CN109475569B - 一种芒果苷-6-o-钙盐及其制备方法与用途 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种芒果苷‑6‑O‑钙盐及其制备方法。另外亦提供该芒果苷‑6‑O‑钙盐作为中间体在制备芒果苷‑6‑O‑小檗碱盐中的用途。

Description

一种芒果苷-6-O-钙盐及其制备方法与用途
技术领域
本发明涉及一种芒果苷-6-O-钙盐及其制备方法。
也涉及芒果苷-6-O-钙盐作为中间体在制备芒果苷-6-O-小檗碱盐中的用途。
背景技术
芒果苷(mangiferin)是天然多酚类化合物，分子式：C19H18O11，分子量：422。其化学结构如下：
Figure GDA0003101941980000011
关于芒果苷钙盐，WO2009065287 A1、WO2008061480 A1、CN101461819、CN101919839的公开内容包括：1)结构方面：芒果苷钙盐的通式化合物(a)、芒果苷-3-O-钙盐(b)、芒果苷-3，7-O-钙盐(c)，结构式如下：
Figure GDA0003101941980000012
2)用途方面：作为胰岛素增敏剂、AMPK激动剂、过氧化物酶增殖物激活受体激动剂的医药用途。
WO2010/145192A1披露一种芒果苷小檗碱盐，根据WO2010/145192A1说明书第5页-第7页第2段所披露的核磁数据分析获知，其所披露的芒果苷小檗碱盐应为芒果苷-3-O-小檗碱盐与芒果苷-7-O-小檗碱盐的组合物，但关于芒果苷-3-O-小檗碱盐与芒果苷-7-O-小檗碱盐的比例如何，WO2010/145192A1并未予以阐述。
技术问题
按照药物注册的要求，上市药物所提供的原料药结构必须是明确的，如果原料药是组合物，其比例也必须是确定的，才能符合药物质量可控的要求。可见WO2010/145192A1所披露的芒果苷小檗碱盐若做为原料药，还需解决进一步明确结构的问题。而分析芒果苷结构可知，芒果苷分子结构中有4个酚羟基，所以芒果苷成盐位点存在多种可能性，这使得获得单一成盐位点的芒果苷盐的技术难度大大增加。
另外，WO2010/145192A1披露的芒果苷小檗碱盐的制备方法【详见说明书第4页，第8-10页的实施例】，皆采用将芒果苷与碱性钠(钾)盐反应制备成芒果苷单钠(钾)盐，再将芒果苷单钠(钾)盐与小檗碱反应生成芒果苷小檗碱盐的方法。该方法存在以下问题：
由于芒果苷原料是来源于植物的提取物，可能因植物品种、采集时间或采集地域的不同以及提取工艺的差异，芒果苷原料中新芒果苷等芒果苷类似物以及鞣质等杂质批次间的含量差异会较大；在此情况下，WO2010/145192A1披露的芒果苷小檗碱盐的制备方法，采用芒果苷原料投料制成芒果苷单钠(钾)盐溶液，直接与盐酸小檗碱溶液反应制备芒果苷小檗碱盐，极易出现芒果苷小檗碱盐批次间质量一致性差异较大的问题；同时还会存在着芒果苷投料准确性的问题。若以芒果苷单钠(钾)盐固体物投料制备芒果苷小檗碱盐，则需使用乙醇、丙酮等结晶溶媒将其沉淀析出，这样则会导致制备过程中较大量的乙醇、丙酮、乙酸乙酯等有机溶剂的使用，这些有机溶剂不仅成本高，还会增加芒果苷小檗碱盐的溶剂残留风险，而且在工业生产中会带来沉重的环保压力。如若采用高纯度芒果苷(含量≥98％)作为原料也可以解决芒果苷小檗碱盐质量问题，但由于高纯度芒果苷制备工艺复杂，会大大提高芒果苷小檗碱盐的生产成本。
技术解决方案为了解决芒果苷小檗碱盐做为原料药，需明确结构的问题；同时也为了解决WO2010/145192A1披露的芒果苷小檗碱盐的制备方法中存在的批次间质量一致性差等问题，发明人经过大量研究，获得芒果苷-6-O-钙盐这一新的单一成盐位点的芒果苷钙盐，并且研究出以芒果苷-6-O-钙盐为中间体制备单一成盐位点的芒果苷-6-O-小檗碱盐的方法。该技术方案解决了前文所述的以下问题：
1、采用芒果苷-6-O-钙盐为中间体制备芒果苷-6-O-小檗碱盐，解决了芒果苷小檗碱盐结构不明确的问题；
2、采用芒果苷-6-O-钙盐为中间体制备芒果苷-6-O-小檗碱盐，解决了制备芒果苷小檗碱盐批次间质量一致性差的问题。
具体技术方案如下：
本发明提供一种芒果苷-6-O-钙盐，其特征在于：所述芒果苷-6-O-钙盐具有下式(Ⅰ)的结构：
Figure GDA0003101941980000031
本发明所述的芒果苷-6-O-钙盐的制备方法，其特征在于：
①将碱性钠盐或碱性钾盐加入水中，制备碱性钠盐溶液或碱性钾盐溶液，浓度为0.1％-2％(w/v)；
②将芒果苷加入二甲基亚砜中溶解，制成芒果苷溶液；
③将芒果苷溶液缓慢加入碱性钠盐溶液或碱性钾盐溶液中，充分搅拌，50℃-100℃反应完全，得芒果苷钠盐溶液或芒果苷钾盐溶液；
④取水溶性钙盐加水溶解，制成钙盐溶液；
过滤，得固体物；将固体物加入适量热水中溶解，滤过，析出沉淀，过滤得固体物；
⑥固体物干燥，得芒果苷-6-O-钙盐。
本发明所述的芒果苷-6-O-钙盐的制备方法，其特征在于：所述芒果苷与二甲基亚砜的配比为1:0.2-5(w/v)。
本发明所述的芒果苷-6-O-钙盐的制备方法，其特征在于：所述芒果苷与碱性钠盐或碱性钾盐的摩尔配比为1:0.5-1。
本发明所述的芒果苷-6-O-钙盐的制备方法，其特征在于：所述芒果苷与水溶性钙盐摩尔比为1:0.5-1。
本发明所述的芒果苷-6-O-钙盐的制备方法，其特征在于：所述碱性钠盐或碱性钾盐选自碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾中的一种或两种以上的混合物，所述水溶性钙盐选自氯化钙、葡萄糖酸钙、乳酸钙、戊酮酸钙中的一种或两种以上的混合物。
本发明所获得的芒果苷-6-O-钙盐可以是每分子芒果苷-6-O-钙盐中含有小于9个水的水合物。
本发明所述的芒果苷-6-O-钙盐作为中间体在制备芒果苷-6-O-小檗碱盐(式Ⅱ)中的用途：
Figure GDA0003101941980000041
本发明所述的用途，其特征在于：所述芒果苷-6-O-钙盐作为中间体制备芒果苷-6-O-小檗碱盐的具体方法如下：
①取芒果苷-6-O-钙盐加50-100℃水溶解，制成芒果苷-6-O-钙盐溶液；
②取盐酸小檗碱加50-100℃水溶解，制成盐酸小檗碱溶液；
③将盐酸小檗碱溶液与芒果苷-6-O-钙盐溶液充分混合，反应完全，析出沉淀，过滤，洗涤，得固体物；
④固体物干燥，得芒果苷-6-O-小檗碱盐。
本发明所述芒果苷-6-O-钙盐作为中间体制备芒果苷-6-O-小檗碱盐的具体方法中所述芒果苷-6-O-钙盐溶液浓度为0.1-3％，优选1-2％；所述盐酸小檗碱溶液浓度为0.1-4％，优选1-2％。
本发明所述芒果苷-6-O-钙盐作为中间体制备芒果苷-6-O-小檗碱盐的具体方法中芒果苷-6-O-钙盐与盐酸小檗碱摩尔比为0.5：1；所述盐酸小檗碱可由硫酸小檗碱或其它小檗碱医学上可接受的盐替代。
芒果苷-6-O-钙盐的理化性质：
芒果苷-6-O-钙盐，分子式：C38H34O22Ca，淡黄绿色或淡黄色粉末状物，微溶于水，溶解于热水，在稀盐酸溶液中略溶。结构式如下：
Figure GDA0003101941980000042
芒果苷-6-O-钙盐的波谱数据：
ESI-MS(+)m/z883(M+H)。
1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ：4.60(H-1’)，6.35(H-5),6.23(H-4),7.11(H-8)。13CNMR(400MHz，DMSO-d6)(δppm)：161.62(C-1)，106.97(C-2)，163.62(C-3)，93.25(C-4)，155.98(C-4a)，100.53(C-4b)，100.89C-5)，164.74(C-6)，147.10(C-7)，103.27(C-8)，106.22(C-8a)，153.52(C-8b)，177.79(C-9)，73.51(C-1’)，70.34(C-2’)，79.14(C-3’)，70.34(C-4’)，81.37(C-5’)，60.27(C-6’)。
附：芒果苷的波谱数据：ESI-MS m/z 421(M-)，1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ：4.60(H-1’)，6.01(H-5),6.10(H-4),6.96(H-8)。13CNMR(400MHz，DMSO-d6)(δppm)：161.68(C-1)，107.54(C-2)，163.73(C-3)，93.27(C-4)，156.15(C-4a)，101.25(C-4b)，102.54C-5)，153.91(C-6)，143.63(C-7)，108.05(C-8)，111.68(C-8a)，150.7(C-8b)，179.02(C-9)，73.04(C-1’)，70.24(C-2’)，78.90(C-3’)，70.56(C-4’)，81.44(C-5’)，61.41(C-6’)。
采用等离子体发射光谱测定芒果苷钙盐中Ca(钙)元素含量：4.5x104mg/kg。
结构分析如下：
芒果苷钙盐与芒果苷的碳核磁数据比较：芒果苷B环碳原子的化学位移均出现较大变化，其中C-6，C-7碳原子的化学位移由于去屏蔽作用而发生显著改变，C-6化学位移变化最大；C-5、C-8、C-8a、C-8b碳原子的化学位移由于屏蔽作用均有不同程度的改变，其中处于C-6原子间位的C-8和对位的C-8a化学位移变化较大。
芒果苷钙盐与芒果苷的氢核磁数据比较：H-8、H-5、H-4氢原子的化学位移由于屏蔽作用均有不同程度的改变，其中H-5原子化学位移变化最大。
电喷雾质谱(+)ESI:883(M+H)
质谱数据显示芒果苷钙盐的分子量为882，表明是2分子的芒果苷离子与1分子的钙连接。
采用等离子体发射光谱测定芒果苷钙盐中Ca(钙)元素含量：4.5x104mg/kg(理论值4.5x104mg/kg)。
根据以上波谱数据，芒果苷钙盐化学结构是：2分子芒果苷-6-O-与Ca2+结合，形成了芒果苷-6-O-钙盐。
有益效果
1)可以使用粗芒果苷原料(如芒果苷含量约为80％、90％的提取物)制备高纯度、稳定、便于贮存的芒果苷-6-O-钙盐作为中间体原料；使用粗芒果苷原料制备芒果苷-6-O-钙盐，可以大大降低生产成本(芒果苷含量为80％-90％的粗芒果苷原料价格为高纯度芒果苷(含量≥98％)的三分之一甚至更低)，同时又可以降低环保压力。
2)采用芒果苷-6-O-钙盐为中间体制备芒果苷-6-O-小檗碱盐，可以提高芒果苷-6-O-小檗碱盐的纯度，简化芒果苷-6-O-小檗碱盐的纯化工艺(WO2010/145192A1披露的芒果苷小檗碱盐纯度<99％，若获得99％以上的芒果苷小檗碱盐，则另需进行纯化)，降低芒果苷-6-O-小檗碱盐的制备成本。
试验例1：芒果苷-6-O-小檗碱盐的理化性质研究结果
芒果苷-6-O-小檗碱盐，分子式：C20H18NO4·C19H17O11·xH2O，橙黄色粉末状物，熔点：177-179℃，结构式如下：
Figure GDA0003101941980000061
芒果苷-6-O-小檗碱盐的波谱数据：ESI-MS(-)m/z 756(M-),421；ESI-MS(+)m/z336，423；芒果苷基团1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ：4.56(H-1’)，6.01(H-5),6.15(H-4),6.88(H-8)。13CNMR(400MHz，DMSO-d6)δ：161.51(C-1)，106.58(C-2)，163.06(C-3)，92.77(C-4)，155.55(C-4a)，103.74(C-4b)，98.64(C-5)，166.93(C-6)，147.03(C-7)，100.47(C-8)，100.53(C-8a)，154.37(C-8b)，176.73(C-9)，73.51(C-1’)，70.34(C-2’)，79.14(C-3’)，70.34(C-4’)，81.37(C-5’)，61.27(C-6’)。小檗碱基团1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ：3.2(H-5)，4.03(-OCH3)，4.07(-OCH3)，4.89(H-6)，6.13(-O-CH2-O-)，7.01(H-4)，7.69(H-1)，7.86(H-12)，8.07(H-11)，8.78(H-13)，9.78(H-8)。13CNMR(400MHz，DMSO-d6)δ：105.33(C-1)，120.29(C-1a)，147.56(C-2)，149.71(C-3)，108.22(C-4)，130.45(C-4a)，26.28(C-5)，55.07(C-6)，145.06(C-8)，121.24(C-8a)，143.51(C-9)，150.15(C-10)，126.55(C-11)，123.33(C-12)，132.87(C-12a)，120.08(C-13)，137.3(C-13a)，56.93(C10(-OCH3))，61.74(C9(-OCH3))，101.96(-O-CH2-O-)。
附：芒果苷的波谱数据：ESI-MS m/z 421(M-)；1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ：4.60(H-1’)，6.37(H-5),6.86(H-4),7.39(H-8)。3CNMR(400MHz，DMSO-d6)δ：161.68(C-1)，107.54(C-2)，163.73(C-3)，93.27(C-4)，156.15(C-4a)，101.25(C-4b)，102.54(C-5)，153.91(C-6)，143.63(C-7)，108.05(C-8)，111.68(C-8a)，150.7(C-8b)，179.02(C-9)，73.04(C-1’)，70.24(C-2’)，78.9(C-3’)，70.56(C-4’)，81.44(C-5’)，61.41(C-6’)。
小檗碱的波谱数据：ESI-MS m/z 336(M)；1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ：3.26(H-5)，4.11(-OCH3)，4.21(-OCH3)，4.92(H-6)，6.11(-O-CH2-O-)，6.96(H-4)，7.66(H-1)，8.0(H-12)，8.11(H-11)，8.7(H-13)，9.76(H-8)。13CNMR(400MHz，DMSO-d6)δ：106.54(C-1)，121.49(C-1a)，149.92(C-2)，152.17(C-3)，109.40(C-4)，131.90(C-4a)，28.24(C-5)，57.20(C-6)，145.73(C-8)，123.33(C-8a)，146.42(C-9)，152.02(C-10)，128.04(C-11)，124.55(C-12)，135.13(C-12a)，121.86(C-13)，139.65(C-13a)，57.61(C10(-OCH3))，62.56(C9(-OCH3))，103.68(-O-CH2-O-)。
结构分析如下：
与小檗碱原型化合物比较，芒果苷-6-O-小檗碱盐中小檗碱基团碳谱数据各碳原子的化学位移由于屏蔽作用均发生明显改变。
与芒果苷原型化合物比较，芒果苷-6-O-小檗碱盐中芒果苷基团碳谱数据中C6，C7，C8b碳原子的化学位移由于去屏蔽作用而发生显著改变，C6化学位移变化最大；C5、C8、C8a碳原子的化学位移由于屏蔽作用均有不同程度的改变，其中处于C6原子间位的C8和对位的C8a化学位移变化较大。
根据以上波谱数据分析显示：芒果苷-6-O-与小檗碱-N+结合，形成了芒果苷-6-O-小檗碱盐。芒果苷-6-O-小檗碱盐及其水合物的元素分析数据：
芒果苷-6-O-小檗碱盐及其水合物的元素分析数据
Figure GDA0003101941980000071
试验例2：芒果苷-6-O-小檗碱盐批次间质量考察
采用芒果苷含量80％、90％、98％不同规格的芒果苷原料，分别通过两种制备方法制备芒果苷-6-O-小檗碱盐，比较不同方法所获得芒果苷-6-O-小檗碱盐的纯度。
1、将芒果苷制备成芒果苷-6-O-钙盐，然后将芒果苷-6-O-钙盐溶液与盐酸小檗碱溶液反应制备芒果苷-6-O-小檗碱盐(简称钙盐途径，即本发明内容中所述芒果苷-6-O-小檗碱盐制备方法)；
2、将芒果苷制备成钠盐溶液，直接与盐酸小檗碱溶液反应制备芒果苷-6-O-小檗碱盐(简称钠盐途径，附下)。
“钠盐途径”制备芒果苷-6-O-小檗碱盐：
①将碱性钠盐或碱性钾盐加入水中，制备碱性钠盐溶液或碱性钾盐溶液，浓度为0.1％-2％(w/v)；
②将芒果苷加入二甲基亚枫中溶解，制成芒果苷溶液；
③将芒果苷溶液缓慢加入碱性钠盐溶液或碱性钾盐溶液中，充分搅拌，50℃-100℃反应完全，得芒果苷-6-O-钠盐溶液或芒果苷-6-O-钾盐溶液；
④取盐酸小檗碱加50℃-100℃水溶解，制成盐酸小檗碱溶液；
⑤将盐酸小檗碱溶液与芒果苷-6-O-钠盐溶液或芒果苷-6-O-钾盐溶液充分混合，反应完全，析出沉淀，过滤，得固体物；
⑥固体物干燥，得芒果苷-6-O-小檗碱盐。
样品的检测方法：
色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：甲醇-水(0.05mol/l磷酸二氢钾)＝40：60为流动相，检测波长为260nm，流速1ml/min。
称取芒果苷-6-O-小檗碱盐样品适量,置25ml量瓶中，加流动相溶解并定容，取2ml母液至10ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。
分别精密吸取上述对照品溶液和供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪，测定，用面积归一化法计算纯度，结果如下表：
Figure GDA0003101941980000081
综上可见：采用“钠盐途径”制备的芒果苷-6-O-小檗碱盐，批次间一致性差；采用“钙盐途径”制备的芒果苷-6-O-小檗碱盐，批次间一致性好；采用“钠盐途径”采用不同规格芒果苷原料制备芒果苷-6-O-小檗碱盐，批次间一致性差；而采用“钙盐途径”采用不同规格芒果苷原料制备芒果苷-6-O-小檗碱盐，批次间一致性好。
试验例3：芒果苷-6-O-钙盐的稳定性
1)室温长期稳定性试验
试验方法：取芒果苷-6-O-钙盐原料样品，铝塑复合袋密闭包装，置25℃±2℃、60％RH±5％RH条件下，分别于0、3、6、9、12个月取样，对其性状和含量进行检测，结果如下表。
室温长期稳定性试验考察结果(批号140618)
Figure GDA0003101941980000091
结论：芒果苷-6-O-钙盐在室温条件下放置12个月性质稳定。
2、加速试验
取芒果苷-6-O-钙盐原料样品，铝塑复合袋密闭包装，置40℃±2℃、75％RH±5％RH条件下，分别于0、3、6个月取样，对其性状、含量检测，结果如下表。
加速试验考察结果(批号140618)
Figure GDA0003101941980000092
结论：芒果苷-6-O-钙盐在加速试验条件下放置6个月性质稳定。
附图说明
无。
本发明的最佳实施方式
实施例1：芒果苷-6-O-钙盐的制备
在反应器中加水1680ml，将碳酸氢钠0.1mol加入水中制成浓度为0.5％(w/v)的碳酸氢钠溶液；将0.1mol芒果苷(含量95％)加入85ml DMSO(芒果苷与DMSO的配比为1∶2(w/v))加热溶解，制成芒果苷溶液；将芒果苷溶液缓慢加入碳酸氢钠溶液中，充分搅拌，85℃保温反应完全，滤过备用；称取无水氯化钙0.05mol加入500ml水中溶解，将氯化钙溶液加入芒果苷反应液中，充分搅拌，降温析出沉淀，降至室温，静置过夜，将反应液抽滤；沉淀物加热水溶解，过滤，滤液降温析出沉淀，室温静置过夜，抽滤，沉淀物60℃真空干燥，粉碎，得淡黄色粉末芒果苷-6-O-钙盐，收率为74.5％，样品纯度经HPLC测定为99.5％。
本发明的实施方式
本发明所述的芒果苷采用市售品(西安瑞林生物科技有限公司，具有相应提取设备的厂家均可以生产)。盐酸小檗碱、硫酸小檗碱等均为市售品(西安小草植物科技有限公司)。碳酸氢钠、碳酸钠、碳酸氢钾、碳酸钾、二甲基亚砜(DMSO)、无水氯化钙、氯化钙、葡萄糖酸钙、乳酸钙、戊酮酸钙等试剂均采用市售品。
实施例2：芒果苷-6-O-钙盐的制备
在反应器中加水2000ml，将碳酸氢钠0.1mol加入水中制成浓度为0.4％(w/v)的碳酸氢钠溶液；将0.1mol芒果苷(含量90％)加入127ml DMSO(芒果苷与DMSO的配比为1:3(w/v))加热溶解，制成芒果苷溶液；将芒果苷溶液缓慢加入碳酸氢钠溶液中，充分搅拌，80℃保温反应完全，滤过备用，称取无水氯化钙0.05mol和0.025mol葡萄糖酸钙加入1000ml水中溶解，将该氯化钙与葡萄糖酸钙混合溶液加入芒果苷反应液中，充分搅拌，降温，析出沉淀，降至室温，静置过夜，将反应液抽滤；沉淀物加热水溶解，过滤，滤液降温，析出沉淀，室温静置过夜，抽滤，沉淀物50℃真空干燥，粉碎，得淡黄色粉末芒果苷-6-O-钙盐，收率为70.5％，样品纯度经HPLC测定为99.6％。
实施例3：芒果苷-6-O-钙盐的制备
在反应器中加水3500ml，将碳酸钠0.05mol加入水中制成浓度为0.3％(w/v)的碳酸钠溶液；将0.1mol芒果苷(含量80％)加入169ml DMSO(芒果苷与DMSO的配比为1:4(w/v))溶解，制成芒果苷溶液；将芒果苷溶液缓慢加入碳酸钠溶液中，充分搅拌，100℃保温反应完全，滤过备用；称取葡萄糖酸钙0.06mol加入100ml热水中溶解，将葡萄糖酸钙溶液加入芒果苷反应液中，充分搅拌，降温，析出沉淀，降至室温，静置过夜，将反应液抽滤；沉淀物加热水溶解，过滤，滤液降温，析出沉淀，室温静置过夜，抽滤，沉淀物55℃真空干燥，粉碎，得淡黄色粉末芒果苷-6-O-钙盐，收率为70.1％，样品纯度经HPLC测定为99.3％。
实施例4：芒果苷-6-O-钙盐的制备
在反应器中加水13800ml，将碳酸钾0.06mol加入水中制成浓度为0.1％(w/v)的碳酸钾溶液；将0.1mol芒果苷(含量98％)加入210ml DMSO(芒果苷与DMSO的配比为1:5(w/v))溶解，制成芒果苷溶液；将芒果苷溶液缓慢加入碳酸钾溶液中，充分搅拌，50℃保温反应完全，滤过备用；称取乳酸钙0.07mol加入100ml热水中溶解，将乳酸钙溶液加入芒果苷反应液中，充分搅拌，降温，析出沉淀，降至室温，静置过夜，将反应液抽滤；沉淀物加热水溶解，过滤，滤液降温，析出沉淀，室温静置过夜，抽滤，沉淀物55℃真空干燥，粉碎，得淡黄色粉末芒果苷-6-O-钙盐，收率为65.7％，样品纯度经HPLC测定为99.4％。
实施例5：芒果苷-6-O-钙盐的制备
在反应器中加水670ml，将碳酸氢钾0.1mol加入水中制成浓度为1.5％(w/v)的碳酸氢钾溶液；将0.1mol芒果苷(含量90％)加入21ml DMSO(芒果苷与DMSO的配比为1:0.5(w/v))加热溶解，制成芒果苷溶液；将芒果苷溶液缓慢加入碳酸氢钾溶液中，充分搅拌，70℃保温反应完全，滤过备用；称取戊酮酸钙0.055mol加入1000ml水中溶解，将戊酮酸钙溶液加入芒果苷反应液中，充分搅拌，降温，析出沉淀，降至室温，静置过夜，将反应液抽滤；沉淀物加热水溶解，过滤，滤液降温，析出沉淀，室温静置过夜，抽滤，沉淀物55℃真空干燥，粉碎，得淡黄色粉末芒果苷-6-O-钙盐，收率为72.5％，样品纯度经HPLC测定为99.4％。
实施例6：芒果苷-6-O-钙盐的制备
在反应器中加水800ml，将碳酸氢钠0.1mol加入水中制成浓度为1％(w/v)的碳酸氢钠溶液；将0.1mol芒果苷(含量90％)加入8.5ml DMSO(芒果苷与DMSO的配比为1:0.2(w/v))加热溶解，制成芒果苷溶液；将芒果苷溶液缓慢加入碳酸氢钠溶液中，充分搅拌，90℃保温反应完全，滤过，备用；称取氯化钙0.05mol加入800ml水中溶解，将氯化钙溶液加入芒果苷反应液中，充分搅拌，降温，析出沉淀，降至室温，静置过夜，将反应液抽滤；沉淀物加热水溶解，过滤，滤液降温，析出沉淀，室温静置过夜，抽滤，沉淀物55℃真空干燥，粉碎，得淡黄色粉末芒果苷-6-O-钙盐，收率为73.2％，样品纯度经HPLC测定为99.6％。
实施例7：芒果苷-6-O-钙盐的制备
在反应器中加水380ml，将碳酸钠0.03mol和0.04mol碳酸氢钠加入水中制成浓度为2％(w/v)的溶液；将0.1mol芒果苷(含量80％)加入42ml DMSO(芒果苷与DMSO的配比为1:1(w/v))加热溶解，制成芒果苷溶液；将芒果苷溶液缓慢加入碱性钠盐溶液中，充分搅拌，95℃保温反应完全，备用；称取无水氯化钙0.1mol加入1500ml水中溶解，将氯化钙溶液加入芒果苷反应液中，充分搅拌，降温，析出沉淀，降至室温，静置过夜，将反应液抽滤；沉淀物加热水溶解，过滤，滤液降温，析出沉淀，室温静置过夜，抽滤，沉淀物55℃真空干燥，粉碎，得淡黄色粉末芒果苷-6-O-钙盐，收率为65.2％，样品纯度经HPLC测定为99.0％。
制备例1：芒果苷-6-O-小檗碱盐的制备
称取上述实施例所得芒果苷-6-O-钙盐0.05mol，加入适量100℃水中溶解，制成浓度为3％(w/v)的溶液，滤过备用；称取硫酸小檗碱0.1mol，加入适量50℃水中溶解，制成浓度为0.1％(w/v)的溶液，滤过备用；将硫酸小檗碱溶液缓慢加入中芒果苷-6-O-钙盐溶液，充分搅拌，反应完全，降温，析出沉淀，过滤，沉淀物用纯水充分洗涤，固体物50℃真空干燥，粉碎，得橙黄色固体芒果苷-6-O-小檗碱盐，收率为71.8％。样品纯度经HPLC测定为99.6％。
制备例2：芒果苷-6-O-小檗碱盐四水合物的制备
称取上述实施例所得芒果苷-6-O-钙盐0.05mol，加入适量50℃水中溶解，制成浓度为0.1％(w/v)的溶液，滤过备用；称取盐酸小檗碱0.1mol，加入适量100℃水中溶解，制成浓度为4％(w/v)的溶液，滤过备用；将盐酸小檗碱溶液缓慢加入中芒果苷-6-O-钙盐溶液，充分搅拌，反应完全，降温，析出沉淀，过滤，沉淀物用纯水充分洗涤，固体物55℃真空干燥，粉碎，得橙黄色固体芒果苷-6-O-小檗碱盐四水合物，收率为71.5％。样品纯度经HPLC测定为99.5％。
制备例3：芒果苷-6-O-小檗碱盐二水合物的制备
称取上述实施例所得芒果苷-6-O-钙盐0.05mol，加入适量80℃水中溶解，制成浓度为1％(w/v)的溶液，滤过备用；称取盐酸小檗碱0.1mol，加入适量70℃水中溶解，制成浓度为2％(w/v)的溶液，滤过备用；将芒果苷-6-O-钙盐溶液缓慢加入中盐酸小檗碱溶液，充分搅拌，反应完全，降温，析出沉淀，过滤，固体物60℃真空干燥，粉碎，得橙黄色固体芒果苷-6-O-小檗碱盐二水合物，收率为76.2％。样品纯度经HPLC测定为99.5％。
制备例4：芒果苷-6-O-小檗碱盐的制备
称取上述实施例所得芒果苷-6-O-钙盐0.05mol，加入适量70℃水中溶解，制成浓度为2％(w/v)的溶液，滤过备用；称取盐酸小檗碱0.1mol，加入适量90℃水中溶解，制成浓度为1％(w/v)的溶液，滤过备用；将芒果苷-6-O-钙盐溶液缓慢加入中盐酸小檗碱溶液，充分搅拌，反应完全，降温，析出沉淀，过滤，沉淀物用纯水充分洗涤，固体物50℃真空干燥，粉碎，得橙黄色固体芒果苷-6-O-小檗碱盐，收率为76.2％。样品纯度经HPLC测定为99.6％。
制备例5：芒果苷-6-O-小檗碱盐的制备
称取上述实施例所得芒果苷-6-O-钙盐0.05mol，加入适量90℃水中溶解，制成浓度为1.5％(w/v)的溶液，滤过备用；称取盐酸小檗碱0.05mol和硫酸小檗碱0.05mol，加入适量80℃水中溶解，制成浓度为1.5％(w/v)的溶液，滤过备用；将芒果苷-6-O-钙盐溶液缓慢加入盐酸小檗碱和硫酸小檗碱的混合溶液，充分搅拌，反应完全，析出沉淀，过滤，沉淀物用纯水充分洗涤，固体物55℃真空干燥，粉碎，得橙黄色固体芒果苷-6-O-小檗碱盐，收率为78.2％。样品纯度经HPLC测定为99.6％。
上述具体实施方式对本发明作进一步说明，但不限于此。
工业实用性
本发明的化合物的制备方法解决大量有机溶剂的使用带来的环保压力与降低芒果苷-6-O-小檗碱盐制备成本问题，从而更适合工业化生产。

Claims (13)

1.一种芒果苷-6-O-钙盐的制备方法，其特征在于：
所述芒果苷-6-O-钙盐具有下式(I)的结构，
Figure FDA0003101941970000011
①将碱性钠盐或碱性钾盐加入水中，制备碱性钠盐溶液或碱性钾盐溶液，浓度为0.1％-2％(w/v)；
②将芒果苷加入二甲基亚砜中溶解，制成芒果苷溶液；
③将芒果苷溶液缓慢加入碱性钠盐溶液或碱性钾盐溶液中，充分搅拌，50℃-100℃反应完全，得芒果苷钠盐溶液或芒果苷钾盐溶液；
④取水溶性钙盐加水溶解，制成钙盐溶液；
⑤将钙盐溶液与芒果苷钠盐溶液或芒果苷钾盐溶液充分混合，反应完全，析出沉淀，过滤，得固体物；将固体物加入适量热水中溶解，滤过，析出沉淀，过滤得固体物；
⑥固体物干燥，得芒果苷-6-O-钙盐。
2.根据权利要求1所述的芒果苷-6-O-钙盐的制备方法，其特征在于：所述芒果苷与二甲基亚砜的配比为1:0.2-5(w/v)。
3.根据权利要求1所述的芒果苷-6-O-钙盐的制备方法，其特征在于：所述芒果苷与碱性钠盐或碱性钾盐的摩尔配比为1:0.5-1。
4.根据权利要求1所述的芒果苷-6-O-钙盐的制备方法，其特征在于：所述芒果苷与水溶性钙盐摩尔比为1:0.5-1。
5.根据权利要求1所述的芒果苷-6-O-钙盐的制备方法，其特征在于：所述碱性钠盐或碱性钾盐选自碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾中的一种或两种以上的混合物，所述水溶性钙盐选自氯化钙、葡萄糖酸钙、乳酸钙、戊酮酸钙中的一种或两种以上的混合物。
6.权利要求1所述的制备方法得到的芒果苷-6-O-钙盐作为中间体在制备芒果苷-6-O-小檗碱盐式( II)中的用途:
Figure FDA0003101941970000021
其中0≤x≤4。
7.根据权利要求6所述的用途，其特征在于：所述芒果苷-6-O-钙盐作为中间体制备芒果苷-6-O-小檗碱盐的具体方法如下：
①取芒果苷-6-O-钙盐加50-100℃水溶解，制成芒果苷-6-O-钙盐溶液；
②取盐酸小檗碱加50-100℃水溶解，制成盐酸小檗碱溶液；
③将盐酸小檗碱溶液与芒果苷-6-O-钙盐溶液充分混合，反应完全，析出沉淀，过滤，洗涤，得固体物；
④固体物干燥，得芒果苷-6-O-小檗碱盐。
8.根据权利要求7所述的用途，其特征在于：所述芒果苷-6-O-钙盐溶液浓度为0.1-3％。
9.根据权利要求7所述的用途，其特征在于：所述芒果苷-6-O-钙盐溶液浓度为1-2％。
10.根据权利要求7所述的用途，其特征在于：所述盐酸小檗碱溶液浓度为0.1-4％。
11.根据权利要求7所述的用途，其特征在于：所述盐酸小檗碱溶液浓度为1-2％。
12.根据权利要求7所述的用途，其特征在于：所述芒果苷-6-O-钙盐作为中间体制备芒果苷-6-O-小檗碱盐的具体方法中芒果苷-6-O-钙盐与盐酸小檗碱摩尔比为0.5:1。
13.根据权利要求7所述的用途，其特征在于：所述盐酸小檗碱可由硫酸小檗碱或其它小檗碱医学上可接受的盐替代。
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