CN109975544A - 一种PEDV IgY抗体胶体金检测试纸条及其制备方法和应用 - Google Patents

一种PEDV IgY抗体胶体金检测试纸条及其制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种PEDV IgY抗体胶体金检测试纸条及其制备方法和应用，所述试纸条包括PVC底板、及依次搭接在PVC底板上的样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，其中，所述结合垫为包被有兔抗鸡IgG‑胶体金复合物的胶体金垫，所述硝酸纤维素膜上设有由山羊抗兔IgG包被的质控线和PEDV重组抗原包被的检测线。与现有技术相比，本发明填补了PEDV IgY抗体目前无针对性检测试剂的空白，相比较常规ELISA抗体检测方法，本发明更加的方便快捷。

Description

一种PEDV IgY抗体胶体金检测试纸条及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及PEDV IgY抗体(PEDV卵黄抗体)的快速检测技术领域，尤其涉及一种PEDV IgY抗体胶体金检测试纸条及其制备方法和应用。
背景技术
猪流行性腹泻病原体是猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus，PEDV)，是单股正链RNA病毒，属于Ⅰ类冠状病毒，因其能通过粪口传播、接触传播和飞沫传播感染不同性别、年龄和品种的猪，引起以急性水样下痢、呕吐、脱水等致病特征的猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea，PED)，成为当前危害世界猪业生产的主要传染性病原体之一，如何防控PEDV成为我国学者研究的重点工作。目前，针对PEDV的疫苗较少，且无论进口或国产疫苗效果均不佳，而PEDV卵黄抗体作为饲料添加剂在使用中发现对PEDV有较好的治疗作用和预防作用。但市场上暂无针对于PEDV卵黄抗体检测的试剂。
胶体金免疫层析技术作为一种新的免疫学方法，在生物医学各领域得到了日益广泛的应用。它是继传统三大免疫标记技术之后又一较为成熟的、得到广泛应用的免疫标记技术。当待测样品加入到样品膜上后，由于微孔滤膜的毛细管作用，使抗原抗体反应在固相膜上快速进行，检测一般只要5～10min就会出结果,相比其它方法(如ELISA需1～2h)大大的缩短了检测时间。其测试结果以肉眼可见的显色条带来判断，不需要特别仪器设备，只需要试纸条或渗滤试剂盒,样品只要做非常简单的处理或不需要做前处理。且具有成本较低、操作简单、试剂稳定不受温度等外界因素影响、方便快捷、特异敏感、稳定性强、结果判断直观等优点，因而特别适合于现场快速检查，具有巨大的发展潜力和广阔的应用前景，代表了诊断试剂简单快速、便于普及的发展方向。本发明制备了一种PEDV IgY的间接法胶体金检测试纸条。
发明内容
为了解决以上问题，本发明提出一种PEDV IgY抗体胶体金检测试纸条及其制备方法和应用，以提供一种针对PEDV卵黄抗体的快速检测的方法。
本发明采用以下技术方案来实现：
本发明提供了一种PEDV IgY抗体胶体金检测试纸条，包括PVC底板、及依次搭接在PVC底板上的样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，其中，所述结合垫为包被有兔抗鸡IgG-胶体金复合物的胶体金垫，所述硝酸纤维素膜上设有由山羊抗兔IgG包被的质控线和PEDV重组抗原包被的检测线。
本发明还提供了上述PEDV IgY抗体胶体金检测试纸条的制备方法，包括以下步骤：
(1)制备纯化的PEDV重组抗原；
(2)制备硝酸纤维素膜：将山羊抗兔IgG和纯化的PEDV重组抗原分别稀释后，包被在硝酸纤维素膜的质控线和检测线上；
(3)制备胶体金；
(4)胶体金标记兔抗鸡IgG：取兔抗鸡IgG，将胶体金与兔抗鸡IgG混合，离心，用PBS溶液重悬沉淀，获得兔抗鸡IgG-胶体金复合物；
(5)制备金标释放垫：将兔抗鸡IgG-胶体金复合物均匀喷在结合垫上，充分干燥，获得胶体金垫；
(6)试纸条的组装：在干燥环境下，将样品垫、胶体金垫、包被好的硝酸纤维素膜和吸水垫粘贴在PVC板上，裁切，获得试纸条。
进一步优选地，制备纯化的PEDV重组抗原的步骤包括：根据已知的PEDV N蛋白基因序列制备PEDV N蛋白的大肠杆菌重组菌，将重组菌发酵表达并离心获得菌体，将菌体破碎，离心取上清，将上清过亲合层析柱，即为纯化的PEDV重组抗原。
进一步优选地，制备硝酸纤维素膜的步骤中，山羊抗兔IgG和纯化的PEDV重组抗原分别以100mM的PBS稀释至终浓度为1mg/ml，再以0.8μL/cm的喷量喷施包被在质控线和检测线上，充分干燥。
进一步优选地，制备胶体金的方法为柠檬酸三钠还原法，步骤包括：取质量分数为0.01％-0.02％的HAuCl4水溶液100ml，加热煮沸，迅速加入质量分数为1％-5％的柠檬酸三钠水溶液1ml，继续煮沸，溶液由淡黄色变成灰色，继而转成黑色，随后逐渐稳定成酒红色，制成胶体金溶液。
进一步优选地，胶体金标记兔抗鸡IgG的步骤包括：取高纯度兔抗鸡IgG溶于0.1-0.2ml的PBS中，将胶体金溶液的pH值调至6.9；按以下组合将兔抗鸡IgG与胶体金混合：每60mg兔抗鸡IgG，加入10ml胶体金溶液；混合3min后，加入质量分数为0.05％的PEG6000室温作用结合15min后，先2000r/min低速离心10min，再12000r/min高速离心30min；用100mM/L的pH7.6的含0.2％质量分数Proclin300的PBS溶液重悬沉淀，即为兔抗鸡IgG-胶体金复合物。
进一步优选地，兔抗鸡IgG-胶体金复合物在玻璃纤维素膜上的喷量为10μL/cm。
进一步优选地，试纸条的组装的方法为：在干燥环境下准备好样品垫、胶体金垫、包被的硝酸纤维素膜、吸水垫和PVC底板，在PVC底板中央贴上包被好的硝酸纤维素膜，硝酸纤维素膜上缘粘贴吸水垫，硝酸纤维素膜下缘粘贴胶体金垫，胶体金垫下缘粘贴样品垫，完成后将试纸板切成条状。
本发明还提供了上述PEDV IgY抗体胶体金检测试纸条在检测PEDV IgY抗体中的应用，步骤包括：将检测试纸平放于桌面上，取待测血清样品50-100μL，加入样品垫，室温静置15min后，根据以下情况判定结果：
试纸有效：在质控线出现紫红色线，即说明本试纸有效；
阴性：只在质控线出现紫红色线，在检测线不出现色线；
阳性：在质控线和检测线均出现一条紫红色线；
且色线深浅与抗体滴度成正比，即抗体滴度越高，色线越深。
本发明的有益效果是：本发明提供了一种PEDV IgY抗体胶体金检测试纸条及其制备方法和应用，利用检测试纸检测后，阳性结果说明所检测样本PEDV IgY抗体阳性且达到了要求的抗体水平，阴性结果说明样本PEDV IgY抗体阴性或未达到要求的抗体水平，该试纸条可迅速检测PEDV IgY抗体水平，填补了PEDV IgY抗体目前无针对性检测试剂的空白，相比较常规ELISA抗体检测方法，本发明更加的方便快捷。
附图说明
图1为PEDV IgY抗体免疫胶体金检测试纸条结构示意图；其中，A为试纸条内部结构示意图，B为组装后产品结构示意图；
图2为PEDV IgY抗体免疫胶体金检测试纸条检测结果示意图；其中，A为样本检测结果图；B为检测结果示意图。
具体实施方式
为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体图示，进一步阐述本发明。
实施例1
1、材料
本实施例所用方法如无特别说明均为本领域的技术人员所知晓的常规方法，所用的试剂等材料，如无特别说明，均为市售购买产品。
2、方法
2.1纯化的PEDV重组抗原的制备
从GENBANK获取PEDV N蛋白基因序列，送华大基因公司制备PEDVN蛋白的大肠杆菌重组菌，将重组菌发酵表达并离心获得菌体，将菌体使用高压均质机破碎并使用超声破碎仪二次破碎，离心取上清，将上清过亲合层析柱，即为纯化的PEDV重组抗原。
2.2制备硝酸纤维素膜4
将山羊抗兔IgG和纯化的PEDV重组抗原分别以100mM的PBS稀释至终浓度为1mg/ml，然后分别均匀喷在硝酸纤维素膜4上的质控线C和检测线T，喷量均为0.8μL/cm，充分干燥。
2.3胶体金的制备
采用柠檬酸三钠还原法，制备10-40nm胶体金，具体操作方法如下：取质量分数为0.01％-0.02％的HAuCl4水溶液100ml，加热煮沸，迅速加入质量分数为1％-5％的柠檬酸三钠水溶液1ml，继续煮沸约5min，制成粒径10-40nm金颗粒，此时可观察到淡黄色的氯金酸水溶液在柠檬酸三钠加入后很快变成灰色，续而转成黑色，随后逐渐稳定成酒红色，冷却至室温后4℃避光保存。
2.3胶体金标记兔抗鸡IgG
取高纯度兔抗鸡IgG溶于0.1-0.2ml的PBS中，将胶体金溶液的pH值调至6.9；按以下组合将兔抗鸡IgG与胶体金混合：每60mg兔抗鸡IgG，加入10ml的40nm胶体金溶液；混合3min后，加入质量分数为0.05％的PEG6000室温作用结合15min后，先低速离心，2000r/min，10min，再高速离心，12000r/min，30min。用100mM/L pH7.6的PBS(含0.2％Proclin300)重悬沉淀，即为兔抗鸡IgG-胶体金复合物。
2.4制备金标释放垫
将上述制备的兔抗鸡IgG-胶体金复合物按照10μL/cm的喷量均匀喷在玻璃纤维素膜上，充分干燥，获得胶体金垫3。
2.5试纸条的组装
在干燥间内准备好吸水垫5、样品垫2、PVC底板1，在PVC底板1中央贴上步骤2.2包被好的硝酸纤维素膜4，硝酸纤维素膜4上缘粘贴吸水垫5，硝酸纤维素膜4下缘粘贴步骤2.4制备的胶体金垫3，胶体金垫3下缘粘贴样品垫2，各组分相互叠加部分为1-2mm，完成后用裁切机将贴好的试纸板切成4.1mm宽的试纸条，如图1A所示。将切好的试纸条装入卡壳中，再将试纸条和干燥剂密封于铝箔袋中，完成产品的组装，如图1B所示。
本发明所提供的检测试纸使用与结果判定方法可按照以下步骤进行：将试纸条平放于桌面上，取待测血清样品50-100μL，加入样品垫2，室温静置15min后，如图2所示，根据以下情况判定结果：
试纸有效：在质控线C出现紫红色线，即说明本试纸有效；
阴性：只在质控线C出现紫红色线，在检测线T不出现色线；
阳性：在质控线C和检测线T均出现一条紫红色线；
且色线深浅与抗体滴度成正比，即抗体滴度越高，色线越深。
3、试纸条检测效果验证
根据PEDV IgY抗体出厂时要求的抗体水平，取PEDV IgY抗体，用100mM的PBS溶液稀释至100ng/ml浓度、200ng/ml浓度、400ng/ml浓度、800ng/ml浓度，作为检测样品，同时设置空白对照，分别利用本发明的试纸条和酶联免疫吸附法(ELISA)检测抗体浓度，结果如下表1所示：
表1：不同方法检测PEDV IgY抗体浓度
表1可以看出，本发明的胶体金试纸条的检测结果与ELISA检测结果具有高度一致性，说明本发明胶体金试纸条的准确率为100％，利用本申请的胶体金试纸条检测PEDV IgY抗体及其含量是可行的。由于色线深浅与抗体滴度成正比，抗体滴度越高，色线越深，可由此来检测市售的PEDV IgY抗体产品是否达到了出厂抗体水平，以判断购买的产品是否为假货或掺假。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。

Claims (9)

1.一种PEDV IgY抗体胶体金检测试纸条，包括PVC底板、及依次搭接在PVC底板上的样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，其特征在于，所述结合垫为包被有兔抗鸡IgG-胶体金复合物的胶体金垫，所述硝酸纤维素膜上设有由山羊抗兔IgG包被的质控线和PEDV重组抗原包被的检测线。
2.一种如权利要求1所述的PEDV IgY抗体胶体金检测试纸条的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)制备纯化的PEDV重组抗原；
(2)制备硝酸纤维素膜：将山羊抗兔IgG和纯化的PEDV重组抗原分别稀释后，包被在硝酸纤维素膜上的质控线和检测线上；
(3)制备胶体金；
(4)胶体金标记兔抗鸡IgG：取兔抗鸡IgG，将胶体金与兔抗鸡IgG混合，离心，用PBS溶液重悬沉淀，获得兔抗鸡IgG-胶体金复合物；
(5)制备金标释放垫：将兔抗鸡IgG-胶体金复合物均匀喷在结合垫上，充分干燥，获得胶体金垫；
(6)试纸条的组装：在干燥环境下，将样品垫、胶体金垫、包被好的硝酸纤维素膜和吸水垫粘贴在PVC板上，裁切，获得试纸条。
3.根据权利要求2所述的一种PEDV IgY抗体胶体金检测试纸条的制备方法，其特征在于，制备纯化的PEDV重组抗原的步骤包括：根据已知的PEDV N蛋白基因序列制备PEDV N蛋白的大肠杆菌重组菌，将重组菌发酵表达并离心获得菌体，将菌体破碎，离心取上清，将上清过亲合层析柱，即为纯化的PEDV重组抗原。
4.根据权利要求2所述的一种PEDV IgY抗体胶体金检测试纸条的制备方法，其特征在于，制备硝酸纤维素膜的步骤中，山羊抗兔IgG和纯化的PEDV重组抗原分别以100mM的PBS稀释至终浓度为1mg/ml，再以0.8μL/cm的喷量喷施在质控线和检测线上，充分干燥。
5.根据权利要求2所述的一种PEDV IgY抗体胶体金检测试纸条的制备方法，其特征在于，制备胶体金的方法为柠檬酸三钠还原法，步骤包括：取质量分数为0.01％-0.02％的HAuCl4水溶液100ml，加热煮沸，迅速加入质量分数为1％-5％的柠檬酸三钠水溶液1ml，继续煮沸，溶液由淡黄色变成灰色，继而转成黑色，随后逐渐稳定成酒红色，制成金颗粒。
6.根据权利要求2所述的一种PEDV IgY抗体胶体金检测试纸条的制备方法，其特征在于，胶体金标记兔抗鸡IgG的步骤包括：取高纯度兔抗鸡IgG溶于0.1-0.2ml的PBS中，将胶体金溶液的pH值调至6.9；按以下组合将兔抗鸡IgG与胶体金混合：每60mg兔抗鸡IgG，加入10ml胶体金溶液；混合3min后，加入质量分数为0.05％的PEG6000室温作用结合15min后，先2000r/min低速离心10min，再12000r/min高速离心30min；用100mM/L的pH7.6的含有0.2％质量分数Proclin300的PBS溶液重悬沉淀，即为兔抗鸡IgG-胶体金复合物。
7.根据权利要求2所述的一种PEDV IgY抗体胶体金检测试纸条的制备方法，其特征在于，兔抗鸡IgG-胶体金复合物在结合垫上的喷量为10μL/cm。
8.根据权利要求2所述的一种PEDV IgY抗体胶体金检测试纸条的制备方法，其特征在于，试纸条的组装的方法为：在干燥环境下准备好样品垫、胶体金垫、包被的硝酸纤维素膜、吸水垫和PVC底板，在PVC底板中央贴上包被好的硝酸纤维素膜，硝酸纤维素膜上缘粘贴吸水垫，硝酸纤维素膜下缘粘贴胶体金垫，胶体金垫下缘粘贴样品垫，完成后将试纸板切成条状。
9.一种如权利要求1所述的PEDV IgY抗体胶体金检测试纸条在检测PEDV IgY抗体中的应用，其特征在于，将检测试纸平放于桌面上，取待测血清样品50-100μL，加入样品垫，室温静置15min后，根据以下情况判定结果：
试纸有效：在质控线出现紫红色线，即说明本试纸有效；
阴性：只在质控线出现紫红色线，在检测线不出现色线；
阳性：在质控线和检测线均出现一条紫红色线；
且色线深浅与抗体滴度成正比，即抗体滴度越高，色线越深。
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Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111551744A (zh) * 2020-05-15 2020-08-18 安徽中起生物科技有限公司 新城疫病毒N蛋白IgY抗体胶体碳检测试纸及其应用
CN111551745A (zh) * 2020-05-15 2020-08-18 安徽中起生物科技有限公司 禽流感病毒H7N9亚型N蛋白IgY抗体检测胶体金试纸及方法
CN111551746A (zh) * 2020-05-15 2020-08-18 安徽中起生物科技有限公司 非洲猪瘟病毒N蛋白IgY抗体检测胶体金试纸及方法
CN111579795A (zh) * 2020-05-15 2020-08-25 安徽中起生物科技有限公司 猪蓝耳病毒GP5蛋白IgY抗体检测免疫荧光试纸及其制备方法和应用
CN111948388A (zh) * 2020-08-18 2020-11-17 山东农业大学 一种检测腐败梭菌的胶体金试纸条及其制备方法和应用
CN114184791A (zh) * 2020-09-15 2022-03-15 北京市农林科学院 一种检测副鸡禽杆菌外膜蛋白抗体的胶体金试纸及其制备方法与应用

Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101570574A (zh) * 2009-06-10 2009-11-04 中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所 一种抗I型志贺毒素IgY抗体、及其制备方法和用途
CN102645538A (zh) * 2012-03-28 2012-08-22 广西壮族自治区兽医研究所 H5亚型禽流感病毒抗体的ha抗原表位胶体金快速检测试纸条
CN103033626A (zh) * 2012-12-27 2013-04-10 北京大北农科技集团股份有限公司动物医学研究中心 猪tgev抗体与猪pedv抗体胶体金试纸条
CN103454419A (zh) * 2013-07-22 2013-12-18 东北农业大学 一种用于检测猪流行性腹泻病毒的免疫胶体金试纸条及其制备方法和应用
CN103777010A (zh) * 2014-01-27 2014-05-07 深圳市宝舜泰生物医药股份有限公司 猪流行性腹泻病毒elisa检测试剂盒及其制备方法
CN104459156A (zh) * 2014-12-01 2015-03-25 周丽华 一种诊断猪病毒性腹泻的蛋白芯片
CN104730238A (zh) * 2015-02-05 2015-06-24 四川农业大学 一种检测抗猪流行性腹泻病毒抗体的elisa检测试剂盒及其使用方法和用途
CN206725585U (zh) * 2017-05-24 2017-12-08 河南科技学院 一种猪流行性腹泻病毒快速早期诊断试纸
CN109283339A (zh) * 2018-09-26 2019-01-29 郝保林 一种寨卡病毒抗原抗体检测试剂盒

Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101570574A (zh) * 2009-06-10 2009-11-04 中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所 一种抗I型志贺毒素IgY抗体、及其制备方法和用途
CN102645538A (zh) * 2012-03-28 2012-08-22 广西壮族自治区兽医研究所 H5亚型禽流感病毒抗体的ha抗原表位胶体金快速检测试纸条
CN103033626A (zh) * 2012-12-27 2013-04-10 北京大北农科技集团股份有限公司动物医学研究中心 猪tgev抗体与猪pedv抗体胶体金试纸条
CN103454419A (zh) * 2013-07-22 2013-12-18 东北农业大学 一种用于检测猪流行性腹泻病毒的免疫胶体金试纸条及其制备方法和应用
CN103777010A (zh) * 2014-01-27 2014-05-07 深圳市宝舜泰生物医药股份有限公司 猪流行性腹泻病毒elisa检测试剂盒及其制备方法
CN104459156A (zh) * 2014-12-01 2015-03-25 周丽华 一种诊断猪病毒性腹泻的蛋白芯片
CN104730238A (zh) * 2015-02-05 2015-06-24 四川农业大学 一种检测抗猪流行性腹泻病毒抗体的elisa检测试剂盒及其使用方法和用途
CN206725585U (zh) * 2017-05-24 2017-12-08 河南科技学院 一种猪流行性腹泻病毒快速早期诊断试纸
CN109283339A (zh) * 2018-09-26 2019-01-29 郝保林 一种寨卡病毒抗原抗体检测试剂盒

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
单虎 等: "《现代兽医兽药大全 动物生物制品分册》", 30 April 2011 *
周宏专: "猪流行性腹泻研究概况", 《动物医学进展》 *

Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111551744A (zh) * 2020-05-15 2020-08-18 安徽中起生物科技有限公司 新城疫病毒N蛋白IgY抗体胶体碳检测试纸及其应用
CN111551745A (zh) * 2020-05-15 2020-08-18 安徽中起生物科技有限公司 禽流感病毒H7N9亚型N蛋白IgY抗体检测胶体金试纸及方法
CN111551746A (zh) * 2020-05-15 2020-08-18 安徽中起生物科技有限公司 非洲猪瘟病毒N蛋白IgY抗体检测胶体金试纸及方法
CN111579795A (zh) * 2020-05-15 2020-08-25 安徽中起生物科技有限公司 猪蓝耳病毒GP5蛋白IgY抗体检测免疫荧光试纸及其制备方法和应用
CN111579795B (zh) * 2020-05-15 2023-03-31 安徽中起生物科技有限公司 猪蓝耳病毒GP5蛋白IgY抗体检测免疫荧光试纸及其制备方法和应用
CN111551745B (zh) * 2020-05-15 2023-04-07 安徽中起生物科技有限公司 禽流感病毒H7N9亚型N蛋白IgY抗体检测胶体金试纸及方法
CN111948388A (zh) * 2020-08-18 2020-11-17 山东农业大学 一种检测腐败梭菌的胶体金试纸条及其制备方法和应用
CN111948388B (zh) * 2020-08-18 2022-03-22 山东农业大学 一种检测腐败梭菌的胶体金试纸条及其制备方法和应用
CN114184791A (zh) * 2020-09-15 2022-03-15 北京市农林科学院 一种检测副鸡禽杆菌外膜蛋白抗体的胶体金试纸及其制备方法与应用

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