CN109503612B

CN109503612B - 8-甲氧基补骨脂素的结构修饰物及其制备方法与应用

Info

Publication number: CN109503612B
Application number: CN201710826430.2A
Authority: CN
Inventors: 柳春梅; 赵莹; 李兵; 王赛; 朱慧泽; 孙雨
Original assignee: Beijing University of Agriculture
Current assignee: Beijing University of Agriculture
Priority date: 2017-09-14
Filing date: 2017-09-14
Publication date: 2020-06-16
Anticipated expiration: 2037-09-14
Also published as: CN109503612A

Abstract

本发明公开了8‑甲氧基补骨脂素的结构修饰物及其制备方法与应用。本发明所提供的8‑甲氧基补骨脂素的结构修饰物为式1所示的化合物B₂₀或式2所示的化合物A₁₀。化合物B₂₀在64μg/mL的浓度下对产肠毒素大肠杆菌的抑菌活性是8‑甲氧基补骨脂素的2.3倍；化合物A₁₀在64μg/mL的浓度下对产肠毒素大肠杆菌的抑菌活性是8‑甲氧基补骨脂素的2.4倍。本发明的化合物B₂₀和化合物A₁₀可用于制备治疗和/或预防仔猪腹泻的药物。

Description

8-甲氧基补骨脂素的结构修饰物及其制备方法与应用

技术领域

本发明涉及天然化合物的结构修饰领域中8-甲氧基补骨脂素的结构修饰物及其制备方法与应用。

背景技术

仔猪腹泻是生猪养殖的多发病之一，对生猪的生长影响很大，许多养殖厂因为没有有效的治疗手段，导致仔猪发育缓慢，有的甚至引起大量死亡，造成巨额经济损失。在引起仔猪腹泻的诸多病原菌中，产肠毒素性大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia.coli，ETEC)是引起仔猪腹泻的主要致病因子。目前主要治疗手段是使用抗生素，然而大量抗生素的使用甚至是滥用带来严重的耐药性和药物残留等问题。从生物合成的天然物质中发现生物活性并以此为先导化合物仍是当前药物创制的一条重要途径。

8-甲氧基补骨脂素(如式A所示)属呋喃香豆素类化合物，该化合物在临床治疗白癜风和银屑病主要是通过光敏反应发挥生物效应。补骨脂素光化学疗法(PUVA)是美国FDA以及欧洲许多国家认可的治疗白癜风和牛皮癣的最好方法。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是如何提高8-甲氧基补骨脂素对产肠毒素大肠杆菌的抑菌活性。

为了解决以上技术问题，本发明提供了8-甲氧基补骨脂素的结构修饰物或其药用盐。

本发明所提供的一种8-甲氧基补骨脂素的结构修饰物为如式1所示的化合物：

式1所示的化合物在下文中称为化合物B₂₀。

本发明还提供了含有化合物B₂₀或其药用盐的抗菌药物。

其中，所述抗菌药物对产肠毒素大肠杆菌具有抑制作用。

上述抗菌药物中，所述抗菌药物的活性成分可为化合物B₂₀或其药用盐，所述抗菌药物的活性成分还可含有其它成分，所述抗菌药物的其它活性成分本领域技术人员可根据对产肠毒素大肠杆菌的抑菌效果确定。

化合物B₂₀或其药用盐在制备治疗和/或预防仔猪腹泻产品(药物或饲料)中的应用也属于本发明的保护范围。

本发明还提供了制备化合物B₂₀的方法。

本发明所提供的制备化合物B₂₀的方法，包括：

1)用8-甲氧基补骨脂素制备8-羟基补骨脂素，

2)用8-羟基补骨脂素制备化合物B₂₀。

上述方法中，所述1)可为在三溴化硼的作用下，脱掉8-甲氧基补骨脂素的甲氧基生成羟基，得到8-羟基补骨脂素；和/或，

所述2)是在碱性条件(比如：碳酸钾或碳酸钠)下，使8-羟基补骨脂素与N-二甲基-2-氯-乙胺进行取代反应，得到8-羟基补骨脂素。

上述方法中，所述1)具体包括在冰浴的条件下，用二氯甲烷溶解8-甲氧基补骨脂素得到8-甲氧基补骨脂素溶液；在0-10℃，搅拌下向所述8-甲氧基补骨脂素溶液中滴加三溴化硼，三溴化硼滴加完毕后，在15-30℃反应(如20-30℃或15-25℃)，得到8-羟基补骨脂素。

本发明还提供了另一种8-甲氧基补骨脂素的结构修饰物或其药用盐。该8-甲氧基补骨脂素的结构修饰物为如式2所示的化合物：

式2所示的化合物在下文中称为化合物A₁₀。

本发明还提供了含有化合物A₁₀或其药用盐的抗菌药物。

其中，所述抗菌药物对产肠毒素大肠杆菌具有抑制作用。

上述抗菌药物中，所述抗菌药物的活性成分可为化合物A₁₀或其药用盐，所述抗菌药物的活性成分还可含有其它成分，所述抗菌药物的其它活性成分本领域技术人员可根据对产肠毒素大肠杆菌的抑菌效果确定。

化合物A₁₀或其药用盐在制备治疗和/或预防仔猪腹泻产品(药物或饲料)中的应用也属于本发明的保护范围。

本发明还提供了制备化合物A₁₀的方法。

本发明所提供的制备化合物A₁₀的方法，包括用化合物A₇制备化合物A₁₀；所述化合物A₇的结构式如式2a：

上述方法中，用所示化合物A₇制备化合物A₁₀包括使所述化合物A₇和N-甲基哌嗪进行缩合反应得到化合物A₁₀。

上述方法中，所述化合物A₇是使化合物A₆进行水解反应得到的；

所述化合物A₆的结构式如式2b：

上述方法中，所述化合物A₆是使8-甲氧基补骨脂素与重氮乙酸乙酯发生环丙烷化反应得到的化合物。

本发明的8-甲氧基补骨脂素的结构修饰物的药用盐，包括盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、磷酸盐、硫酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、苹果酸盐、酒石酸盐、没食子酸盐等。

实验证明，化合物B₂₀在64μg/mL的浓度下对产肠毒素大肠杆菌的抑菌活性是8-甲氧基补骨脂素的2.3倍；化合物A₁₀在64μg/mL的浓度下对产肠毒素大肠杆菌的抑菌活性是8-甲氧基补骨脂素的2.4倍。本发明的化合物B₂₀和化合物A₁₀可用于制备治疗和/或预防仔猪腹泻的药物。

附图说明

图1为8-甲氧基补骨脂素的B环5位、8位结构修饰路线。

图2为化合物B₁的合成。

图3为化合物B₂的合成。

图4为化合物B₃的合成。

图5为化合物B₄的合成。

图6为化合物B₅的合成。

图7为化合物B₆的合成。

图8为化合物B₇的合成。

图9为化合物B₈的合成。

图10为化合物B₉的合成。

图11为化合物B₁₀的合成。

图12为化合物B₁₁的合成。

图13为化合物B₁₂的合成。

图14为化合物B₁₃的合成。

图15为化合物B₁₄的合成。

图16为化合物B₁₅的合成。

图17为化合物B₁₆的合成。

图18为化合物B₁₇的合成。

图19为化合物B₁₈的合成。

图20为化合物B₁₉的合成。

图21为化合物B₂₀的合成。

图22为化合物B₂₁的合成。

图23为化合物B₂₂的合成。

图24为化合物B₂₃的合成。

图25为化合物B₂₄的合成。

图26为A环C-6、C-7位合环反应路线。

图27为化合物A₆的合成。

图28为化合物A₇的合成。

图29为化合物A₈的合成。

图30为化合物A₉的合成。

图31为化合物A₁₀的合成。

图32为化合物A₁₁的合成。

图33为化合物C₁的合成。

图34为化合物B₁核磁共振氢谱与质谱。

图35为化合物B₂₀核磁共振氢谱与质谱。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。下述实施中的常温是指25±5℃。下述实施中的室温是指25±5℃。

表1、下述实施例中所用试剂

实施例1、8-甲氧基补骨脂素的结构修饰物的制备

本发明对式M的8-甲氧基补骨脂素母体骨架的A、B、C三环结构修饰，进行修饰的活性位点主要集中在A环(呋喃环)的C-6、C-7位和B环(苯环)的C-8、C-5位。

对8-甲氧基补骨脂素的结构修饰主要分为三部分。

第一部分为对B环(苯环)C-5位、C-8位的结构修饰。在三溴化硼的作用下脱掉8-甲氧基补骨脂素的甲氧基生成羟基。整个反应时间约4h左右，经淬灭后萃取，浓缩干燥后得到大量黄色固体，收率约为82％。以8-羟基补骨脂素为底物，在碱性条件下(例如：碳酸钠或碳酸钾)，与酸酐、不同碳链长度的溴化物、芳香类化合物以及醇类、N，N-二甲基-2-氯-乙胺等进行取代反应，经柱层析纯化后得到B₂-B₇、B₁₂-B₂₁共16个B环C-8位修饰物，收率在34％-91％之间。在DMAP、DCC的作用下，与不同碳链长度的羧化物进行缩合反应，产率在74％-85％之间，以中等收率得到B₈-B₁₁共4个B环C-8位缩合产物。以8-甲氧基补骨脂素为原料，通过硝化反应引入5位硝基，铁粉还原，酸酐取代共得到B₂₂-B₂₄共3个B环C-5位修饰物。此部分结构修饰目的是通过改变取代基的空间位阻和电性，来考察C-5和C-8位取代基对此类化合物的活性影响。

第二部分对A环(呋喃环)C-6位、C-7位的结构修饰。以8-甲氧基补骨脂素为原料，在催化剂的作用下与重氮乙酸乙酯发生加成反应，合环生成化合物A₆，由于反应时间长，反应条件高，导致收率低，产率12.6％。化合物A₆的酯基在氢氧化钠的作用下水解生成羧基，然后在PyBOP的作用下，苯胺等化合物缩合，得到A₈-A₁₁共4个修饰物。A环的结构修饰反应时间较长，条件比较苛刻，收率较低。此部分结构修饰目的是考察A环结构的取代基的改变对活性影响。

第三部分对C环(内酯环)进行结构修饰。以8-甲氧基补骨脂素为底物，在硼氢化钠的作用下内酯环水解得到化合物C₁，产率66.7％。文献报道香豆素类化合物不饱和内酯键是此类化合物的关键活性位点，通过还原得到内酯还原化合物来研究内酯环对此类化合物构效关系。

具体如下：

1、对B环进行修饰

改变B环(苯环)的取代基，改变C-8位的取代基得到化合物B₁-B₂₁，改变C-5位的取代基得到化合物B₂₂-B₂₄(图1-图25)。

(1)化合物B₁的合成

在冰浴的条件下将8-甲氧基补骨脂素(3.0g，13.8mmol)加入到150mL的三颈烧瓶中，50mL的二氯甲烷溶解，搅拌下向其中滴加三溴化硼(1.9mL，20.7mmol)，控制温度使其不超过10℃。三溴化硼滴加完毕，撤掉冰浴，常温搅拌4h。TLC检测反应完毕后，滴加100mL的水萃灭反应液，然后用乙酸乙酯(3×200mL)萃取，有机相用饱和食盐水洗(2×100mL)，无水硫酸钠干燥，减压蒸馏得淡黄色固体(即化合物B₁，8-羟基补骨脂素)2.3g，产率82.1％。8-羟基补骨脂素的结构式如图2中的B₁。

(2)化合物B₂的合成

常温下将化合物B₁(50.0mg，0.24mmol)溶于5mL二氯甲烷中搅拌，加入三乙胺(10.0mg，0.1mmol)，4-二甲氨基吡啶(6.2mg，0.05mmol)，然后加入醋酸酐(50.0mg，0.48mmol)，搅拌5-7h，TLC检测反应完毕。将混合液减压浓缩，加入200mg的硅胶拌样，柱层析分离。洗脱体系用石油醚︰乙酸乙酯＝5:1。将分离产物收集，冻干机冻干，得白色固体(即化合物B₂)21.0mg，产率34.8％。

(3)化合物B₃的合成

化合物B₁(50.0mg，0.24mmol)溶解于4mL的二氯甲烷，搅拌下滴加三乙胺(10.0mg，0.1mmol)，4-二甲氨基吡啶(6.2mg，0.05mmol)，滴加完毕后加入苯甲酰氯(50.0mg，0.35mmol)，室温下搅拌6-8h，利用TLC检测反应进程。反应完毕后浓缩反应液，拌硅胶柱层析分离样品，洗脱剂用石油醚︰乙酸乙酯＝10:1。富集柱层析产物，冻干，得白色固体产物(即化合物B₃)36.1mg，产率48.0％。

(4)化合物B₄的合成

在圆底烧瓶中加入化合物B₁(50.0mg，0.24mmol)，加入5mL的二氯甲烷中溶解，搅拌下加入三乙胺(10.0mg，0.1mmol)，4-二甲氨基吡啶(6.2mg，0.05mmol)，然后加入3-氯苯甲酰氯(50.0mg，0.28mmol)，25℃下搅拌4-5h左右，TLC检测反应。体系浓缩后用石油醚︰乙酸乙酯＝5:1柱层析纯化，减压浓缩，最终得到目标化合物。收集产物，冻干，获得白色粉末(即化合物B₄)45.3mg，产率53.5％。

(5)化合物B₅的合成

在25℃下将化合物B₁(50.0mg，0.24mmol)加入圆底烧瓶中，滴加4mL的二氯甲烷溶解搅拌，滴加4-二甲氨基吡啶(6.2mg，0.05mmol)，三乙胺(10.0mg，0.1mmol)，最后滴加对氯苯甲酰氯(50.0mg，0.28mmol)，室温下搅拌4-6h，通过TLC检测反应。反应完成后浓缩，硅胶拌样，上柱层析分离。洗脱剂用石油醚︰乙酸乙酯＝8:1。收集分离产物，冻干机冻干，得到白色粉末(即化合物B₅)56.1mg，产率66.6％。

(6)化合物B₆的合成

将化合物B₁(50.0mg，0.24mmol)溶于3mL二氯甲烷中搅拌，加入三乙胺(10.0mg，0.1mmol)，4-二甲氨基吡啶(6.2mg，0.05mmol)，然后加入2-氯苯甲酰氯(50.0mg，0.28mmol)，搅拌6-8h，TLC检测反应。体系浓缩后用石油醚︰乙酸乙酯＝10:1～5:1柱层析纯化，减压浓缩得到产物，将分离产物收集，烘干，得白色粉末(即化合物B₆)39.2mg，产率46.4％。

(7)化合物B₇的合成

室温下将化合物B₁(50.0mg，0.24mmol)溶于5mL二氯甲烷中搅拌，加入三乙胺(10.0mg，0.1mmol)，4-二甲氨基吡啶(6.2mg，0.05mmol)，然后加入甲氧基乙酰氯(50.0mg，0.46mmol)，搅拌6-8h，TLC检测反应完毕。将混合液减压浓缩，柱层析分离，洗脱体系用石油醚︰乙酸乙酯＝10:1-5:2。将分离产物收集，冻干机冻干，得淡黄色粉末(即化合物B₇)41.0mg，产率61.2％。

(8)化合物B₈的合成

将化合物B₁(97.0mg，0.48mmol)溶于6mL二氯甲烷中搅拌，加入N,N-二环己基碳二亚胺(206.0mg，1mmol)，4-二甲氨基吡啶(6.2mg，0.05mmol)，称量肉蔻豆酸(124.0mg，0.54mmol)加入，室温搅拌6-8h，TLC检测完成反应。体系浓缩后用石油醚︰乙酸乙酯＝10:1-5:1柱层析纯化，减压浓缩，最终得到最终产物。收集目标化合物，烘干，得白色粉末(即化合物B₈)174.3mg，产率85.7％。

(9)化合物B₉的合成

准确称量化合物B₁(97.0mg，0.48mmol)加入到圆底烧瓶中放置在磁力搅拌器上，加入5mL的二氯甲烷溶解，搅拌下加入4-二甲氨基吡啶(6.2mg，0.05mmol)，N,N-二环己基碳二亚胺(206.0mg，1mmol)，最后加入棕榈酸(126.0mg，0.49mmol)，搅拌8-10h，TLC检测，反应完成后将混合液浓缩，柱层析分离。洗脱体系用石油醚︰乙酸乙酯＝10:1-5:2。将分离产物收集，烘干，得到白色粉末(即化合物B₉)183.1mg，产率84.3％。

(10)化合物B₁₀的合成

将化合物B₁(97.0mg，0.48mmol)加入到圆底烧瓶中，搅拌下加入二氯甲烷溶解，然后加入N,N-二环己基碳二亚胺(206.0mg，1mmol)，4-二甲氨基吡啶(6.2mg，0.05mmol)，最后加入亚油酸(138.0mg，0.48mmol)，搅拌7-8h，TLC检测反应完毕。体系浓缩后用石油醚︰乙酸乙酯＝10:1-5:2柱层析纯化，减压浓缩，最终干燥得到产物，黄白色固体(即化合物B₁₀)171.1mg，产率74.2％。

(11)化合物B₁₁的合成

称取化合物B₁(97.0mg，0.48mmol)溶于10mL的二氯甲烷中，加入4-二甲氨基吡啶(6.2mg，0.05mmol)，N,N-二环己基碳二亚胺(206.0mg，1mmol)，最后加入硬脂酸(140mg，0.48mmol)，搅拌8-10h，TLC监测反应完成。将混合液减压浓缩，硅胶拌样柱层析分离。洗脱体系用石油醚：乙酸乙酯＝10:1-5:2。将分离产物收集，冻干机冻干，得白色固体(即化合物B₁₁)180.4mg，产率77.9％。

(12)化合物B₁₂的合成

准确称量化合物B₁(52.5mg，0.26mmol)溶于3mL的二甲基甲酰胺中，搅拌下加入碳酸钾(110.0mg，0.8mmol)，然后将1-溴代正己烷(124.0mg，0.8mmol)加入到混合液中，转移到恒温磁力搅拌器上50℃搅拌6-8h，TLC检测反应完毕。将10mL 1M的盐酸滴加到混合液中，用氯仿(3×20mL)萃取，用饱和食盐水(2×10mL)萃取有机相，将萃取后的有机相减压浓缩，拌硅胶柱层析。洗脱体系用石油醚︰乙酸乙酯＝10:1。收集分离的目标物，干燥得白色固体(即化合物B₁₂)51.0mg。产率：68.9％。

(13)化合物B₁₃的合成

将化合物B₁(107.2mg，0.53mmol)溶于4mL的二甲基甲酰胺中，搅拌加入碳酸钠(168.5mg，1.59mmol)，然后将溴代十二烷(396.3mg，1.59mmol)加入到混合液中，转移到恒温磁力搅拌器上50℃搅拌3-4h，TLC检测反应完毕。用10mL 1M的盐酸滴加到混合液中，氯仿(3×20mL)萃取，饱和食盐水(2×10mL)萃取有机相，将萃取后的有机相浓缩后用石油醚︰乙酸乙酯＝10:1柱层析纯化，减压浓缩，最终干燥得到产物。得白色固体(即化合物B₁₃)180.5mg。产率：91.8％。

(14)化合物B₁₄的合成

准确称量化合物B₁(107.2mg，0.53mmol)加入圆底烧瓶中，加入6mL的二甲基甲酰胺溶解，称量固体碳酸钠(168.5mg，1.59mmol)加入混合液中，然后将溴代十四烷(440.9mg，1.59mmol)加入到混合液中，转移到恒温磁力搅拌器上50℃搅拌4h，TLC检测反应。反应结束后将10mL 1M的盐酸滴加到混合液中，用氯仿(3×20mL)萃取，饱和食盐水(2×10mL)萃取有机相，将萃取后的有机相减压浓缩，拌硅胶柱层析。洗脱体系用石油醚︰乙酸乙酯＝10:1。收集分离的目标物，冻干机冻干，得白色固体(即化合物B₁₄)170.2mg。产率：80.5％。

(15)化合物B₁₅的合成

将化合物B₁(107.2mg，0.53mmol)溶于4mL的二甲基甲酰胺中，搅拌下加入碳酸钠(168.5mg，1.59mmol)，搅拌均匀后加入溴代十六烷(485.5mg，1.59mmol)到混合液中，随后转移到恒温磁力搅拌器上50℃搅拌4-5h，TLC检测反应完毕。将10mL 1M的盐酸滴加到混合液中，用氯仿(3×20mL)萃取，饱和食盐水(2×10mL)萃取有机相，将萃取后的有机相浓缩后用石油醚︰乙酸乙酯＝10:1柱层析纯化，减压浓缩，最终干燥得到产物，得白色固体(即化合物B₁₅)165.4mg。产率：77.5％。

(16)化合物B₁₆的合成

称取化合物B₁(107.2mg，0.53mmol)溶于6mL的二甲基甲酰胺中，搅拌下加入碳酸钠(168.5mg，1.59mmol)，然后将溴代十八烷(530.0mg，1.59mmol)加入到混合液中，将反应体系转移到恒温磁力搅拌器上50℃搅拌4-5h，TLC检测反应完毕。将10mL1M的盐酸滴加到混合液中，用氯仿(3×20mL)萃取，用饱和食盐水(2×10mL)萃取有机相，将萃取后的有机相减压浓缩，拌硅胶柱层析。收集分离的目标物，冻干机冻干，得白色固体(即化合物B₁₆)200.0mg。产率：83.3％。

(17)化合物B₁₇的合成

将化合物B₁(107.2mg，0.53mmol)溶于4mL的二甲基甲酰胺中，加入碳酸钠(168.5mg，1.59mmol)搅拌，然后将1-溴代-3-甲基-2-丁烯(236.9mg，1.5mmol)加入到混合液中，转移到恒温磁力搅拌器上50℃搅拌5h，TLC检测反应完毕。将10mL1M的盐酸滴加到混合液中，用氯仿(3×20mL)萃取，用饱和食盐水(2×10mL)萃取有机相，将萃取后的有机相减压浓缩，拌硅胶柱层析。洗脱体系用石油醚︰乙酸乙酯＝10:1。富集目标物，干燥后得白色固体(即化合物B₁₇)84.2mg。产率：58.7％。

(18)化合物B₁₈的合成

量取1-溴代乙醇(198.7mg，1.59mmol)加入到化合物B₁(107.2mg，0.53mmol)与碳酸钠(168.5mg，1.59mmol)的二甲基甲酰胺溶液中，50℃搅拌4-6h，TLC检测反应。待反应完毕后，加入5mL的水淬灭，将10mL 1M的盐酸滴加到混合液中，用氯仿(3×20mL)萃取，用饱和食盐水(2×10mL)萃取有机相，将萃取后的有机相浓缩后用石油醚︰乙酸乙酯＝10:1柱层析纯化，减压浓缩，最终干燥得到产物，得白色固体(即化合物B₁₈)67.0mg。产率：51.3％。

(19)化合物B₁₉的合成

室温下将1-溴代丙醇(221.0mg，1.59mmol)加入到化合物B₁(107.2mg，0.53mmol)与碳酸钾(219.7mg，1.59mmol)的二甲基甲酰胺溶液中，然后转移到恒温磁力搅拌器上，50℃搅拌5h，TLC检测反应。加入5mL的水淬灭，将10mL 1M的盐酸滴加到混合液中，用氯仿(3×20mL)萃取，用饱和食盐水(2×10mL)萃取有机相，将萃取后的有机相减压浓缩，进行硅胶柱层析(洗脱体系用PE(石油醚):EA(乙酸乙酯)＝5:1)。收集分离的目标物，烘干，得白色固体(即化合物B₁₉)70.5mg。产率：51.5％。

(20)化合物B₂₀的合成

称取化合物B₁(107.2mg，0.53mmol)与碳酸钾(219.7mg，1.59mmol)，加入到N,N-二甲基甲酰胺中，然后将N,N-二甲基-2-氯乙胺(228.9mg，1.59mmol)加入到混合液中，50℃搅拌6h，TLC检测反应。加入5mL的水淬灭，将10mL 1M的盐酸滴加到混合液中，用氯仿(3×20mL)萃取，用饱和食盐水(2×10mL)萃取有机相，将萃取后的有机相浓缩后用石油醚︰乙酸乙酯＝1:2(体积比)柱层析纯化，减压浓缩，最终干燥得到产物。得淡黄色固体(即化合物B₂₀)75.0mg。产率：50.3％。

化合物B₂₀的结构式如式1：

(21)化合物B₂₁的合成

称取N,N-二甲基-3-氯-丙胺(251.3mg，1.59mmol)加入到化合物B₁(107.2mg，0.53mmol)与碳酸钾(219.7mg，1.59mmol)的二甲基甲酰胺溶液中，然后转移到恒温磁力搅拌器上，55℃搅拌4-6h，TLC检测反应。待反应结束后，加入5mL的水淬灭，将10mL 1M的盐酸滴加到混合液中，用氯仿(3×20mL)萃取，用饱和食盐水(2×10mL)萃取有机相，将萃取后的有机相减压浓缩，进行硅胶柱层析(洗脱体系用PE:EA＝1:2)。收集分离的目标物，冻干机冻干，得淡黄色固体(即化合物B₂₁)77.3mg。产率：50.6％。

(22)化合物B₂₂的合成

将8-甲氧基补骨脂素(1.1g，5mmol)溶于15mL的冰醋酸中，冰浴下搅拌滴加发烟硝酸(0.9mL，20mmol)，温度保持在20℃下，滴加完毕搅拌3h，TLC检测反应完毕。将混合体系倒入冰水中，用1M的氢氧化钠溶液调节pH值至中性，有大量固体析出，过滤，用少量水洗固体两次，烘干。得黄色粉末(即化合物B₂₂)1.0g。产率：74.1％。

(23)化合物B₂₃的合成

将化合物B₂₂(100.0mg，0.38mmol)溶于10mL的乙醇与5mL的水中，搅拌加入铁粉(90.0mg，1.60mmol)，加入氯化铵固体(85.0mg，1.6mmol)，反应加热到80℃，搅拌2h，TLC检测。将反应完毕的混合液减压浓缩，柱层析分离产物(洗脱体系用PE:EA＝5:2)。得黄色固体(即化合物B₂₃)36.3mg。产率：42.4％。

(24)化合物B₂₄的合成

化合物B₂₃(50.0mg，0.23mmol)溶于3mL的二氯甲烷中，加入三乙胺0.5mL，醋酸酐(46.0mg，0.45mmol)，常温搅拌6h。TLC检测反应完毕，将混合液减压浓缩，柱层析分离产物(洗脱体系用PE:EA＝5:2)。得黄色固体(即化合物B₂₄)25.0mg。产率：42.3％。

2、对A环进行修饰

对于A环(呋喃环)，改变A环的C-6，C-7位取代基，通过引入不通的取代基来研究构效关系(图26-图32)。

(1)化合物A₆的合成

室温下，(S,S)-2,2-异亚丙基双(4苯基-2恶唑啉)(50.0mg，0.15mmol)与三氟甲烷磺酸亚铜甲苯络合物(50.0mg，0.1mmol)溶于5mL的二氯甲烷中，氮气保护下搅拌1h，加入8-甲氧基补骨脂素(2.0g，1mmol)搅拌1h，缓慢滴加重氮乙酸乙酯溶液(100.0mL，0.18mol/L)，滴加时间在10h左右，TLC检测反应完毕。用0.05mol/L的乙二胺四乙酸二钠(2×100mL)洗涤反应液，再用饱和食盐水(2×100mL)洗涤有机相，然后将有机相减压浓缩，柱层析分离(洗脱体系PE:EA＝20:1)。得黄色固体(即化合物A₆)404.0mg.产率：12.6％。

化合物A₆的结构式如式2b：

(2)化合物A₇的合成

室温下，化合物A₆(82.0mg，0.26mmol)溶于5mL的甲醇中，加入1mol/L的氢氧化钠4mL，常温搅拌2h，TLC检测反应完毕。用1mo/L的稀盐酸10mL酸化反应液，用乙酸乙酯(2×20mL)萃取，浓缩，柱层析分离(洗脱体系PE:EA＝5:2)。得淡黄色固体(即化合物A₇)64.2mg.产率：86.4％。

所述化合物A₇的结构式如式2a：

(3)化合物A₈的合成

将化合物A₇(54.8mg，0.2mmol)溶于5mL的二氯甲烷中，搅拌滴加三乙胺(70.0mg，0.6mmol)，滴加完毕加入六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷(200.0mg，0.4mmol)，后加入甲氧胺盐酸盐(19.9mg，0.24mmol)，室温搅拌4-5h，TLC检测反应完毕。用制备薄层板分离样品，收集目标物。得淡黄色固体(即化合物A₈)20.2mg。产率：33.3％。

(4)化合物A₉的合成

在圆底烧瓶中加入化合物A₇(54.8mg，0.2mmol)，加入5mL的二氯甲烷溶解，搅拌滴加三乙胺(70.0mg，0.6mmol)，滴加完毕加入六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷(200.0mg，0.4mmol)，最后加入异丙胺(14.2mg，0.24mmol),室温搅拌4-6h，TLC检测反应完毕。用制备薄层板分离样品，收集目标物。得白色固体(即化合物A₉)25.3mg。产率：34.5％。

(5)化合物A₁₀的合成

室温下将化合物A₇(54.8mg，0.2mmol)溶于5mL的二氯甲烷中，搅拌滴加三乙胺(70.0mg，0.6mmol)，加入六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷(200.0mg，0.4mmol)，最后加入N-甲基哌嗪(24.0mg，0.24mmol),室温搅拌6-8h，TLC检测反应完毕。用制备薄层板分离样品，收集目标物。得淡黄色固体(即化合物A₁₀)26.2mg。产率：37.2％。

化合物A₁₀的结构式如式2：

(6)化合物A₁₁的合成

化合物A₇(54.8mg，0.2mmol)溶于5mL的二氯甲烷中，搅拌滴加三乙胺(70.0mg，0.6mmol)，滴加完毕加入六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷(200mg，0.4mmol)，最后加入苯胺(22.3mg，0.24mmol),室温搅拌8h，TLC检测反应完毕。用制备薄层板分离样品，收集目标物。得白色固体(即化合物A₁₁)34.5mg。产率：35.6％。

3、C环(内酯环)结构修饰

冰浴下将8-甲氧基补骨脂素(216.2mg，1mmol)溶于5mL的四氢呋喃中，搅拌下加入硼氢化钠(75.7mg，2mmol)，升至室温搅拌6h，TLC检测反应(图33)。用制备薄层板分离样品，收集目标物，得白色固体(即化合物C₁)147.4mg。产率：66.7％。

4、结构解析

化合物B₁淡黄色固体，产率82.1％；¹H NMR(400MHz,DMSO)δ10.66(s,1H),8.10(d,J＝9.6Hz,1H),8.08(d,J＝2.0Hz,1H),7.45(s,1H),7.03(d,J＝2.4Hz,1H),6.40(d,J＝9.6Hz,1H)(图34)。)

化合物B₂白色固体，产率34.8％；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.84(d,J＝9.6Hz,1H),7.75(d,J＝2.4Hz,1H),7.55(s,1H),6.82(d,J＝2.4Hz,1H),6.35(d,J＝9.6Hz,1H),2.49(s,3H)。

化合物B₃白色固体，产率48.0％；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.36(d,J＝1.2Hz,1H),8.28(d,J＝1.2Hz,1H),7.82(d,J＝9.6Hz,1H),7.74(d,J＝2.4Hz,1H),7.70(d,J＝2.4Hz,1H),7.60(d,J＝2.4Hz,1H),7.55(s,1H),6.87(d,J＝2.4Hz,1H),6.39(d,J＝9.6Hz,1H)。

化合物B₄白色固体，产率53.5％；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.29(d,J＝2.0Hz,1H),8.14(s,1H),7.82(d,J＝9.6Hz,1H),7.71(d＝1.2,1H),7.65(d,J＝2.4Hz,1H),7.62(s,1H),7.50(t,J＝8.0Hz,1H),6.88(d,J＝2.4Hz,1H),6.38(d,J＝9.6Hz,1H)。

化合物B₅白色固体，产率66.6％；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.24(d,J＝2.0Hz,,1H),7.81(d,J＝9.6Hz,1H),7.68(d,J＝2.4Hz,1H),7.61(s,1H),7.50(d,J＝2.4Hz,1H),6.87(d,J＝2.4Hz,1H),6.38(d,J＝9.6Hz,1H)。

化合物B₆白色固体，产率46.4％；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.32(d,J＝1.2Hz,1H),8.28(d,J＝1.2Hz,1H)7.81(d,J＝9.6Hz,1H),7.68(d,J＝2.4Hz,1H),7.61(s,1H),7.55(d,J＝2.4Hz,1H),6.87(d,J＝2.4Hz,1H),6.38(d,J＝9.6Hz,1H)。

化合物B₇淡黄色粉末，产率61.2％；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.79(d,J＝9.6Hz,1H),7.69(d,J＝2.4Hz,1H),7.58(s,1H),6.86(d,J＝2.4Hz,1H),6.38(d,J＝9.6Hz,1H),4.54(s,2H),3.62(s,3H)。

化合物B₈白色粉末，产率85.7％；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.78(d,J＝9.6Hz,1H),7.68(d,J＝2.0Hz,1H),7.55(s,1H),6.84(d,J＝2.0Hz,1H),6.37(d,J＝9.6Hz,1H),2.79(t,J＝7.6Hz,2H),1.92–1.81(m,2H),1.56–1.45(m,2H),1.43–1.13(m,20H),0.88(t,J＝6.8Hz,3H)。

化合物B₉白色粉末，产率84.3％；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.77(d,J＝9.6Hz,1H),7.67(d,J＝2.0Hz,1H),7.55(s,1H),6.84(d,J＝2.0Hz,1H),6.36(d,J＝9.6Hz,1H),2.78(t,J＝7.6Hz,2H),1.85(dd,J＝15.2,7.6Hz,2H),1.50(dd,J＝15.2,7.6Hz,2H),1.43–1.10(m,24H),0.88(t,J＝6.7Hz,3H)。

化合物B₁₀黄白色固体，产率74.2％；¹H NMR(400MHz,DMSO)δ8.21(d,J＝9.6Hz,1H),8.13(d,J＝2.4Hz,1H),7.94(s,1H),7.17(d,J＝2.4Hz,1H),6.48(d,J＝9.6Hz,1H),5.41–5.13(m,4H),3.33(s,2H),2.79(t,J＝7.2Hz,2H),2.73(t,J＝6.0Hz,2H),2.00(dt,J＝13.2,6.8Hz,4H),1.84–1.62(m,3H),1.45(dd,J＝14.0,6.4Hz,2H),1.31(d,J＝10.2Hz,6H),1.30–1.12(m,8H),0.83(dd,J＝11.6,5.0Hz,3H)。

化合物B₁₁白色固体，产率：77.9％；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.77(d,J＝9.6Hz,1H),7.67(d,J＝2.0Hz,1H),7.55(s,1H),6.84(d,J＝2.0Hz,1H),6.36(d,J＝9.6Hz,1H),2.79(t,J＝7.6Hz,2H),1.92–1.80(m,2H),1.54–1.44(m,2H),1.26(s,23H),0.88(t,J＝6.8Hz,3H)。

化合物B₁₂白色固体，产率：80.5％；¹H NMR(400MHz,DMSO)δ8.13(d,J＝9.6Hz,1H),8.10(d,J＝2.0Hz,1H),7.66(s,1H),7.08(d,J＝2.0Hz,1H),6.42(d,J＝9.6Hz,1H),4.38(t,J＝6.4Hz,1H),3.32(d,J＝9.2Hz,1H),1.80–1.61(m,1H),1.59–1.39(m,1H),1.37–1.22(m,2H),1.03–0.60(m,2H)。

化合物B₁₃白色固体，产率：91.8％；¹H NMR(400MHz,DMSO)δ8.13(d,J＝9.6Hz,1H),8.10(d,J＝2.0Hz,1H),7.66(s,1H),7.08(d,J＝2.0Hz,1H),6.42(d,J＝9.6Hz,1H),4.37(t,J＝6.5Hz,2H),1.82–1.65(m,2H),1.59–1.39(m,2H),1.39–1.09(m,18H),0.82(t,J＝6.8Hz,3H)。

化合物B₁₄白色固体，产率：80.5％；8.13(d,J＝9.6Hz,1H),8.10(d,J＝2.0Hz,1H),7.66(s,1H),7.08(d,J＝2.0Hz,1H),6.42(d,J＝9.6Hz,1H),4.37(t,J＝6.4Hz,2H),3.32(d,J＝9.6Hz,1H),1.97–1.58(m,1H),1.58–1.37(m,1H),1.37–1.04(m,10H),0.83(t,J＝6.7Hz,2H)。

化合物B₁₅白色固体，产率：77.5％；8.13(d,J＝9.6Hz,1H),8.10(d,J＝2.0Hz,1H),7.66(s,1H),7.08(d,J＝2.0Hz,1H),6.42(d,J＝9.6Hz,1H),4.37(t,J＝6.4Hz,2H),3.51(t,J＝6.4Hz,2H),1.75(dd,J＝12.4,7.6Hz,2H),1.42–0.97(m,34H),0.97–0.79(m,4H)。

化合物B₁₇白色固体，产率：58.7％；¹H NMR(400MHz,DMSO)δ8.14(d,J＝9.6Hz,1H),8.11(d,J＝2.0Hz,1H),7.68(s,1H),7.10(t,J＝2.0Hz,1H),6.43(d,J＝9.6Hz,1H),5.77–5.35(m,1H),4.91(m,2H),1.66(s,6H)。

化合物B₁₈白色固体，产率：51.3％；¹H NMR(400MHz,MeOD)δ8.01(d,J＝9.6Hz,1H),7.88(d,J＝2.4Hz,1H),7.55(s,1H),6.95(d,J＝2.4Hz,1H),6.37(d,J＝9.6Hz,1H),4.89(s,3H),4.61–4.42(m,2H),4.05–3.89(m,2H)。

化合物B₁₉白色固体，产率：51.5％；¹H NMR(400MHz,DMSO)δ8.13(d,J＝10.0Hz,1H),8.12(d,J＝2.4Hz,1H),7.67(d,J＝8.8Hz,1H),7.55(s,1H),7.09(d,J＝2.0Hz,1H),6.43(d,J＝9.6Hz,1H),4.56(dd,J＝6.4,4.0Hz,1H),4.48(dd,J＝10.8,4.4Hz,1H),4.16–4.07(m,1H),3.34(d,J＝9.6Hz,1H),1.96–1.84(m,2H)。

化合物B₂₀淡黄色固体，产率：50.3％；¹H NMR(400MHz,DMSO)δ8.13-8.17(m,2H),7.70(s,1H),7.11(d,J＝2.0Hz,1H),6.44(d,J＝1.6Hz,1H),4.49-4.53(m,2H),2.87-2.88(m,2H),2.38(s,6H)(图35)。

化合物B₂₁淡黄色固体，产率：50.6％；¹H NMR(400MHz,DMSO)δ8.14(d,J＝9.6Hz,1H),8.11(d,J＝2.0Hz,1H),7.68(s,1H),7.10(d,J＝2.4Hz,1H),6.44(d,J＝9.6Hz,1H),4.43(t,J＝6.4Hz,1H),2.45(t,J＝7.2Hz,2H),2.13(s,3H),1.93–1.79(m,2H)。

化合物B₂₂黄色粉末，产率：74.1％；¹H NMR(400MHz,DMSO)δ8.64(d,J＝10.0Hz,1H),8.45(d,J＝2.4Hz,1H),7.40(d,J＝2.4Hz,1H),6.77(d,J＝10.0Hz,1H),4.42(s,3H)。

化合物B₂₃黄色粉末，产率：42.4％；¹H NMR(400MHz,DMSO)δ8.33(d,J＝9.6Hz,1H),7.86(d,J＝2.0Hz,1H),7.20(d,J＝2.0Hz,1H),6.53(s,1H),6.13(d,J＝9.6Hz,1H),3.95–3.85(m,3H)。

化合物B₂₄黄色粉末，产率：42.3％；¹H NMR(400MHz,DMSO)δ8.20(d,J＝2.0Hz,1H),8.03(d,J＝9.6Hz,1H),7.15(d,J＝2.0Hz,1H),6.52(d,J＝9.6Hz,1H),4.26(s,3H),3.34(d,J＝9.4Hz,3H)。

化合物A₆黄色固体，产率：12.6％；¹H NMR(400MHz,DMSO)δ7.99(d,J＝9.6Hz,1H),7.50(s,1H),6.33(d,J＝9.6Hz,1H),5.44(dd,J＝5.2,0.8Hz,1H),4.27–4.04(m,2H),3.93(s,3H),3.45(dd,J＝5.2,3.2Hz,1H),1.56(dd,J＝3.2,1.0Hz,1H),1.32–1.03(m,3H)。

化合物A₇淡黄色固体,[M+H]⁺＝275

化合物A₈淡黄色固体，产率：33.3％；¹H NMR(400MHz,DMSO)δ7.99(d,J＝9.6Hz,1H),7.52(s,1H),6.34(d,J＝9.6Hz,1H),5.32(d,J＝5.2Hz,1H),3.92(s,3H),3.33(s,3H),1.43–1.01(m,1H),0.98–0.63(m,1H)。

化合物A₉淡黄色固体，产率：34.5％；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.98(d,J＝10.0Hz,1H)，δ7.63(d,J＝9.6Hz,1H),7.21(s,1H),6.27(d,J＝9.,6Hz,1H),5.08(dd,J＝13.1,7.2Hz,1H),4.77(d,J＝5.6Hz,1H),4.07(d,J＝7.1Hz,3H),3.43(d,J＝17.0Hz,1H),2.85(d,J＝7.5Hz,1H),1.19(d,J＝6.5Hz,3H)。

化合物A₁₀淡黄色固体；¹H NMR(400MHz,DMSO)δ7.99(d,J＝9.6Hz,1H),7.54(s,1H),7.31(t,J＝7.9Hz,2H),6.32(d,J＝9.6Hz,1H),5.27(d,J＝5.6Hz,1H),3.94(s,3H),3.46-3.50(m,4H),2.99-3.01(m,1H),2.26-2.32(m,6H),2.18(s,3H)。

化合物A₁₁白色固体，产率：35.6％；¹H NMR(400MHz,DMSO)δ8.02(d,J＝9.6Hz,1H),7.56(d,J＝2.0Hz,2H),7.54(s,1H),7.31(t,J＝8.0Hz,2H),7.06(d,J＝7.2Hz,1H),6.35(d,J＝9.6Hz,1H),5.41(d,J＝5.6Hz,1H),3.95(s,3H),3.42(dd,J＝5.2,3.2Hz,1H),3.33(d,J＝9.6Hz,8H),2.58–2.42(m,9H),1.61(d,J＝2.4Hz,1H),1.23(s,3H)。

实施例2、8-甲氧基补骨脂素的结构修饰物对产肠毒素大肠杆菌的抑菌活性

本实验对实施例1合成的8-甲氧基补骨脂素的结构修饰物采用常量肉汤二倍稀释法测定其最小抑菌浓度(MIC值)进行体外对产肠毒素大肠杆菌抑菌效果的评价。通过对比不加抗菌药物的阳性对照，来计算其抑菌率。

1、材料与方法

1.1实验材料

1.1.1供试菌株

本实施例中的产肠毒素大肠杆菌为产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenicEscherichia coli，ETEC))F4ac，由中国农业大学动物科技学院提供(仔猪产肠毒素大肠杆菌(ETEC)F4ac受体基因的鉴定及功能验证.王文文.博士论文.2016)，以下简称产肠毒素大肠杆菌。

1.1.3培养基

MH肉汤的配制：称取21g MH肉汤培养基，加入1L的去离子水中溶解，121℃灭菌20min，备用。

1.1.4产肠毒素大肠杆菌菌悬液的制备

取-40℃冰箱中保存在甘油和营养肉汤混合溶液中的产肠毒素大肠杆菌菌种10μL于1.5mL离心管中，加入500μL的营养肉汤，震荡摇匀，取100μL涂在营养琼脂培养基表面，37℃恒温培养12h。划线培养最终得到单一的产肠毒素大肠杆菌菌种，挑取单菌落，接种到含有200mL的MH肉汤培养基的锥形瓶中，在温度37℃、150rpm的条件下摇床振荡培养3h,得到产肠毒素大肠杆菌培养液，用MH肉汤稀释该产肠毒素大肠杆菌培养液，得到产肠毒素大肠杆菌菌悬液，该产肠毒素大肠杆菌菌悬液中产肠毒素大肠杆菌的含量为1×10⁶CFU/mL。

1.2抑菌实验操作方法

将实施例1合成的8-甲氧基补骨脂素的结构修饰物—化合物B₁-B₂₄、A₆-A₁₁和C₁、8-甲氧基补骨脂素以及对照药物庆大霉素作为抗菌药物，分别用10％的DMSO溶液溶解，配制成1280μg/mL的溶液，用0.2pm的微孔滤膜过滤之后备用，将这些过滤后的溶液作为抗菌药物原液。取无菌试管(13×100mm)13支，排成一排，除第1管加入1.6mL MH肉汤外，其余每管加入MH肉汤1mL，在第1管加入抗菌药物原液0.4mL混匀，然后吸取1mL至第2管，混匀后再吸取1mL至第3管，如此连续倍比稀释至第11管，并从第11管中吸取1mL弃去，第12管为不含抗菌药物的生长对照(阳性对照)。然后在每管内加入的1.1.4的产肠毒素大肠杆菌菌悬液各1mL，使每管内产肠毒素大肠杆菌的含量为5×10⁵CFU/mL。第1管至第11管药物浓度分别为128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125μg/mL。同时做三组平行，放入37℃恒温培养箱孵育16h，观察结果。MIC是用肉眼在微量稀释孔中所见能完全抑制细菌生长的最低抗菌药物浓度，在黑暗背景下，观察到孔底无细菌生长，呈现清亮状态的最低药物浓度即为化合物的MIC。通过紫外分光光度计测量其OD₆₀₀的值，通过对比不加抗菌药物的阳性对照，来计算其抑菌率。

2、结果与分析

8-甲氧基补骨脂素修饰物对产肠毒素大肠杆菌的MIC如表2所示。

表2、8-甲氧基补骨脂素修饰物对产肠毒素大肠杆菌的MIC

从3个系列的8-甲氧基补骨脂素修饰物对产肠毒素大肠杆菌的菌抑活性来看，总的来说，可以看出化合物B₁、B₇、B₁₈-B₂₄、A₁、A₂、A₆、A₁₀对产肠毒素大肠杆菌据均有一定的抑制效果，通过对B₂₀与B₂₁的对比发现，与苯环上C-8位相连的碳链长度最适宜在2个碳链长度，抑菌效果相对较好，化合物B₂₀的MIC值为64μg/mL，对化合物B₂₀有望进行进一步的结构修饰来增强其抑制产肠毒素大肠杆菌的生物活性，通过B₂-B₆的结果分析，含有苯环的芳香类化合物与苯环上C-8位相连结果不好，不宜采用。通过对化合物B₈-B₁₁的分析，含有过长碳链的羧基基团同样不适合与苯环上8位的结构修饰，通过对化合物B₁₂-B₁₆的分析，同样含有过长碳链的溴化基团对产肠毒素大肠杆菌的抑制活性效果很差。对比B₁₈-B₁₉，含2-3个碳链的羟基与苯环C-8位相连具有一定的抑制活性。通过对比B₂₂、B₂₃、B₂₄发现，B₂₂的MIC值为32μg/mL，B₂₃、B₂₄的MIC值为128μg/mL。对苯环上C-5位进行硝基基团的结构修饰以及后期的修饰都有较好的抑菌活性，有望进一步结合其他位点进行结构修饰，增强其抑菌活性。

通过对A₁-A₁₀的比较发现A₁、A₂、A₆、A₁₀的抑菌效果较好(MIC值均范围在64-128μg/mL)，其中通过呋喃环环化而得来的A₁₀的抑制效果最强，MIC值为64μg/mL。通过对比8-甲氧基补骨脂素与C1的抑菌结果，发现C环的内酯环的合环结构对抑制产肠毒素大肠杆菌是关键性的有效基团。

8-甲氧基补骨脂素修饰物对产肠毒素大肠杆菌的抑制率如表3所示。

表3、8-甲氧基补骨脂素修饰物对ETEC的抑制率

结果表明在化合物B系列中，B₁、B₇、B₁₈-B₂₄在浓度128μg/mL下对产肠毒素大肠杆菌均表现出良好的抑制活性，抑制率均在65％以上，其中化合物B₂₀与B₂₂效果最好，化合物B₂₂在浓度32μg/mL下对产肠毒素大肠杆菌的抑制率达到75.35％，化合物B₂₀在浓度64μg/mL下抑制率达到67.23％，其余的B系列化合物抑制效果较差，抑制率低于50％。化合物B₂₀在64μg/mL的浓度下对产肠毒素大肠杆菌的抑菌活性是8-甲氧基补骨脂素的2.3倍。

在A系列中，化合物A₆-A₉对产肠毒素大肠杆菌的抑制活性不是很好，抑制率偏低，化合物A₁₀的的抑制活性在A系列中是最好的，在浓度为64μg/mL下，化合物A₁₀对产肠毒素大肠杆菌的抑制率为68.78％。化合物A₁₀在64μg/mL的浓度下对产肠毒素大肠杆菌的抑菌活性是8-甲氧基补骨脂素的2.4倍。化合物C₁对产肠毒素大肠杆菌的抑制活性表现较差，128μg/mL下抑制率低于35％。

Claims

1.化合物或其药用盐，其特征在于：所述化合物的结构式如式2：

2.一种抗菌药物，其特征在于：所述抗菌药物含有权利要求1所述的化合物或其药用盐。

3.一种抗菌药物，其特征在于：所述抗菌药物含有权利要求1所述的化合物或其药用盐，所述抗菌药物对产肠毒素大肠杆菌具有抑制作用。

4.权利要求1所述的化合物或其药用盐在制备治疗和/或预防仔猪腹泻药物中的应用。

5.制备权利要求1所述化合物的方法，包括用化合物A₇制备权利要求1所述化合物；所述化合物A₇的结构式如式2a：