CN1985582A - 吊瓜组培育苗方法 - Google Patents

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CN1985582A CN 200610161470 CN200610161470A CN1985582A CN 1985582 A CN1985582 A CN 1985582A CN 200610161470 CN200610161470 CN 200610161470 CN 200610161470 A CN200610161470 A CN 200610161470A CN 1985582 A CN1985582 A CN 1985582A
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吴有光
方建民
刘唤英
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Abstract

本发明涉及一种吊瓜组培育苗方法，包括以下工艺步骤：1.外植体的选取：在春夏之交取吊瓜块根上萌发的芽或藤状茎为外植体；2.外植体的处理：剪取芽或藤状茎，去除藤状茎上的叶片及卷须，切成一叶茎段，待接种；3.外植体接种：将步骤二得芽或茎段，接种在装有培养基I的培养瓶I内，每瓶接种一个芽或一个茎段，4.继代培养：将步骤三得带叶茎蔓又剪成一叶茎段，接种在装有培养基II的培养瓶II内，每瓶插单茎段4～6个；5.生根培养：将上述步骤四得带叶茎蔓剪成一叶茎段，接种在装有培养基III的培养瓶III内，每瓶插10个茎段，培养20～30天，即可生根。本发明繁殖周期短，繁殖系数高。

Description

吊瓜组培育苗方法
技术领域
本发明涉及一种植物组织培养方法，特别涉及一种借助于基本培养基附加不同成分对吊瓜进行工厂化快速繁殖的吊瓜组培育苗方法。属植物组织培养技术领域。
背景技术
吊瓜，又名栝楼(Trivbosantnes Kirilouii)，系葫芦科栝楼属，是多年生宿根草质藤本植物，在我国已有多年种植历史，吊瓜有药用吊瓜和食用吊瓜(主要收获瓜籽)，根椐《本草纲目》记载，吊瓜有健胃、润肺、化痰、散节、滑润作用，主治痰热咳嗽、肺痰咳血、胸闷、消泻和便秘等症，现代医学研究表明。吊瓜籽还有消炎、抗癌功效，上海科学技术文献出版社的《抗癌新法精编》介绍，其对肺癌、胃癌、胰岛素乳腺癌疗效显著。吊瓜籽营养丰富，其中蛋白质、脂肪、纤维素、微量元素及生物碱、黄酮类、疳类和有机类等含量颇丰，是不可多得的药膳食品，长期食用有益健康，其籽炒制后香味适口，是天然绿色保健品，因而市场需求大，供不应求，价格攀升。
吊瓜不但有食用和药用价值，还是一种优良的遮荫、观果的绿化品种，6～9月果未成熟时浓荫遮日，未成熟的吊瓜淡绿色，表覆青黑色的狭条斑，9月以后，果实呈橙红色，有光泽，十分醒目耀眼，可广泛应用于公园的池塘边做垂吊遮荫，也可作为休闲遮荫棚架植物，形成风格独特的一景。
食用吊瓜是浙江长兴一带农民自发从野生吊瓜资源驯化而来农家品种。它雌雄异株，目前吊瓜的繁殖生产上主要靠种子播种法和2～3年生块根切段繁殖，以块根繁殖为主。用种子播种繁殖，不结果的雄株占自然繁殖的幼苗的70％左右，育苗成本高，繁殖率低。用块根切段繁殖，由于受到块根数量的限制，繁殖效率低，且费工费时，直接影响种植面积的扩大，优良品种的推广。
发明内容
本发明的目的在于克服上述不足，提供一种繁殖周期短，繁殖系数高的吊瓜组培育苗方法。
本发明的目的是这样实现的：一种吊瓜组培育苗方法，其特征在于该法包括以下工艺步骤：
步骤一、外植体的选取
在春夏之交取吊瓜块根上萌发的芽或藤状茎为外植体；
步骤二、外植体的处理
剪取芽或藤状茎，去除藤状茎上的叶片及卷须，切成一叶茎段，流水冲洗20～30分钟，用洁净干纱布吸干表面水分，在超净工作台内，用70％～75％的酒精浸泡10～15秒，倒出酒精液，用无菌水冲洗1～2遍，再用0.1％的氯化汞溶液振荡消毒8～10分钟，再用无菌水冲洗3～4次，用无菌纱布吸干表面水分，最后剪去接触药液的茎段两端少许，待接种；
步骤三、外植体接种
将步骤二得经消毒并整理好的芽或茎段，按生物学极性方向接种在装有培养基I的培养瓶I内，每瓶接种一个芽或一个茎段，
培养瓶I内的培养基I由MS+BA0.1～0.5+KT0.01～0.2+IAA0.05～0.2+0.5％的琼脂粉+2～3％的蔗糖组成，用NaOH或HCl调pH值5.8～6.0，接种好芽或茎段的培养瓶放在温度25±2℃、光照1500～2500lx、光照10～12小时、黑暗12～14小时的培养室，培养25～30天，即可长成4～5节带叶茎蔓；
步骤四、继代培养
将步骤三得带叶茎蔓又剪成一叶茎段，接种在装有培养基II的培养瓶II内，每瓶插单茎段4～6个。
培养瓶II内的培养基II由MS+BA0.3～0.5+KT0.2～0.3+NAA0.01～0.1+0.5％的琼脂粉+2～3％的蔗糖组成，用NaOH或HCl调pH值5.8～6.0，接种好茎段的培养瓶放在温度25±2℃、光照1500～2500lx、光照10～12小时、黑暗12～14小时的条件下培养25～30天，可长成4～5节带叶茎蔓，如此反复继代，则小苗按几何级数增长，直到达到目标苗数；
步骤五、生根培养
将上述步骤四得带叶茎蔓剪成一叶茎段，接种在装有培养基III的培养瓶III内，每瓶插10个茎段，
培养瓶III内的培养基III由MS0+0.6％琼脂+15～20％蔗糖组成，接种好茎段的培养瓶III放在温度25±2℃、光照1500～2500lx、光照10～12小时、黑暗12～14小时的条件下培养20～30天，即可100％的生根；
本发明在已知结瓜的株上选取芽或茎纳入组培繁殖体系，则可源源不断地为生产提供优质种苗，满足生产的需求。用本发明组培吊瓜育苗方法具有繁殖周期短，繁殖系数高，25～30天为一周期，繁殖系数3～4倍，周年生产，1个芽可生产数万株苗，节约大量2～3年生的块根，克服了籽播雌株率低(约30％左右)，幼苗需1年以上待籽播苗结果才能确定，浪费人力、物力、地力，采用组培育苗方法完全可满足吊瓜苗的规模化生产的要求。因此，本发明实现了优质高效吊瓜的生产规模化。
具体实施方式
下面为本发明采用食用吊瓜组培育苗方法的最佳方式：
步骤一、外植体的选取
在5月份取吊瓜块根上萌发的芽或藤状茎。
步骤二、外植体的处理
剪取芽或藤状茎，去除藤状茎上的叶片及卷须，切成一叶茎段，先用1％洗洁精液振荡洗涤8分钟，再流水冲洗30分钟，用洁净干纱布吸干表面水分。在超净工作台内，把芽或茎段放入经高压灭菌的广口瓶内，先用70％的酒精浸泡10秒，倒出酒精液，用无菌水冲洗2遍，再用0.1％的氯化汞溶液振荡消毒10分钟，再用无菌水冲洗4次，每次不少于4分钟，倒去无菌水洗液，用无菌纱布吸干表面水分，最后剪去接触药液的茎段两端少许，待接种。
步骤三、外植体接种
将步骤二得经消毒并整理好的芽或茎段，按生物学极性方向接种在装有培养基I的培养瓶I内，每瓶接种一个芽或一个茎段。
培养瓶I内的培养基I由MS+BA0.3+KT0.1+IAA0.1+0.5％的琼脂粉+3％的蔗糖组成，用1NNaOH或1N HCl调pH值6.0，接种好芽或茎段的培养瓶放在温度25℃、光照2000lx、光照12小时、黑暗12小时的环境中培养30天，可长成4～5节带叶茎蔓。
步骤四、继代培养
将步骤三得带叶茎蔓剪成一叶茎段，接种在装有培养基II的培养瓶II内，每瓶插单茎段4～6个。
培养瓶II内的培养基II由MS+BA0.3+KT0.2+NAA0.1+0.5％的琼脂粉+3％的蔗糖组成，用1NNaOH或1N HCl调pH值6.0，接种好茎段的培养瓶放在温度25±2℃、光照2000lx、光照12小时、黑暗12小时的环境中培养30天，可长成4～5节带叶茎蔓，如此反复继代，则小苗按几何级数增长，直到达到目标苗数。
步骤五、生根培养
将上述步骤四得带叶茎蔓剪成一叶茎段，接种在装有培养基III的培养瓶III内，每瓶插10个茎段。
培养瓶III内的培养基III由MS0+0.6％琼脂+15％蔗糖组成，接种好茎段的培养瓶III放在温度25±2℃、光照1500～2500lx、光照10～12小时、黑暗12～14小时的条件下培养20天左右，即可100％的生根。
步骤六、移栽炼苗
把步骤五得培养瓶内的苗小心取出，冲洗干净根上琼脂，移栽在50穴的穴盘内，穴盘内装有经800～1000倍敌克松溶液消毒的基质内，基质由珍珠岩∶蛭石∶草炭土＝1∶1∶1。移栽后淋透1000倍多菌灵，遮光5～7天，湿度保持90％以上，温度20～25℃。移栽后8～15天，早晚见光，中午遮荫，喷一次1000倍多菌灵液，保持湿度80～90％，温度20～25℃。移栽后16～23天，逐渐增加光照直到全日照，保持湿度60～70％，喷一次1000倍多菌灵液+0.3％磷酸二氢钾液，保持温度在25℃左右，新白根生根、叶片蜡质层形成，逐渐适应外界环境，炼苗即完成，可上钵培养10～15天，即可下田移栽。

Claims (1)

1、一种吊瓜组培育苗方法，其特征在于该法包括以下工艺步骤：
步骤一、外植体的选取
在春夏之交取吊瓜块根上萌发的芽或藤状茎为外植体；
步骤二、外植体的处理
剪取芽或藤状茎，去除藤状茎上的叶片及卷须，切成一叶茎段，流水冲洗20～30分钟，用洁净干纱布吸干表面水分，在超净工作台内，用70％～75％的酒精浸泡10～15秒，倒出酒精液，用无菌水冲洗1～2遍，再用0.1％的氯化汞溶液振荡消毒8～10分钟，再用无菌水冲洗3～4次，用无菌纱布吸干表面水分，最后剪去接触药液的茎段两端少许，待接种；
步骤三、外植体接种
将步骤二得经消毒并整理好的芽或茎段，按生物学极性方向接种在装有培养基I的培养瓶I内，每瓶接种一个芽或一个茎段，
培养瓶I内的培养基I由MS+BA0.1～0.5+KT0.01～0.2+IAA0.05～0.2+0.5％的琼脂粉+2～3％的蔗糖组成，用NaOH或HCl调pH值5.8～6.0，接种好芽或茎段的培养瓶放在温度25±2℃、光照1500～2500lx、光照10～12小时、黑暗12～14小时的培养室，培养25～30天，即可长成4～5节带叶茎蔓；
步骤四、继代培养
将步骤三得带叶茎蔓又剪成一叶茎段，接种在装有培养基II的培养瓶II内，每瓶插单茎段4～6个，
培养瓶II内的培养基II由MS+BA0.3～0.5+KT0.2～0.3+NAA0.01～0.1+0.5％的琼脂粉+2～3％的蔗糖组成，用NaOH或HCl调pH值5.8～6.0，接种好茎段的培养瓶放在温度25±2℃、光照1500～2500lx、光照10～12小时、黑暗12～14小时的条件下培养25～30天，可长成4～5节带叶茎蔓，如此反复继代，则小苗按几何级数增长，直到达到目标苗数；
步骤五、生根培养
将上述步骤四得带叶茎蔓剪成一叶茎段，接种在装有培养基III的培养瓶III内，每瓶插10个茎段，
培养瓶III内的培养基III由MS0+0.6％琼脂+15～20％蔗糖组成，接种好茎段的培养瓶III放在温度25±2℃、光照1500～2500lx、光照10～12小时、黑暗12～14小时的条件下培养20～30天，即可生根。
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