CN107417804A - 食用菌多糖提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了食用菌多糖提取方法，包括以下提取步骤：原料粉碎；热水浸提；重复浸提；离心；浓缩；醇沉；去蛋白；醇析；料液稀释；喷雾干燥；干燥粉的收集。本发明制备方法，以去离子水作为提取剂，采用离心、醇沉、喷雾干燥等方法来提取多糖，保证了食用菌多糖的提取效率和食用菌的利用率；采用浸提、浓缩、离心等物理方法提取，将整个过程温度控制，防止高温破坏多糖结构，工艺合理，可操作性强，易实现规模化生产。
Description
技术领域
本发明涉及食用菌加工领域，尤其涉及食用菌多糖的提取方法。
背景技术
食用菌是指可供人类食用的大型真菌。具体地说食用菌是指能形成大型的肉质(或胶质)子实体或菌核类组织并能供人们食用或药用的一类大型真菌。常见的食用菌有秀珍菇、猴头菇、姬松茸、杏鲍菇、红菇等等；食用菌以其白色或浅色的菌丝体在含有丰富有机质的场所生长。条件适宜时形成子实体，菌丝体和子实体是一般食用菌生长发育的两个主要阶段。各种食用菌是根据子实体的形态如：菇形、菇盖、菌褶或子实层体、孢子和菇柄的特征，再结合生态、生理等的差别来分类识别。食用菌有非常多的用途，最主要的就是它的食用价值和药用价值，食用菌含有丰富的蛋白质和氨基酸，其含量是一般蔬菜和水果的几倍到几十倍，部分食用菌还含有维生素和矿质元素，可以促进对钙的吸收，增强人体体质；食用菌中还含有高分子多糖、β－葡萄糖和RNA复合体、等对维护人体健康有重要的利用价值。可以起到抗癌、抗菌、抗病毒、降血压血脂等作用。因此，对于食用菌的多糖提取至关重要。但是目前市场上的食用菌多糖产品均为单一或微少的物质组成，所起到的功效相对单一。例如香菇多糖、灵芝多糖、灰树花多糖、虫草多糖等，在现有的公开文件中，多糖的制备工艺也是针对单一的产品而提出的，例如公开号为CN101244093A中国发明专利专利“一种香菇多糖口服液的制备方法”、公开号为CN1307314C“酶解制备灵芝多糖的方法”等，这些方法仅针对单一的产品，而且所提取的多糖含量低，提取效率低，大大减少了食用菌多糖的利用率。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于克服现有技术的不足，提供一种功效全面、多糖含量高、多糖提取效率高、制备工艺合理，可操作性强的食用菌多糖提取方法。
为解决上述技术问题，本发明的技术解决方案是：
食用菌多糖提取方法，包括以下提取步骤：
1)原料粉碎：取烘干的食用菌用粉碎机粉碎成粉末状；
2)热水浸提：称取粉末，加入去离子水，于水浴锅中浸提；
3)重复浸提：取出浸提液，沉淀物用加入去离子水，于水浴锅中浸提的方法重新提取，再将两次浸提液混合；
4)离心：用离心机对混合的浸提液进行离心，提取上清液或用滤布直接过滤去掉残渣；
5)浓缩：将离心后的上清液，置于旋转蒸发器里，100℃温度下进行浓缩；
6)醇沉：在步骤5制备的浓缩液里加无水乙醇，4℃环境下沉淀12小时，5000r/min离心15min取沉淀物，得到水溶性粗提物；
7)去蛋白：粗提物加水溶解，再加入三氯甲烷-正丁醇混合液，剧烈振荡，分液漏斗静置20～30min使其分层，去除下层有机溶剂-蛋白相，上清液用相同方法反复脱蛋白3到5次；
8)醇析：将去蛋白后的上清液加无水乙醇，4℃沉淀12小时。5000r/min离心15min取沉淀物；
9)料液稀释：取定量的醇析沉淀物，用蒸馏水稀释，加热至60℃左右备用；
10)喷雾干燥：开启喷雾干燥器开关，打开空压泵，设定好进料量及进料温度，调节压力，待出风温度稳定后把进料吸管放进料液开始喷雾干燥；
11)干燥粉的收集：料液喷完全后用蒸馏水清洗下进料管，继续喷5分钟后关机，卸下料罐，收集于密闭容器内，装满放干燥剂后立即封口保存。
所述的步骤2)中粉末质量为10g，去离子水体积为400ml，水浴锅的温度为90℃，浸提时间为4小时。
所述的步骤4)的离心方法是在5000r/min转速离心15min。
所述的步骤5)中的浓缩后体积为浸提液的20％。
所述的步骤7)加水溶解时水的质量为粗提物的2倍，所述的混合液的量是溶液体积的1/5，所述的三氯甲烷和正丁醇的比例是5:1。
所述的步骤8)的无水乙醇的体积是上清液的三倍。
所述的步骤9)稀释至折光为5停止稀释。
与现有技术相比，本发明具有如下优点：
1.该制备方法，以去离子水作为提取剂，采用离心、醇沉、喷雾干燥等方法来提取多糖，保证了食用菌多糖的提取效率和食用菌的利用率；
2.采用浸提、浓缩、离心等物理方法提取，将整个过程温度控制，防止高温破坏多糖结构，工艺合理，可操作性强，易实现规模化生产。
具体实施方式
下面以实施例对本发明作进一步说明，但本发明并不局限于这些实施例。
实施例1：
食用菌多糖提取方法，包括以下提取步骤：
1)原料粉碎：取烘干的香菇用粉碎机粉碎成粉末状；
2)热水浸提：称取10g粉末，加入400ml去离子水，于90℃水浴锅中浸提4h；
3)重复浸提：取出浸提液，沉淀物用加入去离子水，于水浴锅中浸提的方法重新提取，再将两次浸提液混合；
4)离心：用离心机对混合的浸提液在5000r/min转速离心15min，提取上清液或用滤布直接过滤去掉残渣；
5)浓缩：将离心后的上清液，置于旋转蒸发器里，100℃温度下进行浓缩，浓缩至体积为浸提液的20％；
6)醇沉：在步骤5制备的浓缩液里加无水乙醇，4℃环境下沉淀12小时，5000r/min离心15min取沉淀物，得到水溶性粗提物；
7)去蛋白：粗提物加水溶解，水的质量为粗提物的2倍，再加入1/5溶液体积的三氯甲烷-正丁醇混合液，三氯甲烷和正丁醇的比例是5:1，剧烈振荡，分液漏斗静置20～30min使其分层，去除下层有机溶剂-蛋白相，上清液用相同方法反复脱蛋白3到5次；相同方法指加入1/5溶液体积的三氯甲烷-正丁醇混合液，三氯甲烷和正丁醇的比例是5:1，剧烈振荡，分液漏斗静置20～30min使其分层，去除下层有机溶剂-蛋白相；
8)醇析：将去蛋白后的上清液加三倍体积的无水乙醇，4℃沉淀12小时。5000r/min离心15min取沉淀物；
9)料液稀释：取定量的醇析沉淀物，用蒸馏水稀释至折光为5停止稀释，加热至60℃左右备用；
10)喷雾干燥：开启喷雾干燥器开关，打开空压泵，设定好进料量及进料温度，调节压力，待出风温度稳定后把进料吸管放进料液开始喷雾干燥；
11)干燥粉的收集：料液喷完全后用蒸馏水清洗下进料管，继续喷5分钟后关机，卸下料罐，收集于密闭容器内，装满放干燥剂后立即封口保存。
用实施例一提取香菇多糖，提取率高于现有技术，易实现规模化生产。
实施例2：
食用菌多糖提取方法，包括以下提取步骤：
1)原料粉碎：取烘干的杏鲍菇用粉碎机粉碎成粉末状；
2)热水浸提：称取10g粉末，加入400ml去离子水，于90℃水浴锅中浸提4h；
3)重复浸提：取出浸提液，沉淀物用加入去离子水，于水浴锅中浸提的方法重新提取，再将两次浸提液混合；
4)离心：用离心机对混合的浸提液在5000r/min转速离心15min，提取上清液或用滤布直接过滤去掉残渣；
5)浓缩：将离心后的上清液，置于旋转蒸发器里，100℃温度下进行浓缩，浓缩至体积为浸提液的20％；
6)醇沉：在步骤5制备的浓缩液里加无水乙醇，4℃环境下沉淀12小时，5000r/min离心15min取沉淀物，得到水溶性粗提物；
7)去蛋白：粗提物加水溶解，水的质量为粗提物的2倍，再加入1/5溶液体积的三氯甲烷-正丁醇混合液，三氯甲烷和正丁醇的比例是5:1，剧烈振荡，分液漏斗静置20～30min使其分层，去除下层有机溶剂-蛋白相，上清液用相同方法反复脱蛋白3到5次；
8)醇析：将去蛋白后的上清液加三倍体积的无水乙醇，4℃沉淀12小时。5000r/min离心15min取沉淀物；
9)料液稀释：取定量的醇析沉淀物，用蒸馏水稀释至折光为5停止稀释，加热至60℃左右备用；
10)喷雾干燥：开启喷雾干燥器开关，打开空压泵，设定好进料量及进料温度，调节压力，待出风温度稳定后把进料吸管放进料液开始喷雾干燥；
11)干燥粉的收集：料液喷完全后用蒸馏水清洗下进料管，继续喷5分钟后关机，卸下料罐，收集于密闭容器内，装满放干燥剂后立即封口保存。
用实施例二的方法提取杏鲍菇的多糖，提取率可以达到2％-4％，远远高于其他多糖提取方法，大大提高了利用率。
实施例3：
食用菌多糖提取方法，包括以下提取步骤：
1)原料粉碎：取烘干的虫草用粉碎机粉碎成粉末状；
2)热水浸提：称取12g粉末，加入400ml去离子水，于90℃水浴锅中浸提4h；
3)重复浸提：取出浸提液，沉淀物用加入去离子水，于水浴锅中浸提的方法重新提取，再将两次浸提液混合；
4)离心：用离心机对混合的浸提液在5000r/min转速离心15min，提取上清液或用滤布直接过滤去掉残渣；
5)浓缩：将离心后的上清液，置于旋转蒸发器里，100℃温度下进行浓缩，浓缩至体积为浸提液的20％；
6)醇沉：在步骤5制备的浓缩液里加无水乙醇，4℃环境下沉淀12小时，5000r/min离心15min取沉淀物，得到水溶性粗提物；
7)去蛋白：粗提物加水溶解，水的质量为粗提物的2倍，再加入1/5溶液体积的三氯甲烷-正丁醇混合液，三氯甲烷和正丁醇的比例是5:1，剧烈振荡，分液漏斗静置20～30min使其分层，去除下层有机溶剂-蛋白相，上清液用相同方法反复脱蛋白3到5次；
8)醇析：将去蛋白后的上清液加三倍体积的无水乙醇，4℃沉淀12小时。5000r/min离心15min取沉淀物；
9)料液稀释：取定量的醇析沉淀物，用蒸馏水稀释至折光为5停止稀释，加热至60℃左右备用；
10)喷雾干燥：开启喷雾干燥器开关，打开空压泵，设定好进料量及进料温度，调节压力，待出风温度稳定后把进料吸管放进料液开始喷雾干燥；
11)干燥粉的收集：料液喷完全后用蒸馏水清洗下进料管，继续喷5分钟后关机，卸下料罐，收集于密闭容器内，装满放干燥剂后立即封口保存。
用实施例三的方法提取虫草的多糖，提取率可以达到2％-3％，远远高于其他多糖提取方法，大大提高了利用率，同时可以实现虫草多糖的规模化生产。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明的技术范围作任何限制，故但凡依本发明的权利要求和说明书所做的变化或修饰，皆应属于本发明专利涵盖的范围之内。
Claims (7)
1.食用菌多糖提取方法，包括以下提取步骤：
1)原料粉碎：取烘干的食用菌用粉碎机粉碎成粉末状；
2)热水浸提：称取粉末，加入去离子水，于水浴锅中浸提；
3)重复浸提：取出浸提液，沉淀物用加入去离子水，于水浴锅中浸提的方法重新提取，再将两次浸提液混合；
4)离心：用离心机对混合的浸提液进行离心，提取上清液或用滤布直接过滤去掉残渣；
5)浓缩：将离心后的上清液，置于旋转蒸发器里，100℃温度下进行浓缩；
6)醇沉：在步骤5制备的浓缩液里加无水乙醇，4℃环境下沉淀12小时，然后用离心机以5000r/min离心15min取沉淀物，得到水溶性粗提物；
7)去蛋白：粗提物加水溶解，再加入三氯甲烷-正丁醇混合液，剧烈振荡，分液漏斗静置20～30min使其分层，去除下层有机溶剂-蛋白相，上清液用加入三氯甲烷-正丁醇混合液，剧烈振荡，分液漏斗静置20～30min使其分层，去除下层有机溶剂-蛋白相的方法反复脱蛋白3到5次；
8)醇析：将去蛋白后的上清液加无水乙醇，4℃沉淀12小时，然后用离心机以5000r/min离心15min取沉淀物；
9)料液稀释：取定量的醇析沉淀物，用蒸馏水稀释，加热至60℃左右备用；
10)喷雾干燥：开启喷雾干燥器开关，打开空压泵，设定好进料量及进料温度，调节压力，待出风温度稳定后把进料吸管放进料液开始喷雾干燥；
11)干燥粉的收集：料液喷完全后用蒸馏水清洗下进料管，继续喷5分钟后关机，卸下料罐，收集于密闭容器内，装满放干燥剂后立即封口保存。
2.根据权利要求1所述的食用菌多糖提取方法，其特征在于：所述的步骤2)中粉末质量为10g，去离子水体积为400ml，水浴锅的温度为90℃，浸提时间为4小时。
3.根据权利要求1所述的食用菌多糖提取方法，其特征在于：所述的步骤4)的离心方法是在5000r/min转速离心15min。
4.根据权利要求1所述的食用菌多糖提取方法，其特征在于：所述的步骤5)中的浓缩后体积为浸提液的20％。
5.根据权利要求1所述的食用菌多糖提取方法，其特征在于：所述的步骤7)加水溶解时水的质量为粗提物的2倍，所述的混合液的量是溶液体积的1/5，所述的三氯甲烷和正丁醇的比例是5:1。
6.根据权利要求1所述的食用菌多糖提取方法，其特征在于：所述的步骤8)的无水乙醇的体积是上清液的三倍。
7.根据权利要求1所述的食用菌多糖提取方法，其特征在于：所述的步骤9)稀释至折光为5停止稀释。
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