CN109771633A - 一种具有降血糖功能的膏滋及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提出了一种具有降血糖功能的膏滋，由以下原料按重量份制备而成：羧甲基茯苓多糖45‑50份、青钱柳叶20‑30份、菊粉12‑17份、地龙蛋白3‑8份、金花茶20‑30份、枸杞子20‑30份、肉桂20‑30份、山药20‑30份、黄精30‑40份、葛根20‑30份、玉米须10‑15份和甜菊糖0.5‑1份。本发明原料来源广，制备方法简单，制得的膏滋能够明显具有降低血糖、尿糖、血脂、糖化血红蛋白，提高胰岛素机能，控制血脂，增强免疫力等功效，具有广阔的应用前景。

Description

一种具有降血糖功能的膏滋及其制备方法

技术领域

本发明涉及中药保健技术领域，具体涉及一种具有降血糖功能的膏滋。

背景技术

糖尿病是一种严重危害人类健康的疾病。据统计，全世界糖尿病的发病率为3％～5％，50岁以上的人均发病率为10％。在美国，每年死于糖尿病并发症的人数超过16万。在我国，随着经济的发展和人们饮食结构的改变以及人口老龄化，糖尿病患者的数量迅速增加。

糖尿病是一种终身性疾病，其严重性在于并发症的发生率较高。美国的研究表明，患糖尿病20年以上的病人中有95％出现视网膜病变，糖尿病患者死于心血管疾病。除此之外，糖尿病患者还可能并发肾病、神经病变、消化道疾病、口腔疾病、阳痿、皮肤和关节疾病以及下肢动脉硬化闭塞症等。由于糖尿病并症可以累及全身各个系统，因此给糖尿病患者精神和肉体上都带来很大的痛苦，而避免和控制糖尿病并发症的最好办法就是控制血糖水平。目前临床上常用的口服降糖药都有副作用，均可引起消化系统的不良反应，有些还引起麻疹，贫血，白细胞和血小板减少，头晕和乏力等。因此寻找开发具有降糖作用的保健食品，以辅助药物治疗，在有效地控制血糖和糖尿病并发症的同时降低副作用已引起人们的关注。

茯苓，又称玉灵、茯灵、万灵桂、茯菟，是中药“四君八珍”之一，是拟层孔菌科真菌茯苓的干燥菌核，常寄生在松树根上，形如甘薯，球状，外皮淡棕色或黑褐色，内部粉色或白色，具有利水渗湿，健脾宁心之功效。医学研究更进一步证明茯苓具有抗肿瘤、利水消肿、增强免疫、镇定安神和抑菌等多种作用。茯苓中含有多种化学成分，其中最主要的是茯苓多糖，其含量可达茯苓干重的84％。茯苓多糖易溶于中、强碱溶液中，难溶于水，其主体结构为β-(1→3)结合的葡萄糖线性结构，同时还具有β-(1→6)结合的葡萄糖基支链的结构。科学研究表明，将羧甲基化半合成衍生化方法对茯苓多糖进行化学改性来增大其溶解度、提高生物活性，取代程度越高，在水中的溶解度就越大，生物利用度越高，生物活性则越强。

羧甲基茯苓多糖是茯苓多糖上带有羧甲基的多糖，这种多糖水溶性高，并且具有明显的抗肿瘤、提高免疫力、保肝降酶、抗病毒、减轻放射副反应、降血糖、提升白细胞功能、健胃安神、抗衰老等生理活性，将其开发成抗肿瘤、免疫增强的药物或者保健食品，效果明显，具有极好的市场前景。

申请号为CN200610163425.X的中国发明专利公开了一种高取代度羧甲基茯苓多糖及其制备方法和其应用，以水或水醇溶液为介质，茯苓多糖、氯乙酸与适当过量的氢氧化钠进行取代反应，以制得高羧甲基取代度的羧甲基茯苓多糖(CMP)，取代度＞1。该发明方法是先从茯苓中提取茯苓多糖，氯乙酸取代需保持较高的反应温度，获得羧甲基茯苓多糖后再进行脱色、纯化，为液相不振荡工艺，反应中碱液和氯乙酸溶液需要预先配制，生产总耗时长。申请号为CN101724091B的中国发明专利公开的活性羧甲基茯苓多糖及其生产工艺和应用中，先用乙醇对茯苓粉进行脱脂，在乙醇相体系中用二次碱化法(碱加入量为茯苓量的2％-10％)，氯乙酸加入量在15％-20％，获得中等取代度的羧甲基茯苓多糖。申请号为CN104387482B的发明创造采用乙醇相体系，二次碱化工艺，并利用催化剂来提升取代反应过程。上述两种工艺均需二次碱化、乙醇反应体系，操作步骤多并消耗大量的乙醇。

随着生活水平的提高，人们对于健康的要求越来越高，因此人们功能性保健品来辅助治疗高血糖等疾病，保持身体健康。

发明内容

为了解决上述的技术问题，本发明提供一种具有降血糖功能的膏滋及其制备方法，其目的在于，提供一种具有降血糖功能的膏滋，通过添加羧甲基茯苓多糖，有明显的抗肿瘤、提高免疫力、保肝降酶、抗病毒、减轻放射副反应、降血糖、提升白细胞功能、健胃安神、抗衰老等生理活性。

本发明提供一种具有降血糖功能的膏滋，由以下原料制备而成：羧甲基茯苓多糖、青钱柳叶、菊粉、地龙蛋白、金花茶、枸杞子、肉桂、山药、黄精、葛根、玉米须和甜菊糖。

作为本发明进一步的改进，由以下原料按重量份制备而成：羧甲基茯苓多糖45-50份、青钱柳叶20-30份、菊粉12-17份、地龙蛋白3-8份、金花茶20-30份、枸杞子20-30份、肉桂20-30份、山药20-30份、黄精30-40份、葛根20-30份、玉米须10-15份和甜菊糖0.5-1份。

作为本发明进一步的改进，由以下原料按重量份制备而成：羧甲基茯苓多糖46-49份、青钱柳叶22-28份、菊粉14-16份、地龙蛋白4-7份、金花茶22-27份、枸杞子23-28份、肉桂22-25份、山药22-28份、黄精33-38份、葛根22-26份、玉米须11-13份和甜菊糖0.6-0.9份。

作为本发明进一步的改进，由以下原料按重量份制备而成：羧甲基茯苓多糖48份、青钱柳叶25份、菊粉15份、地龙蛋白6份、金花茶25份、枸杞子24份、肉桂24份、山药24份、黄精36份、葛根24份、玉米须12份和甜菊糖0.8份。

作为本发明进一步的改进，所述羧甲基茯苓多糖由以下方法制备：

S1.茯苓的培养：将茯苓菌丝无菌接种在麦芽汁液体培养基中，28℃培养4-5天；

S2.茯苓多糖的制备：将培养好的茯苓培养基35℃发酵2天，加热至微沸，提取1-2h后，过滤，加入氯仿和正丁醇的混合溶剂，振荡，离心，加入3倍量的95％乙醇，过夜，过滤得沉淀，用乙醚洗涤2-3次，得到茯苓多糖；

S3.茯苓次多糖的制备：将茯苓多糖加入高碘酸钠溶液中进行选择性氧化，用三氟乙酸调pH值至3-4，适度酸解后，过滤，固体用水洗涤，得到茯苓次多糖；

S4.羧甲基茯苓多糖的制备：将茯苓次多糖溶于碱溶液中，搅拌下缓慢加入35％双氧水脱色处理，至溶液变成白色，加入氯乙酸的异丙醇和叔丁醇的混合溶液中，控制反应体系中异丙醇和叔丁醇的混合溶剂的浓度为65％-70％，60-80℃醚化反应2-3h后，反应体系呈糊状，倒出上层液体，下层加入稀盐酸溶液调节pH＝6.0，剧烈搅拌，加入95％乙醇，过滤，固体物溶解于水中，用乙醇沉淀，过滤，干燥，得白色粉末状固体物，即为羧甲基茯苓多糖。

作为本发明进一步的改进，所述酸解时间为30min-1h，所述异丙醇和叔丁醇的混合体积比为3:1，所述氯仿和正丁醇的混合体积比例为(4-6):1，所述碱溶液为KOH溶液，所述高碘酸钠溶液的物质的量的浓度为0.5mol/L-1.5mol/L。

本发明进一步保护一种上述具有降血糖功能的膏滋的制备方法，按照以下方法制备：

S1.中药的提取：按比例称取枸杞子、肉桂、山药、黄精、葛根和玉米须，加水煎煮，微沸提取两次，180-200目过滤，合并滤液，浓缩至密度为1.2g/cm³-1.5g/cm³，得到中药浓缩液；

S2.青钱柳叶和金花茶的提取：将青钱柳叶和金花茶分别洗净，晒干，粉碎，加水浸泡，微波加热至50℃-70℃，提取10min-15min后，过滤，减压浓缩至1.2g/cm³-1.5g/cm³，得到茶提取液；

S3.膏滋的制备：按比例将羧甲基茯苓多糖、菊粉和地龙蛋白溶于少量水中，混合搅拌均匀，加入步骤S1中制备的中药浓缩液和步骤S2中制备的茶提取液，搅拌均匀，加入甜菊糖，常压炼膏，收膏，即得。

作为本发明进一步的改进，步骤S1中第一次提取加水量为中药重的5倍，提取时间为2h-3h，第二次提取加水量为中药重的4倍，提取时间为1h-2h。

作为本发明进一步的改进，步骤S2中加水量为所述青钱柳叶和金花茶总重的3-5倍。

作为本发明进一步的改进，步骤S3中加水量为所述羧甲基茯苓多糖、菊粉和地龙蛋白总重的1-2倍。

本发明具有如下有益效果：

1.羧甲基茯苓多糖的制备中用异丙醇和叔丁醇的混合溶液代替传统的异丙醇或乙醇，异丙醇为仲醇，叔丁醇为叔醇，两者的位阻大，在该SN2取代反应中有助于降低副反应，减少氯乙酸的用量并降低生产成本，反应较温和，不仅制得的羧甲基茯苓多糖取代度较高且取代基分布均匀，而且克服了异丙醇或乙醇作为介质制备的羧甲基茯苓多糖容易结块的缺点；通过控制异丙醇和叔丁醇的浓度有利于提高羧甲基茯苓多糖的取代度；本发明采用的三氟乙酸因其酸性、氧化性弱，水解效果好并且具有对茯苓多糖结构影响小的优点，作为酸解用酸使茯苓多糖糖苷键断裂；本发明通过控制适合的醚化反应温度进一步提高取代度，研究发现，温度过低，取代度过低；醚化温度过高，取代度反而下降，通过实验发现，温度在60-80℃时取代度最高；

2.本发明的方法制备的羧甲基茯苓多糖具有良好的水溶性，20℃下溶解度为0.105-0.109mg/mL，取代度为1.55-1.59，均优于现有的羧甲基茯苓多糖，制得的羧甲基茯苓多糖有明显的抗肿瘤、提高免疫力、保肝降酶、抗病毒、减轻放射副反应、降血糖、提升白细胞含量、健胃安神、抗衰老等生理活性；青钱柳叶、菊粉具有良好的控制血脂、降低血糖的作用，地龙蛋白有助于改善了人体多种机能，改善了机体的内环境，促进了胰岛功能的恢复，从而有助于降低血糖；金花茶含有丰富的多糖物质，能有效控制餐后血糖上升幅度及改善葡萄糖耐量，并可改善脂类代谢紊乱，有明显的降血糖效果，金花茶含有丰富的茶多酚，可以清除自由基，能降低DM血糖的升高，从而改善其糖耐量，稳定血糖，金花茶含有丰富的茶色素，降低血糖、尿糖、血脂、糖化血红蛋白，减少胰岛素抵抗，改善血液流变、缓解微循环障碍，因此，可以有效的起到降低血糖的作用；

3.枸杞子，甘，平，归肝、肾经，滋补肝肾，益精明目。用于虚劳精亏，腰膝酸痛，眩晕耳鸣，内热消渴，血虚萎黄，目昏不明；肉桂，辛、甘，大热，归肾、脾、心、肝经，补火助阳，引火归源，散寒止痛，活血通经，用于阳痿，宫冷，腰膝冷痛，肾虚作喘，阳虚眩晕，目赤咽痛，心腹冷痛，虚寒吐泻，寒疝，奔豚，经闭，痛经；山药，甘，平，归脾、肺、肾经，补脾养胃，生津益肺，补肾涩精，用于脾虚食少，久泻不止，肺虚喘咳，肾虚遗精，带下，尿频，虚热消渴，麸炒山药补脾健胃，用于脾虚食少，泄泻便溏，白带过多；黄精，甘，平，归脾、肺、肾经，补气养阴，健脾，润肺，益肾，用于脾胃虚弱，体倦乏力，口干食少，肺虚燥咳，精血不足，内热消渴；葛根，甘、辛，凉，归脾、胃经，解肌退热，生津，透疹，升阳止泻，用于外感发热头痛、项背强痛，口渴，消渴，麻疹不透，热痢，泄泻；高血压颈项强痛；玉米须，甘、淡，平，归膀胱、肝、胆经，利尿消肿，平肝利胆，用于急、慢性肾炎，水肿，急、慢性肝炎，高血压，糖尿病，慢性鼻窦炎，尿路结石，胆道结石，小便不利、湿热黄胆等症，并可预防习惯性流产；

4.本发明原料来源广，制备方法简单，制得的膏滋能够明显具有降低血糖、尿糖、血脂、糖化血红蛋白，提高胰岛素机能，控制血脂，增强免疫力等功效，具有广阔的应用前景。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整的描述，显然，所述的实施例只是本发明的部分具有代表性的实施例，而不是全部实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的其他所有实施例都属于本发明的保护范围。

实施例1

所述羧甲基茯苓多糖由以下方法制备：

S1.茯苓的培养：将茯苓菌丝无菌接种在麦芽汁液体培养基中，28℃培养4天；

S2.茯苓多糖的制备：将培养好的茯苓培养基35℃发酵2天，加热至微沸，提取1h后，过滤，加入3倍量的氯仿和正丁醇的混合溶剂，所述氯仿和正丁醇的混合体积比例为4:1，振荡，离心，加入3倍量的95％乙醇，过夜，过滤得沉淀，用乙醚洗涤2次，得到茯苓多糖；

S3.茯苓次多糖的制备：将10g茯苓多糖加入100mL0.5mol/L高碘酸钠溶液中进行选择性氧化，用三氟乙酸调pH值至3，适度酸解，酸解时间为30min，过滤，固体用水洗涤，得到茯苓次多糖；

S4.羧甲基茯苓多糖的制备：将1g茯苓次多糖溶于20mL 0.1mol/L的KOH溶液中，搅拌下缓慢加入35％双氧水脱色处理，至溶液变成白色，加入50mL 2mol/L的氯乙酸的异丙醇和叔丁醇的混合溶液，体积比为3:1，控制反应体系中异丙醇和叔丁醇的混合溶剂的浓度为65％，60℃醚化反应2h后，反应体系呈糊状，倒出上层液体，下层加入稀盐酸溶液调节pH＝6.0，剧烈搅拌，加入95％乙醇，过滤，固体物溶解于水中，用乙醇沉淀，过滤，干燥，得白色粉末状固体物，即为羧甲基茯苓多糖。

经检测，该羧甲基茯苓多糖的取代度为1.55，20℃时的溶解度为0.105mg/mL。

实施例2

所述羧甲基茯苓多糖由以下方法制备：

S1.茯苓的培养：将茯苓菌丝无菌接种在麦芽汁液体培养基中，28℃培养5天；

S2.茯苓多糖的制备：将培养好的茯苓培养基35℃发酵2天，加热至微沸，提取2h后，过滤，加入5倍体积的氯仿和正丁醇的混合溶剂，所述氯仿和正丁醇的混合体积比例为6:1，振荡，离心，加入3倍量的95％乙醇，过夜，过滤得沉淀，用乙醚洗涤3次，得到茯苓多糖；

S3.茯苓次多糖的制备：将10g茯苓多糖加入30mL 1.5mol/L高碘酸钠溶液中进行选择性氧化，用三氟乙酸调pH值至4，适度酸解，酸解时间为1h，过滤，固体用水洗涤，得到茯苓次多糖；

S4.羧甲基茯苓多糖的制备：将1g茯苓次多糖溶于20mL 0.1mol/L的KOH溶液中，搅拌下缓慢加入35％双氧水脱色处理，至溶液变成白色，加入50mL 2mol/L氯乙酸的异丙醇和叔丁醇的混合溶液，体积比为3:1，控制反应体系中异丙醇和叔丁醇的混合溶剂的浓度为70％，80℃醚化反应3h后，反应体系呈糊状，倒出上层液体，下层加入稀盐酸溶液调节pH＝6.0，剧烈搅拌，加入95％乙醇，过滤，固体物溶解于水中，用乙醇沉淀，过滤，干燥，得白色粉末状固体物，即为羧甲基茯苓多糖。

经检测，该羧甲基茯苓多糖的取代度为1.57，20℃时的溶解度为0.106mg/mL。

实施例3

所述羧甲基茯苓多糖由以下方法制备：

S1.茯苓的培养：将茯苓菌丝无菌接种在麦芽汁液体培养基中，28℃培养4天；

S2.茯苓多糖的制备：将培养好的茯苓培养基35℃发酵2天，加热至微沸，提取2h后，过滤，加入氯仿和正丁醇的混合溶剂，所述氯仿和正丁醇的混合体积比例为5:1，振荡，离心，加入3倍量的95％乙醇，过夜，过滤得沉淀，用乙醚洗涤3次，得到茯苓多糖；

S3.茯苓次多糖的制备：将10g茯苓多糖加入50mL 1.0mol/L高碘酸钠溶液中进行选择性氧化，用三氟乙酸调pH值至3.6，适度酸解，酸解时间为45min，过滤，固体用水洗涤，得到茯苓次多糖；

S4.羧甲基茯苓多糖的制备：将1g茯苓次多糖溶于20mL 0.1mol/LKOH溶液中，搅拌下缓慢加入35％双氧水脱色处理，至溶液变成白色，加入50mL 2mol/L氯乙酸的异丙醇和叔丁醇的混合溶液中，体积比为3:1，控制反应体系中异丙醇和叔丁醇的混合溶剂的浓度为68％，70℃醚化反应2.5h后，反应体系呈糊状，倒出上层液体，下层加入稀盐酸溶液调节pH＝6.0，剧烈搅拌，加入95％乙醇，过滤，固体物溶解于水中，用乙醇沉淀，过滤，干燥，得白色粉末状固体物，即为羧甲基茯苓多糖。

经检测，该羧甲基茯苓多糖的取代度为1.59，20℃时的溶解度为0.109mg/mL。

对比实施例1

按照中国发明专利CN104188900B方法制备的羧甲基茯苓多糖。

经检验，该羧甲基茯苓多糖的取代度为1.02，20℃时的溶解度为0.085mg/mL。

测试例1抗氧化性测试

取pH为8.2的Tris-HCl缓冲液于比色管中，各自加入实施例1-3和对比实施例1制备的羧甲基茯苓多糖的样品溶液，37℃水浴，然后加入预热过的邻苯三酚溶液，混匀，处理5min后用盐酸淬灭反应，测定320nm处吸光值。对照组分别为维生素C，和对比实施例1制备的羧甲基茯苓多糖。试验结果以清除率E(％)表示。结果见表1。

表1

样品\浓度mg/mL

0.1

0.5

1.0

2.0

5.0

10.0

实施例1

14.1±1.6

17.4±1.1

28.3±2.2

38.4±1.6

48.3±3.7

60.3±1.5

实施例2

14.5±1.3

16.7±1.7

27.3±0.8

36.9±1.8

47.7±2.4

59.1±1.2

实施例3

15.6±0.7

18.1±1.4

29.3±1.2

39.6±1.6

51.1±0.9

63.6±1.8

维生素C

42.3±0.8

91.7±1.3

92.1±1.5

91.8±1.7

91.8±1.3

92.1±1.6

对比实施例1

9.3±1.3

12.4±0.8

16.6±1.1

25.4±1.8

33.6±3.7

38.3±2.5

由上表可知，本发明实施例1-3制备的羧甲基茯苓多糖具有良好的抗氧化活性，活性明显优于对比实施例1。

测试例2羧甲基茯苓多糖的取代度(D·S)测试

将实施例1-3和对比实施例1制备的羧甲基茯苓多糖进行取代度测试，具体方法如下：

精密称取羧甲基茯苓多糖样品0.4g(精确到小数点后4位)，置于150ml的烧杯中，80℃水浴加热，搅拌使溶解，冷却后，用2molL的盐酸溶液调pH至4.0，加入无水乙醇100ml，搅拌均匀，静置过夜，离心分离醇析物，醇析物用95％的乙醇反复洗涤，至洗涤液中不含氯离子。洗净醇析物用0.1000mol/L的NaOH标准溶液40.00ml溶解，待溶液呈透明状后，立即用0.1000mol/L的标准盐酸溶液反滴定，至酚酞指示剂的红色刚退去，记录反滴定所消耗的0.1000mol/L的盐酸标准液的体积为V_HCl。

按照下式计算羧甲基茯苓多糖的取代度(D·S)：

式中：

A为中和1g酸式羧甲基茯苓多糖样品所消耗的NaOH的m mol数；

C_NaOH为NaOH标准溶液的浓度(0.1000mol/L)；

V_NaOH为加入0.1000mol/L的NaOH标准溶液的体积数(40.00ml)；

C_HCl为反滴定用的盐酸标准溶液的浓度(0.1000mol/L)；

V_HCl为反滴定所消耗0.1000mol/L的盐酸标准溶液的体积数。

结果见表2。

表2

从结果可知，本发明实施例1-3制备的羧甲基茯苓多糖具有较高的取代度(1.55-1.59)，明显优于对比实施例1。

实施例4

原料组成(重量份)：羧甲基茯苓多糖45份、青钱柳叶20份、菊粉12份、地龙蛋白3份、金花茶20份、枸杞子20份、肉桂20份、山药20份、黄精30份、葛根20份、玉米须10份和甜菊糖0.5份。

一种具有降血糖功能的膏滋的制备方法，按照以下方法制备：

S1.中药的提取：按比例称取枸杞子、肉桂、山药、黄精、葛根和玉米须，加水煎煮，微沸提取两次，第一次提取加水量为中药重的5倍，提取时间为2h，第二次提取加水量为中药重的4倍，提取时间为1h，180目过滤，合并滤液，浓缩至密度为1.2g/cm³，得到中药浓缩液；

S2.青钱柳叶和金花茶的提取：将青钱柳叶和金花茶分别洗净，晒干，粉碎，加水浸泡，加水量为所述青钱柳叶和金花茶总重的3倍，微波加热至50℃，提取10min后，过滤，减压浓缩至1.2g/cm³，得到茶提取液；

S3.膏滋的制备：按比例将羧甲基茯苓多糖、菊粉和地龙蛋白溶于少量水中，加水量为所述羧甲基茯苓多糖、菊粉和地龙蛋白总重的1倍，混合搅拌均匀，加入步骤S1中制备的中药浓缩液和步骤S2中制备的茶提取液，搅拌均匀，加入甜菊糖，常压炼膏，收膏，即得。

实施例5

原料组成(重量份)：羧甲基茯苓多糖50份、青钱柳叶30份、菊粉17份、地龙蛋白8份、金花茶30份、枸杞子30份、肉桂30份、山药30份、黄精40份、葛根30份、玉米须15份和甜菊糖1份。

一种具有降血糖功能的膏滋的制备方法，按照以下方法制备：

S1.中药的提取：按比例称取枸杞子、肉桂、山药、黄精、葛根和玉米须，加水煎煮，微沸提取两次，第一次提取加水量为中药重的5倍，提取时间为3h，第二次提取加水量为中药重的4倍，提取时间为2h，200目过滤，合并滤液，浓缩至密度为1.5g/cm³，得到中药浓缩液；

S2.青钱柳叶和金花茶的提取：将青钱柳叶和金花茶分别洗净，晒干，粉碎，加水浸泡，加水量为所述青钱柳叶和金花茶总重的5倍，微波加热至70℃，提取15min后，过滤，减压浓缩至1.5g/cm³，得到茶提取液；

S3.膏滋的制备：按比例将羧甲基茯苓多糖、菊粉和地龙蛋白溶于少量水中，加水量为所述羧甲基茯苓多糖、菊粉和地龙蛋白总重的2倍，混合搅拌均匀，加入步骤S1中制备的中药浓缩液和步骤S2中制备的茶提取液，搅拌均匀，加入甜菊糖，常压炼膏，收膏，即得。

实施例6

原料组成(重量份)：羧甲基茯苓多糖46份、青钱柳叶22份、菊粉14份、地龙蛋白4份、金花茶22份、枸杞子23份、肉桂22份、山药22份、黄精33份、葛根22份、玉米须11份和甜菊糖0.6份。

一种具有降血糖功能的膏滋的制备方法，按照以下方法制备：

S1.中药的提取：按比例称取枸杞子、肉桂、山药、黄精、葛根和玉米须，加水煎煮，微沸提取两次，第一次提取加水量为中药重的5倍，提取时间为2h，第二次提取加水量为中药重的4倍，提取时间为1h，180目过滤，合并滤液，浓缩至密度为1.3g/cm³，得到中药浓缩液；

S2.青钱柳叶和金花茶的提取：将青钱柳叶和金花茶分别洗净，晒干，粉碎，加水浸泡，加水量为所述青钱柳叶和金花茶总重的4倍，微波加热至55℃，提取12min后，过滤，减压浓缩至1.3g/cm³，得到茶提取液；

S3.膏滋的制备：按比例将羧甲基茯苓多糖、菊粉和地龙蛋白溶于少量水中，加水量为所述羧甲基茯苓多糖、菊粉和地龙蛋白总重的1.2倍，混合搅拌均匀，加入步骤S1中制备的中药浓缩液和步骤S2中制备的茶提取液，搅拌均匀，加入甜菊糖，常压炼膏，收膏，即得。

实施例7

原料组成(重量份)：羧甲基茯苓多糖49份、青钱柳叶28份、菊粉16份、地龙蛋白7份、金花茶27份、枸杞子28份、肉桂25份、山药28份、黄精38份、葛根26份、玉米须13份和甜菊糖0.9份。

一种具有降血糖功能的膏滋的制备方法，按照以下方法制备：

S1.中药的提取：按比例称取枸杞子、肉桂、山药、黄精、葛根和玉米须，加水煎煮，微沸提取两次，第一次提取加水量为中药重的5倍，提取时间为3h，第二次提取加水量为中药重的4倍，提取时间为2h，200目过滤，合并滤液，浓缩至密度为1.4g/cm³，得到中药浓缩液；

S2.青钱柳叶和金花茶的提取：将青钱柳叶和金花茶分别洗净，晒干，粉碎，加水浸泡，加水量为所述青钱柳叶和金花茶总重的4倍，微波加热至65℃，提取14min后，过滤，减压浓缩至1.4g/cm³，得到茶提取液；

S3.膏滋的制备：按比例将羧甲基茯苓多糖、菊粉和地龙蛋白溶于少量水中，加水量为所述羧甲基茯苓多糖、菊粉和地龙蛋白总重的1.8倍，混合搅拌均匀，加入步骤S1中制备的中药浓缩液和步骤S2中制备的茶提取液，搅拌均匀，加入甜菊糖，常压炼膏，收膏，即得。

实施例8

原料组成(重量份)：羧甲基茯苓多糖48份、青钱柳叶25份、菊粉15份、地龙蛋白6份、金花茶25份、枸杞子24份、肉桂24份、山药24份、黄精36份、葛根24份、玉米须12份和甜菊糖0.8份。

一种具有降血糖功能的膏滋的制备方法，按照以下方法制备：

S1.中药的提取：按比例称取枸杞子、肉桂、山药、黄精、葛根和玉米须，加水煎煮，微沸提取两次，第一次提取加水量为中药重的5倍，提取时间为2.5h，第二次提取加水量为中药重的4倍，提取时间为1.5h，200目过滤，合并滤液，浓缩至密度为1.35g/cm³，得到中药浓缩液；

S2.青钱柳叶和金花茶的提取：将青钱柳叶和金花茶分别洗净，晒干，粉碎，加水浸泡，加水量为所述青钱柳叶和金花茶总重的4倍，微波加热至60℃，提取13min后，过滤，减压浓缩至1.35g/cm³，得到茶提取液；

S3.膏滋的制备：按比例将羧甲基茯苓多糖、菊粉和地龙蛋白溶于少量水中，加水量为所述羧甲基茯苓多糖、菊粉和地龙蛋白总重的1.5倍，混合搅拌均匀，加入步骤S1中制备的中药浓缩液和步骤S2中制备的茶提取液，搅拌均匀，加入甜菊糖，常压炼膏，收膏，即得。

对比例1

制备方法与实施例8相同，配方与实施例8相比羧甲基茯苓多糖替换为对比实施例1制备的羧甲基茯苓多糖。

对比例2

制备方法与实施例8相同，配方与实施例8相比不含有中药浓缩液。

对比例3

制备方法与实施例8相同，配方与实施例8相比不含有茶提取液。

试验例1小鼠试验

1、高血糖小鼠模型建立及处理。

取100只大小相近的小鼠，分为10组，每组10只，全部给予尾静脉注射10mg/mL四氧嘧啶，剂量为50mg/kg。3d后，尾静脉采血测血糖。血糖值在10mmol/L以上的小鼠为成功造模的高血糖小鼠。

实施例4-8组的小鼠给与灌胃实施例4-8制备的膏滋的水溶液，剂量为200mg，对比例1-3组的小鼠给与灌胃对比例1-3制备的膏滋的水溶液，剂量为200mg，对照1组小鼠灌胃市售降糖药的水溶液，剂量为200mg，对照2组小鼠灌胃生理盐水，剂量为200mg。12h后测血糖。

2、GOD-POD法测血糖。饱和草酸钾溶液(抗凝剂)润洗枪头和0.5m LDorf管，采血，3000r/min离心30min，取上清用葡萄糖试剂盒进行血糖测定。

实验结果参见表3。

表3对多糖处理的小鼠降血糖作用的影响

由以上结果可知，与市售降糖药相比，本发明实施例4-8制得的具有降血糖功能的膏滋能够明显降低小鼠血糖值，使之回到正常值的范围之内，其中，实施例8中的膏滋的效果更显著。对比例1中用使用现有技术其它方法制备获得的羧甲基茯苓多糖(对比实施例1)，其降血糖效果明显差于实施例8，可见本发明的方法制备的羧甲基茯苓多糖具有更好的降血糖功效；对比例2中未添加中药浓缩液和对比例3中为添加茶提取液，其降血糖效果较差，明显高于实施例4-8中的血糖值，可见，各组分添加具有协同增效的作用。

测试例2稳定性试验

将本发明实施例4-8制备的具有降血糖功能的膏滋进行稳定性试验，结果见表2。

表4

与现有技术相比，羧甲基茯苓多糖的制备中用异丙醇和叔丁醇的混合溶液代替传统的异丙醇或乙醇，异丙醇为仲醇，叔丁醇为叔醇，两者的位阻大，在该SN2取代反应中有助于降低副反应，减少氯乙酸的用量并降低生产成本，反应较温和，不仅制得的羧甲基茯苓多糖取代度较高且取代基分布均匀，而且克服了异丙醇或乙醇作为介质制备的羧甲基茯苓多糖容易结块的缺点；通过控制异丙醇和叔丁醇的浓度有利于提高羧甲基茯苓多糖的取代度；本发明采用的三氟乙酸因其酸性、氧化性弱，水解效果好并且具有对茯苓多糖结构影响小的优点，作为酸解用酸使茯苓多糖糖苷键断裂；本发明通过控制适合的醚化反应温度进一步提高取代度，研究发现，温度过低，取代度过低；醚化温度过高，取代度反而下降，通过实验发现，温度在60-80℃时取代度最高；

本发明的方法制备的羧甲基茯苓多糖具有良好的水溶性，20℃下溶解度为0.105-0.109mg/mL，取代度为1.55-1.59，均优于现有的羧甲基茯苓多糖，制得的羧甲基茯苓多糖有明显的抗肿瘤、提高免疫力、保肝降酶、抗病毒、减轻放射副反应、降血糖、提升白细胞含量、健胃安神、抗衰老等生理活性；青钱柳叶、菊粉具有良好的控制血脂、降低血糖的作用，地龙蛋白有助于改善了人体多种机能，改善了机体的内环境，促进了胰岛功能的恢复，从而有助于降低血糖；金花茶含有丰富的多糖物质，能有效控制餐后血糖上升幅度及改善葡萄糖耐量，并可改善脂类代谢紊乱，有明显的降血糖效果，金花茶含有丰富的茶多酚，可以清除自由基，能降低DM血糖的升高，从而改善其糖耐量，稳定血糖，金花茶含有丰富的茶色素，降低血糖、尿糖、血脂、糖化血红蛋白，减少胰岛素抵抗，改善血液流变、缓解微循环障碍，因此，可以有效的起到降低血糖的作用；

枸杞子，甘，平，归肝、肾经，滋补肝肾，益精明目。用于虚劳精亏，腰膝酸痛，眩晕耳鸣，内热消渴，血虚萎黄，目昏不明；肉桂，辛、甘，大热，归肾、脾、心、肝经，补火助阳，引火归源，散寒止痛，活血通经，用于阳痿，宫冷，腰膝冷痛，肾虚作喘，阳虚眩晕，目赤咽痛，心腹冷痛，虚寒吐泻，寒疝，奔豚，经闭，痛经；山药，甘，平，归脾、肺、肾经，补脾养胃，生津益肺，补肾涩精，用于脾虚食少，久泻不止，肺虚喘咳，肾虚遗精，带下，尿频，虚热消渴，麸炒山药补脾健胃，用于脾虚食少，泄泻便溏，白带过多；黄精，甘，平，归脾、肺、肾经，补气养阴，健脾，润肺，益肾，用于脾胃虚弱，体倦乏力，口干食少，肺虚燥咳，精血不足，内热消渴；葛根，甘、辛，凉，归脾、胃经，解肌退热，生津，透疹，升阳止泻，用于外感发热头痛、项背强痛，口渴，消渴，麻疹不透，热痢，泄泻；高血压颈项强痛；玉米须，甘、淡，平，归膀胱、肝、胆经，利尿消肿，平肝利胆，用于急、慢性肾炎，水肿，急、慢性肝炎，高血压，糖尿病，慢性鼻窦炎，尿路结石，胆道结石，小便不利、湿热黄胆等症，并可预防习惯性流产；

本发明原料来源广，制备方法简单，制得的膏滋能够明显具有降低血糖、尿糖、血脂、糖化血红蛋白，提高胰岛素机能，控制血脂，增强免疫力等功效，具有广阔的应用前景。

本领域的技术人员在不脱离权利要求书确定的本发明的精神和范围的条件下，还可以对以上内容进行各种各样的修改。因此本发明的范围并不仅限于以上的说明，而是由权利要求书的范围来确定的。

Claims (10)

1.一种具有降血糖功能的膏滋，其特征在于，由以下原料制备而成：羧甲基茯苓多糖、青钱柳叶、菊粉、地龙蛋白、金花茶、枸杞子、肉桂、山药、黄精、葛根、玉米须和甜菊糖。

2.根据权利要求1所述一种具有降血糖功能的膏滋，其特征在于，由以下原料按重量份制备而成：羧甲基茯苓多糖45-50份、青钱柳叶20-30份、菊粉12-17份、地龙蛋白3-8份、金花茶20-30份、枸杞子20-30份、肉桂20-30份、山药20-30份、黄精30-40份、葛根20-30份、玉米须10-15份和甜菊糖0.5-1份。

3.根据权利要求2所述一种具有降血糖功能的膏滋，其特征在于，由以下原料按重量份制备而成：羧甲基茯苓多糖46-49份、青钱柳叶22-28份、菊粉14-16份、地龙蛋白4-7份、金花茶22-27份、枸杞子23-28份、肉桂22-25份、山药22-28份、黄精33-38份、葛根22-26份、玉米须11-13份和甜菊糖0.6-0.9份。

4.根据权利要求3所述一种具有降血糖功能的膏滋，其特征在于，由以下原料按重量份制备而成：羧甲基茯苓多糖48份、青钱柳叶25份、菊粉15份、地龙蛋白6份、金花茶25份、枸杞子24份、肉桂24份、山药24份、黄精36份、葛根24份、玉米须12份和甜菊糖0.8份。

5.根据权利要求1所述一种具有降血糖功能的膏滋，其特征在于，所述羧甲基茯苓多糖由以下方法制备：

S1.茯苓的培养：将茯苓菌丝无菌接种在麦芽汁液体培养基中，28℃培养4-5天；

S2.茯苓多糖的制备：将培养好的茯苓培养基35℃发酵2天，加热至微沸，提取1-2h后，过滤，加入氯仿和正丁醇的混合溶剂，振荡，离心，加入3倍量的95％乙醇，过夜，过滤得沉淀，用乙醚洗涤2-3次，得到茯苓多糖；

S3.茯苓次多糖的制备：将茯苓多糖加入高碘酸钠溶液中进行选择性氧化，用三氟乙酸调pH值至3-4，适度酸解后，过滤，固体用水洗涤，得到茯苓次多糖；

S4.羧甲基茯苓多糖的制备：将茯苓次多糖溶于碱溶液中，搅拌下缓慢加入35％双氧水脱色处理，至溶液变成白色，加入氯乙酸的异丙醇和叔丁醇的混合溶液，控制反应体系中异丙醇和叔丁醇的混合溶剂的浓度为65％-70％，60-80℃醚化反应2-3h后，反应体系呈糊状，倒出上层液体，下层加入稀盐酸溶液调节pH＝6.0，剧烈搅拌，加入95％乙醇，过滤，固体物溶解于水中，用乙醇沉淀，过滤，干燥，得白色粉末状固体物，即为羧甲基茯苓多糖。

6.根据权利要求5所述一种具有降血糖功能的膏滋，其特征在于，所述酸解时间为30min-1h，所述异丙醇和叔丁醇的混合体积比为3:1，所述氯仿和正丁醇的混合体积比例为(4-6):1，所述碱溶液为KOH溶液，所述高碘酸钠溶液的物质的量的浓度为0.5mol/L-1.5mol/L。

7.根据权利要求1-6任一项权利要求所述一种具有降血糖功能的膏滋的制备方法，其特征在于，按照以下方法制备：

S1.中药的提取：按比例称取枸杞子、肉桂、山药、黄精、葛根和玉米须，加水煎煮，微沸提取两次，180-200目过滤，合并滤液，浓缩至密度为1.2g/cm³-1.5g/cm³，得到中药浓缩液；

S2.青钱柳叶和金花茶的提取：将青钱柳叶和金花茶分别洗净，晒干，粉碎，加水浸泡，微波加热至50℃-70℃，提取10min-15min后，过滤，减压浓缩至1.2g/cm³-1.5g/cm³，得到茶提取液；

S3.膏滋的制备：按比例将羧甲基茯苓多糖、菊粉和地龙蛋白溶于少量水中，混合搅拌均匀，加入步骤S1中制备的中药浓缩液和步骤S2中制备的茶提取液，搅拌均匀，加入甜菊糖，常压炼膏，收膏，即得。

8.根据权利要求7所述一种具有降血糖功能的膏滋的制备方法，其特征在于，步骤S1中第一次提取加水量为中药重的5倍，提取时间为2h-3h，第二次提取加水量为中药重的4倍，提取时间为1h-2h。

9.根据权利要求7所述一种具有降血糖功能的膏滋的制备方法，其特征在于，步骤S2中加水量为所述青钱柳叶和金花茶总重的3-5倍。

10.根据权利要求7所述一种具有降血糖功能的膏滋的制备方法，其特征在于，步骤S3中加水量为所述羧甲基茯苓多糖、菊粉和地龙蛋白总重的1-2倍。