CN110818809A - 一种食用菌复合多糖的制备工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种食用菌复合多糖的制备工艺，属于食用菌加工技术领域；称取经过研磨的食用菌干粉5g于烧杯中，加入100mL蒸馏水，用5mol/L盐酸水解，料液比为1：20，加热6h；经过离心取出上清液，加入活性炭，在60℃水浴振荡半小时左右脱色完全.加入混合试剂,三氯甲烷∶正丁醇，去除粗多糖中的蛋白质，并用葡聚糖凝胶对提取液中复合多糖进行纯化；采用类似实验的方法制得多糖锌的配合物，工艺简单，操作方便，且后续进行多种实验来确认配合物结合率与温度等参数，可得到最佳反应条件，从而可提高食用菌复合多糖制备的品质。
Description
技术领域
本发明涉及一种食用菌复合多糖的制备工艺，属于食用菌加工技术领域。
背景技术
香菇、银耳、猴头菇组合提取的复合多糖具有改善胃痛、胃胀的作用；灰树花、鸡腿菇组合提取的复合多糖具有辅助降血压、降血糖的作用。复合多糖清除自由基的能力高于单一提取的食用菌多糖。
调节机体免疫作用真菌多糖对机体免疫调节作用，主要是通过单核巨噬细胞、细胞免疫系统和体液免疫系统几个层次的作用而提高机体免疫力。一些真菌多糖(银耳多糖、香菇多糖、云芝多糖等)可增强羊红细胞致敏正常小鼠的PFE反应，从而提高体液免疫反应，促进体细胞免疫和体液免疫功能。
食用菌多糖具有广泛的应用价值，如香菇中含有人体所需的多糖，多糖具有极其重要的生物功能，多糖与免疫功能的调节、细胞与细胞的识别、细胞间物质的转运、癌症的诊断与治疗等都有着密切的关系。
因此食用菌复合多糖的制备工艺是目前研究的课题。
发明内容
本发明的目的在于针对现有技术的缺陷和不足，提供一种设计合理、操作方便的食用菌复合多糖的制备工艺。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：所述食用菌复合多糖的制备工艺包含以下步骤：
1、称取经过研磨的食用菌(香菇、元菇)干粉5g于烧杯中，加入100mL蒸馏水，用5mol/L盐酸水解，料液比为1：20，加热6h，静置三小时左右；
2、在微波功率为80％条件下微波处理四分钟，提取混合多糖；
3、经过离心取出上清液，加入活性炭，在60℃水浴振荡半小时左右脱色完全.加入混合试剂(三氯甲烷∶正丁醇)，去除粗多糖中的蛋白质，并用葡聚糖凝胶对提取液中复合多糖进行纯化；
4、将纯化液经过3000r/min离心，冷冻干燥，制得混合多糖，
5、取一定质量比的复合多糖和醋酸锌混合溶于200mL水中，控制溶液的反应温度，调节ph值，反应10-30分钟后，经4000r/min离心10分钟左右，取上清液做减压蒸馏；
6、醇沉、把减压蒸馏后剩余少量液体预冻，进行冷冻干燥；
7、干燥后称量配合物质量；
8、水解分离，得到多糖锌的配合物。
作为优选，所述步骤1中静置时慢慢降温，三小时候确保温度控制在25摄氏度左右。
作为优选，所述步骤3中混合试剂为三氯甲烷∶正丁醇＝4：1。
本发明中复合多糖配合温度的选测测定方法为：分别称量6份一定质量比的复合多糖和醋酸锌混合溶于200mL水中，调节溶液pH9.0，控制反应时间为65min，并控制反应温度分别为30、40、50、60、70、80℃.醇沉、把减压蒸馏后剩余少量液体预冻，进行冷冻干燥，干燥后称量配合物质量，而后水解分离，得到多糖锌的配合物.而后按照复合多糖配合结合率的检测方法检测最佳温度。
采用上述方法后，本发明有益效果为：本发明所述的一种食用菌复合多糖的制备工艺，采用类似实验的方法制得多糖锌的配合物，工艺简单，操作方便，且后续进行多种实验来确认配合物结合率与温度等参数，可得到最佳反应条件，从而可提高食用菌复合多糖制备的品质。
具体实施方式
所述食用菌复合多糖的制备工艺包含以下步骤：
1、称取经过研磨的香菇干粉5g于烧杯中，加入100mL蒸馏水，用5mol/L盐酸水解，料液比为1：20，加热6h，静置三小时左右；
2、在微波功率为80％条件下微波处理四分钟，提取混合多糖；
3、经过离心取出上清液，加入活性炭，在60℃水浴振荡半小时左右脱色完全.加入混合试剂(三氯甲烷∶正丁醇＝4：1)，去除粗多糖中的蛋白质，并用葡聚糖凝胶对提取液中复合多糖进行纯化；
4、将纯化液经过3000r/min离心，冷冻干燥，制得混合多糖。
5、取一定质量比的复合多糖和醋酸锌混合溶于200mL水中，控制溶液的反应温度，调节ph值，反应10-30分钟后，经4000r/min离心10分钟左右，取上清液做减压蒸馏；
6、醇沉、把减压蒸馏后剩余少量液体预冻，进行冷冻干燥；
7、干燥后称量配合物质量；
8、水解分离，得到多糖锌的配合物。
本具体实施方式中复合多糖配合结合率的检测方法：
a、吸取水样10mL于25mL比色管中，如水样锌含量超过5mg，可取适量水样，用纯水稀释至10mL；
b、另取比色管8支，依次加入1mg/mL锌，标准使用溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0和5.0mL，各加纯水至10mL，
c、向比色管中各加5ml乙酸－乙酸纳缓冲溶液，混匀再各加1mL硫代硫酸钠溶液，混匀，
d、然后加入2.5mL双硫腙溶液，摇匀，静置半小时左右即可测得。
本发明中复合多糖配合温度的选测测定方法为：
Ⅰ、分别称量6份一定质量比的复合多糖和醋酸锌混合溶于200mL水中，调节溶液pH9.0，控制反应时间为65min，并控制反应温度分别为30、40、50、60、70、80℃；
Ⅱ、醇沉、把减压蒸馏后剩余少量液体预冻，进行冷冻干燥；
III、干燥后称量配合物质量；
Ⅳ、水解分离，得到多糖锌的配合物；
Ⅴ、按照复合多糖配合结合率的检测方法检测最佳温度。
香菇中复合多糖的分子质量的确定方法：
精确称取不同分子质量的葡聚糖标准品0.05g，用流动相溶解并定容至5mL.最终质量浓度为10mg/mL，分别进样10μL，以不同分子质量标准葡聚糖的分离保留时间与相应分子的质量建立分子质量对数值绘制标准坐标曲线待测样品经分离后得到不同分子质量峰的保留时间值，通过分子质量标准工作曲线即可计算其多糖分子质量。
本具体实施方式所述的一种食用菌复合多糖的制备工艺，采用类似实验的方法制得多糖锌的配合物，工艺简单，操作方便，且后续进行多种实验来确认配合物结合率与温度等参数，可得到最佳反应条件，从而可提高食用菌复合多糖制备的品质。
以上所述，仅用以说明本发明的技术方案而非限制，本领域普通技术人员对本发明的技术方案所做的其它修改或者等同替换，只要不脱离本发明技术方案的精神和范围，均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。
Claims (6)
1.一种食用菌复合多糖的制备工艺，其特征在于：所述食用菌复合多糖的制备工艺包含以下步骤：
(1)、称取经过研磨的食用菌干粉5g于烧杯中，加入100mL蒸馏水，用5mol/L盐酸水解，料液比为1：20，加热6h，静置三小时左右；
(2)、在微波功率为80％条件下微波处理四分钟，提取混合多糖；
(3)、经过离心取出上清液，加入活性炭，在60℃水浴振荡半小时左右脱色完全.加入混合试剂,三氯甲烷∶正丁醇，去除粗多糖中的蛋白质，并用葡聚糖凝胶对提取液中复合多糖进行纯化；
(4)、将纯化液经过3000r/min离心，冷冻干燥，制得混合多糖，
(5)、取一定质量比的复合多糖和醋酸锌混合溶于200mL水中，控制溶液的反应温度，调节ph值，反应10-30分钟后，经4000r/min离心10分钟左右，取上清液做减压蒸馏；
(6)、醇沉、把减压蒸馏后剩余少量液体预冻，进行冷冻干燥；
(7)、干燥后称量配合物质量；
(8)、水解分离，得到多糖锌的配合物。
2.根据权利要求1所述的一种食用菌复合多糖的制备工艺，其特征在于：所述步骤(1)中静置时慢慢降温，三小时候确保温度控制在25摄氏度左右。
3.根据权利要求1所述的一种食用菌复合多糖的制备工艺，其特征在于：所述步骤(3)中混合试剂为三氯甲烷∶正丁醇＝4：1。
4.根据权利要求1所述的一种食用菌复合多糖的制备工艺，其特征在于:
复合多糖配合结合率的检测方法：
(a)、吸取水样10mL于25mL比色管中，如水样锌含量超过5mg，可取适量水样，用纯水稀释至10mL；
(b)、另取比色管8支，依次加入1mg/mL锌，标准使用溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0和5.0mL，各加纯水至10mL，
(c)、向比色管中各加5ml乙酸－乙酸纳缓冲溶液，混匀再各加1mL硫代硫酸钠溶液，混匀，
(d)、然后加入2.5mL双硫腙溶液，摇匀，静置半小时左右即可测得。
5.根据权利要求1所述的一种食用菌复合多糖的制备工艺，其特征在于：所述复合多糖配合温度的选测测定方法为：
(Ⅰ)、分别称量6份一定质量比的复合多糖和醋酸锌混合溶于200mL水中，调节溶液pH9.0，控制反应时间为65min，并控制反应温度分别为30、40、50、60、70、80℃；
(Ⅱ)、醇沉、把减压蒸馏后剩余少量液体预冻，进行冷冻干燥；
(III)、干燥后称量配合物质量；
(Ⅳ)、水解分离，得到多糖锌的配合物；
(Ⅴ)、按照复合多糖配合结合率的检测方法检测最佳温度。
6.根据权利要求1所述的一种食用菌复合多糖的制备工艺，其特征在于：香菇中复合多糖的分子质量的确定方法：
精确称取不同分子质量的葡聚糖标准品0.05g，用流动相溶解并定容至5mL.最终质量浓度为10mg/mL，分别进样10μL，以不同分子质量标准葡聚糖的分离保留时间与相应分子的质量建立分子质量对数值绘制标准坐标曲线待测样品经分离后得到不同分子质量峰的保留时间值，通过分子质量标准工作曲线即可计算其多糖分子质量。
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Cited By (2)
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|---|---|---|---|---|
| CN114521570A (zh) * | 2022-01-17 | 2022-05-24 | 郑州轻工业大学 | 一种香菇多糖抗菌复合物及其制备方法 |
| CN114891131A (zh) * | 2022-06-24 | 2022-08-12 | 贵州中医药大学 | 一种粉条儿菜多糖的提取纯化工艺 |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107417804A (zh) * | 2017-09-29 | 2017-12-01 | 福建绿宝食品集团有限公司 | 食用菌多糖提取方法 |
| CN108250317A (zh) * | 2018-02-22 | 2018-07-06 | 广州市上品荟科技发展有限公司 | 一种从食用菌边角料中提取纯化活性蘑菇多糖的方法 |
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