CN109619569A - 一种无花果复合保健酵素及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种无花果复合保健酵素，采用无花果、无花果、香蕉、苹果、梨、慈姑、竹笋、白萝卜、莲藕、中药材、食用菌类等共同制备出一种复合性的保健酵素，先将果蔬通过护色液浸泡，再沸水蒸制，使酶被分开钝化，使酶达到失活的目的，抑制非酶促褐变；另外，本发明采用直接蒸制再打浆的方法，有效防止因氧含量混入浆料而引起褐变；充分过滤后，采用发酵方法进一步处理浆料组织，提高酵素的稳定性和风味口感，选用乳酸菌进行阶段式发酵，使pH值保持在3‑3.5，此pH值范围内的酵素口感最佳。最终获得一种风味浓郁、酵素活性成分高、酸甜适宜、色泽协调、口感爽滑、保健功能强的无花果复合酵素，填补了无花果在复合酵素加工中的空白。

Description

一种无花果复合保健酵素及其制备方法

技术领域

本发明涉及食品生物加工领域，具体涉及一种无花果复合保健酵素及其制备方法。

背景技术

无花果是一种蔷薇目桑科榕属的多年生木本植物，主要生长于一些热带和温带地区。无花果是我国一种产量较大的药食兼用的水果，味道甘甜，具有极高的营养价值。新鲜无花果中含有丰富的功能多糖、氨基酸、多酚类等物质，还有多种脂肪酶、淀粉糖化酶、过氧化物歧化酶等。由于无花果具有抗氧化、抗病毒、抗菌、防癌、降血糖、降胆固醇、润肠通便和抗蠕虫等功效，因此无花果也被誉为“21 世纪人类健康的守护神”。然而，无花果收获季节短且不耐储存，目前主要作为水果消费，这不利于无花果精深加工水平的提高和产业链的延长，影响了无花果产业的发展。因此，将无花果精深加工制成各类产品可以有效提高其利用价值。

酵素（Enzyme），是酶的俗称，是指由氨基酸组成的具有生物催化功能的高分子物质，存在于所有活的动植物内，几乎所有的细胞活动进程都需要酵素的参与，以提高效率。与其他非生物催化剂相似，酵素通过降低化学反应的活化能来加快反应速率。因为外界因素、年龄增长等因素都会导致人体内的酵素减少，当体内酵素作用衰弱或减少时，难免会有各种疾病的出现，所以人体必须要从膳食中摄取更多的酵素。果蔬酵素是以水果蔬菜为原料经多种益生菌发酵而制成的果蔬发酵汁，含有丰富的酶、维生素、矿物质等成分，能满足人体对各类酵素的需求，具有营养与食用快速、便捷的特点。

专利CN105211880A公开了一种无花果酵素的制备方法，其生产的是以无花果为单一原料的酵素液，虽然无花果营养丰富，但发酵后的酵素作用仍然单一；另外，该发明仅利用了无花果内部菌种进行自然发酵，自然发酵模式并不能控制菌种的发酵过程，不能保证每批产品的品质一致、风味一致，且不能保证其内是否存在有害微生物。

专利CN104605448A公开了一种酶素激酶饮品的制备方法，无花果仅作为其中的一种原料加入，无花果的风味被其他如山楂、红枣等风味更强的蔬果掩盖，无花果特有风味得不到体现。

鉴于上述不足，一种风味浓郁、酵素活性成分高、酸甜适宜、色泽协调、口感爽滑，且具有复合性保健效果的酵素是目前行业急需的。

发明内容

本发明的目的在于克服上述不足之处，从而提供一种无花果复合保健酵素及其制备方法。

本发明由如下方法实现：

一种无花果复合保健酵素，由如下重量份配比的原料制成：无花果100份、香蕉2-10份、苹果5-10份、梨5-10份、慈姑3-8份、竹笋3-15份、白萝卜5-10份、莲藕6-10份、中药材1-3份、食用菌类1-7份、护色液0.1-0.3份、蜂蜜0.1-1份、果葡糖浆0.5-1.5份、胶原肽0.05-0.1份、复合乳酸菌0.05-0.1份、蛋白酶0.001-0.007份、纤维素酶0.01-0.03份、果胶酶0.01-0.05份、酸度调节剂0.1-0.5份、β-环糊精0.0001-0.0005份、纯净水适量。

进一步的，该酵素由如下重量份配比的原料制成：无花果100份、香蕉6份、苹果7.5份、梨7.5份、慈姑5.5份、竹笋9份、白萝卜7.5份、莲藕8份、中药材2份、食用菌类4份、护色液0.2份、蜂蜜0.5份、果葡糖浆1.0份、胶原肽0.075份、复合乳酸菌0.1份、蛋白酶0.004份、纤维素酶0.02份、果胶酶0.03份、酸度调节剂0.3份、β-环糊精0.0003份、纯净水若干份。

一种复合保健酵素的制备方法，包括如下步骤：

（1）原料预处理：挑选新鲜无花果、香蕉、苹果、梨、慈姑、竹笋、白萝卜、莲藕，分别切片后置于50-55℃的护色剂中浸泡5-10min，再于沸水中蒸制10min，得预处理原料；

（2）制备果蔬汁：将预处理的原料过胶体磨，得果蔬浆料，随后在45-55℃下以200W水浴超声处理20min，使用酸度调节剂调节pH至6，维持温度下加入纤维素酶、果胶酶，连续搅拌酶解2-4h，得酶解液离心，取上清液经硅藻土及0.1μm膜过滤，得果蔬汁；

（3）第一阶段发酵：将果蔬汁灭菌处理后，加入间歇式供氧负压发酵罐中，物料在无菌环境下冷却至37℃，接入0.08份复合乳酸菌震荡混匀，在37℃下连续发酵24h后得第一阶段酵素液；

（4）制备中药材粉末：中药材清洗消毒后行破碎处理，在40-60℃下，以100-200W，超声处理10-30min，随后加入中药材质量0.01%-0.05%的β-环糊精，混合均匀，干燥粉碎后过200目筛，得中药材粉末备用；

（5）制备食用菌提取液：取食用菌清洗消毒后加入适量纯净水打浆，加入食用菌类质量0.1%的蛋白酶，在37-40℃下超声提取1-1.5h，其中超声功率为200W，将提取物在4000rpm/min下离心10min，取上清液并将其浓缩至原体积的30%，得食用菌类提取液；

（6）第二阶段发酵：将食用菌类提取液、中药材粉末杀菌、混合后加入至间歇式供氧负压发酵罐中，同时向其中加入果葡糖浆、胶原肽、0.02份乳酸菌，震荡混匀，在37℃下发酵至pH3-3.5时停止发酵，得到第二阶段酵素液；

（7）后酵与后熟：将第二阶段酵素液与蜂蜜混合，调整可溶性固形物至40-50%，在4℃下后熟180-360天，即可得到一种无花果复合保健酵素。

进一步的，所述中药材由人参、决明子、菊花、甘草、菖蒲、竹茹、薏苡仁、桔梗中的三种或三种以上组成。

进一步的，所述食用菌为猴头菇、杏鲍菇、牛樟芝、香菇、银耳、木耳中的一种或多种

进一步的，所述护色液由以下重量百分比的原料组成：60%-80%NaCl、10%-30%Vc、10%-15% 柠檬酸以及10-20%茶多酚。

进一步的，所述复合乳酸菌为植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌中的一种或多种。

进一步的，所述酸度调节剂为柠檬酸、L-苹果酸、抗坏血酸、葡萄糖酸中的一种或多种。

进一步的，所述步骤（3）所述灭菌处理温度为98-102℃，压力0.8-1MPa，时间10-15min。

进一步的，步骤（3）、（6）所述间歇式供氧负压发酵工艺的参数为：压力为0.07MPa，供氧时间为4-6h。

本发明与现有产品和技术相比，具有如下优点：

1、由于本发明工艺运用合理且无花果的含量高，因此产品具有浓醇口感且无花果特有风味浓郁。

2、由于本发明使用了阶段式发酵工艺，将果蔬、食用菌类提取液、中药材提取液的酵素有机结合在一起，增进强了酵素活力，有利于人体对酵素需求。

3、由于本发明的工艺是先将果蔬通过护色液浸泡，再沸水蒸制、打浆，使酶被分开钝化，使酶达到失活的目的，抑制非酶促褐变。

4、充分过滤后，采用发酵方法进一步处理浆料组织，提高酵素的稳定性和风味口感，选用乳酸菌进行阶段式发酵，使pH值保持在3-3.5，此pH值范围内的酵素口感最佳。当发酵完毕后，进一步的用蜂蜜调味，当蜂蜜的可溶性固形物在40-50%时，酵素的酸甜适宜，色泽协调，口感爽滑。

5、本发明采用两阶段间歇式供氧负压发酵，能提高产品的质量，维持新鲜水果的天然酵素及功能性成分；且耗费时间更短、效率更高、效果更好、更节能；另外，在第二阶段发酵时添加了果葡糖浆、胶原肽对新加入的乳酸菌进行培养，可使新加入的乳酸菌在短时间内成为优势菌群，使产品香气更丰富、口感更协调、风味更独特、发酵更完全。

6、本发明针对中药材当中含有的苦味，在中药材中加入β-环糊精，于40-60℃条件下，超声功率为100-200W处理10-30min，利用加热和超声波的作用促进苦味物质的溶出，再利用β-环糊精进行包埋，达到理想的脱苦效果。

7、本发明无花果复合酵素的制作方法以风味浓郁、出汁率高、含糖量高无花果为原料，以优选的块大、汁多、味淡的蔬果为辅料，通过微生物的发酵产生大量生物活性物质，极大地增强其保健功能。对混合果浆采用先超声处理后酶解处理工艺，不仅提高了出汁率，还有效地提取了果浆内的营养物质，使产品风味、营养俱佳。

具体实施方法

下面通过实施例对本发明进行具体的描述，有必要在此指出的是本实施例只用于对本发明进行进一步说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，该领域的技术熟练人员可以根据上述本发明的内容作出一些非本质的改进和调整。

实施例1

按表1对应实施例1数据称取各原辅料

一种无花果复合保健酵素

（1）原料预处理：挑选无腐烂、无病虫害、新鲜的无花果、香蕉、苹果、梨、慈姑、竹笋、白萝卜、莲藕，将它们用切片机切片，将其置于50℃的护色剂中浸泡10min，再在沸水上蒸制10min。蒸制完成后使用胶体磨磨浆，得到果蔬浆料，将其置于45℃下水浴超声20min，其中超声功率为200W，然后用酸度调节剂调节pH值至6左右。在同一温度下加入纤维素酶、果胶酶，连续搅拌酶解4h，然后将酶解液离心，取上清液再经硅藻土以及0.1μm膜过滤，得果蔬汁。

（2）第一阶段发酵：将步骤（1）制备的果蔬汁经灭菌后，加入至负压发酵罐中，将物料在无菌环境下冷却至37℃，无菌操作下接入复合乳酸菌，添加量为0.08份，震荡混匀，在温度37℃，连续发酵24h后得到第一阶段酵素液。

（3）第二阶段发酵：将上述的食用菌类提取液、中药材粉末杀菌、混合后加入至负压发酵罐中，同时向其中加入果葡糖浆、胶原肽、0.02份乳酸菌，震荡混匀，在温度37℃下发酵，当发酵液的pH值在3时停止发酵，得到第二阶段酵素液。

（4）后酵与后熟：将第二阶段酵素液与蜂蜜混合，调整可溶性固形物至40%，在4℃处后熟240天得到无花果复合保健酵素。

实施例2

按表1对应实施例2数据称取各原辅料

一种无花果复合保健酵素

（1）原料预处理：挑选无腐烂、无病虫害、新鲜的无花果、香蕉、苹果、梨、慈姑、竹笋、白萝卜、莲藕，将它们用切片机切片，将其置于50℃的护色剂中浸泡10min，再在沸水上蒸制10min。蒸制完成后使用胶体磨磨浆，得到果蔬浆料，将其置于50℃下水浴超声20min，其中超声功率为200W，然后用酸度调节剂调节pH值至6左右。在同一温度下加入纤维素酶、果胶酶，连续搅拌酶解3h，然后将酶解液离心，取上清液再经硅藻土以及0.1μm膜过滤，得果蔬汁。

（2）第一阶段发酵：将步骤（1）制备的果蔬汁经灭菌后，加入至负压发酵罐中，将物料在无菌环境下冷却至37℃，无菌操作下接入复合乳酸菌，添加量为0.08份，震荡混匀，在温度37℃，连续发酵24h后得到第一阶段酵素液。

（3）第二阶段发酵：将上述的食用菌类提取液、中药材粉末杀菌、混合后加入至负压发酵罐中，同时向其中加入果葡糖浆、胶原肽、0.02份乳酸菌，震荡混匀，在温度37℃下发酵，当发酵液的pH值在3.5时停止发酵，得到第二阶段酵素液。

（4）后酵与后熟：将第二阶段酵素液与蜂蜜混合，调整可溶性固形物至50%，在4℃处后熟200天得到无花果复合保健酵素。

对比例1

相较于实施例1而言，未使用阶段式发酵工艺，仅使用了传统的多菌种混合发酵模式。其他步骤及各原料的组分均与实施例1一致。

对比例2

相较于实施例1而言，未添加食用菌提取液以及中药材粉末。其他步骤及各原料的组分均与实施例1一致。

对比例3

相较于实施例1而言，未使用阶段式发酵工艺，仅使用了传统的多菌种混合发酵模式，且未添加食用菌提取液以及中药材粉末，其他步骤及各原料的组分均与实施例1一致。

表1 无花果复合保健酵素配方（单位：kg）

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测试例1：体外抗氧化活性测试

测试材料：实施例1与对比例1、对比例3在相同时间内所制得的无花果复合酵素

测试方法：

1）总还原力测定

分别精密吸取样品0.1 mL置于试管中，然后加入0.9 mL 95%乙醇补足1 mL，同时精密吸取1.0 mL95%乙醇作为空白对照，然后依次加入2.5 mL磷酸缓冲液，再加入2.5 mL1% K₃[Fe(CN)₆]溶液，混合摇匀，封口后，置于水浴锅中50℃恒温水浴20 min。水浴结束后迅速冷却，再加入2.5 mL10%TCA溶液，混合摇匀，4000 rpm/min离心10min后精密量取2.5 mL上清液，依次加入2.5 mL蒸馏水、1.0 mL0.1%FeCl₃溶液，混合摇匀，静置10 min后在波长700 nm处测定吸光度值，以A₇₀₀值大小直接衡量其还原力大小。

2）DPPH自由基清除实验

取2mL样品与2mL0.1mmol/L DPPH溶液混合，在避光室温条件下反应30min，在517nm波长处定吸光度值，以无水乙醇作为参比。取DPPH醇溶液2mL，再加入无水乙醇2mL，混匀反应30min，在波长517nm处测其吸光值，以无水乙醇为空白对照。

DPPH自由基清除率（%）=（1-A实验组/A空白组）×100%

3）羟基自由基清除实验

以磷酸盐缓冲液作为溶剂。取0.1mL样品与0.2mL0.4M的(NH₄)₂Fe(SO₄)₂、0.05mL2mM的Vc、0.05mL20mM 的H₂O₂和0.6mL混合溶液（2.67mM脱氧核糖和0.13mM的EDTA）混合均匀。在37℃孵育15min，加入1mL1%TBA和1mL 2%TCA。将混合物在水浴中煮沸15min并在冰水中冷却，在532nm处测定吸光度，以95%乙醇作为空白对照。

羟基自由基清除率（%）=（1-A实验组/A空白组）×100%

4）超氧阴离子自由基清除实验

以Tris-HCl缓冲液作为溶剂。取0.1mL样品与1mL 557μM的NADH溶液、1mL 45μM的PMS溶液和1mL 108μM的NBT溶液混合均匀，室温温育5min，然后在560nm处测定吸光度。

超氧阴离子自由基清除率（%）=（1-A实验组/A空白组）×100%

测定结果如表2所示。

表2 不同样品的体外抗氧化活性

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酵素中含有大量的抗氧化活性成分，比如多酚、黄酮以及多糖等，这些抗氧化活性成分可以防止食物成分的自氧化，也可以综合人体内产生的过量的自由基。从表2可知，总还原力方面，实施例1的吸光度为0.51，而对比例1（传统的多菌种混合发酵模式）只有0.32，在DPPH、羟基自由基、超氧阴离子自由基清除实验方面，实施例的清除率约为对比例1的2倍，可以明显看出，使用了超声加酶解工艺能显著提高产品的抗氧化活性，其原因在于本发明的原料大多为浆果类果实，果胶、纤维素含量较多，浆液粘稠，即使加入一定量水分，所得汁液经过杀菌冷却后还是会出现胶状沉淀物，导致利用率低，果饮料成本高等问题。在加工过程中采用了间歇式供氧负压发酵工艺，该工艺能提高原料的出汁率并释放更多的营养物质，加速了抗氧化活性成分的逸出。因此，间歇式供氧负压发酵工艺能够有效地提高产品的体外抗氧化活性，进而提高产品的营养性。对比例3相比对比例1取消了食用菌提取液以及中药材粉末，对比例3所制备的保健酵素的抗氧化活性明显低于对比例1所制备的酵素，因此，添加了食用菌提取液以及中药材粉末可以显著提高产品的营养特性。

测试例2：感官评定

测试材料：实施例1与对比例1、对比例3在相同时间内所制得的无花果复合酵素

测试方法：选取经培训的感官评定人员10名，评定前对其讲解品评要求，把产品编号后提供给评价员，品评时要求评价员严肃认真，每次品评后，用清水漱口，等5min后，再品评下一个产品，且品评时不允许相互交流，评价指标分色泽、口感及风味3个方面，各分5个等级，共10分，总分越高说明产品质量越好，评分细则见表4。

表3感官评价评分表

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表4不同发酵工艺对无花果风味酵素的影响

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从表5可以明显看出，实施例1所制得的无花果复合保健酵素，颜色好且色泽均一，有浓郁的无花果香气，且与其他水果的香味相互协调，食用起来口感醇厚，酸甜爽口，无苦涩感。而对比例1（传统的多菌种混合发酵模式）所制得的无花果复合保健酵素有苦涩味明显，与浓郁的无花果风味不协调，食用起来口感一般。因此采用间歇式供氧负压发酵工艺能获得感官更佳的无花果风味酵素。虽然对比例3（相较于对比例1而言，未添加食用菌提取液以及中药材粉末）所制备的酵素没有苦涩味，但是由于在与实施例1同一发酵时间内所制备的酵素没有进行充分发酵，所以酵味较浓，口感一般。

测试例3：生化测试

测试材料：实施例2与对比例2、对比例3所制得的无花果复合酵素

测试方法：固定每日早晨8点给成年健康雄性实验小鼠喂食样品，持续5天，隔最后一次喂食24h后，取颈椎脱位致死的实验小鼠眼眶血样并立即在4℃1500g离心10min已获得血清。利用SOD试剂盒A001-1，CAT试剂盒A007-1，GSH-Px试剂盒A004和MDA试剂盒A003-1对血清进行测定，以TEP作为阳性对照。

测定结果如表5所示。

表5 不同样品的对抗氧化酶的效果

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氧化应激通常被定义为细胞或个体水平上氧化剂和还原剂之间的不平衡，它对人体健康有害，可能导致许多慢性疾病，如肌肉变性、心血管疾病和神经系统疾病，SOD，CAT和GSH-Px是关键的抗氧化酶，可以保护生物免受氧化应激和组织损伤，这是生物系统中ROS和自由基的有害作用的关键防御机制丙二醛（MDA）是脂质过氧化最重要的副产物之一。因此，血清中MDA水平表明脂质过氧化程度。从表2可以看出，添加了食用菌提取液以及中药材粉末的实验例1所制备的酵素具有显著的体内抗氧化潜力，要远优于对比例1（相较于实施例1而言，未使用阶段式发酵工艺，仅使用了传统的多菌种混合发酵模式）。而未添加食用菌提取液以及中药材粉末的对比例3与对比例1相比，SOD活性、CAT活性、GSH-Px活性、MDA含量均低于对比例1，所以添加了食用菌提取液以及中药材粉末的产品有较高的营养价值和体内抗氧化活性。

综上所述，只有在本发明采用两阶段间歇式供氧负压发酵，添加了食用菌提取液以及中药材粉末的工艺与配方上，才能将无花果复合保健酵素的抗氧化活性剂风味提到最高，同时使产品香气更丰富、口感更协调、风味更独特、发酵更完全。

Claims (10)

1.一种无花果复合保健酵素，其特征在于，该酵素由如下重量份配比的原料制成：无花果100份、香蕉2-10份、苹果5-10份、梨5-10份、慈姑3-8份、竹笋3-15份、白萝卜5-10份、莲藕6-10份、中药材1-3份、食用菌类1-7份、护色液0.1-0.3份、蜂蜜0.1-1份、果葡糖浆0.5-1.5份、胶原肽0.05-0.1份、复合乳酸菌0.05-0.1份、蛋白酶0.001-0.007份、纤维素酶0.01-0.03份、果胶酶0.01-0.05份、酸度调节剂0.1-0.5份、β-环糊精0.0001-0.0005份、纯净水适量。

2.根据权利要求1所述的复合保健酵素，其特征在于，该酵素由如下重量份配比的原料制成：无花果100份、香蕉6份、苹果7.5份、梨7.5份、慈姑5.5份、竹笋9份、白萝卜7.5份、莲藕8份、中药材2份、食用菌类4份、护色液0.2份、蜂蜜0.5份、果葡糖浆1.0份、胶原肽0.075份、复合乳酸菌0. 1份、蛋白酶0.004份、纤维素酶0.02份、果胶酶0.03份、酸度调节剂0.3份、β-环糊精0.0003份、纯净水若干份。

3.一种根据权利要求1或2所述复合保健酵素的制备方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：

（1）原料预处理：挑选新鲜无花果、香蕉、苹果、梨、慈姑、竹笋、白萝卜、莲藕，分别切片后置于50-55℃的护色剂中浸泡5-10min，再于沸水中蒸制10min，得预处理原料；

（2）制备果蔬汁：将预处理的原料过胶体磨，得果蔬浆料，随后在45-55℃下以200W水浴超声处理20min，使用酸度调节剂调节pH至6，维持温度下加入纤维素酶、果胶酶，连续搅拌酶解2-4h，得酶解液离心，取上清液经硅藻土及0.1μm膜过滤，得果蔬汁；

（3）第一阶段发酵：将果蔬汁灭菌处理后，加入负压发酵罐中，物料在无菌环境下冷却至37℃，接入0.08份复合乳酸菌震荡混匀，在37℃下连续发酵24h后得第一阶段酵素液；

（4）制备中药材粉末：中药材清洗消毒后行破碎处理，在40-60℃下，以100-200W，超声处理10-30min，随后加入中药材质量0.01%-0.05%的β-环糊精，混合均匀，干燥粉碎后过200目筛，得中药材粉末备用；

（5）制备食用菌提取液：取食用菌清洗消毒后加入适量纯净水打浆，加入食用菌类质量0.1%的蛋白酶，在37-40℃下超声提取1-1.5h，其中超声功率为200W，将提取物在4000rpm/min下离心10min，取上清液并将其浓缩至原体积的30%，得食用菌类提取液；

（6）第二阶段发酵：将食用菌类提取液、中药材粉末杀菌、混合后加入至负压发酵罐中，同时向其中加入果葡糖浆、胶原肽、0.02份乳酸菌，震荡混匀，在37℃下发酵至pH3-3.5时停止发酵，得到第二阶段酵素液；

（7）后酵与后熟：将第二阶段酵素液与蜂蜜混合，调整可溶性固形物至40-50%，在4℃下后熟180-360天，即可得到一种无花果复合保健酵素。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述中药材由人参、决明子、菊花、甘草、菖蒲、竹茹、薏苡仁、桔梗中的三种或三种以上组成。

5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述食用菌为猴头菇、杏鲍菇、牛樟芝、香菇、银耳、木耳中的一种或多种。

6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述护色液由以下重量百分比的原料组成：60%-80%NaCl、10%-30%Vc、10%-15% 柠檬酸以及10-20%茶多酚。

7.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述复合乳酸菌为植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌中的一种或多种。

8.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述酸度调节剂为柠檬酸、L-苹果酸、抗坏血酸、葡萄糖酸中的一种或多种。

9.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）所述灭菌处理温度为98-102℃，压力0.8-1MPa，时间10-15min。

10.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤（3）、（6）所述间歇式供氧负压发酵工艺的参数为：压力为0.07MPa，供氧时间为4-6h。