CN109364122A - 具有抗氧化活性的女贞子总三萜的提取方法 - Google Patents

具有抗氧化活性的女贞子总三萜的提取方法 Download PDF

Info

Publication number
CN109364122A
CN109364122A CN201811314377.9A CN201811314377A CN109364122A CN 109364122 A CN109364122 A CN 109364122A CN 201811314377 A CN201811314377 A CN 201811314377A CN 109364122 A CN109364122 A CN 109364122A
Authority
CN
China
Prior art keywords
glossy privet
total triterpene
privet fruit
fruit total
triterpene
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201811314377.9A
Other languages
English (en)
Inventor
李彦灵
苏慧慧
詹璐璐
马矜烁
陈小敏
闫福林
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Sanquan College of Xinxiang Medical University
Original Assignee
Sanquan College of Xinxiang Medical University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sanquan College of Xinxiang Medical University filed Critical Sanquan College of Xinxiang Medical University
Priority to CN201811314377.9A priority Critical patent/CN109364122A/zh
Publication of CN109364122A publication Critical patent/CN109364122A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/63—Oleaceae (Olive family), e.g. jasmine, lilac or ash tree
    • A61K36/638—Ligustrum, e.g. Chinese privet
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents
    • A61P39/06—Free radical scavengers or antioxidants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
    • A61K2236/333—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using mixed solvents, e.g. 70% EtOH
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/35—Extraction with lipophilic solvents, e.g. Hexane or petrol ether
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/39—Complex extraction schemes, e.g. fractionation or repeated extraction steps

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

本发明公开了一种具有抗氧化活性的女贞子总三萜的提取方法，用甲醇浸提，石油醚、乙酸乙酯先后萃取，乙醇热溶冷沉法纯化制备女贞子总三萜，并采用DPPH法测定总三萜的抗氧化能力，结果表明制备女贞子总三萜纯度为93.33%，浓度在214.9μg/mL时，对DPPH自由基的清除率为94.65%，并且本发明提取工艺简单高效。

Description

具有抗氧化活性的女贞子总三萜的提取方法
技术领域
本发明属于女贞子中三萜类化合物的提取技术领域，具体涉及一种具有抗氧化活性的女贞子总三萜的提取方法。
背景技术
女贞子为木犀科植物女贞Ligustrum lucidum Ait.的干燥成熟果实，是一味补肾滋阴、养肝明目的中药，可用于肝肾不足、头晕耳鸣、头发早白及两目昏糊等病症。三萜类化合物为其主要化学成分，且含量高，有文献报道其含量可达到6.08％[1-4]。三萜类化合物具有抗肿瘤、抗炎、抗菌等药理活性[5-6]，Xiao等[7-9]从五味子中分得的三萜类化合物具有抗HIV活性。DPPH是一种稳定的有机自由基，有机溶液呈紫色，在波长为517nm处具有最大光吸收。自由基清除时，由于与其单电子配对而使其吸收逐渐消失，其褪色程度与其所接受的电子数成定量关系，因而可以通过吸光度的变化进行定量分析[10-11]。本发明利用女贞子中三萜类化合物在冷热乙醇中溶解度的差异不同进行分离纯化，并通过测试女贞子总三萜对DPPH自由基的清除能力，评价其抗氧化活性。
参考文献
[1]王雪竹,吴顺红,赵光远.超高压提取女贞子总三萜工艺条件的优化[J].安徽医药,2016,20(04):639-642。
[2]吴修红,孙泽,杨恩龙,等.响应面法优化女贞子中总三萜的提取工艺研究[J].上海中医药杂志,2016,50(01):83-87。
[3]谭文广,刘伟,鲁菲菲,等.女贞子中三萜化合物的提取与含量测定[J].食品科学，2006(11):260-262。
[4]江洪波,董小萍.女贞子总三萜的制备及抗氧化活性研究[J].世界科学技术-中医药现代化,2015,17(01):189-191。
[5]包海鹰,史帧婷,冯爽.多孔菌科真菌中羊毛甾烷型三萜类成分及其药理作用研究进展[J].中草药,2018,49(09):2172-2187。
[6]王存琴,王宏婷,陈娟,等.苦丁茶三萜类成分及药理作用研究进展[J].中国临床药理学与治疗学,2016,21(06):703-709。
[7]Xiao W L,Yang L M,Zhang H B,et al.Chemical constituents from theleaves and stems of Schisandra lancifolia[J].Chem Pharm Bull,2010,58(6):852-855。
[8]Xiao W L,Huang S H,Zhang L,et al.Nortriterpenoids from Schisandralancifolia[J].J Nat Prod,2006,69:650-653。
[9]Xiao W L,Zhu H J,Shen Y H,et al.Lancifodilactone G:A uniquenortriterpenoid isolated from Schisandra lancifolia and its anti-HIV activity[J].Org Lett,2005,7(11):2145-2148。
[10]熊双丽,卢飞,史敏娟,等.DPPH自由基清除活性评价方法在抗氧化剂筛选中的研究进展[J].食品工业科技,2012,33(08):380-383。
[11]韦献雅,殷丽琴,钟成,等.DPPH法评价抗氧化活性研究进展[J].食品科学,2014,35(09):317-322。
发明内容
本发明的目的是提供了一种简单高效且成本低廉的具有抗氧化活性的女贞子总三萜的提取方法。
本发明为实现上述目的采用如下技术方案，具有抗氧化活性的女贞子总三萜的提取方法，其特征在于具体步骤为：
步骤S1：取女贞子药材30Kg，用100L甲醇浸提3次，每次4-7天，合并浸提液，于60℃减压回收溶剂至浸膏状，以水分散混悬，石油醚萃取至颜色不再加深，回收溶剂至浸膏，备用，水相继续用乙酸乙酯萃取至颜色不再加深，回收溶剂至浸膏，将所有浸膏烘干后得到乙酸乙酯部位950g；
步骤S2：取50g乙酸乙酯部位，于65℃超声振荡溶于500mL无水乙醇中，自然冷却至室温，析出女贞子总三萜沉淀，抽滤，室温下用无水乙醇洗涤，滤液与前母液合并，合并后的母液于60℃减压浓缩至溶液浑浊，开始析出固体，自然冷却至室温，析出女贞子总三萜沉淀，抽滤，室温下用50mL无水乙醇洗涤，滤液与前母液合并，同上述方法再分离一次，合并3次沉淀物，得到女贞子总三萜，烘干得25.61g，该女贞子总三萜含量的平均值高达93.33％。
进一步优选，步骤S2提取制得的女贞子总三萜具有清除DPPH自由基的能力，随着女贞子总三萜浓度的增大，DPPH自由基的清除率呈逐渐增加的趋势，当女贞子总三萜浓度超过107.45μg/mL时，DPPH自由基的清除率达到92.59％，之后随着女贞子总三萜浓度的增大，DPPH自由基的清除率变化不大。
本发明利用女贞子中三萜类化合物在冷热乙醇中溶解度差异较大的特性提取制得女贞子总三萜，该方法简单，高效，女贞子总三萜的纯度高达93.33％，并且提取的女贞子总三萜具有较好的抗氧化活性，当女贞子总三萜浓度超过107.45μg/mL时，DPPH自由基的清除率达到92.59％。
附图说明
图1是以熊果酸对照品浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘的制标准曲线；
图2是Vc和女贞子总三萜对DPPH自由基的清除效果曲线。
具体实施方式
以下通过实施例对本发明的上述内容做进一步详细说明，但不应该将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例，凡基于本发明上述内容实现的技术均属于本发明的范围。
实施例
1仪器与试药
1.1实验材料
女贞子药材于2017年11月采自河南省新乡市原阳县新乡医学院三全学院校园内，经新乡医学院苏慧慧鉴定为木犀科植物女贞的干燥成熟果实；熊果酸购自中国食品药品检定研究院(批号：110742-201622)；2,2-二苯基-1-苦基肼(DPPH)；VC、高氯酸为优极纯；香草醛、冰乙酸、甲醇、无水乙醇均为分析纯。
1.2实验仪器
T6新世纪紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限公司)；FA2004电子F分析天平(批号：14D101-1000，上海良平仪器仪表有限公司)；HH恒温水浴锅(金坛市中大仪器厂)；旋转蒸发仪(R206)(上海申生科技有限公司)；SHZ-3循环水式多用真空泵、CCA-420低温冷却水循环泵(郑州杜普仪器厂)。
2方法与结果
2.1女贞子总三萜的提取
取女贞子药材30Kg，用100L甲醇浸提3次，每次4-7天，合并浸提液，于60℃减压回收溶剂至浸膏状，以水分散混悬，石油醚萃取至颜色不再加深，回收溶剂至浸膏，备用，水相继续用乙酸乙酯萃取至颜色不再加深，回收溶剂至浸膏，将所有浸膏烘干后得到乙酸乙酯部位950g。
2.2女贞子总三萜的纯化
取50g乙酸乙酯部位，于65℃超声振荡溶于500mL无水乙醇中，自然冷却至室温，析出女贞子总三萜沉淀，抽滤，室温下用无水乙醇洗涤，滤液与前母液合并，合并后的母液于60℃减压浓缩至溶液浑浊，开始析出固体，自然冷却至室温，析出女贞子总三萜沉淀，抽滤，室温下用50mL无水乙醇洗涤，滤液与前母液合并，同上述方法再分离一次，合并3次沉淀物，得到女贞子总三萜，烘干得25.61g。
2.3女贞子总三萜含量测定
2.3.1标准曲线的制备
精密称取3.3mg熊果酸定容至25mL容量瓶，加甲醇溶解定容，摇匀即得浓度为0.132mg/mL的对照品溶液。精密称取熊果酸对照品溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL置于试管中，100℃水浴蒸干甲醇，加入新配制的5wt％香草醛-冰乙酸溶液0.2mL和1.00mL高氯酸溶液，密塞，在60℃水浴加热15min后，移入冰水浴，再加入5.00mL冰乙酸摇匀，在545nm处测定吸光度。以熊果酸对照品浓度(mg/mL)为横坐标，吸光度(A)为纵坐标绘制标准曲线，结果见图1。回归方程为：Y＝42.28X-0.003，r＝0.9999，表明熊果酸在含量为0.00-0.0213mg范围内与吸光度呈良好线性关系。
2.3.2重复性试验
精密称取同一样品10.0mg，共5份，按“2.3.5”项下制备样品溶液，精密吸取供试品溶液1.0mL，按标准曲线项下自“100℃水浴蒸干甲醇”开始操作，在517nm处测定吸收值，RSD为3.08％，表明该方法重复性良好。
2.3.3稳定性试验
精密称取同一样品10.0mg，按“2.3.5”项下制备样品溶液，精密吸取供试品溶液1.0mL，按标准曲线项下自“100℃水浴蒸干甲醇”开始操作，分别在0、30、60、90、120min，517nm处测定其吸光度值，RSD为1.41％，表明样品在120min内稳定性良好。
2.3.4加样回收率试验
取同一样品10.0mg，共6份，精密称定，分别精密加入对照品3.0mg，按“2.3.5”项下制备样品，精密吸取供试品溶液1.0mL，按标准曲线项下自“100℃水浴蒸干甲醇”开始操作，测定各样品的吸光度值，RSD值为1.28％。
表1女贞子三萜含量测定加样回收率试验结果
2.3.5女贞子总三萜含量的测定
精密称取制备好的三萜样品10.0mg，至100mL容量瓶，加甲醇溶解，定容至刻度备用。精密吸取样品溶液1.0mL至试管中，按“2.3.1”项下方法，从“100℃水浴挥干甲醇”开始测定女贞子总三萜含量，得女贞子总三萜含量为93.33％，RSD值为3.12％。
表2女贞子三萜含量测定结果
2.4抗氧化实验
2.4.1DPPH溶液的配制
DPPH母液：精密称取14.40mg DPPH至50mL容量瓶，用乙醇溶解，定容。
DPPH稀释液：精密吸取20mL DPPH母液至100mL容量瓶，用乙醇定容。
2.4.2样品溶液的配制
精密称取30.7mg女贞子总三萜样品至100mL容量瓶中，无水乙醇溶解，定容至刻度，备用。
2.4.3抗氧化标准曲线的绘制
取11.3mg VC至100mL容量瓶，用乙醇定容，得VC浓度为0.113mg/mL。精密吸取上述VC溶液0.1、0.2、0.6、0.8、1.6、2.0、4.0、6.0、10.0、16.0、20.0mL置于25mL容量瓶中，乙醇定容。分别吸取上述不同浓度VC溶液1.0mL至试管中，依次加入2.0mL DPPH稀释液，摇匀，避光反应30min后在517nm处测吸光度D1。再分别吸取上述不同浓度VC溶液1.0mL至试管中，分别加入2.0mL乙醇，摇匀，避光反应30min后在517nm处测吸光度D2。取1支试管，加入2.0mLDPPH和1.0mL乙醇，摇匀，避光反应30min后在517nm处测吸光度D0。按照以下公式计算VC对DPPH的清除率：
2.4.4女贞子总三萜抗氧化能力的测定
分别吸取不同体积0.1、0.5、1.0、2.0、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、6.0、7.0、8.0mL的样品溶液各两份至不同的试管中，一份样品加入2.0mL DPPH稀释液、不同体积的乙醇溶液使总积均为10.0mL，摇匀，避光反应30min后用无水乙醇作参比，在517nm处测定测定吸光度D1。另一份样品加入乙醇溶液使总体积均为10.0mL，摇匀，避光反应30min后用无水乙醇作参比，在517nm处测定测定吸光度D2。取2.0mLDPPH溶液至试管中，加入8.0mL乙醇溶液，摇匀，避光反应30min后用无水乙醇作参比，在517nm处测定测定吸光度D0。计算样品溶液DPPH清除率。以VC及样品浓度(μg/ml)为横坐标，DPPH清除率为纵坐标绘制曲线，结果见图2。
由图2可知，女贞子总三萜具有清除DPPH自由基的能力，随着女贞子总三萜浓度的增大，DPPH自由基的清除率呈逐渐增加的趋势，当女贞子总三萜的浓度超过107.45μg/mL时，DPPH自由基的清除率达到92.59％，之后随着女贞子总三萜浓度的增大，DPPH自由基的清除率变化不大。
3结论
本发明利用女贞子中三萜类化合物在冷热乙醇中溶解度差异较大的特性提取制得女贞子总三萜，该方法简单，高效，女贞子总三萜的纯度高达93.33％
在DPPH自由基清除实验中，女贞子总三萜显示了良好的清除自由基的能力，在浓度为3.07-245.6μg/mL的范围内，其抗氧化活性均接近Vc。通过测定女贞子总三萜对DPPH自由基的清除率，结果表明其具有抗氧化活性，女贞子总三萜浓度在214.9μg/mL时，对DPPH自由基的清除率为94.65％，与Vc的清除率96.78％接近，该研究可为女贞子的综合开发利用提供参考。
以上实施例描述了本发明的基本原理、主要特征及优点，本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明原理的范围下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进均落入本发明保护的范围内。

Claims (2)

1.具有抗氧化活性的女贞子总三萜的提取方法，其特征在于具体步骤为：
步骤S1：取女贞子药材30Kg，用100L甲醇浸提3次，每次4-7天，合并浸提液，于60℃减压回收溶剂至浸膏状，以水分散混悬，石油醚萃取至颜色不再加深，回收溶剂至浸膏，备用，水相继续用乙酸乙酯萃取至颜色不再加深，回收溶剂至浸膏，将所有浸膏烘干后得到乙酸乙酯部位950g；
步骤S2：取50g乙酸乙酯部位，于65℃超声振荡溶于500mL无水乙醇中，自然冷却至室温，析出女贞子总三萜沉淀，抽滤，室温下用无水乙醇洗涤，滤液与前母液合并，合并后的母液于60℃减压浓缩至溶液浑浊，开始析出固体，自然冷却至室温，析出女贞子总三萜沉淀，抽滤，室温下用50mL无水乙醇洗涤，滤液与前母液合并，同上述方法再分离一次，合并3次沉淀物，得到女贞子总三萜，烘干得25.61g，该女贞子总三萜含量的平均值高达93.33%。
2.根据权利要求1所述的具有抗氧化活性的女贞子总三萜的提取方法，其特征在于：步骤S2提取制得的女贞子总三萜具有清除DPPH自由基的能力，随着女贞子总三萜浓度的增大，DPPH自由基的清除率呈逐渐增加的趋势，当女贞子总三萜浓度超过107.45μg/mL时，DPPH自由基的清除率达到92.59%，之后随着女贞子总三萜浓度的增大，DPPH自由基的清除率变化不大。
CN201811314377.9A 2018-11-06 2018-11-06 具有抗氧化活性的女贞子总三萜的提取方法 Pending CN109364122A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811314377.9A CN109364122A (zh) 2018-11-06 2018-11-06 具有抗氧化活性的女贞子总三萜的提取方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811314377.9A CN109364122A (zh) 2018-11-06 2018-11-06 具有抗氧化活性的女贞子总三萜的提取方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN109364122A true CN109364122A (zh) 2019-02-22

Family

ID=65397305

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201811314377.9A Pending CN109364122A (zh) 2018-11-06 2018-11-06 具有抗氧化活性的女贞子总三萜的提取方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN109364122A (zh)

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101347470A (zh) * 2008-08-01 2009-01-21 石任兵 女贞子总三萜提取物和总酚提取物及其同时制备方法

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101347470A (zh) * 2008-08-01 2009-01-21 石任兵 女贞子总三萜提取物和总酚提取物及其同时制备方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
江洪波等: "女贞子总三萜的制备及抗氧化活性研究", 《世界科学技术-中医药现代化》 *
谭文广等: "女贞子中三萜化合物的提取与含量测定", 《食品科学》 *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106167493B (zh) 新型千金藤素的制备方法及其在药物上的应用
CN104000892A (zh) 一种从牡丹花中提取牡丹花总黄酮的方法
CN109200197A (zh) 一种铁皮石斛提取物及其制备方法
CN107021947A (zh) 金钗石斛中一个新化合物及其提取分离方法
CN102133298A (zh) 一种双水相萃取白英中总皂苷的方法
CN108276460B (zh) 一种从血人参中提取的化合物及其提取工艺和应用
CN105572284B (zh) 一种快速检测与鉴定钩吻中化学成分的分析方法
CN104725450A (zh) 一种从素馨花中提取高纯度橄榄苦苷的方法
CN109765308A (zh) 一种定量检测茶树籽三萜皂苷的uplc-uv-qtof-ms/ms方法
CN103432196A (zh) 金钱草总黄酮及金钱草总黄酮和总多糖的制备方法
CN109942649B (zh) 一种吲哚苷类化合物及其提取分离方法和应用
CN102050851A (zh) 甘草苷及其制备方法
CN106596426A (zh) 一种绞股蓝总皂苷的提取分离过程中的检测方法
CN111747914A (zh) 一种银杏根皮中分离得到的化合物及其用途
CN103340916B (zh) 一种野马追提取物、制备方法及其应用
CN109364122A (zh) 具有抗氧化活性的女贞子总三萜的提取方法
Xie et al. Study on the extraction process of totalanthraquinones in radix et rhizoma rhei and their antilipemic effects
CN105131063B (zh) 从全缘叶绿绒蒿花中同时分离纯化多种黄酮类成分的方法
CN111983095A (zh) 一种菊花中五种重要药用成分含量的uplc-ms/uv检测方法
CN107011355B (zh) 老鹰茶中一类骨架黄烷醇及其分离制备方法
CN107056800B (zh) 一种长苞铁杉中的二聚体黄酮类成分及其分离方法和应用
CN102603832A (zh) 一种斯皮诺素的生产方法
CN109369586A (zh) 一种乌药烷型倍半萜二聚体及其制备方法和用途
CN109232681A (zh) 一种桂花中毛蕊花苷的分离与鉴定方法
CN101129536B (zh) 一种化州柚黄酮提取物的膜分离制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20190222

RJ01 Rejection of invention patent application after publication