酶、二异丙基氟磷酸盐(DSP)、抗胰蛋白。
在本发明的一个具体实施方案中，本发明的纤维蛋白原组合物不含水蛭素和/或苯甲脒和/或抑肽酶和/或PMSF和/或胃蛋白酶抑制剂和/或亮肽素和/或抗凝血酶III任选地与肝素和/或α-2-巨球蛋白和/或α-1抗胰蛋白酶和/或己酸和/或ε-氨基己酸和/或氨甲环酸和/或α2-抗纤溶酶的组合。
在本发明的一个具体实施方案中，本发明的组合物不包含其他共纯化蛋白质，有利地不包含FXIII和/或不包含纤连蛋白。
在本发明的另一个具体实施方案中，本发明的纤维蛋白原组合物还可包含一种或多种伴随的、任选共纯化的蛋白质。在本发明的一个具体实施方案中，本发明的组合物有利地包含FXIII。
有利地，本发明的组合物不含纤维蛋白。
在另一个具体的实施方案中，组合物基本上由纤维蛋白原、精氨酸、谷氨酸、任选的表面活性剂优选吐温80、任选的疏水性氨基酸优选脯氨酸和/或异亮氨酸、和任选的缓冲剂如柠檬酸三钠组成，其含义是可能存在的赋形剂只是微量的。
根据本发明，组合物的最终pH有利地为6至8。优选地，pH约为6.0-7.5，甚至更优选为6.0-7.0。事实上，pH值为6.0-7.0，在液体稳定性方面随时间提供特别令人满意的结果，同时能够限制聚集现象和降解现象。最终的pH是指配制后组合物的pH，即在即用型组合物中。除非另有说明，否则在本说明书中，组合物的pH表示最终pH。
本发明优选的10-30g/l纤维蛋白原组合物包含：
-10-300mM的精氨酸，
-10-300mM的谷氨酸，
-任选1-15mM的缓冲剂，特别是柠檬酸三钠，
-任选1-300mM的另一种氨基酸，特别是1-300mM的脯氨酸和/或1-300mM的异亮氨酸和/或1-300mM的丝氨酸，
-任选1-500ppm的表面活性剂，优选20-400ppm，更优选150-250ppm，
-任选5-1000ppm的人白蛋白，
该组合物的pH为6.0-8.0。
本发明优选的10-30g/l纤维蛋白原组合物包含：
-20-200mM的精氨酸，
-20-200mM的谷氨酸，
-任选7-10mM的缓冲剂，特别是柠檬酸三钠，
-任选1-100mM的另一种氨基酸，特别是1-100mM的脯氨酸和/或1-100mM的异亮氨酸和/或1-100mM的丝氨酸，
-任选20-400ppm的表面活性剂，
-任选5-500ppm的人白蛋白，
该组合物的pH为6.0-8.0。
本发明优选的15-25g/l纤维蛋白原组合物包含：
-150mM的精氨酸，
-80mM的谷氨酸，
-8.5mM的缓冲剂，特别是柠檬酸三钠，
-200ppm的表面活性剂，优选聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯20或F68，
-任选1-100mM的另一种氨基酸，特别是1-100mM的脯氨酸和/或1-100mM的异亮氨酸和/或1-100mM的丝氨酸，
-任选5-500ppm的人白蛋白，
该组合物的pH为6.0-7.0。
本发明优选的15-25g/l纤维蛋白原组合物包含：
-10-300mM的精氨酸，
-10-300mM的谷氨酸，
该组合物的pH为6.0-8.0。
本发明优选的15-20g/l纤维蛋白原组合物包含：
-10-300mM的精氨酸，
-10-300mM的谷氨酸，
该组合物的pH为6.0-8.0。
本发明另一种优选的15-25g/l纤维蛋白原组合物包含：
-10-300mM的精氨酸，
-10-300mM的谷氨酸，
-1-15mM的缓冲剂，特别是柠檬酸三钠，
该组合物的pH为6.0-8.0。
本发明另一种优选的15-20g/l纤维蛋白原组合物包含：
-10-300mM的精氨酸，
-10-300mM的谷氨酸，
-1-15mM的柠檬酸三钠，
该组合物的pH为6.0-8.0。
本发明另一种优选的15-25g/l纤维蛋白原组合物包含：
-10-300mM的精氨酸，
-10-300mM的谷氨酸，
-1-300mM的另一种氨基酸，
该组合物的pH为6.0-8.0。
本发明另一种优选的15-20g/l纤维蛋白原组合物包含：
-10-300mM的精氨酸，
-10-300mM的谷氨酸，
-1-300mM的疏水性氨基酸，
该组合物的pH为6.0-8.0。
本发明另一种优选的15-25g/l纤维蛋白原组合物包含：
-10-300mM的精氨酸，
-10-300mM的谷氨酸，
-1-300mM的另一种氨基酸，
-1-15mM的缓冲剂，特别是柠檬酸三钠，
该组合物的pH为6.0-8.0。
本发明另一种优选的15-20g/l纤维蛋白原组合物包含：
-10-300mM的精氨酸，
-10-300mM的谷氨酸，
-1-300mM的疏水性氨基酸，
-1-15mM的柠檬酸三钠，
该组合物的pH为6.0-8.0。
本发明另一种优选的15-25g/l纤维蛋白原组合物包含：
-10-300mM的精氨酸，
-10-300mM的谷氨酸，
-1-300mM的脯氨酸和/或异亮氨酸和/或丝氨酸，
该组合物的pH为6.0-8.0。
本发明另一种优选的15-20g/l纤维蛋白原组合物包含：
-10-300mM的精氨酸，
-10-300mM的谷氨酸，
-1-300mM的脯氨酸和/或异亮氨酸和/或丝氨酸，
该组合物的pH为6.0-8.0。
本发明另一种优选的15-20g/l纤维蛋白原组合物包含：
-10-300mM的精氨酸，
-10-300mM的谷氨酸，
-1-300mM的脯氨酸和/或异亮氨酸，
该组合物的pH为6.0-8.0。
本发明另一种优选的15-20g/l纤维蛋白原组合物包含：
-10-300mM的精氨酸，
-10-300mM的谷氨酸，
-1-500ppm的表面活性剂，优选50-400ppm，更优选150-250ppm，该组合物的pH为6.0-8.0。
本发明另一种优选的15-20g/l纤维蛋白原组合物包含：
-10-300mM的精氨酸，
-10-300mM的谷氨酸，
-1-500ppm的表面活性剂，优选50-400ppm，更优选150-250ppm，
-1-15mM的柠檬酸三钠，
该组合物的pH为6.0-8.0。
本发明另一种优选的15-20g/l纤维蛋白原组合物包含：
-10-300mM的精氨酸，
-10-300mM的谷氨酸，
-1-500ppm的聚山梨醇酯80，优选50-400ppm，更优选150-250ppm，该组合物的pH为6.0-8.0。
本发明另一种优选的15-20g/l纤维蛋白原组合物包含：
-10-300mM的精氨酸，
-10-300mM的谷氨酸，
-1-300mM的疏水性氨基酸，
-1-500ppm的表面活性剂，优选50-400ppm，更优选150-250ppm，
-1-15mM的柠檬酸三钠，
该组合物的pH为6.0-8.0。
本发明另一种优选的15-20g/l纤维蛋白原组合物包含：
-10-300mM的精氨酸，
-10-300mM的谷氨酸，
-1-300mM的脯氨酸和/或异亮氨酸，
-1-500ppm的聚山梨醇酯80，优选50-400ppm，更优选150-250ppm，
-任选1-15mM的柠檬酸三钠，
该组合物的pH为6.0-8.0。
这种纤维蛋白原组合物的经测量的重量摩尔渗透压浓度有利地约为225-715mOsm/kg。
令人惊讶且有利的是，申请人已证明精氨酸浓度约为10-80mM，+/-10％，并且谷氨酸浓度约为10-80mM，+/-10％，两者组合足以保持液体15-20g/l纤维蛋白原组合物稳定，同时在组合物中维持重量摩尔渗透压浓度为225-500mOsm/kg，虽然，预期更高的浓度以保证液体稳定性，同时增加所述组合物的重量摩尔渗透压浓度。事实上，过高的重量摩尔渗透压浓度可能是造成患者不利的细胞脱水(胞内水离开到达胞外介质)的原因。
有利地，本发明的组合物具有大于或等于70％的纯度，优选大于或等于75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％的纯度。
液体形式并且在2℃-8℃储存至少6个月期限后的本发明纤维蛋白原组合物在进行稳定性测试期间有利地具有的纤维蛋白原单体的量大于50％、优选大于60％、优选大于70％、优选大于80％、优选大于90％、优选大于95％的纤维蛋白原单体的初始含量。
更优选地，本发明的纤维蛋白原组合物，以液体形式和在5℃±3℃下储存至少6个月的时间期限后，有利地具有在进行稳定性测试期间保留的纤维蛋白原单体的量大于70％的纤维蛋白原单体的初始含量。
或者，液体形式的本发明的纤维蛋白原组合物在稳定性试验期间有利地具有低于20％、优选低于10％、优选低于5％、优选低于1％的纤维蛋白原单体量的变化。
液体形式并且在2℃-8℃储存至少6个月期限后的本发明纤维蛋白原组合物有利地具有的在进行稳定性测试期间形成的纤维蛋白原聚合物的量相对于纤维蛋白原聚合物的初始含量低于10％、优选低于20％、优选低于30％、优选低于40％、优选低于50％。典型地，纤维蛋白原聚合物的初始含量相当于进行稳定性测试前纤维蛋白原的所有聚合物形式(三聚体和以上)。
更优选地，液体形式并且在2℃-8℃储存至少6个月期限后的本发明纤维蛋白原组合物具有在进行稳定性测试期间形成的纤维蛋白原聚合物的量低于30％。典型地，在进行稳定性测试前和所述稳定性测试期间或结束时测定纤维蛋白原聚合物的量。
或者，本发明纤维蛋白原组合物为液体形式，其在稳定性测试期间有利地具有的纤维蛋白原聚合物的量低于20％、优选低于10％、优选低于5％、优选低于1％。
液体形式并且在2℃-8℃储存至少6个月期限后的本发明纤维蛋白原组合物有利地具有的可凝固纤维蛋白原/抗原性纤维蛋白原之比大于0.5；有利地大于0.6；大于0.7；大于0.8；大于0.9；甚至更优选约等于1.0。
液体形式并且在2℃-8℃储存至少6个月期限后的本发明纤维蛋白原组合物有利地表现出：
-所有α链的至少50％、优选至少60％、优选至少70％、优选至少80％、优选至少90％保留；更优选约100％保留，和/或
-所有β链的至少50％、优选至少60％、优选至少70％、优选至少80％、优选至少90％保留；更优选约100％保留，和/或
-所有γ链的至少50％、优选至少60％、优选至少70％、优选至少80％、优选至少90％保留；更优选约100％保留。
液体形式并且在2℃-8℃储存至少6个月期限后的本发明纤维蛋白原组合物有利地表现出在稳定性测试后测定的浊度，其相当于稳定性测定前的浊度的低于130％、低于120％、低于110％；有利地相当于稳定性测定前的浊度的100％。
本发明的组合物可以是药物组合物，即适合于治疗用途的组合物。因此，本发明的药物组合物可用作药物，特别是用于治疗出现自发性或创伤后出血的患者的低纤维蛋白原血症、异常纤维蛋白原血症或先天性纤维蛋白原血症，或作为治疗获得性低纤维蛋白原血症背景下不受控制的严重出血的补充治疗。
根据本发明，可以使用含有纤维蛋白原的几种起始材料来源。因此，纤维蛋白原组合物可以来源于血浆，也称为血浆级分，来自细胞培养上清液或来自转基因动物乳。
在一个优选的实施方案中，本发明的组合物未经历先前的冷冻干燥、干燥、脱水或干燥步骤。
在一个优选的实施方案中，本发明的组合物未经历先前的冷冻干燥产品重构步骤。
本发明的组合物可以有利地经受至少一种病原体去除或灭活方法。
病毒灭活通常包含用化学产品处理，例如用溶剂和/或洗涤剂和/或加热(巴氏灭菌和/或加热)和/或用辐射(γ和/或UVC辐射)和/或通过pH处理(在酸性pH下处理)。
优选地，病毒灭活由通过加热处理或通过用溶剂和洗涤剂处理的步骤组成。用溶剂和洗涤剂处理(通常称为溶剂/洗涤剂或S/D处理)特别包含用磷酸三正丁酯(TnBP)和/或选自Triton X-100、Tween(优选Tween 80)、胆酸钠和2-[4-(2，4，4-三甲基戊-2-基)苯氧基]乙醇(辛苯昔醇)的洗涤剂处理。
优选地，病毒去除步骤由纳米过滤组成，其可用于去除病原体，特别是病毒和UTA。在血浆蛋白的情况下，纳米过滤通常是指通过具有孔径小于80nm的过滤器过滤目标蛋白质的浓缩物。可用的过滤器例如是PlanovaBioEx、75N、35N，20N或15N(Asahi公司)、Pegasus SV4、Ultipor DV 50或DV 20(Pall corporation)、Virosart CPV、Virosart HC或Virosart HF(Sartorius)、NFR、Pro或NFP(Millipore)过滤器。纳米过滤可有利地使用单个过滤器或使用具有相同或降低孔隙率的几个串联过滤器进行。
除去病原体也可以通过深度过滤进行。可用的过滤器是例如由再生纤维素组成的过滤器，可以向其中添加过滤助剂(例如硅藻土、珠光体或硅藻土)，由Cuno(Ｚeta+VR系列过滤器)、Pall-Seitz(P系列深度过滤器)或Sartorius(Virosart CPV，Sartoelear P深度过滤器)销售。
在纯化和至少一种病原体去除或灭活步骤后，本发明的组合物直接进行液体形式的药物形成步骤：配制、无菌过滤和分配到容器(瓶子或其他储存/施用装置)中。
特别有利地，本发明的组合物不经历冷冻干燥、干燥、脱水或干燥步骤。
特别有利的是，根据本发明的组合物因此是液体形式，而没有经过重构冷冻干燥产品的步骤。
以下实施例示例本发明而不限制其范围。
实施例：
实施例1：稳定的液体纤维蛋白原组合物
根据专利FR 0 506 640中所述的方法得到纤维蛋白原。
然后将终产物对8.5mM柠檬酸三钠二水合物缓冲剂(0.175mM的柠.檬酸+8.325mM柠檬酸钠)在pH 7.0±0.2下透析：以便得到去配制的纤维蛋白原。
实施例2：稳定的液体纤维蛋白原组合物
材料和方法
血浆级分
原料是预先进行冷沉淀步骤、然后进行用8％乙醇沉淀的步骤的人血浆库。
由此获得的预纯化的血浆纤维蛋白原溶液用2个体积的凝胶平衡缓冲液稀释，然后注射到相对于pH和电导率预平衡的色谱柱上。
血浆级分的特征：通过稀释至4.7-4.8g/l调整的抗原性纤维蛋白原。
缓冲溶液
将在色谱法的各个步骤中使用的缓冲溶液的组成总结在下表1中。
表1：用于亲和色谱法的缓冲溶液
亲和色谱凝胶
为了进行色谱法，使用CaptureSelect纤维蛋白原亲和凝胶(Life Technologies参比号191291050，批号171013-01和171013-05)。
柱
使用50mm直径柱(参比号XK 50/30 GE Healthcare)，对于3.4cm高的柱，填充凝胶体积为67ml。
亲和纯化
将调节至约5g/l的纤维蛋白原溶液注射到平衡的CaptureSelect纤维蛋白原亲和柱上，无需其它调节。施加约10g/l的载量。
然后将色谱洗脱液超滤并在具有截留阈值为100kDa的膜上预配制(参考号PallOmega OS100C10)。
在该方法结束时，所得产物的可凝固纤维蛋白原浓度为15.2g/l，且抗原性纤维蛋白原浓度为15.2mg/ml。
实施例3：通过加速稳定性测试的液体纤维蛋白原组合物的稳定性
纤维蛋白还原组合物
将实施例1或实施例2中获得的组合物与各种赋形剂一起配制。
重复生产下表2中的制剂：
分析方案
通过在37℃的恒温室中加热使组合物经受加热应激，然后从恒温室中取出以在T0、T+7天和T+14天进行分析。
所进行的各种分析如下：
·视觉检查：通过用欧洲药典检查装置进行的目视检查来确定乳光和可见颗粒的形成。
·浊度。
·通过SDS PAGE分析各种纤维蛋白原链。
·DLS分析。
·活化的抗原性纤维蛋白原和可凝固纤维蛋白原。
结果
得到的结果如下：
表3：热应激前后的视觉检查和浊度
说明：
乳光：Op：乳光；S Op：轻微乳光；V S Op：极为轻度的乳光；V Op：非常明显的乳光
颗粒：0：无颗粒；1：几乎没有颗粒；2：颗粒；3：许多颗粒；4：非常多的颗粒
表4a和4b：在T0的SDS PAGE结果
表5a和5b：在T+7天的SDS PAGE结果
表6a和6b：在T+14天的SDS PAGE结果
表7：在T0、T+7天和T+14天的DLS结果
表8：抗原性纤维蛋白原和可凝固纤维蛋白原活性在T0、T+7天和T+14天的结果
结果显示在pH 7.0下的包含10-300mM的精氨酸和谷氨酸且特别是等摩尔量的这些F1-F13的制剂是稳定的。
实施例4：通过长期稳定性测试的液体纤维蛋白原组合物的稳定性
纤维蛋白原组合物
组合物与实施例3的那些组合物相同。
纤维蛋白原组合物稳定性
在5℃在空气气氛中对组合物进行稳定性测试。
在T0、T+1个月、T+2个月、T+3个月和T+6个月取样用于分析。
表9和10：显示表面活性剂作用的制剂F14和F15的比较
实施例5：通过加速稳定性测试的液体纤维蛋白原组合物的稳定性
纤维蛋白原组合物
用不同赋形剂配制实施例1中得到的组合物。
按照下表11重复生产制剂：
分析方案
通过在37℃下的恒温室内加热对组合物进行加热，然后从恒温室内取出用于在T0、T+7天和T+14天时的分析。
进行各种分析如下：
·视觉检查：通过使用欧洲药典检查装置进行的视觉检查确定乳光和可见颗粒的形成
·浊度
·pH
·重量摩尔渗透压浓度
·通过SDS PAGE分析各种纤维蛋白原
·DLS分析
结果
得到的结果如下：
·视觉检查：
·浊度
OD 400nm T0 T7d T14d
F16 0.021 0.024 0.030
F17 0.018 0.022 0.033
F18 0.021 0.034 0.048
F19 0.016 0.023 0.033
F20 0.021 0.029 0.036
F21 0.018 0.022 0.032
F22 0.019 0.028 0.031
F23 0.019 0.024 0.030
F24 0.019 0.031 0.032
F25 0.019 0.031 0.032
F26 0.017 0.022 0.027
·pH的监测
pH T0 T7d T14d
F16 6.0 6.0 6.1
F17 7.0 7.0 7.1
F18 6.1 6.1 6.1
F19 6.0 6.1 6.1
F20 6.1 6.1 6.1
F21 6.0 6.0 6.0
F22 6.1 6.1 6.1
F23 7.0 6.9 7.0
F24 6.0 6.0 6.1
F25 6.0 6.0 6.0
F26 6.9 6.9 6.9
·重量摩尔渗透压浓度
制剂 T0 T7d T14d
F16 432 433 431
F17 434 438 435
F18 295 295 294
F19 457 465 462
F20 385 386 385
F21 544 546 545
F22 518 516 515
F23 530 534 526
F24 429 431 429
F25 514 514 516
F26 516 513 512
·DLS分析
结果表明在pH 6.0-8.0下的包含50-200mM的精氨酸和谷氨酸的制剂F16-F26是稳定的。
实施例6：通过长期稳定性测试的液体纤维蛋白原组合物的稳定性
纤维蛋白原组合物
用不同赋形剂配制实施例2中得到的组合物。
按照如下表11重复生产制剂：
分析方案
将组合物储存在5℃、25℃和37℃下的恒温室内，然后从恒温室内取出用于在T0、T+14天和T+1个月时的分析。
进行各种分析如下：
·视觉检查：通过使用欧洲药典检查装置进行的视觉检查确定乳光和可见颗粒的形成。
·浊度
·pH
·重量摩尔渗透压浓度
·DLS分析
·可凝固纤维蛋白原和抗原性纤维蛋白原
通过SDS PAGE分析各种纤维蛋白原。
结果
得到的结果如下：
·视觉检查：
·浊度
·pH和重量摩尔渗透压浓度
·DLS分析
·可凝固的纤维蛋白原和抗原性纤维蛋白原
·通过SDS PAGE在还原条件下分析各种纤维蛋白原链
结果显示在pH 6.0-7.0下的包含80mM的谷氨酸和150mM的精氨酸、在表面活性剂、缓冲剂和补充性氨基酸的存在下制剂F27-F28是稳定的。

Claims (24)

1.包含人纤维蛋白原的液体药物组合物，其特征在于它包含：
-10-300mM的精氨酸
-10-300mM的谷氨酸
该组合物的pH为6-8。
2.如权利要求1中所述的药物组合物，其特征在于精氨酸浓度和谷氨酸浓度为10-300mM，优选20-200mM，更优选30-100mM，甚至更优选50-80mM。
3.如权利要求1中所述的药物组合物，其特征在于精氨酸浓度和谷氨酸浓度为10-80mM，优选20-70mM，更优选30-60mM。
4.根据上述权利要求任一项的药物组合物，其特征在于谷氨酸浓度低于80mM，优选低于70mM，更优选低于60mM，甚至更优选低于50mM。
5.根据上述权利要求任一项的药物组合物，其特征在于谷氨酸浓度为10-80mM，优选20-70mM，更优选30-60mM。
6.上述权利要求任一项的药物组合物，其特征在于精氨酸浓度为10-300mM，优选20-250mM，更优选50-250mM。
7.如上述权利要求任一项中所述的药物组合物，其特征在于精氨酸和谷氨酸以等摩尔量存在，两者之比为0.8-1.2，优选0.9-1.1，甚至更优选约等于1.0。
8.如上述权利要求任一项中所述的药物组合物，其特征在于纤维蛋白原浓度为10-30g/I，优选15-25g/l，甚至更优选15-20g/l。
9.如上述权利要求任一项中所述的药物组合物，其特征在于它还包含至少一种氨基酸，其选自丙氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸和缬氨酸或其组合。
10.如上述权利要求任一项中所述的药物组合物，其特征在于它还包含至少一种疏水性氨基酸，其选自亮氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、半胱氨酸和/或甘氨酸或其组合。
11.如权利要求10中所述的药物组合物，其特征在于所述氨基酸选自脯氨酸和/或异亮氨酸和/或丝氨酸。
12.如权利要求9-11任一项中所述的药物组合物，其特征在于氨基酸浓度为1-300mM，优选10-200mM，更优选20-100mM。
13.如上述权利要求任一项中所述的药物组合物，其特征在于它还包含表面活性剂，优选聚山梨醇酯80或聚山梨醇酯20或F68。
14.如权利要求13中所述的药物组合物，其特征在于所述表面活性剂浓度为1-500ppm，优选50-400ppm，更优选150-250ppm。
15.如上述权利要求任一项中所述的药物组合物，其特征在于它还包含缓冲剂。
16.如权利要求15中所述的药物组合物，其特征在于所述缓冲剂由柠檬酸三钠组成。
17.如权利要求16中所述的药物组合物，其特征在于柠檬酸三钠浓度为1-15mM，优选7-10mM。
18.如上述权利要求任一项中所述的药物组合物，其特征在于pH为6-7.5，优选6-7。
19.如上述权利要求任一项中所述的药物组合物，其特征在于它不含氯化钠和/或白蛋白。
20.如上述权利要求任一项中所述的药物组合物，其特征在于它具有250-650mOsm/kg、优选300-550mOsm/kg的重量摩尔渗透压浓度。
21.如上述权利要求任一项中所述的液体药物组合物，其特征在于它包含：
-10-30g/l的纤维蛋白原，
-10-300mM的精氨酸，
-10-300mM的谷氨酸，
-任选1-15mM的缓冲剂，特别是柠檬酸三钠，
-任选1-300mM的另一种氨基酸，特别是1-300mM的脯氨酸和/或1-300mM的异亮氨酸和/或1-300mM的丝氨酸，
-任选1-500ppm的表面活性剂，优选20-400ppm，更优选150-250ppm，
-任选5-1000ppm的人白蛋白，
该组合物的pH为6.0-8.0。
22.如上述权利要求任一项中所述的液体药物组合物，其特征在于它包含：
-10-30g/l的纤维蛋白原，
-20-200mM的精氨酸，
-20-200mM的谷氨酸，
-任选7-10mM的缓冲剂，特别是柠檬酸三钠，
-任选1-100mM的另一种氨基酸，特别是1-100mM的脯氨酸和/或1-100mM的异亮氨酸和/或1-100mM的丝氨酸，
-任选20-400ppm的表面活性剂，
-任选5-500ppm的人白蛋白，
该组合物的pH为6.0-8.0。
23.如上述权利要求任一项中所述的液体药物组合物，其特征在于它包含：
-15-25g/l的纤维蛋白原，
-150mM的精氨酸，
-80mM的谷氨酸，
-8.5mM的柠檬酸三钠，
-200ppm的表面活性剂，优选聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯20或F68，
-任选1-100mM的另一种氨基酸，特别是1-100mM的脯氨酸和/或1-100mM的异亮氨酸和/或1-100mM的丝氨酸，
-任选5-1000ppm的人白蛋白，
该组合物的pH为6.0-7.0。
24.如上述权利要求任一项中所述的药物组合物，其特征在于纤维蛋白原是通过血浆分级分离得到的。
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Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20210171587A1 (en) * 2019-12-06 2021-06-10 University Of Wyoming Fibrin particles and methods of forming fibrin particles
WO2023017153A1 (en) 2021-08-13 2023-02-16 Biotest Ag Fibrinogen compositions and methods of preparation

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20050080009A1 (en) * 2002-08-13 2005-04-14 Hubert Metzner Storage-stable, liquid fibrinogen formulation
US20060247426A1 (en) * 2003-07-09 2006-11-02 Laboratoire Francasis Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Method for stabilizing a cryoprecipitate of plasmatic proteins for being subjected to a viral inactivation thermal treatment
CN101371921A (zh) * 2008-10-08 2009-02-25 余美伦 一种速溶冻干纤维蛋白原和凝血酶制剂组合物、制备方法及其用途
CN101678086A (zh) * 2007-03-22 2010-03-24 财团法人化学及血清疗法研究所 固体纤维蛋白原制剂
US20110263503A1 (en) * 2008-05-02 2011-10-27 Pharming Intellectual Property B.V. Treatment of bleeding with low half-life fibrinogen
CN102286095A (zh) * 2011-07-06 2011-12-21 大田华灿生物科技有限公司 纤维蛋白原的制备方法
CN104105502A (zh) * 2011-10-27 2014-10-15 株式会社绿十字 制备高度浓缩的纤维蛋白原溶液的方法以及通过使用其制备纤维蛋白封闭剂的方法

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE336207C (de) 1916-03-05 1921-04-28 Siemens & Halske Akt Ges Vermittlungsvorrichtung fuer Fernsprechleitungen
DK1115742T3 (da) 1998-09-24 2006-07-31 Pharming Intellectual Pty Bv Rensning af fibrinogen fra mælk ved anvendelse af kationbytningskromatografi
ES2267289T3 (es) 1998-09-24 2007-03-01 Pharming Intellectual Property Bv Purificacion de fibrinogeno a partir de fluidos mediante precipitacion y cromatografia de interaccion hidrofoba.
FR2887883B1 (fr) 2005-06-29 2007-08-31 Lab Francais Du Fractionnement Procede de separation des proteines fibrinogene, facteur xiii et colle biologique d'une fraction plasmatique solubilisee et de preparation de concentres lyophilises desdites proteines
FR3018450B1 (fr) 2014-03-11 2016-04-15 Lab Francais Du Fractionnement Procede de preparation de proteines plasmatiques humaines

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20050080009A1 (en) * 2002-08-13 2005-04-14 Hubert Metzner Storage-stable, liquid fibrinogen formulation
US20060247426A1 (en) * 2003-07-09 2006-11-02 Laboratoire Francasis Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Method for stabilizing a cryoprecipitate of plasmatic proteins for being subjected to a viral inactivation thermal treatment
CN101678086A (zh) * 2007-03-22 2010-03-24 财团法人化学及血清疗法研究所 固体纤维蛋白原制剂
US20110263503A1 (en) * 2008-05-02 2011-10-27 Pharming Intellectual Property B.V. Treatment of bleeding with low half-life fibrinogen
CN101371921A (zh) * 2008-10-08 2009-02-25 余美伦 一种速溶冻干纤维蛋白原和凝血酶制剂组合物、制备方法及其用途
CN102286095A (zh) * 2011-07-06 2011-12-21 大田华灿生物科技有限公司 纤维蛋白原的制备方法
CN104105502A (zh) * 2011-10-27 2014-10-15 株式会社绿十字 制备高度浓缩的纤维蛋白原溶液的方法以及通过使用其制备纤维蛋白封闭剂的方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ALEXANDER P. GOLOVANOV等: "A Simple Method for Improving Protein Solubility and Long-Term Stability", 《J. AM. CHEM. SOC.》 *
宋景春等: "《弥散性血管内凝血中西医结合治疗法》", 31 December 2014, 军事医学科学出版社 *

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