CN105168844A - 治疗门脉高压症术后血栓形成的药物 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种用于治疗肝硬化门脉高压症术后血栓形成的药物，其特征在于原料药包括丹参、当归、川芎、赤芍、生地黄、桃仁、香附、川牛膝、百合、乌药、炒白术、党参、茯苓、茵陈、柴胡、陈皮、法半夏、三七、牡丹皮、泽泻、甘草。采用本发明提供的药物能够能有效减少脾切除术后血小板升高所引起的门静脉系统血栓形成，改善门静脉系统血流动力学，疗效综合评价优于西药，充分显示了本发明的优势。

Description

治疗门脉高压症术后血栓形成的药物

技术领域

本发明涉及中医药技术领域，尤其涉及一种治疗门脉高压症术后血栓形成的药物。

背景技术

近年来肝硬化门静脉高压患者脾切除术后门静脉系统血栓发生率逐年增高，逐渐成为患者预后的严重影响因素。门静脉系统血栓形成常与脾切除术后血小板升高、门静脉系统血液动力学改变、高血凝状态及血管内膜损伤有关。肝硬化门脉高压症行脾切除术后，门静脉血流量锐减20％-40％，根据Pciseuille定律，血流量与血黏度呈反比，全血黏度升高、流速降低，有利于血栓形成。脾静脉处理过于靠近脾门，使脾静脉残端过长而形成盲端，盲端内血流缓慢甚至停滞，在高凝状态下易形成血栓，脾静脉内血栓发生率可达30％，血栓可逐渐延伸至门静脉和肠系膜上静脉。脾脏可贮藏血小板循环总量的1/3，并于需要时将其释入血循环内，血小板经正常生存期后亦在脾脏内被清除。在门脉高压时脾功能亢进，脾脏破坏血细胞能力增强，血小板数量下降，功能降低。脾切除术后，血小板破坏减少，数量和功能很快恢复，并超过正常范围，加之手术对血管刺激，术后血液粘稠的增大，脾静脉血流缓慢，凝血机制亢进易形成脾静脉血栓。同时增加的血小板对骨髓代偿能力进行负反馈，造成血小板升高达到顶峰后缓慢下降至正常值范围。通常脾切除后2-3d即可见有血小板增高，并常在第7-14d内达到最高峰；以后又逐渐下降，约在术后1-2个月内恢复正常门静脉系统血栓形成将导致患者术后恢复不顺利，重者可致死亡。

因此，积极预防、早期发现并及时处理门静脉高压术后门静脉系统血栓形成非常重要。中国传统医学中并无“肝硬化门脉高压症”病名，但在传统医学与现代疾病对应过程中，将本病归为“胁痛、积聚、臌胀”范畴，其中病程后期多出现肝硬化腹水，预后不良，既为“鼓胀”，病情多较危重。现代医学技术的发展，对本病的发生、发展有了一定的认识，也发展了相应的治疗手段，如肝硬化门静脉高压脾切除术等。除正规轻柔的手术操作外，术后严密动态监测患者凝血状态和血小板总数十分重要，根据血小板变化尽早应用药物抗凝祛聚。而阿司匹林肠溶片具有抗凝祛聚作用，它通过抑制血小板释放ADP，并可使环氧化酶乙酰化而失活，阻碍TXA形成，而达到预防增多的血小板聚集成团在门静脉系统形成血栓。一般认为血小板计数超过400×10⁹/L应行阿司匹林肠溶片抗凝祛聚疗法；但此时血小板数量明显增多或已形成血栓，这时单独应用阿司匹林肠溶片抗凝祛聚疗效欠佳。近年来也有研究表明，有时候，阿司匹林常规剂量甚至加大剂量都不能完全抑制血栓素的生成和血小板的聚集，从而导致血栓形成，造成严重的危害，这一现象被称为阿司匹林抵抗。中药复方具有益气扶正，活血化瘀的功效，在术后恢复自身免疫力，改善集体基础体征上，在抗血小板聚集上的作用有良好的临床证据支持，通过相应的实验研究证实，中药复方减少血小板聚集，改变血液动力学，修复血管内膜损伤有很好的作用，进而减少血栓的形成，减少术后并发症的发生。因此，运用中药或者中西医结合治疗肝硬化门静脉高压术后血栓形成有良好的应用前景。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种治疗门脉高压症术后血栓形成的药物，其能够能有效减少脾切除术后血小板升高所引起的门静脉系统血栓形成，改善门静脉系统血流动力学，疗效综合评价优于西药，充分显示了本发明的优势。

为解决上述技术问题，本发明提供了一种用于治疗肝硬化门脉高压症术后血栓形成的药物，其原料药包括丹参、当归、川芎、赤芍、生地黄、桃仁、香附、川牛膝、百合、乌药、炒白术、党参、茯苓、茵陈、柴胡、陈皮、法半夏、三七、牡丹皮、泽泻、甘草。

其中，所述药物中各原料药的重量份分别为丹参30～40重量份、当归15～20重量份、川芎15～30重量份、赤芍15～30重量份、生地黄15～30重量份、桃仁15～20重量份、香附15～30重量份、川牛膝15～20重量份、百合10～20重量份、乌药15～20重量份、炒白术15～20重量份、党参15～20重量份、茯苓30～40重量份、茵陈15～20重量份、柴胡15～20重量份、陈皮15～30重量份、法半夏20～30重量份、三七5～10重量份、牡丹皮10～15重量份、泽泻15～20重量份、甘草15～20重量份。

其中，所述药物中各原料药的重量份分别为丹参35～40重量份、当归15～20重量份、川芎25～30重量份、赤芍15～20重量份、生地黄20～25重量份、桃仁15～20重量份、香附15～20重量份、川牛膝15～20重量份、百合10～15重量份、乌药15～20重量份、炒白术15～20重量份、党参15～20重量份、茯苓30～35重量份、茵陈15～20重量份、柴胡15～20重量份、陈皮15～20重量份、法半夏20～25重量份、三七5～10重量份、牡丹皮10～15重量份、泽泻15～20重量份、甘草15～20重量份。

其中，所述药物中各原料药的重量份分别为丹参35重量份、当归15重量份、川芎25重量份、赤芍20重量份、生地黄25重量份、桃仁20重量份、香附20重量份、川牛膝20重量份、百合15重量份、乌药15重量份、炒白术20重量份、党参20重量份、茯苓30重量份、茵陈20重量份、柴胡20重量份、陈皮20重量份、法半夏25重量份、三七10重量份、牡丹皮15重量份、泽泻20重量份、甘草20重量份。

其中，所述药物的剂型为颗粒剂、片剂、胶囊剂、滴丸剂、煎煮液、口服液、糖浆剂。

其中，所述药物制备成滴丸剂。

本发明还提供了用于治疗肝硬化门脉高压症术后血栓形成的药物滴丸，其包括上述用于治疗肝硬化门脉高压症术后血栓形成的中药药物。

本发明还提供上述滴丸剂的制备方法，其包括：

第一步，取丹参、当归、川芎、赤芍、乌药、炒白术、党参、法半夏、三七、牡丹皮、泽泻、甘草，分别洗净，粉碎，混合在一起，加入相对于该步获得的混合药材质量8～10倍量含质量百分比1.0％碳酸钠的醇浓度为80％～90％乙醇，加热回流提取3次，每次1～2小时，合并提取液；所得的提取液减压回收乙醇，浓缩至0.5g生药/ml，用酸调节pH为1.5～4，放冷，滤过，滤液上树脂体积相当于生药药液体积2～4倍的大孔树脂柱，先用1～1.5倍柱体积水冲洗，水洗液弃去，再用2～3倍柱体积的醇浓度为85～95％乙醇洗脱，收集洗脱液，洗脱液减压浓缩至浸膏，60℃真空干燥，取出，粉碎，获得第一粉末；

第二步，取余下原料药组分，分别洗净，粉碎，混合，加水煎煮提取2～3次，每次加该步获得的混合药材质量5～7倍量水，每次0.5～2小时，合并提取液，用酸调节pH为1.5～4，放冷，滤过，滤液上树脂体积相当于生药药液体积2～4倍的大孔树脂柱，先用1～1.5倍柱体积水冲洗，水洗液弃去，再用2～3倍柱体积的醇浓度为85～95％乙醇洗脱，收集洗脱液，洗脱液减压浓缩至浸膏，60℃真空干燥，取出，粉碎，获得第二粉末；

第三步，将第一粉末和第二粉末混合，进一步加入混合粉末总重量2～4倍的聚乙二醇-6000或者聚乙二醇-4000或者两者的混合物混合均匀，加热熔融，化料后移至滴丸机滴罐中，药液滴至6～8℃液体石蜡或甲基硅油中，除油，即得。

所述大孔树脂为D101、AB-8或ZTC型大孔树脂。

本发明的有益效果:

采用本发明提供的药物治疗肝硬化门脉高压症术后血栓形成，除上述中药功效作用外，还体现了中药新剂型的三效(高效、速效、长效)、三小(毒性、副反应、用量小)和五方便(生产、运输、使用、携带、保管方便)的要求，综合临床研究和实验研究，其疗效优于西药，充分显示了本发明的优势，在临床推广应用有着广阔的发展前景。

具体实施方式

本发明提供了一种用于治疗肝硬化门脉高压症术后血栓形成的药物，其原料药包括丹参、当归、川芎、赤芍、生地黄、桃仁、香附、川牛膝、百合、乌药、炒白术、党参、茯苓、茵陈、柴胡、陈皮、法半夏、三七、牡丹皮、泽泻、甘草。

进一步优选，所述药物仅由上述原料药制备而成。

其中，所述药物中各原料药的重量份分别为丹参30～40重量份、当归15～20重量份、川芎15～30重量份、赤芍15～30重量份、生地黄15～30重量份、桃仁15～20重量份、香附15～30重量份、川牛膝15～20重量份、百合10～20重量份、乌药15～20重量份、炒白术15～20重量份、党参15～20重量份、茯苓30～40重量份、茵陈15～20重量份、柴胡15～20重量份、陈皮15～30重量份、法半夏20～30重量份、三七5～10重量份、牡丹皮10～15重量份、泽泻15～20重量份、甘草15～20重量份。

其中，所述药物中各原料药的重量份分别为丹参35～40重量份、当归15～20重量份、川芎25～30重量份、赤芍15～20重量份、生地黄20～25重量份、桃仁15～20重量份、香附15～20重量份、川牛膝15～20重量份、百合10～15重量份、乌药15～20重量份、炒白术15～20重量份、党参15～20重量份、茯苓30～35重量份、茵陈15～20重量份、柴胡15～20重量份、陈皮15～20重量份、法半夏20～25重量份、三七5～10重量份、牡丹皮10～15重量份、泽泻15～20重量份、甘草15～20重量份。

其中，所述药物中各原料药的重量份分别为丹参35重量份、当归15重量份、川芎25重量份、赤芍20重量份、生地黄25重量份、桃仁20重量份、香附20重量份、川牛膝20重量份、百合15重量份、乌药15重量份、炒白术20重量份、党参20重量份、茯苓30重量份、茵陈20重量份、柴胡20重量份、陈皮20重量份、法半夏25重量份、三七10重量份、牡丹皮15重量份、泽泻20重量份、甘草20重量份。

根据本病的发生、发展规律，中医将其归为“臌胀”范畴，因为其在脾切除术后，造成了门静脉系统的一系列的改变，但其主要的病因病机未发生改变，即正气亏虚，湿热蕴积，血瘀脉络的本虚标实证，因此，对其辨证施治具有很好的作用，本方就是在此基础上所设立：急则治其标，本病正气亏虚，湿热蕴积，血瘀脉络，加之术后血瘀益甚，故重用丹参为君药，丹参具有活血化瘀，理气止痛的功能，现代医学研究，其具有提高纤溶酶活性抗血栓形成作用，药效学试验表明，丹参可使垂体后叶素所致的大鼠缺血性心电图改善，使体外血小板聚集率降低，可使高脂血症模型大鼠增高的全血黏度、全血还原黏度、血小板粘附率和血栓指数降低；以当归、川芎、赤芍、生地黄、桃仁、香附、川牛膝、牡丹皮、泽泻共奏活血化瘀，清热通络的作用，其中当归、川芎、赤芍、生地、桃仁有桃红四物汤组方之意，起到养血不留瘀，祛瘀不伤正的功效，现代医学研究，其具有延长出、凝血时间，抑制血小板聚集，改善血液流变学特性，上述药物组合，助君药之功，为臣药组；本病正虚为本，故用白术、党参、茯苓、甘草补脾益气，健脾利水，同时配合当归、赤芍、三七以养血行血，为佐药，本病后期会有腹水、腹胀、腹痛等症状，病程迁延日久，血瘀久化热，湿热内蕴，故根据临床表现，加入茵陈清热利胆，牡丹皮清热凉血，陈皮、乌药、百合理气止痛，法半夏、白术健脾燥湿；甘草调和诸药为使药。全方合用，起到活血化瘀，清热止痛，扶正补虚，对于肝硬化门静脉高压术后，减少门静脉系统血栓形成，改善门静脉系统血流动力学等有良好的疗效。

各原料药药理如下：

丹参：味苦，性微寒，归心、肝经，具有活血调经，祛瘀止痛，凉血消痈，清心除烦，养血安神的功效，主治月经不调，经闭痛经，症瘕积聚，胸腹刺痛，热痹疼痛，疮疡肿痛，心烦不眠；肝脾肿大，心绞痛等证，丹参能扩张冠状动脉，增加冠状动脉血流量，改善心功能，改善外周循环，并有抑制血小板聚集，抑制凝血功能和促进纤溶活性的作用。

当归：拉丁名AngelicaeSinensisRadix，味甘、辛，性温，入肝、心、脾经，具有补血活血，调经止痛，润肠通便的功效，主治心血不足之头晕目眩，倦怠乏力，心悸气短，血海空虚，冲任虚寒或淤血阻滞之月经不调，经痛，产或腹痛，及其他血瘀作痛及阴虚血少肠燥之便秘等证，其能改善子宫的血液循环、减轻盆腔充血，缓解痛经。

川芎：味辛，性温，归肝、胆、心包经，具有活血行气，祛风止痛的功效，主治月经不调；经闭痛经；产后瘀滞腥痛；症瘕肿块；胸胁疼痛；头痛眩晕；风寒湿痹；跌打损伤；痈疽疮疡等证。

赤芍：味苦、微苦，归肝经，具有泻肝火，清热凉血，祛瘀止痛的功效，主治肝火旺盛之目赤肿痛，头晕目眩，胸胁疼痛，温热病热入血分之身热舌绛，斑疹出血，以及血瘀经闭；火热炽盛迫血妄行之吐血尿血；妇女血热之行经过多；血行阻滞所引起的各种疼痛；血热毒盛之疮疖痈肿等证。

生地黄：味甘、苦，性寒，归心、肝、肾经，具有清热凉血、去瘀生新，养阴生津的功效，主治热如营分之身热口渴等真阴被劫之证；或热病后期低热不退；慢性疾病证属阴虚内热者；肺胃蕴热之口渴引饮，消渴心烦，胃阴受伤之口渴少津；血热妄行之便血、崩漏下血；血热毒盛之发斑紫黑等证。

桃仁：味苦、甘，性平，归心、肝、大肠经，具有活血祛瘀，润肠通便，止咳平喘的功效，主治经闭，痛经，癓瘕痞块，跌扑损伤，肠燥便秘等证。

香附：味辛、甘、微苦，性平，归肝、三焦经；具有气香行散，可升可降，理气解郁，调经止痛的功效，主治肝郁气滞，胸胁痞满，脘腹胀痛，疝气疼痛，月经不调，经行腹痛，闭经，崩漏带下，胎动不安等证。

川牛膝：味甘、微苦，性平，归肝、肾经，具有逐瘀通经，通利关节，利尿通淋的作用，主治风湿腰膝疼痛，脚痿筋挛，血淋，尿血，妇女经闭，症瘕。用于经闭症瘕，胞衣不下，关节痹痛，足痿筋挛，尿血血淋，跌扑损伤等证。

百合：味甘，性微寒，入心、肺经，具有养阴润肺，清心安神的功效，主治阴虚久咳，痰中带血，虚烦惊悸，失眠多梦，精神恍惚等证。

乌药：味辛，性温，入肺、脾、肾、膀胱经，有行气止痛，温肾散寒的功效，用于胸胁满闷，脘腹胀痛，头痛，寒凝气滞所致的寒疝疼痛，经行腹痛及产后腹痛，下元虚寒，气化无权之尿频，遗尿或小便不利等证，乌药能加速血液循环，使局部血管扩张。

炒白术：拉丁名atractylodismacrocephalaerhizoma，苦、甘，性温，入脾、胃经，具有健脾益气，燥湿利水，止汗，安胎的功效。用于脾胃气虚，运化无力，食少便溏，肢软神疲，脾虚不运，水湿内停所致小便不利，水肿，胸胁支满，脾胃气虚，胎动不安等证，

党参：味甘，性平，入肺、脾经，有补气益脾，养血生津的作用，主要用于脾肺气虚或气血两虚之倦怠乏力、气短，咳嗽自汗等症状，党参长于补脾养胃，调理中焦，兼有养血的作用，其性平，健脾运而不燥；滋味阴而不湿，能够改善机体的免疫状态，提高抗病能力，促进消化吸收，提高新陈代谢。

茯苓：味甘、淡，性平，入脾、肺、膀胱、心经，有渗湿利水、健脾宁心的作用，主要用于水湿停滞之水肿，小便不利；湿热蕴结之热淋，脾虚湿困之食少便溏、痰饮停滞、癫痫等证，茯苓对金黄色葡萄球菌、变形杆菌具有显著的抑制作用。

茵陈：味苦、辛，性微寒，入脾、胃、肝、胆经，具有清湿热，退黄疸的作用，用于黄疸，无论湿热阳黄或寒湿阴黄均可应用，亦可应用于暑温或湿温所致小便短赤等证。

柴胡：拉丁名bupleuriradix，为伞形科植物柴胡或狭叶柴胡的干燥根，味苦，性微寒，归肝经、胆经，具有疏散退热、升阳舒肝的功效，用于感冒发热、寒热往来、疟疾，肝郁气滞，胸肋胀痛，脱肛，子宫脱落，月经不调等证。

陈皮：性温，味辛、苦；归脾、肺经，辛散通温，气味芳香，长于理气，能入脾肺，故既能行散肺气壅遏，又能行气宽中，用于肺气拥滞、胸膈痞满及脾胃气滞、脘腹胀满等证。

法半夏：味辛、性温，归脾、胃、肺经，具有燥湿化痰的功效，主治痰多咳嗽，风痰眩晕，痰厥头痛等证。

三七：为五加科植物三七干燥根和根茎，拉丁名NotoginsengRadixetRhizoma，性温，味甘、微苦，归肝、胃经，具有止血，散瘀，消肿，止痛的功效，主治吐血，咳血，衄血，便血，血痢，崩漏，症瘕，产后血晕，恶露不下，跌扑瘀血，外伤出血，痈肿疼痛等证

牡丹皮：味苦、辛，性微寒，入心、肝、肾经，具有清热凉血、活血散瘀的作用，主要用于治疗温热病热入血分、发斑、吐衄，热病后期热伏阴分发热、阴虚骨蒸潮热、血滞经闭、痛经、痈肿疮毒、跌扑伤痛、风湿热痹等证。

泽泻：味甘、淡，性寒，入肾、膀胱经，有利水渗湿、泻热通淋，清心肺、泻肾火的作用，主要用于脾虚水湿停滞、水湿泛滥之全身水肿；水饮痰湿之邪困阻，致清阳不升浊音不降之眩晕；湿热下注之小便不利，赤短涩痛，以及湿热黄疸等证，对结核杆菌、肺炎双球球菌、金黄色葡萄球菌等有抑制作用。

甘草：味甘，性平，入十二经，有清热解毒，调和药性，祛痰止咳的作用，并能健脾和中，缓急止痛，主要用于补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛，调和诸药。用于脾胃虚弱，倦怠乏力，心悸气短，咳嗽痰多，脘腹、四肢挛急疼痛，痈肿疮毒，缓解药物毒性、烈性，通过加入甘草能起到补气中和，调和各组分的作用。

本发明提供的药物可以根据需要，添加常规辅料，制备成任何常用内服剂型，优选为颗粒剂、片剂、胶囊剂、滴丸剂、煎煮液、口服液、糖浆剂，进一步优选制备成滴丸剂。

本发明还提供上述滴丸剂的制备方法，其包括：

第一步，取丹参、当归、川芎、赤芍、乌药、炒白术、党参、法半夏、三七、牡丹皮、泽泻、甘草，分别洗净，粉碎，混合在一起，加入相对于该步获得的混合药材质量8～10倍量含质量百分比1.0％碳酸钠的醇浓度为80％～90％乙醇，加热回流提取3次，每次1～2小时，合并提取液；所得的提取液减压回收乙醇，浓缩至0.5g生药/ml，用酸调节pH为1.5～4，放冷，滤过，滤液上树脂体积相当于生药药液体积2～4倍的大孔树脂柱，先用1～1.5倍柱体积水冲洗，水洗液弃去，再用2～3倍柱体积的醇浓度为85～95％乙醇洗脱，收集洗脱液，洗脱液减压浓缩至浸膏，60℃真空干燥，取出，粉碎，获得第一粉末；

第二步，取余下原料药组分，分别洗净，粉碎，混合，加水煎煮提取2～3次，每次加该步获得的混合药材质量5～7倍量水，每次0.5～2小时，合并提取液，用酸调节pH为1.5～4，放冷，滤过，滤液上树脂体积相当于生药药液体积2～4倍的大孔树脂柱，先用1～1.5倍柱体积水冲洗，水洗液弃去，再用2～3倍柱体积的醇浓度为85～95％乙醇洗脱，收集洗脱液，洗脱液减压浓缩至浸膏，60℃真空干燥，取出，粉碎，获得第二粉末；

第三步，将第一粉末和第二粉末混合，进一步加入混合粉末总重量2～4倍的聚乙二醇-6000或者聚乙二醇-4000或者两者的混合物混合均匀，加热熔融，化料后移至滴丸机滴罐中，药液滴至6～8℃液体石蜡或甲基硅油中，除油，即得。

所述大孔树脂为D101、AB-8或ZTC型大孔树脂。

以下采用实施例来详细说明本发明的实施方式，借此对本发明如何应用技术手段来解决技术问题，并达成技术效果的实现过程能充分理解并据以实施。

实施例1滴丸剂1

取丹参35g、当归15g、川芎25g、赤芍20g、乌药15g、炒白术20g、党参20g、法半夏25g、三七10g、牡丹皮15g、泽泻20g、甘草20g，分别洗净，粉碎，混合在一起，加入2.2kg含质量百分比1.0％碳酸钠的醇浓度为90％乙醇，加热回流提取3次，每次2小时，合并提取液；所得的提取液减压回收乙醇，浓缩至0.5g生药/ml，用酸调节pH为3，放冷，滤过，滤液上树脂体积相当于生药药液体积3倍的D101型大孔树脂柱，先用1.5倍柱体积水冲洗，水洗液弃去，再用3倍柱体积的醇浓度为95％乙醇洗脱，收集洗脱液，洗脱液减压浓缩至浸膏，60℃真空干燥，取出，粉碎，获得第一粉末，取生地黄25g、桃仁20g、香附20g、川牛膝20g、百合15g、茯苓30g、茵陈20g、柴胡20g、陈皮20g，分别洗净，粉碎，混合，加水煎煮提取3次，每次加1.2kg的水，每次2小时，合并提取液，用酸调节pH为3，放冷，滤过，滤液上树脂体积相当于生药药液体积3倍的D101型大孔树脂柱，先用1.5倍柱体积水冲洗，水洗液弃去，再用3倍柱体积的醇浓度为95％乙醇洗脱，收集洗脱液，洗脱液减压浓缩至浸膏，60℃真空干燥，取出，粉碎，获得第二粉末，将第一粉末和第二粉末混合，进一步加入混合粉末总重量3倍的聚乙二醇-6000，混合均匀，加热熔融，化料后移至滴丸机滴罐中，药液滴至6～8℃液体石蜡或甲基硅油中，除油，即得。

药理学急毒性试验

1实验材料：

1.1实验动物

SPF级KM小鼠50只，20±2g，雌雄各半，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，动物合格证号SCXK(京)2013-0011。购入后适应性饲养一周，饲养环境26±2℃，湿度40±10％，自由饮食、饮水，正常昼夜节律。

2受试药物

2.1本发明药物滴丸水溶液：灌肠，3次/日，以蒸馏水配制成高浓度药液，然后浓缩至生药浓度为4.125g/ml。

2.2空白对照组：蒸馏水灌肠，其余条件同本发明药物组。

3实验方法

3.1预实验

随机选取12只小鼠，分成3组，每组4只，给与不同剂量，以生药浓度16.5、33.0、66.0g/kg/d，一次性灌肠，观察一周，记录小鼠各项反应，死亡情况。结果，各组动物行为学无明显异常，未出现死亡及其他毒性反应。

3.2正式实验

由于受试药物浓度和体积限制，故选取最大耐受量测定。滴丸水溶液组以66g/kg/d一次性灌肠，给药0.5ml，空白组给与0.5ml蒸馏水一次性灌肠，连续灌肠一周，详细记录各组小鼠行为学反应，体重、外观、进食进水量。

4结果与结论

观察一周后，各组小鼠活动、外观、进食、进水情况无异常，各组小鼠体重增长基本一致，无统计学差异(P>0.05)，肉眼观察无明显毒性反应。一般认为最大耐受量相当于人临床日用剂量100倍以上而动物无死亡，无明显毒性反应情况出现时，该药是安全的。本发明滴丸水溶液临床拟用量为0.3g/日，根据水溶液小鼠最大耐受量66.0g/kg/d计算，此耐受量是本发明滴丸水溶液临床拟用量的220倍。因此，可以肯定，本药品临床应用是安全的。

本发明大鼠长期毒性试验

1实验材料

1.1受试药物与配药

本发明滴丸水溶液，灌胃，3次/日，以蒸馏水配制成高浓度药液，然后浓缩至生药浓度为1.65g/ml，4℃保存备用，每日摄入总量相当于4.35g/ml。

1.2实验动物

SD大鼠，SPF级，220±20g，雌雄各半，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，动物合格证号SCXK(京)2012-0054。购入后适应性饲养一周。饲养环境23±2℃，湿度50±8％，自由饮食、饮水，正常昼夜节律。

2实验方法

2.1分组与给药途径

SD大鼠，SPF级，40只，雌雄各半，按体重随机分为对照组、本发明滴丸水溶液高剂量组、本发明滴丸水溶液中剂量组、本发明滴丸水溶液低剂量组，相应剂量为16.5g/kg/d，13.2g/kg/d，9.9g/kg/d。各给药组按剂量灌胃给药20mL/kg，对照组同法灌胃给予蒸馏水20mL/kg，试验采用灌胃给药。

2.2给药方法

本发明滴丸水溶液各剂量组，灌胃给药，1次/日，按体积20mL/kg；对照组灌胃蒸馏水，按20mL/kg灌胃。每周称1次体重，并根据体重调整给药量，连续给药6周后停药(临床用药1个疗程为1～2周)，恢复观察期为停药后2周。

3实验结果

大鼠灌胃给予本发明滴丸水溶液高剂量16.5g/kg/d，(临床成人拟用剂量99倍)、本发明滴丸水溶液中剂量13.2g/kg/d，(临床成人拟用剂量79.2倍)、本发明滴丸水溶液低剂量9.9g/kg/d，(临床成人拟用剂量59.4倍)，1次/日，连续给药6周后与对照组比较各项检测指标，如一般状态、体重、进食量、饮水量、脏器系数和组织病理学等，未见明显的毒性敏感指标和毒性靶器官；停药观察2周后，本发明滴丸水溶液高、中、低剂量组大鼠各项检测指标均属正常，未见本发明滴丸产生迟发性毒性反应和蓄积性毒性反应。试验结果说明本发明滴丸长期应用对大鼠无明显毒副作用，临床成人拟用剂量和疗程处于安全范围。

实施例2滴丸剂2

取丹参40g、当归20g、川芎30g、赤芍20g、乌药20g、炒白术20g、党参20g、法半夏25g、三七10g、牡丹皮15g、泽泻20g、甘草20g，分别洗净，粉碎，混合在一起，加入2.5kg含质量百分比1.0％碳酸钠的醇浓度为90％乙醇，加热回流提取3次，每次2小时，合并提取液；所得的提取液减压回收乙醇，浓缩至0.5g生药/ml，用酸调节pH为3，放冷，滤过，滤液上树脂体积相当于生药药液体积3倍的D101型大孔树脂柱，先用1.5倍柱体积水冲洗，水洗液弃去，再用3倍柱体积的醇浓度为95％乙醇洗脱，收集洗脱液，洗脱液减压浓缩至浸膏，60℃真空干燥，取出，粉碎，获得第一粉末，取生地黄25g、桃仁20g、香附20g、川牛膝20g、百合15g、茯苓35g、茵陈20g、柴胡20g、陈皮20g，分别洗净，粉碎，混合，加水煎煮提取3次，每次加1.5kg的水，每次2小时，合并提取液，用酸调节pH为3，放冷，滤过，滤液上树脂体积相当于生药药液体积3倍的D101型大孔树脂柱，先用1.5倍柱体积水冲洗，水洗液弃去，再用3倍柱体积的醇浓度为95％乙醇洗脱，收集洗脱液，洗脱液减压浓缩至浸膏，60℃真空干燥，取出，粉碎，获得第二粉末，将第一粉末和第二粉末混合，进一步加入混合粉末总重量3倍的聚乙二醇-6000，混合均匀，加热熔融，化料后移至滴丸机滴罐中，药液滴至6～8℃液体石蜡或甲基硅油中，除油，即得。

实施例3滴丸剂3

取丹参35g、当归15g、川芎25g、赤芍15g、乌药15g、炒白术15g、党参15g、法半夏20g、三七5g、牡丹皮10g、泽泻15g、甘草15g，分别洗净，粉碎，混合在一起，加入2kg含质量百分比1.0％碳酸钠的醇浓度为90％乙醇，加热回流提取3次，每次2小时，合并提取液；所得的提取液减压回收乙醇，浓缩至0.5g生药/ml，用酸调节pH为3，放冷，滤过，滤液上树脂体积相当于生药药液体积3倍的D101型大孔树脂柱，先用1.5倍柱体积水冲洗，水洗液弃去，再用3倍柱体积的醇浓度为95％乙醇洗脱，收集洗脱液，洗脱液减压浓缩至浸膏，60℃真空干燥，取出，粉碎，获得第一粉末，取生地黄20g、桃仁15g、香附15g、川牛膝15g、百合10g、茯苓30g、茵陈15g、柴胡15g、陈皮15g，分别洗净，粉碎，混合，加水煎煮提取3次，每次加1.2kg的水，每次2小时，合并提取液，用酸调节pH为3，放冷，滤过，滤液上树脂体积相当于生药药液体积3倍的D101型大孔树脂柱，先用1.5倍柱体积水冲洗，水洗液弃去，再用3倍柱体积的醇浓度为95％乙醇洗脱，收集洗脱液，洗脱液减压浓缩至浸膏，60℃真空干燥，取出，粉碎，获得第二粉末，将第一粉末和第二粉末混合，进一步加入混合粉末总重量3倍的聚乙二醇-6000，混合均匀，加热熔融，化料后移至滴丸机滴罐中，药液滴至6～8℃液体石蜡或甲基硅油中，除油，即得。

实施例4临床资料

1一般情况

采用前瞻随机对照研究的方法，选择2013年11月-2014年8月，因肝硬化门静脉高压症在本院施行脾切除术患者83例，随机分为对照组和实验组。实验组43例，其中男性28例，女性15例，年龄28-57岁，平均(35±2.18)岁，术前化验血小板(39±16)×10⁹/L之间，肝功能Child-Pugh分级A级23例、B级20例；对照组40例。其中男29例，女11例，年龄29-54岁，平均(36±2.13)岁，术前化验血小板(40±13)×10⁹/L之间，肝功能Child-Pugh分级A级22例、B级18例。两组患者性别、年龄及术前血小板值、肝功能Child-Pugh分级比较，差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

2治疗方法

两组患者在施行门脉高压术后，均给予护肝等对症治疗。当患者血小板升高≥400×10⁹/L开始药物干预。实验组舌下含服本发明滴丸6丸，每日2次；对照组服阿司匹林肠溶片0.1g每日1次。

3观察指标

术后隔1日化验血小板，术后常规行彩超检查，每周一次，连续3次。有疑问时行增强CT扫描进一步明确诊断。

4统计学方法

采用SPSS19.0计量资料以表示，采用配对t检验；计数资料采用X²检验，P<0.05为差异有统计学意义。

5治疗结果

表1两组患者血栓形成率比较

6讨论

本文研究结果显示：两组肝硬化门脉高压术后患者，均在血小板升高≥400×10⁹/L开始药物干预。本发明滴丸组门静脉系统血栓形成例数2例，百分比为4.6％，明显低于单用阿司匹林肠溶片的对照组的11例和22.5％。两组差异有统计学意义(P<0.05)。

实施例6动物实验研究

1实验目的

通过动物实验观察本方对肝硬化大鼠时效相关性的研究，了解本发明对肝硬化大鼠疗效。

2材料

2.1实验动物

Wistar大鼠60只，体重220±20g，北京维通利华生物技术有限公司提供。购入后，适应7d，自由进食、饮水，正常照明环境、昼夜节律。

2.2药物

2.2.1中药方剂

本发明提供的滴丸水溶液，超声波震荡溶解后，水浴加热，浓缩至含生药量1.625g/10ml，4℃保存，备用。

2.2.2水合氯醛，规格：分析纯，批号：150506，济南万邦生物制药有限公司。

2.2.3肝素钠注射液，规格12500u2ml，批号：131547，济南万邦生物制药有限公司。

2.2.4四氯化碳注射液，规格：500ml，济南万邦生物制药有限公司。

2.2.5复方丹参滴丸，国药准字Z10950111，天津天士力制药股份有限公司

2.2.6阿司匹林肠溶片，国药准字J20080078，拜耳医药保健有限公司

3实验方法

3.1造模与分组

3.1.1造模

ⅰ.将80只大鼠随机分为4组，每组20只，清洁级环境饲养。饲料中不含血管活性成分。

ⅱ.用中性菜籽油将四氯化碳稀释成60％浓度。

ⅲ.交替部位皮下注射。因四氯化碳油性液对皮肤有刺激作用，故取交替注射，一方面有利于药物的吸收，另一方面有利于皮下针刺点皮肤的愈合。

ⅳ.60％四氯化碳，3ml/kg，皮下注射。愈合不佳的皮肤每日两次消毒，以免感染发生。

ⅴ.每4天注射1次，共注射14次。每次注射前称体重，计算给药量。

ⅵ.10％乙醇液体为其唯一饮用水。

ⅶ.第14次给药后，每组随机取4只大鼠，处死，行病理解剖，光镜下证实肝硬化形成。测门静脉压力平均值达15mmH₂O，测门静脉压力低于14.7mmH₂O弃之不用。计算造模成功率。

3.2实验方法

3.2.1分组给药

根据造模成功率，取造模成功Wistar大鼠48只，根据体重随机分为4组，每组12只，分为空白对照组，本发明滴丸水溶液组(实验组)，复方丹参滴丸水溶液组(丹参组)，阿司匹林组。

空白对照组：给生理盐水0.5ml/100g，交替部位皮下注射，1次/日，给药15天。

实验组：给本发明滴丸水溶液，0.5ml/100g，交替部位皮下注射，1次/日，给药15天。

丹参组：给复方丹参滴丸水溶液，0.5ml/100g，交替部位皮下注射，1次/日，给药15天。

阿司匹林组：给阿司匹林肠溶片水溶液，0.5ml/100g，交替部位皮下注射，1次/日，给药15天。

3.2.2血液动力学检测。

10％水合三氯乙醛(0.3ml/kg)，皮下注射，麻醉大鼠。大鼠取仰卧位，沿正中线开腹，暴露血管。首先电磁流量剂测量门静脉血流量和肠系膜上动脉血流量。然后取7号头皮针直接穿刺门静脉，接压力换能器，应用八道生理记录仪，测定门静脉压力。左侧腹主动脉插管，测平均动脉压，并记录心率。

3.2.3病理学检查

实验结束时，处死实验组和对照组大鼠，开腹后切取肝左叶部分肝组织，行石蜡切片HE染色，镜下观察病理组织变化，包括肝细胞的变性坏死情况，炎性细胞浸润，纤维间隔及假小叶形成等病理变化特点。以肉眼观察到肝硬化结节形成及镜下假小叶形成为肝硬化模型诱导成功。

3.3统计学处理

应用SPSS19.0软件包进行统计分析"计量资料以均数士标准差表示，结果采用完全随机设计资料的方差分析方法进行，先进行方差齐性检验，方差齐时采用SNK法进行均数间两两比较，方差不齐时用Dunnet`sC法进行均数间的两两比较，均P＜0.05认为差异有显著性，计数资料组间比较采用等级秩和检验。

4.实验结果

4.1各组大鼠血流动力学测定

结果表明，实验组、中药阳性药物丹参组以及西药阳性药物阿司匹林组血流动力学指标明显改善，其中门脉压力分别为1.027、1.145、1.008mmHg，门静脉血流量分别为160.88、188.55、190.04ml/min，肠至膜上动脉血流量分别为270.62、289.47、264.98ml/min，腹主动脉分别为20.98、25.47、18.99mmHg，通过对各组数值差值进行统计学分析，各组指标与空白对照组比较，统计学有差异，P<0.05，与中药、西药阳性药物组比较，无统计学差异，P>0.05，表明本发明可减轻门脉高压，且对体循环无影响。各组大鼠血液动力学指标测定见表1。

表2各组大鼠血液动力学指标比较

PP:门脉压力，mmHg；PBF：门静脉血流量ml/min；

SMABF:肠系膜上动脉血流量ml/min；CAP:腹主动脉压力mmHg；

HR：心率time/min。

^*P<0.05

4.2组织病理学检查

各组大鼠的肝脏光镜分析：经过治疗后，各组大鼠的肝脏组织光镜分析：通过药物干预，肝索与肝窦的比例下降，胶原纤维条索渐分离，炎性细胞浸润减少，肝细胞坏死及脂肪变性减轻。

光学显微镜下观察HE/Massorr染色切片标本，充分显示了各组大鼠肝脏的组织学病变特征：

肝硬化大鼠组：HE染色可见肝小叶正常结构消失，增生的胶原纤维条索相互连接，完全分隔正常的肝小叶形成肝硬化：形成了许多类圆形的肝细胞团(假小叶)。肝细胞索排列紊乱而不呈放射状，中央静脉异位(偏位、不出现或出现几个)。肝细胞团内出现门管区结构：肝索与肝窦的比例约为8:1。假小叶内的肝细胞出现大量的颗粒样变性，胞质疏松化和细胞水肿，部分肝细胞成为了脂肪空泡，散在灶性肝细胞溶解坏死，仍有被胶原纤维间隔再分隔的趋势，可出现毛细胆管内瘀胆或胆栓形成。在假小叶之间的纤维间隔连续、厚薄不均。胆管增生不明显，可有较多的淋巴细胞、单核细胞浸润，原有门管区明显增宽、增粗，有明显的纤维束形成，较粗而密，相邻的门管区域中央静脉之间已形成明显的纤维间隔，分隔包绕肝组织，无充血，无水肿，无肝细胞增生。肝窦狭窄、扭曲。Masson染色显示纤维间隔内有大量胶原沉积。

实验组：出现模型组大鼠的基本病变，但是炎性细胞浸润明显减少，肝细胞损伤较轻，纤维增生明显减轻且不均一致。肝索与肝窦的比例在5:1到5:2之间，胆管增生不明显。

丹参组：肝索与肝窦的比例约为6:1，部分大鼠增生的胶原纤维条索未相互连接，未能完全分隔肝小叶为肝纤维化，部分大鼠增生的胶原纤维条索相互连接分隔肝小叶。炎性细胞浸润减少，肝细胞坏死及脂肪变性较轻，余病变特征与模型组相似。

阿司匹林组：组织学情况较实验组无明显差异。

5结论

通过实验研究表明，本发明有效的改善门静脉高压时静脉血流速度，减少炎性反应，修复肝脏组织、门静脉系统损伤，对于基本的病理有明显改善。与中药阳性药物、西药阳性药物对比研究，证实其显著疗效，综合评价，与西药阳性药物疗效接近，且副作用小；与优于中药阳性药物疗效。

所有上述的首要实施这一知识产权，并没有设定限制其他形式的实施这种新产品和/或新方法。本领域技术人员将利用这一重要信息，上述内容修改，以实现类似的执行情况。但是，所有修改或改造基于本发明新产品属于保留的权利。

以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非是对本发明作其它形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型，仍属于本发明技术方案的保护范围。

Claims (8)

1.一种用于治疗肝硬化门脉高压症术后血栓形成的药物，其特征在于：原料药包括丹参、当归、川芎、赤芍、生地黄、桃仁、香附、川牛膝、百合、乌药、炒白术、党参、茯苓、茵陈、柴胡、陈皮、法半夏、三七、牡丹皮、泽泻、甘草。

2.如权利要求1所述的用于治疗肝硬化门脉高压症术后血栓形成的药物，其特征在于：各原料药的重量份分别为丹参30～40重量份、当归15～20重量份、川芎15～30重量份、赤芍15～30重量份、生地黄15～30重量份、桃仁15～20重量份、香附15～30重量份、川牛膝15～20重量份、百合10～20重量份、乌药15～20重量份、炒白术15～20重量份、党参15～20重量份、茯苓30～40重量份、茵陈15～20重量份、柴胡15～20重量份、陈皮15～30重量份、法半夏20～30重量份、三七5～10重量份、牡丹皮10～15重量份、泽泻15～20重量份、甘草15～20重量份。

3.如权利要求1或2所述的用于治疗肝硬化门脉高压症术后血栓形成的药物，其特征在于：各原料药的重量份分别为丹参35～40重量份、当归15～20重量份、川芎25～30重量份、赤芍15～20重量份、生地黄20～25重量份、桃仁15～20重量份、香附15～20重量份、川牛膝15～20重量份、百合10～15重量份、乌药15～20重量份、炒白术15～20重量份、党参15～20重量份、茯苓30～35重量份、茵陈15～20重量份、柴胡15～20重量份、陈皮15～20重量份、法半夏20～25重量份、三七5～10重量份、牡丹皮10～15重量份、泽泻15～20重量份、甘草15～20重量份。

4.如权利要求1至3所述的用于治疗肝硬化门脉高压症术后血栓形成的药物，其特征在于：各原料药的重量份分别为丹参35重量份、当归15重量份、川芎25重量份、赤芍20重量份、生地黄25重量份、桃仁20重量份、香附20重量份、川牛膝20重量份、百合15重量份、乌药15重量份、炒白术20重量份、党参20重量份、茯苓30重量份、茵陈20重量份、柴胡20重量份、陈皮20重量份、法半夏25重量份、三七10重量份、牡丹皮15重量份、泽泻20重量份、甘草20重量份。

5.如权利要求1至4所述的用于治疗肝硬化门脉高压症术后血栓形成的药物，其特征在于：所述药物的剂型为颗粒剂、片剂、胶囊剂、滴丸剂、煎煮液、口服液、糖浆剂。

6.如权利要求1至5所述的用于治疗肝硬化门脉高压症术后血栓形成的药物，其特征在于：所述药物制备成滴丸剂。

7.一种用于治疗肝硬化门脉高压症术后血栓形成的药物滴丸，其特征在于：包括权利要求1至6所述用于治疗肝硬化门脉高压症术后血栓形成的中药药物。

8.权利要求7所述滴丸剂的制备方法，其特征在于，包括：

第一步，取丹参、当归、川芎、赤芍、乌药、炒白术、党参、法半夏、三七、牡丹皮、泽泻、甘草，分别洗净，粉碎，混合在一起，加入相对于该步获得的混合药材质量8～10倍量含质量百分比1.0％碳酸钠的醇浓度为80％～90％乙醇，加热回流提取3次，每次1～2小时，合并提取液；所得的提取液减压回收乙醇，浓缩至0.5g生药/ml，用酸调节pH为1.5～4，放冷，滤过，滤液上树脂体积相当于生药药液体积2～4倍的大孔树脂柱，先用1～1.5倍柱体积水冲洗，水洗液弃去，再用2～3倍柱体积的醇浓度为85～95％乙醇洗脱，收集洗脱液，洗脱液减压浓缩至浸膏，60℃真空干燥，取出，粉碎，获得第一粉末；

第二步，取余下原料药组分，分别洗净，粉碎，混合，加水煎煮提取2～3次，每次加该步获得的混合药材质量5～7倍量水，每次0.5～2小时，合并提取液，用酸调节pH为1.5～4，放冷，滤过，滤液上树脂体积相当于生药药液体积2～4倍的大孔树脂柱，先用1～1.5倍柱体积水冲洗，水洗液弃去，再用2～3倍柱体积的醇浓度为85～95％乙醇洗脱，收集洗脱液，洗脱液减压浓缩至浸膏，60℃真空干燥，取出，粉碎，获得第二粉末；

第三步，将第一粉末和第二粉末混合，进一步加入混合粉末总重量2～4倍的聚乙二醇-6000或者聚乙二醇-4000或者两者的混合物混合均匀，加热熔融，化料后移至滴丸机滴罐中，药液滴至6～8℃液体石蜡或甲基硅油中，除油，即得。

所述大孔树脂为D101、AB-8或ZTC型大孔树脂。