CN110564739B - 杨树PtMYB158基因及其在创制杨树新种质材料中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供了杨树PtMYB158基因及其在创制杨树新种质材料中的应用，属于植物育种技术领域，所述PtMYB158基因如SEQ ID NO.1所示；所述PtMYB158基因能够明显改变杨树植株的形态。PtMYB158转基因杨树主要表现为茎组织柔韧，不易直立生长。进一步的解剖学研究发现，PtMYB158过表达杨树木纤维和导管细胞壁厚度与对照植株相比显著减小。在杨树中过量表达PtMYB158基因，能够创制一种形态明显改变的新的杨树种质材料，为培育杨树新品种奠定基础。

Description

杨树PtMYB158基因及其在创制杨树新种质材料中的应用

技术领域

本发明涉及植物育种技术领域，尤其涉及杨树PtMYB158基因及其在创制杨树新种质材料中的应用。

背景技术

杨树(拉丁语学名：PopμLus L.)是杨属的植物，全属有约100余种，主要分布于北半球温带，包括北美、北非及欧亚大陆。我国是世界杨树集中分布区之一，包含5大派约60种，主要分布在北方、西南及华中。

杨树是我国主要的造林树种，不仅在生态防护中起重要作用，而且在城市绿化、园林景观设计中也有广阔的应用前景。此外，杨树也是一种重要的工业用材，为造纸、家具制造等生产活动提供原材料。创制新的杨树种质材料对培育适应我国现代化建设需求的杨树新品种具有重要作用。

丰富的种质资源是植物育种的物质基础。传统的创制植物新种质的方法主要是通过化学诱变(EMS诱变)和物理诱变(如γ射线)等，这些方法诱发突变的方向难以掌控，而且诱发突变的效率较低，需要通过处理大量的材料，提高获得诱变个体的机会。相对于一年生的草本植物，多年生木本植物具有生长周期长，组织细胞形态结构特殊，通过传统诱变方法获取新的种质材料更是困难。

发明内容

本发明的目的在于提供杨树PtMYB158基因及其在创制杨树新种质材料中的应用。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了杨树PtMYB158基因，所述PtMYB158基因的核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示。

本发明还提供了上述方案所述的PtMYB158基因的编码序列，所述编码序列的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

本发明还提供了上述方案所述的PtMYB158基因编码的蛋白质，所述蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。

本发明还提供了一种包含上述方案所述编码序列的重组载体。

本发明还提供了上述方案所述的PtMYB158基因在杨树育种中的应用。

本发明还提供了上述方案所述的PtMYB158基因在降低杨树茎组织的柔韧度中的应用。

本发明还提供了上述方案所述的PtMYB158基因在降低杨树植株的木纤维和/或导管细胞壁的厚度中的应用。

优选的，所述应用通过PtMYB158基因过量表达实现。

本发明的有益效果：本发明提供了杨树PtMYB158基因，所述PtMYB158基因如SEQID NO.1所示；所述PtMYB158基因能够明显改变杨树植株的形态。PtMYB158转基因杨树主要表现为茎组织柔韧，不易直立生长。进一步的解剖学研究发现，PtMYB158过表达杨树木纤维和导管细胞壁厚度与对照植株相比显著减小。在杨树中过量表达PtMYB158基因，能够创制一种形态明显改变的新的杨树种质材料，为培育杨树新品种奠定基础。

附图说明

图1为重组载体的构建流程图；

图2为实施例1中PtMYB158在杨树不同组织的表达模式；

图3为实施例5中转基因植株PCR检测结果，其中1：DL2000 Marker；2：阴性对照(以野生型毛白杨基因组DNA为模板PCR扩增)；3-22：转基因植株(以PtMYB158转基因毛白杨基因组DNA为模板PCR扩增)；

图4为实施例5中转基因植株RT-qPCR检测结果；

图5为实施例6中对照植株和PtMYB158过表达植株的表型比较；

图6为实施例6中对照植株和PtMYB158过表达植株的株高、茎直径和茎节长度的比较分析，其中图6-A为对照植株和PtMYB158过表达植株的株高的比较分析；图6-B为对照植株和PtMYB158过表达植株的茎直径的比较分析；图6-C为对照植株和PtMYB158过表达植株的茎节长度的比较分析；图6-A、图6-B和图6-C中，对照表示对照植株，转基因植株表示PtMYB158过表达植株；

图7为实施例7中对照植株和PtMYB158过表达植株木纤维和导管细胞壁厚度的比较分析；其中图7-A为对照植株和PtMYB158过表达植株的茎木质部区域的细胞形态；图7-B为对照植株和PtMYB158过表达植株木纤维细胞壁厚度的比较；图7-C为对照植株和PtMYB158过表达植株导管细胞壁厚度的比较。图7-A、图7-B和图7-C中，对照表示对照植株，转基因植株表示PtMYB158过表达植株。

具体实施方式

本发明提供了杨树PtMYB158基因，所述PtMYB158基因的核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示，具体为：ATGGAGGAATCTTTGGCTGGAAATTCGAGTGATGATGCGAAGAGTACTGCTTGCCCTAGAGGTCACTGGAGACCAGCTGAGGACGACAAACTCAGGCAACTTGTTGAGCAATATGGTGCACAAAACTGGAATTCTATTGCAGAGAAGCTCCAAGGAAGATCAGGTAAATTATATGAAATTTTAAAATTATTTTTTGATAAACCGGGTGAATATCATTAAGATAAACACGTTAGAATCAATCTGAAATCTATGCTTAATTTAAAGATAACATATAAGGAAAAATATTGCAAAGATCATTAAACTCAAACAGTAGGCATATCTTAGTTTTATTTTATTTTGTTACATGAAACGGACTTCCAATTTCTAAAAAATTAAGATCGAGATGGATTCTTTGCTTAAGTAACTAACAGATATCAATGATACGTCTCTCTAAACGTGTGTAGGACTTCTGGATCATGCTAGATGTAATTTTACCATTTTCATTTCTTTTCTTTTTCTTTGATAGAGGTAATTTTACCAGCTTATGATTGAATTAATAATGTCTCGTATATATGCGGCCAGCTTGAGAAACTCCCGAAATTCCTATCTCGTGACATGGGAGATAAAATTCTACCAAGCATAACGATGGCTCCCTCTCTCTCTCTACACACACTTGCACACACTTAATTACTTGGTTCCTGAATTTCTCTCTCTTTGTTTTTTTTTTTTTTCCAGGGAAGAGTTGCAGATTGAGGTGGTTTAATCAACTTGATCCTAGAATCAACAGGAGACCTTTCAGTGAACAGGAAGAAGAGAGACTACTAGCAGCTCATCGGATTCATGGAAACAAATGGGCACTAATAGCCAGACTATTTCCAGGTCGAACAGATAATGCTGTGAAAAATCATTGGCATGTCATAATGGCAAGAAAGCAAAGGGAACAGTCCAAGCTATGTGGAAAGAGAAGTTATCAAGATAATCTAAGTGAATCCAATGCCACTAATAGTTCACATGCAGGGAAATCAAGAGCTCAAGATGTGTTCAATTCAAGAATTGGATTTGATGACTCTAGAGTCTTGGAATTTCGAAACCCGGGTAAAGATAGGATATTGTCAATATCTCCTTCTGGTTCTTCACCTTCTTGGAATTTCACCCCATCAACTATAGCAGCTTCAAACAATTCTTCTTCGGTGGACTTATCGAGAAGGGAAGGAAGAGATAATTACTTCAATTCAAGTTTATTTTGCACCACCGAGAGCTCCAAATTAATCTCCGATCAACCTATTTATAGATACTATATGAATTCTTCGGTGTGTGGCAGCTACCGGAGTTCAAGTATATTCGGGATTCCAAACTATAGAAGGGTTGTTCCAAGTCCTTTTGGATCATACCTTAAACTTGGAGATGATTATGAAAACCACGGAATGATCAAGAAAGAGCTGGCAAGTTGCCATAACTCATCGACATTAAAGAATTTAAGAGCGACGAGTAATCATCAAGAGAAAGGAGATCATGAATCTATCAAACCCAAGGATGTTCCTTTCATTGATTTTCTTGGAGTGGGTATATCTTCTTGA。

本发明还提供了上述方案所述的PtMYB158基因的编码序列(PtMYB158基因的cDNA序列)，所述编码序列的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，具体为：ATGGAGGAATCTTTGGCTGGAAATTCGAGTGATGATGCGAAGAGTACTGCTTGCCCTAGAGGTCACTGGAGACCAGCTGAGGACGACAAACTCAGGCAACTTGTTGAGCAATATGGTGCACAAAACTGGAATTCTATTGCAGAGAAGCTCCAAGGAAGATCAGGGAAGAGTTGCAGATTGAGGTGGTTTAATCAACTTGATCCTAGAATCAACAGGAGACCTTTCAGTGAACAGGAAGAAGAGAGACTACTAGCAGCTCATCGGATTCATGGAAACAAATGGGCACTAATAGCCAGACTATTTCCAGGTCGAACAGATAATGCTGTGAAAAATCATTGGCATGTCATAATGGCAAGAAAGCAAAGGGAACAGTCCAAGCTATGTGGAAAGAGAAGTTATCAAGATAATCTAAGTGAATCCAATGCCACTAATAGTTCACATGCAGGGAAATCAAGAGCTCAAGATGTGTTCAATTCAAGAATTGGATTTGATGACTCTAGAGTCTTGGAATTTCGAAACCCGGGTAAAGATAGGATATTGTCAATATCTCCTTCTGGTTCTTCACCTTCTTGGAATTTCACCCCATCAACTATAGCAGCTTCAAACAATTCTTCTTCGGTGGACTTATCGAGAAGGGAAGGAAGAGATAATTACTTCAATTCAAGTTTATTTTGCACCACCGAGAGCTCCAAATTAATCTCCGATCAACCTATTTATAGATACTATATGAATTCTTCGGTGTGTGGCAGCTACCGGAGTTCAAGTATATTCGGGATTCCAAACTATAGAAGGGTTGTTCCAAGTCCTTTTGGATCATACCTTAAACTTGGAGATGATTATGAAAACCACGGAATGATCAAGAAAGAGCTGGCAAGTTGCCATAACTCATCGACATTAAAGAATTTAAGAGCGACGAGTAATCATCAAGAGAAAGGAGATCATGAATCTATCAAACCCAAGGATGTTCCTTTCATTGATTTTCTTGGAGTGGGTATATCTTCTTGA。

本发明还提供了上述方案所述的PtMYB158基因编码的蛋白质，所述蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，具体为：MEESLAGNSSDDAKSTACPRGHWRPAEDDKLRQLVEQYGAQNWNSIAEKLQGRSGKSCRLRWFNQLDPRINRRPFSEQEEERLLAAHRIHGNKWALIARLFPGRTDNAVKNHWHVIMARKQREQSKLCGKRSYQDNLSESNATNSSHAGKSRAQDVFNSRIGFDDSRVLEFRNPGKDRILSISPSGSSPSWNFTPSTIAASNNSSSVDLSRREGRDNYFNSSLFCTTESSKLISDQPIYRYYMNSSVCGSYRSSSIFGIPNYRRVVPSPFGSYLKLGDDYENHGMIKKELASCHNSSTLKNLRATSNHQEKGDHESIKPKDVPFIDFLGVGISS。

本发明还提供了一种包含上述方案所述编码序列的重组载体；所述重组载体优选的以ΔpCAMBIA1302作为原始载体；所述ΔpCAMBIA1302是由传统的植物表达载体pCAMBIA1302改造而来的一个双元植物表达载体，ΔpCAMBIA1302载体的核苷酸序列如SEQID NO.4所示，具体改造过程为：将pCAMBIA1302载体中T-DNA区段含有的组成型的CaMV35S启动子(CaMV35S-P)(538bp)和报告基因GFP替换为组成型的CaMV35S启动子(CaMV35S-P)(835bp)和多克隆位点序列；所述编码序列优选的插入在ΔpCAMBIA1302上的BamHI和SalI位点之间；所述重组载体构建的流程图参见图1；本发明对构建重组载体的方法没有特殊限制，采用本领域常规方法即可。

本发明还提供了上述方案所述的PtMYB158基因在杨树育种中的应用。

本发明还提供了上述方案所述的PtMYB158基因在降低杨树茎组织的柔韧度中的应用。

本发明还提供了上述方案所述的PtMYB158基因在降低杨树植株的木纤维和/或导管细胞壁的厚度中的应用。

本发明上述方案所述应用通过PtMYB158基因过量表达实现，更优选的是通过将所述重组载体的T-DNA区段整合到杨树基因组上实现的；所述杨树优选为毛白杨。

下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。

下述实例中所用到的常规实验操作：

1、DNA提取

基因组DNA采用DNAsecure Plant Kit(天根，北京)，详细步骤见说明书。

2、RNA的提取

RNA提取采用RNAprep Pure PlantKit(天根，北京)，详细步骤见说明书。

3、DNA片段的PCR扩增

扩增体系：10×ExTaq ReactionBuffer：2.0μL

dNTP(2.5mM)：2.0μL

Forward Primer(2.0mM)：2.0μL

Reverse Primer(2.0mM)：2.0μL

模板(基因组DNA或cDNA)：1μL

ExTaqpolymerase(5U/μL)：0.1μL；

补充ddH₂O至20μL。

扩增程序：94℃预变性3min；94℃变性30sec，55～58℃退火30sec，72℃延伸1.5min，35个循环；72℃延伸10min；15℃，30sec。

4、DNA片段的回收、连接和克隆

使用DNA快速回收/纯化试剂盒(北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司)回收DNA片段，详细步骤见说明书。回收的DNA片段连入pEASY-Blunt载体(全式金，北京)，连接体系及反应条件：PCR产物，4μL；pEASY-Blunt载体1μL；室温反应5min。然后将连接产物转化大肠杆菌DH10b。经过抗性筛选，选取单克隆，送美吉生物公司测序。

5、RT-qPCR检测

利用PrimeScriptTM RT reagent Kit(Perfect Real Time)(TakaRa)将RNA反转录为cDNA，反转录体系为：

5×PrimeScript Buffer(forReal Time)：2μL

PrimeScript RT Enzyme Mix I：0.5μL

Oligo dTPrimer(50μM)：0.5μL

Random 6mers(100μM)：0.5μL

Total RNA：400ng

补充Rnase Free ddH2O至10μL。

以cDNA为模板，利用

Premix Ex Taq^TMII(Tli RNaseH Plus)进行RT-qPCR检测，反应体系为：

SYBR Premix Ex Taq II(Tli RNaseH Plus)(2×)：10μL

PCR Forward Primer(10μM)：0.8μL

PCR Reverse Primer(10μM)：0.8μL

cDNA模板(<100ng)：2μL

灭菌水：6.4μL

RT-qPCR检测采用两步法：(1)预变性：95℃，30sec；(2)PCR反应：95℃5sec，60℃30sec，40个循环；(3)溶解曲线分析：95℃5sec，60℃60sec。

实施例1 PtMYB158的表达模式分析

毛白杨生长3个月后，分别提取树皮、根、茎、叶、叶柄和木质部中的总RNA，采用RT-qPCR方法检测PtMYB158的组织表达模式，RT-qPCR引物见表1。RT-qPCR检测结果显示，PtMYB158在毛白杨树皮、根、茎、叶、叶柄和木质部中均有表达，其中在木质部中的表达水平最高(图2)，表明PtMYB158可能在杨树木质部的发育过程中发挥重要作用。

表1 PtMYB158进行RT-qPCR检测的引物信息

实施例2 PtMYB158编码序列的克隆

分别提取毛白杨根、茎和叶组织的总RNA，然后将各组织的总RNA进行等量混合，反转录为cDNA。利用特异性引物5’-TGGACTTCTTTCTGGTGTATTTG-3’，如SEQ ID NO.9所示；5’-GCTACTTAATTTTCATGCCGTCA-3’，如SEQ ID NO.10所示；以上述混合cDNA作为模板，扩增PtMYB158的编码序列。扩增产物通过常规方法进行回收、克隆和测序，最终获得PtMYB158的编码序列。

实施例3 PtMYB158过量表达载体构建

将PtMYB158的编码序列构建入植物双元表达载体ΔpCAMBIA1302流程见图1。ΔpCAMBIA1302是由传统的植物表达载体pCAMBIA1302改造而来的一个双元植物表达载体，其核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。改造过程为：将pCAMBIA1302载体中T-DNA区段含有的组成型的CaMV35S启动子(CaMV35S-P)(538bp)和报告基因GFP替换为组成型的CaMV35S启动子(CaMV35S-P)(835bp)和多克隆位点序列。

利用BamHI和SalI酶切ΔpCAMBIA1302载体。利用BamHI和SalI将PtMYB158的编码序列从克隆载体上切下，将酶切下的片段连入到酶切后的ΔpCAMBIA1302，最终获得过量表达载体PtMYB158OE。所有限制性内切酶购自NEB公司，按照使用说明书操作。DNA片段的回收、连接等操作按前述常规操作方法进行。

实施例4杨树的遗传转化

通过根癌农杆菌介导转化法，获得多个过量表达PtMYB158的杨树候选转基因植株。根癌农杆菌介导转化法中使用的培养基见表2，具体操作如下：

(1)将携带遗传转化载体的农杆菌单菌落接种于含有50mg/L Kan和50mg/L Rif的液体YEB培养基中，置于28℃摇床(200rpm)震荡培养至OD600＝0.8～1.0，离心收集菌体，使用WPM重悬液重悬菌体，28℃震荡培养1～2h(OD600≈0.6)，置于冰上，作为侵染液，用于转化。

(2)剪取4周之内的组培苗幼嫩叶片(从顶端向下1～4片叶)和茎节(从顶端向下1～4节)，将叶片切成0.5×0.5cm²的小块，将茎节切成0.5～1cm长的茎段，置于侵染液中悬浮10～15min。

(3)将侵染后的外植体吸去表面多余菌液，然后平铺于CM1培养基上，25℃避光培养2d。

(4)将外植体转接到CM2培养基中，25℃避光培养3～4周，期间每10-14天更换一次培养基。

(5)待外植体切口处出现白色或淡黄色的愈伤组织时，将外植体转接到CM3培养基中，放置于光下诱导出芽。

(6)待不定芽生长至1～2公分时，将其切下转接到CM4培养基中，一周左右不定根开始出现。

(7)当幼苗长至8～10cm，且根系发达时，将其移栽到温室中培养。

表2根癌农杆菌介导的杨树遗传转化用培养基

WPM:Lloyd&McCownWoodPlantBasalMediumwithVitamins，货号：L449。

实施例5过量表达PtMYB158的杨树转基因植株的检测

对候选植株进行检测，筛选转基因阳性植株。

首先，检测携带有PtMYB158基因的T-DNA区段是否整合到杨树基因组上。提取候选转基因植株的基因组DNA，提取步骤按前述常规操作方法进行。利用引物5’-TGCTCCATACAAGCCAACC-3’，如SEQ ID NO.11所示；5’-TGTCCTGCGGGTAAATAGC-3’，SEQ IDNO.12所示；以候选转基因植株的基因组DNA为模板，PCR扩增潮霉素抗性基因hptII，hptII基因扩增片段(594bp)的核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示，具体为：TGCTCCATACAAGCCAACCACGGCCTCCAGAAGAAGATGTTGGCGACCTCGTATTGGGAATCCCCGAACATCGCCTCGCTCCAGTCAATGACCGCTGTTATGCGGCCATTGTCCGTCAGGACATTGTTGGAGCCGAAATCCGCGTGCACGAGGTGCCGGACTTCGGGGCAGTCCTCGGCCCAAAGCATCAGCTCATCGAGAGCCTGCGCGACGGACGCACTGACGGTGTCGTCCATCACAGTTTGCCAGTGATACACATGGGGATCAGCAATCGCGCATATGAAATCACGCCATGTAGTGTATTGACCGATTCCTTGCGGTCCGAATGGGCCGAACCCGCTCGTCTGGCTAAGATCGGCCGCAGCGATCGCATCCATAGCCTCCGCGACCGGTTGTAGAACAGCGGGCAGTTCGGTTTCAGGCAGGTCTTGCAACGTGACACCCTGTGCACGGCGGGAGATGCAATAGGTCAGGCTCTCGCTAAACTCCCCAATGTCAAGCACTTCCGGAATCGGGAGCGCGGCCGATGCAAAGTGCCGATAAACATAACGATCTTTGTAGAAACCATCGGCGCAGCTATTTACCCGCAGGACA。hptII抗性基因位于T-DNA区段中，可用于检测T-DNA区段是否整合到杨树基因组中。PCR扩增hptII标记基因的结果如图3所示，其中1：DL2000 Marker；2：阴性对照(以野生型毛白杨基因组DNA为模板PCR扩增)；3-22：转基因植株(以PtMYB158转基因毛白杨基因组DNA为模板PCR扩增)，表明携带有PtMYB158基因的T-DNA区段成功整合到杨树基因组上。

然后，检测杨树转基因植株中PtMYB158的转录水平。分别提取对照植株和转基因植株的RNA，反转录合成cDNA一链，以此为模板进行RT-qPCR检测，RT-qPCR的检测引物如表1所示。反转录和RT-qPCR操作步骤按前述常规操作方法进行。RT-qPCR检测结果表明(图4)，与对照植株相比，PtMYB158在转基因植株中的表达量显著提高。

实施例6过量表达PtMYB158改变杨树植株形态

在杨树中过量表达PtMYB158后，杨树不能够直立生长(图5)。比较对照植株和PtMYB158过表达植株的株高、茎直径、茎节长度，发现PtMYB158过表达植株的株高、茎直径、茎节长度显著减小(图6)。

实施例7过量表达PtMYB158导致杨树细胞壁细胞厚度减小

取对照植株和转基因植株的茎组织，制作超薄切片，在透射电子显微镜下观察细胞壁的厚度。具体操作流程如下：

(1)利用双面刀片将对照植株和PtMYB158过表达植株的第9茎节进行横切，然后将切块迅速投入预冷的固定液中，固定液含3％戊二醛和0.1M PB(pH 7.2)，在固定液中将茎块切割成0.5mm以下的薄片。

(2)材料切割完成后，将含有材料的固定液置于真空泵中进行真空处理。真空处理后更换新的固定液，室温条件下继续固定2～4h。

(3)利用0.1M PB(pH 7.2)充分漂洗材料3～4次，约30Min/次。

(4)利用1％锇酸固定材料2h。

(5)利用0.1M PB(pH 7.2)充分漂洗材料3～4次，约30Min/次。

(6)对材料进行乙醇系列脱水：10％乙醇，30min，冰上；30％乙醇，30min，冰上；70％乙醇，30min，冰上；80％乙醇，30min，室温；95％乙醇，30min，室温；100％乙醇，30min，室温。

(7)利用乙醇：丙酮(1:1，vol/vol)置换材料30min，然后利用纯丙酮置换材料2次，每次30min。

(8)丙酮：树脂(3:1，vol/vol)置换材料2～3h；丙酮：树脂(1:1，vol/vol)置换材料2～3h，丙酮；树脂(1:3，vol/vol)置换材料2～3h；纯树脂置换材料8h。

(9)将材料置于新鲜纯树脂中，60℃烘箱中聚合至少24h。树脂样品制备完成后，置于携带有钻石刀的切片机上进行切片。将制备完成的超薄切片置于铜网中在透射电子显微镜下观察细胞壁的厚度，观察及分析结果参见图7，其中图7-A为对照植株和PtMYB158过表达植株的茎木质部区域的细胞形态；图7-B为对照植株和PtMYB158过表达植株木纤维细胞壁厚度的比较；图7-C为对照植株和PtMYB158过表达植株导管细胞壁厚度的比较。A、B和C图中，对照表示对照植株，转基因植株表示PtMYB158过表达植株。结果显示，与对照植株相比，PtMYB158过表达植株导管和纤维细胞壁厚度显著减小。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

序列表

<110> 中国林业科学研究院

<120> 杨树PtMYB158基因及其在创制杨树新种质材料中的应用

<160> 13

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 1556

<212> DNA

<213> 杨树(PopulusL.)

<400> 1

atggaggaat ctttggctgg aaattcgagt gatgatgcga agagtactgc ttgccctaga 60

ggtcactgga gaccagctga ggacgacaaa ctcaggcaac ttgttgagca atatggtgca 120

caaaactgga attctattgc agagaagctc caaggaagat caggtaaatt atatgaaatt 180

ttaaaattat tttttgataa accgggtgaa tatcattaag ataaacacgt tagaatcaat 240

ctgaaatcta tgcttaattt aaagataaca tataaggaaa aatattgcaa agatcattaa 300

actcaaacag taggcatatc ttagttttat tttattttgt tacatgaaac ggacttccaa 360

tttctaaaaa attaagatcg agatggattc tttgcttaag taactaacag atatcaatga 420

tacgtctctc taaacgtgtg taggacttct ggatcatgct agatgtaatt ttaccatttt 480

catttctttt ctttttcttt gatagaggta attttaccag cttatgattg aattaataat 540

gtctcgtata tatgcggcca gcttgagaaa ctcccgaaat tcctatctcg tgacatggga 600

gataaaattc taccaagcat aacgatggct ccctctctct ctctacacac acttgcacac 660

acttaattac ttggttcctg aatttctctc tctttgtttt tttttttttt ccagggaaga 720

gttgcagatt gaggtggttt aatcaacttg atcctagaat caacaggaga cctttcagtg 780

aacaggaaga agagagacta ctagcagctc atcggattca tggaaacaaa tgggcactaa 840

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<210> 2

<211> 1005

<212> DNA

<213> 杨树(PopulusL.)

<400> 2

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ggtcactgga gaccagctga ggacgacaaa ctcaggcaac ttgttgagca atatggtgca 120

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tcaatatctc cttctggttc ttcaccttct tggaatttca ccccatcaac tatagcagct 600

tcaaacaatt cttcttcggt ggacttatcg agaagggaag gaagagataa ttacttcaat 660

tcaagtttat tttgcaccac cgagagctcc aaattaatct ccgatcaacc tatttataga 720

tactatatga attcttcggt gtgtggcagc taccggagtt caagtatatt cgggattcca 780

aactatagaa gggttgttcc aagtcctttt ggatcatacc ttaaacttgg agatgattat 840

gaaaaccacg gaatgatcaa gaaagagctg gcaagttgcc ataactcatc gacattaaag 900

aatttaagag cgacgagtaa tcatcaagag aaaggagatc atgaatctat caaacccaag 960

gatgttcctt tcattgattt tcttggagtg ggtatatctt cttga 1005

<210> 3

<211> 334

<212> PRT

<213> 杨树(PopulusL.)

<400> 3

Met Glu Glu Ser Leu Ala Gly Asn Ser Ser Asp Asp Ala Lys Ser Thr

1 5 10 15

Ala Cys Pro Arg Gly His Trp Arg Pro Ala Glu Asp Asp Lys Leu Arg

20 25 30

Gln Leu Val Glu Gln Tyr Gly Ala Gln Asn Trp Asn Ser Ile Ala Glu

35 40 45

Lys Leu Gln Gly Arg Ser Gly Lys Ser Cys Arg Leu Arg Trp Phe Asn

50 55 60

Gln Leu Asp Pro Arg Ile Asn Arg Arg Pro Phe Ser Glu Gln Glu Glu

65 70 75 80

Glu Arg Leu Leu Ala Ala His Arg Ile His Gly Asn Lys Trp Ala Leu

85 90 95

Ile Ala Arg Leu Phe Pro Gly Arg Thr Asp Asn Ala Val Lys Asn His

100 105 110

Trp His Val Ile Met Ala Arg Lys Gln Arg Glu Gln Ser Lys Leu Cys

115 120 125

Gly Lys Arg Ser Tyr Gln Asp Asn Leu Ser Glu Ser Asn Ala Thr Asn

130 135 140

Ser Ser His Ala Gly Lys Ser Arg Ala Gln Asp Val Phe Asn Ser Arg

145 150 155 160

Ile Gly Phe Asp Asp Ser Arg Val Leu Glu Phe Arg Asn Pro Gly Lys

165 170 175

Asp Arg Ile Leu Ser Ile Ser Pro Ser Gly Ser Ser Pro Ser Trp Asn

180 185 190

Phe Thr Pro Ser Thr Ile Ala Ala Ser Asn Asn Ser Ser Ser Val Asp

195 200 205

Leu Ser Arg Arg Glu Gly Arg Asp Asn Tyr Phe Asn Ser Ser Leu Phe

210 215 220

Cys Thr Thr Glu Ser Ser Lys Leu Ile Ser Asp Gln Pro Ile Tyr Arg

225 230 235 240

Tyr Tyr Met Asn Ser Ser Val Cys Gly Ser Tyr Arg Ser Ser Ser Ile

245 250 255

Phe Gly Ile Pro Asn Tyr Arg Arg Val Val Pro Ser Pro Phe Gly Ser

260 265 270

Tyr Leu Lys Leu Gly Asp Asp Tyr Glu Asn His Gly Met Ile Lys Lys

275 280 285

Glu Leu Ala Ser Cys His Asn Ser Ser Thr Leu Lys Asn Leu Arg Ala

290 295 300

Thr Ser Asn His Gln Glu Lys Gly Asp His Glu Ser Ile Lys Pro Lys

305 310 315 320

Asp Val Pro Phe Ile Asp Phe Leu Gly Val Gly Ile Ser Ser

325 330

<210> 4

<211> 9870

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 4

catgccaacc acagggttcc cctcgggatc aaagtacttt gatccaaccc ctccgctgct 60

atagtgcagt cggcttctga cgttcagtgc agccgtcttc tgaaaacgac atgtcgcaca 120

agtcctaagt tacgcgacag gctgccgccc tgcccttttc ctggcgtttt cttgtcgcgt 180

gttttagtcg cataaagtag aatacttgcg actagaaccg gagacattac gccatgaaca 240

agagcgccgc cgctggcctg ctgggctatg cccgcgtcag caccgacgac caggacttga 300

ccaaccaacg ggccgaactg cacgcggccg gctgcaccaa gctgttttcc gagaagatca 360

ccggcaccag gcgcgaccgc ccggagctgg ccaggatgct tgaccaccta cgccctggcg 420

acgttgtgac agtgaccagg ctagaccgcc tggcccgcag cacccgcgac ctactggaca 480

ttgccgagcg catccaggag gccggcgcgg gcctgcgtag cctggcagag ccgtgggccg 540

acaccaccac gccggccggc cgcatggtgt tgaccgtgtt cgccggcatt gccgagttcg 600

agcgttccct aatcatcgac cgcacccgga gcgggcgcga ggccgccaag gcccgaggcg 660

tgaagtttgg cccccgccct accctcaccc cggcacagat cgcgcacgcc cgcgagctga 720

tcgaccagga aggccgcacc gtgaaagagg cggctgcact gcttggcgtg catcgctcga 780

ccctgtaccg cgcacttgag cgcagcgagg aagtgacgcc caccgaggcc aggcggcgcg 840

gtgccttccg tgaggacgca ttgaccgagg ccgacgccct ggcggccgcc gagaatgaac 900

gccaagagga acaagcatga aaccgcacca ggacggccag gacgaaccgt ttttcattac 960

cgaagagatc gaggcggaga tgatcgcggc cgggtacgtg ttcgagccgc ccgcgcacgt 1020

ctcaaccgtg cggctgcatg aaatcctggc cggtttgtct gatgccaagc tggcggcctg 1080

gccggccagc ttggccgctg aagaaaccga gcgccgccgt ctaaaaaggt gatgtgtatt 1140

tgagtaaaac agcttgcgtc atgcggtcgc tgcgtatatg atgcgatgag taaataaaca 1200

aatacgcaag gggaacgcat gaaggttatc gctgtactta accagaaagg cgggtcaggc 1260

aagacgacca tcgcaaccca tctagcccgc gccctgcaac tcgccggggc cgatgttctg 1320

ttagtcgatt ccgatcccca gggcagtgcc cgcgattggg cggccgtgcg ggaagatcaa 1380

ccgctaaccg ttgtcggcat cgaccgcccg acgattgacc gcgacgtgaa ggccatcggc 1440

cggcgcgact tcgtagtgat cgacggagcg ccccaggcgg cggacttggc tgtgtccgcg 1500

atcaaggcag ccgacttcgt gctgattccg gtgcagccaa gcccttacga catatgggcc 1560

accgccgacc tggtggagct ggttaagcag cgcattgagg tcacggatgg aaggctacaa 1620

gcggcctttg tcgtgtcgcg ggcgatcaaa ggcacgcgca tcggcggtga ggttgccgag 1680

gcgctggccg ggtacgagct gcccattctt gagtcccgta tcacgcagcg cgtgagctac 1740

ccaggcactg ccgccgccgg cacaaccgtt cttgaatcag aacccgaggg cgacgctgcc 1800

cgcgaggtcc aggcgctggc cgctgaaatt aaatcaaaac tcatttgagt taatgaggta 1860

aagagaaaat gagcaaaagc acaaacacgc taagtgccgg ccgtccgagc gcacgcagca 1920

gcaaggctgc aacgttggcc agcctggcag acacgccagc catgaagcgg gtcaactttc 1980

agttgccggc ggaggatcac accaagctga agatgtacgc ggtacgccaa ggcaagacca 2040

ttaccgagct gctatctgaa tacatcgcgc agctaccaga gtaaatgagc aaatgaataa 2100

atgagtagat gaattttagc ggctaaagga ggcggcatgg aaaatcaaga acaaccaggc 2160

accgacgccg tggaatgccc catgtgtgga ggaacgggcg gttggccagg cgtaagcggc 2220

tgggttgtct gccggccctg caatggcact ggaaccccca agcccgagga atcggcgtga 2280

cggtcgcaaa ccatccggcc cggtacaaat cggcgcggcg ctgggtgatg acctggtgga 2340

gaagttgaag gccgcgcagg ccgcccagcg gcaacgcatc gaggcagaag cacgccccgg 2400

tgaatcgtgg caagcggccg ctgatcgaat ccgcaaagaa tcccggcaac cgccggcagc 2460

cggtgcgccg tcgattagga agccgcccaa gggcgacgag caaccagatt ttttcgttcc 2520

gatgctctat gacgtgggca cccgcgatag tcgcagcatc atggacgtgg ccgttttccg 2580

tctgtcgaag cgtgaccgac gagctggcga ggtgatccgc tacgagcttc cagacgggca 2640

cgtagaggtt tccgcagggc cggccggcat ggccagtgtg tgggattacg acctggtact 2700

gatggcggtt tcccatctaa ccgaatccat gaaccgatac cgggaaggga agggagacaa 2760

gcccggccgc gtgttccgtc cacacgttgc ggacgtactc aagttctgcc ggcgagccga 2820

tggcggaaag cagaaagacg acctggtaga aacctgcatt cggttaaaca ccacgcacgt 2880

tgccatgcag cgtacgaaga aggccaagaa cggccgcctg gtgacggtat ccgagggtga 2940

agccttgatt agccgctaca agatcgtaaa gagcgaaacc gggcggccgg agtacatcga 3000

gatcgagcta gctgattgga tgtaccgcga gatcacagaa ggcaagaacc cggacgtgct 3060

gacggttcac cccgattact ttttgatcga tcccggcatc ggccgttttc tctaccgcct 3120

ggcacgccgc gccgcaggca aggcagaagc cagatggttg ttcaagacga tctacgaacg 3180

cagtggcagc gccggagagt tcaagaagtt ctgtttcacc gtgcgcaagc tgatcgggtc 3240

aaatgacctg ccggagtacg atttgaagga ggaggcgggg caggctggcc cgatcctagt 3300

catgcgctac cgcaacctga tcgagggcga agcatccgcc ggttcctaat gtacggagca 3360

gatgctaggg caaattgccc tagcagggga aaaaggtcga aaaggtctct ttcctgtgga 3420

tagcacgtac attgggaacc caaagccgta cattgggaac cggaacccgt acattgggaa 3480

cccaaagccg tacattggga accggtcaca catgtaagtg actgatataa aagagaaaaa 3540

aggcgatttt tccgcctaaa actctttaaa acttattaaa actcttaaaa cccgcctggc 3600

ctgtgcataa ctgtctggcc agcgcacagc cgaagagctg caaaaagcgc ctacccttcg 3660

gtcgctgcgc tccctacgcc ccgccgcttc gcgtcggcct atcgcggccg ctggccgctc 3720

aaaaatggct ggcctacggc caggcaatct accagggcgc ggacaagccg cgccgtcgcc 3780

actcgaccgc cggcgcccac atcaaggcac cctgcctcgc gcgtttcggt gatgacggtg 3840

aaaacctctg acacatgcag ctcccggaga cggtcacagc ttgtctgtaa gcggatgccg 3900

ggagcagaca agcccgtcag ggcgcgtcag cgggtgttgg cgggtgtcgg ggcgcagcca 3960

tgacccagtc acgtagcgat agcggagtgt atactggctt aactatgcgg catcagagca 4020

gattgtactg agagtgcacc atatgcggtg tgaaataccg cacagatgcg taaggagaaa 4080

ataccgcatc aggcgctctt ccgcttcctc gctcactgac tcgctgcgct cggtcgttcg 4140

gctgcggcga gcggtatcag ctcactcaaa ggcggtaata cggttatcca cagaatcagg 4200

ggataacgca ggaaagaaca tgtgagcaaa aggccagcaa aaggccagga accgtaaaaa 4260

ggccgcgttg ctggcgtttt tccataggct ccgcccccct gacgagcatc acaaaaatcg 4320

acgctcaagt cagaggtggc gaaacccgac aggactataa agataccagg cgtttccccc 4380

tggaagctcc ctcgtgcgct ctcctgttcc gaccctgccg cttaccggat acctgtccgc 4440

ctttctccct tcgggaagcg tggcgctttc tcatagctca cgctgtaggt atctcagttc 4500

ggtgtaggtc gttcgctcca agctgggctg tgtgcacgaa ccccccgttc agcccgaccg 4560

ctgcgcctta tccggtaact atcgtcttga gtccaacccg gtaagacacg acttatcgcc 4620

actggcagca gccactggta acaggattag cagagcgagg tatgtaggcg gtgctacaga 4680

gttcttgaag tggtggccta actacggcta cactagaagg acagtatttg gtatctgcgc 4740

tctgctgaag ccagttacct tcggaaaaag agttggtagc tcttgatccg gcaaacaaac 4800

caccgctggt agcggtggtt tttttgtttg caagcagcag attacgcgca gaaaaaaagg 4860

atctcaagaa gatcctttga tcttttctac ggggtctgac gctcagtgga acgaaaactc 4920

acgttaaggg attttggtca tgcattctag gtactaaaac aattcatcca gtaaaatata 4980

atattttatt ttctcccaat caggcttgat ccccagtaag tcaaaaaata gctcgacata 5040

ctgttcttcc ccgatatcct ccctgatcga ccggacgcag aaggcaatgt cataccactt 5100

gtccgccctg ccgcttctcc caagatcaat aaagccactt actttgccat ctttcacaaa 5160

gatgttgctg tctcccaggt cgccgtggga aaagacaagt tcctcttcgg gcttttccgt 5220

ctttaaaaaa tcatacagct cgcgcggatc tttaaatgga gtgtcttctt cccagttttc 5280

gcaatccaca tcggccagat cgttattcag taagtaatcc aattcggcta agcggctgtc 5340

taagctattc gtatagggac aatccgatat gtcgatggag tgaaagagcc tgatgcactc 5400

cgcatacagc tcgataatct tttcagggct ttgttcatct tcatactctt ccgagcaaag 5460

gacgccatcg gcctcactca tgagcagatt gctccagcca tcatgccgtt caaagtgcag 5520

gacctttgga acaggcagct ttccttccag ccatagcatc atgtcctttt cccgttccac 5580

atcataggtg gtccctttat accggctgtc cgtcattttt aaatataggt tttcattttc 5640

tcccaccagc ttatatacct tagcaggaga cattccttcc gtatctttta cgcagcggta 5700

tttttcgatc agttttttca attccggtga tattctcatt ttagccattt attatttcct 5760

tcctcttttc tacagtattt aaagataccc caagaagcta attataacaa gacgaactcc 5820

aattcactgt tccttgcatt ctaaaacctt aaataccaga aaacagcttt ttcaaagttg 5880

ttttcaaagt tggcgtataa catagtatcg acggagccga ttttgaaacc gcggtgatca 5940

caggcagcaa cgctctgtca tcgttacaat caacatgcta ccctccgcga gatcatccgt 6000

gtttcaaacc cggcagctta gttgccgttc ttccgaatag catcggtaac atgagcaaag 6060

tctgccgcct tacaacggct ctcccgctga cgccgtcccg gactgatggg ctgcctgtat 6120

cgagtggtga ttttgtgccg agctgccggt cggggagctg ttggctggct ggtggcagga 6180

tatattgtgg tgtaaacaaa ttgacgctta gacaacttaa taacacattg cggacgtttt 6240

taatgtactg aattaacgcc gaattaattc gggggatctg gattttagta ctggattttg 6300

gttttaggaa ttagaaattt tattgataga agtattttac aaatacaaat acatactaag 6360

ggtttcttat atgctcaaca catgagcgaa accctatagg aaccctaatt cccttatctg 6420

ggaactactc acacattatt atggagaaac tcgagcttgt cgatcgacag atccggtcgg 6480

catctactct atttctttgc cctcggacga gtgctggggc gtcggtttcc actatcggcg 6540

agtacttcta cacagccatc ggtccagacg gccgcgcttc tgcgggcgat ttgtgtacgc 6600

ccgacagtcc cggctccgga tcggacgatt gcgtcgcatc gaccctgcgc ccaagctgca 6660

tcatcgaaat tgccgtcaac caagctctga tagagttggt caagaccaat gcggagcata 6720

tacgcccgga gtcgtggcga tcctgcaagc tccggatgcc tccgctcgaa gtagcgcgtc 6780

tgctgctcca tacaagccaa ccacggcctc cagaagaaga tgttggcgac ctcgtattgg 6840

gaatccccga acatcgcctc gctccagtca atgaccgctg ttatgcggcc attgtccgtc 6900

aggacattgt tggagccgaa atccgcgtgc acgaggtgcc ggacttcggg gcagtcctcg 6960

gcccaaagca tcagctcatc gagagcctgc gcgacggacg cactgacggt gtcgtccatc 7020

acagtttgcc agtgatacac atggggatca gcaatcgcgc atatgaaatc acgccatgta 7080

gtgtattgac cgattccttg cggtccgaat gggccgaacc cgctcgtctg gctaagatcg 7140

gccgcagcga tcgcatccat agcctccgcg accggttgta gaacagcggg cagttcggtt 7200

tcaggcaggt cttgcaacgt gacaccctgt gcacggcggg agatgcaata ggtcaggctc 7260

tcgctaaact ccccaatgtc aagcacttcc ggaatcggga gcgcggccga tgcaaagtgc 7320

cgataaacat aacgatcttt gtagaaacca tcggcgcagc tatttacccg caggacatat 7380

ccacgccctc ctacatcgaa gctgaaagca cgagattctt cgccctccga gagctgcatc 7440

aggtcggaga cgctgtcgaa cttttcgatc agaaacttct cgacagacgt cgcggtgagt 7500

tcaggctttt tcatatctca ttgccccccg ggatctgcga aagctcgaga gagatagatt 7560

tgtagagaga gactggtgat ttcagcgtgt cctctccaaa tgaaatgaac ttccttatat 7620

agaggaaggt cttgcgaagg atagtgggat tgtgcgtcat cccttacgtc agtggagata 7680

tcacatcaat ccacttgctt tgaagacgtg gttggaacgt cttctttttc cacgatgctc 7740

ctcgtgggtg ggggtccatc tttgggacca ctgtcggcag aggcatcttg aacgatagcc 7800

tttcctttat cgcaatgatg gcatttgtag gtgccacctt ccttttctac tgtccttttg 7860

atgaagtgac agatagctgg gcaatggaat ccgaggaggt ttcccgatat taccctttgt 7920

tgaaaagtct caatagccct ttggtcttct gagactgtat ctttgatatt cttggagtag 7980

acgagagtgt cgtgctccac catgttatca catcaatcca cttgctttga agacgtggtt 8040

ggaacgtctt ctttttccac gatgctcctc gtgggtgggg gtccatcttt gggaccactg 8100

tcggcagagg catcttgaac gatagccttt cctttatcgc aatgatggca tttgtaggtg 8160

ccaccttcct tttctactgt ccttttgatg aagtgacaga tagctgggca atggaatccg 8220

aggaggtttc ccgatattac cctttgttga aaagtctcaa tagccctttg gtcttctgag 8280

actgtatctt tgatattctt ggagtagacg agagtgtcgt gctccaccat gttggcaagc 8340

tgctctagcc aatacgcaaa ccgcctctcc ccgcgcgttg gccgattcat taatgcagct 8400

ggcacgacag gtttcccgac tggaaagcgg gcagtgagcg caacgcaatt aatgtgagtt 8460

agctcactca ttaggcaccc caggctttac actttatgct tccggctcgt atgttgtgtg 8520

gaattgtgag cggataacaa tttcacacag gaaacagcta tgaccatgat tacgaattcg 8580

agctcagatt agccttttca atttcagaaa gaatgctaac ccacagatgg ttagagaggc 8640

ttacgcagca ggtctcatca agacgatcta cccgagcaat aatctccagg aaatcaaata 8700

ccttcccaag aaggttaaag atgcagtcaa aagattcagg actaactgca tcaagaacac 8760

agagaaagat atatttctca agatcagaag tactattcca gtatggacga ttcaaggctt 8820

gcttcacaaa ccaaggcaag taatagagat tggagtctct aaaaaggtag ttcccactga 8880

atcaaaggcc atggagtcaa agattcaaat agaggaccta acagaactcg ccgtaaagac 8940

tggcgaacag ttcatacaga gtctcttacg actcaatgac aagaagaaaa tcttcgtcaa 9000

catggtggag cacgacacac ttgtctactc caaaaatatc aaagatacag tctcagaaga 9060

ccaaagggca attgagactt ttcaacaaag ggtaatatcc ggaaacctcc tcggattcca 9120

ttgcccagct atctgtcact ttattgtgaa gatagtggaa aaggaaggtg gctcctacaa 9180

atgccatcat tgcgataaag gaaaggccat cgttgaagat gcctctgccg acagtggtcc 9240

caaagatgga cccccaccca cgaggagcat cgtggaaaaa gaagacgttc caaccacgtc 9300

ttcaaagcaa gtggattgat gtgatatctc cactgacgta agggatgacg cacaatccca 9360

ctatccttcg caagaccctt cctctatata aggaagttca tttcatttgg agagaacacg 9420

ggatccggta ccgtcgacac gcgtctgcag agatctcacg tgtgaattgg tgaccagctc 9480

gaatttcccc gatcgttcaa acatttggca ataaagtttc ttaagattga atcctgttgc 9540

cggtcttgcg atgattatca tataatttct gttgaattac gttaagcatg taataattaa 9600

catgtaatgc atgacgttat ttatgagatg ggtttttatg attagagtcc cgcaattata 9660

catttaatac gcgatagaaa acaaaatata gcgcgcaaac taggataaat tatcgcgcgc 9720

ggtgtcatct atgttactag atcgggaatt aaactatcag tgtttgacag gatatattgg 9780

cgggtaaacc taagagaaaa gagcgtttat tagaataacg gatatttaaa agggcgtgaa 9840

aaggtttatc cgttcgtcca tttgtatgtg 9870

<210> 5

<211> 21

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 5

ctcttaacgg aggctccttt a 21

<210> 6

<211> 22

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 6

ccaacacaat accagttgta cg 22

<210> 7

<211> 22

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 7

gccactaata gttcacatgc ag 22

<210> 8

<211> 22

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 8

cttcccttct cgataagtcc ac 22

<210> 9

<211> 23

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 9

tggacttctt tctggtgtat ttg 23

<210> 10

<211> 23

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 10

gctacttaat tttcatgccg tca 23

<210> 11

<211> 19

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 11

tgctccatac aagccaacc 19

<210> 12

<211> 19

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 12

tgtcctgcgg gtaaatagc 19

<210> 13

<211> 594

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 13

tgctccatac aagccaacca cggcctccag aagaagatgt tggcgacctc gtattgggaa 60

tccccgaaca tcgcctcgct ccagtcaatg accgctgtta tgcggccatt gtccgtcagg 120

acattgttgg agccgaaatc cgcgtgcacg aggtgccgga cttcggggca gtcctcggcc 180

caaagcatca gctcatcgag agcctgcgcg acggacgcac tgacggtgtc gtccatcaca 240

gtttgccagt gatacacatg gggatcagca atcgcgcata tgaaatcacg ccatgtagtg 300

tattgaccga ttccttgcgg tccgaatggg ccgaacccgc tcgtctggct aagatcggcc 360

gcagcgatcg catccatagc ctccgcgacc ggttgtagaa cagcgggcag ttcggtttca 420

ggcaggtctt gcaacgtgac accctgtgca cggcgggaga tgcaataggt caggctctcg 480

ctaaactccc caatgtcaag cacttccgga atcgggagcg cggccgatgc aaagtgccga 540

taaacataac gatctttgta gaaaccatcg gcgcagctat ttacccgcag gaca 594

Claims (2)

1.PtMYB158基因在降低杨树茎组织的柔韧度中的应用，所述PtMYB158基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述应用通过PtMYB158基因过量表达实现。

2.PtMYB158基因在降低杨树植株的木纤维和/或导管细胞壁的厚度中的应用，所述PtMYB158基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述应用通过PtMYB158基因过量表达实现。

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