CN106417033A - 一种高唐栝楼快速繁殖方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种高唐栝楼快速繁殖方法，包括以下步骤：1）外植体的选择与处理；2）丛生芽的诱导；3）根的诱导；4）移栽。可加快高唐栝楼无性繁殖的速度，同时保持母本的优良特性，该方法出芽率高，培养时间短，可操作性强，应用价值高，投入少，产出高。

Description

一种高唐栝楼快速繁殖方法
技术领域
本发明属于植物种植领域，具体涉及一种高唐栝楼快速繁殖方法。
背景技术
高唐栝楼为是山东的一种道地药材，其个大质优，在国内外享有较高的知名度，近年来面积不断扩大，而优质种苗却供应不足。栝楼繁殖方法通常用种子繁殖和分根繁殖。由于栝楼雌雄异株，开花前无明显的形态差异，难以分辨，种植后常导致雄株多（雌雄株比例约为 3:7），而影响产量和经济效益，而用分根繁殖，由于块根本身也是药材，同时块根繁殖量不大，且常年无性繁殖引起种源退化严重，导致优质种苗数量少。
因此为了解决高唐栝楼的快速繁殖，目前已经有很多繁殖方法，但是效果并不明显，成活率也存在很大问题。现有报道大多通过愈伤诱导进行栝楼快繁，存在变异率高，所需周期长等问题。
发明内容
发明目的：本发明的目的是提供了一种高唐栝楼快速繁殖方法，加快高唐栝楼无性繁殖的速度，同时保持母本的优良特性，该方法出芽率高，培养时间短，可操作性强，应用价值高，投入少，产出高。
技术方案：为了解决上述问题，本发明提供了一种高唐栝楼快速繁殖方法，包括以下步骤：
1）外植体的选择与处理：分别取健康的高唐栝楼雌、雄株的块根苗，剥取顶芽，流水冲洗30 分钟后置于超净工作台，70% 乙醇浸泡外植体1 分钟，无菌水冲洗2次，0.1%升汞消毒5 分钟，无菌水冲洗 5-6 次，无菌滤纸吸干水分，备用；
2）丛生芽的诱导：将步骤1）处理的外植体接种在诱导培养基上培养得到丛生芽，将丛生芽分成单株在诱导培养基上连续培养2代得到再生植株；
3）根的诱导：将再生植株移栽到生根培养基中，诱导生根得到根系发达的植株；
4）移栽：将根系发达的植株移栽到试验田中进行田间管理并在自然条件下生长。
其中，步骤2）中诱导培养基为MS 培养基加入0.2-0.6 mg/L的6-苄氨基腺嘌呤和0.02-0.1 mg/L的萘乙酸。
其中，步骤2）中的培养温度为25℃，光强1500LX，每天光照8小时，培养45-80天。
其中，步骤3）中的生根培养基为MS 培养基加入0.2-0.6 mg/L的6-苄氨基腺嘌呤、0.02-0.1 mg/L的萘乙酸和0.02-0.08mg/L的吲哚乙酸。
其中，步骤3）中的培养温度为25℃，光强1500LX，每天光照12小时，培养15-25天。
有益效果：本发明相对于现有技术，具有以下优点：
1)本发明选择的是外植体进行繁殖，并且处理的方式简单，对高唐栝楼芽无损伤，而且该处理方法增强高唐栝楼苗的成活率；
2)本发明的方法采用的不同的阶段使用不同的培养基和培养条件，获得更高的成活率；
3）本发明的方法采用对丛生芽的诱导和继代培养使用相同的培养基和培养条件，缩短组培时间，节省成本，提高成活率；
4）本发明通过对组培快繁条件的探索，建立起高唐栝楼的丛生芽诱导体系，加快了高唐栝楼无性繁殖的速度，而且通过丛生芽增殖的方式，保持了母本的优良特性，最终获得了优良的高唐栝楼品种。
具体实施方式
下面对本发明作更进一步的说明。
实施例1
一种高唐栝楼快速繁殖方法，包括以下步骤：
1）外植体的选择与处理：分别取健康的高唐栝楼雌、雄株的块根苗，剥取顶芽，流水冲洗30 分钟后置于超净工作台，70% 乙醇浸泡外植体1 分钟，无菌水冲洗2次，0.1%升汞消毒5 分钟，无菌水冲洗 5-6 次，无菌滤纸吸干水分，备用；
2）丛生芽的诱导：将步骤1）处理的外植体接种在诱导培养基上培养得到丛生芽，将丛生芽分成单株在诱导培养基上连续培养2代得到再生植株
3）根的诱导：将再生植株移栽到生根培养基中，诱导生根得到根系发达的植株；
4）移栽：将根系发达的植株移栽到试验田中进行田间管理并在自然条件下生长。
其中，步骤2）中诱导培养基为MS 培养基加入0.4mg/L的6-苄氨基腺嘌呤和0.04mg/L的萘乙酸。
其中，步骤2）中的培养温度为25℃，光强1500LX，每天光照8小时，诱导培养20天，继代培养周期为15天。
其中，步骤3）中的生根培养基为MS 培养基加入0.2 mg/L的6-苄氨基腺嘌呤、0.05mg/L的萘乙酸和0.05mg/L的吲哚乙酸。
其中，步骤3）中的培养温度为25℃，光强1500LX，每天光照12小时，培养20天。
通过上述方法获得的高唐栝楼苗的移栽成活率为91％。
实施例2
一种高唐栝楼快速繁殖方法，包括以下步骤：
1）外植体的选择与处理：分别取健康的高唐栝楼雌、雄株的块根苗，剥取顶芽，流水冲洗30 分钟后置于超净工作台，70% 乙醇浸泡外植体1 分钟，无菌水冲洗2次，0.1%升汞消毒5 分钟，无菌水冲洗 5-6 次，无菌滤纸吸干水分，备用；
2）丛生芽的诱导：将步骤1）处理的外植体接种在诱导培养基上培养得到丛生芽，将丛生芽分成单株在分化培养基上连续培养2代得到再生植株
3）根的诱导：将再生植株移栽到生根培养基中，诱导生根得到根系发达的植株；
4）移栽：将根系发达的植株移栽到试验田中进行田间管理并在自然条件下生长。
其中，步骤2）中诱导培养基为MS 培养基加入0.6mg/L的6-苄氨基腺嘌呤和0.05mg/L的萘乙酸。
其中，步骤2）中的培养温度为25℃，光强1500LX，每天光照8小时，诱导培养20天，继代培养周期为20天。
其中，步骤3）中的生根培养基为MS 培养基加入0.2 mg/L的6-苄氨基腺嘌呤、0.05mg/L的萘乙酸和0.05mg/L的吲哚乙酸。
其中，步骤3）中的培养温度为25℃，光强1500LX，每天光照12小时，培养25天。
通过上述方法获得的高唐栝楼苗的移栽成活率为86％。
实施例3 一种高唐栝楼快速繁殖方法，包括以下步骤：
1）外植体的选择与处理：分别取健康的高唐栝楼雌、雄株的块根苗，剥取顶芽，流水冲洗30 分钟后置于超净工作台，70% 乙醇浸泡外植体1 分钟，无菌水冲洗2次，0.1%升汞消毒5 分钟，无菌水冲洗 5-6 次，无菌滤纸吸干水分，备用；
2）丛生芽的诱导：将步骤1）处理的外植体接种在诱导培养基上培养得到丛生芽，将丛生芽分成单株在诱导培养基上连续培养2代得到再生植株；
3）根的诱导：将再生植株移栽到生根培养基中，诱导生根得到根系发达的植株；
4）移栽：将根系发达的植株移栽到试验田中进行田间管理并在自然条件下生长。
激素对愈伤组织诱导和器官分化起着十分关键的作用，是影响植物形态建成及其调控的主要因子。适宜浓度的 6-苄氨基腺嘌呤和萘乙酸比例可以促进顶芽诱导分化产生大量的不定芽。
所述步骤2）中诱导培养基为MS 培养基加入0.2-0.6 mg/L的6-苄氨基腺嘌呤和0.02-0.1 mg/L的萘乙酸。
采用丛生芽诱导方式进行高唐栝楼组培快繁，45-65天组培苗高度即达20cm 以上，和愈伤组织诱导方式相比缩短了快繁时间。
所述步骤2）中的培养温度为25℃，光强1500LX，每天光照8小时，培养时间45-80天。
所述步骤3）中的生根培养基为MS 培养基加入0.2-0.6 mg/L的6-苄氨基腺嘌呤、0.02-0.1 mg/L的萘乙酸和0.02-0.08mg/L的吲哚乙酸。
所述步骤3）中的培养温度为25℃，光强1500LX，每天光照12小时，培养15-25天。
实施例4
不同培养基对高唐栝楼生根的影响
从不同激素配比的培养基对高唐栝楼生根率的影响看出，3号培养基的生根率为最高，6-苄氨基腺嘌呤浓度固定时，单独加入萘乙酸根粗壮，但侧根少，而单独加入吲哚乙酸，则根细且多。所以生产上不宜单独用高浓度的萘乙酸，而是采用萘乙酸 与吲哚乙酸相结合的方法。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出：对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (3)

1.一种高唐栝楼快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：
1）外植体的选择与处理：分别取健康的高唐栝楼雌、雄株的块根苗，剥取顶芽，流水冲洗30 分钟后置于超净工作台，70% 乙醇浸泡外植体1 分钟，无菌水冲洗2次，0.1%升汞消毒5 分钟，无菌水冲洗 5-6 次，无菌滤纸吸干水分，备用；
2）丛生芽的诱导：将步骤1）处理的外植体接种在诱导培养基上培养得到丛生芽，将丛生芽分成单株在诱导培养基上连续培养2代得到再生植株；
3）根的诱导：将再生植株移栽到生根培养基中，诱导生根得到根系发达的植株；
4）移栽：将根系发达的植株移栽到试验田中进行田间管理并在自然条件下生长。
2.根据权利要求1所述的一种高唐栝楼快速繁殖方法，其特征在于，所述步骤2）中诱导培养基为MS 培养基加入0.2-0.6 mg/L的6-苄氨基腺嘌呤和0.02-0.1 mg/L的萘乙酸。
3.根据权利要求1所述的一种高唐栝楼快速繁殖方法，其特征在于，所述步骤2）中的培养温度为25℃，光强1500LX，每天光照8小时，培养时间45-80天。
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