CN110041442A - 一种鲍鱼壳抗氧化性水溶性多糖提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种鲍鱼壳抗氧化性水溶性多糖提取方法,包括以下步骤:S1:清洗:将鲍鱼壳浸泡,清除表面海水盐分,用清水洗掉鲍鱼壳上的泥沙和菌类杂质;S2:浸泡:用醋酸溶液浸泡鲍鱼壳6~10小时,以去除鲍鱼壳的表层物质;S3:干燥:将鲍鱼壳沥干后置于恒温鼓风干燥箱中,调节温度至90℃~100℃干燥30~50分钟;S4:粉碎:将干燥后的鲍鱼壳进行粉碎研磨,过滤获得鲍鱼壳粉末;S5:提取:加水浸泡,并于60℃~85℃下充分搅拌提取,搅拌提取时间为1‑5小时,抽滤去残渣;提取2‑3次,将上清液合并,本发明提取物中的活性多糖是杂多糖,具有较高的清除超氧自由基的活性,可以制成抗氧化剂,对鲍鱼壳资源充分利用,变废为宝,成本低廉。
Description
技术领域
本发明涉及水产品加工副产物的技术领域,尤其涉及一种鲍鱼壳抗氧化性水溶性多糖提取方法。
背景技术
福建省的鲍鱼产量资源丰富,2016年产量已经超过10万吨,因此鲍鱼加工制品的品种和产量也不断增加以提高产品的附加值,在加工中必然会产生大量的鲍鱼壳。
鲍鱼壳,也称石决明,为鲍科鲍属动物杂色鲍、皱纹盘鲍、羊鲍、澳洲鲍、耳鲍和白鲍等的贝壳。鲍鱼壳是由角质层,棱柱层和珍珠层三层组成,化学成分包括了95%碳酸钙和0.3%~5%的有机质。鲍壳水溶性有机质主要由糖蛋白,磷蛋白,蛋白聚糖、黏多糖和其他蛋白质组成的混合物。一般对于鲍鱼壳的处理为研磨后药用或直接丢弃,利用率低下,未见鲍鱼壳中多糖成分提取以及抗氧化性分析的报道
本发明的目的在于提供一种有效的方法,提取鲍鱼壳中抗氧化性水溶性多糖。
发明内容
本发明的目的是为了解决现有技术中把鲍鱼壳中抗氧化性水溶性多糖充分提取出来利用的问题,而提出的一种鲍鱼壳抗氧化性水溶性多糖提取方法。
本发明提出的一种鲍鱼壳抗氧化性水溶性多糖提取方法,包括以下步骤:
S1:清洗:将鲍鱼壳浸泡,清除表面海水盐分,用清水洗掉鲍鱼壳上的泥沙和菌类杂质;
S2:浸泡:用醋酸溶液浸泡鲍鱼壳6~10小时,以去除鲍鱼壳的表层物质;
S3:干燥:将鲍鱼壳沥干后置于恒温鼓风干燥箱中,调节温度至90℃~100℃干燥30~50分钟;
S4:粉碎:将干燥后的鲍鱼壳进行粉碎研磨,过滤获得鲍鱼壳粉末;
S5:提取:加水浸泡,并于60℃~85℃下充分搅拌提取,搅拌提取时间为1-5小时,抽滤去残渣;提取2-3次,将上清液合并;
S6:萃取:将步骤S5获得的上清液按1:1~1:3(w/v)比加入柠檬酸水溶液,在高温高压下萃取20min~60min,冷却至室温后用200目~400目尼龙过滤网布过滤得到鲍鱼壳萃取液和残渣;
S7:水溶性物质的制备:将步骤S6获得的鲍鱼壳萃取液利用活性炭处理后,通过真空浓缩至固形物含量为10%~20%,添加β-环糊精,喷雾干燥制备成鲍鱼壳水溶性提取物;
S8:静置:在获得的鲍鱼壳水溶性提取物加入三倍体积的无水乙醇,保持温度为4°C的条件下静置1-12小时;
S9:离心:将静置后的溶液放置在离心机上,以10000rpm离心10min;离心完成后收集沉淀,对上清液重复以上离心分离步骤2-3次,将沉淀汇总后收集;
S10:溶解:将通过步骤S9获取的沉淀用无水乙醇清洗,然后用蒸馏水溶解至完全重溶得到鲍鱼壳水溶性多糖粗提物;
S11:获取蛋白溶液:取步骤S10中获得重溶的粗多糖提取物利用三氯乙酸法脱蛋白,每10ml重溶的粗多糖提取物加入体积浓度为5%-15%三氯乙酸溶液5ml,摇匀于4°C的条件下静置1-12小时,将静置后的溶液利用离心机离心,以10000rpm离心10min,上清液即为去蛋白溶液;
S12:透析:取步骤S11中获得去蛋白水溶液用1KD膜流水透析24-72小时除盐和色素后;
S13:干燥:将透析后的溶液于-60°C~-80°C真空冷冻干燥得到抗氧化水溶性物质,即水溶性多糖
优选地,在步骤S6中,所述的柠檬酸水溶液质量浓度为0.1%~0.5%;高温高压指的是温度为170°C~260°C,压力为1.0MPa~5.0MPa。
优选地,所述的鲍鱼壳为杂色鲍、皱纹盘鲍、羊鲍、澳洲鲍、耳鲍和白鲍等的贝壳。
优选地,所述抗氧化水溶性物质,即水溶性多糖由甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、半乳糖醛酸、岩藻糖或阿拉伯糖中的一种或多种形成的糖单元组成。
优选地,在步骤S4中,所述鲍鱼壳粉末采用200目滤网进行筛选。
优选地,在步骤S2中,所述醋酸溶液的浓度为36%~38%。
优选地,在步骤S7中,所述β-环糊精的浓缩液体积为的20%~30%。
与现有技术相比,本发明具有如下有益效果;
1、本提取物中的活性多糖是由甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、半乳糖醛酸、岩藻糖或阿拉伯糖等中的一种或多种的杂多糖,具有较高的清除超氧自由基的活性,可以制成抗氧化剂。
2、鲍鱼壳资源丰富,提取容易,具有开发潜力;同时能够对鲍鱼壳资源充分利用,变废为宝,成本低廉。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。
实施例一:
本发明提出的一种鲍鱼壳抗氧化性水溶性多糖提取方法,包括以下步骤:
(1)清洗:将鲍鱼壳浸泡,所述的鲍鱼壳为杂色鲍、皱纹盘鲍、羊鲍、澳洲鲍、耳鲍和白鲍等的贝壳,清除表面海水盐分,用清水洗掉鲍鱼壳上的泥沙和菌类杂质。
(2)浸泡:用36%醋酸溶液浸泡鲍鱼壳6小时,以去除鲍鱼壳的表层物质。
(3)、干燥:将鲍鱼壳沥干后置于恒温鼓风干燥箱中,调节温度至90℃干燥30分钟。
(4)、粉碎:将干燥后的鲍鱼壳进行粉碎研磨,采用200目滤网进行筛选过滤获得鲍鱼壳粉末。
(5)提取:加水浸泡,并于60℃下充分搅拌提取,搅拌提取时间为2小时,抽滤去残渣;提取2次,将上清液合并。
(6)、萃取:将步骤(5)获得的上清液按1:1(w/v)比加入质量浓度为0.1%柠檬酸水溶液,在170°C和1.0MPa的条件下萃取20min,冷却至室温后用200目尼龙过滤网布过滤得到鲍鱼壳萃取液和残渣;
(7)、水溶性物质的制备:将步骤(6)获得的鲍鱼壳萃取液利用活性炭处理后,通过真空浓缩至固形物含量为10%,添加浓缩液体积为的20%的β-环糊精,喷雾干燥制备成鲍鱼壳水溶性提取物;
(8)、静置:在获得的鲍鱼壳水溶性提取物加入三倍体积的无水乙醇,保持温度为4°C的条件下静置5小时。
(9)、离心:将静置后的溶液放置在离心机上,以10000rpm离心10min;离心完成后收集沉淀,对上清液重复以上离心分离步骤2次,将沉淀汇总后收集。
(10)、溶解:将通过步骤(9)获取的沉淀用无水乙醇清洗,然后用蒸馏水溶解至完全重溶得到鲍鱼壳水溶性多糖粗提物。
(11)、获取蛋白溶液:取步骤(10)中获得重溶的粗多糖提取物利用三氯乙酸法脱蛋白,每10ml重溶的粗多糖提取物加入体积浓度为5%三氯乙酸溶液5ml,摇匀于4°C的条件下静置5小时,将静置后的溶液利用离心机离心,以10000rpm离心10min,上清液即为去蛋白溶液。
(12)、透析:取步骤(11)中获得去蛋白水溶液用1KD膜流水透析24小时除盐和色素后。
(13)、干燥:将透析后的溶液于-60°C真空冷冻干燥得到抗氧化水溶性物质,即水溶性多糖,水溶性多糖由甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、半乳糖醛酸、岩藻糖或阿拉伯糖中的一种或多种形成的糖单元组成。
由此可见,按照本实施例的方法进行鲍鱼壳抗氧化性水溶性多糖的提取,提取物为多糖,每1kg鲍鱼壳粉得率最终获得精多糖6.67mg。本提取物中的活性多糖是由甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、半乳糖醛酸、岩藻糖或阿拉伯糖等中的一种或多种的杂多糖,具有较高的清除超氧自由基的活性,可以制成抗氧化剂,鲍鱼壳资源丰富,提取容易,具有开发潜力;也对鲍鱼壳资源充分利用,变废为宝,成本低廉。
实施例二:
本发明提出的一种鲍鱼壳抗氧化性水溶性多糖提取方法,包括以下步骤:
(1)清洗:将鲍鱼壳浸泡,所述的鲍鱼壳为杂色鲍、皱纹盘鲍、羊鲍、澳洲鲍、耳鲍和白鲍等的贝壳,清除表面海水盐分,用清水洗掉鲍鱼壳上的泥沙和菌类杂质。
(2)浸泡:用37%醋酸溶液浸泡鲍鱼壳7小时,以去除鲍鱼壳的表层物质。
(3)、干燥:将鲍鱼壳沥干后置于恒温鼓风干燥箱中,调节温度至95℃干燥40分钟。
(4)、粉碎:将干燥后的鲍鱼壳进行粉碎研磨,采用200目滤网进行筛选过滤获得鲍鱼壳粉末。
(5)提取:加水浸泡,并于70℃下充分搅拌提取,搅拌提取时间为3小时,抽滤去残渣;提取2次,将上清液合并。
(6)、萃取:将步骤(5)获得的上清液按1:2(w/v)比加入质量浓度为0.3%柠檬酸水溶液,在220°C和3.0MPa的条件下萃取20min,冷却至室温后用200目尼龙过滤网布过滤得到鲍鱼壳萃取液和残渣;
(7)、水溶性物质的制备:将步骤(6)获得的鲍鱼壳萃取液利用活性炭处理后,通过真空浓缩至固形物含量为15%,添加浓缩液体积为的25%的β-环糊精,喷雾干燥制备成鲍鱼壳水溶性提取物;
(8)、静置:在获得的鲍鱼壳水溶性提取物加入三倍体积的无水乙醇,保持温度为4°C的条件下静置7小时。
(9)、离心:将静置后的溶液放置在离心机上,以10000rpm离心10min;离心完成后收集沉淀,对上清液重复以上离心分离步骤2次,将沉淀汇总后收集。
(10)、溶解:将通过步骤(9)获取的沉淀用无水乙醇清洗,然后用蒸馏水溶解至完全重溶得到鲍鱼壳水溶性多糖粗提物。
(11)、获取蛋白溶液:取步骤(10)中获得重溶的粗多糖提取物利用三氯乙酸法脱蛋白,每10ml重溶的粗多糖提取物加入体积浓度为10%三氯乙酸溶液5ml,摇匀于4°C的条件下静置7小时,将静置后的溶液利用离心机离心,以10000rpm离心10min,上清液即为去蛋白溶液。
(12)、透析:取步骤(11)中获得去蛋白水溶液用1KD膜流水透析24小时除盐和色素后。
(13)、干燥:将透析后的溶液于-70°C真空冷冻干燥得到抗氧化水溶性物质,即水溶性多糖,水溶性多糖由甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、半乳糖醛酸、岩藻糖或阿拉伯糖中的一种或多种形成的糖单元组成。
由此可见,按照本实施例的方法进行鲍鱼壳抗氧化性水溶性多糖的提取,提取物为多糖,每1kg鲍鱼壳粉得率最终获得精多糖6.67mg。本提取物中的活性多糖是由甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、半乳糖醛酸、岩藻糖或阿拉伯糖等中的一种或多种的杂多糖,具有较高的清除超氧自由基的活性,可以制成抗氧化剂,鲍鱼壳资源丰富,提取容易,具有开发潜力;也对鲍鱼壳资源充分利用,变废为宝,成本低廉。
实施例三:
本发明提出的一种鲍鱼壳抗氧化性水溶性多糖提取方法,包括以下步骤:
(1)清洗:将鲍鱼壳浸泡,所述的鲍鱼壳为杂色鲍、皱纹盘鲍、羊鲍、澳洲鲍、耳鲍和白鲍等的贝壳,清除表面海水盐分,用清水洗掉鲍鱼壳上的泥沙和菌类杂质。
(2)浸泡:用38%醋酸溶液浸泡鲍鱼壳10小时,以去除鲍鱼壳的表层物质。
(3)、干燥:将鲍鱼壳沥干后置于恒温鼓风干燥箱中,调节温度至100℃干燥350分钟。
(4)、粉碎:将干燥后的鲍鱼壳进行粉碎研磨,采用200目滤网进行筛选过滤获得鲍鱼壳粉末。
(5)提取:加水浸泡,并于85℃下充分搅拌提取,搅拌提取时间为5小时,抽滤去残渣;提取3次,将上清液合并。
(6)、萃取:将步骤(5)获得的上清液按1:3(w/v)比加入质量浓度为0.5%柠檬酸水溶液,在260°C和5.0MPa的条件下萃取60min,冷却至室温后用200目尼龙过滤网布过滤得到鲍鱼壳萃取液和残渣;
(7)、水溶性物质的制备:将步骤(6)获得的鲍鱼壳萃取液利用活性炭处理后,通过真空浓缩至固形物含量为20%,添加浓缩液体积为的30%的β-环糊精,喷雾干燥制备成鲍鱼壳水溶性提取物;
(8)、静置:在获得的鲍鱼壳水溶性提取物加入三倍体积的无水乙醇,保持温度为4°C的条件下静置12小时。
(9)、离心:将静置后的溶液放置在离心机上,以10000rpm离心10min;离心完成后收集沉淀,对上清液重复以上离心分离步骤3次,将沉淀汇总后收集。
(10)、溶解:将通过步骤(9)获取的沉淀用无水乙醇清洗,然后用蒸馏水溶解至完全重溶得到鲍鱼壳水溶性多糖粗提物。
(11)、获取蛋白溶液:取步骤(10)中获得重溶的粗多糖提取物利用三氯乙酸法脱蛋白,每10ml重溶的粗多糖提取物加入体积浓度为15%三氯乙酸溶液5ml,摇匀于4°C的条件下静置12小时,将静置后的溶液利用离心机离心,以10000rpm离心10min,上清液即为去蛋白溶液。
(12)、透析:取步骤(11)中获得去蛋白水溶液用1KD膜流水透析72小时除盐和色素后。
(13)、干燥:将透析后的溶液于-80°C真空冷冻干燥得到抗氧化水溶性物质,即水溶性多糖,水溶性多糖由甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、半乳糖醛酸、岩藻糖或阿拉伯糖中的一种或多种形成的糖单元组成。
由此可见,按照本实施例的方法进行鲍鱼壳抗氧化性水溶性多糖的提取,提取物为多糖,每1kg鲍鱼壳粉得率最终获得精多糖6.67mg。本提取物中的活性多糖是由甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、半乳糖醛酸、岩藻糖或阿拉伯糖等中的一种或多种的杂多糖,具有较高的清除超氧自由基的活性,可以制成抗氧化剂,鲍鱼壳资源丰富,提取容易,具有开发潜力;也对鲍鱼壳资源充分利用,变废为宝,成本低廉。
以上所述,仅为本发明较佳的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内,根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变,都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种鲍鱼壳抗氧化性水溶性多糖提取方法,其特征在于:包括以下步骤:
S1:清洗:将鲍鱼壳浸泡,清除表面海水盐分,用清水洗掉鲍鱼壳上的泥沙和菌类杂质;
S2:浸泡:用醋酸溶液浸泡鲍鱼壳6~10小时,以去除鲍鱼壳的表层物质;
S3:干燥:将鲍鱼壳沥干后置于恒温鼓风干燥箱中,调节温度至90℃~100℃干燥30~50分钟;
S4:粉碎:将干燥后的鲍鱼壳进行粉碎研磨,过滤获得鲍鱼壳粉末;
S5:提取:加水浸泡,并于60℃~85℃下充分搅拌提取,搅拌提取时间为1-5小时,抽滤去残渣;提取2-3次,将上清液合并;
S6:萃取:将步骤S5获得的上清液按1:1~1:3(w/v)比加入柠檬酸水溶液,在高温高压下萃取20min~60min,冷却至室温后用200目~400目尼龙过滤网布过滤得到鲍鱼壳萃取液和残渣;
S7:水溶性物质的制备:将步骤S6获得的鲍鱼壳萃取液利用活性炭处理后,通过真空浓缩至固形物含量为10%~20%,添加β-环糊精,喷雾干燥制备成鲍鱼壳水溶性提取物;
S8:静置:在获得的鲍鱼壳水溶性提取物加入三倍体积的无水乙醇,保持温度为4°C的条件下静置1-12小时;
S9:离心:将静置后的溶液放置在离心机上,以10000rpm离心10min;离心完成后收集沉淀,对上清液重复以上离心分离步骤2-3次,将沉淀汇总后收集;
S10:溶解:将通过步骤S9获取的沉淀用无水乙醇清洗,然后用蒸馏水溶解至完全重溶得到鲍鱼壳水溶性多糖粗提物;
S11:获取蛋白溶液:取步骤S10中获得重溶的粗多糖提取物利用三氯乙酸法脱蛋白,每10ml重溶的粗多糖提取物加入体积浓度为5%-15%三氯乙酸溶液5ml,摇匀于4°C的条件下静置1-12小时,将静置后的溶液利用离心机离心,以10000rpm离心10min,上清液即为去蛋白溶液;
S12:透析:取步骤S11中获得去蛋白水溶液用1KD膜流水透析24-72小时除盐和色素后;
S13:干燥:将透析后的溶液于-60°C~-80°C真空冷冻干燥得到抗氧化水溶性物质,即水溶性多糖。
2.根据权利要求1所述的一种鲍鱼壳抗氧化性水溶性多糖提取方法,其特征在于:在步骤S6中,所述的柠檬酸水溶液质量浓度为0.1%~0.5%;高温高压指的是温度为170°C~260°C,压力为1.0MPa~5.0MPa。
3.根据权利要求1所述的一种鲍鱼壳抗氧化性水溶性多糖提取方法,其特征在于:所述的鲍鱼壳为杂色鲍、皱纹盘鲍、羊鲍、澳洲鲍、耳鲍和白鲍等的贝壳。
4.根据权利要求1所述的一种鲍鱼壳抗氧化性水溶性多糖提取方法,其特征在于:所述抗氧化水溶性物质,即水溶性多糖由甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、半乳糖醛酸、岩藻糖或阿拉伯糖中的一种或多种形成的糖单元组成。
5.根据权利要求1所述的一种鲍鱼壳抗氧化性水溶性多糖提取方法,其特征在于:在步骤S4中,所述鲍鱼壳粉末采用200目滤网进行筛选。
6.根据权利要求1所述的一种鲍鱼壳抗氧化性水溶性多糖提取方法,其特征在于:在步骤S2中,所述醋酸溶液的浓度为36%~38%。
7.根据权利要求1所述的一种鲍鱼壳抗氧化性水溶性多糖提取方法,其特征在于:在步骤S7中,所述β-环糊精的浓缩液体积为的20%~30%。
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