CN110591982A - 液体微生物肥料及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种液体微生物肥料及其制备方法，所述液体微生物肥料包括以下重量百分比的原料：微生物菌剂70‑90％以及糖蜜酒精浓缩液10‑30％；所述液体微生物肥料的制备方法包括以下步骤：步骤一：选择优良菌株，经划线活化后，挑取单菌落接种至NB液体培养基培养得到种子液；步骤二：所述种子液经逐级扩大培养，制成高含量的芽孢状态的微生物菌剂；步骤三：将所述微生物菌剂与糖蜜酒精浓缩液按比例混匀，即得到所述液体微生物肥料。本发明具有制备方法简单、有效活菌数量高以及防病促生抗寒效果显著等特点。
Description
技术领域
本发明涉及微生物肥料领域。更具体地说，本发明涉及一种液体微生物肥料及其制备方法。
背景技术
微生物肥料是指含有特定微生物活体的制品，应用于农业生产，通过其中所含微生物的生命活动，增加植物养分的供应量或促进植物生长，提高产量，改善农产品品质及农业生态环境。微生物在土壤的生命活动必须有足够的营养物质作为保障，营养缺乏，会使功能微生物迅速死亡衰减，导致微生物肥料大田应用效果欠佳，对于土壤有机质含量低的地区，微生物肥料更难以发挥作用。这就是微生物肥料使用效果受环境影响的主要因素。微生物肥料为活体制品，有效期通常很短，国家规定液态制剂有效期为3个月。产品从包装入库，出厂，进入市场，再到大田使用，通常情况下都会超出3个月的有效期，使产品过期失效。
目前，微生物肥料的生产主要是在发酵菌液中添加防腐剂如山梨酸钾抑制微生物的活性，达到稳定菌量的目的，但是防腐剂对菌体有损害作用，应用于大田往往表现出活性不够等问题。中国专利号201810815361.X提出了一种微生物液体菌剂及其制备方法，该微生物菌剂由促生菌菌液、聚谷氨酸和生物有机质组成，生物有机质包括生化黄腐酸、糖蜜和酵母提取物，该方法利用生物有机质物质的高渗透压环境来抑制芽孢杆菌芽孢的萌发，从而达到维持菌种稳定的目的。但是该方法存在一定的缺陷：一是高密度发酵液需要转到4℃低温环境下促进芽孢化，大规模生产难以实现或者需要付出很大的成本；二是所选生物有机质用量大，且原料价格昂贵，产品生产价格高；三是保藏过程中有效活菌数量仅保持稳定，并未有所增长。
发明内容
本发明的一个目的是解决至少上述问题和/或缺陷，并提供至少后面将说明的优点。
本发明还有一个目的是提供一种液体微生物肥料及其制备方法，其能够在常温下促进微生物芽孢的生成，且在保藏过程中有效活菌数还会大幅度地增长，并能够提高作物的抗寒性能。
为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种液体微生物肥料，所述液体微生物肥料包括以下重量百分比的原料：微生物菌剂70-90％以及糖蜜酒精浓缩液10—30％。
优选的是，所述微生物菌剂为芽孢杆菌。
优选的是，所述芽孢杆菌具有防病促生长的功能。
优选的是，所述糖蜜酒精浓缩液是以糖蜜为原料生产酒精后产生的废液浓缩而成，其锤度在50-70oBx之间。
优选的是，包括以下步骤：
步骤一：选择优良菌株，经划线活化后，挑取单菌落接种至NB液体培养基培养得到种子液；
步骤二：所述种子液经逐级扩大培养，制成高含量的芽孢状态的微生物菌剂；
步骤三：将所述微生物菌剂与糖蜜酒精浓缩液按比例混匀，即得到所述液体微生物肥料。
优选的是，步骤二中制备的微生物菌剂的芽孢率＞90％，微生物菌剂中的有效活菌数＞50亿个/mL。
优选的是，步骤一中，所述NB液体培养基包括以下质量浓度的组分：牛肉浸膏3-5g/L，蛋白胨8-10g/L，氯化钠3-5g/L，pH6.0-6.5。
优选的是，步骤二中，种子液逐级扩大培养的培养基包括以下质量浓度的组分：糖蜜酒精浓缩液70-100g/L，玉米浆干粉10-30g/L，pH6.0-6.5。
优选的是，所述液体微生物肥料中还包括质量分数为0.1-0.5％的壳聚糖。
本发明至少包括以下有益效果：本发明以糖蜜酒精废液为主要原料，能够充分利用糖蜜酒精废液这种资源，实现废液的资源化利用，降低肥料的生产使用成本；同时添加的微生物能将糖蜜酒精废液中的大分子物质，分解成更利于植物吸收的小分子物质，使肥料营养更丰富，易吸收；不含任何合成激素，减少环境污染；添加壳聚糖，提高了作物的抗寒性能以及防病性能。本发明具有制备方法简单、有效活菌数量高以及防病促生抗寒效果显著等特点。
本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
应当理解，本文所使用的诸如“具有”、“包含”以及“包括”术语并不配出一个或多个其它元件或其组合的存在或添加。
实施例1
一种液体微生物肥料，所述液体微生物肥料包括以下重量百分比的原料：枯草芽孢杆菌菌剂70％以及糖蜜酒精浓缩液30％。
实施例2
一种液体微生物肥料，所述液体微生物肥料包括以下重量百分比的原料：枯草芽孢杆菌菌剂90％以及糖蜜酒精浓缩液10％。
实施例3
一种液体微生物肥料，所述液体微生物肥料包括以下重量百分比的原料：解淀粉芽孢杆菌菌剂80％以及糖蜜酒精浓缩液20％。
实施例4
一种液体微生物肥料，所述液体微生物肥料包括以下重量百分比的原料：贝莱斯芽孢杆菌菌剂85％以及糖蜜酒精浓缩液15％。
实施例5
一种液体微生物肥料，所述液体微生物肥料包括以下重量百分比的原料：解淀粉芽孢杆菌和贝莱斯芽孢杆菌复合菌剂75％以及糖蜜酒精浓缩液25％，其中，所述糖蜜酒精浓缩液是以糖蜜为原料生产酒精后产生的废液浓缩而成，其锤度为70oBx。
实施例6
一种液体微生物肥料的制备方法，包括以下步骤：
步骤一：选择优良菌株，经划线活化后，挑取单菌落接种至NB液体培养基培养得到种子液；
步骤二：所述种子液经逐级扩大培养，制成高含量的芽孢状态的微生物菌剂；
步骤三：将所述微生物菌剂与糖蜜酒精浓缩液按比例混匀，即得到所述液体微生物肥料。
实施例7
一种液体微生物肥料的制备方法，包括以下步骤：
步骤一：选择优良菌株，经划线活化后，挑取单菌落接种至NB液体培养基培养得到种子液，其中，NB液体培养基包括以下浓度的组分：牛肉浸膏5g/L，蛋白胨10g/L，氯化钠5g/L，pH6.0；
步骤二：所述种子液经逐级扩大培养，制成高含量的芽孢状态的枯草芽孢杆菌菌剂，其中，枯草芽孢杆菌菌剂的芽孢率为95％，枯草芽孢杆菌有效活菌数为100亿个/mL，扩大培养的培养基包括以下浓度的组分：糖蜜酒精浓缩液80g/L，玉米浆干粉30g/L，pH6.0；
步骤三：将所述微生物菌剂与糖蜜酒精浓缩液按比例混匀，即得到所述液体微生物肥料。
实施例8
一种液体微生物肥料的制备方法，包括以下步骤：
步骤一：选择优良菌株，经划线活化后，挑取单菌落接种至NB液体培养基培养得到种子液，其中，NB液体培养基包括以下浓度的组分：牛肉浸膏5g/L，蛋白胨10g/L，氯化钠5g/L，pH6.0；
步骤二：所述种子液经逐级扩大培养，制成高含量的芽孢状态的枯草芽孢杆菌菌剂，其中，枯草芽孢杆菌菌剂的芽孢率为95％，枯草芽孢杆菌有效活菌数为100亿个/mL，扩大培养的培养基包括以下浓度的组分：糖蜜酒精浓缩液80g/L，玉米浆干粉30g/L，pH6.0；
步骤三：将所述微生物菌剂与糖蜜酒精浓缩液按比例混匀，即得到所述液体微生物肥料；
其中，所述液体微生物肥料还包括质量分数为0.1％的壳聚糖。
对实施例1-8制备的液体微生物肥料中的有效活菌数进行定期检测，结果如表1所示。
表1微生物肥料有效活菌数跟踪检测表
| 30d(10<sup>9</sup>cfu/mL) | 60d(10<sup>9</sup>cfu/mL) | 90d(10<sup>9</sup>cfu/mL) | |
| 实施例1 | 5.1 | 24.6 | 24.2 |
| 实施例2 | 6.6 | 37.3 | 37.5 |
| 实施例3 | 5.5 | 26.5 | 26.8 |
| 实施例4 | 6.2 | 36.1 | 35.9 |
| 实施例5 | 7.9 | 35.9 | 35.0 |
| 实施例6 | 7.1 | 32.7 | 32.6 |
| 实施例7 | 6.9 | 33.7 | 32.6 |
| 实施例8 | 7.5 | 35.6 | 35.1 |
从表1结果可知，本发明方法制备的液体微生物肥料不仅具有合格的保质期，在保存过程中有效活菌数还会大幅度增长。有效活菌数作为微生物肥料的关键核心技术指标，决定着微生物肥料产品的应用效果。本发明的方法不仅能够在有效期内稳定有效活菌数，而且还会使有效活菌数大幅度增加。
应用例1
室内盆栽试验设置3个处理，3次重复，实验小区面积为1m2。
试验设计
处理一：常规施肥(施用泥土重量2％的有机肥)
处理二：常规施肥+基质(供试菌剂经微波灭活)
处理三：常规施肥+供试肥料(实施例1制备的肥料)
试验方法
1.选择菜园土壤，过筛，除去大颗粒，备用；
2.计算好泥土用量，添加泥土重量2％的有机肥，搅拌混匀；
3.将泥土分为三等分，作为三个处理试验土壤。
4.按照试验设计实施各组处理。其中，处理一为常规对照组，除了施用前面添加的有机肥，不再施用任何肥料；处理二为基质对照组，在常规施肥的基础上，施用实施例1制备的微生物肥料经微波灭菌的基质；处理三为试验组，施用实施例1制备的微生物肥料。处理二和处理三所施用肥料等量，从播种开始，每隔7天苗床喷施一次，总共喷施3次。其他按照蔬菜常规种植方法进行管理。
试验28天结束，按照每个小区单收、单打、单计产的原则进行采收计产，结果如表2所示。
表2小白菜室内盆栽产量统计表 单位：千克
由表4可以看出：处理三(常规施肥+供试肥料)比处理一(常规施肥)增产0.9千克，增产率34.6％；处理三比处理二(基质对照)增产0.65千克，增产率22.8％。供试肥料室内盆栽对小白菜的增产效果极为显著。
应用例2
供试肥料：实施例3制备的微生物肥料；
供试作物：芥菜，品种：安吉清甜芥菜。
试验设4个处理，3次重复，采用完全随机区组设计。每一个试验小区面积3.2mX10m＝32m2。
试验设计
处理一：常规施肥(有机肥600千克/亩，尿素25公斤/亩)。
处理二：常规施肥+供试菌剂(4升/亩)。
处理三：常规施肥+基质(灭活供试菌剂，4升/亩)。
处理四：空白对照不施肥。
试验方法
施用方法：菜地起好畦后，按照试验设计撒施腐熟鸡粪有机肥做底肥，处理二、处理三分别苗床喷施供试菌剂和基质，处理四为空白组，不施用任何肥料，施肥完毕，当天播种、浇足水分。施肥时间为：2019年3月29日。
田间管理：2019年3月29日按照试验设计，实施各组处理，播种15天间苗后，除处理四外，追施一次尿素，各个处理的田间管理都一样。全程浇水7次，2019年5月4日收获。
收获和计产：将芥菜带根拔起，清除老叶败叶，扎成把，装框。12个试验小区分开采收，单独计产，同一天采收完毕。
试验结果与分析
1、施用实施例3制备的微生物肥料对芥菜生物学性状的影响
施用实施例3制备的微生物肥料，芥菜长势良好，无病害发生，叶色浓绿，肥厚，有光泽，株型健壮，底部干叶败叶极少，无病叶，根系健康。
2、不同处理对芥菜产量的影响
表3小区产量统计表 产量单位：千克
由上表可以看出：处理二(常规施肥+供试菌剂4升/亩)比处理一(常规施肥)亩增产178.6千克，增产率9.5％；处理二比处理三(常规施肥+基质)亩增产145.9千克，增产率7.7％；处理二比处理四(空白对照不施肥)亩增产554.4千克，增产率37.1％。方差分析表明，各处理间产量差异达到极显著水平。实施例3制备的微生物肥料对芥菜产量增产效果即为显著。
应用例3
供试肥料：实施例5制备的微生物肥料；
供试作物：芥菜，品种：安吉清甜芥菜。
试验设计和方法
本试验在大棚设施内进行，设4个处理，3次重复，采用完全随机区组设计。每一个试验小区面积3m×5m＝15m2。
试验设计
处理一：常规施肥(有机肥800千克/亩，复合肥20千克/亩)。
处理二：常规施肥+供试菌剂(4升/亩)。
处理三：常规施肥+基质(灭活供试菌剂，4升/亩)。
处理四：空白对照不施肥。
试验方法
施用方法：菜地起好畦后，按照试验设计撒施商品有机肥做底肥，处理二、处理三分别均匀喷施供试菌剂和基质，处理四为空白组，不施用任何肥料，施肥完毕，当天播种、浇足水分。施肥时间为：2019年4月2日。
田间管理：2019年4月2日按照试验设计，实施各组处理，播种15天间苗后，除处理四外，追加一次复合肥，各个处理的田间管理都一样。全程浇水11次，2019年5月5日收获。
收获和计产：将芥菜带根拔起，清除老叶败叶，扎成把，装框。12个试验小区分开采收，单独计产，同一天采收完毕。
试验结果与分析
1、微生物肥料对芥菜生物学性状的影响
施用实施例5制备的微生物肥料，芥菜长势良好，无病害发生，叶色浓绿，肥厚，有光泽，株型健壮，底部干叶败叶极少，无病叶，根系健康。
2、不同处理对芥菜产量的影响
表4小区产量统计表 产量单位：千克
由上表可以看出：处理二(常规施肥+供试菌剂4升/亩)比处理一(常规施肥)亩增产177.9千克，增产率8.2％；处理二比处理三(常规施肥+基质)亩增产164.5千克，增产率7.6％；处理二比处理四(空白对照不施肥)亩增产640.3千克，增产率37.6％。方差分析表明，各处理间产量差异达到极显著水平。实施例5制备的微生物肥料对芥菜产量增产效果即为显著。
应用例4
采用实施例7和实施例8制备的液体微生物肥料对西红柿幼苗进行抗冻试验。先在温室中培育西红柿幼苗，选取培育好的健康、无病害的西红柿幼苗一共90株，试验分3组，每组30株幼苗，A组喷施实施例7制备的液体微生物肥料，B组喷施实施例8制备的液体微生物肥料，C组喷施实施例7制备的液体微生物肥料经微波灭菌的基质。48小时后，将西红柿幼苗转移至室外低温环境。每隔48小时观察西红柿幼苗在室外的生长情况。结果表明西红柿幼苗的抗冻能力大幅度提高，对低温环境具有较强的适应能力。试验结果如表5所示。
表5西红柿冻害情况观察表
从表5结果可知，添加壳聚糖后，西红柿幼苗在室外生长的16天内生长良好，没有出现冻伤，表面添加壳聚糖能增强西红柿幼苗的抗冻能力。
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用。它完全可以被适用于各种适合本发明的领域。对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改。因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的实施例。
Claims (9)
1.一种液体微生物肥料，其特征在于，所述液体微生物肥料包括以下重量百分比的原料：微生物菌剂70-90％以及糖蜜酒精浓缩液10-30％。
2.根据权利要求1所述的液体微生物肥料，其特征在于，所述微生物菌剂为芽孢杆菌。
3.根据权利要求2所述的液体微生物肥料，其特征在于，所述芽孢杆菌具有防病促生长的功能。
4.根据权利要求1所述的液体微生物肥料，其特征在于，所述糖蜜酒精浓缩液是以糖蜜为原料生产酒精后产生的废液浓缩而成，其锤度在50-70oBx之间。
5.权利要求1-4任意一项所述的液体微生物肥料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤一：选择优良菌株，经划线活化后，挑取单菌落接种至NB液体培养基培养得到种子液；
步骤二：所述种子液经逐级扩大培养，制成高含量的芽孢状态的微生物菌剂；
步骤三：将所述微生物菌剂与糖蜜酒精浓缩液按比例混匀，即得到所述液体微生物肥料。
6.根据权利要求5所述的液体微生物肥料的制备方法，其特征在于，步骤二中制备的微生物菌剂的芽孢率＞90％，微生物菌剂中的有效活菌数＞50亿个/mL。
7.根据权利要求5所述的液体微生物肥料的制备方法，其特征在于，步骤一中，所述NB液体培养基包括以下质量浓度的组分：牛肉浸膏3-5g/L，蛋白胨8-10g/L，氯化钠3-5g/L，pH6.0-6.5。
8.根据权利要求5所述的液体微生物肥料的制备方法，其特征在于，步骤二中，种子液逐级扩大培养的培养基包括以下质量浓度的组分：糖蜜酒精浓缩液70-100g/L，玉米浆干粉10-30g/L，pH6.0-6.5。
9.根据权利要求5所述的液体微生物肥料的制备方法，其特征在于，所述液体微生物肥料中还包括质量分数为0.1-0.5％的壳聚糖。
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| US20110100078A1 (en) * | 2007-11-26 | 2011-05-05 | Foshan Jinkuizi Plant Nutriment Co., Ltd. | Microorganisms, microbial phosphate fertilizers and methods for preparing such microbial phosphate fertilizers |
| CN106747987A (zh) * | 2016-11-30 | 2017-05-31 | 广西金穗生态科技股份有限公司 | 利用糖蜜酒精浓缩液配合生产功能型生物有机肥的工艺 |
| CN109652336A (zh) * | 2019-01-22 | 2019-04-19 | 广西金穗生态科技股份有限公司 | 一株贝莱斯芽孢杆菌及其应用 |
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