CN110079494A - 一种杏鲍菇菌种复壮筛选方法 - Google Patents

一种杏鲍菇菌种复壮筛选方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种杏鲍菇菌种复壮筛选方法，包括：初次筛选培养：将待筛选的杏鲍菇菌种接种在以木质素配合马铃薯葡萄糖粉的培养基上，斜面培养5‑10天，选出先贴壁生长的菌种；第二次筛选：将步骤(1)中先贴壁生长的菌种再接种至以琼脂配合马铃薯葡萄糖粉的培养基上，斜面培养5‑10天，选出先贴壁生长的菌种；第三次筛选：将步骤(2)选出的先贴壁生长的菌种接种至小米粉培养基上，斜面培养5‑10天，选出先贴壁生长的菌种。该方法具有快速、准确且高效的特点，可广泛应用于大规模生产的菌种复壮筛选，提高生产效率和生产效益。

Description

一种杏鲍菇菌种复壮筛选方法
技术领域
本发明涉及杏鲍菇栽培，具体地，涉及一种杏鲍菇菌种复壮筛选方法。
背景技术
杏鲍菇是我国工厂化栽培规模最大的食用菌品种之一。杏鲍菇生产中，由于菌种传代次数过多及其他栽培因素的原因，常常引致菌种的退化，造成菌丝生长过慢，生物转化率降低，子实体商品品质下降，生产周期拉长，生产效益严重下滑。
现有中国专利申请公开了杏鲍菇菌种复壮筛选的方法，包括：待筛选的杏鲍菇菌种接种至第二培养基未覆盖的第一固态培养基上并进行培养，选择在第二固态培养基上贴壁生长的菌丝为杏鲍菇复壮菌种，但是，该方法实际筛选的菌种在实际应用中，筛选的菌种并未取得实际的复壮效果，可能是由于培养基与实际栽培的培养基差别较大，筛选的菌种不能适应。
因此，目前，对退化杏鲍菇菌种进行复壮，尚无特别行之有效的方法。
发明内容
本发明的目的是提供一种杏鲍菇菌种复壮筛选方法，该杏鲍菇菌种复壮筛选方法通过三次筛选，并分别将依次筛选的菌种接种在不同的培养基上，得到长势最好的菌种，该方法具有快速、准确且高效的特点，可广泛应用于大规模生产的菌种复壮筛选，提高生产效率和生产效益。
为了实现上述目的，本发明提供了一种杏鲍菇菌种复壮筛选方法，包括以下步骤：(1)初次筛选培养：将待筛选的杏鲍菇菌种接种在以木质素配合马铃薯葡萄糖粉的培养基上，斜面培养5-10天，选出先贴壁生长的菌种；(2)第二次筛选：将步骤(1)中先贴壁生长的菌种再接种至以琼脂配合马铃薯葡萄糖粉的培养基上，斜面培养5-10天，选出先贴壁生长的菌种；(3)第三次筛选：将步骤(2)选出的先贴壁生长的菌种接种至小米粉培养基上，斜面培养5-10天，选出先贴壁生长的菌种。
通过上述技术方案，本发明采用常规的斜面培养，依次将筛选的菌种接种至木质素配合马铃薯葡萄糖粉的培养基、琼脂配合马铃薯葡萄糖粉的培养基和小米粉培养基，第一步，通过接种至木质素配合马铃薯葡萄糖粉的培养基，筛选出在低营养情况下依然能较快生长的菌种，再接种在琼脂配合马铃薯葡萄糖粉的培养基，筛选出营养旺盛的情况下，生长较好的菌种，再结合小米粉培养基筛选出需要从作物粉料中吸收营养从而快速生长的菌种。该方法具有快速、准确且高效的特点，可广泛应用于大规模生产的菌种复壮筛选，提高生产效率和生产效益。
本发明的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。
具体实施方式
以下对本发明的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。
在本文中所披露的范围的端点和任何值都不限于该精确的范围或值，这些范围或值应当理解为包含接近这些范围或值的值。对于数值范围来说，各个范围的端点值之间、各个范围的端点值和单独的点值之间，以及单独的点值之间可以彼此组合而得到一个或多个新的数值范围，这些数值范围应被视为在本文中具体公开。
本发明提供了一种杏鲍菇菌种复壮筛选方法，包括以下步骤：(1)初次筛选培养：将待筛选的杏鲍菇菌种接种在以木质素配合马铃薯葡萄糖粉的培养基上，斜面培养5-10天，选出先贴壁生长的菌种；(2)第二次筛选：将步骤(1)中先贴壁生长的菌种再接种至以琼脂配合马铃薯葡萄糖粉的培养基上，斜面培养5-10天，选出先贴壁生长的菌种；(3)第三次筛选：将步骤(2)选出的先贴壁生长的菌种接种至小米粉培养基上，斜面培养5-10天，选出先贴壁生长的菌种。
通过上述技术方案，本发明采用常规的斜面培养，依次将筛选的菌种接种至木质素配合马铃薯葡萄糖粉的培养基、琼脂配合马铃薯葡萄糖粉的培养基和小米粉培养基，第一步，通过接种至木质素配合马铃薯葡萄糖粉的培养基，筛选出在低营养情况下依然能较快生长的菌种，再接种在琼脂配合马铃薯葡萄糖粉的培养基，筛选出营养旺盛的情况下，生长较好的菌种，再结合小米粉培养基筛选出需要从作物粉料中吸收营养从而快速生长的菌种。该方法具有快速、准确且高效的特点，可广泛应用于大规模生产的菌种复壮筛选，提高生产效率和生产效益。
为了提高筛选的准确性，在本发明一种优选的实施方式中，步骤(1)中木质素与马铃薯葡萄糖粉质量比为(80-88):(20-12)。
为了提高筛选的准确性，在本发明一种优选的实施方式中，步骤(1)中的培养基中木质素与马铃薯葡萄糖粉总质量与水的质量比为2.5-3.5：100。
为了提高筛选的准确性，在本发明一种优选的实施方式中，步骤(2)中琼脂与马铃薯葡萄糖粉的质量比为3-4:2。
为了提高筛选的准确性，在本发明一种优选的实施方式中，步骤(2)中的培养基中琼脂与马铃薯葡萄糖粉总质量与水的质量比为：2.5-3.5：100。
为了提高筛选的准确性，在本发明一种优选的实施方式中，步骤(3)中小米粉培养基通过将小米粉和水以质量比为2-3:8进行混合并加热搅拌至糊化。
在上述技术方案中，还包括对步骤(1)中、步骤(2)中和步骤(3)中的培养基进行灭菌的步骤。
其中，灭菌的条件可在较宽范围内进行调整，优选的，灭菌的条件包括：于115-125℃下灭菌25-30min。
其中，培养温度可在较宽范围内进行调整，在本发明一种优选的实施方式中，步骤(1)、步骤(2)和步骤(3)中的培养温度为20-27℃。
在上述技术方案中，为了提高筛选的准确性，还包括在步骤(3)之后，采用ABTS法对所述杏鲍菇复壮菌种进行漆酶活性测定，从而对筛选得到的杏鲍菇复壮菌种的品质进行评价。
以下将通过实施例对本发明进行详细描述。
实施例1
初次筛选的培养基
木质素与马铃薯葡萄糖粉质量比为80：20，木质素与马铃薯葡萄糖粉总质量与水的质量比为2.5：100；
添加至培养皿中，于122℃下灭菌25min。
第二次筛选的培养基
琼脂与马铃薯葡萄糖粉的质量比为3:2，琼脂与马铃薯葡萄糖粉总质量与水的质量比为2.5：100；
添加至培养皿中，于122℃下灭菌25min。
第三次筛选的培养基
将小米粉和水以质量比为2:8进行混合并在70℃加热搅拌至糊化，然后冷却；添加至培养皿中，于122℃下灭菌25min。
杏鲍菇菌种复壮筛选方法，包括以下步骤：
(1)初次筛选培养：将待筛选的杏鲍菇菌种接种在以木质素配合马铃薯葡萄糖粉的培养基上，斜面培养7天，培养温度维持在20-27℃，选出先贴壁生长的菌种；
(2)第二次筛选：将步骤(1)中先贴壁生长的菌种再接种至以琼脂配合马铃薯葡萄糖粉的培养基上，斜面培养7天，培养温度维持在20-27℃，选出先贴壁生长的菌种；
(3)第三次筛选：将步骤(2)选出的先贴壁生长的菌种接种至小米粉培养基上，斜面培养7天，培养温度维持在20-27℃，选出先贴壁生长的菌种。
实施例2
初次筛选的培养基
木质素与马铃薯葡萄糖粉质量比为88：12，木质素与马铃薯葡萄糖粉总质量与水的质量比为3.5：100；
添加至培养皿中，于122℃下灭菌25min。
第二次筛选的培养基
琼脂与马铃薯葡萄糖粉的质量比为2:1，琼脂与马铃薯葡萄糖粉总质量与水的质量比为3.5：100；
添加至培养皿中，于122℃下灭菌25min。
第三次筛选的培养基
将小米粉和水以质量比为3:8进行混合并在70℃加热搅拌至糊化，然后冷却；添加至培养皿中，于122℃下灭菌25min。
杏鲍菇菌种复壮筛选方法，包括以下步骤：
(1)初次筛选培养：将待筛选的杏鲍菇菌种接种在以木质素配合马铃薯葡萄糖粉的培养基上，斜面培养7天，培养温度维持在20-27℃，选出先贴壁生长的菌种；
(2)第二次筛选：将步骤(1)中先贴壁生长的菌种再接种至以琼脂配合马铃薯葡萄糖粉的培养基上，斜面培养7天，培养温度维持在20-27℃，选出先贴壁生长的菌种；
(3)第三次筛选：将步骤(2)选出的先贴壁生长的菌种接种至小米粉培养基上，斜面培养7天，培养温度维持在20-27℃，选出先贴壁生长的菌种。
实施例3
初次筛选的培养基
木质素与马铃薯葡萄糖粉质量比为84：16，木质素与马铃薯葡萄糖粉总质量与水的质量比为3：100；
添加至培养皿中，于122℃下灭菌25min。
第二次筛选的培养基
琼脂与马铃薯葡萄糖粉的质量比为2:1，琼脂与马铃薯葡萄糖粉总质量与水的质量比为3：100；
添加至培养皿中，于122℃下灭菌25min。
第三次筛选的培养基
将小米粉和水以质量比为2.5:8进行混合并在70℃加热搅拌至糊化，然后冷却；添加至培养皿中，于122℃下灭菌25min。
杏鲍菇菌种复壮筛选方法，包括以下步骤：
(1)初次筛选培养：将待筛选的杏鲍菇菌种接种在以木质素配合马铃薯葡萄糖粉的培养基上，斜面培养7天，培养温度维持在20-27℃，选出先贴壁生长的菌种；
(2)第二次筛选：将步骤(1)中先贴壁生长的菌种再接种至以琼脂配合马铃薯葡萄糖粉的培养基上，斜面培养7天，培养温度维持在20-27℃，选出先贴壁生长的菌种；
(3)第三次筛选：将步骤(2)选出的先贴壁生长的菌种接种至小米粉培养基上，斜面培养7天，培养温度维持在20-27℃，选出先贴壁生长的菌种。
检测例
以未经筛选的原始杏鲍菇菌株菌丝2g，采用ABTS法做漆酶活性检测，设定其活性为100％作为对照，采用同样的方法测定实施例1-3中筛选得到的杏鲍菇复壮菌种漆酶活性的范围为285％-356％，结果表明筛选方法准确且高效。
以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。
另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。
此外，本发明的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合，只要其不违背本发明的思想，其同样应当视为本发明所公开的内容。

Claims (10)

1.一种杏鲍菇菌种复壮筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)初次筛选培养：将待筛选的杏鲍菇菌种接种在以木质素配合马铃薯葡萄糖粉的培养基上，斜面培养5-10天，选出先贴壁生长的菌种；
(2)第二次筛选：将步骤(1)中先贴壁生长的菌种再接种至以琼脂配合马铃薯葡萄糖粉的培养基上，斜面培养5-10天，选出先贴壁生长的菌种；
(3)第三次筛选：将步骤(2)选出的先贴壁生长的菌种接种至小米粉培养基上，斜面培养5-10天，选出先贴壁生长的菌种。
2.根据权利要求1所述的杏鲍菇菌种复壮筛选方法，其中，步骤(1)中木质素与马铃薯葡萄糖粉质量比为(80-88):(20-12)。
3.根据权利要求2所述的杏鲍菇菌种复壮筛选方法，其中，步骤(1)中的培养基中木质素与马铃薯葡萄糖粉总质量与水的质量比为2.5-3.5：100。
4.根据权利要求1所述的杏鲍菇菌种复壮筛选方法，其中，步骤(2)中琼脂与马铃薯葡萄糖粉的质量比为3-4:2。
5.根据权利要求4所述的杏鲍菇菌种复壮筛选方法，其中，步骤(2)中的培养基中琼脂与马铃薯葡萄糖粉总质量与水的质量比为2.5-3.5：100。
6.根据权利要求1所述的杏鲍菇菌种复壮筛选方法，其中，步骤(3)中小米粉培养基通过将小米粉和水以质量比为2-3:8进行混合并加热搅拌至糊化。
7.根据权利要求1-6任一项所述的杏鲍菇菌种复壮筛选方法，其中，还包括对步骤(1)中、步骤(2)中和步骤(3)中的培养基进行灭菌的步骤。
8.根据权利要求7所述的杏鲍菇菌种复壮筛选方法，其中，灭菌的条件包括：于115-125℃下灭菌25-30min。
9.根据权利要求1-6任一项所述的杏鲍菇菌种复壮筛选方法，其中，步骤(1)、步骤(2)和步骤(3)中的培养温度为20-27℃。
10.根据权利要求1-6任一项所述的杏鲍菇菌种复壮筛选方法，其中，还包括在步骤(3)之后，采用ABTS法对所述杏鲍菇复壮菌种进行漆酶活性测定。
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