CN109089884A - 一种栝楼种苗的快繁方法 - Google Patents
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Abstract
一种栝楼种苗的快繁方法，其特征在于包括以下步骤：1）外植体的选取：晴天中午剪取已知雌、雄栝楼苗的嫩枝，剪下枝条后将叶去除；2）消毒处理：将嫩枝切成2‑3cm的茎段，在超净工作台上进行消毒，然后将带节茎段接种于启动培养基中，建立无菌体系，获得无菌新芽；3）继代培养：待无菌体系建立完成并长出无菌新芽后，再转接至继代培养基中进行继代培养；4）生根培养：将新芽转接至生根培养基中进行生根培养；5）移植：将生根培养基中培育好的的瓶苗移至种植棚内放置1‑2周，开瓶，取苗，洗苗，浸苗，然后移栽至装有基质的容器中，浇定植水，最后置于大棚内进行驯化；它具有易于控制实施，成活率高，能快速增殖等特点。
Description
技术领域
本发明涉及植物培育领域，更具体的说，涉及一种栝楼种苗的快繁方法。
背景技术
栝楼别名吊瓜、瓜蒌，其根（天花粉）、果（栝楼实）、果皮（栝楼皮）、种子（栝楼仁）均可入药，其中栝楼子又名吊瓜子，为天然绿色休闲食品。栝楼为雌雄异株植物，雌性栝楼和雄性栝楼有不同的收获部位，具有不同的药用价值和经济价值，因此在人工栽培种控制栝楼雌雄植株的比例十分必要。以收获天花粉为目的，可以种植100%的雄性栝楼，而以收获栝楼果实、果皮、种子（栝楼仁或食用吊瓜子）则栽培的雌雄比例为10：1为宜，而自然分化的雌雄植株比例为3：7，这个比例对不同种植目的都不合适，且目前还没有依据种子或幼苗对栝楼进行性别鉴定的技术；通过种子播种繁殖，不仅需要大量的种子（雌雄比例3:7）播种，栽培种植到开花结果才能够分辨雌雄株，浪费人力、物力、空间。因此，对栝楼进行雌雄定向繁殖则显得尤为重要。通过块根繁殖、枝条扦插、组培可以实现定向繁育。
目前实际生产上多采用块根繁殖、枝条扦插来生产种苗，但两者的增殖系数有限，需要消耗大量的原材料，不利于实际大规模生产。而目前的组培技术中，使用植物生长调节剂含量较高，容易造成激素积累，不能进行多次继代培养，继代苗容易产生愈伤组织、褐化死亡；生根苗黄化、玻璃化严重，目前栝楼的组培繁育技术只涉及组培阶段，且没有专门对于组培苗驯化移栽适应栽培环境的培育技术。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术存在的不足，而提供一种栝楼种苗的快繁方法，该方法易于控制实施，成活率高，能快速增殖，可有效提高栝楼种苗的品质。
本发明的目的是通过如下技术方案来完成的，一种栝楼种苗的快繁方法，其包括以下步骤：
1）外植体的选取：晴天中午剪取已知雌、雄栝楼苗具明显节10节以下的嫩枝，剪下枝条后将叶去除，留1/2叶柄；
2）消毒处理：将嫩枝切成2-3cm的茎段，近茎端叶柄留0.6-1cm,放入已经灭菌的玻璃瓶内，在超净工作台上先后用无菌水冲洗2-3次，75%酒精消毒30s,无菌水冲洗2-3次，0.1%升汞消毒10-15分钟，无菌水冲洗8-10次，然后将消毒后的茎段用无菌抽纸吸干表面水分，将茎段两端切去，留0.5-1cm带节茎段，然后将带节茎段接种于启动培养基中，每瓶培养基接种1个带节茎段，建立无菌体系，获得无菌新芽；
3）继代培养：待无菌体系建立完成并长出无菌新芽后，将无菌新芽切段为1-2个节的茎段，再转接至继代培养基中进行继代培养，所述继代培养的培养周期为15-30天；
4）生根培养：将继代培养后的新芽切除基部愈伤组织，转接至生根培养基中进行生根培养获得瓶苗，所述生根培养的培养周期为15-20天；
5）移植：将生根培养基中培育好的的瓶苗移至种植棚内放置1-2周，开瓶，取苗，洗苗，浸苗，然后移栽至装有基质的容器中，浇定植水，最后置于大棚内进行驯化。
作为优选：所述步骤2）中启动培养基为MS+6-BA 0.1-0.2mg/L+糖20g+琼脂粉5g，PH值为6.0。
作为优选：所述步骤2）中建立无菌体系的具体操作为：在启动培养基培养的过程中，将污染的、死亡的茎段剔除，留下未污染、腋芽萌发的茎段继续培养，获得无菌新芽。
作为优选：所述步骤3）中继代培养基为MS+6-BA 0.1-0.5mg/L+NAA 0.01-0.05mg/L+糖20-30g+琼脂粉4.5-5g，PH值为6.0。
作为优选：所述步骤4）中生根培养基为MS+IBA 0.05-0.1mg/L+NAA 0.01-0.05mg/L+糖20-30g+琼脂粉5-6g，PH值为6.0。
作为优选：所述步骤5）中的基质为重量配比1：1的进口泥炭及椰糠混合而成。
作为优选：所述步骤5）中装有基质的容器为无纺布袋和带PVC透明盖的育苗托盘；所述透明盖上穿设有透气孔，瓶苗种植于无纺布袋内，无纺布袋整齐放置于育苗托盘内；所述无纺布袋规格为7cm*9cm或9cm*11cm；所述育苗托盘上口外径为378mm*305mm*75mm，透明盖高度为7cm。
作为优选：所述步骤5）中的驯化过程为：a)水分管理：浇定植水后立刻将育苗托盘的透明盖盖紧，打开透气孔；夜间将整个透明盖打开，第二天早晨再次盖上，2-3天撤去透明盖；期间保持基质湿度60%以上；b)光照管理：1周内遮光率75%，1周后遮光率50%，2周后遮光率25%，3周以后全日照；c)水肥管理：1周以后叶面喷施花多多1号肥3000倍液1次，2周后每周灌根花多多1号肥2000倍液1次。
本发明的技术效果是：本发明在生根培养阶段采用低生长调节剂配比，愈伤组织少，根系生长良好，植株生长良好，无黄化、玻璃化现象；移栽驯化瓶苗成活率99%，极大的提高了瓶苗的成活率；在继代培养过程中采用低生长调节剂配比，在保证继代苗生长正常、每个培养周期保持3-5倍的增殖倍数的情况下，不造成激素积累，可进行多次继代培养，每年增殖倍数为60000-9000000倍，增殖率极大的提高。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细的介绍：一种栝楼种苗的快繁方法，其包括以下步骤：
1）外植体的选取：晴天中午剪取已知雌、雄栝楼苗具明显节10节以下的嫩枝，剪下枝条后将叶去除，留1/2叶柄；
2）消毒处理：将嫩枝切成2-3cm的茎段，近茎端叶柄留0.6-1cm,放入已经灭菌的玻璃瓶内，在超净工作台上先后用无菌水冲洗2-3次，75%酒精消毒30s,无菌水冲洗2-3次，0.1%升汞消毒10-15分钟，无菌水冲洗8-10次，然后将消毒后的茎段用无菌抽纸吸干表面水分，将茎段两端切去，留0.5-1cm带节茎段，然后将带节茎段接种于启动培养基中，每瓶培养基接种1个带节茎段，建立无菌体系，获得无菌新芽；
3）继代培养：待无菌体系建立完成并长出无菌新芽后，将无菌新芽切段为1-2个节的茎段，再转接至继代培养基中进行继代培养，所述继代培养的培养周期为15-30天；
4）生根培养：将继代培养后的新芽切除基部愈伤组织，转接至生根培养基中进行生根培养获得瓶苗，所述生根培养的培养周期为15-20天；
5）移植：将生根培养基中培育好的的瓶苗移至种植棚内放置1-2周，开瓶，取苗，洗苗，浸苗，然后移栽至装有基质的容器中，浇定植水，最后置于大棚内进行驯化。
所述步骤2）中启动培养基为MS+6-BA 0.1-0.2mg/L+糖20g+琼脂粉5g，PH值为6.0。
所述步骤2）中建立无菌体系的具体操作为：在启动培养基培养的过程中，将污染的、死亡的茎段剔除，留下未污染、腋芽萌发的茎段继续培养，获得无菌新芽。
所述步骤3）中继代培养基为MS+6-BA 0.1-0.5mg/L+NAA 0.01-0.05mg/L+糖20-30g+琼脂粉4.5-5g，PH值为6.0。
所述步骤4）中生根培养基为MS+IBA 0.05-0.1mg/L+NAA 0.01-0.05mg/L+糖20-30g+琼脂粉5-6g，PH值为6.0。
所述步骤5）中的基质为重量配比1：1的进口泥炭及椰糠混合而成。
所述步骤5）中装有基质的容器为无纺布袋和带PVC透明盖的育苗托盘；所述透明盖上穿设有透气孔，瓶苗种植于无纺布袋内，无纺布袋整齐放置于育苗托盘内；所述无纺布袋规格为7cm*9cm或9cm*11cm；所述育苗托盘上口外径为378mm*305mm*75mm，透明盖高度为7cm。
所述步骤5）中的驯化过程为：a)水分管理：浇定植水后立刻将育苗托盘的透明盖盖紧，打开透气孔；夜间将整个透明盖打开，第二天早晨再次盖上，2-3天撤去透明盖；期间保持基质湿度60%以上；b)光照管理：1周内遮光率75%，1周后遮光率50%，2周后遮光率25%，3周以后全日照；c)水肥管理：1周以后叶面喷施花多多1号肥3000倍液1次，2周后每周灌根花多多1号肥2000倍液1次。
所述步骤5）中的驯化时期最好为每年的3-9月。
本文中所描述的具体实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因此，但凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。
Claims (8)
1.一种栝楼种苗的快繁方法，其特征在于包括以下步骤：
1）外植体的选取：晴天中午剪取已知雌、雄栝楼苗具明显节10节以下的嫩枝，剪下枝条后将叶去除，留1/2叶柄；
2）消毒处理：将嫩枝切成2-3cm的茎段，近茎端叶柄留0.6-1cm,放入已经灭菌的玻璃瓶内，在超净工作台上先后用无菌水冲洗2-3次，75%酒精消毒30s,无菌水冲洗2-3次，0.1%升汞消毒10-15分钟，无菌水冲洗8-10次，然后将消毒后的茎段用无菌抽纸吸干表面水分，将茎段两端切去，留0.5-1cm带节茎段，然后将带节茎段接种于启动培养基中，每瓶培养基接种1个带节茎段，建立无菌体系，获得无菌新芽；
3）继代培养：待无菌体系建立完成并长出无菌新芽后，将无菌新芽切段为1-2个节的茎段，再转接至继代培养基中进行继代培养，所述继代培养的培养周期为15-30天；
4）生根培养：将继代培养后的新芽切除基部愈伤组织，转接至生根培养基中进行生根培养获得瓶苗，所述生根培养的培养周期为15-20天；
5）移植：将生根培养基中培育好的的瓶苗移至种植棚内放置1-2周，开瓶，取苗，洗苗，浸苗，然后移栽至装有基质的容器中，浇定植水，最后置于大棚内进行驯化。
2.根据权利要求1所述的栝楼种苗的快繁方法，其特征在于，所述步骤2）中启动培养基为MS+6-BA 0.1-0.2mg/L+糖20g+琼脂粉5g，PH值为6.0。
3.根据权利要求1所述的栝楼种苗的快繁方法，其特征在于，所述步骤2）中建立无菌体系的具体操作为：在启动培养基培养的过程中，将污染的、死亡的茎段剔除，留下未污染、腋芽萌发的茎段继续培养，获得无菌新芽。
4.根据权利要求1所述的栝楼种苗的快繁方法，其特征在于，所述步骤3）中继代培养基为MS+6-BA 0.1-0.5mg/L+NAA 0.01-0.05mg/L+糖20-30g+琼脂粉4.5-5g，PH值为6.0。
5.根据权利要求1所述的栝楼种苗的快繁方法，其特征在于，所述步骤4）中生根培养基为MS+IBA 0.05-0.1mg/L+NAA 0.01-0.05mg/L+糖20-30g+琼脂粉5-6g，PH值为6.0。
6.根据权利要求1所述的栝楼种苗的快繁方法，其特征在于，所述步骤5）中的基质为重量配比1：1的进口泥炭及椰糠混合而成。
7.根据权利要求1所述的栝楼种苗的快繁方法，其特征在于，所述步骤5）中装有基质的容器为无纺布袋和带PVC透明盖的育苗托盘；所述透明盖上穿设有透气孔，瓶苗种植于无纺布袋内，无纺布袋整齐放置于育苗托盘内；所述无纺布袋规格为7cm*9cm或9cm*11cm；所述育苗托盘上口外径为378mm*305mm*75mm，透明盖高度为7cm。
8.根据权利要求1所述的栝楼种苗的快繁方法，其特征在于，所述步骤5）中的驯化过程为：a)水分管理：浇定植水后立刻将育苗托盘的透明盖盖紧，打开透气孔；夜间将整个透明盖打开，第二天早晨再次盖上，2-3天撤去透明盖；期间保持基质湿度60%以上；b)光照管理：1周内遮光率75%，1周后遮光率50%，2周后遮光率25%，3周以后全日照；c)水肥管理：1周以后叶面喷施花多多1号肥3000倍液1次，2周后每周灌根花多多1号肥2000倍液1次。
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