CN109652336A - 一株贝莱斯芽孢杆菌及其应用 - Google Patents

一株贝莱斯芽孢杆菌及其应用 Download PDF

Info

Publication number
CN109652336A
CN109652336A CN201910060215.5A CN201910060215A CN109652336A CN 109652336 A CN109652336 A CN 109652336A CN 201910060215 A CN201910060215 A CN 201910060215A CN 109652336 A CN109652336 A CN 109652336A
Authority
CN
China
Prior art keywords
culture
bei laisi
laisi bacillus
weight
parts
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201910060215.5A
Other languages
English (en)
Inventor
谭寿湖
张琦敏
梁春吉
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guangxi Jinsui Ecology Technology Co ltd
Original Assignee
Guangxi Jinsui Ecology Technology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guangxi Jinsui Ecology Technology Co ltd filed Critical Guangxi Jinsui Ecology Technology Co ltd
Priority to CN201910060215.5A priority Critical patent/CN109652336A/zh
Publication of CN109652336A publication Critical patent/CN109652336A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/07—Bacillus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/10—Animals; Substances produced thereby or obtained therefrom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
    • C05F—ORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C, e.g. FERTILISERS FROM WASTE OR REFUSE
    • C05F11/00—Other organic fertilisers
    • C05F11/08—Organic fertilisers containing added bacterial cultures, mycelia or the like
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

本发明提供一株贝莱斯芽孢杆菌，所述贝莱斯芽孢杆菌于2018年12月4日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏名称CK3‑15，保藏号CGMCC No.16867；本发明所提供的贝莱斯芽孢杆菌CK3‑15高密度发酵菌液浓度达3×1010个/ml，芽孢生成率达98％以上，并且，本发明所提供的贝莱斯芽孢杆菌CK3‑15制成的微生物肥料对香蕉枯萎病防控效果显著，同时具有促进植物生长的作用。

Description

一株贝莱斯芽孢杆菌及其应用
技术领域
本发明属于生物技术领域。更具体地说，本发明涉及一株贝莱斯芽孢杆菌及其应用。
背景技术
《中国香蕉产业发展报告(2016-2017)》数据显示，1996年中国香蕉种植面积为17.55万公顷，到2015年达到43.11万公顷，过去20年，中国的香蕉种植面积增长了近1.5倍。然而，最近几年，香蕉枯萎病大规模爆发，导致中国香蕉种植主产区广东、广西、海南、云南、福建种植面积急剧锐减。我国香蕉产业正面临着香蕉枯萎病的毁灭性威胁。
香蕉枯萎病，又称香蕉黄叶病，巴拿马病等，由于最早在巴拿马大面积发生而得名。香蕉枯萎病是一种毁灭性病害，是国际植物检疫对象，由尖孢镰刀菌古巴专化型侵染引起。在我国主要分布1号和4号小种，1号小种主要为害粉蕉，4号小种为害粉蕉和香蕉。枯萎病传染性强，蔓延速度快，根治困难，一旦发生，将威胁整个蕉园。目前攻克香蕉枯萎病被称为世界性难题。枯萎病近距离传播主要依靠水、土、农具等物质作为媒介，而远距离传播则是通过带病种源。该病在酸性土壤或连续种植香蕉园中发生最为严重。
目前香蕉枯萎病的防治方法有：化学防治、间作和轮作、抗病品种选育、转基因品种和生物防治等。香蕉枯萎病病原菌从香蕉根部、球茎基部侵入，然后通过维管束传染蔓延，化学药剂很难渗透到维管束，所以化学防治效果不佳。通过与病原菌非寄主植物的轮作或间作，可有效改善土壤微生物环境，抑制病原菌数量，降低因连作障碍引发土传病害的风险。目前，主要轮作方式为水旱轮作，间作主要为香蕉/韭菜和香蕉/大蒜。韭菜能促进土壤中细菌的生长，抑制真菌和放线菌的生长，大蒜对根际微生物的生长有着较为明显的促进作用。2009年广东省果树研究所提出了一种《防控香蕉枯萎病的栽培新技术》(专利号：200910039331.5)，采用香蕉与韭菜间作或轮作的方式进行种植，可有效降低枯萎病发病率，但该方法大面积种植实施难度较大。香蕉抗枯萎病品种选育主要采用组培苗变异选择和毒素筛选两种方式。但是选择出来的抗性品种往往在产量和品质等方面都不理想，例如南天黄、矮粉1号等。转基因品种在澳大利亚已经开展田间试验，田间试验表明转基因植株确实能够抵抗枯萎病的侵染，预计3-5年内有可能推广种植，但市场是否可以接受转基因香蕉产品仍不得而知。因此，用绿色环保的生物防治方法来控制香蕉枯萎病将越来越受到人们的重视。
发明内容
本发明的一个目的是解决至少上述问题和/或缺陷，并提供至少后面将说明的优点。
本发明还有一个目的是提供一种贝莱斯芽孢杆菌，其能够防控香蕉枯萎病。
为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种贝莱斯芽孢杆菌，所述贝莱斯芽孢杆菌于2018年12月4日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏名称CK3-15，保藏号CGMCC No.16867。
优选的是，所述贝莱斯芽孢杆菌用于防控香蕉枯萎病。
优选的是，所述贝莱斯芽孢杆菌用于制备微生物肥料。
优选的是，所述贝莱斯芽孢杆菌用于促进作物生长。
优选的是，所述贝莱斯芽孢杆菌用于与枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌或甲基营养型芽孢杆菌复合制备微生物肥料。
一种应用所述贝莱斯芽孢杆菌CK3-15制备微生物肥料的方法，所述微生物肥料包括液体微生物菌剂、粉剂微生物菌剂、颗粒微生物菌剂和生物有机肥，其包括以下步骤：
1)菌种活化：将所述贝莱斯芽孢杆菌在NA培养基试管斜面上划线，33-36℃培养22-25小时，获得活化菌；
2)一级种子培养：用接种环刮取步骤1)试管斜面上的活化菌，接种于 NB液体培养基中，33-36℃，180-200rmp，摇瓶培养18-20小时，获得一级种子液；
3)二级种子液制备：将所述一级种子液按体积比为1-10％的比例接种到 NB培养基中，33-36℃培养18-20小时，全程通气搅拌培养，在0-8小时通气量为6-8m3/h，搅拌转速100-120rpm，在8-18小时通气量为10-12m3/h，搅拌转速150-160rpm；
4)三级发酵培养：将所述二级种子液以体积比为1-10％的接种量转入到发酵培养基中，全程通气搅拌培养，在0-8小时通气量为100-120m3/h，搅拌转速100-120rpm，在8-18小时通气量为140-150m3/h，搅拌转速150-160rpm， 35-37℃培养30-48小时，发酵结束，获得高密度发酵菌液；
5)液体微生物菌剂的制备：往所述高密度菌液中添加糖蜜浓缩液或糖蜜干粉，边加边搅拌混匀，所述糖蜜浓缩液或糖蜜干粉添加量均为高密度发酵菌液的6-50％之间，密封常温贮藏，获得所述液体微生物菌剂；
6)粉剂微生物菌剂的制备：往所述液体微生物菌剂中添加β环糊精，经喷雾干燥，制成粉剂微生物菌剂；
7)颗粒微生物菌剂的制备：将液体微生物菌剂或粉剂微生物菌剂与有机载体混合均匀，有机载体为腐熟有机肥，经造粒，获得所述颗粒微生物菌剂；
8)生物有机肥的制备：往发酵腐熟的有机肥中添加所述液体微生物菌剂或粉剂微生物菌剂，混合均匀后粉碎筛分打包，获得所述生物有机肥。
优选的是，所述NA培养基包括以下原料和组分：牛肉浸膏5-7重量份，蛋白胨10-15重量份，氯化钠5-7重量份，琼脂18-20重量份和水1000重量份，pH为7.0；
所述NB液体培养基包括以下原料和组分：牛肉浸膏5-7重量份，蛋白胨10-12重量份，氯化钠5-8重量份和水1000重量份，pH为6.0；
所述发酵培养基包括以下原料和组分：糖蜜干粉1-8重量份，玉米粉0.02-0.12重量份，硫酸镁0.02-0.10重量份，葡萄糖0.01-0.08重量份和酵母浸膏0.02-0.12重量份，余量为水，pH为6.0-8.0。
优选的是，步骤5)中，往高密度发酵菌液中添加质量分数为3-5％的硅藻土，混合均匀后再添加糖蜜浓缩液或糖蜜干粉。
本发明至少包括以下有益效果：本发明所提供的贝莱斯芽孢杆菌对香蕉枯萎病具有显著的防控效果，并且对香蕉生长具有促进作用；本发明所提供的三级扩大培养方法，获得的高密度发酵菌液浓度约为3×1010个/ml，芽孢生成率达98％以上；本发明方法制备的微生物肥料，在常温条件下保存，180 天的存活率达93％以上；本发明提供的贝莱斯芽孢杆菌防病促生长效果极显著，繁殖快速、易产芽孢，产品制备工艺简单，成本低廉，可大批量生产和推广应用。
本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
附图说明
图1为本发明所提供的菌株CK3-15在NA培养基平板菌落形态；
图2为本发明所提供的菌株CK3-15在2000倍显微镜下的形态特征。
具体实施方式
下面结合附图对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
应当理解，本文所使用的诸如“具有”、“包含”以及“包括”术语并不配出一个或多个其它元件或其组合的存在或添加。
本发明筛选的贝莱斯芽孢杆菌的拉丁名称为Bacillus velezensis,菌株编号为CK3-15，保藏单位为中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No.16867，保存日期为2018年12月4日。
如图1和图2所示，本发明筛选的贝莱斯芽孢杆菌的菌株特征为：在NA 培养基上，菌落呈乳白色不透明，扁平，粘稠不易挑起，表面粗糙无光泽，边缘规则呈圆形；革兰氏染色呈阳性，杆状，中生芽孢，椭圆形，两端钝圆；水解淀粉和明胶，可利用柠檬酸盐；接触酶呈阳性，氧化酶呈阴性，硝酸盐还原酶呈阳性，甲基红试验呈阴性，V-P试验呈阳性；在pH4-10范围内生长良好，最佳pH指为6，在50℃可正常生长，繁殖快速、易产芽孢。
实施例1
从广西南宁隆安县那桐镇香蕉枯萎病重病区健康植株根部采集土样，采用“梯度稀释+镰刀菌平板涂布”的方法初筛拮抗菌，具体方法：称取5g土壤，加入带玻璃珠的100ml无菌水中，25℃,200转/分，震荡摇匀40分钟，取土壤悬液1ml进行10-1-10-5系列浓度梯度稀释，然后取10-4,10-5梯度80ul 稀释液，20ul镰刀菌菌液，混合涂布于PDA平板，于28℃倒置培养3天，然后挑取出现抑菌圈的菌落通过平板对峙实验对拮抗菌进行复筛，复筛方法：PDA平板上十字交叉画线标记，用打孔器从长满镰刀菌的平板上挖取一块病原菌菌块放置于十字交叉点，在距菌块2.5厘米处3个位置接种拮抗菌，另一个位置不接种作为空白对照，28℃倒置培养5-7天，观察测试拮抗菌对病原菌的抑菌情况，计算抑菌率。
挑取单菌落接种到NB液体培养基中，培养过夜，采用上海生工《细菌基因组DNA快速抽提试剂盒》提取基因组DNA，交由南宁国拓生物科技有限公司完成测序，所得序列如序列表SEQ No.1所示。将序列SEQ No.1在GeneBank 数据库进行Blast比对，结果显示：与已知的贝莱斯芽孢杆菌16SrDNA序列的同源性＞99％，可认为是同种内不同菌株的贝莱斯芽孢杆菌。
实施例2
环境因素对本发明所提供的贝莱斯芽孢杆菌的影响
1)氧气对菌株的影响
采用深层琼脂法测定氧气对菌株生长的影响，具体方法为：将装有NA培养基的试管，放微波炉融化，待培养基冷却至45℃左右时，无菌操作吸取 0.1ml菌液加入试管中，轻轻涡旋震荡混匀，然后将试管置于冷水中，使培养基迅速凝固，然后将试管放置35℃培养箱中培养，连续观察生长情况，直至10d后结果清晰为止。根据细菌在试管中的生长部位，判断其对O2的需求及耐受能力。
结果显示，菌株只在试管表面生长，由此判断该菌株为好氧菌。
2)温度对菌株的影响
制备加厚NA平板，用接种环沾取菌液，然后在NA平板上划线，平板分别置于28℃、35℃、45℃、50℃、55℃、60℃培养箱中培养24小时，观察生长情况。
将菌株置于-70℃、-20℃、4℃、28℃、35℃、50℃、70℃、90℃、100℃、 110℃、121℃环境中，测试菌株的温度耐受性能。
结果显示：菌株在28-50℃下均可生长，55℃以上不生长，但转到35℃又可恢复生长。菌株在-70—110℃间可存活，121℃致死。由此可见，菌株具有高温耐受能力，可进行高温喷雾干燥制成粉剂微生物菌剂。
3)pH对菌株的影响
将菌株接种到不同pH值的NB液体培养基中培养24小时，测定最终菌液 pH值及菌量，判断pH对菌株生长的影响，结果如表1所示。
表1 pH对菌株生长的影响
由此可见，本发明所提供的贝莱斯芽孢杆菌具有较宽的pH适应范围，菌株在pH4-10范围内均可正常生长，最适pH为6。
实施例3
本发明所提供的贝莱斯芽孢杆菌(CK3-15)对病原菌的抑菌试验
利用平板对峙试实验，测定菌株对不同病原菌的抑制作用，具体方法为： PDA平板上十字交叉画线标记，在距十字交叉点2.5厘米处3个位置接种菌株CK3-15，用打孔器从长满病原真菌的平板上挖取一块病原菌菌块放置于十字交叉点，另一个位置不接种作为空白对照。28℃倒置培养5-7天，观察测试拮抗菌对病原菌的抑菌情况，计算抑菌率，结果如表2所示。
表2 CK3-15对不同病原菌的抑制效果
从表2结果可知，贝莱斯芽孢杆菌(CK3-15)对香蕉枯萎病1号小种、香蕉枯萎病4号小种以及香蕉根腐病均有较好的抑制效果。
实施例4
本发明所提供的贝莱斯芽孢杆菌(CK3-15)对其他生防菌的拮抗试验
采用“牛津杯+平板涂布法”测定菌株对其他生防菌的拮抗作用，具体方法为：取0.1mlCK3-15菌液均匀涂布于NA平板上，待菌液涂干后将牛津杯放置在平板上，保证牛津杯与培养基接触面紧密没有缝隙，在牛津杯中分别加入生防菌0.1ml菌液，置于35℃培养箱中培养24小时，观察牛津杯周围是否出现抑菌圈。实验选择的生防菌为枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌和甲基营养型芽孢杆菌。
结果显示：牛津杯周围没有出现明显的抑菌圈，说明菌株CK3-15与测试的生防菌之间没有拮抗作用。
实施例5
菌株CK3-15在有机肥或土壤中的定殖试验
试验方法：取1ml 300亿/ml液体菌剂均匀混入1000g有机肥中，封装在自封袋后室温放置，分别在1、30、60、120、180天时检测其中目标菌的菌量，结果如表3所示。
试验方法：取1ml 300亿/ml液体菌剂均匀混入1000g黄土中，室温放置，分别在1、30、60、120、180天时检测其中目标菌的菌量，结果如表3 所示。
表3目标菌的菌量(cfu/g)变化
从表3结果可知，菌株CK3-15在有机肥、土壤中均具有较好的定殖能力。
实例6
高密度培养试验
选择本发明所提供的贝莱斯芽孢杆菌(CK3-15)与现有的贝莱斯芽孢杆菌YB-15进行高密度培养试验，利用平板计数法，检测培养液菌量，比较分析菌株的繁殖能力。
种子培养基：牛肉浸膏5g/L，蛋白胨10g/L，氯化钠5g/L，pH6.0。
发酵培养基：糖蜜干粉4％，玉米粉0.05％，硫酸镁0.02％，葡萄糖0.01％，酵母浸膏0.05％，pH6.0。
培养条件：种子液摇床培养，装瓶量50mL/250mL，接种量2％，35℃，200rpm， 18小时。高密度摇床培养，装瓶量50mL/250mL，接种量2％，37℃，220rpm， 48小时，结果如表4所示。
表4贝莱斯芽孢杆菌不同菌株高密度培养对比分析
序号 菌株编号 菌量(cfu/ml) 芽孢率(％)
1 CK3-15 3.5E+10 98
2 YB-15 2.6E+9 60
由此可见，其他条件都一致的情况下，贝莱斯芽孢杆菌CK3-15与YB-15 相比，繁殖更为快速，菌量可高达300亿/毫升以上，而且易产芽孢，培养 48小时芽孢率达98％。
实施例7
一种应用所述贝莱斯芽孢杆菌制备微生物肥料的方法，所述微生物肥料包括液体微生物菌剂、粉剂微生物菌剂、颗粒微生物菌剂和生物有机肥，其包括以下步骤：
1)菌种活化：将所述贝莱斯芽孢杆菌在NA培养基试管斜面上划线，35℃培养24小时，获得活化菌；
2)一级种子培养：用接种环刮取步骤1)试管斜面上的活化菌，接种于 NB液体培养基中，35℃，200rmp，摇瓶培养18小时，获得一级种子液；
3)二级种子液制备：将一级种子液按8％(体积比)比例接种到装有120L NB培养基的200L种子罐中，35℃培养18小时，全程通气搅拌培养，在0-8 小时通气量为8m3/h，搅拌转速120rpm,在8-18小时通气量为10m3/h，搅拌转速150rpm；
4)三级发酵培养：将二级种子液以8％的接种量转入到2000L发酵罐内进行发酵培养，发酵罐装液量1500L，全程通气搅拌培养，在0-8小时通气量为100m3/h，搅拌转速120rpm,在8-18小时通气量为140m3/h，搅拌转速 150rpm，37℃培养48小时，发酵结束，得到高密度发酵菌液；
5)液体微生物菌剂的制备：往所述高密度菌液中添加糖蜜浓缩液或糖蜜干粉，边加边搅拌混匀，所述糖蜜浓缩液或糖蜜干粉添加量均为高密度发酵菌液的6-50％之间，密封常温贮藏，获得所述液体微生物菌剂；
6)粉剂微生物菌剂的制备：往所述液体微生物菌剂中添加β环糊精，经喷雾干燥，制成粉剂微生物菌剂；
7)颗粒微生物菌剂的制备：将液体微生物菌剂与有机载体混合均匀，经造粒，获得所述颗粒微生物菌剂；所述有机载体为腐熟有机肥；
8)生物有机肥的制备：往发酵腐熟的有机肥中添加所述液体微生物菌剂或粉剂微生物菌剂，混合均匀后粉碎筛分打包，获得所述生物有机肥。
实施例8
一种应用所述贝莱斯芽孢杆菌制备微生物肥料的方法，所述微生物肥料包括液体微生物菌剂、粉剂微生物菌剂、颗粒微生物菌剂和生物有机肥，其包括以下步骤：
1)菌种活化：将所述贝莱斯芽孢杆菌在NA培养基试管斜面上划线，35℃培养24小时，获得活化菌；其中，NA培养基包括以下组分:牛肉浸膏5g/L，蛋白胨10g/L，氯化钠5g/L,琼脂18g/L，pH7.0；
2)一级种子培养：用接种环刮取步骤1)试管斜面上的活化菌，接种于 NB液体培养基中，35℃，200rmp，摇瓶培养18小时，获得一级种子液；其中，其中所述NB液体培养基包括以下组分：牛肉浸膏5g/L，蛋白胨10g/L，氯化钠5g/L，pH6.0；
3)二级种子液制备：将一级种子液按5％(体积比)比例接种到装有75L NB培养基的200L种子罐中，35℃培养18小时，全程通气搅拌培养，在0-8 小时通气量为8m3/h，搅拌转速120rpm,在8-18小时通气量为10m3/h，搅拌转速150rpm；
4)三级发酵培养：将二级种子液以5％的接种量转入到2000L发酵罐内进行发酵培养，发酵罐装液量1500L，全程通气搅拌培养，在0-8小时通气量为100m3/h，搅拌转速120rpm,在8-18小时通气量为140m3/h，搅拌转速 150rpm，37℃培养48小时，发酵结束，得到高密度发酵菌液；其中，所述发酵培养基包括以下质量分数的组分：糖蜜干粉4％，玉米粉0.05％，硫酸镁0.02％，葡萄糖0.01％，酵母浸膏0.05％，余量为水，pH6.0；
5)液体微生物菌剂：往所述高密度菌液中添加糖蜜浓缩液或糖蜜干粉，边加边搅拌混匀，所述糖蜜浓缩液或糖蜜干粉添加量均为高密度发酵菌液的 6-50％之间，密封常温贮藏，获得所述液体微生物菌剂；
6)粉剂微生物菌剂的制备：往所述液体微生物菌剂中添加β环糊精，经喷雾干燥，制成粉剂微生物菌剂；
7)颗粒微生物菌剂的制备：将粉剂微生物菌剂与腐熟有机肥混合均匀，经造粒，获得所述颗粒微生物菌剂；
8)生物有机肥的制备：往发酵腐熟的有机肥中添加所述液体微生物菌剂或粉剂微生物菌剂，混合均匀后粉碎筛分打包，获得所述生物有机肥。
实施例9
一种应用所述贝莱斯芽孢杆菌制备微生物肥料的的方法，所述微生物肥料包括液体微生物菌剂、粉剂微生物菌剂、颗粒微生物菌剂和生物有机肥，其包括以下步骤：
1)菌种活化：将所述贝莱斯芽孢杆菌在NA培养基试管斜面上划线，35℃培养24小时，获得活化菌；其中，NA培养基包括以下组分:牛肉浸膏5g/L，蛋白胨10g/L，氯化钠5g/L,琼脂18g/L，pH7.0；
2)一级种子培养：用接种环刮取步骤1)试管斜面上的活化菌，接种于 NB液体培养基中，35℃，200rmp，摇瓶培养18小时，获得一级种子液；其中，其中所述NB液体培养基包括以下组分：牛肉浸膏5g/L，蛋白胨10g/L，氯化钠5g/L，pH6.0；
3)二级种子液制备：将一级种子液按1％(体积比)比例接种到装有100L NB培养基的150L种子罐中，35℃培养18小时，全程通气搅拌培养，在0-8 小时通气量为8m3/h，搅拌转速120rpm,在8-18小时通气量为10m3/h，搅拌转速150rpm；
4)三级发酵培养：将二级种子液以2％的接种量转入到3000L发酵罐内进行发酵培养，发酵罐装液量1500L，全程通气搅拌培养，在0-8小时通气量为100m3/h，搅拌转速120rpm,在8-18小时通气量为140m3/h，搅拌转速 150rpm，37℃培养48小时，发酵结束，得到高密度发酵菌液；其中，所述发酵培养基包括以下质量分数的组分：糖蜜干粉4％，玉米粉0.05％，硫酸镁0.02％，葡萄糖0.01％，酵母浸膏0.05％，余量为水，pH6.0；
5)液体微生物菌剂的制备：往所述高密度菌液中质量分数为3％的硅藻土，硅藻土的粒径20um，混合均匀后再添加糖蜜浓缩液或糖蜜干粉，边加边搅拌混匀，所述糖蜜浓缩液或糖蜜干粉添加量均为高密度发酵菌液的6-50％之间，密封常温贮藏，获得所述液体微生物菌剂；
6)粉剂微生物菌剂的制备：往所述液体微生物菌剂中添加β环糊精，经喷雾干燥，制成所述粉剂微生物菌剂；
7)颗粒微生物菌剂的制备：将液体微生物菌剂与腐熟有机肥混合均匀，经造粒，获得所述颗粒微生物菌剂；
8)生物有机肥的制备：往发酵腐熟的有机肥中添加所述粉剂微生物菌剂，混合均匀后粉碎筛分打包，获得所述生物有机肥。
实施例10
一种应用所述贝莱斯芽孢杆菌制备的生物有机肥防控香蕉枯萎病的方法
应用方法：选取一块香蕉枯萎病严重无法再种植香蕉的旧蕉地，多次翻犁均匀后，将其均匀划分为4片，每片种植30株威廉斯B6品种香蕉，片1：不施用有机肥，片2：施用所述的腐熟有机肥，片3：施用所述腐熟有机肥+ 灭活菌剂，片4：施用实例7制备的生物有机肥，统计各个片区的香蕉枯萎病的发病率以及生防率，结果见表5所示。
表5
发病率(％) 生防率(％)
片1 93.1 3.4
片2 87.7 6.9
片3 83.6 7.1
片4 24.2 74.9
从表5结果可知，施用本发明所制备的生物有机肥，对香蕉枯萎病具有较好的防控效果。
实施例11
一种应用所述贝莱斯芽孢杆菌制备的微生物菌剂促进植物生长的方法
处理一：常规施肥(有机肥800千克/亩，尿素25公斤/亩)；
处理二：常规施肥+供试菌剂(4kg/亩)，即实施例8制备的微生物菌剂；
处理三：常规施肥+灭活的供试菌剂(4kg/亩)，即实施例8制备的微生物菌剂，但菌剂经过灭活处理；
处理四：空白对照不施肥。
选取一块地，均分为4块，按照上述处理一、处理二、处理三、处理四的方法。具体做法是将菌剂与有机肥混合拌匀，菜地起好晆后，均匀撒施，旋耕机搅拌。大田移栽定值后，各个处理的田间管理都一样。
结果分析
1、不同处理对生菜生物学形状的影响，施用实例8制备的微生物菌剂，生菜叶色浓绿，肥厚，有光泽，株型高大健壮，底部干叶败叶极少，无病叶，根系健康。
2、不同处理对生菜产量的影响，结果见表6。
生菜产量统计表6 产量单位：kg 作物品种：生菜
由上表可以看出：处理二(常规施肥+供试菌剂4kg/亩)比处理一(常规施肥)亩增产366.9kg，增产率21.0％；处理二比处理三(常规施肥+基质) 亩增产208.5kg，增产率11.0％；处理二比处理四(空白对照不施肥)亩增产616kg，增产率41.2％。可见，本发明所述贝莱斯芽孢杆菌制备的微生物菌剂具有促进植物生长的作用。
实施例12
一种应用所述贝莱斯芽孢杆菌制备的微生物肥料促进植物生长的方法
处理A：常规施肥(有机肥800千克/亩，复合肥50公斤/亩)；
处理B：常规施肥+供试菌剂(4kg/亩)，即实施例9制备的微生物菌剂；
处理C：常规施肥+灭活的供试菌剂(4kg/亩)，即实施例9制备的微生物菌剂，但菌剂经过灭活处理；
处理D：空白对照不施肥。
将一块地均分为4块，分别按照处理A、处理B、处理C、处理D的方法进行肥料管理,每个处理125棵。具体做法是将菌剂与有机肥混合拌匀，撒施于种植沟内，与泥土搅拌混匀，移栽香蕉幼苗，各个处理的田间管理都一样，统计500株香蕉幼苗种植时的平均株高和种植50天后的平均株高，结果见表7所示。
表7
第1天(cm) 第50天(cm)
处理A 15.6 56.5
处理B 15.1 79.1
处理C 15.9 61.1
处理D 15.5 30.5
从表7结果可知，添加本发明的菌株后对香蕉的生长具有明显的促进作用。
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用。它完全可以被适用于各种适合本发明的领域。对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改。因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的图例。
<110>广西金穗生态科技股份有限公司
<120>一株贝莱斯芽孢杆菌及其应用
<160> 1
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 1454
<212> DNA
<213> SEQ No.1
<400> 1
CAGACTATCTGTCACCTTCGGCGGCTGGCTCCATAAAGGTTACCTCACCGACTTCGGGTGTTACAAACTCTCGTGGTGTGACGGGCGGTGTGTACAAGGCCCGGGAACGTATTCACCGCGGCATGCTGATCCGCGATTACTAGCGATTCCAGCTTCACGCAGTCGAGTTGCAGACTGCGATCCGAACTGAGAACAGATTTGTGGGATTGGCTTAACCTCGCGGTTTCGCTGCCCTTTGTTCTGTCCATTGTAGCACGTGTGTAGCCCAGGTCATAAGGGGCATGATGATTTGACGTCATCCCCACCTTCCTCCGGTTTGTCACCGGCAGTCACCTTAGAGTGCCCAACTGAATGCTGGCAACTAAGATCAAGGGTTGCGCTCGTTGCGGGACTTAACCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACAACCATGCACCACCTGTCACTCTGCCCCCGAAGGGGACGTCCTATCTCTAGGATTGTCAGAGGATGTCAAGACCTGGTAAGGTTCTTCGCGTTGCTTCGAATTAAACCACATGCTCCACCGCTTGTGCGGGCCCCCGTCAATTCCTTTGAGTTTCAGTCTTGCGACCGTACTCCCCAGGCGGAGTGCTTAATGCGTTAGCTGCAGCACTAAGGGGCGGAAACCCCCTAACACTTAGCACTCATCGTTTACGGCGTGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTTCGCTCCCCACGCTTTCGCTCCTCAGCGTCAGTTACAGACCAGAGAGTCGCCTTCGCCACTGGTGTTCCTCCACATCTCTACGCATTTCACCGCTACACGTGGAATTCCACTCTCCTCTTCTGCACTCAAGTTCCCCAGTTTCCAATGACCCTCCCCGGTTGAGCCGGGGGCTTTCACATCAGACTTAAGAAACCGCCTGCGAGCCCTTTACGCCCAATAATTCCGGACAACGCTTGCCACCTACGTATTACCGCGGCTGCTGGCACGTAGTTAGCCGTGGCTTTCTGGTTAGGTACCGTCAAGGTGCCGCCCTATTTGAACGGCACTTGTTCTTCCCTAACAACAGAGCTTTACGATCCGAAAACCTTCATCACTCACGCGGCGTTGCTCCGTCAGACTTTCGTCCATTGCGGAAGATTCCCTACTGCTGCCTCCCGTAGGAGTCTGGGCCGTGTCTCAGTCCCAGTGTGGCCGATCACCCTCTCAGGTCGGCTACGCATCGTCGCCTTGGTGAGCCGTTACCTCACCAACTAGCTAATGCGCCGCGGGTCCATCTGTAAGTGGTAGCCGAAGCCACCTTTTATGTCTGAACCATGCGGTTCAGACAACCATCCGGTATTAGCCCCGGTTTCCCGGAGTTATCCCAGTCTTACAGGCAGGTTACCCACGTGTTACTCACCCGTCCGCCGCTAACATCAGGGAGCAAGCTCCCATCTGTCCGCTCGACTGCAGTATAGCACCCGTCAGT 1454

Claims (8)

1.一种贝莱斯芽孢杆菌，其特征在于，所述贝莱斯芽孢杆菌于2018年12月4日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏名称CK3-15，保藏号CGMCC No.16867。
2.如权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌，其特征在于，所述贝莱斯芽孢杆菌用于防控香蕉枯萎病。
3.根据权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌，其特征在于，所述贝莱斯芽孢杆菌用于制备微生物肥料。
4.根据权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌，其特征在于，所述贝莱斯芽孢杆菌用于促进作物生长。
5.根据权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌，其特征在于，所述贝莱斯芽孢杆菌用于与枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌或甲基营养型芽孢杆菌复合制备微生物肥料。
6.一种应用权利要求1-5任一项所述的贝莱斯芽孢杆菌制备微生物肥料的方法，所述微生物肥料包括液体微生物菌剂、粉剂微生物菌剂、颗粒微生物菌剂和生物有机肥，其特征在于，包括以下步骤：
1)菌种活化：将所述贝莱斯芽孢杆菌在NA培养基试管斜面上划线，33-36℃培养22-25小时，获得活化菌；
2)一级种子培养：用接种环刮取步骤1)试管斜面上的活化菌，接种于NB液体培养基中，33-36℃，180-200rmp，摇瓶培养18-20小时，获得一级种子液；
3)二级种子液制备：将所述一级种子液按体积比为1-10％的比例接种到NB培养基中，33-36℃培养18-20小时，全程通气搅拌培养，在0-8小时通气量为6-8m3/h，搅拌转速100-120rpm，在8-18小时通气量为10-12m3/h，搅拌转速150-160rpm；
4)三级发酵培养：将所述二级种子液以体积比为1-10％的接种量转入到发酵培养基中，全程通气搅拌培养，在0-8小时通气量为100-120m3/h，搅拌转速100-120rpm，在8-18小时通气量为140-150m3/h，搅拌转速150-160rpm，35-37℃培养30-48小时，发酵结束，获得高密度发酵菌液；
5)液体微生物菌剂的制备：往所述高密度菌液中添加糖蜜浓缩液或糖蜜干粉，边加边搅拌混匀，所述糖蜜浓缩液或糖蜜干粉添加量为高密度发酵菌液的6-50％之间，密封常温贮藏，获得所述液体微生物菌剂；
6)粉剂微生物菌剂的制备：往所述液体微生物菌剂中添加β环糊精，经喷雾干燥，获得所述粉剂微生物菌剂；
7)颗粒微生物菌剂的制备：将液体微生物菌剂或粉剂微生物菌剂与有机载体混合均匀，经造粒，获得所述颗粒微生物菌剂；
8)生物有机肥的制备：往发酵腐熟的有机肥中添加所述液体微生物菌剂或粉剂微生物菌剂，经过混合均匀后粉碎筛分打包，获得所述生物有机肥。
7.根据权利要求6所述的贝莱斯芽孢杆菌制备微生物肥料的方法，其特征在于，所述NA培养基包括以下原料和组分：牛肉浸膏5-7重量份，蛋白胨10-15重量份，氯化钠5-7重量份，琼脂18-20重量份和水1000重量份，pH为7.0；
所述NB液体培养基包括以下原料和组分：牛肉浸膏5-7重量份，蛋白胨10-12重量份，氯化钠5-8重量份和水1000重量份，pH为6.0；
所述发酵培养基包括以下原料和组分：糖蜜干粉1-8重量份，玉米粉0.02-0.12重量份，硫酸镁0.02-0.10重量份，葡萄糖0.01-0.08重量份和酵母浸膏0.02-0.12重量份，余量为水，pH为6.0-8.0。
8.根据权利要求6所述的贝莱斯芽孢杆菌制备微生物肥料的方法，其特征在于，步骤5)中，往高密度发酵菌液中添加质量分数为3-5％的硅藻土，混合均匀后再添加糖蜜浓缩液或糖蜜干粉。
CN201910060215.5A 2019-01-22 2019-01-22 一株贝莱斯芽孢杆菌及其应用 Pending CN109652336A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910060215.5A CN109652336A (zh) 2019-01-22 2019-01-22 一株贝莱斯芽孢杆菌及其应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910060215.5A CN109652336A (zh) 2019-01-22 2019-01-22 一株贝莱斯芽孢杆菌及其应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN109652336A true CN109652336A (zh) 2019-04-19

Family

ID=66120532

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910060215.5A Pending CN109652336A (zh) 2019-01-22 2019-01-22 一株贝莱斯芽孢杆菌及其应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN109652336A (zh)

Cited By (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110372448A (zh) * 2019-08-28 2019-10-25 广西金穗生态科技股份有限公司 利用糖蜜酒精废液生产水溶性微生物肥料的方法
CN110387337A (zh) * 2019-05-12 2019-10-29 华南农业大学 贝莱斯芽孢杆菌118及其生物菌剂与应用
CN110591982A (zh) * 2019-10-29 2019-12-20 广西金穗生态科技股份有限公司 液体微生物肥料及其制备方法
CN110754466A (zh) * 2019-05-17 2020-02-07 卢志军 贝莱斯芽孢杆菌可溶粒剂及其制备方法
CN110982751A (zh) * 2019-12-27 2020-04-10 天津开发区坤禾生物技术有限公司 微生物复合菌剂、微胶囊化复合微生态制剂和肉兔饲料及制备方法与应用
CN111234830A (zh) * 2019-12-20 2020-06-05 云南省微生物发酵工程研究中心有限公司 一种用于改良土壤团粒结构的微生物改良剂及其应用
CN111269039A (zh) * 2020-03-27 2020-06-12 常州市研核生物科技有限公司 一种微生物肥料及其制备方法
CN111411063A (zh) * 2020-05-15 2020-07-14 云南省微生物发酵工程研究中心有限公司 一种具有防治烟草土传病害功能的芽孢杆菌复合菌剂及其制备方法
CN112746033A (zh) * 2020-03-26 2021-05-04 湖南鑫业农牧科技有限公司 一种贝莱斯芽孢杆菌、菌剂及其在发酵生产有机肥中的应用
CN113061554A (zh) * 2021-04-16 2021-07-02 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 一株防治香蕉枯萎病的贝莱斯芽孢杆菌及应用
CN113801804A (zh) * 2021-03-24 2021-12-17 云南省农业科学院农业环境资源研究所 一株香蕉枯萎病生防拮抗菌株及其应用
CN113980835A (zh) * 2021-09-23 2022-01-28 中化农业（临沂）研发中心有限公司 复合微生物菌剂及其在肥料中的应用
CN114606152A (zh) * 2020-12-09 2022-06-10 江苏恒顺醋业股份有限公司 一株贝莱斯芽孢杆菌、微生物菌剂及其应用
CN114854650A (zh) * 2022-07-05 2022-08-05 烟台泓源生物肥料有限公司 一种微生物菌剂及其制备方法
CN115088718A (zh) * 2022-07-18 2022-09-23 中国农业科学院烟草研究所(中国烟草总公司青州烟草研究所) 浒苔多糖在促进芽孢杆菌生物膜形成中的应用
CN116064275A (zh) * 2022-07-06 2023-05-05 海南大学 一种用于防治香蕉枯萎病的芽孢菌及其应用

Citations (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103773720A (zh) * 2013-12-30 2014-05-07 邵素英 一种微生物肥料的制备方法
CN107254427A (zh) * 2017-08-15 2017-10-17 云南农业大学 一种贝莱斯芽孢杆菌菌株jn5及其应用
CN107312734A (zh) * 2017-08-21 2017-11-03 广东省农业科学院农业资源与环境研究所 香蕉枯萎病拮抗菌以及生物有机肥及其制备方法和应用
CN107446847A (zh) * 2017-08-14 2017-12-08 云南农业大学 一株贝莱斯芽孢杆菌gt11及其应用
CN107937313A (zh) * 2017-12-21 2018-04-20 福建省农业科学院植物保护研究所 一株用于防治黄瓜枯萎病的贝莱斯芽孢杆菌及其应用
CN108004185A (zh) * 2018-01-09 2018-05-08 中国农业科学院植物保护研究所 一株具防病、促生、抗旱功能植物内生贝莱斯芽孢杆菌及其应用
CN108102991A (zh) * 2018-03-07 2018-06-01 山东戴盟得生物科技有限公司 一株贝莱斯芽孢杆菌及其在防治西瓜枯萎病中的应用
CN108753664A (zh) * 2018-06-28 2018-11-06 广东省农业科学院农业资源与环境研究所 一种生物防治剂、生物有机肥及其应用
CN108949632A (zh) * 2018-08-02 2018-12-07 南京林业大学 一株具有广谱抗病促生作用的解淀粉芽孢杆菌yh-20及其应用
CN109022304A (zh) * 2018-07-04 2018-12-18 华南农业大学 一株贝莱斯芽孢杆菌及其广谱抑菌作用和在防治香蕉病害中的应用
CN109097295A (zh) * 2018-07-02 2018-12-28 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所 贝莱斯芽孢杆菌菌株hn03及其应用

Patent Citations (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103773720A (zh) * 2013-12-30 2014-05-07 邵素英 一种微生物肥料的制备方法
CN107446847A (zh) * 2017-08-14 2017-12-08 云南农业大学 一株贝莱斯芽孢杆菌gt11及其应用
CN107254427A (zh) * 2017-08-15 2017-10-17 云南农业大学 一种贝莱斯芽孢杆菌菌株jn5及其应用
CN107312734A (zh) * 2017-08-21 2017-11-03 广东省农业科学院农业资源与环境研究所 香蕉枯萎病拮抗菌以及生物有机肥及其制备方法和应用
CN107937313A (zh) * 2017-12-21 2018-04-20 福建省农业科学院植物保护研究所 一株用于防治黄瓜枯萎病的贝莱斯芽孢杆菌及其应用
CN108004185A (zh) * 2018-01-09 2018-05-08 中国农业科学院植物保护研究所 一株具防病、促生、抗旱功能植物内生贝莱斯芽孢杆菌及其应用
CN108102991A (zh) * 2018-03-07 2018-06-01 山东戴盟得生物科技有限公司 一株贝莱斯芽孢杆菌及其在防治西瓜枯萎病中的应用
CN108753664A (zh) * 2018-06-28 2018-11-06 广东省农业科学院农业资源与环境研究所 一种生物防治剂、生物有机肥及其应用
CN109097295A (zh) * 2018-07-02 2018-12-28 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所 贝莱斯芽孢杆菌菌株hn03及其应用
CN109022304A (zh) * 2018-07-04 2018-12-18 华南农业大学 一株贝莱斯芽孢杆菌及其广谱抑菌作用和在防治香蕉病害中的应用
CN108949632A (zh) * 2018-08-02 2018-12-07 南京林业大学 一株具有广谱抗病促生作用的解淀粉芽孢杆菌yh-20及其应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
杨可等: "海洋生境贝莱斯芽孢杆菌TCS001的鉴定及抑真菌活性", 《农药学学报》 *
陈燕红等: "一株香蕉枯萎病生防解淀粉芽胞杆菌的分离、鉴定及其拮抗物质研究", 《广东农业科学》 *

Cited By (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110387337A (zh) * 2019-05-12 2019-10-29 华南农业大学 贝莱斯芽孢杆菌118及其生物菌剂与应用
CN110754466A (zh) * 2019-05-17 2020-02-07 卢志军 贝莱斯芽孢杆菌可溶粒剂及其制备方法
US11523614B2 (en) 2019-05-17 2022-12-13 Zhijun Lu Soluble granule of Bacillus velezensis and its preparation method
CN110372448A (zh) * 2019-08-28 2019-10-25 广西金穗生态科技股份有限公司 利用糖蜜酒精废液生产水溶性微生物肥料的方法
CN110591982A (zh) * 2019-10-29 2019-12-20 广西金穗生态科技股份有限公司 液体微生物肥料及其制备方法
CN111234830A (zh) * 2019-12-20 2020-06-05 云南省微生物发酵工程研究中心有限公司 一种用于改良土壤团粒结构的微生物改良剂及其应用
CN110982751A (zh) * 2019-12-27 2020-04-10 天津开发区坤禾生物技术有限公司 微生物复合菌剂、微胶囊化复合微生态制剂和肉兔饲料及制备方法与应用
CN112746033A (zh) * 2020-03-26 2021-05-04 湖南鑫业农牧科技有限公司 一种贝莱斯芽孢杆菌、菌剂及其在发酵生产有机肥中的应用
CN111269039A (zh) * 2020-03-27 2020-06-12 常州市研核生物科技有限公司 一种微生物肥料及其制备方法
CN111411063A (zh) * 2020-05-15 2020-07-14 云南省微生物发酵工程研究中心有限公司 一种具有防治烟草土传病害功能的芽孢杆菌复合菌剂及其制备方法
CN114606152A (zh) * 2020-12-09 2022-06-10 江苏恒顺醋业股份有限公司 一株贝莱斯芽孢杆菌、微生物菌剂及其应用
CN114606152B (zh) * 2020-12-09 2023-07-21 江苏恒顺醋业股份有限公司 一株贝莱斯芽孢杆菌、微生物菌剂及其应用
CN113801804A (zh) * 2021-03-24 2021-12-17 云南省农业科学院农业环境资源研究所 一株香蕉枯萎病生防拮抗菌株及其应用
CN113801804B (zh) * 2021-03-24 2022-11-15 云南省农业科学院农业环境资源研究所 一株香蕉枯萎病生防拮抗菌株及其应用
CN113061554A (zh) * 2021-04-16 2021-07-02 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 一株防治香蕉枯萎病的贝莱斯芽孢杆菌及应用
CN113980835A (zh) * 2021-09-23 2022-01-28 中化农业（临沂）研发中心有限公司 复合微生物菌剂及其在肥料中的应用
CN114854650A (zh) * 2022-07-05 2022-08-05 烟台泓源生物肥料有限公司 一种微生物菌剂及其制备方法
CN116064275A (zh) * 2022-07-06 2023-05-05 海南大学 一种用于防治香蕉枯萎病的芽孢菌及其应用
CN116064275B (zh) * 2022-07-06 2024-01-30 海南大学 一种用于防治香蕉枯萎病的芽孢菌及其应用
CN115088718A (zh) * 2022-07-18 2022-09-23 中国农业科学院烟草研究所(中国烟草总公司青州烟草研究所) 浒苔多糖在促进芽孢杆菌生物膜形成中的应用
CN115088718B (zh) * 2022-07-18 2024-02-09 中国农业科学院烟草研究所(中国烟草总公司青州烟草研究所) 浒苔多糖在促进芽孢杆菌生物膜形成中的应用

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN109652336A (zh) 一株贝莱斯芽孢杆菌及其应用
CN104928212B (zh) 巨大芽孢杆菌x3及其制备方法、应用
CN104894010B (zh) 一种拮抗土传真菌病害的复合微生物肥料及其制备方法和应用
CN106754484B (zh) 一株豌豆根瘤菌及其发酵培养方法与应用
CN104745483B (zh) 一种宛氏拟青霉菌株sj1及其应用
CN106591193A (zh) 一株具有广谱促生抗逆作用的解淀粉芽孢杆菌
CN110616171B (zh) 一株耐盐碱太平洋芽孢杆菌及其活菌制剂与应用
CN104560827B (zh) 一种防治烟草青枯病的生防放线菌菌株及其应用
CN102329755B (zh) 一种防治香蕉枯萎病的不吸水链霉菌株bwl58及其应用
CN102703363B (zh) 一株甲基营养性芽孢杆菌utm401及其应用
CN106399178B (zh) 具有降解无机磷和抑菌作用的解淀粉芽孢杆菌及其应用
CN101864376A (zh) 一种荧光假单胞菌菌株、菌剂及其作为防治番茄青枯病的育苗基质的应用
CN105746503B (zh) 一种甲基营养型芽孢杆菌可湿性粉剂及其制备方法和应用
CN110218659A (zh) 一种绿色木霉菌、菌剂、生物肥及应用
CN108552235A (zh) 一种预防烤烟根腐病与改良土壤的生物菌肥及其制备与应用
CN106635903A (zh) 一种提高中重度盐碱地作物耐盐性的促生菌组合
CN101886055B (zh) 用于防除连作烟草青枯病的拮抗菌njl-14
CN106754463A (zh) 一株具解磷能力伯克霍尔德菌属细菌njau‑b8及其研制的微生物肥料
CN101892173A (zh) 一株在草莓连作病害中起生防作用的枯草芽孢杆菌及其应用
CN107099475B (zh) 一株甲基营养型芽孢杆菌及其菌剂的制备和应用
CN104232532A (zh) 一种植物内生短小芽孢杆菌及其菌剂、制法与应用
CN104789494B (zh) 采用强化垃圾堆肥微生物菌剂提高草皮抗盐性的方法
CN104738091A (zh) 一种抗花生连作复合菌剂的制备及应用
CN110791459B (zh) 一株用于防控连作百合土传枯萎病的枯草芽孢杆菌及其应用
CN104830706A (zh) 一株胶冻样芽孢杆菌及马铃薯专用生物有机缓控释肥料

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20190419

RJ01 Rejection of invention patent application after publication