CN109937883A

CN109937883A - 百子莲矮生重瓣品种‘钻石重’的种苗快速繁育方法

Info

Publication number: CN109937883A
Application number: CN201910344497.1A
Authority: CN
Inventors: 陈香波; 李圃锦; 张冬梅
Original assignee: Shanghai Academy of Landscape Architecture Science and Planning
Current assignee: Shanghai Academy of Landscape Architecture Science and Planning
Priority date: 2019-04-26
Filing date: 2019-04-26
Publication date: 2019-06-28

Abstract

本发明一种百子莲矮生重瓣品种‘钻石重’（Agapanthus ‘Double Dimond’）的种苗快速繁育方法，包括以下步骤：（1）外植体的选择；（2）外植体消毒处理；（3）启动培养；（4）增殖培养；（5）壮苗培养；（6）生根培养；（7）炼苗与移栽。本发明首次公开了百子莲品种‘钻石重’的组织培养繁殖方法，利用本发明的方法不仅可保留品种优良性状，增殖系数由原来的年增殖不及3.0增加到月增殖8.0，繁殖效率得到大大提高。可在短期内获得大量性状稳定、保持品种优良性状的种苗。将该种苗用于盆栽或在园林绿地中作为花境植物种植，扩大了百子莲品种的生产应用，满足市场需求。

Description

百子莲矮生重瓣品种‘钻石重’的种苗快速繁育方法

技术领域

本发明属于花卉园艺领域，涉及一种百子莲品种种苗的繁育技术，具体来说是百子莲矮生重瓣品种‘钻石重’(Agapanthus‘Double Dimond’)的种苗快速繁育方法。

背景技术

百子莲(Agapanthus spp.)又名非洲蓝百合、非洲爱情花，是原产于南非的多年生常绿或落叶草本花卉，具顶生聚伞花序，花色为深浅不一的蓝、白或紫色，花期6～9月，花大色艳、花期长、适应性强、病虫害少，既用作鲜切花，也可作盆花或花坛、花境植物栽培，应用范围广泛。大约十七世纪中叶百子莲被引入英国，经过三百多年的发展，如今已成为欧洲庭院中种植的主要球根花卉之一，为西方仅次于玫瑰表达爱意的爱情花。

百子莲重瓣品种‘钻石重’(Agapanthus‘Double Dimond’)为上海市园林科学规划研究院2014年国内首次引进的百子莲园艺品种。该品种叶片常绿，花葶极度矮化，高度仅20cm左右，花白色、重瓣，雄蕊瓣化，花瓣数9～19，特别适合盆栽或作矮生地被植物种植，推广应用前景广阔。

该品种引进国内后种植，因为是重瓣品种、雄蕊特化，不能够正常结实。在部分地区种植时，6月上旬开花、花期较早，花后侧基仅出现2～3个新芽，年增殖系数不及3.0，未开花株未有新芽生出，受出芽数限制，切芽分株繁殖，繁殖系数不高，制约着这一优良品种扩大推广种植。

发明内容

本发明的目的在于提供一种百子莲矮生重瓣品种‘钻石重’的种苗快速繁育方法，所述的这种百子莲矮生重瓣品种‘钻石重’的种苗快速繁育方法要解决现有技术中的该品种不能够种子结实、分株繁殖效率不高的问题。

本发明提供了一种百子莲矮生重瓣品种‘钻石重’的种苗快速繁育方法，包括如下步骤：

1)一个选择外植体的步骤：选取百子莲矮生重瓣品种‘钻石重’的根茎侧基发出的新芽，切割带有部分根茎组织的新芽，切割后用蘸取了体积百分比浓度为浓度为75％酒精的棉球擦拭芽组织，剥离芽外围叶，保留4～6片包裹叶，使得芽的长度在0.6～1.0cm范围内，以备消毒；

2)一个对外植体进行消毒处理的步骤：采用体积百分比浓度为1％的洗洁精进行表面清洗10～15min，然后用自来水冲洗1～2h，移至超净工作台；先用体积百分比浓度为75％的酒精冲涮30s，无菌水冲洗至少2次，然后用体积百分比浓度为0.1％的氯化汞溶液摇动消毒6～8min，无菌水冲洗至少2次，剥去外层包裹叶、露出心芽；然后加入0.05％氯化汞溶液浸泡1min，无菌水冲洗至少2次；

3)一个启动培养的步骤：采用灭菌刀片薄层切去芽基部受消毒剂杀伤致死的根茎组织，将芽接入诱导培养基MS+6-BA 4.0～8.0mg/L+NAA 0.1mg/L上培养，在所述的培养基上培养至母芽侧基出现1～2个新芽；

4)一个增殖培养的步骤：将侧基芽及母芽沿中心切割一分为二，转入增殖培养基MS+6-BA2.0～6.0mg/L+NAA 0.1mg/L上培养，在该培养基上培养至芽基陆续增生6～10个丛生状不定芽，1月后切割不定芽继续转接至芽增殖培养基MS+6-BA 4.0mg/L+NAA 0.1mg/L进行继代增殖培养，如此反复转接实现增殖；

5)一个壮苗培养的步骤：切割增殖丛生芽至壮苗培养基MS+6-BA 0.2mg/L+NAA0.05～0.1mg/L中培养，在该培养基上培养至基部紧密丛生的芽成为独立的芽；

6)一个生根培养的步骤：在壮苗培养基上培养后，分别将单个芽切割转入生根培养基培养，所述的生根培养基为1/2MS+NAA 0.2mg/L或1/2MS+IBA 0.2mg/L或MS+NAA0.2mg/L，在该培养基上接种培养10天后芽基部开始出现根凸起，至50～60天后生根数4～10、最大根长40～60mm，苗高长至50～70mm的生根苗即可进行移栽。

进一步的，还包括一个炼苗与移栽的步骤：于春、秋季外界气温10～20℃时，进行组培生根苗移栽。

优选的，在步骤2)中，用体积百分比浓度为0.1％的氯化汞溶液摇动消毒6min剥去外层包裹叶、露出心芽后再加入0.05％氯化汞溶液浸泡1min，无菌水冲洗至少2次。

优选的，步骤3)的诱导培养基为MS+6-BA 8.0mg/L+NAA 0.1mg/L。

优选的，步骤4)的增殖培养基为MS+6-BA4.0mg/L+NAA 0.1mg/L。

优选的，步骤5)的的壮苗培养基为MS+6-BA 0.2mg/L+NAA 0.05mg/L。

优选的，步骤6)的生根培养基为1/2MS+NAA 0.2mg/L。

进一步的，移栽前两天先打开瓶盖，组培瓶内加入少量蒸馏水薄层湿润培养基，瓶盖完全打开降低空气湿度，叶表面喷雾化水以使瓶苗适应，2～4天后取出组培苗清洗基部培养基移栽至栽培基质中，所述的栽培基质由草炭和珍珠岩按照体积比3:1混合；栽后喷施水分使基质足够吸水保湿，新移栽小苗置于透明塑料薄膜下以保湿，每日中午掀开塑料薄膜稍透气0.5～1h，其余时间遮盖，视基质干燥情况适当喷雾补水，2周后打开塑料薄膜，使适应自然光照与空气湿度，炼苗完成。

本发明是利用植物细胞全能性，带芽组织接种在含有激素的营养培养基中诱导不定芽获得再生植株，其技术关键在于通过消毒处理获得无菌材料并增殖与生根，实现无性繁殖。

本发明提供了一种短期内大量快速繁殖获得优质种苗的技术方法，不仅可保留品种优良性状且在原有基础上繁殖系数得到大大提高。

本发明和已有技术相比，其技术效果是积极和明显的。本发明首次公开了百子莲品种‘钻石重’(Agapanthus‘Double Dimond’)的组织培养繁殖方法，利用本发明的方法不仅可保留品种优良性状，增殖系数由原来的年增殖不及3.0增加到月增殖8.0，繁殖效率得到大大提高，可在短期内获得大量性状稳定、能保持百子莲品种Agapanthus‘DoubleDimond’母本优良性状的种苗。将该种苗用于盆栽或在园林绿地中作为花境植物种植，可以扩大这一新优百子莲品种的生产应用，满足市场需求。

附图说明

图1为初代诱导的照片。

图2为继代增殖的照片。

图3为壮苗培养的照片。

图4为实施例1中生根培养的照片。

图5为移栽苗的照片。

图6为实施例2中生根苗的照片。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。

实施例1：

于上海地区的11月上旬晴天的上午，采集百子莲品种‘钻石重’(Agapanthus‘Double Dimond’)开花苗种植土壤表层以上根茎处发出的新芽，切割带有部分根茎组织的新芽，切割后用蘸取了体积百分比浓度为75％酒精的棉球擦拭芽，修切芽基去除表面污垢，剥离芽外围叶保留4片叶，剪切至1.0cm长度，清水加以冲涮。

将修切好的外植体先用体积百分比浓度为1％洗洁精溶液浸泡冲涮10min，流动自来水冲洗1h，进入超净工作台；加入体积百分比浓度为75％酒精冲涮外植体30s，无菌水冲洗3次；用体积百分比浓度为0.1％氯化汞溶液摇动消毒6min，无菌水冲洗3次；小心剥开外部包裹叶、露出心芽，然后加入0.05％氯化汞溶液浸泡1min，无菌水冲洗3次。

将消毒好的芽外植体切去基部受消毒液杀伤的表面薄层，接入芽诱导培养基MS+6-BA 8.0mg/L+NAA 0.1mg/L，1月后芽基部诱导产生2个侧基芽(如图1所示)，2月后切割侧基芽连同主芽继续转接至芽诱导培养基MS+6-BA 8.0mg/L+NAA 0.1mg/L，诱导叶片增生、芽增粗叶包裹更为紧密。

2月后沿芽中心四分切割分别带部分基部组织接入芽增殖培养基MS+6-BA 4.0mg/L+NAA 0.05mg/L，接入芽基部生出6～10个丛生状不定芽，平均增殖倍数8.0，1月后继续切割不定芽转接至相同的芽增殖培养基进行继代，如此反复实现芽不断增殖(如图2所示)。

增殖芽紧密丛生，切割增殖芽团转入壮苗培养基MS+6-BA 0.2mg/L+NAA 0.05mg/L，丛生芽中的单芽分离伸长、叶片伸展(如图3所示)，1月后，分别切割单芽转入生根培养基1/2MS+NAA 0.2mg/L，10天后小苗基部开始有根凸起，接种5天根数达到5～8、最大根长50cm(如图4所示)、苗高达到50cm，叶片舒展正常，准备进行移栽。

于秋季10月下旬外界气温10～20℃时进行移栽。移栽前先提前打开瓶盖2天，降低空气湿度使瓶苗适应自然空气湿度，取出组培苗，冲洗基部培养基，移栽基质选用草炭和珍珠岩，所述的草炭和珍珠岩的体积比为3:1，充分混合，事先在基质中挖出小穴，将组培苗根系置入其中基质盖匀，轻压覆实。

小苗塑料薄膜覆盖置于荫处，喷施水分使基质足够吸水保湿，其后每日中午见光透气约1h，2周后逐渐打开塑料薄膜使适应自然光照与空气湿度，炼苗完成，获得苗高50～60cm、根数5～8根的健壮正常苗(如图5所示)。

实施例2：

于上海地区的10月下旬晴天的上午，采集百子莲品种‘钻石重’(Agapanthus‘Double Dimond’)土壤表层以上根茎处发出的新芽，将新芽进行切割，切割后的新芽带有部分根茎组织，然后用蘸取了体积百分比浓度为75％酒精棉球擦拭芽，去除芽表面污垢，剥离芽外围叶保留6片叶，剪切至0.8cm长度，清水冲涮。

将擦拭后的外植体先用体积百分比浓度为1％洗洁精溶液浸泡冲涮15min，流动自来水冲洗2h，进入超净工作台；加入体积百分比浓度为75％酒精冲涮外植体30s，无菌水冲洗3次；用体积百分比浓度为0.1％氯化汞溶液摇动消毒8min，无菌水冲洗3次。

将消毒好的芽外植体切去基部受消毒液杀伤的表面薄层，小心剥开外部包裹叶保留2片叶，将修切好的芽接入芽诱导培养基MS+6-BA 8.0mg/L+NAA 0.1mg/L，1月后芽伸长、基部膨大，2月后中央切分芽继续转接至芽诱导培养基MS+6-BA 8.0mg/L+NAA 0.1mg/L，诱导基部增生丛生不定芽。

2月后切割单个不定芽转入芽增殖培养基MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L，接入芽基部生出6～10个丛生状不定芽，平均增殖倍数4.2，1月后继续切割不定芽转接至相同的芽增殖培养基进行继代，如此反复实现芽不断增殖。

增殖芽紧密丛生，切割增殖芽团转入壮苗培养基MS+6-BA 0.2mg/L+NAA 0.05mg/L，丛生芽中的单芽分离伸长、叶片伸展，1月后，分别切割单芽转入生根培养基1/2MS+IBA0.2mg/L，12天后小苗基部开始有根凸起，接种50天根数达到2～4、最大根长35cm、苗高达到44cm(如图6所示)，叶片舒展正常，准备进行移栽。

于春季3月下旬外界温度10～18℃时进行移栽。移栽前先提前打开瓶盖4天，降低空气湿度使瓶苗适应自然空气湿度，取出组培苗，冲洗基部培养基，移栽基质选用草炭和珍珠岩，所述的草炭和珍珠岩的体积比为3:1，充分混合，事先在基质中挖出小穴，将组培苗根系置入其中基质盖匀，轻压覆实。

小苗塑料薄膜覆盖置于荫处，喷施水分使基质足够吸水保湿，2周后逐渐打开塑料薄膜使适应自然光照与空气湿度，炼苗完成，获得苗高50～55cm、根数4～6根的正常苗(如图6所示)。

Claims

1.一种百子莲矮生重瓣品种‘钻石重’的种苗快速繁育方法，其特征在于：包括如下步骤：

1)一个选择外植体的步骤：选取百子莲矮生重瓣品种‘钻石重’的根茎侧基发出的新芽，切割带有部分根茎组织的新芽，切割后用蘸取了体积百分比浓度为75％酒精的棉球擦拭芽组织，剥离芽外围叶，保留4～6片包裹叶，使得芽的长度在0.6～1.0cm范围内，以备消毒；

2)一个对外植体进行消毒处理的步骤：采用体积百分比浓度为1％的洗洁精进行表面清洗10～15min，然后用自来水冲洗1～2h，移至超净工作台；先用体积百分比浓度为75％的酒精冲涮30s，无菌水冲洗至少2次，然后用体积百分比浓度为0.1％的氯化汞溶液摇动消毒6～8min，无菌水冲洗至少2次，剥去外层包裹叶、露出心芽；

5)一个壮苗培养的步骤：切割增殖丛生芽至壮苗培养基MS+6-BA 0.2mg/L+NAA 0.05～0.1mg/L中培养，在该培养基上培养至基部紧密丛生的芽成为独立的芽；

6)一个生根培养的步骤：在壮苗培养基上培养后，分别将单个芽切割转入生根培养基培养，所述的生根培养基为1/2MS+NAA 0.2mg/L或1/2MS+IBA 0.2mg/L或MS+NAA 0.2mg/L，在该培养基上接种培养10天后芽基部开始出现根凸起，至50～60天后生根数4～10、最大根长40～60mm，苗高长至50～70mm的生根苗时进行移栽。

2.根据权利要求1所述的一种百子莲矮生重瓣品种‘钻石重’的种苗快速繁育方法，其特征在于：还包括一个炼苗与移栽的步骤：于春、秋季外界气温10～20℃时，进行组培生根苗移栽。

3.根据权利要求1所述的一种百子莲矮生重瓣品种‘钻石重’的种苗快速繁育方法，其特征在于：在步骤2)中，剥去外层包裹叶、露出心芽后再加入0.05％氯化汞溶液浸泡1min，无菌水冲洗至少2次。

4.根据权利要求1所述的一种百子莲矮生重瓣品种‘钻石重’的种苗快速繁育方法，其特征在于：步骤3)的诱导培养基为MS+6-BA 8.0mg/L+NAA 0.1mg/L。

5.根据权利要求1所述的一种百子莲矮生重瓣品种‘钻石重’的种苗快速繁育方法，其特征在于：步骤4)的增殖培养基为MS+6-BA4.0mg/L+NAA 0.1mg/L。

6.根据权利要求1所述的一种百子莲矮生重瓣品种‘钻石重’的种苗快速繁育方法，其特征在于：步骤5)的的壮苗培养基为MS+6-BA 0.2mg/L+NAA 0.05mg/L。

7.根据权利要求1所述的一种百子莲矮生重瓣品种‘钻石重’的种苗快速繁育方法，其特征在于：步骤6)的生根培养基为1/2MS+NAA 0.2mg/L。

8.根据权利要求2所述的一种百子莲矮生重瓣品种‘钻石重’的种苗快速繁育方法，其特征在于：移栽前两天先打开瓶盖，组培瓶内加入少量蒸馏水薄层湿润培养基，瓶盖完全打开降低空气湿度，叶表面喷雾化水以使瓶苗适应，2～4天后取出组培苗清洗基部培养基移栽至栽培基质中，所述的栽培基质由草炭和珍珠岩按照体积比3:1混合；栽后喷施水分使基质足够吸水保湿，新移栽小苗置于透明塑料薄膜下以保湿，每日中午掀开塑料薄膜稍透气0.5～1h，其余时间遮盖，视基质干燥情况适当喷雾补水，2周后打开塑料薄膜，使适应自然光照与空气湿度，炼苗完成。