CN109762043B - 鹅去氧胆酸及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及药物合成领域，具体而言，涉及一种鹅去氧胆酸及其制备方法。鹅去氧胆酸的制备方法，包括以下步骤：利用3α，7α‑二羟基‑5α‑胆烷酸为原料经过化学反应后形成中间体E，而后中间体E再经过化学反应形成鹅去氧胆酸；所述中间体E的结构式如下：

其中，R1为烷基、烯基或者芳香基团，R2为酰基。该制备方法能够利用提取副产物作为原料，快速合成鹅去氧胆酸，路线各步骤条件温和，收率高，适合大量制备。

Description

鹅去氧胆酸及其制备方法

技术领域

本发明涉及药物合成领域，具体而言，涉及一种鹅去氧胆酸及其制备方法。

背景技术

胆汁酸是与无数生物学功能相关的重要内源性分子，包括胆固醇的吸收和排泄，在脂肪代谢中起到重要作用。鹅去氧胆酸是天然的初级胆汁酸，在人、畜、禽的胆汁中广泛存在，是鸡、鸭、鹅等家禽胆汁中主要成分。自从Thistle和Schoenfirld发现鹅去氧胆酸能治疗胆结石之后，鹅去氧胆酸在临床上的应用就不断被发现。20世纪70年代以来，鹅去氧胆酸主要用于胆结石疾病和其他肝胆疾病的治疗，随后，陆续发现鹅去氧胆酸除了能治疗各种肝胆疾病外，还具有抗菌、消炎、平喘镇咳、促进消化系统的消化、治疗脑腱性黄瘤病和胰岛素耐受性等药用价值，同时，鹅去氧胆酸还是合成熊去氧胆酸和奥贝胆酸的重要原料。因此，随着药用价值的扩大以及对熊去氧胆酸和奥贝胆酸需求的扩大，鹅去氧胆酸的需求也越来越大。

目前的化学合成途径主要是以胆酸和猪去氧胆酸为原料进行合成。以胆酸为原料进行的合成有两条途径，一是通过还原12位的羰基制备鹅去氧胆酸；二是通过C11烯烃加氢制备鹅去氧胆酸，这两条途径经过工艺优化后收率可以达到40％。以猪去氧胆酸为原料的合成途径目前的收率在26％，但是这条路线使用到了四氯苯醌，对环境的影响较大。

发明内容

本发明提供了一种鹅去氧胆酸的制备方法，其能够利用提取副产物作为原料，快速合成鹅去氧胆酸，路线各步骤条件温和，收率高，适合大量制备。

本发明还提供一种鹅去氧胆酸，其通过上述方法制备得到。

本发明是这样实现的：

一种鹅去氧胆酸的制备方法，包括以下步骤：

利用3α，7α-二羟基-5α-胆烷酸为原料经过化学反应后形成中间体E，而后中间体E再经过化学反应形成鹅去氧胆酸；所述中间体E的结构式如下：

其中，R1为烷基、烯基或者芳香基团，R2为酰基。

一种鹅去氧胆酸，其通过上述鹅去氧胆酸的制备方法制备得到。

本发明的有益效果是：本发明通过采用鸭胆、鹅胆等经过提取后得到的副产物作为反应原料，能够做到废物利用，降低合成成本，且原料来源广泛。并且，经过上述步骤得到的鹅去氧胆酸的产率高，可达32％，适合大量制备。且该制备方法操作简单，重复性强，具有极强的实用性。

附图说明

为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本发明实施例提供的鹅去氧胆酸的合成路线图。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。

下面对本发明实施例的鹅去氧胆酸及其制备方法进行具体说明。

一种鹅去氧胆酸的制备方法，参见图1，包括以下步骤：

按照下式进行化学反应：

本发明实施例以3α，7α-二羟基-5α-胆烷酸(简称：别鹅去氧胆酸)(A)为原料经酯化得到3α,7α-二羟基-5α-胆烷酸酯(B)，3α,7α-二羟基-5α-胆烷酸酯(B)3位选择性氧化得到3-酮-7α-羟基-5α-胆烷酸酯(C)，3-酮-7α-羟基-5α-胆烷酸酯(C)的7位保护得到3-酮-7α-酰氧基-5α-胆烷酸酯(D)，3-酮-7α-酰氧基-5α-胆烷酸酯(D)进行氧化反应得到△1,4-3-酮-7α-酰氧基-不饱和胆烷酸酯(E)，△1,4-3-酮-7α-酰氧基-不饱和胆烷酸酯(E)进行催化氢化还原双键得到3-酮-7α-酰氧基-5β-胆烷酸酯(F)，3-酮-7α-酰氧基-5β-胆烷酸酯(F)的3位还原得到3α-羟基-7α-酰氧基-5β-胆烷酸酯(G)，3α-羟基-7α-酰氧基-5β-胆烷酸酯(G)水解脱保护得到鹅去氧胆酸(H)。

采用的原料为3α，7α-二羟基-5α-胆烷酸，其为鸭胆、鹅胆等经过提取得到的副产物，采用上述丢弃不用的副产物作为原料，能够快速的制备得到鹅去氧胆酸；以废物作为原料，来源广泛，供应充足还能够降低合成成本。并且，经过上述步骤得到的鹅去氧胆酸产率高，可达32％，适合大量制备。

上式步骤中的中间体E的R1为烷基、烯基或者芳香基团，R2为酰基。而中间体E是将所述3α，7α-二羟基-5α-胆烷酸依次经过第一次酯化反应、氧化反应、第二次酯化反应以及脱氢反应后得到的中间体。

S1、制备中间体B；

第一次酯化反应为3α，7α-二羟基-5α-胆烷酸与醇进行的酯化反应，具体是在催化剂的作用下，将所述3α，7α-二羟基-5α-胆烷酸与醇在50-90℃的条件下，反应得到中间体B；温度优选为60-70℃，反应温度在上述范围内均可，可根据实际需求进行调整，如反应温度可以为60℃、61℃、62℃、63℃、64℃、65℃、66℃、67℃、68℃、69℃、70℃等等。

反应时间为2-6h，可以可根据酯化反应进度调节反应时间，使酯化反应完全，如可以为2h、2.5h、3h、3.5h、4h、4.5h、5h、5.5h、6h等等。

催化剂为酸性物质，更优选为浓盐酸、浓硫酸、苯磺酸、甲磺酸、对甲苯磺酸中的任一种，更优选的，为浓盐酸或浓硫酸。采用上述催化剂能够保证其催化效果，保证中间体B的形成。

3α，7α-二羟基-5α-胆烷酸、所述醇和所述催化剂的摩尔比为1:2-30：0.1-1，在这一范围内能够保证3α，7α-二羟基-5α-胆烷酸顺利酯化，如在不同实施方式中，3α，7α-二羟基-5α-胆烷酸和醇的摩尔比可以为1﹕2、1﹕4、1﹕6、1﹕8、1﹕10、1﹕12、1﹕14、1﹕16、1﹕18、1﹕20、1﹕25、1﹕30等等；3α，7α-二羟基-5α-胆烷酸和催化剂的摩尔比可以为1﹕0.1、1﹕0.3、1﹕0.5、1﹕0.7、1﹕0.9、1﹕1等等。

进一步地，醇为一元醇，更优选为C1-C10一元醇，进一步优选为甲醇、乙醇、异丙醇、丙烯醇和苄醇，最优选为，甲醇或者异丙醇。采用上述醇能够保证制备得到的鹅去氧胆酸的产率。

反应结束后对反应液进行提纯，提纯是为了降低中间体B中的杂质含量，继而保证制备得到的鹅去氧胆酸的纯度，且保证其产率。

提纯方法是：反应结束后，将第一次酯化反应得到的反应液冷却至室温，除去甲醇，加入乙酸乙酯，依次用饱和碳酸氢钠溶液和饱和氯化钠溶液洗涤，干燥，除去溶剂，得到中间体B。其中，乙酸乙酯的加入质量优选为原料3α，7α-二羟基-5α-胆烷酸的10-20倍，从而保证提纯效果。

S2、制备中间体C；

将上述制备得到的中间体B与第一氧化剂反应2-36h形成中间体C，也就是氧化反应，该氧化反应为3位选择性氧化。具体地，化合物B、第一氧化剂、硅藻土和第一有机溶剂混合，回流反应，得到化合物C。采用上述方法保证制备得到中间体C的收率高。

进一步地，第一氧化剂为过氧化物、金属化合物或者溴代酰亚胺中的任意一种；更优选，所述过氧化物为过氧苯甲酸或者双氧水；所述金属化合物为次氯酸钠、碳酸银、二氧化锰或者三氧化铬中的任意一种；所述溴代酰亚胺为N-溴代丁二酰亚胺；最优选，所述第一氧化剂为次氯酸钠、碳酸银或者二氧化锰。采用上述氧化剂，能保证氧化反应的氧化效果，从而保证中间体C的合成速率和产率。

进一步地，第一有机溶剂包括甲苯、二氯甲烷、四氢呋喃、氯仿、乙腈，优选甲苯。采用上述第一有机溶剂能够为氧化反应提供良好的反应氛围，保证反应顺利进行。

中间体B与所述第一氧化剂的摩尔比为1:0.5-3，优选为1:0.8-2，如在不同实施方式中可以为1﹕1、1﹕1.5、1﹕2、1﹕2.5、1﹕3等等。中间体B和硅藻土的摩尔比为1﹕5-15。如在不同实施方式中可以为1﹕6、1﹕8、1﹕10、1﹕12、1﹕15等等。优选的，中间体B和第一有机溶剂的质量比为1﹕5-20。可在该范围内进行调整。采用上述比例能够保证反应过程顺利进行，保证中间体C的产率。

进一步地，反应结束后对氧化反应得到的反应液进行提纯，形成中间体C，提纯方法是：反应结束后，将氧化反应的反应液过滤，收集滤液，浓缩得到残余样品，用甲醇：水＝5:1进行重结晶，过滤得到中间体C。

S3、制备中间体D；

将上述中间体C与4-二甲氨基吡啶、三乙胺、酸酐进行反应1-15h后调节反应液pH至6-7形成中间体D，也就是第二次酯化反应，第二次酯化反应为7位进行酯化反应。具体地，化合物C溶解于第二有机溶剂中，加入4-二甲氨基吡啶、三乙胺、酸酐，室温反应1-15h，而后将反应后的反应液加入水中，调节pH为6-7，分液收集有机相，得到中间体D。第二有机溶剂为乙酸乙酯，酸酐为乙酸酐。

进一步地，调节pH采用的是浓度为1-3M的盐酸进行调节。

中间体C、所述4-二甲氨基吡啶、所述三乙胺、所述酸酐的摩尔比为1﹕0.01-0.5﹕1.5-3﹕0.8-4。且中间体C与第二有机溶剂的质量比为1:10-15。采用上述比例能够保证第二酯化反应顺利进行，保证中间体D产率。

进一步地，将第二次酯化反应得到的有机相进行纯化，形成中间体D，提纯的方法是：用饱和碳酸氢钠溶液和饱和食盐水溶液洗涤有机相，干燥，除去溶剂，得到中间体D。

S4、制备中间体E；

中间体D与第二氧化剂在20-90℃条件下反应3-72h，也就是脱氢反应，该脱氢反应是1,2和4，5位同时脱氢氧化形成烯烃的反应。具体地，中间体D溶解于第三有机溶剂中，加入第二氧化剂和三氟乙酸，氮气保护下加热反应，得到中间体E。

第三有机溶剂优选二甲基亚砜。第二氧化剂为碘试剂，优选为高价碘试剂，更优选为2-碘酰基苯甲酸。采用上述第二氧化剂和第三有机溶剂能够保证中间体E的生产效率。

中间体D和所述第二氧化剂的摩尔比为1:2-5。中间体D和三氟乙酸的摩尔比为1：0.1-0.5且中间体D和第三有机溶剂的质量比为1﹕10-35。

进一步地，反应后对脱氢反应的反应液进行提纯，提纯的方法是：将反应后的反应液加入水中，用乙酸乙酯萃取，分液收集有机相，用水和饱和食盐水溶液洗涤有机相，干燥，除去溶剂，柱层析分离，得到中间体E。进一步优选的，柱层析分离的洗脱液为乙酸乙酯和石油醚，乙酸乙酯和石油醚的体积比为1﹕10-20。采用上述提纯方式能够进一步保证提纯效果，继而保证后续制备得到的鹅去氧胆酸的纯度和产率。

经过上述操作后得到中间体E，而后中间体E依次经过催化加氢还原反应、3位还原反应以及水解反应得到所述鹅去氧胆酸。

S5、制备中间体F；

催化加氢还原反应是1,2和4，5位同时加氢还原的反应，具体地，将所述中间体E与催化剂、三乙胺混合后在20-60℃的条件下进行加氢反应0.5-4h后形成中间体F，具体地，中间体E、催化剂、醇类溶剂和三乙胺进行反应，反应的压力为0.8-1.2MPa。催化剂为钯碳，优选为5％的钯碳，醇类溶剂为甲醇。

优选，中间体E与所述催化剂和三乙胺的摩尔比为1:2-10：0.001-0.5；中间体E与醇类溶剂的质量比为1:10-20。采用上述比例能够保证催化加氢还原反应顺利进行，保证中间体F的产率。

而后将催化加氢还原反应得到的反应液进行提纯，提纯的方法是反应结束后，旋干醇类溶剂，用乙酸乙酯溶解，用盐酸和饱和食盐水洗涤，除去溶剂，得到中间体F。其中，乙酸乙酯的加入质量优选为中间体F的20-30倍。洗涤时，采用相近体积的浓度为1-3M盐酸、饱和食盐水洗涤，优选相同体积。通过上述提纯方法能够保证制备得到的中间体F的产率和从纯度。

S6、制备中间体G；

3位还原反应是将所述中间体F与还原剂进行反应。3位还原反应的意思是位于3位的羰基进行催化加氢反应得到羟基。

具体地，将中间体F溶解于第四有机溶剂中，于0-10℃加入还原剂，室温反应，得到中间体G。还原剂为氢化物，更优选为硼氢化钠。第四有机溶剂优选无水甲醇。其中，反应时间通过薄层色谱法TLC监控，展开剂为体积比为1﹕6-1﹕2的乙酸乙酯和石油醚。采用上述方式进行反应，能够保证反应顺利进行，保证制备得到的中间体G的产率。

中间体F与还原剂的摩尔比为1:0.5-10，中间体F与第四有机溶剂的质量比为1﹕30-50，采用上述比例能够进一步保证中间体G的制备效果。

进一步地，反应后将3位还原反应得到的反应液进行提纯，提纯方法是：向反应后的反应液中加入水、乙酸乙酯，充分搅拌，静置分层，收集有机相，依次用饱和碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤，干燥，除去溶剂，得到中间体F。提纯时，加入水和乙酸乙酯的质量分别优选为反应液质量的5-10倍和10-30倍。

S7、制备鹅去氧胆酸；

水解反应是在碱性条件下，中间体G水解得到鹅去氧胆酸，也就是3α，7α-二羟基-5β-胆烷酸。具体地，中间体G、醇类溶剂、水、碱金属氢氧化物混合，回流反应，浓缩除去醇类溶剂，加入水、盐酸，调节pH为3-4，析出沉淀，过滤收集沉淀，得到鹅去氧胆酸。进一步优选的，于60-80℃反应4-8h。醇类溶剂为甲醇，碱金属氢氧化物包括氢氧化钠和氢氧化钾，优选氢氧化钠。采用上述制备过程，保证生产效率和纯度。

进一步地，中间体G、醇类溶剂和水的质量比为1﹕10-20﹕5-10。中间体G与碱金属氢氧化物的摩尔比为1﹕2-6。采用上述比例能够保证反应充分进行，减少副产物的产生。

其中，加入水的量优选与反应液同体积。加入的盐酸的浓度为1-3M。

本发明还提供一种鹅去氧胆酸，其通过上述鹅去氧胆酸的制备方法制备得到。

综上，本发明各步骤的反应条件相对温和，且工艺简单，经过7步反应得到产物，易于控制，无需复杂的设备即可得到目标化合物。

以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。

实施例1

本实施例提供一种鹅去氧胆酸的制备方法，包括以下步骤：

S1、制备中间体B；

向配有干燥回流冷凝管的反应容器中加入别鹅去氧胆酸(1.0g，2.6mmol)、15mL无水甲醇、浓硫酸100μL，加入完毕后将反应温度升至67℃，搅拌反应4h。反应结束后，旋转蒸发除去溶剂甲醇，加20mL乙酸乙酯溶解残留物，依次用10mL饱和NaHCO₃溶液和水洗涤。将有机相用无水MgSO₄干燥除水，过滤除去无水MgSO₄，收集有机相，减压蒸馏除去溶剂，得到1.0g白色固体，为中间体B，收率：99％。

中间体B的结构表征数据如下：

¹H NMR(600MHz,CD₃OD)δ＝4.03-3.90(m,1H),3.77(d,J＝2.1Hz,1H),3.64(s,1H),0.93(dd,J＝13.1,8.9Hz,1H),0.80(s,1H),0.68(s,1H)。

¹³C NMR(151MHz,CD₃OD)δ＝175.06,67.36,65.81,55.85,50.61,50.34,45.63,42.30,39.52,39.51,36.35,35.81,35.34,35.10,31.90,31.18,30.85,30.43,28.13,27.74,23.11,20.31,17.36,10.86,9.24。

HRMS:Calcd for C₂₅H₄₂O₄[M+Na]⁺429.2983，Found 429.2971。

S2、制备中间体C；

将中间体B(0.5g，1.23mmol)溶于甲苯(10mL)中，加入硅藻土(0.74g，12.23mmol)，搅拌均匀，避光的情况下加入碳酸银(0.68g，2.46mmol)，升温至回流，搅拌反应24h，过滤除去沉淀，浓缩甲苯，加入3mL甲醇和水(甲醇：水＝5:1)进行重结晶，抽滤，得到中间体C，收率为83％。

中间体C的结构表征数据如下：

¹H NMR(600MHz,CD₃OD)δ＝3.79(d,J＝2.6Hz,1H),3.64(s,3H),1.05(s,3H),0.94(d,J＝6.6Hz,3H),0.72(s,3H)。

¹³C NMR(151MHz,CD₃OD)δ＝213.32,175.02,66.81,55.88,50.62,50.24,45.08,43.69,42.30,39.46,39.30,38.23),37.56,36.53,35.46,35.33,30.82,30.43,27.76,23.13,20.84,17.35,10.86,9.30。

HRMS:Calcd for C₂₅H₄₀O₄[M+Na]⁺427.2827，Found 427.2822。

S3、制备中间体D；

在反应容器中加入中间体C(0.2g，0.49mmol)和乙酸乙酯(3mL)搅拌溶解；然后依次加入DMAP(6mg，0.049mmol)、三乙胺(170μL，1.23mmol)，加入乙酸酐(151μL，1.61mmol)，室温搅拌反应10.5h。加入0.5N盐酸调节pH至6-7，分液收集有机相，有机相依次用水(3×5mL)和饱和食盐水(3×5mL)洗涤，无水MgSO₄干燥除水，抽滤除去无水MgSO₄，浓缩除去溶剂，得白色固体0.22g，为中间体D，收率为99.5％。

中间体D的结构表征数据如下：

¹H NMR(600MHz,CD₃OD)δ＝4.94-4.90(m,1H),3.64(s,1H),2.03(s,1H),1.07(d,J＝7.5Hz,1H),0.94(t,J＝4.9Hz,1H),0.73(d,J＝6.8Hz,1H)。

¹³C NMR(151MHz,CD₃OD)δ＝212.70,174.96,171.06,70.99(s),55.79,50.61,50.31,46.53,43.32,42.46,40.09,39.34,38.01,38.00,37.46,35.32,35.26,33.01,30.76,30.40,27.58,23.22,20.96,19.73,17.31,10.76,9.33。

HRMS:Calcd for C₂₇H₄₂O₅[M+Na]⁺469.2932，Found 469.2920。

S4、制备中间体E；

将中间体D(1.0g，2.24mmol)和2-碘酰基苯甲酸(2.5g，8.96mmol)加入到反应容器中，在氮气的氛围下加入DMSO(30mL)搅拌溶解，加入三氟乙酸(0.1mL，0.67mmol)，升温至65℃，薄层色谱法TLC(V乙酸乙酯﹕V石油醚＝1﹕3)监控，反应结束后，加入水稀释，用乙酸乙酯(3×20mL)萃取三次，得到的有机相依次用水(3×20mL)和饱和食盐水洗涤(3×20mL)洗涤，无水MgSO₄干燥除水，过滤除去无水MgSO₄，浓缩得粗品，粗品经柱层析分离，洗脱液为体积比为1﹕10的乙酸乙酯和石油醚，得黄色固体0.5g，为中间体E，收率50％。

中间体E的结构表征数据如下：

¹H NMR(600MHz,DMSO-d₆)δ＝7.21(d,J＝10.1Hz,1H),6.13(dd,J＝10.1,1.5Hz,1H),5.94(s,1H),4.96(d,J＝2.3Hz,1H),3.57(s,1H),1.94(s,1H),1.22(s,1H),0.87(d,J＝6.5Hz,1H),0.71(s,1H)。

¹³C NMR(151MHz,DMSO-d₆)δ＝185.00,174.15,170.25,165.36,156.47,127.35,126.09,72.31,55.52,51.63,50.23,45.49,43.46,42.78,39.03,37.69,37.15,35.13,30.96,30.79,27.83,23.61,22.46,21.24,18.70,18.50,12.09。

HRMS:Calcd for C₂₇H₄₀O₅[M+Na]⁺465.2619，Found 465.2624。

S5、制备中间体F；

将中间体E(0.1g，0.22mmol)溶于甲醇(2mL)中，加入钯碳(0.2g,1.88mmol)，滴加两滴三乙胺，将反应体系置于1MPa的室温下反应1h，旋干甲醇，加入乙酸乙酯(2mL)，依次用1M盐酸(3×2mL)和饱和食盐水(3×2mL)洗涤，无水MgSO₄干燥除水，过滤除去无水MgSO₄，浓缩得中间体F，收率99％。

中间体F的结构表征数据如下：

¹H NMR(600MHz,CD₃OD)δ＝4.98-4.91(m,1H),3.64(s,1H),2.02(s,1H),1.07(s,1H),0.96(d,J＝6.6Hz,1H),0.74(s,1H)。

¹³C NMR(151MHz,CD₃OD)δ＝213.86,174.97,170.74,71.33,55.77,50.62,50.25,44.32,42.76,42.52,39.36,37.78,36.33,36.29,35.26,34.75,34.70,30.77,30.62,30.40,27.64,23.19,20.78,20.75,19.91,17.34,10.73。

HRMS:Calcd for C₂₇H₄₄O₅[M+Na]₊469.2932，Found 469.2934。

S6、制备中间体G；

将中间体F(34mg，0.076mmol)溶于甲醇(2mL)中，降温至0℃，分批加入硼氢化钠(14mg，0.368mmol)，加毕，反应体系缓慢升至室温下搅拌反应，薄层色谱法TLC(V乙酸乙酯﹕V石油醚＝1﹕2)监控。反应结束后，加入蒸馏水(5mL)，加入乙酸乙酯(20mL)，充分搅拌，静置分层，分出有机相，水相用乙酸乙酯(2×5mL)萃取，合并有机相，依次用饱和碳酸氢钠(3×15mL)和饱和食盐水(3×15mL)洗涤，无水MgSO₄干燥，过滤除去无水MgSO₄，浓缩得白色固体30mg，为中间体G，收率88％。

中间体G的结构表征数据如下：

¹H NMR(600MHz,CD₃OD)δ＝4.85(d,J＝2.8Hz,1H),3.64(s,1H),3.41(tt,J＝11.1,4.3Hz,1H),2.04(d,J＝3.7Hz,1H),0.95(s,1H),0.94(d,J＝6.6Hz,1H),0.70(s,1H)。

¹³C NMR(151MHz,CD₃OD)δ＝174.99,171.13,71.64,70.96,55.80,50.62,50.39,42.45,41.19,39.54,38.44,37.83,35.27,34.90,34.47,34.13,31.08,30.78,30.41,29.97,27.66,23.19,21.87,20.39,20.06,17.34,10.72。

HRMS:Calcd for C₂₇H₄₄O₅[M+Na]⁺471.3089，Found 471.3076。

S7、制备鹅去氧胆酸；

室温下，将中间体G(20mg，0.044mmol)加入到甲醇(0.5mL)和水(0.1mL)的混合溶液中，加入氢氧化钠(12mg，0.3mmol)，回流搅拌6h，浓缩除去甲醇，加入1mL水稀释，然后用1N盐酸调pH至3-4，析出白色沉淀，过滤，干燥，得白色固体16mg，为鹅去氧胆酸，收率90.9％，纯度98.7％。

鹅去氧胆酸的结构表征数据如下：

¹H NMR(600MHz,CD₃OD)δ＝3.79(d,J＝2.4Hz,1H),3.41–3.32(m,1H),0.96(d,J＝6.5Hz,1H),0.92(d,J＝10.1Hz,1H),0.69(s,1H)。

¹³C NMR(151MHz,CD₃OD)δ＝176.80,71.46,67.66,55.93,50.13,42.28,41.78,39.65,39.37,39.07,35.37,35.17,34.83,34.49,32.65,30.95,30.59,29.96,27.84,23.23,22.01,20.39,17.41,10.78。

HRMS:Calcd for C₂₄H₄₀O₄[M+H]⁺393.2927，Found 393.2097。

本实施例还提供一种鹅去氧胆酸，其通过上述制备方法制备得到。总收率为32，纯度为98.7％。

实施例2-实施例10

实施例2-实施例10提供的鹅去氧胆酸的制备方法与实施例1提供的鹅去氧胆酸的制备方法操作基本相似，区别在于采用的原料和各个步骤的具体条件不同。

实施例2：

S1、制备中间体B：醇为异丙醇，反应温度为85℃，反应时间为6小时，催化剂为浓硫酸，3α，7α-二羟基-5α-胆烷酸、异丙醇和浓硫酸的摩尔比为1:5：0.5，提纯是乙酸乙酯的用量为3α，7α-二羟基-5α-胆烷酸的10倍。收率为99％。

表征数据为：¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ＝5.03–4.96(m,1H),4.06–4.03(m,1H),3.82(d,J＝2.4Hz,1H),1.23(s,1H),1.22(s,1H),0.91(t,J＝5.9Hz,1H),0.77(s,1H),0.65(s,1H)。

¹³C NMR(151MHz,CDCl₃)δ＝173.92,68.05,67.37,66.44,55.80,50.64,45.87,42.65,39.52,39.49,36.24,36.16,35.51,35.35,31.98,31.63,31.51,31.00,28.83,28.09,23.57,21.88,20.55,18.27,11.86,10.15。

HRMS:Calcd for C₂₇H₄₆O₄[M+Na]⁺434.3396，Found 434.3300。

S2、制备中间体C：反应时间为36小时，第一氧化剂为过氧苯甲酸，第一有机溶剂为四氢呋喃，中间体B与所述第一氧化剂的摩尔比为1：0.5，中间体B和硅藻土的摩尔比为1﹕5。

S3、制备中间体D：反应时间为15h，pH为6.2-6.5，调节pH的颜色的浓度为1M,中间体C、所述4-二甲氨基吡啶、所述三乙胺、所述乙酸酐的摩尔比为1﹕0.1﹕1.5﹕2。

S4、制备中间体E：反应温度90℃，反应时间为48h，中间体D和2-碘酰基苯甲酸的摩尔比为1:2，中间体D和三氟乙酸的摩尔比为1：0.5且中间体D和第三有机溶剂的质量比为1﹕10。提纯时乙酸乙酯和石油醚的体积比为1﹕20。

S5、制备中间体F；反应温度60℃，反应时间为0.5h，反应压力0.8MPa，中间体E与5％的钯碳和三乙胺的摩尔比为1:2：0.001；中间体E与甲醇的质量比为1:10。

S6、制备中间体G；加入硼氢化钠的温度为10℃，展开剂为体积比为1﹕5的乙酸乙酯和石油醚，中间体F与硼氢化钠的摩尔比为1:10，中间体F与无水甲醇的质量比为1﹕30。

S7、制备鹅去氧胆酸：调节pH为3，反应温度为80℃，反应时间为4h，中间体G、甲醇和水的质量比为1﹕10﹕5。中间体G与氢氧化钾的摩尔比为1:2，加入的盐酸的浓度为3M。

总产率为30％，纯度为97％。

实施例3

S1、制备中间体B：醇为乙醇，反应温度为50℃，反应时间为3小时，催化剂为浓盐酸，3α，7α-二羟基-5α-胆烷酸、乙醇和浓盐酸的摩尔比为1:15：1，提纯是乙酸乙酯的用量为3α，7α-二羟基-5α-胆烷酸的20倍。

S2、制备中间体C：反应时间为15小时，第一氧化剂为三氧化铬，第一有机溶剂为二氯甲烷，中间体B与所述第一氧化剂的摩尔比为1：1.5，中间体B和硅藻土的摩尔比为1﹕9。

S3、制备中间体D：反应时间为14h，pH为6.2-6.6，调节pH的颜色的浓度为3M,中间体C、所述4-二甲氨基吡啶、所述三乙胺、所述乙酸酐的摩尔比为1﹕0.4﹕2.5﹕2.5。

S4、制备中间体E：反应温度75℃，反应时间为34h，中间体D和2-碘酰基苯甲酸的摩尔比为1:4.5，中间体D和三氟乙酸的摩尔比为1：0.4且中间体D和第三有机溶剂的质量比为1﹕13。提纯时乙酸乙酯和石油醚的体积比为1﹕12。

S5、制备中间体F；反应温度40℃，反应时间为2h，反应压力0.9MPa，中间体E与5％的钯碳和三乙胺的摩尔比为1:5：0.005；中间体E与甲醇的质量比为1:15。

S6、制备中间体G；加入硼氢化钠的温度为7℃，展开剂为体积比为1﹕3的乙酸乙酯和石油醚，中间体F与硼氢化钠的摩尔比为1:9，中间体F与无水甲醇的质量比为1﹕35。

S7、制备鹅去氧胆酸：调节pH为3.5，反应温度为75℃，反应时间为6h，中间体G、甲醇和水的质量比为1﹕18﹕6。中间体G与氢氧化钾的摩尔比为1:5，加入的盐酸的浓度为1.5M。

总产率为28％，纯度为98％。

实施例4

S1、制备中间体B：醇为丙烯醇，反应温度为90℃，反应时间为4小时，催化剂为甲磺酸，3α，7α-二羟基-5α-胆烷酸、丙烯醇和甲磺酸的摩尔比为1:10：0.7，提纯是乙酸乙酯的用量为3α，7α-二羟基-5α-胆烷酸的15倍。

S2、制备中间体C：反应时间为30小时，第一氧化剂为N-溴代丁二酰亚胺，第一有机溶剂为乙腈，中间体B与所述第一氧化剂的摩尔比为1：0.8，中间体B和硅藻土的摩尔比为1﹕12。

S3、制备中间体D：反应时间为13h，pH为6.1-6.8，调节pH的颜色的浓度为2M,中间体C、所述4-二甲氨基吡啶、所述三乙胺、所述乙酸酐的摩尔比为1﹕0.2﹕2﹕3。

S4、制备中间体E：反应温度50℃，反应时间为36h，中间体D和2-碘酰基苯甲酸的摩尔比为1:3，中间体D和三氟乙酸的摩尔比为1：0.2且中间体D和第三有机溶剂的质量比为1﹕11。提纯时乙酸乙酯和石油醚的体积比为1﹕15。

S5、制备中间体F；反应温度20℃，反应时间为4h，反应压力1.2MPa，中间体E与5％的钯碳和三乙胺的摩尔比为1:10：0.01；中间体E与甲醇的质量比为1:20。

S6、制备中间体G；加入硼氢化钠的温度为2℃，展开剂为体积比为1﹕6的乙酸乙酯和石油醚，中间体F与硼氢化钠的摩尔比为1:5，中间体F与无水甲醇的质量比为1﹕40。

S7、制备鹅去氧胆酸：调节pH为3.2，反应温度为70℃，反应时间为5h，中间体G、甲醇和水的质量比为1﹕15﹕8。中间体G与氢氧化钾的摩尔比为1:4，加入的盐酸的浓度为2M。

总产率为28％，纯度为99％。

实施例5

S1、制备中间体B：醇为苄醇，反应温度为70℃，反应时间为5小时，催化剂为苯磺酸，3α，7α-二羟基-5α-胆烷酸、苄醇和苯磺酸的摩尔比为1:7：0.55，提纯是乙酸乙酯的用量为3α，7α-二羟基-5α-胆烷酸的17倍。

S2、制备中间体C：反应时间为2小时，第一氧化剂为二氧化锰，第一有机溶剂为氯仿，中间体B与所述第一氧化剂的摩尔比为1：3，中间体B和硅藻土的摩尔比为1﹕15。

S3、制备中间体D：反应时间为10h，pH为6.7-6.9，调节pH的颜色的浓度为1.5M,中间体C、所述4-二甲氨基吡啶、所述三乙胺、所述乙酸酐的摩尔比为1﹕0.5﹕3﹕3.5。

S4、制备中间体E：反应温度20℃，反应时间为12h，中间体D和2-碘酰基苯甲酸的摩尔比为1:5，中间体D和三氟乙酸的摩尔比为1：0.1且中间体D和第三有机溶剂的质量比为1﹕15。提纯时乙酸乙酯和石油醚的体积比为1﹕10。

S5、制备中间体F；反应温度50℃，反应时间为3h，反应压力1.1MPa，中间体E与5％的钯碳和三乙胺的摩尔比为1:7：0.008；中间体E与甲醇的质量比为1:17。

S6、制备中间体G；加入硼氢化钠的温度为0℃，展开剂为体积比为1﹕2的乙酸乙酯和石油醚，中间体F与硼氢化钠的摩尔比为1:2，中间体F与无水甲醇的质量比为1﹕50。

S7、制备鹅去氧胆酸：调节pH为4，反应温度为60℃，反应时间为8h，中间体G、甲醇和水的质量比为1﹕20﹕10。中间体G与氢氧化钾的摩尔比为1:6，加入的盐酸的浓度为1M。

总产率为26％，纯度为98％。

实施例6

本实施例与实施例1的制备方法的区别在于中间体C的制备：将中间体B(0.5g，1.23mmol)溶于二氯甲烷(10mL)中，加入活化好的二氧化锰(1.6g，12.3mmol)，室温下反应，薄层色谱法TLC(V_乙酸乙酯﹕V_石油醚＝1﹕1)监控，到原料不再减少停止反应，抽滤，浓缩得粗品，粗品经柱层析分离，洗脱液为体积比为1﹕1的乙酸乙酯和石油醚，得白色固体0.3g，为中间体C，收率60％。总产率为24％，纯度为98％。

实施例7

本实施例与实施例1的制备方法的区别在于，制备中间体D时，乙酸酐的用量为0.98mmol。总产率为30％，纯度为99％。

实施例8

本实施例与实施例1的制备方法的区别在于，制备中间体D时，乙酸酐的用量为1.72mmol。总产率为31％，纯度为98％。

实施例9

本实施例与实施例1的制备方法的区别在于，制备中间体E时，2-碘酰基苯甲酸的用量为4.48mmol。总产率为28％，纯度为98％。

实施例10

本实施例与实施例1的制备方法的区别在于，制备中间体G时，硼氢化钠的用量为0.148mmol。总产率为29％，纯度为98％。

实施例11

本实施例与实施例1的制备方法的区别在于，制备中间体G时，硼氢化钠的用量为0.74mmol。总产率为31％，纯度为98％。

综上所述，本发明的通过采用鸭胆、鹅胆等经过提取后被丢弃的副产物作为反应原料，能够做到废物利用，降低合成成本，且原料来源广泛，供应充足。并且，经过上述步骤得到的鹅去氧胆酸的产率高，可达32％，适合大量制备。且该制备方法操作简单，重复性强，具有极强的实用性。

以上所述仅为本发明的优选实施方式而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (25)

1.一种鹅去氧胆酸的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

利用3α，7α-二羟基-5α-胆烷酸为原料经过系列化学反应后依次形成中间体B、中间体C、中间体D、中间体E、中间体F和中间体G，而后再中间体G形成鹅去氧胆酸；

其中，中间体B、中间体C、中间体D、中间体E、中间体F、中间体G、以及鹅去氧胆酸的结构式依次如下所示：

其中，R1为烷基、烯基或者芳香基团，R2为酰基；

形成中间体C的步骤包括：将所述中间体B与第一氧化剂进行反应，且第一氧化剂为过氧苯甲酸、双氧水、次氯酸钠、碳酸银、二氧化锰、三氧化铬和N-溴代丁二酰亚胺中的任意一种；

形成中间体E的步骤包括：将所述中间体D与第二氧化剂进行脱氢反应，且所述第二氧化剂为2-碘酰基苯甲酸；

形成中间体F的步骤包括：将所述中间体E与催化剂进行催化加氢反应，且所述催化剂为钯碳催化剂；

形成中间体G的步骤包括：将所述中间体F与还原剂进行反应。

2.根据权利要求1所述的鹅去氧胆酸的制备方法，其特征在于，形成中间体B步骤包括：将3α，7α-二羟基-5α-胆烷酸与醇进行的第一次酯化反应。

3.根据权利要求2所述的鹅去氧胆酸的制备方法，其特征在于，第一次酯化反应是在催化剂的作用下，将所述3α，7α-二羟基-5α-胆烷酸与醇在50-90℃的条件下，反应得到中间体B。

4.根据权利要求3所述的鹅去氧胆酸的制备方法，其特征在于，所述3α，7α-二羟基-5α-胆烷酸、所述醇和所述催化剂的摩尔比为1:2-30:0.1-1。

5.根据权利要求4所述的鹅去氧胆酸的制备方法，其特征在于，所述醇为一元醇。

6.根据权利要求5所述的鹅去氧胆酸的制备方法，其特征在于，所述醇为C1-C10一元醇。

7.根据权利要求6所述的鹅去氧胆酸的制备方法，其特征在于，所述醇为甲醇、乙醇、异丙醇、丙烯醇和苄醇。

8.根据权利要求7所述的鹅去氧胆酸的制备方法，其特征在于，所述醇为甲醇或者异丙醇。

9.根据权利要求4所述的鹅去氧胆酸的制备方法，其特征在于，所述催化剂为酸性物质。

10.根据权利要求9所述的鹅去氧胆酸的制备方法，其特征在于，所述酸性物质为浓盐酸、浓硫酸、甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸中的任一种。

11.根据权利要求9所述的鹅去氧胆酸的制备方法，其特征在于，所述酸性物质为浓盐酸或者浓硫酸。

12.根据权利要求1所述的鹅去氧胆酸的制备方法，其特征在于，形成中间体C的步骤包括：将所述中间体B与第一氧化剂反应2-36h。

13.根据权利要求12所述的鹅去氧胆酸的制备方法，其特征在于，所述中间体B与所述第一氧化剂的摩尔比为1:0.5-3。

14.根据权利要求12所述的鹅去氧胆酸的制备方法，其特征在于，所述中间体B与所述第一氧化剂的摩尔比为1:0.8-2。

15.根据权利要求1所述的鹅去氧胆酸的制备方法，其特征在于，所述第一氧化剂为碳酸银、次氯酸钠或者二氧化锰。

16.根据权利要求1所述的鹅去氧胆酸的制备方法，其特征在于，形成中间体D的步骤包括将所述中间体C与4-二甲氨基吡啶、三乙胺、酸酐进行反应1-15h后调节反应液pH至6-7。

17.根据权利要求16所述的鹅去氧胆酸的制备方法，其特征在于，所述中间体C、所述4-二甲氨基吡啶、所述三乙胺、所述酸酐的摩尔比为1﹕0.01-0.5﹕1.5-3﹕0.8-4。

18.根据权利要求1所述的鹅去氧胆酸的制备方法，其特征在于，脱氢反应是将所述中间体D与第二氧化剂在20-90℃条件下反应3-72h。

19.根据权利要求1所述的鹅去氧胆酸的制备方法，其特征在于，所述中间体D和所述第二氧化剂的摩尔比为1:2-5。

20.根据权利要求1所述的鹅去氧胆酸的制备方法，其特征在于，催化加氢还原反应是将所述中间体E与催化剂、三乙胺混合后在20-60℃的条件下进行加氢反应0.5-4h后形成中间体F。

21.根据权利要求20所述的鹅去氧胆酸的制备方法，其特征在于，所述中间体E与所述催化剂和三乙胺的摩尔比为1:0.02-10：0.001-0.5。

22.根据权利要求1所述的鹅去氧胆酸的制备方法，其特征在于，所述催化剂为5％-10％的钯碳。

23.根据权利要求1所述的鹅去氧胆酸的制备方法，其特征在于，所述中间体F与还原剂的摩尔比为1:0.5-10。

24.根据权利要求1所述的鹅去氧胆酸的制备方法，其特征在于，所述还原剂为氢化物。

25.根据权利要求1所述的鹅去氧胆酸的制备方法，其特征在于，所述还原剂为硼氢化钠。

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