CN109694402B - 植物木质素合成相关蛋白及其编码基因和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种植物木质素合成相关蛋白及其编码基因和应用。本发明提供的蛋白质，获自玉米(Zea mays L.)，命名为ZmMZS蛋白，是如下(a)或(b)：(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；(b)将序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物木质素合成相关的由序列1衍生的蛋白质。ZmMZS蛋白的编码基因，命名为ZmMZS基因，也属于本发明的保护范围。过表达ZmMZS基因可以促使植物木质素含量增高，从而抗倒伏性能增强。抑制植物中ZmMZS基因的表达可以促使植物木质素含量降低，可作为生物能源的原材料。本发明在玉米分子育种中具有重要意义。

Description

植物木质素合成相关蛋白及其编码基因和应用

技术领域

本发明涉及一种植物木质素合成相关蛋白及其编码基因和应用。

背景技术

玉米是世界上最重要的食粮之一,现今全世界约有三分之一人口以玉米作为主要食粮。玉米的蛋白质含量高于大米,脂肪含量高于面粉、大米和小米,含热量高于面粉、大米及高粱。在城市及较发达地区,玉米是调剂口味不可缺少的食品。随着玉米加工工业的发展,玉米的食用品质不断改善,新的玉米食品如玉米片、玉米面、玉米渣、特制玉米粉、速食玉米等随之产生,并可进一步制成面条、面包、饼干等。玉米还可加工成为玉米蛋白、玉米油、味精、酱油、白酒等,这些产品在国内外市场上很受欢迎。玉米是饲料之王。据报道,100千克玉米的饲用价值相当于135千克燕麦,120千克高粱或150千克籼米。玉米的副产品秸秆也可制成青贮饲料。世界上大约65-70％的玉米都用作饲料,发达国家高达80％,是畜牧业赖以发展的重要基矗。

木质素是三种苯丙烷单元通过醚键和碳碳键相互连接形成的具有三维网状结构的生物高分子，存在于木质组织中，主要作用是通过形成交织网来硬化细胞壁，为次生壁主要成分。木质素主要位于纤维素纤维之间，起抗压作用。一方面，降低木质素含量后的玉米秸秆更容易转化为生物能源。另一方面，增加木质素含量后的玉米植株，抗倒伏性更强。

发明内容

本发明的目的是提供一种植物木质素合成相关蛋白及其编码基因和应用。

本发明提供的蛋白质，获自玉米(Zea mays L.)，命名为ZmMZS蛋白，是如下(a)或(b)：

(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

(b)将序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物木质素合成相关的由序列1衍生的蛋白质。

为了使(b)中的蛋白质便于纯化和检测，可在由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质的氨基末端或羧基末端连接上如表1所示的标签。

表1标签的序列

上述(b)中的蛋白质可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。上述(b)中的蛋白质的编码基因可通过将序列表中序列2所示的DNA序列中缺失一个或几个氨基酸残基的密码子，和/或进行一个或几个碱基对的错义突变，和/或在其5′端和/或3′端连上表1所示的标签的编码序列得到。

ZmMZS蛋白的编码基因，命名为ZmMZS基因，也属于本发明的保护范围。

ZmMZS基因为如下(1)至(3)中任一所述的DNA分子：

(1)编码区如序列表中序列2所示的DNA分子；

(2)在严格条件下与(1)限定的DNA序列杂交且编码植物木质素合成相关蛋白的DNA分子；

(3)与(1)限定的DNA序列具有90％以上同源性且编码植物木质素合成相关蛋白的DNA分子。

上述严格条件可为用0.1×SSPE(或0.1×SSC)，0.1％SDS的溶液，在DNA或者RNA杂交实验中65℃下杂交并洗膜。

含有ZmMZS基因的重组表达载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌均属于本发明的保护范围。

可用现有的表达载体构建含有ZmMZS基因的重组表达载体。所述表达载体包括双元农杆菌载体和可用于微弹轰击的载体等。使用ZmMZS基因构建重组表达载体时，可在其转录起始核苷酸前加上任何一种增强型、组成型、组织特异型或诱导型启动子，它们可单独使用或与其它的植物启动子结合使用；此外，使用ZmMZS基因构建重组表达载体时，还可使用增强子，包括翻译增强子或转录增强子，这些增强子区域可以是ATG起始密码子或邻接区域起始密码子等，但必需与编码序列的阅读框相同，以保证整个序列的正确翻译。所述翻译控制信号和起始密码子的来源是广泛的，可以是天然的，也可以是合成的。翻译起始区域可以来自转录起始区域或结构基因。为了便于对转基因植物或转基因微生物进行鉴定及筛选，可对所用表达载体进行加工，如加入在植物或微生物中表达可产生颜色变化的酶或发光化合物的基因、具有抗性的抗生素标记物或是抗化学试剂标记基因等。从转基因安全性考虑，可不加任何选择性标记基因，直接以表型筛选转化植物或微生物。

所述重组表达载体具体可为：在pCUB载体的BamHI酶切位点插入序列表的序列2所示的DNA分子得到的重组质粒pCUB-ZmMZS。

本发明还保护ZmMZS蛋白的应用，为如下(d1)至(d8)中的至少一种：

(d1)调控植物的木质素合成；

(d2)调控植物茎秆的木质素合成；

(d3)调控植物的木质素含量；

(d4)调控植物茎秆的木质素含量；

(d5)促进植物的木质素合成；

(d6)促进植物茎秆的木质素合成；

(d7)促进植物的木质素含量增高；

(d8)促进植物茎秆的木质素含量增高。

以上任一所述植物可为单子叶植物。所述单子叶植物可为禾本科植物，具体可为玉米，例如玉米品种综31。

本发明还保护一种制备转基因植物的方法，包括如下步骤：在出发植物中导入ZmMZS基因，得到转基因植物；与所述出发植物相比，所述转基因植物具有如下(f1)或(f2)的表型：(f1)木质素含量增高；(f2)茎秆木质素含量增高。所述ZmMZS基因具体可通过以上任一所述重组表达载体导入所述目的植物。携带有ZmMZS基因的重组表达载体可通过Ti质粒、Ri质粒、植物病毒载体、直接DNA转化、显微注射、电导、农杆菌介导等常规生物学方法转化到出发植物中。

本发明还保护一种制备转基因植物的方法，包括如下步骤：抑制出发植物中ZmMZS基因的表达，得到转基因植物；与所述出发植物相比，所述转基因植物具有如下(g1)至(g8)中的至少一种表型：(g1)木质素含量降低；(g2)茎秆木质素含量降低。

以上任一所述出发植物可为单子叶植物。所述单子叶植物可为禾本科植物，具体可为玉米，例如玉米品种综31。

本发明还保护一种植物育种方法，是提高目的植物中ZmMZS蛋白的含量和/或活性，从而提高目的植物的木质素含量或提高目的植物茎秆的木质素含量。

本发明还保护一种植物育种方法，是降低目的植物中ZmMZS蛋白的含量和/或活性，从而降低目的植物的木质素含量或降低目的植物茎秆的木质素含量。

以上任一所述目的植物可为单子叶植物。所述单子叶植物可为禾本科植物，具体可为玉米，例如玉米品种综31。

本发明还保护ZmMZS蛋白、ZmMZS基因、所述重组表达载体或以上任一所述方法，在植物育种中的应用。所述植物可为单子叶植物。所述单子叶植物可为禾本科植物，具体可为玉米，例如玉米品种综31。

通过分子生物学、生物化学以及细胞生物学分析，发明人发现ZmMZS蛋白能够参与调节木质素的聚合作用，使木质素含量发生变化，导致植株机械强度发生改变。过表达ZmMZS基因可以促使植物木质素含量增高，从而抗倒伏性能增强。抑制植物中ZmMZS基因的表达可以促使植物木质素含量降低，可作为生物能源的原材料。

本发明在玉米分子育种中具有重要意义。

附图说明

图1为实施例1中ZmMZS基因的相对表达水平的结果。

图2为实施例1中组织化学染色后的照片。

图3为实施例1中木质素含量测定的结果。

图4为实施例2中组织化学染色后根部的照片。

图5为实施例2中组织化学染色后第一节间的照片。

图6为实施例2中木质素含量测定的结果。

具体实施方式

以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。pCUB载体为序列表的序列3所示的环形质粒。

提及“玉米品种综31”的参考文献：玉米优良自交系综3、综31的转化研究；杨会，王国英，戴景瑞；《农业生物技术学报》，2001年04期。

提及“玉米B73”的参考文献：玉米自交系B73丙酮酸磷酸双激酶基因的克隆及低氮对PPDK表达的影响；龚付全，李平华；《热带生物学报》，2014年4期。

从玉米中发现一个新蛋白，如序列表的序列1所示，将其命名为ZmMZS蛋白。将编码ZmMZS蛋白的基因命名为ZmMZS基因，其cDNA中的开放阅读框如序列表的序列2所示。

实施例1、过表达植株的制备和鉴定

一、构建重组质粒

1、提取玉米B73的总RNA，反转录获得cDNA。

2、以步骤1得到的cDNA为模板，采用F1和R1组成的引物对进行PCR扩增，得到PCR扩增产物。经测序，PCR扩增产物如序列表的序列4所示。

F1：5’-GACTCTAGAGGATCCATGCCCCTTCGACAACGTC-3’；

R1：5’-GGTACCCGGGGATCCTCAGCACTTGGGCATGTTAGG-3’。

3、取pCUB载体，采用限制性内切酶BamHI进行酶切，得到线性化载体。

4、步骤3得到的线性化载体与步骤2得到的PCR扩增产物进行In-fusion同源重组，得到重组质粒pCUB-ZmMZS。经测序，对重组质粒pCUB-ZmMZS进行结构描述如下：在pCUB载体的BamHI酶切位点插入了序列表的序列2所示的DNA分子。

二、制备转基因植物

以玉米品种综31为出发植物。玉米品种综31又称野生型植株，在图中用WT表示。

在出发植物中导入重组质粒pCUB-ZmMZS，得到T₀代转基因植株，将T₀代转基因植株自交获得T₁代植株，T₁代植株自交获得T₂代植株。在T₂代获得纯合的转基因株系，命名为ZmMZS基因过表达株系。随机取两个ZmMZS基因过表达株系(#3株系和#4株系)进行后续试验。

在出发植物中导入pCUB载体，得到T₀代转基因植株，将T₀代转基因植株自交获得T₁代植株，T₁代植株自交获得T₂代植株。在T₂代获得纯合的转基因株系，命名为转空载体株系。

三、实时荧光定量PCR检测

试验植株为：#3株系的T₂代植株、#4株系的T₂代植株、出发植物。

每个株系3株，结果取平均值。

取水培条件下生长7天(从催芽开始计天数)的试验植株的叶片，提取总RNA，采用F2和R2组成的引物对进行PCR扩增，鉴定ZmMZS基因的相对表达水平。采用Ubi基因为内参基因(用于鉴定内参基因的引物对由F3和R3组成)。

F2：5’-GCGTGTTGTTGTTAGCATTTGG-3’；

R2：5’-GGGTGATGTTCTTGTAGCCCTG-3’。

F3：5’-GCTGCCGATGTGCCTGCGTCG-3’；

R3：5’-CTGAAAGACAGAACATAATGAGCACAG-3’。

结果见图1。与野生型植株相比，#3株系植株和#4株系植株中ZmMZS基因的相对表达水平极其显著的升高。

三、组织化学染色

试验植株为：#3株系的T₂代植株、#4株系的T₂代植株、转空载体株系的T₂代植株、出发植物。

取水培条件下生长30天(从催芽开始计天数)的试验植株的第一节间、叶片以及根部成熟区，切片(切片厚度为50μm)，用5％间苯三酚染色2min，然后滴加1滴盐酸，在显微镜下进行观察。

根部的照片见图2A(刻度标尺代表75μm)。

叶片的照片见图2B(刻度标尺代表75μm)。

第一节间的照片见图2C(刻度标尺代表75μm)。

不论在地上部还是根部，与野生型植株相比，#3株系植株和#4株系植株中染色变深(即木质素含量增加)。不论在地上部还是根部，与野生型植株相比，转空载体株系植株的染色强度一致。

四、木质素含量测定

试验植株为：#3株系的T₂代植株、#4株系的T₂代植株、转空载体株系的T₂代植株、出发植物。每个株系3株，结果取平均值。

取成熟期授粉后第7天的试验植株的第三节间，80℃烘干至恒重，然后粉碎并过40目筛，收集粉末。称取约5mg粉末于10ml玻璃试管中，采用苏州科铭木质素含量试剂盒(乙酰溴法，具体步骤见说明书)检测木质素含量。

木质素含量(单位为mg/g，mg为木质素的质量单位，g为粉末干重的质量单位)＝0.0735*(△A-0.0068)/W*T。A：280nm处吸光值；△A＝A测定管-A空白管；W：样本质量，单位为g；T：稀释倍数。

结果见图3。与野生型植株相比，#3株系植株的茎杆木质素含量增高了21.62％，#4株系植株的茎杆木质素含量增高了40.10％。与野生型植株相比，转空载体株系植株的茎杆木质素含量无显著变化。

实施例2、抑制表达植株的制备和鉴定

一、构建重组质粒

将序列表的序列5所示的双链DNA分子插入pCUB载体的BamHI酶切位点，得到重组质粒pCUB-ZmMZS-Ri。序列表的序列5所示的双链DNA分子表达序列表的序列6所示的RNA分子。序列表的序列6所示的RNA为序列表的序列7所示RNA的前体RNA。序列表的序列7所示RNA为miRNA，靶向ZmMZS基因。

二、制备转基因植物

以玉米品种综31为出发植物。玉米品种综31又称野生型植株，在图中用WT表示。

在出发植物中导入重组质粒pCUB-ZmMZS-Ri，得到T₀代转基因植株，将T₀代转基因植株自交获得T₁代植株，T₁代植株自交获得T₂代植株。在T₂代获得纯合的转基因株系，命名为ZmMZS基因抑制表达株系。随机取一个ZmMZS基因抑制表达株系(#5株系)进行后续试验。

在出发植物中导入pCUB载体，得到T₀代转基因植株，将T₀代转基因植株自交获得T₁代植株，T₁代植株自交获得T₂代植株。在T₂代获得纯合的转基因株系，命名为转空载体株系。

三、组织化学染色

试验植株为：#5株系的T₂代植株、转空载体株系的T₂代植株、出发植物。

取水培条件下生长30天(从催芽开始计天数)的试验植株的第一节间以及根部成熟区，切片(切片厚度为50μm)，用5％间苯三酚染色2min，然后滴加1滴盐酸，在显微镜下进行观察。

根部的照片见图4(刻度标尺代表75μm)。

第一节间的照片见图5(刻度标尺代表200μm)。

不论在地上部还是根部，与野生型植株相比，#5株系植株中染色变浅(即木质素含量降低)。不论在地上部还是根部，与野生型植株相比，转空载体株系植株的染色强度一致。

四、木质素含量测定

试验植株为：#5株系的T₂代植株、转空载体株系的T₂代植株、出发植物。

每个株系3株，结果取平均值。

取成熟期授粉后第7天的试验植株的第三节间，80℃烘干至恒重，然后粉碎并过40目筛，收集粉末。称取约5mg粉末于10ml玻璃试管中，采用苏州科铭木质素含量试剂盒(乙酰溴法，具体步骤见说明书)检测木质素含量。

木质素含量(单位为mg/g，mg为木质素的质量单位，g为粉末干重的质量单位)＝0.0735*(△A-0.0068)/W*T。A：280nm处吸光值；△A＝A测定管-A空白管；W：样本质量，单位为g；T：稀释倍数。

结果见图6。与野生型植株相比，#5株系植株的茎杆木质素含量降低了22.93％。与野生型植株相比，转空载体株系植株的茎杆木质素含量无显著变化。

SEQUENCE LISTING

<110> 中国农业科学院作物科学研究所

<120> 植物木质素合成相关蛋白及其编码基因和应用

<130> GNCYX171909

<160> 7

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 590

<212> PRT

<213> Zea mays L.

<400> 1

Met Pro Leu Arg Gln Arg Pro Thr Met Gly Gly Gly Gly Gly Gly Val

1 5 10 15

Ala Lys Met Pro Ala Gly Gln Leu Trp Leu Leu Leu Leu Gly Val Leu

20 25 30

Leu Leu Ala Phe Gly Val Pro Ala Gln Ala Ser Arg Asn Thr His Tyr

35 40 45

Asp Phe Val Ile Thr Glu Thr Lys Val Thr Arg Leu Cys His Glu Lys

50 55 60

Thr Ile Leu Ala Val Asn Gly Gln Phe Pro Gly Pro Thr Ile Tyr Ala

65 70 75 80

Arg Lys Asp Asp Val Val Ile Val Asn Val Tyr Asn Gln Gly Tyr Lys

85 90 95

Asn Ile Thr Leu His Trp His Gly Val Asp Gln Pro Arg Asn Pro Trp

100 105 110

Ser Asp Gly Pro Glu Tyr Ile Thr Gln Cys Pro Ile Gln Pro Gly Ala

115 120 125

Asn Phe Thr Tyr Lys Ile Ile Phe Thr Glu Glu Glu Gly Thr Leu Trp

130 135 140

Trp His Ala His Ser Glu Phe Asp Arg Ala Thr Val His Gly Ala Ile

145 150 155 160

Val Ile His Pro Lys Arg Gly Thr Val Tyr Pro Tyr Pro Lys Pro His

165 170 175

Lys Glu Met Pro Ile Ile Leu Gly Glu Trp Trp Asn Ala Asp Val Glu

180 185 190

Gln Ile Leu Leu Glu Ser Gln Arg Thr Gly Gly Asp Val Asn Ile Ser

195 200 205

Asp Ala Asn Thr Ile Asn Gly Gln Pro Gly Asp Phe Ala Pro Cys Ser

210 215 220

Lys Glu Asp Thr Phe Lys Met Ser Val Glu His Gly Lys Thr Tyr Leu

225 230 235 240

Leu Arg Val Ile Asn Ala Gly Leu Thr Asn Glu Met Phe Phe Ala Val

245 250 255

Ala Gly His Arg Leu Thr Val Val Gly Thr Asp Gly Arg Tyr Leu Arg

260 265 270

Pro Phe Thr Val Asp Tyr Ile Leu Ile Ser Pro Gly Gln Thr Met Asn

275 280 285

Met Leu Leu Glu Ala Asn Cys Ala Thr Asp Gly Ser Ala Asn Ser Arg

290 295 300

Tyr Tyr Met Ala Ala Arg Pro Phe Phe Thr Asn Thr Ala Val Asn Val

305 310 315 320

Asp Asp Lys Asn Thr Thr Ala Ile Leu Glu Tyr Thr Asp Ala Pro Pro

325 330 335

Ser Ala Gly Pro Pro Asp Ser Pro Asp Leu Pro Ala Met Asp Asp Ile

340 345 350

Ala Ala Ala Thr Ala Tyr Thr Ala Gln Leu Arg Ser Leu Val Thr Lys

355 360 365

Glu His Pro Ile Asp Val Pro Met Glu Val Asp Glu His Met Leu Val

370 375 380

Thr Ile Ser Val Asn Thr Ile Pro Cys Glu Pro Asn Lys Thr Cys Ala

385 390 395 400

Gly Pro Gly Asn Asn Arg Leu Ala Ala Ser Leu Asn Asn Val Ser Phe

405 410 415

Met Asn Pro Thr Ile Asp Ile Leu Asp Ala Tyr Tyr Asp Ser Ile Ser

420 425 430

Gly Val Tyr Glu Pro Asp Phe Pro Asn Lys Pro Pro Phe Phe Phe Asn

435 440 445

Phe Thr Ala Pro Asn Pro Pro Gln Asp Leu Trp Phe Thr Lys Arg Gly

450 455 460

Thr Lys Val Lys Val Val Glu Tyr Gly Thr Val Leu Glu Val Val Phe

465 470 475 480

Gln Asp Thr Ala Ile Leu Gly Ala Glu Ser His Pro Met His Leu His

485 490 495

Gly Phe Ser Phe Tyr Val Val Gly Arg Gly Phe Gly Asn Phe Asp Lys

500 505 510

Asp Lys Asp Pro Ala Thr Tyr Asn Leu Val Asp Pro Pro Tyr Gln Asn

515 520 525

Thr Val Ser Val Pro Thr Gly Gly Trp Ala Ala Met Arg Phe Arg Ala

530 535 540

Ala Asn Pro Gly Val Trp Phe Met His Cys His Phe Asp Arg His Thr

545 550 555 560

Val Trp Gly Met Asp Thr Val Phe Ile Val Lys Asn Gly Lys Gly Pro

565 570 575

Asp Ala Gln Met Met Pro Arg Pro Pro Asn Met Pro Lys Cys

580 585 590

<210> 2

<211> 1773

<212> DNA

<213> Zea mays L.

<400> 2

atgccccttc gacaacgtcc gacgatgggc ggcggcggcg gcggtgtagc taagatgccg 60

gcaggccagc tctggttatt actgctaggc gtgttgttgt tagcatttgg agtcccagcc 120

caggcctcca ggaatactca ctacgacttc gttataactg agacgaaggt cacccgacta 180

tgccatgaga agaccatcct ggccgtgaac gggcagttcc cggggccgac catctacgcg 240

cgcaaggacg acgtggtcat cgtcaacgtg tacaaccagg gctacaagaa catcaccctc 300

cactggcacg gcgtggacca gccgcggaac ccgtggtccg atggcccgga gtacatcacg 360

cagtgcccca tccagcccgg cgccaacttc acctacaaga tcatcttcac cgaggaggaa 420

ggcacgctgt ggtggcacgc gcacagcgaa ttcgaccgcg ccaccgtgca cggcgccatc 480

gtcatccacc ccaagcgcgg caccgtctac ccctacccca agccgcacaa ggagatgccc 540

atcatcctcg gcgagtggtg gaacgcggac gtggagcaga tcctcctcga gtcccagcgg 600

accggcggcg acgtcaacat ttcggacgcc aacaccatca acggccagcc cggcgacttc 660

gccccgtgct ccaaggagga caccttcaag atgtccgtgg agcacggcaa gacgtacctg 720

ctccgggtca tcaacgcggg gctcaccaac gagatgttct tcgccgtcgc cgggcaccgc 780

ctcacggtgg tcggcaccga cggccgctac ctcaggccgt tcaccgtcga ctacatcctc 840

atctcccccg gacagaccat gaacatgctc ctcgaggcca actgcgccac cgacggctca 900

gccaacagcc gctactacat ggctgcgagg ccgttcttca ccaacacggc agtcaatgtc 960

gacgacaaaa acaccacggc cattctggag tacacggacg cgccaccctc cgcggggcca 1020

ccggactccc ccgacctgcc ggccatggac gacatcgccg cggcgacggc gtacacggcg 1080

cagctccggt ccctggtcac caaggagcat ccgatcgacg tgccgatgga ggtggacgag 1140

cacatgctcg tgacgatctc cgtcaacacg atcccctgcg agcccaacaa gacgtgcgcc 1200

ggccccggaa acaaccgcct cgccgcgagc ctgaacaacg tcagcttcat gaacccgacc 1260

atcgacatcc tcgacgccta ctacgactcc atcagcggcg tgtacgagcc ggacttcccc 1320

aacaagccgc ccttcttctt caacttcacc gctcccaacc cgccacagga cctctggttc 1380

acgaagcggg gcaccaaggt gaaggtggtg gagtacggca ccgtcctgga ggtggtgttc 1440

caggacacgg ccatcctcgg cgccgagagc caccccatgc acctgcacgg cttcagcttc 1500

tacgtggtgg gccgaggctt cggtaacttc gacaaggaca aggaccccgc cacgtacaac 1560

ctggtcgacc cgccgtacca gaacaccgtc tccgtgccca cgggcggttg ggctgcaatg 1620

cgcttccgag cggcaaatcc tggtgtgtgg tttatgcatt gccactttga tcgtcacacg 1680

gtgtggggca tggacactgt gttcattgtg aaaaatggca agggcccgga cgctcagatg 1740

atgccacgtc cccctaacat gcccaagtgc tga 1773

<210> 3

<211> 12103

<212> DNA

<213> Artificial sequence

<400> 3

ctcattaggc accccaggct ttacacttta tgcttccggc tcgtatgttg tgtggaattg 60

tgagcggata acaatttcac acaggaaaca gctatgacat gattacgaat tcccgatcta 120

gtaacataga tgacaccgcg cgcgataatt tatcctagtt tgcgcgctat attttgtttt 180

ctatcgcgta ttaaatgtat aattgcggga ctctaatcat aaaaacccat ctcataaata 240

acgtcatgca ttacatgtta attattacat gcttaacgta attcaacaga aattatatga 300

taatcatcgc aagaccggca acaggattca atcttaagaa actttattgc caaatgtttg 360

aacgatcggg gaaattcgag ctcggtaccc ggggatcctc tagagtcgac ctgcagaagt 420

aacaccaaac aacagggtga gcatcgacaa aagaaacagt accaagcaaa taaatagcgt 480

atgaaggcag ggctaaaaaa atccacatat agctgctgca tatgccatca tccaagtata 540

tcaagatcaa aataattata aaacatactt gtttattata atagataggt actcaaggtt 600

agagcatatg aatagatgct gcatatgcca tcatgtatat gcatcagtaa aacccacatc 660

aacatgtata cctatcctag atcgatattt ccatccatct taaactcgta actatgaaga 720

tgtatgacac acacatacag ttccaaaatt aataaataca ccaggtagtt tgaaacagta 780

ttctactccg atctagaacg aatgaacgac cgcccaacca caccacatca tcacaaccaa 840

gcgaacaaaa agcatctctg tatatgcatc agtaaaaccc gcatcaacat gtatacctat 900

cctagatcga tatttccatc catcatcttc aattcgtaac tatgaatatg tatggcacac 960

acatacagat ccaaaattaa taaatccacc aggtagtttg aaacagaatt aattctactc 1020

cgatctagaa cgaccgccca accagaccac atcatcacaa ccaagacaaa aaaaagcatg 1080

aaaagatgac ccgacaaaca agtgcacggc atatattgaa ataaaggaaa agggcaaacc 1140

aaaccctatg caacgaaaca aaaaaaatca tgaaatcgat cccgtctgcg gaacggctag 1200

agccatccca ggattcccca aagagaaaca ctggcaagtt agcaatcaga acgtgtctga 1260

cgtacaggtc gcatccgtgt acgaacgcta gcagcacgga tctaacacaa acacggatct 1320

aacacaaaca tgaacagaag tagaactacc gggccctaac catggaccgg aacgccgatc 1380

tagagaaggt agagaggggg ggggggggag gacgagcggc gtaccttgaa gcggaggtgc 1440

cgacgggtgg atttggggga gatctggttg tgtgtgtgtg cgctccgaac aacacgaggt 1500

tggggaaaga gggtgtggag ggggtgtcta tttattacgg cgggcgagga agggaaagcg 1560

aaggagcggt gggaaaggaa tcccccgtag ctgccggtgc cgtgagagga ggaggaggcc 1620

gcctgccgtg ccggctcacg tctgccgctc cgccacgcaa tttctggatg ccgacagcgg 1680

agcaagtcca acggtggagc ggaactctcg agaggggtcc agaggcagcg acagagatgc 1740

cgtgccgtct gcttcgcttg gcccgacgcg acgctgctgg ttcgctggtt ggtgtccgtt 1800

agactcgtcg acggcgttta acaggctggc attatctact cgaaacaaga aaaatgtttc 1860

cttagttttt ttaatttctt aaagggtatt tgtttaattt ttagtcactt tattttattc 1920

tattttatat ctaaattatt aaataaaaaa actaaaatag agttttagtt ttcttaattt 1980

agaggctaaa atagaataaa atagatgtac taaaaaaatt agtctataaa aaccattaac 2040

cctaaaccct aaatggatgt actaataaaa tggatgaagt attatatagg tgaagctatt 2100

tgcaaaaaaa aaggagaaca catgcacact aaaaagataa aactgtagag tcctgttgtc 2160

aaaatactca attgtccttt agaccatgtc taactgttca tttatatgat tctctaaaac 2220

actgatatta ttgtagtact atagattata ttattcgtag agtaaagttt aaatatatgt 2280

ataaagatag ataaactgca cttcaaacaa gtgtgacaaa aaaaatatgt ggtaattttt 2340

tataacttag acatgcaatg ctcattatct ctagagaggg cacgaccggg tcacgctgca 2400

ctgcaggcat gcaagcttgg cactggccgt cgttttacaa cgtcgtgact gggaaaaccc 2460

tggcgttacc caacttaatc gccttgcagc acatccccct ttcgccagct ggcgtaatag 2520

cgaagaggcc cgcaccgatc gcccttccca acagttgcgc agcctgaatg gcgaatgcta 2580

gagcagcttg agcttggatc agattgtcgt ttcccgcctt cagtttaaac tatcagtgtt 2640

tgacaggata tattggcggg taaacctaag agaaaagagc gtttattaga ataatcggat 2700

atttaaaagg gcgtgaaaag gtttatccgt tcgtccattt gtatgtgcat gccaaccaca 2760

gggttcccct cgggatcaaa gtactttgat ccaacccctc cgctgctata gtgcagtcgg 2820

cttctgacgt tcagtgcagc cgtcttctga aaacgacatg tcgcacaagt cctaagttac 2880

gcgacaggct gccgccctgc ccttttcctg gcgttttctt gtcgcgtgtt ttagtcgcat 2940

aaagtagaat acttgcgact agaaccggag acattacgcc atgaacaaga gcgccgccgc 3000

tggcctggtg ggctatgccc gcgtcagcac cgacgaccag gacttgacca accaacgggc 3060

cgaactgcac gcggcctatg aggtaaagag aaaatgagca aaagccaaac acgctaagtg 3120

ccggccgtcc gagcgcacgc agcagcaagg ctgcaacgtt ggccagcctg gcagacacgc 3180

cagccatgaa gcgggtcaac tttcagttgc cggagctggc caggatgctt gaccacctac 3240

gccctggcga cgttgtgaca gtgaccaggc tagaccgcct ggcccgcagc acccgcgacc 3300

tactggacat tgccgagcgc atccaggagg ccggcgcggg cctgcgtagc ctggcagagc 3360

cgtgggccga caccaccacg ccggccggcc gcatggtgtt gaccgtgttc gccggcattg 3420

ccgagttcga gcgttcccta atcatcgacc gcacccggag cgggcgcgag gccgccaagg 3480

cccgaggcgt gaagtttggc ccccgcccta ccctcacccc ggcacagatc gcgcacgccc 3540

gcgagctgat cgaccaggaa ggccgcaccg tgaaagaggc ggctgcactg cttggcgtgc 3600

atcgctcgac cctgtaccgc gcacttgagc gcagcgagga agtgacgccc accgaggcca 3660

ggcggcgcgg tgccttccgt gaggacgcat tgaccgaggc cgacgccctg gcggccgccg 3720

agaatgaacg ccaagaggaa caagcatgaa accgcaccag gacggccagg acgaaccgtt 3780

tttcattacc gaagagatcg aggcggagat gatcgcggcc gggtacgtgt tcgagccgcc 3840

cgcgcacgtc tcaaccgtgc ggctgcatga aatcctggcc ggtttgtctg atgccaagct 3900

ggcggcctgg ccggccagct tggccgctga agaaaccgag cgccgccgtc taaaaaggtg 3960

atgtgtattt gagtaaaaca gcttgcgtca tgcggtcgct gcgtatatga tgcgatgagt 4020

aaataaacaa atacgcaagg ggaacgcatg aaggttatcg ctgtacttaa ccagaaaggc 4080

gggtcaggca agacgaccat cgcaacccat ctagcccgcg ccctgcaact cgccggggcc 4140

gatgttctgt tagtcgattc cgatccccag ggcagtgccc gcgattgggc ggccgtgcgg 4200

gaagatcaac cgctaaccgt tgtcggcatc gaccgcccga cgattgaccg cgacgtgaag 4260

gccatcggcc ggcgcgactt cgtagtgatc gacggagcgc cccaggcggc ggacttggct 4320

gtgtccgcga tcaaggcagc cgacttcgtg ctgattccgg tgcagccaag cccttacgac 4380

atatgggcca ccgccgacct ggtggagctg gttaagcagc gcattgaggt cacggatgga 4440

aggctacaag cggcctttgt cgtgtcgcgg gcgatcaaag gcacgcgcat cggcggtgag 4500

gttgccgagg cgctggccgg gtacgagctg cccattcttg agtcccgtat cacgcagcgc 4560

gtgagctacc caggcactgc cgccgccggc acaaccgttc ttgaatcaga acccgagggc 4620

gacgctgccc gcgaggtcca ggcgctggcc gctgaaatta aatcaaaact catttgagtt 4680

aatgaggtaa agagaaaatg agcaaaagca caaacacgct aagtgccggc cgtccgagcg 4740

cacgcagcag caaggctgca acgttggcca gcctggcaga cacgccagcc atgaagcggg 4800

tcaactttca gttgccggcg gaggatcaca ccaagctgaa gatgtacgcg gtacgccaag 4860

gcaagaccat taccgagctg ctatctgaat acatcgcgca gctaccagag taaatgagca 4920

aatgaataaa tgagtagatg aattttagcg gctaaaggag gcggcatgga aaatcaagaa 4980

caaccaggca ccgacgccgt ggaatgcccc atgtgtggag gaacgggcgg ttggccaggc 5040

gtaagcggct gggttgcctg ccggccctgc aatggcactg gaacccccaa gcccgaggaa 5100

tcggcgtgag cggtcgcaaa ccatccggcc cggtacaaat cggcgcggcg ctgggtgatg 5160

acctggtgga gaagttgaag gccgcgcagg ccgcccagcg gcaacgcatc gaggcagaag 5220

cacgccccgg tgaatcgtgg caagcggccg ctgatcgaat ccgcaaagaa tcccggcaac 5280

cgccggcagc cggtgcgccg tcgattagga agccgcccaa gggcgacgag caaccagatt 5340

ttttcgttcc gatgctctat gacgtgggca cccgcgatag tcgcagcatc atggacgtgg 5400

ccgttttccg tctgtcgaag cgtgaccgac gagctggcga ggtgatccgc tacgagcttc 5460

cagacgggca cgtagaggtt tccgcagggc cggccggcat ggccagtgtg tgggattacg 5520

acctggtact gatggcggtt tcccatctaa ccgaatccat gaaccgatac cgggaaggga 5580

agggagacaa gcccggccgc gtgttccgtc cacacgttgc ggacgtactc aagttctgcc 5640

ggcgagccga tggcggaaag cagaaagacg acctggtaga aacctgcatt cggttaaaca 5700

ccacgcacgt tgccatgcag cgtacgaaga aggccaagaa cggccgcctg gtgacggtat 5760

ccgagggtga agccttgatt agccgctaca agatcgtaaa gagcgaaacc gggcggccgg 5820

agtacatcga gatcgagcta gctgattgga tgtaccgcga gatcacagaa ggcaagaacc 5880

cggacgtgct gacggttcac cccgattact ttttgatcga tcccggcatc ggccgttttc 5940

tctaccgcct ggcacgccgc gccgcaggca aggcagaagc cagatggttg ttcaagacga 6000

tctacgaacg cagtggcagc gccggagagt tcaagaagtt ctgtttcacc gtgcgcaagc 6060

tgatcgggtc aaatgacctg ccggagtacg atttgaagga ggaggcgggg caggctggcc 6120

cgatcctagt catgcgctac cgcaacctga tcgagggcga agcatccgcc ggttcctaat 6180

gtacggagca gatgctaggg caaattgccc tagcagggga aaaaggtcga aaaggtctct 6240

ttcctgtgga tagcacgtac attgggaacc caaagccgta cattgggaac cggaacccgt 6300

acattgggaa cccaaagccg tacattggga accggtcaca catgtaagtg actgatataa 6360

aagagaaaaa aggcgatttt tccgcctaaa actctttaaa acttattaaa actcttaaaa 6420

cccgcctggc ctgtgcataa ctgtctggcc agcgcacagc cgaagagctg caaaaagcgc 6480

ctacccttcg gtcgctgcgc tccctacgcc ccgccgcttc gcgtcggcct atcgcggccg 6540

ctggccgctc aaaaatggct ggcctacggc caggcaatct accagggcgc ggacaagccg 6600

cgccgtcgcc actcgaccgc cggcgcccac atcaaggcac cctgcctcgc gcgtttcggt 6660

gatgacggtg aaaacctctg acacatgcag ctcccggaga cggtcacagc ttgtctgtaa 6720

gcggatgccg ggagcagaca agcccgtcag ggcgcgtcag cgggtgttgg cgggtgtcgg 6780

ggcgcagcca tgacccagtc acgtagcgat agcggagtgt atactggctt aactatgcgg 6840

catcagagca gattgtactg agagtgcacc atatgcggtg tgaaataccg cacagatgcg 6900

taaggagaaa ataccgcatc aggcgctctt ccgcttcctc gctcactgac tcgctgcgct 6960

cggtcgttcg gctgcggcga gcggtatcag ctcactcaaa ggcggtaata cggttatcca 7020

cagaatcagg ggataacgca ggaaagaaca tgtgagcaaa aggccagcaa aaggccagga 7080

accgtaaaaa ggccgcgttg ctggcgtttt tccataggct ccgcccccct gacgagcatc 7140

acaaaaatcg acgctcaagt cagaggtggc gaaacccgac aggactataa agataccagg 7200

cgtttccccc tggaagctcc ctcgtgcgct ctcctgttcc gaccctgccg cttaccggat 7260

acctgtccgc ctttctccct tcgggaagcg tggcgctttc tcatagctca cgctgtaggt 7320

atctcagttc ggtgtaggtc gttcgctcca agctgggctg tgtgcacgaa ccccccgttc 7380

agcccgaccg ctgcgcctta tccggtaact atcgtcttga gtccaacccg gtaagacacg 7440

acttatcgcc actggcagca gccactggta acaggattag cagagcgagg tatgtaggcg 7500

gtgctacaga gttcttgaag tggtggccta actacggcta cactagaagg acagtatttg 7560

gtatctgcgc tctgctgaag ccagttacct tcggaaaaag agttggtagc tcttgatccg 7620

gcaaacaaac caccgctggt agcggtggtt tttttgtttg caagcagcag attacgcgca 7680

gaaaaaaagg atctcaagaa gatcctttga tcttttctac ggggtctgac gctcagtgga 7740

acgaaaactc acgttaaggg ctgatgaatc ccctaatgat tttggtaaaa atcattaagt 7800

taaggtggat acacatcttg tcatatgatc aaatggtttc gcgaaaaatc aataatcaga 7860

caacaagatg tgcgaactcg atattttaca cgactctctt taccaattct gccccgaatt 7920

acacttaaaa cgactcaaca gcttaacgtt ggcttgccac gcattacttg actgtaaaac 7980

tctcactctt accgaacttg gccgtaacct gccaaccaaa gcgagaacaa aacataacat 8040

caaacgaatc gaccgattgt taggtaatcg tcacctccac aaagagcgac tcgctgtata 8100

ccgttggcat gctagcttta tctgttcggg caatacgatg cccattgtac ttgttgactg 8160

gtctgatatt cgtgagcaaa aacgacttat ggtattgcga gcttcagtcg cactacacgg 8220

tcgttctgtt actctttatg agaaagcgtt cccgctttca gagcaatgtt caaagaaagc 8280

tcatgaccaa tttctagccg accttgcgag cattctaccg agtaacacca caccgctcat 8340

tgtcagtgat gctggcttta aagtgccatg gtataaatcc gttgagaagc tgggttggta 8400

ctggttaagt cgagtaagag gaaaagtaca atatgcagac ctaggagcgg aaaactggaa 8460

acctatcagc aacttacatg atatgtcatc tagtcactca aagactttag gctataagag 8520

gctgactaaa agcaatccaa tctcatgcca aattctattg tataaatctc gctctaaagg 8580

ccgaaaaaat cagcgctcga cacggactca ttgtcaccac ccgtcaccta aaatctactc 8640

agcgtcggca aaggagccat gggttctagc aactaactta cctgttgaaa ttcgaacacc 8700

caaacaactt gttaatatct attcgaagcg aatgcagatt gaagaaacct tccgagactt 8760

gaaaagtcct gcctacggac taggcctacg ccatagccga acgagcagct cagagcgttt 8820

tgatatcatg ctgctaatcg ccctgatgct tcaactaaca tgttggcttg cgggcgttca 8880

tgctcagaaa caaggttggg acaagcactt ccaggctaac acagtcagaa atcgaaacgt 8940

actctcaaca gttcgcttag gcatggaagt tttgcggcat tctggctaca caataacaag 9000

ggaagactta ctcgtggctg caaccctact agctcaaaat ttattcacac atggttacgc 9060

tttggggaaa ttatgagggg atctctcagc gttaagggat tttggtcatg cattctaggt 9120

actaaaacaa ttcatccagt aaaatataat attttatttt ctcccaatca ggcttgatcc 9180

ccagtaagtc aaaaaatagc tcgacatact gttcttcccc gatatcctcc ctgatcgacc 9240

ggacgcagaa ggcaatgtca taccacttgt ccgccctgcc gcttctccca agatcaataa 9300

agccacttac tttgccatct ttcacaaaga tgttgctgtc tcccaggtcg ccgtgggaaa 9360

agacaagttc ctcttcgggc ttttccgtct ttaaaaaatc atacagctcg cgcggatctt 9420

taaatggagt gtcttcttcc cagttttcgc aatccacatc ggccagatcg ttattcagta 9480

agtaatccaa ttcggctaag cggctgtcta agctattcgt atagggacaa tccgatatgt 9540

cgatggagtg aaagagcctg atgcactccg catacagctc gataatcttt tcagggcttt 9600

gttcatcttc atactcttcc gagcaaagga cgccatcggc ctcactcatg agcagattgc 9660

tccagccatc atgccgttca aagtgcagga cctttggaac aggcagcttt ccttccagcc 9720

atagcatcat gtccttttcc cgttccacat cataggtggt ccctttatac cggctgtccg 9780

tcatttttaa atataggttt tcattttctc ccaccagctt atatacctta gcaggagaca 9840

ttccttccgt atcttttacg cagcggtatt tttcgatcag ttttttcaat tccggtgata 9900

ttctcatttt agccatttat tatttccttc ctcttttcta cagtatttaa agatacccca 9960

agaagctaat tataacaaga cgaactccaa ttcactgttc cttgcattct aaaaccttaa 10020

ataccagaaa acagcttttt caaagttgtt ttcaaagttg gcgtataaca tagtatcgac 10080

ggagccgatt ttgaaaccgc ggtgatcaca ggcagcaacg ctctgtcatc gttacaatca 10140

acatgctacc ctccgcgaga tcatccgtgt ttcaaacccg gcagcttagt tgccgttctt 10200

ccgaatagca tcggtaacat gagcaaagtc tgccgcctta caacggctct cccgctgacg 10260

ccgtcccgga ctgatgggct gcctgtatcg agtggtgatt ttgtgccgag ctgccggtcg 10320

gggagctgtt ggctggctgg tggcaggata tattgtggtg taaacaaatt gacgcttaga 10380

caacttaata acacattgcg gacgttttta atgtactgaa ttaacgccga attaattcgg 10440

gggatctgga ttttagtact ggattttggt tttaggaatt agaaatttta ttgatagaag 10500

tattttacaa atacaaatac atactaaggg tttcttatat gctcaacaca tgagcgaaac 10560

cctataggaa ccctaattcc cttatctggg aactactcac acattattat ggagaaactc 10620

gagtcaaatc tcggtgacgg gcaggaccgg acggggcggt accggcaggc tgaagtccag 10680

ctgccagaaa cccacgtcat gccagttccc gtgcttgaag ccggccgccc gcagcatgcc 10740

gcggggggca tatccgagcg cctcgtgcat gcgcacgctc gggtcgttgg gcagcccgat 10800

gacagcgacc acgctcttga agccctgtgc ctccagggac ttcagcaggt gggtgtagag 10860

cgtggagccc agtcccgtcc gctggtggcg gggggagacg tacacggtcg actcggccgt 10920

ccagtcgtag gcgttgcgtg ccttccaggg gcccgcgtag gcgatgccgg cgacctcgcc 10980

gtccacctcg gcgacgagcc agggatagcg ctcccgcaga cggacgaggt cgtccgtcca 11040

ctcctgcggt tcctgcggct cggtacggaa gttgaccgtg cttgtctcga tgtagtggtt 11100

gacgatggtg cagaccgccg gcatgtccgc ctcggtggca cggcggatgt cggccgggcg 11160

tcgttctggg ctcatggtag actcgagaga gatagatttg tagagagaga ctggtgattt 11220

cagcgtgtcc tctccaaatg aaatgaactt ccttatatag aggaagggtc ttgcgaagga 11280

tagtgggatt gtgcgtcatc ccttacgtca gtggagatat cacatcaatc cacttgcttt 11340

gaagacgtgg ttggaacgtc ttctttttcc acgatgctcc tcgtgggtgg gggtccatct 11400

ttgggaccac tgtcggcaga ggcatcttga acgatagcct ttcctttatc gcaatgatgg 11460

catttgtagg tgccaccttc cttttctact gtccttttga tgaagtgaca gatagctggg 11520

caatggaatc cgaggaggtt tcccgatatt accctttgtt gaaaagtctc aatagccctt 11580

tggtcttctg agactgtatc tttgatattc ttggagtaga cgagagtgtc gtgctccacc 11640

atgttcacat caatccactt gctttgaaga cgtggttgga acgtcttctt tttccacgat 11700

gctcctcgtg ggtgggggtc catctttggg accactgtcg gcagaggcat cttgaacgat 11760

agcctttcct ttatcgcaat gatggcattt gtaggtgcca ccttcctttt ctactgtcct 11820

tttgatgaag tgacagatag ctgggcaatg gaatccgagg aggtttcccg atattaccct 11880

ttgttgaaaa gtctcaatag ccctttggtc ttctgagact gtatctttga tattcttgga 11940

gtagacgaga gtgtcgtgct ccaccatgtt ggcaagctgc tctagccaat acgcaaaccg 12000

cctctccccg cgcgttggcc gattcattaa tgcagctggc acgacaggtt tcccgactgg 12060

aaagcgggca gtgagcgcaa cgcaattaat gtgagttagc tca 12103

<210> 4

<211> 1803

<212> DNA

<213> Artificial sequence

<400> 4

gactctagag gatccatgcc ccttcgacaa cgtccgacga tgggcggcgg cggcggcggt 60

gtagctaaga tgccggcagg ccagctctgg ttattactgc taggcgtgtt gttgttagca 120

tttggagtcc cagcccaggc ctccaggaat actcactacg acttcgttat aactgagacg 180

aaggtcaccc gactatgcca tgagaagacc atcctggccg tgaacgggca gttcccgggg 240

ccgaccatct acgcgcgcaa ggacgacgtg gtcatcgtca acgtgtacaa ccagggctac 300

aagaacatca ccctccactg gcacggcgtg gaccagccgc ggaacccgtg gtccgatggc 360

ccggagtaca tcacgcagtg ccccatccag cccggcgcca acttcaccta caagatcatc 420

ttcaccgagg aggaaggcac gctgtggtgg cacgcgcaca gcgaattcga ccgcgccacc 480

gtgcacggcg ccatcgtcat ccaccccaag cgcggcaccg tctaccccta ccccaagccg 540

cacaaggaga tgcccatcat cctcggcgag tggtggaacg cggacgtgga gcagatcctc 600

ctcgagtccc agcggaccgg cggcgacgtc aacatttcgg acgccaacac catcaacggc 660

cagcccggcg acttcgcccc gtgctccaag gaggacacct tcaagatgtc cgtggagcac 720

ggcaagacgt acctgctccg ggtcatcaac gcggggctca ccaacgagat gttcttcgcc 780

gtcgccgggc accgcctcac ggtggtcggc accgacggcc gctacctcag gccgttcacc 840

gtcgactaca tcctcatctc ccccggacag accatgaaca tgctcctcga ggccaactgc 900

gccaccgacg gctcagccaa cagccgctac tacatggctg cgaggccgtt cttcaccaac 960

acggcagtca atgtcgacga caaaaacacc acggccattc tggagtacac ggacgcgcca 1020

ccctccgcgg ggccaccgga ctcccccgac ctgccggcca tggacgacat cgccgcggcg 1080

acggcgtaca cggcgcagct ccggtccctg gtcaccaagg agcatccgat cgacgtgccg 1140

atggaggtgg acgagcacat gctcgtgacg atctccgtca acacgatccc ctgcgagccc 1200

aacaagacgt gcgccggccc cggaaacaac cgcctcgccg cgagcctgaa caacgtcagc 1260

ttcatgaacc cgaccatcga catcctcgac gcctactacg actccatcag cggcgtgtac 1320

gagccggact tccccaacaa gccgcccttc ttcttcaact tcaccgctcc caacccgcca 1380

caggacctct ggttcacgaa gcggggcacc aaggtgaagg tggtggagta cggcaccgtc 1440

ctggaggtgg tgttccagga cacggccatc ctcggcgccg agagccaccc catgcacctg 1500

cacggcttca gcttctacgt ggtgggccga ggcttcggta acttcgacaa ggacaaggac 1560

cccgccacgt acaacctggt cgacccgccg taccagaaca ccgtctccgt gcccacgggc 1620

ggttgggctg caatgcgctt ccgagcggca aatcctggtg tgtggtttat gcattgccac 1680

tttgatcgtc acacggtgtg gggcatggac actgtgttca ttgtgaaaaa tggcaagggc 1740

ccggacgctc agatgatgcc acgtccccct aacatgccca agtgctgagg atccccgggt 1800

acc 1803

<210> 5

<211> 78

<212> DNA

<213> Artificial sequence

<400> 5

gtggaagggg catgcagagg agcacgaacg aggtgtggtt ggcccctcgt tagctctcct 60

gtgcctgcct cttccatt 78

<210> 6

<211> 78

<212> RNA

<213> Zea mays L.

<400> 6

guggaagggg caugcagagg agcacgaacg aggugugguu ggccccucgu uagcucuccu 60

gugccugccu cuuccauu 78

<210> 7

<211> 21

<212> RNA

<213> Zea mays L.

<400> 7

uggaaggggc augcagagga g 21

Claims (7)

1.ZmMZS蛋白的应用，为如下（d5）至（d8）中的至少一种：

（d5）促进植物的木质素合成；

（d6）促进植物茎秆的木质素合成；

（d7）促进植物的木质素含量增高；

（d8）促进植物茎秆的木质素含量增高；

ZmMZS蛋白是由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

所述植物为玉米。

2.一种制备转基因植物的方法，包括如下步骤：在出发植物中导入ZmMZS蛋白的编码基因，得到转基因植物；与所述出发植物相比，所述转基因植物具有如下(f1）或(f2）的表型：(f1）木质素含量增高；(f2）茎秆木质素含量增高；ZmMZS蛋白是由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；所述植物为玉米。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于：所述ZmMZS蛋白的编码基因为编码区如序列表中序列2所示的DNA分子。

4.一种制备转基因植物的方法，包括如下步骤：抑制出发植物中ZmMZS蛋白的编码基因的表达，得到转基因植物；与所述出发植物相比，所述转基因植物具有如下(g1）或(g2）的表型：(g1）木质素含量降低；(g2）茎秆木质素含量降低；ZmMZS蛋白是由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；所述植物为玉米。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于：所述ZmMZS蛋白的编码基因为编码区如序列表中序列2所示的DNA分子。

6.一种植物育种方法，是提高目的植物中ZmMZS蛋白的含量，从而提高目的植物的木质素含量或提高目的植物茎秆的木质素含量；ZmMZS蛋白是由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；所述植物为玉米。

7.一种植物育种方法，是降低目的植物中ZmMZS蛋白的含量，从而降低目的植物的木质素含量或降低目的植物茎秆的木质素含量；ZmMZS蛋白是由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；所述植物为玉米。

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