CN110025559A - 蚯蚓提取物、其制备方法及护肤品 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及天然提取物领域，且特别涉及一种蚯蚓提取物、其制备方法及护肤品。蚯蚓提取物包括吡咯喹啉醌、透明质酸、相对分子质量3000以下的小分子肽以及游离氨基酸，且每升蚯蚓提取物内含有38.6‑100.2毫克吡咯喹啉醌、80‑150毫克透明质酸、1克以上相对分子质量3000以下的小分子肽以及0.7‑1克游离氨基酸。其含有多种活性成分，且每个活性成分含量均较高，具有优异的抗氧化、抗衰老和细胞修复等生化功能。
Description
技术领域
本发明涉及天然提取物领域，且特别涉及一种蚯蚓提取物、其制备方法及护肤品。
背景技术
蚯蚓(地龙)是我国传统中药,有清热平肝、止喘通络诸功能。主治半身不遂,关节疼痛等。据记载,蚯蚓含有解热碱、嘌呤、胆碱、亚油酸、多种酶和维生素等。药用地龙多以削腹晒干后煎服,不但易损失和破坏一些有效成分,而且腥味大,服用较难。新鲜蚯蚓蛋白质含量占20％以上，蚯蚓干物质中蛋白质含量平均为56.5％，最高可达71.0％；油脂含量为5％～8％；蚯蚓还含有丰富的胡萝卜素和维生素A、B、E，及丰富的微量元素。现有技术中对于蚯蚓的提取的利用率低，且制备得到的活性成分含量少，限制了蚯蚓的应用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种蚯蚓提取物，含有多种活性成分，且每个活性成分含量均较高，具有优异的生化性能。
本发明的另一目的在于提供一种蚯蚓提取物的制备方法，该制备方法操作简单、提取效率高，且保证蚯蚓提取物内的活性成分的含量以及活性均优异。
本发明的另一目的在于提供一种护肤品，其具有优异的抗氧化、抗衰老和细胞修复功能。
本发明解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的：
本发明提出一种蚯蚓提取物，其包括吡咯喹啉醌、透明质酸、相对分子质量3000以下的小分子肽以及游离氨基酸，且每升所述蚯蚓提取物内含有38.6-100.2mg吡咯喹啉醌，每升所述蚯蚓提取物中含有80-150毫克透明质酸、1克以上相对分子质量3000以下的小分子肽以及0.7-1克游离氨基酸。
本发明提出一种蚯蚓提取物的制备方法，包括以下步骤：将预处理后的蚯蚓、溶剂和促溶物料均质形成匀浆；而后将所述匀浆与蛋白酶混合；而后再进行分离纯化形成所述蚯蚓提取物。
本发明提出一种护肤品，其包括上述的蚯蚓提取物。
本发明的蚯蚓提取物包含吡咯喹啉醌、透明质酸、相对分子质量3000以下的小分子肽以及游离氨基酸等活性成分，使得其具有良好的抗氧化、抗衰老、细胞修复等功效，继而使得其可以广泛应用于护肤品中。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
在本发明的描述中，需要说明的是，术语“第一”、“第二”等仅用于区分描述，而不能理解为指示或暗示相对重要性。
下面对本发明实施例的蚯蚓提取物、其制备方法及护肤品进行具体说明。
首先，本发明提供一种蚯蚓提取物的制备方法，包括以下步骤：
S1、对蚯蚓进行预处理；
在5-20℃的环境中，将清洗后的蚯蚓放置在pH＝5.5-6.8的微酸性水溶液中2小时以上。具体地，采用清水对蚯蚓进行漂洗，去除蚯蚓表面的灰尘、土壤等污染物。而后将清洗后的蚯蚓放置在pH＝5.5-6.8的微酸性水溶液，微酸性的环境对蚯蚓有一定的刺激作用，继而使得蚯蚓能够快速排除体内的粪便等杂质，继而保证后续蚯蚓可以全样入料，降低提取物中的杂质。
进一步地，采用的pH范围表示为微酸性环境，若酸性过强或碱性过强均容易导致蚯蚓死亡，且死亡的蚯蚓内还含有大量的污秽物。同时，控制浸泡的时间也是为了保证蚯蚓的活力，继而保证后续制备得到的提取物内活性成分的含量以及其生化功能。
而后再利用清水漂洗蚯蚓，降低上述微酸环境对后续提取的影响，接着沥干水分，使得蚯蚓干燥。
需要说明的是本发明提及的清水为现有技术中常规的蒸馏水或者超纯水。
S2、制备匀浆；
将预处理后的蚯蚓、溶剂和促溶物料均质形成匀浆，具体地，在4-10℃的条件下，将上述预处理好的蚯蚓与溶剂和促溶物料混合后再均质得到匀浆。
进一步地，采用的溶剂为醇溶剂，优选地，为二元醇，更优选地，为丙二醇，本发明采用二元醇作为提取溶剂而不采用乙醇、甲醇等一元醇作为提取溶剂，是因为二元醇对人体刺激小特别是丙二醇可以对人体刺激小，具有一定保湿效果，且可以提高提取物中渗透效果，有利于护肤品的吸收，且具有一定防腐效果，能够延长提取物的保质期。同时，丙二醇可以促进活性成分地溶出，提升提取物的提取效果。而乙醇、甲醇等对人体刺激性大，且容易导致皮肤干燥，且含有乙醇的护肤品容易导致皮肤表面的蛋白质生理活性降低或者遭到破坏。
进一步地，促溶物料为生姜，采用生姜不仅仅可以刺激蚯蚓释放更多的活性成分，能够提升提取物的产率和品质，且去除蚯蚓特有泥腥味。且生姜自身也可以提取得到部分活性成分，进一步提升提取物的功效。
且采用的生姜为生姜颗粒或者生姜片，先对生姜进行初步粉碎，能够更有利于生姜促进蚯蚓内活性成分的释放，提升提取效率。
进一步地，每1000克所述预处理后的蚯蚓对应50-100克溶剂、5-10克促溶物料。限制提取溶剂、促溶物料和蚯蚓之间的比例，能够进一步保证提取物中的活性成分的含量以及其功效。
S3、酶降解；
而后将所述匀浆与蛋白酶混合，具体地，将上述均质后得到的匀浆与蛋白酶混合。
进一步具体地，在40-65℃的条件下，将匀浆和蛋白酶混合并保温3-8小时。且每100克所述匀浆对应0.5-10克蛋白酶，添加蛋白酶能够对匀浆内的物质进行酶解，继而得到含有各种氨基酸、肽等活性成分的提取物，且采用上述比例能够保证提取效果。
进一步地，所述蛋白酶为中性蛋白酶、碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶或者酸性蛋白酶；更优选地，为采用黑曲霉(Aspergillus niger)经液体深层发酵、超滤精致而成的酸性蛋白酶。采用上述蛋白酶能够进一步提升提取效果，提升各个活性成分地含量，且保证活性成分地生理活性。
S4、分离纯化；
酶水解后再进行分离纯化形成所述蚯蚓提取物，具体地，浆与所述蛋白酶混合后3-8小时后，再加入硅藻土，而后再进行分离纯化。
加入硅藻土不仅有利于后续地分离，且能够去除匀浆和蛋白酶混合物中的腥味、色素、不溶性大分子物质和有害金属离子等，继而提升提取物的纯度和活性成分的含量，降低杂质的含量。
进一步地，分离纯化是离心形成上清液，而后再对所述上清液进行膜过滤。离心去除固体物质得到上清液，而后利用滤膜对上清液进行过滤，进一步去除上清液中存在的大分子物质，继而保证提取物中活性成分地相对分子质量，继而更有利于提取物的吸收，提升提取物的利用率。且该过滤为无菌过滤，进一步降低提取物的副作用。
进一步地，本发明还提供一种蚯蚓提取物，其包括吡咯喹啉醌、透明质酸、相对分子质量3000以下的小分子肽以及游离氨基酸，且每升所述蚯蚓提取物内含有38.6-100.2mg吡咯喹啉醌，80-150毫克透明质酸、1克以上相对分子质量3000以下的小分子肽以及0.7-1克游离氨基酸。
吡咯喹啉醌，英文名为methoxatin，分子式是C14H6N2O8，简称PQQ，是一种氧化还原酶辅基，微量的PQQ就能提高生物体组织的代谢和生长机能，因此，极其珍贵，其能够保证蚯蚓提取物的抗衰老、抗氧化等效果。
透明质酸，又称糖醛酸，是D-葡萄糖醛酸及N-乙酰葡糖胺组成的双糖单位玻尿酸，其不含硫，其透明质分子能携带500倍以上的水分，为当今所公认的最佳保湿成分，蚯蚓提取物含有透明质酸，在其应用于护肤品中时能够提升护肤品的功效。
相对分子质量3000以下的小分子肽和游离氨基酸，通过上述制备方法保证制备得到的小分子的相对分子量小，更有利于蚯蚓提取的吸收和利用。而游离氨基酸能够更直接被吸收和利用，进一步提升了蚯蚓提取物的生理效果。
进一步地，蚯蚓提取物中还包括硒元素，优选地，每升所述蚯蚓提取物中含有所述硒元素为3-8毫克。硒是一种化学元素，化学符号是Se，在化学元素周期表中位于第四周期VIA族，是一种非金属，是动物体必需的营养元素和植物有益的营养元素。同时，硒具有提升人体免疫力、抗氧化、抗癌、拮抗有机重金属、调节维生素等的吸收和利用等功效，硒能够进一步提升蚯蚓提取物的生理活性。
进一步地，蚯蚓提取物中还包括矿质元素，矿质元素是指除碳、氢、氧以外，主要由根系从土壤中吸收的元素。
优选地，所述矿质元素包括钙元素、锌元素、铁元素、镁元素、铜元素以及锰元素；
更优选地，每1000克所述蚯蚓提取物中含有所述钙元素330-449毫克；
每1000克所述蚯蚓提取物中含有所述锌元素1.08-6.88毫克；
每1000克所述蚯蚓提取物中含有所述镁元素130.1-245.75毫克；
每1000克所述蚯蚓提取物中含有所述铜元素0.5-1.39毫克；
每1000克所述蚯蚓提取物中含有所述铁元素230-330毫克；
每1000克所述蚯蚓提取物中含有所述锰元素0.8-1.03毫克。
控制上述元素在蚯蚓提取物中的含量能够进一步提升蚯蚓提取物的活性。
本发明记载的元素，是利用原子荧光光谱仪和等离子发射光谱仪测定后，分析得到的元素的含量。
本发明还提供一种护肤品，其包括上述的蚯蚓提取物，该护肤品中含有吡咯喹啉醌等活性成分，具有良好地抗氧化、抗衰老、细胞修复等功效，且具有良好的保湿效果，能够提升护肤品的功效。
且在改护肤品中蚯蚓提取物的粒度在1微米以下，控制蚯蚓提取物的粒度，有利于提升蚯蚓提取物的利用率。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
本实施例提供一种蚯蚓提取物，其包括吡咯喹啉醌、透明质酸、硒元素、钙元素、锌元素、铁元素、镁元素、铜元素、锰元素、相对分子质量3000以下的小分子肽以及游离氨基酸，且每升所述蚯蚓提取物内含有78mg吡咯喹啉醌，每升所述蚯蚓提取物中含有90毫克透明质酸、10毫克硒元素、1.005克相对分子质量3000以下的小分子肽以及0.6克游离氨基酸。每1000克所述蚯蚓提取物中含有所述钙元素为395毫克、锌元素3.50毫克、镁元素198毫克、铜元素1.20毫克、铁元素280毫克、锰元素0.92毫克。
本实施例还提供一种上述蚯蚓提取物的制备方法：
S1、对蚯蚓进行预处理；
采用清水对蚯蚓进行漂洗，而后将清洗后的蚯蚓放置在pH＝6的微酸性水溶液中3小时，而后再利用清水漂洗蚯蚓，接着沥干水分。
S2、制备匀浆；
在4℃的条件下，将1000克预处理后的蚯蚓、100克丙二醇和10克生姜颗粒均质形成匀浆。
S3、酶降解；
在55℃的条件下，以100克所述匀浆对应3克菠萝蛋白酶的比例将上述匀浆和菠萝蛋白酶混合，并保温6小时。
S4、分离纯化；
而后按照1000克的匀浆和蛋白酶混合物对应添加60克的硅藻土的比例添加硅藻土，使得硅藻土与匀浆和蛋白酶混合物混合均匀，和肉离心分离，得到上清液，在再对所述上清液进行膜过滤。
本实施例还提供一种护肤品，其包括上述的蚯蚓提取物,该蚯蚓提取物为液体，且蚯蚓提取物的粒度为1um以下。
实施例2
本实施例提供一种蚯蚓提取物，其包括吡咯喹啉醌、透明质酸、硒元素、钙元素、锌元素、铁元素、镁元素、铜元素、锰元素、相对分子质量3000以下的小分子肽以及游离氨基酸，且每升所述蚯蚓提取物内含有100.2mg吡咯喹啉醌，每毫升所述蚯蚓提取物中含有150毫克透明质酸、20毫克硒元素、1.015克相对分子质量3000以下的小分子肽以及0.7克游离氨基酸。每1000克所述蚯蚓提取物中含有所述钙元素为449毫克、锌元素6.88毫克、镁元素245.75毫克、铜元素1.38毫克、铁元素330毫克、锰元素1.03毫克。
本实施例还提供一种上述蚯蚓提取物的制备方法：
S1、对蚯蚓进行预处理；
采用清水对蚯蚓进行漂洗，而后将清洗后的蚯蚓放置在pH＝5.5的微酸性水溶液中2小时，而后再利用清水漂洗蚯蚓，接着沥干水分。
S2、制备匀浆；
在5℃的条件下，将1000克预处理后的蚯蚓、5克丙二醇和10克生姜颗粒均质形成匀浆。
S3、酶降解；
在40℃的条件下，以100克所述匀浆对应8克酸性蛋白酶的比例将上述匀浆和酸性蛋白酶混合，并保温8小时。
S4、分离纯化；
而后按照1000克的匀浆和蛋白酶混合物对应添加50克的硅藻土的比例添加硅藻土，使得硅藻土与匀浆和蛋白酶混合物混合均匀，和肉离心分离，得到上清液，在再对所述上清液进行膜过滤。
本实施例还提供一种护肤品，其包括上述的蚯蚓提取物,该蚯蚓提取物为液体，且蚯蚓提取物的粒度为1um以下。
实施例3
本实施例提供一种蚯蚓提取物，其包括吡咯喹啉醌、透明质酸、硒元素、钙元素、锌元素、铁元素、镁元素、铜元素、锰元素、相对分子质量3000以下的小分子肽以及游离氨基酸，且每升所述蚯蚓提取物内含有38.6mg吡咯喹啉醌，每升所述蚯蚓提取物中含有80毫克透明质酸、5毫克硒元素、1.02克相对分子质量3000以下的小分子肽以及0.7克游离氨基酸。每1000克所述蚯蚓提取物中含有所述钙元素为330毫克、锌元素1.08毫克、镁元素130毫克、铜元素0.5毫克、铁元素230、锰元素0.80毫微克。
本实施例还提供一种上述蚯蚓提取物的制备方法：
S1、对蚯蚓进行预处理；
采用清水对蚯蚓进行漂洗，而后将清洗后的蚯蚓放置在pH＝7.0的微酸性水溶液中2小时，而后再利用清水漂洗蚯蚓，接着沥干水分。
S2、制备匀浆；
在10℃的条件下，将1000克预处理后的蚯蚓、100克丙二醇和10克生姜颗粒均质形成匀浆。
S3、酶降解；
在65℃的条件下，以100克所述匀浆对应1克中性蛋白酶的比例将上述匀浆和菠萝蛋白酶混合，并保温3小时。
S4、分离纯化；
而后按照1000克的匀浆和蛋白酶混合物对应添加100克的硅藻土的比例添加硅藻土，使得硅藻土与匀浆和蛋白酶混合物混合均匀，和肉离心分离，得到上清液，在再对所述上清液进行膜过滤。
本实施例还提供一种护肤品，其包括上述的蚯蚓提取物,该蚯蚓提取物为液体，且蚯蚓提取物的粒度为1um以下。
对比例1：按照实施例1提供的制备方法制备蚯蚓提取物，区别在于使用的提取溶剂为乙醇。
对比例2：按照实施例2提供的制备方法制备蚯蚓提取物，区别在于使用的提取溶剂为甲醇。
对比例3：按照实施例3提供的制备方法制备蚯蚓提取物，区别在于使用的提取溶剂为去离子水。
检测1：对对比例1-3和实施例1-3的蚯蚓提取物进行游离氨基酸检测，游离氨基酸的检测方法参见国家标准(GB/T 8314-87)检测结果参见表1。
表1实施例1-3和对比例1-3的游离氨基酸含量测定(mg/g)
| g/L | 实施例1 | 实施例2 | 实施例3 | 对比例1 | 对比例2 | 对比例3 |
| 天冬氨酸 | 4.57 | 4.55 | 5.9 | 5.18 | 3.44 | 3.97 |
| 苏氨酸 | 3.73 | 4.91 | 4.3 | 4.21 | 2.98 | 4.23 |
| 丝氨酸 | 4.1 | 3.62 | 3.1 | 3.80 | 3.49 | 4.86 |
| 谷氨酸 | 7.49 | 8.37 | 10.4 | 11.36 | 8.05 | 9.55 |
| 甘氨酸 | 7.57 | 1.23 | 2.7 | 1.95 | 7.61 | 7.13 |
| 丙氨酸 | 8.12 | 5.13 | 6.0 | 6.04 | 6.51 | 7.21 |
| 半胱氨酸 | 1.63 | 0.22 | 1.2 | 0.04 | 0.69 | 1.23 |
| 缬氨酸 | 5.87 | 5.64 | 5.4 | 4.83 | 5.19 | 4.15 |
| 蛋氨酸 | 3.49 | 1.23 | 2.5 | 4.47 | 2.66 | 3.82 |
| 异亮氨酸 | 4.81 | 3.79 | 3.0 | 4.96 | 4.22 | 4.83 |
| 亮氨酸 | 6.22 | 13.09 | 4.7 | 3.92 | 5.39 | 5.46 |
| 络氨酸 | 2.6 | 2.45 | 7.9 | 0.73 | 1.65 | 2.52 |
| 苯丙氨酸 | 3.28 | 5.84 | 3.2 | 2.26 | 2.55 | 2.64 |
| 赖氨酸 | 2.62 | 6.69 | 7.2 | 11.26 | 1.66 | 2.54 |
| 组氨酸 | 4.7 | 1.52 | 2.8 | 8.44 | 4.37 | 5.943 |
| 精氨酸 | 3.44 | 9.23 | 5.5 | 0.30 | 2.67 | 3.81 |
| 脯氨酸 | 5.44 | 1.46 | 2.1 | 3.08 | 6.51 | 4.33 |
| 总量 | 79.68 | 78.97 | 77.9 | 76.9 | 69.71 | 76.27 |
检测2：对实施例1-3和对比例1-3的蚯蚓提取物吡咯喹啉醌的含量进行检测，检测方法为高效液相色谱法。检测结果参见表2。
表2吡咯喹啉醌含量检测结果(mg/L)
| 实施例1 | 实施例2 | 实施例3 | 对比例1 | 对比例2 | 对比例3 | |
| 含量 | 78 | 100.2 | 38.6 | 28 | 38.5 | 33 |
检测3：对实施例1-3和对比例1-3的透明质酸含量进行检测，检测方法为CTAB比浊法，检测结果参见表3。
表3透明质酸检测结果(ug/ml)
| 实施例1 | 实施例2 | 实施例3 | 对比例1 | 对比例2 | 对比例3 | |
| 含量 | 90 | 150 | 80 | 75 | 78 | 60 |
检测4：对实施例1-3和对比例1-3的矿质元素的含量进行检测，检测方法为原子吸收光谱法，检测结果参见表4。
表4矿质元素检测结果
| 元素名称 | 实施例1 | 实施例2 | 实施例3 | 对比例1 | 对比例2 | 对比例3 |
| Ca | 395 | 449 | 330 | 310 | 328 | 280 |
| Mg | 198 | 245.75 | 130 | 129 | 120 | 119 |
| Cu | 1.20 | 1.38 | 0.5 | 1.40 | 1.39 | 0.8 |
| Zn | 3.50 | 6.88 | 1.08 | 1.05 | 0.9 | 0.85 |
| Fe | 280 | 330 | 230 | 230 | 200 | 225 |
| Mn | 0.92 | 1.03 | 0.8 | 0.7 | 0.8 | 0.6 |
对实施例1-3和对比例1-3的硒元素进行检测，利用原子荧光光谱仪进行检测。检测结果参见表5。
表5硒元素含量测定(mg/L)
| 实施例1 | 实施例2 | 实施例3 | 对比例1 | 对比例2 | 对比例3 | |
| 含量 | 10 | 20 | 5 | 5 | 4 | 3 |
综上所述，本发明的蚯蚓提取物包含吡咯喹啉醌、透明质酸、相对分子质量3000以下的小分子肽以及游离氨基酸等活性成分，使得其具有良好的抗氧化、抗衰老、细胞修复等功效，继而使得其可以广泛应用于护肤品中。
以上所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。本发明的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的选定实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
Claims (10)
1.一种蚯蚓提取物，其特征在于，其包括吡咯喹啉醌、透明质酸、相对分子质量3000以下的小分子肽以及游离氨基酸，且每升所述蚯蚓提取物内含有38.6-100.2mg吡咯喹啉醌，80-150mg透明质酸、1克以上相对分子质量3000以下的小分子肽以及0.7-1克游离氨基酸。
2.根据权利要求1所述的蚯蚓提取物，其特征在于，所述蚯蚓提取物中还包括硒元素，优选地，每升所述蚯蚓提取物中含有所述硒元素为10-20毫克。
3.根据权利要求1所述的蚯蚓提取物，其特征在于，所述蚯蚓提取物中还包括矿质元素；
优选地，所述矿质元素包括钙元素、锌元素、铁元素、镁元素、铜元素以及锰元素；
更优选地，每1000g所述蚯蚓提取物中含有所述钙元素为330-449mg；
每1000克所述蚯蚓提取物中含有所述锌元素1.08-6.88毫克；
每1000克所述蚯蚓提取物中含有所述镁元素130.1-245.75毫克；
每1000克所述蚯蚓提取物中含有所述铜元素0.5-1.39毫克；
每1000克所述蚯蚓提取物中含有所述铁元素230-330毫克；
每1000克所述蚯蚓提取物中含有所述锰元素0.8-1.03毫克。
4.一种权利要求1所述的蚯蚓提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将预处理后的蚯蚓、溶剂和促溶物料均质形成匀浆；而后将所述匀浆与蛋白酶混合；而后再进行分离纯化形成所述蚯蚓提取物。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，每1000克所述预处理后的蚯蚓对应50-100克溶剂、5-10克促溶物料，且每100克所述匀浆对应0.5-8克蛋白酶。
6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述溶剂为醇溶剂，优选地，为二元醇，更优选地，为丙二醇；
优选地，所述促溶物料为生姜；
优选地，所述蛋白酶为中性蛋白酶、菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶或者酸性蛋白酶；更优选地为，为采用黑曲霉(Aspergillus niger)经液体深层发酵、超滤精致而成的酸性蛋白酶。
7.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述匀浆与所述蛋白酶混合后3-8小时后，再加入硅藻土，而后再进行分离纯化。
8.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，分离纯化是离心形成上清液，而后再对所述上清液进行膜过滤。
9.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述预处理后的蚯蚓是在5-20℃的环境中，将清洗后的蚯蚓放置在pH＝5.5-6.8的微酸性水溶液中2小时以上；
而后再利用清水漂洗蚯蚓；接着沥干水分。
10.一种护肤品，其特征在于，其包括权利要求1-3任一所述的蚯蚓提取物。
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