CN112280690A - 一种金针菇菌种复壮筛选的方法 - Google Patents
一种金针菇菌种复壮筛选的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN112280690A CN112280690A CN202011122447.8A CN202011122447A CN112280690A CN 112280690 A CN112280690 A CN 112280690A CN 202011122447 A CN202011122447 A CN 202011122447A CN 112280690 A CN112280690 A CN 112280690A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- culture medium
- rejuvenating
- strains
- parts
- steps
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Botany (AREA)
- Mycology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明公开了一种金针菇菌种复壮筛选的方法，方法共包含六个工艺步骤：配置第一培养基、配置第二培养基、菌种培养纯化、菌种培养复壮、菌种培养纯化、重复培养复壮与培养纯化，本发明的有益效果是：本发明主要通过PDA培养基的纯化以及普通生产培养基的复壮，重复纯化与复壮步骤，得到性状稳定、高效、准确的复壮菌种。可广泛应用于工厂化生产的菌种复壮筛选，提高生产效率和生产效益。
Description
技术领域
本发明涉及食用菌工厂化栽培相关技术领域，具体为一种金针菇菌种复壮筛选的方法。
背景技术
金针菇是工厂化程度最高的食用菌品种，经过多年的发展，国内金针菇工厂化栽培技术已日趋成熟。不过金针菇菌种生产技术一直发展较慢。目前国内工厂多是从日本引进菌种用作生产主流菌种使用，每次引进新菌种，都需经过多重试验，确认菌种品质稳定，再投入生产，通常已花去6-9月时间，已经过多次数传代。再经长时间生产后，由于菌种一直在精细化PDA培养基传代次数过多及其他栽培因素的原因，常常引起部分基因片段难以表达，以致菌种的退化，造成菌丝生长过慢或过快，子实体发育不良，生物转化率降低，生产效益严重下滑。
现有国内金针菇菌种复壮方面多是采收加富培养基复壮，复壮性状与原始性状难以在生物性状上保持高度一致，稳定性差，该方法实际筛选的菌种在实际应用中，筛选的菌种并未取得实际的复壮效果，可能是由于培养基与实际栽培的培养基差别较大，筛选的菌种不能适应。
发明内容
本发明的目的是针对现有的问题，提供一种金针菇菌种复壮筛选的方法，解决了上述背景技术中提出的金针菇菇由于因长期在工厂化生产培养上进行多次数传代而导致衰退的情况，该方法具有准确、稳定且高效的特点，可广泛应用于工厂化生产的菌种复壮筛选，提高生产效率和生产效益。
本发明为实现上述技术目的所采用的技术方案为：一种金针菇菌种复壮筛选的方法，方法包括六个工艺步骤：步骤1：配置第一培养基；步骤2：配置第二培养基；步骤3：菌种培养纯化；步骤4：菌种培养复壮；步骤5：菌种培养纯化；步骤6：重复培养复壮与培养纯化。
进一步的，所述步骤1配置第一培养基的具体工艺步骤为：配置固体马铃薯葡萄糖琼脂培养基做为第一培养基。
进一步的，所述步骤2配置第二培养基的具体工艺步骤为：以干豆渣5～10份，玉米芯30～50份，米糠30～40份，麸皮10～20份，甜菜渣2-8份，啤酒糟3～10份，大豆皮3～10份，贝壳粉1～5份，轻质碳酸钙1～5份的组成配置培养基，作为第二培养基，改栽培基质含水率为67％～69％，pH为6.2～6.8。
进一步的，所述步骤3菌种培养纯化的具体工艺步骤为：将金针菇菌种接种在PDA培养基上培养纯化。
进一步的，所述步骤4菌种培养复壮的具体工艺步骤为：挑选经PDA培养基培养纯化的性状较稳定均一的菌种接种在第二培养基上培养复壮。
进一步的，所述步骤5菌种培养纯化的具体工艺步骤为：将经第二培养基培养复壮后的菌种接回到PDA培养基上培养纯化。
进一步的，所述步骤6重复培养复壮与培养纯化的具体工艺步骤为：多次重复步骤4与步骤5，直到得到性状更为稳定的菌种。
有益效果
经过实验表明，本发明的金针菇菌种复壮筛选方法，与现有的技术相比，具有以下优点：
1.取材简单方便，本方法使用的培养基为普通PDA培养基和生产上使用的普通栽培培养基。
2.本方法克服了以往所用复壮培养基营养元素明确，有限的特点，所使用的生产普通栽培培养基含有更为广泛的营养元素，特别是各种粗纤维、粗脂肪、粗蛋白等以及各种微量元素，提供丰富营养。能够刺激菌种各种基因片段的表达，从而找回各种基因片段的正常表达，进而达到菌种复壮的目的。
3.本方法操作简单，复壮过程具有准确、稳定且高效的特点，可广泛应用于工厂化生产的菌种复壮筛选，提高生产效率和生产效益。
具体实施方式
下面对本发明做进一步的阐述，以下结合具体实施例对上述方案做进一步说明，应理解，这些实施例是用于说明本发明而不限于限制本发明的范围，实施例中采用的实施条件可以根据具体企业条件做进一步调整，未注明的实施条件通常为常规实验中的条件。
S1.配置固体马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基做为第一培养基，添加至平板中，于121℃下灭菌20min。
S2.配置第二培养基，分为四个步骤，如下：
a.原材料称取：据生产规定的每批次培养基重量要求，按照大豆膳食纤维粉1～10份，玉米芯30～50份，米糠30～40份，麸皮10～20份，甜菜渣2-8份，啤酒糟3～10份，大豆皮3～10份，贝壳粉1～5份，轻质碳酸钙1～5份的比例称取原料。
b.混合、搅拌：将原材料依次投入搅拌机，先干拌15～20分钟，再加水，搅拌直至培养基中的各种原料混合均匀，充分吸水，最终培养基的含水率为67％～69％，pH为6.2～6.8。
c.装瓶、盖瓶盖：每16个聚丙烯塑料栽培瓶为一筐，采用全自动装瓶机将配制好的复合培养基灌装到栽培瓶中，灌装结束后通过自动打孔机在料面中间和四周一共打5个孔洞到瓶底，要求培养基料面平整。灌装、打孔完成后，通过自动盖盖机为栽培瓶盖上匹配的瓶盖。
d.高压蒸汽灭菌：将装有栽培瓶的栽培筐放置到周转车上，推入高压蒸汽灭菌器中进行灭菌，121℃维持80min。
S3.将菌种接到PDA培养基纯化培养。
S4.将经PDA纯化后的菌种接种到经灭菌冷却后的第二培养基上培养。培养环境为：室温13-15℃、空气湿度75-85％，避光、空气循环良好。培养室采用自动控制系统，将料温控制在17-20℃，空间湿度控制在70-80％，CO2浓度控制在3000-5000ppm，同时通过高效空气过滤来确保空间环境的洁净度，培养22-24天后菌丝即可长满栽培瓶。
S5.挑选步骤4中培养后的走菌快慢稳定，白度较好的栽培瓶，挑选瓶身中部菌丝接回到PDA培养基上纯化培养，得到第一次复壮纯化菌种。
S6.多次重复步骤4与步骤5，直到得到性状更为稳定的菌种。
对于本领域的技术人员而言，可根据以上描述的技术方案以及构思做出其它各种相应的改变以及变形，而所有的这些改变以及变形都应该属于本发明权利要求的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种金针菇菌种复壮筛选的方法，其特征在于：方法包括六个工艺步骤：步骤1：配置第一培养基；步骤2：配置第二培养基；步骤3：菌种培养纯化；步骤4：菌种培养复壮；步骤5：菌种培养纯化；步骤6：重复培养复壮与培养纯化。
2.根据权利要求1所述的一种金针菇菌种复壮筛选的方法，其特征在于：所述步骤1的具体工艺步骤为：配置固体马铃薯葡萄糖琼脂培养基做为第一培养基。
3.根据权利要求1所述的一种金针菇菌种复壮筛选的方法，其特征在于：所述步骤2的具体工艺步骤为：以干豆渣5～10份，玉米芯30～50份，米糠30～40份，麸皮10～20份，甜菜渣2-8份，啤酒糟3～10份，大豆皮3～10份，贝壳粉1～5份，轻质碳酸钙1～5份的组成配置培养基，作为第二培养基，改栽培基质含水率为67％～69％，pH为6.2～6.8。
4.根据权利要求1所述的一种金针菇菌种复壮筛选的方法，其特征在于：所述步骤3的具体工艺步骤为：将金针菇菌种接种在PDA培养基上培养纯化。
5.根据权利要求1所述的一种金针菇菌种复壮筛选的方法，其特征在于：所述步骤4的具体工艺步骤为：挑选经PDA培养基培养纯化的性状较稳定均一的菌种接种在第二培养基上培养复壮。
6.据权利要求1所述的一种金针菇菌种复壮筛选的方法，其特征在于：所述步骤5的具体工艺步骤为：将经第二培养基培养复壮后的菌种接回到PDA培养基上培养纯化。
7.据权利要求1所述的一种金针菇菌种复壮筛选的方法，其特征在于：所述步骤6的具体工艺步骤为：多次重复步骤4与步骤5，直到得到性状更为稳定的菌种。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202011122447.8A CN112280690A (zh) | 2020-10-20 | 2020-10-20 | 一种金针菇菌种复壮筛选的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202011122447.8A CN112280690A (zh) | 2020-10-20 | 2020-10-20 | 一种金针菇菌种复壮筛选的方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN112280690A true CN112280690A (zh) | 2021-01-29 |
Family
ID=74423102
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202011122447.8A Pending CN112280690A (zh) | 2020-10-20 | 2020-10-20 | 一种金针菇菌种复壮筛选的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN112280690A (zh) |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103232300A (zh) * | 2013-05-28 | 2013-08-07 | 山西嘉沁农业有限公司 | 一种金针菇复壮培养基及其制备方法 |
| CN103283608A (zh) * | 2013-06-27 | 2013-09-11 | 沈阳恒生农业发展有限公司 | 一种金针菇工厂化栽培菌种及其栽培方法 |
| CN104488557A (zh) * | 2014-12-26 | 2015-04-08 | 青岛华盛绿能农业科技有限公司 | 一种食用菌菌种提纯复壮的方法 |
| CN104823719A (zh) * | 2015-06-05 | 2015-08-12 | 电白中茂生物科技有限公司 | 一种培养金针菇原种的方法 |
| CN107653218A (zh) * | 2017-09-22 | 2018-02-02 | 上海市农业科学院 | 一种金针菇退化菌种的复壮方法 |
| CN110079494A (zh) * | 2019-05-16 | 2019-08-02 | 安徽吾悦农业科技有限公司 | 一种杏鲍菇菌种复壮筛选方法 |
-
2020
- 2020-10-20 CN CN202011122447.8A patent/CN112280690A/zh active Pending
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103232300A (zh) * | 2013-05-28 | 2013-08-07 | 山西嘉沁农业有限公司 | 一种金针菇复壮培养基及其制备方法 |
| CN103283608A (zh) * | 2013-06-27 | 2013-09-11 | 沈阳恒生农业发展有限公司 | 一种金针菇工厂化栽培菌种及其栽培方法 |
| CN104488557A (zh) * | 2014-12-26 | 2015-04-08 | 青岛华盛绿能农业科技有限公司 | 一种食用菌菌种提纯复壮的方法 |
| CN104823719A (zh) * | 2015-06-05 | 2015-08-12 | 电白中茂生物科技有限公司 | 一种培养金针菇原种的方法 |
| CN107653218A (zh) * | 2017-09-22 | 2018-02-02 | 上海市农业科学院 | 一种金针菇退化菌种的复壮方法 |
| CN110079494A (zh) * | 2019-05-16 | 2019-08-02 | 安徽吾悦农业科技有限公司 | 一种杏鲍菇菌种复壮筛选方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN109168982B (zh) | 一种海鲜菇液体菌种制种培养基、栽培培养基及栽培方法 | |
| CN109055444B (zh) | 一种黑曲霉种子连续培养及其生产柠檬酸的方法 | |
| CN104605308A (zh) | 适用于微藻保健稀态发酵酱油曲制备方法 | |
| CN105695341B (zh) | 一种用于黑曲霉扩大培养的麸曲培养基及培养方法 | |
| CN106852254A (zh) | 黑木耳的栽培方法 | |
| CN100535104C (zh) | 以玉米皮水解液为原料制备饲料酵母的方法 | |
| CN108517303A (zh) | 一种金针菇液体菌种的制备方法 | |
| CN111492896A (zh) | 一种用于工厂化栽培金针菇的培养基的制备方法 | |
| CN106676018B (zh) | 一种适用于标准化工厂的双孢菇菌种繁育方法 | |
| CN105368722A (zh) | 一种金针菇液体菌种转固体再液化的制种方法 | |
| CN108293593B (zh) | 一种利用玉米芯混合料栽培黑木耳的方法 | |
| CN104277978A (zh) | 黑曲霉种子液的制备方法以及发酵制备柠檬酸的方法 | |
| CN112280690A (zh) | 一种金针菇菌种复壮筛选的方法 | |
| CN103343151B (zh) | 一种细菌纤维素薄膜的液体培养基制备方法 | |
| CN102649971A (zh) | 黑曲霉麸曲的培养方法以及发酵制备柠檬酸的方法 | |
| CN108739067B (zh) | 一种缩短平菇液体菌种接种菌包发菌期的方法及应用 | |
| CN113141969A (zh) | 一种肉灵芝培植方法 | |
| CN106747819A (zh) | 黑木耳栽培基质及其制备方法 | |
| CN111512889A (zh) | 一种咖啡渣培养基用于金针菇的栽培工艺 | |
| CN112931047A (zh) | 一种袋栽香菇的菌棒制造方法 | |
| CN111296176A (zh) | 一种肉灵芝营养液制备方法及肉灵芝快速培育技术 | |
| CN108834765A (zh) | 一种用厘竹条作为载体的杏鲍菇菌种制作工艺 | |
| CN104498542A (zh) | 连续法发酵生产l-乳酸的方法 | |
| CN114480142B (zh) | 一种香菇液体培养基及其配套的养菌方法 | |
| CN109161541A (zh) | 一种低能n+离子注入诱变长柄木霉高产蛋白酶的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20210129 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |