CN104403019A - 一种复合食用菌多糖的提取方法 - Google Patents
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Abstract
一种复合食用菌多糖的提取方法，所述的提取方法的具体步骤为：步骤1、材料预处理；步骤2、微波提取；步骤3、热水浸提；步骤4、超声提取；步骤5、制备洗脱液；步骤6、制备截留液；步骤7、浓缩；步骤8、醇沉；步骤9、离心；步骤10、干燥。本发明采用热水浸提、超声提取和微波提取三种方法对复合食用菌多糖进行提取，更好的保留了多糖的结构，且使多糖的提取率与现有方法相比达到最大。
Description
技术领域
本发明涉及一种多糖提取方法，特别是一种复合食用菌多糖的提取方法。
背景技术
食用菌是指子实体硕大、可供食用的蕈菌（大型真菌），通称为蘑菇。中国已知的食用菌有350多种，其中多属担子菌亚门，常见的有：香菇、草菇、蘑菇、木耳、银耳、猴头、竹荪、松口蘑（松茸）、口蘑、红菇和牛肝菌等。
食用菌不仅味美，而且营养丰富，常被人们称作健康食品。食用菌中含有生物活性物质如：高分子多糖、β－葡萄糖和RNA复合体、天然有机锗、核酸降解物、cAMP和三萜类化合物等对维护人体健康有重要的利用价值，食用菌的药用保健价值有：①抗癌作用：食用菌的多糖体，能刺激抗体的形成，提高并调整机体内部的防御能力。能降低某些物质诱发肿瘤的发生率，并对多种化疗药物有增效作用。此外栗蘑中富含的有机硒，可作补硒食品，若长期食用，几乎可以防止一切癌变。②抗菌、抗病毒作用。③降血压、降血脂、抗血栓、抗心律失常、强心等。④健胃、助消化作用。⑤止咳平喘、祛痰作用。⑥利胆、保肝、解毒。⑦降血糖。⑧通便利尿。⑨免疫调节。
食药用菌多糖是继核酸和蛋白质之后的另一种有待深入研究的生物大子，食药用真菌多糖是主要存在于菌丝体细胞内分泌到细胞外的大分子化合物，是很好的免疫调节增强剂，可以从根本上提高人体免疫功能，起到扶正固本强身保健的功能。
本发明选取常见且营养丰富、多糖含量高的猴头菇、香菇、黑木耳、姬松茸四种食用菌为原料，进行多糖的提取，这四种食用菌多糖是作为保健食品原料的热门选择，本发明同时进行多糖的提取，避免了单独提取的繁琐工序，也使提取的多糖结构类型丰富、达到复合功能强大的作用。
本发明采用热水浸提、超声提取和微波提取三种方法对复合食用菌多糖进行提取，更好的保留了多糖的结构，且使多糖的提取率与现有方法相比达到最大。
发明内容
本发明提供了一种复合食用菌多糖的提取方法。
本发明的目的通过以下技术方案来实现：一种复合食用菌多糖的提取方法，所述的提取方法的具体步骤为：
步骤1、材料预处理：取猴头菇、香菇、黑木耳、姬松茸子实体，分别使用粉碎机粉碎，粉碎后过70-90目筛，按1:1:1:1的比例称重混合，得到食用菌混合体；
步骤2、微波提取：取步骤1中食用菌混合体，按食用菌混合体与水l：10-20的重量配比，加水浸泡2-4小时，然后对浸泡过的食用菌混合体进行微波处理5-20min，调节微波发生器的功率为600-1000w，然后进行固液分离，得到固形物、提取液；
步骤3、热水浸提：取步骤2中固形物，按固形物与水l：10- 20的重量配比，将固形物置于80-90℃的热水中浸提2-6小时，进行固液分离，得到固形物、提取液；
步骤4、超声提取：取步骤3中固形物，按固形物与水l：10- 20的重量配比，将固形物置于20-40℃的热水中，超声提取10-60分钟，进行固液分离，提取液备用；
步骤5、制备洗脱液：合并三次提取液，用稀盐酸调节混合提取液pH为4.0～4.5，上层析柱，柱内填充介质为HD-3树脂，4～5BV/h流速下层析脱色脱蛋白，收集6～7BV洗脱液；
步骤6、制备截留液：调节洗脱液pH为6.5～7.5，在0.1～0.25Mpa压力条件下，用50KD的超滤膜和10KD的陶瓷膜进行超滤，两次收集截留液；
步骤7、浓缩：将步骤6得到的截留液混合，然后置于旋转蒸发仪内，在50-60℃下进行减压浓缩，浓缩至原体积的1/4，得到浓缩液；
步骤8、醇沉：采用80-90%的食用乙醇，按浓缩液与乙醇1：2的比例进行搅拌混合，多糖沉淀于容器基部；
步骤9、离心：将加入乙醇后的浓缩液置1-4℃的低温下静置18-30小时后，以2500-4000r/min的转速离心20-30min，收集离心杯底部多糖；
步骤10、干燥：将收集的多糖置于电热真空干燥箱内，在40-70℃的温度条件下真空干燥，得到一种复合食用菌多糖。
本发明的有益效果：
（1）本发明采用热水浸提、超声提取和微波提取三种方法法对复合食用菌多糖进行提取，此种方法快速高效。
（2）应用树脂层析柱进行脱色脱蛋白，除去了蛋白质等分子杂质，使提取的多糖含量更高、更纯。
（3）本发明同时提取猴头菇、香菇、黑木耳、姬松茸四种食用菌的多糖物质，避免单独提取的复杂工序，使获得的多糖含量高，种类全。
具体实施方式
实施例1
1)材料预处理：取猴头菇、香菇、黑木耳、姬松茸子实体，分别经粉碎，过80目筛，按1:1:1:1比例称重混合，待提取；
2)微波提取：取步骤1）中食用菌混合体，按重量配比l：10加水浸泡4小时，调节微波发生器的功率为600w，对上述浸泡过的食用菌混合体进行微波处理10min后进行固液分离，固形物进行后续提取，液体待用；
3)热水浸提：取步骤2）中固形物，按重量配比l：10加入到80-90℃的热水内浸提2小时，进行固液分离，固形物进行后续提取，液体待用；
4)超声提取：取步骤3）中固形物，按重量配比1：10加入到20-40℃的热水中，超声提取20分钟；进行固液分离，液体待用；
5) 制备洗脱液：合并三次提取液，用稀盐酸调节滤液pH为4.0～4.5，上层析柱，柱内填充介质为HD-3树脂，4～5BV/h流速下层析脱色脱蛋白，收集6～7BV洗脱液；
6) 制备截留液：调节洗脱液pH为6.5～7.5，在0.1～0.25Mpa压力下，用超滤膜为50KD和10KD的陶瓷膜进行超滤，收集中间截留液；
7)浓缩：将上述步骤6）得到的混合液混合后置旋转蒸发仪内，在50-60℃进行减压浓缩，浓缩至原体积的1/4即可；
8)醇沉：采用80-90%的食用乙醇，按浓缩液与乙醇1：2的比例进行搅拌混合，多糖沉淀于容器基部；
9)离心：将加入乙醇后的浓缩液置1-4℃的低温下静置18-30小时后，以4000r/min的转速离心20-30min，收集离心杯底部多糖；
10)干燥：将收集的多糖置电热真空干燥箱内，在40-70℃以下真空干燥，得到复合食用菌多糖。
提取的复合食用菌多糖得率25.68%。
实施例2
1)材料预处理：取猴头菇、香菇、黑木耳、姬松茸子实体，分别经粉碎，过80目筛，按比例称重混合，待提取；
2)微波提取：取步骤1）中食用菌混合体，按重量配比l：10加水浸泡3小时，调节微波发生器的功率为600w，对上述浸泡过的食用菌混合体进行微波处理15min后进行固液分离，固形物进行后续提取，液体待用；
3)热水浸提：取步骤2）中固形物，按重量配比l：10加入到80-90℃的热水内浸提3小时，进行固液分离，固形物进行后续提取，液体待用；
4)超声提取：取步骤3）中固形物，按重量配比1：10加入到20-40℃的热水中，超声提取30分钟；进行固液分离，液体待用；
5) 制备洗脱液：合并三次提取液，用稀盐酸调节滤液pH为4.0～4.5，上层析柱，柱内填充介质为HD-3树脂，4～5BV/h流速下层析脱色脱蛋白，收集6～7BV洗脱液；
6) 制备截留液：调节洗脱液pH为6.5～7.5，在0.1～0.25Mpa压力下，用超滤膜为50KD和10KD的陶瓷膜进行超滤，收集中间截留液；
7)浓缩：将上述步骤6）得到的混合液混合后置旋转蒸发仪内，在50-60℃进行减压浓缩，浓缩至原体积的1/4即可；
6)醇沉：采用80-90%的食用乙醇，按浓缩液与乙醇1：2的比例进行搅拌混合，多糖沉淀于容器基部；
7)离心：将加入乙醇后的浓缩液置1-4℃的低温下静置18-30小时后，以4000r/min的转速离心20- 30min，收集离心杯底部多糖；
8)干燥：将收集的多糖置电热真空干燥箱内，在40-70℃以下真空干燥，得到复合食用菌多糖。
提取的复合食用菌多糖得率29.65%。
Claims (1)
1.一种复合食用菌多糖的提取方法，其特征在于：所述的提取方法的具体步骤为：
步骤1、材料预处理：取猴头菇、香菇、黑木耳、姬松茸子实体，分别使用粉碎机粉碎，粉碎后过70-90目筛，按1:1:1:1的比例称重混合，得到食用菌混合体；
步骤2、微波提取：取步骤1中食用菌混合体，按食用菌混合体与水l：10-20的重量配比，加水浸泡2-4小时，然后对浸泡过的食用菌混合体进行微波处理5-20min，调节微波发生器的功率为600-1000w，然后进行固液分离，得到固形物、提取液；
步骤3、热水浸提：取步骤2中固形物，按固形物与水l：10- 20的重量配比，将固形物置于80-90℃的热水中浸提2-6小时，进行固液分离，得到固形物、提取液；
步骤4、超声提取：取步骤3中固形物，按固形物与水l：10- 20的重量配比，将固形物置于20-40℃的热水中，超声提取10-60分钟，进行固液分离，提取液备用；
步骤5、制备洗脱液：合并三次提取液，用稀盐酸调节混合提取液pH为4.0～4.5，上层析柱，柱内填充介质为HD-3树脂，4～5BV/h流速下层析脱色脱蛋白，收集6～7BV洗脱液；
步骤6、制备截留液：调节洗脱液pH为6.5～7.5，在0.1～0.25Mpa压力条件下，用50KD的超滤膜和10KD的陶瓷膜进行超滤，两次收集截留液；
步骤7、浓缩：将步骤6得到的截留液混合，然后置于旋转蒸发仪内，在50-60℃下进行减压浓缩，浓缩至原体积的1/4，得到浓缩液；
步骤8、醇沉：采用80-90%的食用乙醇，按浓缩液与乙醇1：2的比例进行搅拌混合，多糖沉淀于容器基部；
步骤9、离心：将加入乙醇后的浓缩液置1-4℃的低温下静置18-30小时后，以2500-4000r/min的转速离心20-30min，收集离心杯底部多糖；
步骤10、干燥：将收集的多糖置于电热真空干燥箱内，在40-70℃的温度条件下真空干燥，得到一种复合食用菌多糖。
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