CN110038071A - 一种具有抗疱疹病毒的中药组合物及制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明属于医药技术领域，具体是涉及一种具有抗疱疹病毒的中药组合物及制备方法和应用。该组合物由以下中药为原料组成：地龙1‑5质量份、延胡索2‑6质量份、连翘1‑5质量份、紫花地丁1‑5质量份、白芷1‑4质量份、甘草1‑3质量份。本发明还公开了该组合物的凝胶剂型制备方法和用途。

Description

一种具有抗疱疹病毒的中药组合物及制备方法和应用
技术领域
本发明属于医药技术领域，具体是涉及一种具有抗疱疹病毒的中药组合物及制备方法和应用。
背景技术
疱疹是指疱疹病毒科病毒所致疾病(HHV)。HHV是一组中等大小的有囊膜的DNA病毒，能引起人类多种疾病，并能长期潜伏在体内，在一定条件下发生再发感染。临床上常见的有带状疱疹、单纯疱疹、生殖器疱疹等疾病。许多可侵犯人体多个器官，任何年龄都可发病。疱疹病毒感染的特点，除了亲神经性，长期潜伏，临床症状主要还有皮肤发疱疹、伴有剧烈疼痛，甚至溃烂感染、发热、侵犯其他脏器等。
西医一般给予对症和抗病毒治疗。但是疗效有限。医学界还是期待从传统中药中获得灵感。祖国医学对带状疱疹早有认识，称其为“缠腰火丹”、“蛇串疮”、“蛇寞疮”、“串腰龙”、“缠腰龙”、“蛇丹”“蜘蛛疮”、“甄带疮”等十余种病名。中医对本病的病名历史上还有诸多记载，此处不再累述。
中医认为，本病是由体内阴阳失调，外部感染邪毒所致。大多采用辩证方法，给予一症一方治疗。但是病患众多，甚至难以满足大部分人的辩证需求，故急需开发出中成药，祖国传统医学惠及更多的人。
发明内容
针对上述不足，本发明解决的技术问题是提供一种具有抗疱疹病毒的中药组合物；及本发明解决的另一技术问题是提供一种具有抗疱疹病毒的中药组合物凝胶剂制备方法和应用。
本发明的技术方案是通过如下实现的：
本发明的具有抗疱疹病毒的中药组合物，是由以下中药为原料组成：地龙 1-5质量份、延胡索2-6质量份、连翘1-5质量份、紫花地丁1-5质量份、白芷 1-4质量份、甘草1-3质量份。
更优地，本发明的具有抗疱疹病毒的中药组合物，是由以下中药为原料组成：地龙2-4质量份、延胡索3-5质量份、连翘2-4质量份、紫花地丁2-4质量份、白芷1-3质量份、甘草1-2质量份。
更优地，本发明的具有抗疱疹病毒的中药组合物，是由以下中药为原料组成：地龙3质量份、延胡索4质量份、连翘3质量份、紫花地丁3质量份、白芷2 质量份、甘草1质量份。
本发明组合物凝胶剂的技术方案还通过如下方法实现：
(1)提取：六味原料，用乙醇浸渍渗漉，收集渗漉液，回收乙醇并浓缩得清膏；取上清液继续浓缩得稠膏；取沉淀溶解，过滤，得滤液；
(2)制备凝胶基质；
(3)将稠膏和滤液加入凝胶基质。
更进一步地，本发明凝胶剂的技术方案通过如下实现：
(1)提取：六味原料，粉碎，用50-80％乙醇浸渍24小时后，缓缓渗漉，收集渗漉液，减压回收乙醇并浓缩至60℃相对密度1.01-1.05的清膏，冷藏过夜；取其上清液继续浓缩至60℃相对密度1.15-1.35的稠膏；取其沉淀加入泊洛沙姆和水使沉淀溶解，过滤，得滤液；
(2)取纯化水，甘油，卡波姆，制备凝胶基质；
(3)将稠膏和滤液加入凝胶基质中，搅匀，调节pH至5.5.0-7.5，加纯化水，搅匀，分装，即得。
上述技术方案中，步骤(1)提取，加入泊洛沙姆的型号为188，量为0.6-2.0％；步骤(2)制备凝胶基质中，卡波姆用量为1-3％；步骤(3)用三乙醇胺调节PH 值。
本发明的优点：
1.组方巧妙
本发明组合物中地龙清热通络为君，延胡索活血化瘀、行气止痛，连翘、紫花地丁清热解毒、凉血消肿，白芷祛风除湿，甘草调和诸药。全方具有解毒利湿、消疹止痛的功效，可用于疱疹病毒感染的治疗。
2.效果优异
实验结果表明，本发明组合物的凝胶制剂，具有抗病毒、抗炎、止痛等多种效果，适用疱疹病毒导致的皮肤病症。
3.凝胶制剂工艺精妙
提取方面：本组合物凝胶制剂，采用醇提，质控以延胡索乙素的转移率为标准，能够很好得到有效部位；采用渗漉，巧妙避免高温带来的不可控因素发生；对沉淀再一次溶解，并用滤过，而非离心，既简化了工艺，又意外得到使干膏率和转移率增加的结果。
凝胶基质方面：对卡波姆和甘油的选择，也是根据本发明组合物的特性，经过严格的试验得到的。卡波姆的用量对凝胶粘度有显著影响，根据粘附性，确定了卡波姆的用量。
调PH值方面：用三乙醇胺作为pH调节剂，本发明组合物凝胶外观更均匀、细腻。甘油作为保湿剂，能增加凝胶的黏度，故更适合本方案。
附图说明
图1为本发明组合物凝胶剂工艺流程图。
具体实施方式
实施例1
地龙100g、延胡索200g、连翘100g、紫花地丁500g、白芷400g、甘草300g。以上六味，粉碎，用50％乙醇浸渍24小时后，缓缓渗漉，收集渗漉液，减压回收乙醇并浓缩至相对密度1.01(60℃)的清膏，冷藏过夜；取其上清液继续浓缩至相对密度约1.15(60℃)的稠膏。沉淀中加入0.6％的泊洛沙姆和纯化水使溶解，过滤，得滤液。取纯化水，加入甘油100g，卡波姆10g，搅拌至溶胀，得凝胶。取提取物稠膏和滤液加入凝胶基质中，搅匀，加入三乙醇胺调节pH至6.0-6.5，加纯化水，搅匀，分装，即得。
实施例2
地龙150g、延胡索200g、连翘150g、紫花地丁150g、白芷100g、甘草50g。以上六味，10目粉碎，用60％乙醇作溶剂，浸渍24小时后，以每分钟5～10ml 的速度缓缓渗漉，收集渗漉液，减压回收乙醇并浓缩至相对密度1.01-1.04(60℃) 的清膏，冷藏过夜，取上清液继续浓缩至相对密度约1.22-1.30(60℃)的稠膏。沉淀中加入1.2％的泊洛沙姆和17％的纯化水使溶解，过滤，得滤液。取纯化水 400g，加入甘油100g，卡波姆20g，羟苯乙酯3g(乙醇溶解)，搅拌至溶胀，得凝胶基质。取提取物稠膏和滤液加入凝胶基质中，搅匀，加入三乙醇胺调节pH至6.0-6.5，加纯化水，搅匀，分装，即得。
实施例3
地龙300g、延胡索400g、连翘300g、紫花地丁300g、白芷250g、甘草200g。以上六味，16目粉碎，用80％乙醇作溶剂，浸渍，以每分钟5～10ml的速度缓缓渗漉，收集渗漉液，减压回收乙醇并浓缩至相对密度1.01-1.03(60℃)的清膏，冷藏过夜，取上清液继续浓缩至相对密度约1.25-1.30(60℃)的稠膏。沉淀中加入1.8％的泊洛沙姆和纯化水使溶解，过滤，得滤液。取纯化水400g，加入甘油100g，卡波姆30g，搅拌至溶胀，得凝胶基质。取提取物稠膏和滤液加入凝胶基质中，搅匀，加入三乙醇胺调节pH至6.5-7.0，加纯化水，搅匀，分装，即得。
实施例4
地龙500g、延胡索600g、连翘500g、紫花地丁100g、白芷100g、甘草100g。以上六味，24目粉碎，用70％乙醇作溶剂，浸渍24小时后，以每分钟5～10ml 的速度缓缓渗漉，收集渗漉液，减压回收乙醇并浓缩至相对密度1.01-1.05(60℃) 的清膏，冷藏过夜，取上清液继续浓缩至相对密度约1.25-1.30(60℃)的稠膏。沉淀中加入2.0％的泊洛沙姆和17％的纯化水使溶解，过滤，得滤液。取纯化水 400g，加入甘油100g，卡波姆20g，羟苯乙酯3g(乙醇溶解)，搅拌至溶胀，得凝胶基质。取提取物稠膏和滤液加入凝胶基质中，搅匀，加入三乙醇胺调节pH至5.5-6.5，加纯化水，搅匀，分装，即得。
凝胶剂型实验例
实验例1选择乙醇回流和渗漉两种提取方式比较
表1-1提取工艺考察
由上表可知，渗漉提取过程中延胡索乙素和样品出膏率均高于乙醇回流提取，原因可能药材经过粉碎，有效成分都溶解出来，而且渗漉提取是冷浸，有效成分不会因高温破坏而损失，因此确定提取方式为渗漉提取。
实验例2渗漉后浓缩液相对密度考察
表1-2浓缩液相对密度的考察
备注：相对密度为1.010与1.022没有粘瓶壁，未进行洗瓶壁液的操作。
由上表可知，渗漉液浓缩相对密度对干膏得率的影响不是很大，相对密度为1.01-1.05(60℃)时延胡索乙素的转移率较高，故浓缩相对密度为 1.01-1.05(60℃)。
实验例3表面活性剂的种类及用量的考察
表1-3-1表面活性剂种类筛选考察
表1-3-2表面活性剂用量筛选考察
由表1-3-1，1-3-2可知，泊洛沙姆比聚山梨酯-80的溶解沉淀的效果要好，故选用泊洛沙姆作为沉淀的溶解剂，且泊洛沙姆188的效果最佳。其通过用量的考察发现用量范围为0.6％-2.0％。
实验例4沉淀溶解液离心与过滤方式的比较
表1-4沉淀溶解液离心与过滤方式的比较
*备注：采用确定的泊洛沙姆的型号以及用量，做了3次沉淀溶解度的试验，沉淀溶解液采用的是离心的方式除杂，3次试验中延胡索的转移率分别为：38.2、39.5、41.6；固形物得率分别为：3.0、3.0、3.2。
由上表可知，延胡索乙素的转移率变化不大，而固形物得率有所增加，同时凝胶外观没有变化，没有颗粒感，涂覆肤感没有变化。故确定最后工艺沉淀溶解液的处理方式为直接过滤。
实验例5凝胶基质筛选的考察
表1-5-1凝胶基质种类考察
将凝胶基质置于冰箱中冷藏放置5天，观察其凝胶状态，对仍成凝胶状的样品进行黏度测定。
表1-5-2凝胶稳定性的考察
表1-5-3凝胶黏度的考察
由上三表可知，从凝胶的外观状态、稳定性及粘度测定结果可以看出卡波姆用量1-3％，最佳用量2％。
实验例6凝胶保湿剂及pH调节剂选择
表1-6凝胶黏度的考察
从以上表格可以看出，用三乙醇胺作为pH调节剂，本发明凝胶外观更均匀、细腻，采用甘油和丙二醇作为保湿剂制备的本发明凝胶，从外观看区别较小，相同pH条件下，加甘油制备的凝胶比加丙二醇的黏度要大些，另外，本发明凝胶为外用制剂治疗带状疱疹，对于疱疹皮肤特别是有破损的皮肤，采用甘油作为保湿剂，其对皮肤的刺激性会相对小点。综合考虑，确定采用三乙醇胺和甘油作为本发明凝胶的pH调节剂和保湿剂。
药效实验例
试验目的：验证本发明凝胶用于治疗疱疹病毒感染的有效性。
1试验材料
1.1受试药物
1.1.1本发明凝胶，含量：1.6g生药/g凝胶、0.8g生药/g凝胶，用法用量：均匀涂于患处，3次/日；性状：棕色凝胶。
1.1.2空白凝胶，不含有生药的空白凝胶。用法用量：均匀涂于患处，3次/日；性状：白色半透明状凝胶。
1.1.3本发明凝胶干膏粉(体外试验用药)，含量：8.2g生药/g干膏粉。性状：棕色粉末。
1.2阳性对照药
1.2.1扶他林(双氯芬酸二乙胺乳胶剂)：用法用量：外用，按照痛处面积大小涂擦，一日3-4次。性状：白色或淡黄色乳脂样凝胶，味香。
1.2.2阿昔洛韦乳膏：福建太平洋制药有限公司产品。用于单纯疱疹或带状疱疹感染。用法用量：局部外用，取适量本品涂患处，成人与小儿均为白天每2小时 1次，一日4～6次，共7日。
1.3试验动物
ICR小鼠、家兔均购自正规渠道，符合药理试验规定。
1.4毒株及细胞
1.4.1病毒毒株：疱疹病毒1、2型，购自中国医学科学院生物与技术研究所，本试验室传代，-80℃冰箱保存备用。
1.4.2培养细胞：人喉癌传代细胞Hep-2株，购自北京协和医科大学细胞资源中心，本研究室传代液氮保存。
2试验方法及结果
2.1剂量设计
2.1.1本发明凝胶
试验中采用1.6g生药/g、0.8g生药/g两个浓度药物。按照药理学方法折算给药剂量。
2.1.2本发明凝胶(干膏粉)：用于体外试验，配制成浓度为200mg/ml的母液备用。
2.1.3扶他林软膏，小鼠按0.1ml/只、大鼠按0.2ml/只涂抹给药。阿昔洛韦软膏，家兔按1.25ml/只涂抹。
2.2对单纯疱疹病毒致家兔皮肤感染模型的影响
取2-2.5kg家兔36只，按体重等级随机分为5组，分别为正常对照组、模型对照组、阿昔洛韦对照组、本发明凝胶两个剂量组，每组6只，雌雄各半。各组家兔背部区皮肤脱毛(5×5cm2)后用砂纸擦伤背部皮肤，模型组及各给药组背部破损部位滴涂100μl稀释100倍的HSV-1病毒液，正常对照组给予等量生理盐水，连续感染2天。第1天感染后4小时各给药组皮肤涂擦给药，1.25ml/只，每日1次，连续7天，正常对照组和模型对照组在同等情况下给予空白凝胶(基质)涂抹。于感染当天开始观察各组家兔背部病变情况，连续观察12天，并按下述评判标准表记录分数情况(见表2-1)，将感染过程中所有的阿拉伯及罗马计分数字加在一起得到累积计分，同时记录各组动物的痊愈时间，所有结果采用组间比较t检验进行统计学处理。
表2-1单纯疱疹病毒致家兔皮肤感染模型病变评判标准
表2-2本发明凝胶对单纯疱疹病毒致家兔皮肤感染模型的影响
注：与正常组比较，##P＜0.01；与模型对照组比较，**P＜0.01。
表2-2结果显示：试验观察期间模型组家兔感染区皮肤红肿明显并伴有渗液，疱疹逐渐连接成片，病变计分与正常对照组比较有显著性差异(P＜0.01)；本发明凝胶两剂量组感染区病变明显减轻，病变计分与模型组比较有显著性差异 (P＜0.01)；并可缩短家兔皮肤感染的痊愈时间，与模型对照组比较有显著性差异(P＜0.01)。
2.3对热板致小鼠疼痛模型的影响
筛选合格小鼠：恒温水浴箱预先加热至55℃。取ICR小鼠，体重19±1g，雌雄各半，每次1只放在热板上，小鼠自放在热板上至出现舔后足所需时间(秒)，作为该鼠的痛阈值，凡舔后足时间小于5秒钟或大于30秒钟或跳跃者弃之不用。
观察药物作用：取合格小鼠50只，雌雄各半，体重19±1g，按体重等级随机分为4组，分别为模型对照组、扶他林对照组、本发明凝胶高、低；两个剂量组，每组10只。给药前各组小鼠重复测其正常痛阈值2次，取2次平均值，作为该鼠给药前痛阈值。然后小鼠背部区皮肤脱毛(2×2cm2)后，各给药组脱毛区涂抹给药，0.2ml/只，给药1次。模型对照组在同等情况下空白凝胶(基质) 涂抹。分别于给药后0.5h、1h、2h测定小鼠痛阈值(从放入到出现舔足的时间)，如60秒钟仍无反应，将小鼠取出，以免烫伤，其痛阈值以60秒计算。
镇痛率％＝(用药后痛阈值-用药前平均痛阈值)×100％/用药前平均痛阈值
表2-3本发明凝胶对热板致小鼠疼痛模型的影响
注：与模型对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01
表2-3结果显示：本发明凝胶两剂量组给药后0.5h、1h、2h均可提高热板致小鼠疼痛的镇痛率，其中高、低剂量组给药后0.5h与模型对照组比较有显著性差异(P＜0.01)，低剂量组给药后1h与模型对照组比较有显著性差异(P＜0.05)，高、低剂量组给药后2h与模型对照组比较有显著性差异(P＜0.05)。
2.4对二甲苯致小鼠腹部皮肤毛细血管通透性的影响
取ICR小鼠60只，雌雄各半，体重19±1g，按体重等级随机分为5组，分别为正常对照组、模型对照组、扶他林对照组，本发明凝胶高、低剂量组，每组10只。小鼠背部区皮肤脱毛(2×2cm2)后，各给药组脱毛区涂抹给药， 0.2ml/只，每日1次，连续3天，正常组对照组及模型对照组在同等情况下给予空白凝胶(基质)。末次给药1小时后，各组小鼠尾静脉注射0.5％伊文思兰液体，0.1ml/10g，随即除正常对照组外(涂抹生理盐水)其余各组动物腹部皮肤同一处脱毛区涂抹二甲苯，0.03ml/只，20分钟后脱臼处死动物，剪下蓝染皮肤并剪碎，置于10ml的丙酮-硫酸钠提取液(无水硫酸钠1.5g，溶于蒸馏水中成150ml，再缓缓向硫酸钠溶液加入丙酮350ml即成)，置暗处放置， 3000rpm离心15分钟，取上清液用多功能酶标仪在590nm处测定吸光度，以T 检验进行统计学处理，比较模型对照组与给药组是否有统计学差异。
表2-4本发明凝胶对二甲苯致小鼠腹部皮肤毛细血管通透性的影响
注：正常对照组比较，##P＜0.01；与模型对照组比较，**P＜0.01。
表2-4结果显示：本发明凝胶两个剂量组均可明显抑制二甲苯引起小鼠腹部皮肤毛细血管通透性，与模型对照组比较有显著性差异(P＜0.01)。
2.5体外抗病毒试验
2.5.1 Hep-2细胞培养
将贴壁生长的单层Hep-2细胞用0.25％的Trypsin-EDTA混合液消化后弃去胰酶，加入新的10％的EDTA培养液，并将细胞轻吹打成单细胞悬液，接种于96 孔培养板中，浓度为2.7×105个细胞/ml，100ul/孔，接种后将细胞置于37℃， 5％C0，培养箱中培养。
2.5.2药物对病毒致培养细胞病变的抑制作用
取已长成单层的Hep-2细胞培养板，倒掉培养液，用细胞维持液冲洗细胞面 3遍后，接种相应倍数稀释度的病毒液，每种毒株100μL/孔。置37℃5％CO2培养箱中吸附1h后弃去病毒液，再加入1∶2～1∶128倍比稀释的各药物，100μL/ 孔，同时设细胞对照和病毒对照组。置37℃5％CO2培养箱中培养，每日倒置显微镜下观察细胞病变情况，48h按以下标准记录结果。
细胞病变按6级标准判断：-：细胞生长正常，无病变出现；±：细胞病变少于整个单层的10％；+：细胞病变约占整个单层细胞的25％以下；++：细胞病变约占整个单层细胞的50％以下；+++：细胞病变约占整个单层细胞的75％以下；++++：细胞病变约占整个单层细胞的75％以上。按Reed-Muench计算50％抑制浓度(IC50)。
表2-5本发明凝胶(干膏粉)体外抗疱疹病毒作用
注：表中数据为细胞病变等级
表2-6本发明凝胶(干膏粉)的体外抗疱疹病毒作用
IC50：mg·mL-1
表2-5、表2-6结果显示：经48小时培养后，本发明凝胶对所试的2种疱疹病毒株均有明显的抑制作用。
3结论
将同体积的不同浓度本发明凝胶涂抹模型动物皮肤给药后，结果显示：在所试剂量范围内本发明对疱疹病毒感染致家兔皮肤疱疹病毒有明显减轻作用，并可缩短病毒治愈时间；对冰醋酸及热板诱发小鼠疼痛有明显止痛作用；可明显减轻二甲苯引起的腹部皮肤毛细血管通透性；在体外对疱疹病毒1、2型致培养细胞病变有明显抑制作用。

Claims (10)

1.一种具有抗疱疹病毒的中药组合物，其特征在于由以下中药为原料组成：地龙1-5质量份、延胡索2-6质量份、连翘1-5质量份、紫花地丁1-5质量份、白芷1-4质量份、甘草1-3质量份。
2.根据权利要求1所述的一种具有抗疱疹病毒的中药组合物，其特征在于由以下中药为原料组成：地龙2-4质量份、延胡索3-5质量份、连翘2-4质量份、紫花地丁2-4质量份、白芷1-3质量份、甘草1-2质量份。
3.根据权利要求2所述的一种具有抗疱疹病毒的中药组合物，其特征在于由以下中药为原料组成：地龙3质量份、延胡索4质量份、连翘3质量份、紫花地丁3质量份、白芷2质量份、甘草1质量份。
4.一种具有抗疱疹病毒的中药组合物凝胶剂的制备方法，其特征在于：
（1）提取：六味原料，用乙醇浸渍渗漉，收集渗漉液，回收乙醇并浓缩得清膏；取上清液继续浓缩得稠膏；取沉淀溶解，过滤，得滤液；
（2）制备凝胶基质；
（3）将稠膏和滤液加入凝胶基质。
5.根据权利要求4所述的一种具有抗疱疹病毒的中药组合物凝胶剂的制备方法，其特征在于：
（1）提取：六味原料，粉碎，用50-80%乙醇浸渍24小时后，缓缓渗漉，收集渗漉液，减压回收乙醇并浓缩至60℃相对密度1.01-1.05的清膏，冷藏过夜；取其上清液继续浓缩至60℃相对密度1.15-1.35的稠膏；取其沉淀加入泊洛沙姆和水使沉淀溶解，过滤，得滤液；
（2）取纯化水，甘油，卡波姆，制备凝胶基质；
（3）将稠膏和滤液加入凝胶基质中，搅匀，调节pH至5.5.0-7.5，加纯化水，搅匀，分装，即得。
6.根据权利要求5所述的一种具有抗疱疹病毒的中药组合物凝胶剂的制备方法，其特征在于：步骤（1）提取中，加入泊洛沙姆的型号为188，量为0.6-2.0%。
7.根据权利要求5所述的一种具有抗疱疹病毒的中药组合物凝胶剂的制备方法，其特征在于：步骤（2）制备凝胶基质中，卡波姆用量为1-3%。
8.根据权利要求8所述的一种具有抗疱疹病毒的中药组合物凝胶剂的制备方法，其特征在于：步骤（2）制备凝胶基质中，卡波姆用量优选为2%。
9.根据权利要求5所述的一种具有抗疱疹病毒的中药组合物凝胶剂的制备方法，其特征在于：步骤（3）用三乙醇胺调节PH值。
10.一种具有抗疱疹病毒的中药组合物，其特征在于在制备治疗疱疹病毒引起的疾病的药物中的应用。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113509512A (zh) * 2021-07-30 2021-10-19 谢吉伟 治疗带状疱疹、带状疱疹后遗疼痛的中药及其制备方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101966192A (zh) * 2009-07-27 2011-02-09 上海玉森新药开发有限公司 连翘酯苷在制备治疗单纯疱疹药物中的用途
CN106668072A (zh) * 2017-03-23 2017-05-17 济宁华能制药厂有限公司 一种消疹止痛凝胶及制备方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101966192A (zh) * 2009-07-27 2011-02-09 上海玉森新药开发有限公司 连翘酯苷在制备治疗单纯疱疹药物中的用途
CN106668072A (zh) * 2017-03-23 2017-05-17 济宁华能制药厂有限公司 一种消疹止痛凝胶及制备方法

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113509512A (zh) * 2021-07-30 2021-10-19 谢吉伟 治疗带状疱疹、带状疱疹后遗疼痛的中药及其制备方法

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